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Mthodes

d'talonnage pour la
quantification des polluants

Introduction
Les mthodes de quantification des polluants chimiques sappuient gnralement sur le
principe de comparaison un talon. Dans ce cas, lopration dtalonnage consiste
dterminer la relation mathmatique, souvent linaire, entre la rponse du dtecteur et
la quantit de substance analyse. Cette tape est fondamentale dans le processus de
quantification, car un mauvais talonnage conduit forcment des rsultats errons, il
est donc indispensable de matriser la ralisation de cette tape de lanalyse.

Principe de ltalonnage ............................................................................. 2

Les difficults de ltalonnage ................................................................... 3

Les diffrents types dtalonnage ............................................................. 4


Ltalonnage externe ................................................................................................. 4
Ltalonnage interne .................................................................................................. 5
La mthode des ajouts doss .................................................................................... 6

Mise en uvre pratique des talonnages ................................................. 7

Auteurs ........................................................................................................ 8

Historique .................................................................................................... 8

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Mthodes d'talonnage pour la quantification des polluants

PRINCIPE DE LETALONNAGE
Ltalonnage consiste prparer, partir dune substance pure ou bien dune solution talon commerciale,
une gamme dtalonnage qui va couvrir la plage de travail. Les dilutions des solutions sont ralises par
volumtrie ou par gravimtrie. Dans le premier cas, le laboratoire doit disposer de matriel de prcision et
dune procdure de vrification de ces matriels. Par exemple, lutilisation intensive de la verrerie ainsi que
les chocs thermiques imposs par les appareils de lavage peuvent altrer sa prcision. Dans le second cas,
cest la balance qui doit tre contrle rgulirement afin de garantir la justesse des peses. Dans tous les
cas, il est prfrable de raliser plusieurs dilutions du produit pur ou de la solution talon plutt que de
partir dune seule solution mre dilue successivement (figure 1). Car, pour cette dernire mthode, il existe
un risque de propagation derreur de dilution qui peut conduire une erreur systmatique sur tous les
points de la gamme.

Etalon en poudre ou en solution Etalon en poudre ou en solution



ou ou
Solvant
Solvant
<
Solvant
< < <


Solvant


<







<























Figure 1 : ralisation de la gamme dtalonnage : prfrer la ralisation de solutions mres
multiples plutt que les dilutions successives.

La gamme dtalonnage est ensuite analyse laide de la technique dans les mmes conditions que
lanalyse des chantillons inconnus. La mesure de lintensit du signal : hauteur de pic, aire de pic, intensit
lumineuse, etc. est mise en relation avec les quantits de substances prsentes dans les diffrentes
solutions de la gamme dtalonnage. Lquation mathmatique qui relie la quantit, ou la concentration de
substance et le signal est trs souvent une droite dont lquation est dtermine par le logiciel de pilotage
de lappareil. Cette quation va ensuite tre utilise pour convertir lintensit du signal mesure lors de
lanalyse dchantillons inconnus pour en dterminer la concentration comme lindique la figure 2

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Figure 2 : principe gnral de ltalonnage, cration de la courbe dtalonnage partir de la
gamme talon et dtermination de la concentration dun chantillon laide de cette courbe.

Il existe cependant des cas particuliers, o la grandeur est dtermine directement sans talonnage comme
les analyses par gravimtrie directe ou bien les analyses de comptage de fibres.

LES DIFFICULTES DE LETALONNAGE


Si le principe de ltalonnage est relativement simple, sa mise en uvre peut se heurter des problmes de
taille.
La principale difficult pour ltalonnage est la disponibilit de ltalon. En effet, si un grand nombre de
substances chimiques est disponible commercialement soit ltat pur ou avec un pourcentage de puret
connu- soit en solution de concentration connue, certaines ne sont pas accessibles et il est ncessaire de les
synthtiser pour raliser un talonnage. Ce cas de figure reste relativement rare, mais certains produits de
dgradation peuvent tre concerns ou encore des substances produites naturellement. Dune manire
gnrale, pour les produits dangereux ltat solide, il est recommand de travailler avec des solutions
talons, plutt quavec des poudres dont la dispersion dans latmosphre reprsente un risque pour les
oprateurs. Lorsquil nexiste pas de solutions talons et que la manipulation de poudres est indispensable,
il convient de travailler avec un poste de pese ventil pour viter les expositions potentielles (voir photo 1)
La puret de ltalon est un paramtre important, elle est gnralement donne par le fournisseur, mais
elle peut voluer dans le temps si le produit se dgrade. Dans ce cas, il faut contrler cette puret et ce
contrle nest possible que si la nature des impurets est connue. Les talons distribus commercialement
sont accompagns dune date de premption qui garantit labsence de dgradation dans les conditions
recommandes de stockage. Lorsque cette date est dpasse, la dtermination de la puret est
indispensable.
Leffet de la matrice constitue un autre point important de vigilance lors de lopration de ltalonnage. En
effet, la rponse du dtecteur une quantit de produit talon dans la matrice peut tre altre par
rapport la mme quantit de produit solubilise dans un solvant. Ce phnomne sobserve par exemple
quand le support de collecte est trait en mme temps que le prlvement comme pour les analyses de
substances minrales. Pour rsoudre ce problme, les talons sont traits de la mme manire que les

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chantillons. Cette reconstitution de la matrice est systmatique pour lanalyse des mtaux. Lorsque leffet
matrice est trop important, il peut tre utile de recourir ltalonnage par la mthode des ajouts doss
dont le dtail est expliqu dans le chapitre suivant.
La prparation de la gamme dtalonnage peut galement tre rendue complexe lorsque la substance est
sous forme gazeuse pression atmosphrique. Dans ce cas, il faut dissoudre le gaz dans un solvant ou le
diluer dans lair pour remplir des sacs talons en Tedlar ou encore ladsorber en quantits variables sur
des supports qui seront analyss en ligne, de type support de thermodsorption. La prparation dune
gamme dtalonnage en sac ou sur support thermodsorbable ncessite lutilisation dun systme de
dilution et une parfaite matrise de la dbitmtrie gazeuse.

LES DIFFERENTS TYPES DETALONNAGE

LETALONNAGE EXTERNE
Ce type dtalonnage est le plus simple, il est particulirement adapt aux mthodes utilisant des
techniques analytiques trs rptables. La gamme dtalonnage est ralise en accord avec la plage de
travail dsire, cest--dire entre le dixime de la valeur limite et deux fois la valeur limite du polluant. La
courbe de calibration ainsi dtermine va convertir directement la mesure de la rponse du dtecteur en
concentration. A ce stade, la concentration peut tre soit la concentration atmosphrique (masse/volume
air), soit la concentration en substance dans la solution analyse (masse/volume de solution) le passage la
concentration atmosphrique se fera en utilisant le facteur de dilution correspondant au rapport Volume
dair prlev/volume dextraction, comme le dtaille lexemple suivant.
Exemple du prlvement de styrne.
VLEP-8h du styrne = 215mg/m3
Prlvement individuel de 8h 100cm3/min
Le volume prlev est donc de 0.1*60*8=48 L
Prlvement sur tube de charbon actif dont la plage de mesure sera analyse aprs dsorption dans 3 mL
de CS2.
Le facteur de dilution est donc gal : Vair prlev/Vsolvant dsorption = 48/3 = 16 L dair/mL de CS2
La plage de travail est donc dfinie da la manire suivante :
Valeur basse Valeur haute
Concentration atmosphrique (mg/m3) 21.5 430

Masse de styrne prleve pour un volume de 48 L


0.344 6.88
(mg)
Concentration en styrne dans le CS2 (mg/mL) 0.115 2.293


La gamme dtalonnage va donc tre ralise entre 0.1 et 2.5 mg/mL, partir de trois solutions mres
0,2 ; 1 et 5 mg/mL de CS2. Linjection des 6 points de la gamme de calibration donne les rsultats suivants :
Concentration Rponse du dtecteur (aire du
Point de la gamme
(mg/ml) pic, units arbitraires)
1 0.1 12347

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2 0.2 25016
3 0.5 60255
4 1 121468
5 2 242520
6 3 364935


La courbe de calibration peut tre assimile une droite dont lquation est donne dans le graphique ci-
dessous :

Lchantillon inconnu est son tour inject et la rponse du dtecteur est de 9668. En utilisant lquation
de la droite dtalonnage, la concentration de la solution chantillon est dtermine : 0,80 mg/mL.
Le prlvement de 8 heures, soit 48 L, est extrait dans 3 mL de solvant. Le facteur de dilution est donc
gal 48/3 = 16 L dair/mL de CS2.
La concentration atmosphrique est donc gale 0,8/16 = 0,05 mg/L soit 50 mg/m3

LETALONNAGE INTERNE
1
Ce type dtalonnage est utilis lorsque lanalyse prsente une mauvaise rptabilit ou une mauvaise
2
reproductibilit , cest le cas par exemple, lorsque le solvant utilis est trs volatil et que son vaporation
au cours du traitement de lchantillon risque de modifier de manire significative la concentration des
solutions analyses ou encore lorsque la rptabilit des injections automatiques sur lappareil danalyse
est mauvaise. Ce dernier cas est observ en chromatographie en phase gazeuse, lorsque le solvant utilis
linjection possde un coefficient dexpansion volumique lev et implique un dbit de division peu
constant.
Lide gnrale de ltalonnage interne est dajouter au cours de la prparation des chantillons et des

1 Rptabilit : variabilit entre les rsultats dune mme mesure obtenus dans des conditions similaires : mme
oprateur, mme appareillage, mme jour, etc.
2 Reproductibilit : Variabilit entre les rsultats dune mme mesure obtenus dans des conditions diffrentes, au
moins lun des paramtres : oprateur, appareillage, matriel de prparation, jour, etc. est diffrent.

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talons, une substance dont la structure et le comportement est proche de la substance doser
Ainsi, la courbe dtalonnage ne sera plus tablie en fonction de la concentration de la substance analyser
mais en fonction du rapport des concentrations entre la substance doser et la substance talon interne. Si
les variations de volume de solvant dues lvaporation ou les variations de volume dinjection ont un
impact sur les concentrations individuelles des substances, elles en auront beaucoup moins sur le rapport
de concentration, voire pas du tout, si le comportement de ltalon interne est vraiment proche de celui de
la substance analyser.
Ltalon interne peut tre introduit de diffrentes manires en fonction de la nature des variabilits. Si la
variabilit de linjection est importante, il suffira dajouter une quantit connue et identique dans les talons
et les chantillons prts injecter, dune solution dtalon interne. En revanche si la volatilit du solvant
implique une variabilit des rsultats, ltalon interne peut tre ajout la solution de dsorption qui servira
la fois extraire les chantillons et prparer les talons. Si le rapport de volume entre ces deux
oprations nest pas identique, il conviendra dintroduire un nouveau facteur de dilution dans le mode de
calcul.
Le choix de ltalon est essentiel, car il doit sagir dune substance dont le comportement et/ou la structure
est proche des substances doser, mais il faut galement que cette substance ne soit pas prsente dans le
prlvement.
En ce qui concerne les calculs de concentration lis cette mthode, ils sont identiques la mthode
dtalonnage externe, mais la valeur de la concentration est remplace par le rapport des concentrations
(concentration substance dintrt/concentration talon interne) et la valeur de la rponse du dtecteur est
remplace par le rapport des rponses (rponse du dtecteur pour la substance dintrt/rponse du
dtecteur pour ltalon interne).

LA METHODE DES AJOUTS DOSES


Cette mthode est utilise lorsque les effets de matrice sont importants et dans les cas o la substance
dintrt peut difficilement tre extraite de la matrice. Dans ce cas, la matrice va tre analyse seule puis
avec des supplmentations -ou ajouts- connues en substance doser. Elle est rarement utilise dans le cas
danalyse de prlvement atmosphriques. La droite de rponse du dtecteur en fonction de la
concentration est reprsente sur la figure 3. Son quation est la suivante :
Rponsetotale = a x Cajout+Rponsex
Avec :
a : pente de la droite dtalonnage
Cajout : concentration de lajout ralis
Rponsetotale : rponse du dtecteur
Rponsex : rponse du dtecteur pour la solution inconnue sans ajout
Par ailleurs, la concentration totale des solutions dose est gale la concentration de la solution inconnue
laquelle il faut ajouter la concentration de lajout.
Soit :
C = Cx+Cajout
Sur cette droite, pour le point particulier A, o la rponse du dtecteur est nulle, la concentration totale est
galement nulle :
Rponsetotale= 0 et C=0
Soit :
a x Cajout + Rponsex = 0 et Cx+Cajout = 0

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soit donc :
Cajout = - Rponsex/a et Cx =-Cajout
il vient donc :
Cx = Rponsex/a


Rponse de lappareil de e
r o it
mesure a d

d e l
Rx+ajout4 e n te

a : p
Rx+ajout3



?

Rx+ajout2

Rx+ajout1


Rponsex


Concentrations
A


Cx +ajout 1 Cx +ajout 2 Cx +ajout 3 Cx +ajout 4

C
x


?

Figure 3 : reprsentation graphique de ltalonnage par ajouts doss

MISE EN UVRE PRATIQUE DES ETALONNAGES


Les gammes dtalonnage sont ralises dans de la verrerie de laboratoire propre ou lorsque cela est
possible dans des contenants usage unique afin dviter les contaminations croises. Les prparations
peuvent se faire par volumtrie, dans ce cas il faudra veiller au contrle rgulier des organes de mesure des
volumes : pipettes, fioles jauges, etc. ou bien par gravimtrie. Cette dernire solution est souvent
privilgie en raison de la plus grande facilit de contrle des balances de prcision. Cependant, lutilisation
des balances rend la manipulation des produits toxiques plus dlicate. Afin de matriser le risque
dexposition lors de la prparation des talons, certaines dispositions peuvent tre mises en place :
! Eviter la manipulation de poudres.
! Prfrer les talons primaires dj vendu sous forme de solution concentre diluer. Il est ncessaire
de sassurer, dans ce cas, de la justesse de ltalon fourni, soit par le biais dun certificat du fournisseur,
soit par une dtermination directe comme par exemple, par mesure de lintensit dabsorption une
longueur donde pour laquelle une valeur du coefficient dextinction est connue.

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! Raliser les peses de solutions dagents chimiques dangereux dans des contenants bouchs et
tanches.
! Manipuler les solutions sous sorbonne,
! Boucher les contenants sous la sorbonne galement et transfrer le contenant vers la balance.
! Dans le cas de solutions dagents CMR, il est prfrable de raliser les peses sur un poste ventil

Pour les analyses de mtaux, le substrat de collecte est dissous en mme temps que lchantillon. La
prsence de cette matrice lors de lanalyse peut avoir un impact sur la qualit de la rponse de lappareil de
mesure. Il est donc indispensable de raliser les talons dans un milieu reconstituant cette matrice. Des
substrats de collecte seront donc dissous dans les talons avant analyse.
Dans le cas danalyses minrales multi lmentaire en ICP optique, il est galement ncessaire de raliser
des gammes dtalonnage croises, afin que la charge globale en lments soit constante et rester ainsi
dans le domaine de linarit du dtecteur.
Pour lanalyse de lchantillon, il est galement recommand de raliser deux analyses deux niveaux de
dilutions diffrents. Le ratio de rponse doit tre identique au ratio de dilution afin de dmontrer labsence
deffet de matrice.
Lorsquun chantillon donne une rponse hors de la gamme dtalonnage il est toujours ncessaire de
diluer lchantillon pour que sa rponse soit compatible avec les rponses de la gamme. Dans le cas des
mtaux encore, il est ncessaire de diluer dans la matrice reconstitu

AUTEURS

E. Langlois et D.Rousset
INRS, Mtrologie des polluants (metropol@inrs.fr)

HISTORIQUE
Version Date Modifications
1 Octobre 2015 Cration de la fiche

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