ANTGENOS

1.-DEFINICIN:
Se definen como antgenos aquellas sustancias extraas al organismo vivo capaces
de estimular los mecanismos de defensa provocando repuesta inmune de tipo
inespecifico o especfica.
Los antgenos exhiben (o pueden mostrar) una serie de propiedades inmunolgicas:
a).- Inmunogenicidad: capacidad de inducir una respuesta inmune especfica,
humoral y/o celular. En este sentido, antgeno sera sinnimo de inmungeno.
clulas B + Ag clulas plasmticas + clulas B de memoria
clulas T + Ag clulas T efectoras + clulas T de memoria.

b). - Ant igenicid ad: capacidad de com binar se con ant icuer pos y/ o
con receptores de clulas T (TCR).
si una molcula es inmunognica, tambin es antignica; sin
embargo, la inversa no siempre es verdad: p. ej., ms adelante en
este captulo hablaremos de los haptenos, que por s mismos no
desencadenan respuest a inm une, per o que pueden ligar se a Ac
preformados.
si una molcula es inmunognica, tambin es antignica; sin
embargo, la inversa no siempre es verdad: p. ej., ms adelante en
este captulo hablaremos de los haptenos, que por s mismos no
desencadenan respuest a inm une, per o que pueden ligar se a Ac
preformados.

c) . - Aler genicida d: capacidad de inducir algn t ipo de respuesta

alrgica. Los alergenos son inmungenos que tienden a activar
ciertos tipos de respuestas humorales o celulares que dan
sntomas de alergia.
d ) . - Tol e r o g e n i c i d a d : c a p a c i d a d d e i n d u c i r u n a f a l t a d e respuesta
especfica en la rama celular o en la humoral.

2.- CARACTERISTICAS QUE DEBE REUNIR UN ANTGENO (INMUNOGENICIDAD)

El sistema inmune reconoce molculas de los microorganismos, pero no todos los
tipos de molculas tienen la misma capacidad inmunognica:

las ms inmunognicas son las protenas los hidratos de carbono poseen menor
capacidad inmunognica los lpidos y los cidos nucleicos slo son inmunognicos
cuando van unidos a protenas o a carbohidratos.
Por otro lado, hay que tener ya presente que en la rama humoral pueden actuar de
inmungenos todos los tipos moleculares que acabamos de citar, mientras que en la
rama celular slo lo son las protenas.
A continuacin trataremos las caractersticas que condicionan la inmunogenicidad de
los antgenos, diferenciando los que dependen de la propia molcula antignica y los
que dependen del sistema biolgico (el hospedador donde ocurre la respuesta
inmune).
.1 Factores de la molcula inmunognica
a) Carcter de no-propia (extrao)
Ante todo, la molcula ha de ser reconocida como una molcula extraa, ajena al
individuo. Tenemos pues, que un primer rasgo condicionador de la inmunogenicidad es
el grado de falta de parecido entre el antgeno con respecto a molculas propias.
En general, molculas que han divergido ampliamente en los distintos linajes
evolutivos actan como buenos inmungenos en especies heterlogas.
En cambio, molculas evolutivamente conservadas (como el colgeno, el citocromo c)
no son buenas inmungenas.
Por otro lado, ciertas molculas propias pueden actuar como auto antgenos, debido a
que proceden de rganos inmunolgicamente privilegiados (secuestrados respecto del
sistema inmune) en las fases tempranas del desarrollo (p. ej., del esperma, tejido de la
crnea).
b) Tamao molecular
En general, se puede decir que, a mayor tamao, mayor inmunogenicidad. Sustancias
de unos 100.000 dalton (Da) suelen ser buenos inmungenos, mientras que las de
menos de 5.000-10.000 Da son malos inmungenos.
c) Heterogeneidad en la composicin qumica
A mayor heterogeneidad de composicin qumica, mejor inmunogenicidad.
Los copolmeros sintticos repetitivos de un solo aminocido, o los polisacridos a
base de un solo azcar son malos inmungenos.
La poli [glu-lys] requiere tener 30-40 kDa de p.m. para ser inmunognica; pero el poli
{[glu-lys]-tyr} slo requiere 10 kDa; si al anterior copolmero lo volvemos ms complejo
aadiendo unidades de phe, ya slo se necesitan tamaos moleculares de 4 kDa para
desencadenar respuesta inmune.
La complejidad qumica se expresa tambin en el hecho de que contribuye la
estructura secundaria, terciaria y cuaternaria de las protenas.
d) Degradabilidad
Slo las molculas degradables por el hospedador son buenas inmungenas. Como
veremos, ello se debe a que la inmunidad humoral y la celular dependen de la
activacin de los linfocitos TH, que a su vez depende de que ste reconozca antgeno
degradado, procesado y presentado por molculas MHC-II de las clulas
presentadoras de antgeno (APC).
Las molculas no degradables no son buenas inmungenas. Por ejemplo, los
polmeros de D-aminocidos no pueden ser degradados por los macrfagos (stos no
tienen enzimas hidrolticas adecuadas), por lo que no pueden se procesados y
presentados a los linfocitos TH.
En general, las molculas grandes e insolubles son mejores inmungenos, ya que son
mejor fagocitadas y procesadas.
2 Factores del sistema biolgico
1) Genotipo del receptor
La influencia del genotipo del hospedador se puede comprobar en experimentos
usando razas puras de animales de laboratorio. Supongamos que disponemos de una
raza pura A que induce altos niveles de Ac en respuesta a un determinado Ag, y otra
raza B que produce bajos niveles de Ac ante ese mismo Ag. Los individuos de la F 1
procedentes del cruce de AxB exhiben niveles intermedios de Ac al ser enfrentados
con el citado Ag.
Por anlisis de retrocruzamiento se comprob que los genes que controlan la mayor o
menor respuesta se cartografiaban en una zona concreta de un cromosoma, dentro
del llamado complejo principal de histocompatibilidad (MHC).
Las protenas sintetizadas por dicho complejo MHC funcionan para presentar el Ag
procesado a las clulas T, y juegan un papel esencial en determinar el grado de
respuesta a cada antgeno.
Aparte de la dotacin de alelos del complejo MHC que cada individuo posee, existen
otros genes que tambin influyen en el grado de respuesta inmune, como los que
codifican el BCR, el TCR y los de citoquinas.
2) Dosis y ruta de administracin del antgeno
Para cada inmungeno experimental existe un protocolo de administracin ms
adecuado, que supone usar una determinada ruta y cierta dosis, lo que condiciona una
respuesta inmune ptima. Determinar estos parmetros reviste un especial inters a la
hora de la administracin de las vacunas.
Dosis:
Dosis muy bajas de Ag pueden no estimular a los linfocitos (falta de respuesta); dosis
demasiado altas pueden provocar un estado activo de tolerancia inmunolgica, por el
que los linfocitos entran en una situacin de no respuesta.
Dosis adecuadas son capaces de estimulacin.
Un protocolo de dosis repetidas espaciadas a lo largo de varias semanas es mejor que
una dosis nica, porque provoca una mayor proliferacin clonal de linfocitos t y B
especficos.
Rutas de administracin: determinan a qu rgano linfoide ir a parar el antgeno.
por va oral se estimula sobre todo el MALT del tracto digestivo (pero al mismo tiempo
se puede inducir tolerancia sistmica).
Por va parenteral:
intravenosa: el antgeno podr quedar retenido en el bazo
intradrmica
subcutnea: el antgeno terminar en algn ganglio regional
intramuscular
intraperitoneal
3) Adyuvantes ( coadyuvantes)
Los adyuvantes son sustancias que cuando se mezclan con un Ag y se inyectan con
l, mejoran la inmunogenicidad de ese antgeno.
Algunos adyuvantes y sus mecanismos de accin:
Almina: sales insolubles de sulfato alumnico-potsico. Acta mediante varios
mecanismos:
1. pr ecipit a el ant geno. Al inyect ar se va liber ando el ant geno
lentamente, con lo que se suministra un estmulo persistente
( el Ag dur a var ios das en el lugar donde se inocul) .
2. El Ag pr ecipit ado t iene m ayor tam ao, por lo que puede ser
fagocitado ms fcilmente, y por lo tanto es presentado ms
efectivamente.
3. Induccin de granulomas.
Adyuvantes de Freund: El adyuvante incompleto de Freund consiste en una solucin
acuosa con el Ag, junto con un aceite mineral y un agente dispersante (p. ej., el
manoleato). El adyuvante completo de Freund es como el incompleto, pero incorpora
una suspensin de Mycobacterium muertos por calor.
1. Am bas ver siones liber an lent am ent e el Ag, con lo que se
logra un estmulo persistente.
2. El macrfago aumenta en su superficie el nmero de
molculas B7, lo que facilita su interaccin con el receptor
CD28 del linfocito TH. Como veremos en otro captulo, ello
suministra la llamada seal coestimulatoria, que potencia la
int er accin ent r e MHC (del m acr f ago) , Ag pr ocesado y T CR
(de la clula T).
3. Adems, el completo es ms potente porque suministra
muramil-dipptidos de la pared celular de las micobacterias:
ello permite una buena activacin de macrfagos, que liberan
la citoquina IL-1, que a su vez activa a los linfocitos T H.
4. El completo induce igualmente mejor los granulomas. El
granuloma es una infiltracin celular, con una masa densa y
rica en macrfagos, con lo que se mejora el procesamiento y
pr esent acin del Ag. Se pr ovoca una buena liber aci n de IL-
1 de los macrfagos, que activan a los linfocitos T H.
Polirribonucletidos sintticos: estimulan la proliferacin inespecfica de linfocitos.
Lipopolisacrido bacteriano (LPS): igual efecto que el anterior.
Recientemente se estn ensayando los liposomas: el antgeno se encierra en
liposomas o se une a la bicapa lipdica de este tipo de vesculas membranosas.
3.- EPITOPOS
Los epitopos o determinantes antignicos, son cada uno de los sitios discretos de una
macromolcula que son reconocidos individualmente por un anticuerpo especfico o
por un TCR especfico. Son las regiones inmunolgicamente activas de un
inmungeno (las que se unen de hecho a un receptor de linfocitos o a un Ac libre).
Por lo tanto, a partir de ahora habremos de acostumbrarnos a pensar en los antgenos
como estructuras complejas que suelen constar de varios tipos de epitopos, cada uno
de ellos capaz de unirse con un Ac o un TCR especfico diferente. En este sentido, las
macromolculas son antgenos multivalentes, con muchos tipos de determinantes
antignicos distintos.
Si hablamos de Ag proteicos, esta unin suele implicar varios niveles de la estructura
del antgeno, desde la primaria a la terciaria (y, en su caso) a la cuaternaria.
En el caso de los polisacridos, las ramificaciones debidas a distintos enlaces
glucosdicos suponen conformaciones peculiares que son reconocidas de modo
especfico.
Diferencias en el modo de reconocimiento por parte de clulas B y T

Epitopos de clulas B Epitopos de clulas T

Unin con el Ag binaria: Ig - Ag ternaria: TCR - Ag- MHC

(reconocimiento restringido
por el haplotipo)
se une a Ag soluble? S No

requiere MHC? No S

naturaleza qumica del Protena nicamente protenas

epitopo Lpido
Polisacrido

Propiedades del epitopo parte externa, accesible parte interna,

hidrfilo desnaturalizada

movilidad (flexibilidad) anfiptico

secuencial o pptido lineal; unin a MHC

conformacional

.1 Propiedades de los epitopos de clulas B

1.-El tamao de un epitopo depende del tamao del sitio de
unin que posea la inmunoglobulina especfica respectiva. Cada
sitio de unin a un epitopo en una inmunoglobulina se denomina
paratopo.
2.-Los epitopos de clulas B de protenas nativas suelen
consistir en varios aminocidos hidrfilos de la superficie de la
pr ot ena, y son los que est n m s accesibles al Ac libr e o al Ac
de membrana (del BCR).

3.-Los epitopos reconocidos por clulas B pueden ser

s e c u e n c ia le s ( e s d e c ir, u n a s e r ie d e a m in o c io s c o n t ig u o s ) o n o
secuenciales (tambin llamados conformacionales).

Los epitopos secuenciales suelen depender de regiones en forma

de bucle, situadas entre cadenas consecutivas.
Los epitopos conformacionales dependen de la configuracin
nativa de la protena.

4.-Si desnaturalizamos una protena, se perdern los epitopos

conformacionales pero permanecern los secuenciales.

5.-Los epitopos de B tienden a situarse en regiones flexibles de

la molcula, capaces de "moverse" molecularmente. Parece que
ello tiende a facilitar el encaje con las regiones
com plem ent ar ias ( par at opo) del Ac.
 6.-La mayor parte de la superficie de una protena globular es
potencialmente antignica, y consiste en numerosos epitopos
par cialm ent e super puest os. Ahor a bien, dada una det er m inada
protena, no todos los epitopos son igualmente inmunognicos
para distintos individuos de la misma especie. Para cada
individuo y par a cada Ag suele exist ir un epit opo llam ado
inmunodominante.

2 Propiedades de los epitopos reconocidos por clulas T

Antes de desarrollar las caractersticas de estos epitopos describiremos
sucintamente una serie de estudios clave que sealaron las diferencias
esenciales entre el modo en que las clulas T reconocen los epitopos
respecto a lo visto para las clulas B:
Estudios de Benacerraf (1959):
Si inmunizamos un animal por primera vez con una protena nativa, se puede observar
una respuesta celular primaria.
Si inmunizamos al mismo animal una segunda vez con la misma protena nativa, se
observa una respuesta celular secundaria.
La "sorpresa" (para las expectativas de la poca) llega cuando esa segunda
inoculacin se hace con la protena desnaturalizada: tambin ocurre una respuesta
celular secundaria (algo que no ocurre con la respuesta humoral).
La explicacin a este fenmeno no lleg hasta los aos 80: fue entonces cuando se
descubri que los linfocitos T no reconocen Ag soluble, sino Ag procesado, de modo
que los pptidos resultantes son presentados en asociacin con MHC.
1.- El tamao del epitopo de clulas T queda determinado por el
t am ao del sur co de unin al Ag de la m olcula de MHC.
Las molculas de MHC-I unen pptidos de entre 8 y 11
aminocidos.
Las molculas de MHC-II unen pptidos de entre 11 y 17
aminocidos.
2.- Los pptidos antignicos reconocidos por clulas T forman un
complejo trimolecular junto con el TCR del linfocito T y el MHC de
la clula presentadora o diana. El antgeno reconocido por clulas
T tiene dos zonas de unin: una para ligarse al TCR, denominada
epitopo, y otra para engarzar al MHC, denominada agretopo.
3.- Los pptidos antignicos implicados en el complejo trimolecular
proceden del procesamiento intracelular del inmungeno proteico
original.
4.- Los antgenos reconocidos por las clulas T presentan pptidos
anfipticos. Precisamente, quiz la funcin del procesamiento sea
"desplegar " el Ag y exponer est as regiones int er nas anf ipt icas, de
modo que la porcin hidrfoba suele actuar de agretopo, mientras
que la porcin hidrfila acta de epitopo propiamente dicho.
Por programas de ordenador es posible predecir en una protena
aquellas regiones anfipticas de tamao adecuado que
tericamente podran actuar como pptidos antignicos. Esto se
refleja en el llamado "ndice anfiptico", y se est aplicando
actualmente al diseo de vacunas sintticas peptdicas (como en
el caso de la malaria).
Tam b i n s e p u e d e r e c u r r i r p o r o r d e n a d o r a m e d i r e l " n d i c e d e
protrusin" de distintas partes de las protenas: las zonas con
menor protrusin son mejores candidatas a funcionar como
p p t i d o s d e c l u l a s T.
5.- Debido a que los Ag r econocidos por clulas T lo son unidos a
las molculas de MHC del individuo, y debido a que a su vez
existe una gran diversidad de alelos de MHC en las poblaciones de
una especie, los epitopos inmunodominantes en cada individuo
dependen en parte del juego de molculas MHC de ese individuo
(lo cual, depende de su dotacin gentica, obviamente). En una
protena slo una minora de zonas peptdicas tienen capacidad
para unirse a las molculas MHC de cada individuo, y de esas
z o n a s , s l o a l g u n o s e s t i m u l a n d e h e c h o a l a c l u l a T.
4.- HAPTENOS
Se define como hapteno aquel grupo qumico definido, de pequeo tamao, que por s
mismo es incapaz de desencadenar una respuesta inmune (es decir, no es
inmungeno), pero que unido covalentemente a una molcula portadora se comporta
como inmungeno (llegando a constituir el nico determinante inmunodominante del
conjugado).
En los aos 20 y 30 Karl Landsteiner realiz unos famosos experimentos que
mostraron por primera vez la asombrosa especificidad del sistema inmune.
Como haptenos emple una serie de derivados del benceno, como el dinotrofenol
(DNP), en configuraciones distintas (orto, meta, para), as como distintos derivados a
base de distintos sustituyentes en determinadas posiciones conocidas.
Como molcula portadora emple la seroalbmina bovina (BSA).
Obtena as distintas versiones de conjugados BSA-DNP.
Inyectaba conjugados BSA-DNP en un animal de laboratorio, esperaba a que se
produjera la respuesta inmune, y tras una sangra, obtena suero enriquecido en
anticuerpos frente al hapteno (antisuero especfico).
Finalmente, pona en contacto el antisuero con el hapteno original, y en paralelo, con
otros haptenos consistentes en variantes del original (lugar del localizacin de algn
radical, naturaleza qumica del radical).
Las conclusiones que se pueden extraer de estos experimentos son:
Casi ms importante que la naturaleza qumica concreta del hapteno es la
configuracin global del mismo (obsrvese que el hapteno equivale a un epitopo
inmunodominante) a la hora de determinar si dicho hapteno puede reaccionar (y en
qu cuanta) con el antisuero (anticuerpos).
En los experimentos se puede comprobar igualmente la existencia de algunas
reacciones cruzadas, sobre todo cuando dos haptenos comparten una configuracin
parecida.

5.- MITGENOS Y SUPERANTGENOS

Mitgenos
Los mitgenos son agentes capaces de inducir la proliferacin de una gran cantidad
de clones de linfocitos T y/o B, de modo inespecfico (por lo que tambin se
denominan activadores policlonales).
Ejemplos de mitgenos:
Lectinas: conllevan la aglutinacin de clulas (entre ellas linfocitos), pero aqu nos
interesan sobre todo por su capacidad de activacin policlonal de clulas T, B, o de
ambas. Como ejmplos de lectinas tenemos:
concanavalina A (conA), que es mitgeno de clulas T
fitohemaglutinina (PHA), que es mitgenos de clulas T
mitgeno de fitolaca (PWM), que es mitgeno tanto de T como de B.
Lipopolisacrido (LPS) de bacterias Gram negativas. Su actividad
c o m o m i t g e n o r e s i d e e n l a p o r c i n d e l p i d o A.
Superantgenos
Los sper antgenos son unos potentes activadores poli clnales de clulas T que
expresan secuencias comunes en sus receptores: llegan a activar hasta la quinta parte
del total de estos linfocitos). Esta activacin es independiente de la especificidad hacia
una combinacin particular de Ag procesado-MHC.
Unen la porcin V del TCR y lo entrecruzan con la parte externa del MHC, fuera del
surco que normalmente sirve para exponer y presentar el antgeno. De esta forma,
entrecruzan de modo inespecfico las clulas TH con las APC, de modo que los
linfocitos T se activan sin haber reconocido Ag procesado y presentado en el surco de
MHC-II de las APC. El resultado es que un gran nmero de clones de clulas T
segregan grandes niveles de cito quinas, lo que puede llevar a shock y a muerte.
Ejemplos de superantgenos son ciertas toxinas de Staphylococcus aureus, como la
toxina del sndrome del choque txico (TSS-1), o la enterotoxina.