EVALUACIN Y PRESENCIA DE CONTAMINANTES EMERGENTES EN AGUAS

RESIDUALES URBANAS Y EN AGUAS DE RO.

Amadeo Rodriguez Fernndez-Alba1,2, Mara Jos Gmez Ramos2, Sonia Herrera Lpez2, Mara del Mar
Gmez Ramos1

1
Departamento de Hidrogeologa y Qumica Analtica, Universidad de Almera, 04120 Almera.
2
IMDEA-Agua (Instituto Madrileo De Estudios Avanzados- Agua), Punto Net, Edificio ZYE 2, Parque
Cientfico Tecnolgico de la Universidad de Alcal, 28805 Alcal de Henares, Madrid.

INTRODUCCIN

El agua, recurso ecolgico y econmico vital, es una fuente renovable, pero la actividad
humana es un factor importante en el ciclo del agua y puede causar un gran dao al
medioambiente acutico si se contamina o se sobreexplota. La mayor fuente de contaminacin
de los sistemas acuticos deriva de las emisiones de aguas residuales, que contienen un
amplio rango de contaminantes potenciales, entre ellos una de las principales amenazas para
la calidad de las aguas son las sustancias qumicas. Hay sobre unas 100.000 sustancias
potencialmente peligrosas registradas en la Unin Europea y constantemente se estn
desarrollando nuevas sustancias [1]. Aunque las medidas tomadas en el siglo pasado para
evitar la contaminacin acutica han reducido drsticamente la presencia en el agua de
algunos contaminantes conocidos, el nmero de sustancias qumicas potencialmente
peligrosas que pueden llegar a alcanzar el medioambiente es muy amplio, por lo que la
atencin en la investigacin de la contaminacin del agua se ha expandido recientemente de
los contaminantes prioritarios convencionales a los llamados contaminantes emergentes o
nuevos contaminantes, que no estn regulados y cuya presencia en el medioambiente no es
necesariamente nueva, pero si la preocupacin por las posibles consecuencias de la misma.
La lista de nuevos contaminantes incluye productos de higiene personal, mdicos y productos
industriales y para el hogar. Se ha visto que muchos de estos compuestos son omnipresentes,
persistentes y han sido detectados en aguas residuales de plantas de tratamiento [2-5], y
algunos de ellos en aguas superficiales, subterrneas o de bebida [4,6,7]. Es pues necesario
identificar y controlar estos contaminantes particularmente peligrosos para el medio acutico.

Las metodologas analticas para la identificacin de contaminantes prioritarios y emergentes

en las aguas deben ser rpidos, sensibles y selectivos para un amplio rango de compuestos.
Los anlisis multi-residuo, se estn convirtiendo en la tcnica ms adecuada para
proporcionarnos una informacin ms amplia sobre la contaminacin de las muestras de agua.
[2-5,8]. Los artculos cientficos relacionados con el desarrollo de metodologas analticas multi-
residuo se han incrementado en los ltimos aos, pero la mayora de ellos estn centrados en
mtodos de anlisis de compuestos objetivo, es decir, que han sido seleccionados
previamente para su anlisis. Esto significa que no hay ningn control para un gran nmero de
contaminantes y sus productos de degradacin. Hay por tanto una gran necesidad de mtodos
que nos permitan realizar, junto con el anlisis de los compuestos seleccionados, un
screening o bsqueda de un gran nmero de compuestos. Para ello es necesario disponer de
las tcnicas analticas adecuadas.

Normalmente el anlisis de micro-contaminantes orgnicos polares en agua se realiza

mediante la tcnica de cromatografa lquida acoplada a espectrometra de masas en tndem
(LC-MS/MS) y el anlisis de los compuestos no polares o semi-polares mediante cromatografa
gaseosa acoplada a espectrometra de masas (GC-MS) o masas en tndem (GC-MS/MS). Con
estas tcnicas es usual trabajar buscando contaminantes objetivo seleccionando iones o
transiciones concretas. Esto hace que la informacin generada con estas tcnicas se reduzca
al nmero de compuestos seleccionados y esto puede ser insuficiente para valorar la calidad
de las aguas residuales o ambientales. Con la espectrometra de tiempo de vuelo (TOF-MS) no
existen estas limitaciones, ya que adems de poder determinar los compuestos objeto del
anlisis, podemos detectar si aparecen productos de degradacin o transformacin de estos y
otros compuestos no objetivo.

La cromatografa de gases en dos dimensiones acoplada a un detector de tiempo de vuelo

(GCxGC-TOF) es una tcnica muy poderosa, todava poco explorada en el anlisis de
contaminantes en agua, que nos proporciona ventajas en el anlisis de trazas como son el
aumento de la sensibilidad y la resolucin de los compuestos de inters, extrayndolos de las
impurezas y las interferencias, tambin nos permite la determinacin simultnea de un gran
nmero de contaminantes, adems de otras ventajas adicionales, como el proporcionar
cromatogramas ordenados en dos dimensiones, que nos ayudan a visualizar de forma rpida la
contaminacin de una muestra y nos facilitan la comparacin de muestras entre s.

El objetivo de nuestro trabajo es el desarrollo de mtodos analticos multi-residuo sensibles y

precisos, para la bsqueda automtica, identificacin y cuantificacin de un amplo nmero de
contaminantes orgnicos, en su mayora emergentes, entre los que se encuentran pesticidas,
frmacos, fragancias sintticas, filtros U.V, antioxidantes, retardantes de llama y sus principales
productos de degradacin. Mediante el estudio de seguimiento de estos contaminantes se
pretende obtener una visin lo ms amplia posible de su presencia en aguas residuales y de
ro. Para ello utilizamos la tcnica de LC-QTOFMS para compuestos polares y la de GCxGC-
TOFMS, que es ms idnea para el anlisis de compuestos apolares o semipolares.

METODOLOGA ANALTICA

Muestreo

Se realizaron muestreos mensuales durante dos aos de muestras de agua residual integrada
(correspondiente a 24 horas de funcionamiento de la planta) a la entrada y salida de estaciones
de depuracin de agua residual (EDARs) urbana localizadas en Madrid, Cantabria, Barcelona
y Almera. Todas estas plantas de tratamiento aplican un tratamiento biolgico secundario
convencional con lodos activos.

Las muestras de agua de ro analizadas en este estudio se recogieron en diferentes puntos de

un ro, situados a 20 m y 1150 m aguas abajo del punto de emisin de las aguas residuales de
una EDAR y 35000, 24000 y 6000 metros aguas arriba. El ro por estos puntos atraviesa zonas
residenciales, industriales y agrcolas. Se recogieron un total de treinta y seis muestras,
repartidas en seis diferentes campaas de seguimiento, realizadas en los meses de abril, mayo
y junio.
Tratamiento y anlisis de muestra

Extraccin en fase slida (SPE) seguida de LC-TOF-MS

Los compuestos ms polares, tipo frmacos y pesticidas polares, se analizan con

cromatografa lquida y se extraen mediante SPE de forma automatizada con un equipo
ASPEC XL (de Gilson) y utilizado como adsorbente OASIS HLB, un adsorbente apropiado para
anlisis multi-residuo, ya que extrae compuestos de muy diversas propiedades qumico-fsicas.
Se hacen pasar por el adsorbente alcuotas de 100, 200 y 400 mL de muestra de influente,
efluente y agua de ro, respectivamente. Las muestra se ajustan a pH 8 y se eluyen con 3 x 4
mL de MeOH. Los extractos obtenidos se evaporan, llevndolos casi hasta sequedad, y se
reconstituyen con 1 mL de MeOH: agua, 10:90 (v,v). Antes del anlisis de los efluentes e
influentes de agua residual, se diluye el extracto 1:1 con MeOH/agua (10:90).

Para el anlisis de las muestras se desarroll un mtodo en un LC-TOF-MS en modo positivo y

negativo. La separacin de los analitos se realiza con un sistema HPLC de Agilent usando una
columna en fase reversa XDB-C18 de 4.6 mm x 50 mm y 1.8 m de tamao de partcula. El
gradiente de elucin se realiz usando para modo positivo como fase A acetonitrilo con 0.1%
en cido frmico y 5% de agua MilliQ y como fase B agua al 0.1% de cido frmico (pH 3.5) y
para modo negativo acetonitrilo (fase A) y agua MilliQ (fase B).

Extraccin con barras magnticas (SBSE) seguida de GCxGC-TOF-MS

Los compuestos ms hidrofbicos, como los productos de cuidado personal, pesticidas de

polaridad baja e hidrocarburos aromtico policclicos (PAHs), se analizan con cromatografa
gaseosa en dos dimensiones y se extraen mediante barras de agitacin magntica. En este
caso las muestras no se someten a ningn proceso de filtracin, para as evitar las posibles
prdidas de estos contaminantes, que por sus propiedades fsicas tienden a quedar retenidos
en las partculas disueltas en el agua. La extraccin se realiz con barras magnticas
comerciales (Gerstel) de 20 mm x 0.5 mm (de largo x espesor de la pelcula). La barra
magntica se introduce en matraces Erlenmeyer que contienen 100 mL de muestra, las
muestras de agua residuales se diluyen con agua MiliQ (1:4). Para aumentar la eficiencia de
extraccin del mayor nmero de compuestos se aadieron 20 gr de cloruro sdico y un 10% de
metanol a las muestras antes de su extraccin. Las muestras se extraen durante toda una
noche (14h) agitandose a 900rpm a una temperatura de 25C. Despus de la extraccin la
barra magntica se lava con agua MilliQ, se seca con papel tissue y se llevan al equipo de
GCxGC para desorcin trmica y posterior anlisis.

Las barras magnticas se desorben usando una unidad de desorcin trmica TDU (Gerstel)
que est conectada directamente al inyector del equipo. Una vez que los analitos se han
sometido a la desorcin pasan al sistema GCxGC-TOF-MS, que est equipado con un segundo
horno, una segunda columna y un modulador trmico qu utiliza nitrgeno lquido. Las
columnas que se utilizan son; en el primer horno una columna no polar, la Rtx-5 (10m x
0.18mm i.d., 0.2 m) de Restek y en el segundo una de polaridad media, la Rxi-17 (1m x 0.1
mm i.d., 0.10 m) tambin de Restek. En este tipo de anlisis, para obtener buenos resultados,
es muy importante la buena eleccin de las columnas y la optimizacin de los parmetros
cromatogrficos (rampas de temperaturas, flujos, periodos de modulacin).

Validacin

Todos los estudios de validacin se realizan utilizando muestras de efluentes de agua residual
y agua de ro, teniendo siempre en cuenta la presencia de los compuestos estudiados. Ambos
mtodos son validados calculando lmites de deteccin y cuantificacin, repetitividad y
reproducibilidad, linealidad, y recuperaciones.
Para corregir el efecto de la matriz, la cuantificacin de los compuestos se realiza utilizando
rectas de calibrado en matriz.

La contaminacin es muy comn cuando se trabaja con fragancias, filtros UV, antioxidantes
por eso adems de extremar las precauciones a la hora de realizar los anlisis, antes de cada
secuencia de inyecciones se inyecta un blanco de agua MilliQ que utilizaremos para restar el
fondo a las dems muestras, en caso de que se detecten trazas de algn compuesto.

DISCUSION Y RESULTADOS

LC-TOF-MS

En este estudio hemos desarrollado y evaluado un mtodo analtico para la bsqueda de ms

de 400 compuestos (la mayora pesticidas, frmacos y algunos de sus productos de
transformacin) de una forma rpida y automtica y para la cuantificacin de los resultados
positivos en muestras de agua. Para ello hemos creado una base de datos de masa exacta, en
la que se incluyen datos de masa exacta de los compuestos y de sus principales fragmentos,
perfil isotpico y datos de tiempos de retencin. Esta base de datos se enlaza con el software
del equipo, de esta forma al terminar el anlisis el software extrae los compuestos
potencialmente de inters, de todos los datos generados mediante LC-QTOF-MS en cada
muestra, y los compara con los de la base de datos creada. A modo de ejemplo, en la Figura
1, podemos observar una muestra de efluente de agua residual que se ha procesado mediante
una bsqueda automtica de compuestos con la base de datos creada. El software del equipo
ha detectado 463 compuestos potenciales, pero de estos solo 51 tienen masas exactas y
tiempos de retencin coincidentes con los de la base de datos, por lo que los restantes
compuestos se descartaran. Hemos establecido como criterio, que las diferencias en tiempos
de retencin sean inferiores a 15 segundos y la tolerancia de masa exacta inferior a 5 ppm. En
color gris se han marcado los compuestos detectados con espectros con una coincidencia (de
0 a 100) por debajo del 60 % con respecto a la base de datos, ya que estos compuestos habr
que revisarlos manualmente para darlos como positivos. Este porcentaje de coincidencia, lo
realiza el equipo de forma automtica, basndose en la masa exacta y la abundancia isotpica
de los compuestos.
 Figura 1. Bsqueda automtica de compuestos mediante LC-TOF-MS, basndose en la utilizacin de una base
de datos de masa exacta .

+ESI TIC

El software del equipo ha

Resultado de bsqueda con la Base de Datos creada encontrado 463 compuestos
potenciales en la muestra.
Nam e RT Mass (Tgt) Form ula (DB) Score (DB) Nam e RT Mass (Tgt) Form ula (DB) Score (DB)
4AAA 5,56 246,1227 C13 H16 N3 O3 97,68 DIAZINON 11,63 305,1089 C12 H22 N2 O3 P S 65,18
4AAA F1 5,56 204,1137 C11 H14 N3 O 96,97 DIAZINON F1 11,63 169,0799 C8 H13 N2 S 56,89
4FAA 5,69 232,1086 C12 H14 N3 O2 92,76 DIAZINON F2 11,63 153,1028 C8 H13 N2 O 55,56
4FAA F1 5,69 204,1121 C11 H14 N3 O 83,67 Erythrom ycin 6,923 734,4691 C37 H68 N O13 86,46
4MAA 1,947 218,1293 C12 H16 N3 O 97,68 Fluoxetine 7,764 310,1419 C17 H19 F3 N O 61,63
Am itriptyline 7,362 278,1909 C20 H24 N 97,88 Indomethacin 10,351 358,0846 C19 H17 Cl N O4 63,47
Antipyrine 5,336 188,096 C11 H12 N2 O 46,6 Indomethacin Cl37 10,351 360,0823 C19 H17 Cl(37) N O4 58,87
Atenolol 3,019 267,1709 C14 H23 N2 O3 86,06 Ketoprofen 9,116 255,1021 C16 H15 O3 55,01
Atenolol F1 3,019 225,1225 C11 H17N2 O3 53,26 Ketorolac 8,307 256,0974 C15 H14 N O3 54,33
AZOXYSTROBIN 10,15 404,1246 C22 H18 N3 O5 99,16 Lincom ycin 3,401 406,2138 C18 H34 N2 O6 S 69,78
AZOXYSTROBIN F1 10,15 372,0984 C21 H14 N3 O4 80,78 Naproxen 9,187 231,1021 C14 H15 O3 71,19
Caffeine 4,78 195,0882 C8 H11 N4 O2 88,56 Naproxen F1 9,187 185,0966 C13 H13 O 82,85
Caffeine F1 4,78 138,0667 C6 H8 N3 O 88,96 Nicotine 1,18 163,1235 C10 H15 N2 66,01
Carbam azepine 7,75 237,1028 C15 H13 N2 O 85,5 Nicotine F1 1,18 132,0815 C9 H10 N 46,21
CHLORFENVINPHOS 10,805 358,9774 C12 H15 Cl3 O4 P 85,53 Ofloxacin 5,192 362,1516 C18 H21 F N3 O4 92,4
CHLORFENVINPHOS F1 10,805 330,9833 C11H15Cl3O3P 62,53 Ofloxacin F1 5,192 318,1618 C17 H21 F N3 O2 43,49
CHLORFENVINPHOS F2 10,805 155,0473 C4 H12 O4 P 45,23
Ciprofloxacin 5,761 332,141 C17 H19 F N3 O3 88,97
Pentoxifylline
Pentoxifylline F1
5,92
5,92
279,1457
181,0729
C13 H19 N4 O3
C7 H9 N4 O2
81,8
47,62
De estos 463 compuestos, 51
Ciprofloxacin F1 5,761 288,1512 C16 H19 F N3 O 85,1 Propanolol 6,287 260,1651 C16 H22 N O2 63,29 tiene masas exactas y tiempos de
Citalopram 7,043 325,1716 C20 H22 F N2 O 60,58 Propyphenazone 7,843 231,1497 C14 H19 N2 O 73,32 retencin coincidentes con los de
Clarithrom ycin 7,63 748,4847 C38 H70 N O13 66,49
Codeine 3,48 300,16 C18 H22 N O3 95,89
Sotalol 4,585 273,1273 C12 H21 N2 O3 S 44,64
la Base de Datos
Sotalol F1 4,585 255,1167 C12 H19 N2 O2 S 44,77
Cotinina 1,24 177,1028 C10 H13 N2 O 90,6 Trim ethoprim 4,986 291,1457 C14 H19 N4 O3 66,87
CYPRODINIL 9,776 226,1344 C14 H16 N3 72,68 Venlafaxine 6,324 278,212 C17 H28 N O2 64,41
DEET 8,61 192,1392 C12 H18 N O 62,35 Venlafaxine F1 6,324 260,2014 C17 H26 N O 64,69
DEET F1 8,61 119,0497 C8 H7 O 47,51

La base de datos desarrollada, adems de utilizar informacin de masa exacta, tiempos de

retencin y abundancia isotpica, incluye datos de masa exacta de los iones fragmento
caractersticos de cada compuesto. Esta informacin es esencial, debido a la complejidad de
realizar bsquedas de compuestos con caractersticas similares, a muy bajas concentraciones
y en matrices complejas. En la Figura 2 podemos ver un ejemplo que ilustra la utilidad de
incluir fragmentos en la base de datos. La figura muestra el espectro de masas de dos
frmacos que son ismeros, es decir tienen la misma composicin elemental (C7H9N4O2) y la
misma masa exacta (181.0720). Adems, los tiempos de retencin son muy similares. En este
caso, tampoco se pueden diferenciar por su perfil isotpico, sin embargo pueden ser
distinguidos porque tienen diferente fragmentacin.
 Figure 2. Diferenciacin de dos frmacos que son ismeros por su fragmentacin

1.924

138

Theobromine

124

Theophylline

La detallada informacin sobre la fragmentacin tambin puede ser utilizada como una
herramienta muy poderosa para la identificacin automtica de compuestos desconocidos y/o
productos de transformacin con estructura similar a contaminantes orgnicos conocidos
incluidos en la base de datos. Los caminos de fragmentacin de los compuestos pueden
utilizarse para predecir posibles productos de degradacin, ya que los enlaces que se rompen
fcilmente por el instrumento podran ser aquellos que se rompen fcilmente en reacciones en
condiciones ambientales. Teniendo esto en cuenta, hemos investigado lo iones fragmento en el
instrumento con tiempos de retencin diferente del compuesto padre. De esta forma hemos
identificado algunos productos de degradacin en las muestras, como son el mayor producto
de transformacin del acetaminofen, el p-aminofenol, y el producto de transformacin del
antibitico azitromicin.

SBSE-GCxGC-TOFMS

Para el anlisis de compuestos apolares o semipolares (pesticidas, productos de higiene

personal y PAHs entre otros) se ha desarrollado, por primera vez para el anlisis de
contaminantes en aguas, un mtodo basado en SBSE-GCxGC-TOF.

La utilizacin de SBSE tiene ventajas respecto a los mtodos de preconcentracin ms

comunes para este tipo de contaminantes, SPE y extraccin liquido-lquido, minimiza la
cantidad de disolvente orgnico utilizado, es un mtodo de preconcentracin rpido, til para
anlisis multi-residuo e incrementa significativamente los lmites de deteccin.
Con la aplicacin de la tcnica SBSE-GCxGC-TOF hemos obtenidos resultados excelentes en
trminos de eficiencia de separacin y de identificacin de compuestos. Los lmites de
deteccin alcanzados con esta tcnica son excepcionales, menores de 1 ng/L para la mayora
de los compuestos en muestras reales, en modo de barrido completo de masas o full scan. La
identificacin y confirmacin de los analitos fue posible a estos niveles de concentracin,
incluso para compuestos tpicamente problemticos en 1DGC, como son los PAHs.

Una vez optimizadas las condiciones cromatogrficas para GCxGC, la separacin conseguida
entre los compuestos entre s y entre las impurezas de la matriz, mejora de forma considerable
respecto de la obtenida en 1D-GC, compuesto que coeluyen en 1D-GC se pueden separar
mediante esta tcnica. En la Figura 3 podemos ver un ejemplo de esta resolucin, como los
compuestos se distribuyen por todo el espacio en dos dimensiones.

El procesamiento de datos mediante TOF-MS, busca de forma automtica compuestos, realiza

la deconvolucin del espectro y los compara respecto a diferentes libreras de compuestos.
Esto es muy til para el anlisis de compuestos objetivo, como podemos observar en la Figura
3 a). En esta figura se muestra el cromatograma, representado en forma de burbujas, de los
compuestos obtenidos mediante GCxGC-TOFMS en una muestra de agua de ro. Se ha
utilizado un filtro para mostrar solo los compuestos objetivo. El software nos proporciona los
medios para crear clasificaciones por grupos de compuestos, donde podemos agrupar los
compuestos con propiedades similares y asignarles un mismo color. En este trabajo hemos
agrupado los compuestos en tres grupos; productos de higiene personal que los hemos
marcado en amarillo, pesticidas en color violeta y PAHs en rojo. El tamao del radio de las
burbujas es funcin de la concentracin de los compuestos. Todo esto nos ayuda a visualizar
de forma rpida y sencilla el tipo de contaminantes presentes en la muestra y cuales estn en
mayor concentracin. Como puede verse la figura, en esta muestra se ha detectado 16
contaminantes, de los cuales cinco son pesticidas, ocho PCPs y tres PAHs. La figura tambin
ilustra con dos ejemplos, como los compuestos son correctamente identificados en la muestra,
se puede observar que sus espectros de masas coinciden perfectamente con el espectro de la
librera y el de un estndar de referencia.

En la Figura 3 b) se muestra el dibujo de contornos del cromatograma de la misma muestra de

ro, pero esta vez con todos los compuestos encontrados mediante GCxGC-TOFMS. Se
encontraron ms de 2700 compuestos con una seal ruido por encima de 10. En la figura se
muestran ejemplos de los contaminantes que consideramos de inters para la valoracin de la
contaminacin del agua de ro. Entre ellos se encuentran antispticos, antioxidantes, drogas de
abuso, productos de degradacin de los compuestos objetivo y frmacos. En la figura tambin
se muestra el dibujo de superficies y la identificacin mediante el espectro de librera de dos
compuestos, el 4-clorofenol y la loratadina. En la figura se puede ver que estos compuestos
estn rodeados de compuestos a altas concentraciones procedentes de la matriz, de los que se
pueden separar por el alto poder de resolucin de la tcnica de GCxGC, que nos proporciona
una segunda dimensin para la separacin de los compuestos. Los espectros de masas
obtenidos para estos compuestos coinciden perfectamente con los de la librera.
 Figure 3 a) Anlisis de compuestos objetivo.
Representacin en f orma de burbujas de los compuestos obtenidos mediante GCxGC-TOFMS en una muestra de agua de ro. Se ha utilizado un f iltro
para visualizar solo los compuestos objetivo. La f igura tambin ilustra la identif icacin de dos compuestos mediante la librera y el espectro de
ref erencia .

Muestra de ro muestreada a 20 m del punto de emisin de aguas residuales de una EDAR

OxybenzoneFluoranthene Triclosan
Terbutryn

Musk Ketone
Phenanthrene
Galaxolide Procymidone
Terbuthylazi Camphor Chrysene
ne
Diazinon Chlorpyrifos-ethyl
Tonalid Cinamate 2-EHMC
Sample spectrum
BHT Diazinon
Sample spectrum

Library spectrum
Similarity: 951
Library spectrum
Hit:1
Similarity: 954
Hit:1

Reference spectrum
Match: 936
Reference spectrum
Match: 969

Figura 3 b) Identificacin de compuestos no-objetivo.

Dibujo de contornos del cromatograma obtenido mediante GCxGC-TOFMS de una muestra de agua de ro, mostrando los ms de 2700 compuestos
obtenidos. Se pueden observar algunos ejemplos de compuestos no-objetivo identif icados en esta muestra. En la f igura tambin se muestra el dibujo de
superf icies y la identif icacin mediante el espectro de librera de dos de los compuestos.

Muestra de ro muestreada a 20 m del punto de emisin de aguas residuales de una EDAR

Prazepam
Acridine Omeprazole
Parachlorophenol 9,10-Antracenedione
Mirtazapine
Imazalil
Cocaine Clozapine
Clopidogrel
Diethyltoluamide Loratadine

Clomipramine
Butylated hydroxyanisole Clonitazene

Clofexamide Tetrazepam

4-chlorophenol Loratadine Sample spectrum

Sample spectrum

Library spectrum
Library spectrum
Similarity:954
Similarity:929
Hit:1
Hit: 1

Adems de los beneficios proporcionados por la tcnica de GCxGC-TOFMS para el anlisis de

micro-contaminantes en aguas comentados anteriormente, esta tcnica tiene otras ventajas.
Genera cromatogramas perfectamente ordenados en el espacio en 2D, lo cual, junto con la
clasificacin por grupos de compuestos y las burbujas de diferentes tamaos y colores, nos da
informacin muy valiosa sobre la contaminacin qumica de la muestra. Esto nos ayuda a
realizar comparacin entre muestras, y destacar de una forma rpida las diferencias. Nosotros
hemos utilizado esta caracterstica para proponer estudios de variacin de la contaminacin a
lo largo de un ro afectado por el vertido de aguas residuales. En la Figura 4 se muestran
cromatogramas visualizados en forma de burbujas, en los que se observa la utilidad de estos
anlisis. A la derecha de la ilustracin se representan cuatro muestras de agua de ro, tomadas
a 35 km aguas arriba del punto de emisin de la EDAR y a 20 m y 1150 m del punto de
emisin, as como una muestra de efluente de esta EDAR tomadas el mismo da. Observamos
que los contaminantes presentes en mayor concentracin y nmero son los productos de
higiene personal. Los pesticidas y PAHs se encuentra en bastante menor concentracin.
Podemos ver, como era de esperar, que la contaminacin es mayor en el efluente de la EDAR,
y luego decrece conforme nos alejamos del punto donde vierte sus aguas residuales la EDAR.
En la parte derecha de la figura podemos observar el anlisis del efluente de la EDAR
muestreado en das diferentes, pudiendo as realizar una valoracin de la contaminacin a lo
largo del tiempo.

Toda esta informacin es muy til para chequear de forma rpida las principales fuentes de
contaminacin de un agua de ro, los contaminantes mayoritarios de una muestra, la
efectividad de operacin de una EDAR, identificar picos de contaminacin anormal o destacar
los meses de mayor contaminacin. Adems nos ayuda a la seleccin rpida de marcadores
qumicos de la contaminacin del agua.

Figure 4. Bsqueda automtica de la variacin de la contaminacin en el espacio y en el tiempo en muestras de agua.

Variacin de la contaminacin a lo largo de un ro. Variacin temporal de la contaminacin de un ef luente de agua residual

Point 1: 35 km aguas arriba de la EDAR_20 Abril Efluente EDAR_11 Abril

Pesticidas: 6 %
PAHs: 2 %
PCPs: 2 %

Total: 2.5 %

Efluente EDAR_20 Abril Efluente EDAR_20 Abril

Pesticidas: 100 %
PAHs: 100 %
PCPs: 100 %

Total: 100 %

Point 4: 20 m aguas abajo de la EDAR_20 Abril Efluente EDAR_27 Abril

Pesticidas: 39 %
PAHs: 24 %
PCPs: 39 %

Total: 38 %

Point 5: 1150 m aguas abajo de la EDAR_20 Abril Efluente EDAR_4 Mayo

Pesticidas: 9 %
PAHs: 23 %
PCPs: 12 %

Total: 12 %

Caracterizacin de los efluentes de las EDARs

Caracterizacin de los efluentes de las EDARs

La estrategia desarrollada se aplic para caracterizar los efluentes de cinco EDARs espaolas
(Figura 5). Se detectaron la mayora de los compuestos inicialmente seleccionados a niveles
de ng/L-g/L. En general, un reducido grupo de unos 13 compuestos representa ms de un
50% de la carga total de la contaminacin por los compuestos estudiados en los efluentes,
algunos compuestos pueden variar dependiendo de las caractersticas de la EDAR. Como se
puede observar hay que destacar la importancia de los metabolitos (subrayados en la Fig. 5),
ya que de los 13 compuestos ms destacados 4 de ellos son metabolitos.
Los metabolitos del antipirtico/antiinflamatorio dipirona (nolotil o buscapina), 4-FAA, 4-AAA y
4-AA, son unos de los contaminantes presentes a mayor concentracin en todas las EDARs
estudiadas y se encuentran en casi el 100% de las muestras analizadas. El -bloqueante
atenolol, el regulador del colesterol gemfibrozil, la fragancia sinttica galaxolide y el diurtico
hidroclorotiazida contribuyen tambin en un alto porcentaje a la contaminacin total en todas
las EDARs. Por otro lado hay contaminantes como los antibiticos ofloxacino y ciprofloxacino,
algunos antiinflamatorios como el diclofenaco, ibuprofeno o la codena, el protector gstrico
ranitidina o la cafena, que si bien son omnipresentes en los efluentes de todas las EDARs, su
contribucin a la contaminacin total vara dependiendo de la EDAR. Hay otros contaminantes
que estn presenten en unas EDARs y en otras no, como es el caso de los agentes de
contraste de rayos-X iopromida e iopamidol, que de las EDARs evaluadas solo se han
encontrado en la de Baix Llobregat a concentraciones del rango de g/L.

Figura 5. Representacin de la carga total media de micro-contaminantes presentes en los efluentes de

cinco EDARs espaolas.

1.- ALMERIA- El Ejido (urbana/agrcola) 4.- CANTABRIA- Vuelta Ostrera (urbana)

2.- MADRID- Alcal de Henares (urbana) 5.- BARCELONA- Baix Llobregat (urbana)
3.- MADRID- Alcal de Henares (urbana/industrial)

140000 140000
Otros
Otros
120000 Paraxanthine
Paraxanthine
120000
Cafeina
Cafeina
100000 Furosemide
Furosemide
100000
Diclofenac
Diclofenac
Carga total ng/L

80000
Ofloxacin
80000 Ofloxacin
Ciprofloxacin
Ciprofloxacin
60000
4-FAA
60000 4-FAA
4-AAA
40000 4-AAA
4-AA
40000 4-AA
Hydrochlorotiazide
20000 Hydrochlorotiazide
Gemfibrozil
20000 Gemfibrozil
0 Atenolol
Atenolol
Galaxolide
0 1 2 3 4 5 Galaxolide

1 2 3 4 5
N=16 N=12 N=18 N=6 N=8

Caracterizacin de las aguas de ro

Las tcnicas desarrolladas tambin se aplicaron para caracterizar las aguas de un ro (Figura
6). Al igual que ocurra en el caso de las aguas residuales, en las aguas de ro tambin hay un
reducido grupo de compuestos que representa ms de un 50% de la carga total de la
contaminacin por los compuestos estudiados. Este grupo lo componen los principales
metabolitos del antipirtico/antiinflamatorio dipirona (4-FAA y 4-AAA), el atenolol, la nicotina, el
naproxen, la cafena y el galaxolide. En la Figura 6 se observa que los contaminantes
mayoritarios en las aguas del ro son el grupo de frmacos y productos de cuidado personal y
como esta contaminacin disminuye de forma proporcional a medida que las muestras de agua
de ro se toman en puntos ms alejados del emisario.

Figura 6. Carga total de micro-contaminantes orgnicos en las aguas de un ro.

 30000

25000 PESTICIDAS

28 JUNIO
11 ABRIL
20 ABRIL
26 ABRIL

7 JUNIO
4 MAYO
PAHs
20000
PPCPs
PCPs
ng/L

15000

28 JUNIO
11 ABRIL
20 ABRIL
26 ABRIL

7 JUNIO
4 MAYO

28 JUNIO
11 ABRIL
20 ABRIL
26 ABRIL
10000

28 JUNIO

7 JUNIO
4 MAYO
11 ABRIL
20 ABRIL
26 ABRIL

7 JUNIO
4 MAYO
28 JUNIO
11 ABRIL
20 ABRIL
26 ABRIL
28 JUNIO

7 JUNIO
4 MAYO
11 ABRIL
20 ABRIL
26 ABRIL

7 JUNIO
4 MAYO

5000

100%
90%
80%
70%
60%
50%
40%
30%
20%
10%
0%
Punto 1 Punto 2 Punto 3 EMISARIO Punto 5 Punto 4
A 35 km A 24 km A 6 km 20 metros A 1.15 km
antes antes antes despus despus
del emisario del emisario del emisario del emisario del emisario

CONCLUSIONES

En este estudio, se ha demostrado que las tcnicas de anlisis LC-TOF-MS y GCxGC-TOF-MS

son poderosas herramientas analticas para el anlisis de forma automtica de un amplio rango
contaminantes orgnicos en aguas residuales y de ro.

Se ha demostrado la eficiencia y la aplicabilidad de la tcnica LC-MS-QTOF para la bsqueda

automtica de compuestos y para el anlisis cualitativo y cuantitativo de contaminantes
polares, usando una base de datos de masa exacta creada por nosotros.

Se han obtenido resultados excelentes en trminos de eficiencia de separacin e identificacin

de compuestos aplicando la tcnica de SBSE-GCxGC-TOF-MS al anlisis de compuestos
apolares o semipolares. Adems, con esta tcnica se generan cromatogramas ordenados en el
espacio en 2D, se pueden realizan separaciones por grupos de compuestos y la informacin
se puede visualizar en forma de burbujas de colores con diferentes tamaos, lo cual es muy til
a la hora de realizar estudios de comparacin entre muestras. Nosotros hemos propuesto en
este trabajo estudios de variacin de la contaminacin a lo largo de un ro y en el efluente de
una EDAR en diferentes das.

La metodologa analtica propuesta ha permitido la evaluacin del estado de las aguas

residuales, as como el de un ro, ya que el problema no se ha centrado en un grupo reducido
de compuestos, sino que se han determinado un grupo muy amplio de contaminantes. Cmo
se ha visto, los tratamientos que se estn aplicando actualmente no son completamente
eficaces para la eliminacin de este tipo de contaminacin, ya que se detectan habitualmente
concentraciones de los contaminantes estudiados del rango de ng/L-g/L en los efluentes y en
los ros. Los resultados obtenidos tambin han puesto de manifiesto que para este tipo de
anlisis es necesario el seguimiento de metabolitos y productos de transformacin de los
compuestos.

REFERENCIAS

[1] Fuerhacker M. (2007): WFD- can we reach the target?. Micropol and Ecohazard,
Frankfurt/Main, Germany: 17-27.

[2] Bueno M.J.M., Agera A., Gmez M.J., Hernando M.D., Garca J.F., Fernndez-Alba A.R.
(2007): Application of Liquid Chromatography/Quadrupole-Linear Ion Trap Mass Spectrometry
and Time-of-Flight Mass Spectrometry to the determination of pharmaceuticals and related
contaminants in wastewater. Analytical Chemistry, 79 (24): 9372-9384.

[3] Castiglioni S., Bagnati R., Calamari D., Fanelli R., Zuccato E. (2005): A multiresidue
analytical method using solid-phase extraction and high-pressure liquid chromatography
tandem mass spectrometry to measure pharmaceuticals of different therapeutic classes in
urban wastewaters. J. Chromatogr. A, 1092: 206-215.

[4] Gros M., Petrovic M., Barcel D. (2006): Development of a multi-residue analytical
methodology based on liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) for
screening and trace level determination of pharmaceuticals in surface and wastewaters.
Talanta, 70: 678-690.

[5] Gmez M.J, Bueno M.J.M, Lacorte S., Fernndez-Alba A.R, Agera A. (2007). Pilot survey
monitoring pharmaceuticals and related compounds in a sewage treatment plant located on the
Mediterranean coast Chemosphere 66: 993-1002.

[6] Bueno M.J.M. Hernando, M.D., Herrera, S, Gmez, M.J., Fernndez-Alba, A.R. Bustamante,
I., Garca-Calvo, E. (2010): Pilot survey of chemical contaminants from industrial and human
activities in river waters of Spain. Intern. J. Environ. Anal. Chem. 90: 321-343.

[7] Heberer Th., Fuhrmann B., Schmidt-Baumler, Tsipi D., Koutsouba V., Hiskia A. (2001):
Occurrence of pharmaceuticals residues in sewage, river, ground and drinking water in Greece
and Berlin (Germanay). Pharmaceuticals and Personal Care Products in the Environment.
Edited by Daughton C.G and Jones-Lepp T.L. ACS symposium series 791. Chapter 4.

[8] Gmez, M.J., Gmez-Ramos, M.M., Agera, A., Mezcua, M., Herrera, S., Fernndez-Alba
A.R. (2009). A new Gas Chromatography/Mass Spectrometry (GC-MS) method for the
simultaneous analysis of target and non-target organic contaminants in waters. J. Chromatogr.
A 1216: 40714082.