UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO

Facultad de Estudios Superiores Zaragoza

Carrera: Qumica Farmacutico Biolgica

Materia: Qumica Orgnica

Prof. Armando Aguirre Guzmn

Alumna: Luna Aguirre Karla

Grupo: 2354

Fundamentos de
Espectroscopia

Junio 2016
Espectroscopia infrarroja

La interaccin de la radiacin infrarroja con los estados vibracionales de una

molcula slo es posible si el vector elctrico de la radiacin incidente oscila con la
misma frecuencia que el momento dipolar molecular. Una vibracin es infrarroja
activa nicamente si el momento dipolar molecular puede ser modulado por la
vibracin normal.

La tcnica de Espectroscopa de Infrarrojo permite la identificacin de los grupos

funcionales de un compuesto. Esto debido a que cuando una molcula absorbe
radiacin infrarroja, la vibracin intramolecular con frecuencia igual a la de la
radiacin, aumenta en intensidad, lo que genera seales con frecuencias que
corresponden a la vibracin de un enlace especfico. La regin infrarroja se divide
en tres regiones denominadas infrarrojo cercano (NIR), infrarrojo medio (MIR) e
infrarrojo lejano (FIR). El espectrmetro de IR con transformada de Fourier permite
la obtencin de espectros de forma rpida, precisa y con relaciones Seal/Ruido
(S/N) elevadas.

El ATR (Attenuated Total Reflection) es una tcnica de muestreo utilizada en el IR,

la cual se produce cuando una radiacin infrarroja entra en un cristal ATR
transmisor y de alto ndice de refraccin. El cristal est diseado para permitir una
reflexin interna total que crea una onda evanescente sobre la superficie del
cristal. Esta onda se extiende a la muestra que se mantiene en contacto ntimo
con el cristal, registrndose el espectro de infrarrojo del analito.

La Espectroscopa de Infrarrojo es una de las tcnicas espectroscpicas ms

verstiles y de mayor aplicacin en la caracterizacin e identificacin de
materiales, anlisis de productos farmacuticos y de sntesis, anlisis de
contaminantes, ciencia forense, biomedicina, agricultura, alimentos, adhesivos y
polmeros entre otros.

La radiacin infrarroja es la radiacin electromagntica de longitudes de onda ms

altas (menores frecuencias) que la de la luz roja; una longitud de onda tpica es de
alrededor de 1000 nm. Esa longitud de onda de 1000 nm corresponde a una
frecuencia de 3x10^14HZ, que es comparable a la energa con la cual las
molculas vibran. Por esta razn, las molculas pueden absorber radiaciones
infrarrojas y excitarse vibracionalmente.

Cualquier enlace entre dos tomos vibra a medida que los tomos se acercan y se
alejan uno del otro. Este tipo de movimiento se llama modo estiramiento. Las
molculas poli atmicas pueden sufrir adems vibraciones de plegado en las
cuales los ngulos entre enlaces peridicamente aumentan y disminuyen. La
frecuencia a la cual las molculas vibran dependen de las masas de sus tomos y
de la rigidez de sus enlaces: una molcula formada por tomos livianos unidos por
enlaces rgidos tiene una frecuencia vibracional ms alta que una formada por
tomos pesados por enlaces ms flojos. La primera absorber entonces
radiaciones de frecuencias ms altas que esta ltima. Los movimientos de plegado
de las molculas tienden a ser menos rgidos que los movimientos de
estiramiento; por lo tanto, las vibraciones de plegado absorben tpicamente
radiacin de frecuencias ms bajas que las vibraciones de estiramiento.

La rigidez de un enlace se mide con su constante de fuerza, k. Esta constante es

la misma que la de la ley de Hooke para la fuerza de restauracin de un resorte:
Hooke observ que la fuerza de restauracin es proporcional al desplazamiento
del resorte de su posicin de reposo:

Fuerza = [-k][desplazamiento]

Un enlace rgido experimenta una fuerza de restauracin elevada, aun para

desplazamientos bastante pequeos, y por ende k es elevada. Un enlace (como
un resorte dbil) experimenta solamente una pequea fuerza de restauracin, aun
para un gran desplazamiento; por lo tanto, su k asociada es pequea. En general,
la constante de fuerza es mayor para los desplazamientos de estiramiento de las
molculas que para los movimientos de plegado. La rigidez de un enlace no debe
confundirse con su fuerza, que es la energa requerida para romper la unin. En
general, la rigidez de un enlace aumenta con su fuerza.

La cantidad LETRARARA MU se llama masa efectiva de la vibracin molecular

(masa reducida). Midiendo la frecuencia vibracional de una molcula, incluye
medir la frecuencia o longitud de onda a la cual absorbe radiaciones infrarrojas,
podemos medir la rigidez de enlace.

En la prctica, el espectro de absorcin vibracional de una molcula se mide

utilizando un espectrmetro infrarrojo. La fuente de radiacin infrarroja es un
filamento caliente, y la longitud de onda se selecciona mediante la difraccin de la
radiacin por una hendidura: la interferencia constructiva da como resultado una
radiacin intensa obtenida en una direccin para un ngulo dado de la hendidura;
y a medida que se modifica el ngulo, pasan a travs de la muestra radiaciones de
distintas longitudes de onda. El rayo de divide, una parte pasa a travs de la
muestra y la otra a travs de un blanco; las intensidades de ambos rayos se
comparan con el detector y se monitorea la reduccin de la intensidad. El
resultado es un espectro en el cual aparecen mnimos a las longitudes de onda de
la radiacin absorbida por la muestra.

Modos normales y molculas poli atmicas

Una molcula no lineal formada por N tomos puede vibrar en 3N-6 formas
diferentes, y una molcula lineal puede vibrar 3N-5 formas. El nmero de formas
en las cuales una molcula puede vibrar aumenta rpidamente con el nmero de
tomos: una molcula de agua, con N=3, puede vibrar de tres maneras, pero una
molcula de benceno, con N=12, puede vibrar de 30 maneras diferentes. Algunas
vibraciones del benceno corresponden a la expansin y contraccin del anillo,
otras a su elongacin, y otras a su flexin y plegado. Cada forma en la cual una
molcula puede vibrar se llama modo normal, y por ello se dice que el benceno
tiene 30 modos normales de vibracin. Cada modo normal tiene una frecuencia
que depende de una manera complicada de las masas de los tomos que se
mueven en la vibracin y de las constantes de fuerza asociadas con los
movimientos involucrados.

Excepto en casos simples, es muy difcil predecir el espectro de absorcin

infrarroja de una molcula poli atmica, ya que cada uno de los modos tiene su
frecuencia de absorcin caracterstica que no es simplemente la frecuencia de una
molcula biatmica.
Sin embargo, ciertos grupos, tales como el anillo del benceno o el grupo carbonilo,
tiene frecuencias caractersticas, y a menudo puede detectarse su presencia en un
espectro. As, el espectro infrarrojo puede usarse para identificar las especies en
una muestra, buscando las bandas de absorcin caractersticas asociadas con
varios grupos.

Una ayuda adicional para la identificacin surge del hecho de que cada molcula
en general tiene una serie compleja de absorciones al hacer un barrido de
longitudes de onda. Esta regin de huellas digitales del espectro puede ser muy
difcil de analizar en detalle, pero su presencia nos permite reconocer a la
sustancia comparando su espectro con los de una biblioteca de espectros.

Resonancia magntica nuclear

La resonancia magntica nuclear (RMN) es la tcnica que mayor informacin

estructural proporciona. Ello se debe a que se observan los ncleos de los tomos
y se puede conocer la influencia de cada entorno molecular sobre cada uno de los
tomos.

La resonancia magntica nuclear (RMN) constituye una fuerte alternativa para

estudios estructurales, evaluacin de identidad y cuantificacin de ingredientes
farmacuticos activos (IFA). En las dos ltimas dcadas la aplicacin de la
resonancia magntica nuclear cuantitativa (RMNc) tuvo un creciente impacto en la
cuantificacin de compuestos, fundamentalmente orgnicos. Varios resultados
obtenidos mediante la RMNc han ido creando un lugar para la tcnica en la
industria biofarmacutica. La RMNc incluye experimentos de RMN con algunos
parmetros modificados, con el objetivo de obtener seales cuantificables. Basada
en algunos de los reportes ms relevantes, la presente revisin aborda algunas de
las aplicaciones de la RMN para vacunas basadas en polisacridos o
glicoprotenas. El trabajo hace especial nfasis en detallar algunos aspectos que
caracterizan la RMNc, as como sus aplicaciones.

La resonancia magntica nuclear (RMN) constituye una tcnica con un amplio y

reconocido espectro de aplicaciones en el campo del anlisis estructural. Tuvo sus
inicios a principios de la dcada de 1950, cuando se comercializaron los primeros
espectrmetros para la obtencin de espectros de protones, tras el descubrimiento
en 1945 de la resonancia. Este fenmeno plantea que los ncleos sometidos a un
campo magntico externo absorben radiacin electromagntica en el orden de las
radiofrecuencias. Como la frecuencia exacta de esta absorcin depende del
entorno qumico de los ncleos, el espectro de seales de absorcin de los
mismos revela una valiosa informacin sobre la estructura de la molcula. Con el
desarrollo de la RMN transformada de Fourier (RMNTF), desde comienzos de los
aos 1970, se aument la sensibilidad en los espectrmetros y posibilit el registro
rutinario de ncleos de poca abundancia natural como el 13C. Un desarrollo
vertiginoso tuvo lugar desde ese entonces y hasta la actualidad. Una gran
aplicabilidad en tcnicas posteriores tuvo la introduccin del concepto de
transferencia de polarizacin, combinando la secuencia para el eco de spines,
propuesta por Hahn en 1954. As mismo, la aplicacin de tcnicas bidimensionales
(2D-RMN) resuelve un nmero importante de interrogantes estructurales en el
campo de las biomolculas. Adicionalmente, las posibilidades tericas de la
tcnica para la cuantificacin de compuestos, desde la dcada de 1960, crearon
las bases para el desarrollo de la resonancia magntica nuclear cuantitativa
(RMNc). Con la utilizacin de gradientes de campo magntico (Pulse Field
Gradient, PFG) se alcanz una reduccin importante en los tiempos de adquisicin
de la seal de resonancia, tambin conocida como cada de induccin libre (FID,
siglas en ingls) y permiti para el caso de las molculas en disolucin, a travs
de la tcnica DOSY (Diffusion Order SpectroscopY), la medicin de la difusin a lo
largo de los tres ejes (X, Y y Z), as como la direccin y velocidad de flujo.

Los tomos ms abundantes en los compuestos orgnicos, H y C, se pueden

observar fcilmente con cantidades no muy grandes de muestra. Puesto que en
cada caso se pueden sacar conclusiones sobre el entorno prximo (e incluso
lejano) a cada tomo, se puede llegar a deducir la estructura de dichos
compuestos.

(1 H)
En el caso del hidrogeno el istopo ms abundante , es el que se

13
( C ),
observa. Para el carbono, el istopo observado es el mientras que el
 (12 C ),
mas abundante es magnticamente inactivo. Otros istopos

( 31 P),
magnticamente activos que pueden observarse con (15 N ) y para los tomos

ms relevantes entre las biomolculas.

En presencia de un campo magntico, los ncleos de los tomos que poseen

omento magntico de spin, pueden tener dos (o ms) orientaciones en dicho
(13 C)
campo. En el caso de los ncleos (1 H) y , con momento de spin pueden

tener dos orientaciones, una a favor y otra en contra del campo externo.

El comportamiento de los ncleos en el campo magntico puede verse influido de

mltiples maneras, para dar diferentes tipos de informacin, pero por lo regular se
obtiene:

Frecuencia a la que sale cada ncleo en concreto Desplazamiento

Numero de ncleos de cata tipo Integral
Nmero y disposicin de los ncleos prximos Multiplicidad

En los compuestos alifticos se puede hacer un clculo aproximado en los CH y

CH2, a partir de la contribucin de cada sustituyente. En el caso de los
compuestos bencnicos se puede calcular aprecindose el apantallamiento
(sustituyentes dadores) o el despantallamiento (sustituyentes atractores) en las
posiciones orto- y para-. Igualmente se conoce el efecto aproximado de los
sustituyentes gemnales o vecinales (cis o trans) en los dobles enlaces.
Adems del desplazamiento, la seal correspondiente a cada tipo de protones
indica el nmero de protones que integran dicha seal, Integral.
Un compuesto de formula molecular C 9 H 16 O5 , presenta el siguiente espectro

RMN 1 H
de . Como puede observarse, existen 5 tipos de protones diferentes

y la intensidad relativa de las seales nos indican los protones que hay de cada
tipo.

La seal de un tipo de protones se ve escindida en dos por cada protn diferente

sobre el mismo carbono o sobre carbonos vecinos. La separacin producida se
llama constante de acoplamiento J y se mide en Hz.

Si la incisin la producen dos protones iguales (igual J) se produce una seal triple
conocida como triplete y si la producen tres protones iguales, la seal es
cudruple y es conocida como cuadruplete.
Diferencia entre acoplarse a tres protones con diferente J: doble doble doblete,
ddd; y acoplarse a tres protones con igual J: cuadruplete, C-

RMN 1 H
El compuesto orgnico cuyo espectro se presenta a continuacin

tiene las siguientes propiedades:

El efecto por el que unos protones hacen escindirse a los protones prximos
(acoplados) es mutuo y de la misma magnitud. Por tanto, la constante de
acoplamiento (j) es idntica entre los dos tipos de protones que se acoplan.

La magnitud del acoplamiento (valor en Hz de la constante de acoplamiento J) es

variable, dependiendo de la disposicin relativa de los protones acoplados
(enlaces que los separan, disposicin, agrupaciones prximas, disposicin
espacial, etc.)

El acoplamiento entre protones alifticos vecinos (en carbonos contiguos), cuando

existe libre rotacin tiene un valor ~6Hz.
Bibliografa

Atkins Jones. Principios de Qumica: los caminos del descubrimiento. 3era

edicin. Edit. Panamericana 2007.
Johnson R. Carl y Pasto J. Daniel. Determinacin de estructuras
orgnicas, Edit, Revert, Barcelona, Espaa, 2003.
McMurry J. Qumica Orgnica. Octava edicin. Edit. Thomson, 2012.
Solomons T.W.G. Qumica orgnica, Edit. Limusa. 1999.
Owens J. Frank y Poole P. Charles Jr. Introduccin a la nanotecnologa,
Edit. Revert, 2007, Barcelona, Espaa.