Uji Aktivitas Antibakteri Kain Sutera Berpewarna Alami

dari Ekstraksi Kulit Nephelium Lappaceum terhadap

Bakteri Escherichia Coli dan Bacilius
Apriyanti Tindage1, Bonaventura Prasetya Dwi Indrawan1
1
Program Studi Kimia, Fakultas Sains dan Matematika, Universitas Kristen Satya Wacana

652014007@student.uksw.edu

Abstrak

Tujuan penelitian ini adalah mengetahui aktivitas antibakteri pada kulit rambutan
yang digunakan sebagai pewarna alami untuk kain sutera. Dalam penelitian ini dilakukan uji
aktivitas antibakteri melalui metode difusi agar dengan kertas cakram. Berdasarkan hasil
akhir penelitian menunjukkan bahwa kain sutera yang telah diwarnai memiliki sifat
antibakteri. Dari hasil ekstraksi dengan pelarut metanol dan etil asetat, didapat nilai aktivitas
antibakteri paling tinggi pada ekstraksi menggunakan pelarut metanol, dengan presentasi
zona hambat untuk bakteri Escherichia Coli yaitu 27,97% dan untuk bakteri Bacilius yaitu
28,93%.
Kata kunci: antibakteri, kulit rambutan, pewarna alami

Abstract

The purpose of this study was to determine the antibacterial activity of the rambutan skin
used as natural dyes for silk fabric. In this study tested the antibacterial activity through the
agar for the diffusion method with paper discs. Based on the final results of the study showed
that the silk fabric that has been dyed have antibacterial properties. From the extraction with
methanol and ethyl acetate, obtained the highest grades of antibacterial activity on solvent
extraction using methanol, with the presentation of inhibition zone for the bacterium
Escherichia coli which is 27.97% and for the bacteria Bacilius is 28.93%.

Keywords : antibacterial, natural dyes ,rambutan skin

1.Pendahuluan Bakteri patogen dapat berbahaya karena

kemampuan menginfeksi dan
Antibakteri adalah zat yang dapat menimbulkan penyakit serta merusak
menggangu pertumbuhan atau bahkan bahan pangan. Berdasarkan daya kerjanya
mematikan bakteri dengan cara antibakteri dibagi dalam dua kelompok,
menggangu metabolisme bakteri patogen. yaitu antibakteri bakteriostatik dan

1
antibakteri bakterisidik. Kelompok
pertama menghambat pertumbuhan dan
perkembangan bakteri. Kelompok kedua,
bekerja mematikan bakteri tersebut.
Pewarna telah lama digunakan
pada bahan makanan, minuman dan bahan
sintetik untuk menambah daya tarik
produk. Pewarna dapat dihasilkan dari
bahan alam maupun bahan sintetik.
Pewarna alami tidak berbahaya karena
mengandung senyawa-senyawa alami, lain
halnya dengan pewarna sintetik yang
bersifat karsinogen. Walaupun pewarna
sintetik lebih banyak diminati karena
proses pembuatan yang mudah dan harga
yang murah, sedangkan warna alami yang
harus melalui banyak proses dan harga
pasaran yang cukup tinggi justru lebih
aman dan ramah lingkungan.
Pewarna alami dapat diambil dari
daun, kulit buah, bunga, batang tanaman,
maupun daging buahnya. Salah satu
contohnya pewarna yang akan kita buat
adalah pewarna alami yang berasal dari
kulit Nephelium Lappaceum (Rambutan).
Rambutan merupakan sejenis buah-buahan
tropika yang banyak digemari oleh
masyarakat. Namun kulitnya yang
berwarna merah masih belum
dimanfaatkan secara maksimal, adanya
warna merah tua diduga terdapat pigmen
antosianin yang dapat digunakan sebagai
pewarna alami dan juga di dalam kulit
rambutan mengandung antibakteri.
Antosianin larut dalam pelarut polar
seperti metanol, aseton, atau kloroform, air
yang diasamkan dengan asam klorida atau
asam format. Sehingga mempermudah
pengambilan warna pada kulit rambutan.
(Elvi,R dkk.,2014).
Pada penelitian ini, pengambilan
zat pewarna dari kulit rambutan dilakukan
2
melalui proses ekstraksi dengan
menggunakan pelarut metanol dan etil
asetat. Selanjutnya ekstrak zat pewarna
dipekatkan melalui proses evaporasi.
Ekstrak zat pewarna yang dihasilkan
kemudian diuji melalui pewarnaan
terhadap kain sutera (mordanting dengan
tawas). Untuk selanjutnya pada kain sutera
hasil pewarnaan dilakukan uji aktivitas
antibakteri. Bahan dari sutera pada
umumnya memiliki afinitas paling bagus
terhadap zat warna alam dibandingkan
dengan bahan dari kapas. Beberapa hasil
penelitian menunjukkan bahwa kulit
rambutan mengandung senyawa tanin,
saponin, flavonoid, alkanoid, fenolik,
terpenoid (Sukadana, et al.; 2008) dan
steroid (ponnama, et al.; 2012) yang
diketahui mempunyai aktivitas antibakteri.
2. Metodologi Penelitian
2.1 Alat dan Bahan
Alat
Alat yang digunakan dalam
penelitian adalah neraca analitik 2 digit
(OHAUS, Gold Series), oven (Memmert,
854 Schwabach), Rotavapor (BUCHI, R-
114) dan Waterbath (BUCHI, B-480), 1
set rangkaian soklet.
Bahan
Bahan yang digunakan dalam
penelitian adalah kulit rambutan, metanol ,
etil asetat, SDS (Sodium Dodesil Sulfat ),
AgNO3, bakteri Escherichia Coli , bakteri
Bacilius, kain sutera, dan tawas.
2.2 Metode
2.2.1 Pembuatan powder kulit rambutan
untuk bahan ekstraksi
 Kulit rambutan yang telah
dipisahkan dari daging buahnya ditimbang
dan dicuci. Setelah itu dioven selama 2
hari pada temperatur 50 . Kemudian
kulit rambutan diblender hingga menjadi
serbuk dan diayak menggunakan ayakan
berukuran 20 mesh.
2.2.2 Ekstraksi powder kulit rambutan
Sampel serbuk kulit rambutan
ditimbang 20 gram dan dibungkus
menggunakan kertas saring dengan cara
selongsong. Kemudian dilakukan dua kali
ekstraksi dengan massa sampel yang sama,
yang pertama menggunakan pelarut
organik metanol dan yang kedua
menggunakan pelarut organik etil asetat.
Selanjutnya ekstrak zat pewarna
dipekatkan melalui proses evaporasi
menggunakan rotavapor. Hasil ekstrak ini
ditimbang dan masing-masing dibilas
menggunakan pelarut metanol dan etil
asetat.
2.2.3 Sintesis nano partikel Ag
AgNP disintesis dengan cara
mereduksi AgNO3 dengan larutan NaOH
dan SDS (Sodium Dodecyl Sulphate)
dalam ekstrak kulit rambutan. Ekstrak
kulit rambutan sebanyak 5 mL
dicampurkan dengan 5 mL larutan SDS
(Sodium Dodecyl Sulphate) dan
didinginkan dalam kulkas selama 5 menit.
Larutan dibuat basa (pH 9) dengan larutan
natrium hidroksida. Setelah itu, 4 mL
larutan perak nitrat ditambahkan ke
dalamnya. Campuran kemudian
dipanaskan dalam waterbath selama 20
menit pada 80C. Warna larutan kemudian
berubah menjadi merah kecoklatan untuk
pelarut metanol dan cokelat kekuningan
3
untuk pelarut etil asetat, yang
menunjukkan terbentuknya AgNP.
2.2.4 Prosedur pencelupan kain sutera
Sebelum pewarnaan kain sutera,
kain direbus dengan larutan tawas 5%.
Setelah itu kain dioven hingga
kering. Kain ini kemudian direndam dalam
hasil ekstrak kulit rambutan menggunakan
pelarut organik metanol dan etil asetat
selama 1 jam dan dioven lagi pada suhu 50
hingga kain benar-benar kering.
Lalu kain dipotong-potong dan diberi
nama sesuai dengan pelarut organik yang
digunakan.
2.2.5 Pembuatan medium NA (Nutrient
Agar)
NA yang dilarutkan dengan
aquades, disterilkan dalam autoclave pada
suhu 121 selama 5 menit, lalu
didinginkan hingga suhunya mencapai 50
.
2.2.6 Pengenceran biakan Bacillus dan
E.coli
Biakan Bacillus diambil 1 mL
ditambahkan dengan 7 mL NaCl 0,9%
steril (untuk 8x pengenceran). Siapkan
juga 1 mL biakan E.coli ditambahkan
dengan 5 mL NaCl 0,9% steril (untuk 6x
pengenceran). pengenceran ini harus
dilakukan dalam inkubator agar piranti dan
alat yang digunakan tetap steril dan tidak
terkontaminasi dengan bakteri lain di
udara.
2.2.7 Inokulasi pada petri
1 mL biakan yang telah diencerkan
dimasukkan di tengah petri disc. Medium
NA yang telah disterilkan dituang ke
 dalam petri disk 20 mL. Lalu
digoyang perlahan-lahan agar bakteri dan
NA dapat bercampur dan dibiarkan hingga
NA memadat.
2.2.8 Uji antibakteri kain sutera
Kain yang telah dipotong-potong,
diletakkan di atas petri disc berisi bakteri
dan nutrient agar. Kain yang telah
dipotong-potong ini sebelumnya telah
dicelupkan dengan pelarut organik berupa
methanol, etilasetat, methanol-AgNP, etil
asetat Ag-NP, dan tanpa perlakuan apapun.
Kemudian diletakkan juga antibiotik
standard disc keatas petri disc yang
berfungsi sebagai penghambat
pertumbuhan bakteri pada daerah di
sekitarnya dimana antibiotik standard disc
ini diletakkan.
2.2.9 Pengukuran panjang
pertumbuhan bakteri
Reaksi positif terjadinya aktivitas bakteri
pada kain yang telah diwarnai ditandai
dengan munculnya zona hambat
disekeliling kain uji yang terkadang
membentuk suatu lingkaran. Kemudian
diukur selisih luas antara zona terang
dengan luas kain.
3.Hasil dan Pembahasan
3.1 Ekstraksi powder kulit rambutan
Ekstrasi kulit rambutan dilakukan 2
kali, yang pertama menggunakan metanol
dan yang kedua menggunakan etil asetat,
hal ini bertujuan untuk membandingkan
pelarut mana yang menghasilkan hasil
ekstraksi yang baik terhadap daya serap
kain sutera dan terhadap pertumbuhan
bakteri. Dari hasil pelarut ini, diperoleh
4
rendemen1 sebesar 58,25% (b/b) untuk
pelarut metanol dan 58,3% (b/b) untuk
pelarut etil asetat (perhitungan terlampir).
Walaupun hasil rendemen dengan pelarut
metanol lebih sedikit dibandingkan dengan
pelarut etil asetat, tapi kualitas pelarut
metanol lebih bagus yang ditandai dengan
warna hasil ekstraksi yang lebih gelap.
3.2 Sintesis nano partikel Ag
Sintesis AgNP dilakukan dengan cara
mereduksi AgNO3 dengan larutan NaOH
dan SDS (Sodium Dodecyl Sulphate)
dalam ekstrak kulit rambutan. Sifat
antibakteri nanopartikel perak dipengaruhi
oleh ukuran partikel. Semakin kecil ukuran
nanopartikel perak semakin besar efek
antibakterinya (Guzman, dkk. 2009). Jika
ukuran partikel semakin kecil, luas
permukaan nanopartikel perak semakin
besar sehingga meningkatkan kontak
mereka dengan bakteri atau jamur, dan
mampu meningkatkan efektivitas
bakterisida dan fungisida. Dalam
penelitian ini, bakteri yang akan diuji
adalah bakteri Escherichia Coli dan
Bacillus. Pada saat nanopartikel perak
kontak dengan bakteri dan jamur maka
nanopartikel perak akan berfungsi dalam
mempengaruhi metabolisme sel dan
menghambat pertumbuhan sel.
Nanopartikel perak melakukan penetrasi
dalam membran sel kemudian mencegah
sintesis protein selanjutnya terjadi
penurunan permeabilitas membran, dan
pada akhirnya menyebabkan kematian sel
(Montazer, dkk. 2012).
Dari hasil penelitian, nano partikel Ag
ini dapat menghambat pertumbuhan
bakteri Escherichia Coli dan Bacillus pada
ektstrak kulit rambutan menggunakan
1 rendemen : hasil akhir ekstraksi
pelarut metanol dan etil asetat. Hal ini Tabel 2. Selisih luas zona hambat bakteri
ditunjukkan dengan reaksi negatif pada Bacillus terhadap beberapa pelarut organik
bakteri Escherichia Coli, dimana tidak
terdapat bakteri pada pengulangan pertama Pelarut Luas zona hambat Rata-
dan kedua untuk pelarut metanol-AgNP organik bakteri (cm2) rata
1 2 3
dan pada pengulangan kedua untuk pelarut
Metanol 2,89 2,89 3,42 3,067
etil asetat dimana tidak terdapat bakteri Etil asetat 1 1,54 0,54 1,027
pada kain sutera dengan pelarut etil asetat- Metanol- 0,09 - - 0,03
AgNP (Tabel 1). Sedangkan pada bakteri AgNP
Bacillus, tidak terdapat bakteri pada Etil - - 0,64 0,213
pengulangan kedua dan ketiga pada kain asetat-
sutera dengan pelarut metanol-AgNP dan AgNP
pada pengulangan pertama dan kedua Diameter antibiotik : 2,2 cm
bakteri tidak hidup/tumbuh pada kain
sutera dengan pelarut etil asetat-AgNP Berdasarkan hasil dalam tabel 1 dan tabel
(Tabel 2). 2, didapat persenan untuk zona hambat
tiap pelarut sebagai berikut : (Perhitungan
3.3 Uji antibakteri kain sutera terlampir)

Berdasarkan penelitian, telah dihitung Tabel 3. Persenan untuk zona hambat

selisih luas antara zona hambat di sekitar bakteri Escherichia Coli
kain dengan selisih luas kain, ini bertujuan
untuk mengetahui seberapa besar nilai Pelarut Organik %
hambat bakteri terhadap kain yang Metanol 27,9
diwarnai dengan pewarna dari ekstrak kulit 7
Etil asetat 13,0
rambutan yang berfungsi sebagai
8
antibakteri. Berikut ini tabel selisih luas
Metanol-AgNP 1,63
zona hambat bakteri dengan luas kain : Etil asetat-AgNP 11,98
Tabel 1. Selisih luas zona hambat bakteri
Escherichia Coli terhadap beberapa pelarut Tabel 4. Persenan untuk zona hambat
organik bakteri Escherichia Coli
Pelarut Luas zona hambat Rata- Pelarut Organik %
organik bakteri (cm2) rata Metanol 28,9
1 2 3 3
Metanol 2,8 2,38 1,69 2,290 Etil asetat 17,6
Etil asetat - 0,2 0,36 0,187 4
Metanol- - - 0,04 0,013 Metanol-AgNP 3,53
AgNP Etil asetat-AgNP 9,04
Etil 0,9 - 0,1 0,333 Dari persenan zona hambat bakteri
asetat- ditunjukkan daya hambat bakteri terbesar
AgNP terdapat pada ekstrak kulit rambutan
Diameter antibiotik : 2,1 cm dengan pelarut metanol. Adanya perbedaan
kemampuan penghambatan pada ekstrak

5
kulit rambutan dengan pelarut metanol dan
etil asetat ini, dipengaruhi oleh perbedaan
penyusun dinding sel pada bakteri.
Dinding sel Bacillus yang merupakan
kelompok bakteri gram positif memiliki
struktur dengan sedikit lipid sedangkan
pada E. coli yang merupakan bakteri gram
negatif relatif lebih banyak mengandung
lipid. Senyawa terpenoid maupun steroid
mudah larut dalam lipid sifat inilah yang
mengakibatkan senyawa ini lebih mudah
menembus dinding sel bakteri gram positif
dan sel bakteri gram negatif. Selain itu
salah satu faktor yang menyebabkan tidak
adanya aktivitas antibakteri adalah
kurangnya kecepatan difusi dari bahan uji
yang digunakan ke dalam media (Ariyanti,
et al, 2012). Hasil penelitian ini
menunjukkan ekstrak kulit rambutan
dengan pelarut metanol mempunyai
kandungan senyawa golongan fenolik
yaitu berupa senyawa tanin, saponin,
flavonoid, alkanoid, fenolik, terpenoid
(Sukadana, et al.; 2008) dan steroid
(ponnama, et al.; 2012) yang diketahui
mempunyai aktivitas antibakteri. (Zulhipri.
et. al.,2012). Aktivitas antibakteri ini
ditunjukkan dengan adanya zona bening
(+) di sekitar paper disk (Gambar 1).
a ternyata hasil terbesar adalah pelarut
b metanol dengan luas zona hambat kain
(1) (2)
Gambar 1. Uji aktivitas antibakteri2 (1)
terhadap bakteri Bacillus (2) terhadap
bakteri Escherichia Coli
Menurut Nofiani., et al. (2009) bakteri
yang menunjukkan aktivitas antimikroba
2 Keterangan : (a) paper disk ; (b) zona
bening
6
ditandai dengan terbentuknya zona bening
disekitar koloni bakteri. Sedangkan reaksi
negatif terhadap antibiotik yang terdapat
pada kain sutera disebabkan karena :
1. Pengovenan kain yang salah
sehingga menyebabkan sifat
antibiotik dari pencelupan ekstrak
kulit rambutan hilang.
2. Pewarnaan kain yang tidak merata.
3. Lamanya proses pencelupan kain
ke hasil ekstraksi yang singkat,
menyebabkan kain belum
menyerap pewarna secara
sempurna.
4.Kesimpulan
Dari hasil tabel 1 dan 2, diperoleh data
bahwa ekstrak kulit rambutan mampu
berfungsi sebagai penghambat
pertumbuhan bakteri Escherichia Coli dan
Bacilius, karena dari hasil penelitian
menunjukkan bahwa pelarut organik yang
digunakan untuk ekstraksi kulit rambutan
mengahasilkan reaksi positif yang ditandai
dengan adanya zona hambat di sekitar kain
sutera.
Berdasarkan penelitian uji aktivitas
antibakteri terhadap bakteri Escherichia
Coli pada beberapa pelarut organik
sebesar 2,290cm2. Sedangkan untuk
bakteri Basilus hasil terbesar juga
ditunjukan oleh pelarut metanol dengan
luas zona hambat kain sebesar 3,067 cm2.
5.Daftar Pustaka :
[1] Elvi R.F.Hutapea, Laura O.Siahaan,
Rondang T. Ekstraksi Pigmen Antosianin
Dari Kulit Rambutan (Nephelium
lappaceum) Dengan Pelarut Metanol.
Jurnal Teknik Kimia Universitas Sumatera Ekstrak Etanol Daun Kelapa Sawit (Elaeis
Utara, Vol. 3, No 2 (Juni 2014). guineensis Jacq) Terhadap Bakteri
Staphylococcus aureus Dan Bacillus
[2] Rengganis A. 2015. Uji Aktivitas subtilis Serta Profil KLTnya.
Antibakteri Ekstrak Kulit Buah Rambutan http://eprints.ums.ac.id/28083/15/NASKA
(Nephelium lappaceum L.) Pada Bakteri . H_PUBLIKASI.pdf. Diakses pada tanggal
http://journal.unnes.ac.id/sju/index.php/ijc 13 April 2016.
s. Diakses pada tanggal 10 April 2016.
6. Lampiran 1 :
[3] Ina,R. 2013. Kajian Pengaruh
Konsentrasi Perak Nitrat (AgNO3) Dokumentasi
Terhadap Ukuran Nanopartikel Perak.
http://lib.unnes.ac.id/19675/1/4311409048 1. Ekstraksi powder kulit
.pdf. Diakses pada tanggal 12 April 2016 rambutan
- Persiapan sampel untuk
[4] Zulhipri, Yusnetty B., dan Rosallia P. ekstraksi
Dyaningtyas. Kandungan Fitokimia dan
Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol
Kulit Rambutan (Nephelium lappaceum L)
Varietas Binjai Dan Lebak Bulus. Jurusan
Kimia Fakultas MIPA Universitas Negeri
Jakarta Vol. 2 No. 2 Desember 2012.

[5] Saranya D.,et al. Study on

antibacterial activity of natural dye from
the bark of Araucaria Columnaris and its
application in textile cotton fabrics.
Journal of Microbiology and
Biotechnology Research. 2014, 4 (3): Hal
32-35.

[6] Swarnali M.,et al. Antimicrobial

activities of silver nanoparticles
synthesized from Lycopersicon esculentum
extract. Journal of Analytical Science and
Technology. 2014, 5: Hal 40. a. Ekstraksi dengan pelarut metanol

[7] Chairul H. 2012. Penapisan Aktivitas

Antibakteri dari Bakteri yang Berasosiasi
dengan Karang Lunak Sarcophyton sp.
http://eprints.unsri.ac.id/1255/1/8.chairul_
huda_69-76.pdf. Diakses pada tanggal 13
April 2016.

[8] Nurida W. 2014. Aktivitas Antibakteri

Ekstrak Etanol Dan Fraksi Fraksi Dari

7
 - Hasil evaporasi ditimbang dan
dibilas masing-masing dengan
pelarut metanol dan etil asetat

b. Ekstraksi dengan pelarut etil asetat

- Kolf kosong ditimbang (massa

awal) sebelum proses evaporasi

2. Prosedur pencelupan kain sutera

- Mordanting menggunakan tawas

- Ekstrak zat pewarna dipekatkan

dengan proses evaporasi
- Sesudah kain dikeringkan dalam
oven

8
- Pewarnaan kain sutera dengan
3. Inokulasi pada petri
menggunkan ekstrak kulit
rambutan

a. Dalam pelarut metanol

4. Uji antibakteri pada kain sutera

a. Terhadap bakteri Bacillus
b. Dalam pelarut etil asetat

b. Terhadap bakteri Escherichia

Coli

- Sesudah kain dikeringkan dalam

oven

9
10