Universidad Distrital Francisco Jos de Caldas Colorimetra y espectrofotometra, diluciones en

serie e independientes
Prctica de laboratorio N4 y 5
Ariza L. (20132150014); Jimnez D. (20132150008); Rodrguez D. (20112150110)

1. RESULTADOS
1.4. Tabla 4. Prueba de Bial

1.1. Tabla 1. Prueba de Benedict

1.5. Tabla 5. Prueba de Fehling

1.2. Tabla 2. Prueba de Molisch 1.6. Tabla 6. Prueba de Tollens

1.3. Tabla 3. Prueba de Seliwanoff

1.7. Tabla 7. Prueba de Barfoed
 Molisch

1.8. Prueba de osazonas

Selliwanoff

1.9. Prueba del cido mucico

Bial

2. DISCUSIN
2
A partir de los ensayos realizados en la primera
parte, se puede inferir que el control de 12 horas, a
Fehling
pesar de haber sido recolectado con previo ayuno,
presenta algn tipo de carbohidrato, arroj un
resultado positivo en la prueba general de Molisch,
adems, dado el tiempo de reaccin en el ensayo de Tollens
seliwanoff, se puede decir que se trata de una
aldosa, que se confirma con el ensayo de fehling el
Barfoed
cual fue positivo para esta muestra, segn el ensayo;
por el aspecto de los cristales observados despus
de realizar la prueba de osazonas y cido mcico, se
puede observar que se trata de una aldosa y
posiblemente corresponde a glucosa.
En cuanto a la muestra problema, dado el resultado 2
La segunda parte de la prctica consisti en hacer
en la prueba de Benedict, se trata posiblemente de la identificacin de carbohidratos a partir de las
un azcar reductor que se confirmara con el ensayo pruebas de las osazonas en reaccin con
de tollens en el que se apreci un precipitado gris fenilhidrazina, y las pruebas con cido mcico en
(positivo) y perteneciente a la familia de aldosas. Se reaccin con cido ntrico.
descartaron los resultados de algunos ensayos Inicialmente se realiz la prueba de osazonas con
debido a posibles interferencias como la diferentes carbohidratos, que a su vez nos
contaminacin de reactivos; por lo tanto, al acotar permitieron identificar el azcar presente en los
los resultados de la formacin de cristales podra controles y muestra problema. La reaccin general
estarse tratando de glucosa, inherente al control de se muestra a continuacin:
12 horas, adems de galactosa.
3
A continuacin se indican las reacciones de las
pruebas realizadas.

Tabla 8. Reacciones ensayos parte 1

Ensayo Reaccin
Benedict

Figura 1. Reaccin de la prueba de osazonas.

Los cristales obtenidos en la prueba de osazonas

para los controles de acuerdo a lo observado en la
muestra problema, permiten indicar que dentro esta
estara presente la glucosa, siendo comparados con
las pruebas positivas de los azcares analizados; ya
que se observan estructuras caractersticas de esos
azcares. La reaccin consiste en que el HNO3
oxida tanto al grupo aldehdo como al alcohlico
primario para formar cidos dicarboxilico, el cido
msico insoluble se forma gracias a la oxidacin de
la galactosa, este cido dicarboxilico al ser
insoluble precipita en forma de cristales.
Figura 2. Reaccin en la Prueba de cido mcico
En el control de 12 y 24 horas se observan cristales
aplanados, largos y en formas de puntas, por esta
razn se puede hablar de la presencia de
glucosazonas, que a nivel de causa mdica que
podra estar presentando la excrecin se hablara de
glucosuria. La glucosuria se presenta por diferentes
causas, una puede ser la diabetes mellitus, otra es la
transitoria que es debida a causa de un estrs
emocional por la secrecin excesiva de hormonas
anti-insulina como el cortisol (ansiedad) y la
hormona tiroidea; y otra puede ser debida a la
glucosuria renal, que es un trastorno debido a la
mutacin en el co-transportador sodio-glucosa tipo
2 (SGLT-2) donde gran parte de la glucosa filtrada
no es reabsorbida y por esto aparece en la orina.
Por otra parte, tambin se observan algunos
cristales en el control de 12 horas muy parecidos a
la galactosa, lo que indicara causa de galactosuria
que es debida a la ausencia de la enzima galactosa
1-fosfato uridil transferasa, aunque se descarta
porqu este fenmeno se presenta en los lactantes
que no transforman la galactosa en glucosa y por
esta razn se deposita en la sangre.
Figura 3. Forma de Cristales en osazonas.
La segunda prueba consisti en la reaccin de la
prueba de cido mcico que consiste en la deteccin
de galactosa en cualquiera de sus formas, por
reaccin de las aldosas con cido ntrico que
originan cidos sacridos, la prueba se realiz con
glucosa, galactosa y lactosa dando positivo en los
tres al generar cristales. Igualmente, se puede
observar en los cristales de la muestra problema.
En cuanto a la Muestra problema, que contena una
parte del control de 12 horas y un carbohidrato
desconocido se observa en los cristales formas de
puntas delgadas alargadas y otras estructuras ms
planas y anchas, por esta razn se podra indicar que
hay presencia de glucosa por parte del control como
se mencion anteriormente, y galactosa como
carbohidrato desconocido.
4
Las cetosas reaccionan con el reactivo de Tollens
ya que estas, en su forma de cadena abierta
presentan arreglos de tipo enediol, para
posteriormente convertirse en aldosas que si se
pueden oxidar; los arreglos tautomricos
mencionados son proporcionados por el medio
bsico en que se encuentra el reactivo.
Figura 4. Tautomera enediol
Figura 5. Azcar reductor (cetosa) con reactivo de
Tollens
5
En caso de tratarse de un disacrido, inicialmente
se debera hacer una hidrlisis cida, en este caso se
tomar el ejemplo de la sacarosa, que al hidrolizar,
genera una molcula de glucosa y una de fructosa.

Figura 6. Hidrolisis de la sacarosa.

Debido a que la fructosa es una cetosa, su reaccin
con el reactivo de tollens est dada por:

Figura 7. Reaccin de la fructosa y el reactivo de

Tollens

Aqu se observa lo anteriormente sealado, dada la

tautomera que presenta la cetosa por el medio
bsico del reactivo, se produce una aldosa que
posteriormente se oxida con el reactivo de tollens.
Este reactivo proporcionara informacin de cada
monosacrido por separado ya que como se sabe, la
sacarosa es un azcar no reductor.
En conclusin la muestra problema posiblemente
contenga galactosa y glucosa, la glucosa pudo ser
secretada en forma de glucosuria o pudo ser
agregada como muestra problema.

BIBLIOGRAFA
Castro S. Perez J. Glucosura. Manual de Patologa
General 7ED. Barcelona. Espaa. 2013 Tomado de:
https://books.google.com.co/books?id=x99IbHaM
okIC&printsec=frontcover&source=gbs_ge_summ
ary_r&cad=#v=onepage&q&f=false
Anexo 1. Laboratorio de bioqumica azcares reductores
Formacin de cristales de osazonas y cido mucico
GRUPO: #5 FECHA: 21 de Septiembre de 2016
Prueba Osazonas Mucico
Control
Positivo

Fructosa ---------------

Arabinosa -----------------

-----------------
Xilosa

------------------
Ribosa

Glucosa

Lactosa

Galactosa

Maltosa -------------------
 Sacarosa -------------------

Ramnosa -------------------

Manosa --------------------

Control
12 horas

Control
24 horas

Muestra
Problema

Anexo 2. Mapa anlisis de muestra problema