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VITEK

Dra. Andrea Sakurada Zamora


Hospital Dr. Stero del Ro
Hospital Clnico Universidad de Chile
Mayo 2010
Tpicos de la presentacin

 Tecnologa y propsito.
 Ventajas y desventajas.
 Descripcin equipo
 Cocaceas gram positivas
 Bacilos gram negativos
 Control de calidad
 Experiencia local/Encuesta
 Recomendaciones.
PROPSITO DE LA AUTOMATIZACION

Mejorar el tiempo de respuesta de los estudios


microbiolgicos manteniendo la calidad de los
mismos.

REAS DE IMPACTO DE LA AUTOMATIZACIN


EN MICROBIOLOGA

Tecnolgica.

Informtica.
SISTEMAS AUTOMATIZADOS EN
MICROBIOLOGA

VENTAJAS
 Estandarizacin de los procesos.
 Requieren de un proceso de inoculacin e
incubacin corto
 Rapidez de respuesta 6-18 hrs.
 Contienen una librera taxonmica amplia
 Adecuacin a la diversidad de agentes de
importancia clnica.
 Objetividad de las determinaciones.
 Precisin y reproducibilidad de los resultados.
 Bioseguridad.
SISTEMAS AUTOMATIZADOS EN
MICROBIOLOGA

VENTAJAS:

 Optimizan el tiempo del personal del


laboratorio.
 Aplicacin de programas que facilitan
interpretacin de las pruebas realizadas y
anlisis estadsticos.
 Estndares CLSI.
 Almacenar gran cantidad de informacin.
 Control de las variables: disminuyen error
Preanalticas (Identificacin de muestra).
Analticas.
Post analticas (Informes) .
SISTEMAS AUTOMATIZADOS EN
MICROBIOLOGA
DESVENTAJA:
 Alto costo.
 No incluye caractersticas esenciales de ciertas
especies.
 Grado de resolucin es menor en algunos grupos
bacterianos.
 No esta disponible para todo el espectro de
bacterias.
 Paneles ATB no definidos por el usuario
 Necesidad de correlacionar con microbiologa
tradicional.
 Necesidad de cultivo puro.
VITEK 1
VITEK 1: FLUJO DE TRABAJO
VITEK I
 Originalmente diseado para la NASA.
 Utiliza sistemas de tarjetas con micro pocillos
con sustratos y antimicrobianos deshidratados
(pruebas bioqumicas).
 Capacidad de 15-120 tarjetas
 Debe realizarse una suspensin estandarizada
de la colonia que se inocula en la tarjeta y sta
es sellada e incubada en el equipo.
 El equipo mide desarrollo microbiano mediante
un lector ptico.
 Lecturas cada 1 hora.
 Mide Colorimetra.
 Tiempo de incubacin: 4-18 horas.
VITEK 1
 Identificacin de:
BGN, fermentadores, no fermentadores,
Familia Vibrionceae.
Cocaceas Y bacilos gram positivos.
Levaduras.
Haemophilus y Neisserias.
Anaerobios.
S. viridans
 Susceptibilidad: Gram+, Gram-
 Necesidad de confirmar algunas CIM y ATB no
presentes en las tarjetas.
 Las reacciones son analizadas automticamente
e interpretadas por el sistema informtico.
(Sistema experto)
VITEK 2

Seguridad
Trazabilidad Unidades
Unin electrnica Selladas
Por cdigo de
Barras

Simplicidad
Rendimiento Inculo nico
64 pocillos
FLUJO TRABAJO VITEK 2

5. Para la sensibilidad tomar alicota desde tubo


1. Colocar 3 ml de sol salina primario y ponerla en un segundo tubo con 3 ml
en tubo plstico. de solucin salina, mezclar y este tubo usarlo
para la sensibilidad.

2. Tomar colonias aisladas desde un


cultivo puro y ponerlas en un tubo con
los 3 ml de sol salina . (McFarland 0.5
0.63 )

3. Medir Mc Farland de inoculo


en densichek

4. Colocar tubo ya medido en


soporte (casete) tubo y tarjetas
de identificacin

145 ul para Gram Negativo


280 ul para Gram Positivo
SISTEMA VITEK 2
 Tarjetas miniaturizadas
 Identificacin microbiana a travs
de colorimetra, cintica
disminucin sustrato
 Variadas tarjetas de
susceptibilidad.
 Procesos completamente
automatizados.
Dilucin del inculo.
Inoculacin de las tarjetas.
Sellado de las tarjetas.
Carga en incubador.
Trasmisin de los datos.
Eliminacin de las tarjetas.
SISTEMA VITEK 2
 Lectura ptica cada 15 minutos (16 veces
cada pocillo promedio)
 Mide turbidez o cambio de color.
 Reporte por escrito.
 Anlisis del estudio de sensibilidad mediante
programa (AES).
 Resultados sensibilidad entre 5-14 horas
(> BNF) e identificacin entre 2,5-14 horas.
Levaduras sensibilidad e identificacin 18
horas
 Tarjetas con 64 pocillos identificacin.
 Sustratos individuales donde se mide la
actividad metablica: acidificacin,
alcalinizacin hidrlisis y capacidad de
crecimiento ante un determinado metabolito.
VITEK 2

 Susceptibilidad microbiana por CIM. ATB


deducidos.
 Sensibilidad 64 pocillos
 Promedio ATB por tarjeta 20 (1-5 diluciones)
 Estudios de susceptibilidad en:
 Staphylococcus spp.
 Enterococcus spp.
 Streptococcus grupo B y D.
 BGN, BNF
 Fastidiososos
 levaduras.
*Confirmar algunas CIMs
*Limitaciones de tarjetas (ver)
ANTIMICROBIANOS TARJETAS VITEK

 Quinolonas: 12 clases
Macrlido: 2 clases
 Aminoglicsidos: 7 clases
Monobactam: 1
 Rifamicina: 1 Phenicol: 1
 B Lact/Inh B lact: 6 clases Fusidane: 1
 B Lactamicos Pen: 8 clases Nitrofurano: 1
 Carbapenemes: 6 clases Oxazolidinona: 1
 Cephem: 25 clases Streptogramina: 2 clases
 Peptido ciclico: 1 Tetraciclina: 3 clases
 Sulfa: 1 Otros: 4
 Glicopeptidos 2 clases
 Glicilciclina: 1
 Ketolidos: 1
 Lincosamida: 2 clases
LIMITACIONES DE LAS TAREJTAS AST
 AST 577: G+
Realizar tcnicas alternativas:
 Eritromicina en S. agalactiae.
 Screening cefoxitin en S saprophyticus,.
 Ampicilina con S agalactiae.
 Linezolid con Enterococcus , Staphylococcus, S agalactiae.

 AST N087: G-
Realizar tcnicas alternativas:
 Amikacina: A baumannii.
 Ampicilina: Citrobacter spp, Enterobacter spp, Pantoea spp,
Serratia spp.
 Ampicilina/sulb: Citrobacter spp, Enterobacter spp, Pantoea
spp, Serratia spp.
LIMITACIONES DE LAS TAREJTAS AST
 AST N087: G-
Realizar tcnicas alternativas:
 Imipenem: Morganella morganii, Proteus spp, Providencia spp.
 Meropenem: Acinetobacter spp
 Ertapenem: E coli, K pneumoniae, C freundii, C koseri, E
aerogenes, E cloacae, K oxytoca, M morganii, P mirabilis, P
vulgaris, S marcescens.
 Tigecilina: C freundii, E cloacae, E coli, K oxytoca, K
pneumoniae, C koseri, E aergenes, S marcescens.
 Aztreonam: Pseudomonas.
VITEK 2 ALARMAS MECANISMOS DE
RESISTENCIA
 Alarmas: B-lactmicos:
Modif PBP (mecA).
Cefuroximasa de alto nivel.
Cefalosporinasas alto nivel (Amp C)
B-lactamasa espectro ampliado
Carbapenemasas (Metalo/oxa), impermeabilidad.
BLEE+
 Glicopptido:
VanA/VanB
 Aminoglucsidos:
 Macrlidos: MLSB, erm
Taxa Vitek 2
 Gram negativos: 148
Enterobacterias: 72
BGN no enterobacterias: 68
BGN muy patog: 8
 Gram positivos: 122
Enterococcus 11
Staphylococcus 26
Streptococcus 40
 Anaerobio/Coryne 63
 Levaduras: 54
 Neisseria/Haemophilus 27
 Bacillus: 42
EVALUACIN RESULTADOS TEST
 Error muy mayor: (VME) informar susceptible cuando
la cepa es resistente. No mayor a 1.5%

Tasa VME= Total de VME x 100


Total resistentes

 Error mayor: (ME) informar resistente cuando la cepa


es sensible. No mayor a 3%

Tasa ME= Total de ME x 100


Total de susceptibles

Antimicrobial susceptibility testing protocols By Richard Schwalbe, Lynn Steele-Moore, Avery C. Goodwin 2007
Antimicrobial susceptibility testing protocols By Richard Schwalbe, Lynn Steele-Moore, Avery C. Goodwin 2007
TIEMPO FLUJOS DE TRABAJO
JCM Eigner Larone, JCM Junkins
2005 Goessens 2010
Habele-Horn
Enterob/ bnf/ (antes 2005)
staphylo/entero
N cepas 307 280
Prep/inoculo/carga 1.5 min 1,3-1.7 1.8
equipo/post 0,9
proceso (min) 0.8-1.0
Mantencin/mes(m 63 Min (1 hr)
in/hrs)
TTR (ID/AST)
Enterobact. 451 + 76 (7,5)
BNF 679 +178 (11.3)
Staphylo 514 +(8,5)
Enterococ 566+ (9,4)
total 506 +120 (8.4)
Concordancia 97
categrica %
Staphylococus identificacin
N cepas Tiempo Identificacion
hr correcta %
Micrococaceae 117 5.2 97.3 JCM Wallet
2005
Staphylococcus spp 152 9 93 JCM Delmas*
38 ref 63 2008
Staphylococcus coag 86 93 JCM Layer
negativo 27 ref 70.7 2006*
Staphylo 93 8,5 97 JCM Eigner
mrsa/mssa/scoagn 2005
Coc+ 107 4-10 99.1 Diag microbio,
Staphylo/Entero/Stre Nakasone*
pto 2007
Coc + 457 4-6 96,5 Proveedor
Staphylococcus susceptibilidad
N VME ME mE Conc. Conc.
cepas esenc categ Autor
Gen mecA 620 0,2 0.6 94,7 99.7 JCM Junkins
Saur 2009*
vitek2 oxa/ 2.107 0.1 0,2 3.0-0.5 96.7-99.5 Eur JCM Bemer*
cefoxitin KB rep 2010
Detec PNC/ 60 96.8 E Inf Microb clin
Oxa S lug Batista 2009*
Detec vanco 129 12 cep 100 90.7 JCM Swenson*
I Saur 45 90.6 64.8 (leg) 2009
Detec. MLSB 163 93 JCM Lavall
Staph 100 Esp 2010*

Staphylos 93 1.1 0.2 0.4 99.2 JCM Eigner* 2005


Tetrac 9.1 0 0
Cipro 0 1.8 0
Detec Staph 107 Diag microbio,
MLSB 97.8 Nakasone* 2007
Gen mecA 100
Streptococaceae identificacin
N cepas Tiempo Identificacio Autor
hrs n correcta
%
Strept/Entero 132 5.2 90.9 JCM Wallet 2005
ERV 121 4-6.5 94-98 (test JCM Abele Horn
adic) 2006
Entero 51 9 100 (test JCM Eigner* 2005
adic)
Coc+ 61 4-10 99.1 Diag microbio,
Enteroc Nakasone* 2007
Coc + 457 4-6 96,5 Proveedor
Streptococaceae susceptibilidad

N VME ME mE Conc. Conc.


cepa esencial categ Autor
s
ERV 121 JCM Abele Horn
Vanco 5 94.2 2006
Teico 9 95.9
Linezolid 5 97.5
Enteroc 51 0 0 0 100 JCM Eigner
2005*
St pneumoniae identificacin
N cepas Tiempo Identificacion Autor
correcta %
Coc+ 57 4-10 horas 99.1 Diagmicrobio,
Nakasone* 2007
Coc + 162 6 92.6 Eur J clin Microb
Infect dis
Abele Horn 2006
Coc + 457 4-6 96,5 Proveedor
Strepto pneumoniae susceptibilidad
N VME ME mE Conc. Conc.
cepas esencial categ Autor
Coc+ 292 2.4 0 9.6 95 98.8 JCM
Mittman
PNC 0.3 0 5.5 91.8 94.2 2009
eritro 1.7 0 1 94.2 97.3
stx 0 0 2.1 92.4 97.9
CTX 0 0 0 97.9 100
Coc+ 162 >95 Eur J clin
Microb
PNC 4.3 95.7 Infect dis
CTX 0 98.1 Abele
4.9 95.1 Horn
Amoxi 2006
BACILOS GRAM NEGATIVOS
FERMENTADORES IDENTIFICACION
N Tiempo Identifi
cepas (hr) correcta %
Enterobacterias, pasteurellas, 243 5.2 98.7 JCM Wellet 2005
vibrios
Enterobacterias 141 7.2 98 JCM Eigner 2005

Enterobacterias 181 4-10 96.7 Diag microbio,


Klpn/ecoli Nakasone* 2007
Enterobacterias inhabituales 61 90 JCM Stone 2007

Bacilos gram negativos 623 4-6 96.8 Proveedor


BACILOS GRAM NEGATIVOS FERMENTADORES
SUSCEPTIBILIDAD
N VME ME mE Conc. Conc.
cepas esenci categ Autor
al
Enterobacte 141 1.7 0 3.7 95.9 JCM Eigner
2005*
cefep 16.7 0 1.4
Pip 5.0 0 2.8
Cefaz 4.3 0 6.4
-E coli cefep 79 14- 0 suma Cong Chil infect
-Klpne caz 31 0 0 10 (10) Roman 2009
Imip 0 0 3 (3) 98
P/T 0 25 3 (28)
Cefep 0 0 13 (13)
E coli/klpne 174 58 cep Enf Inf Microb
cefep Exp Clin Trevio
corrig 2009
BACILOS GRAM NEGATIVOS FERMENTADORES
SUSCEPTIBILIDAD
N VME ME mE Conc. Conc.
cepas esencial categ Autor
Enterobact 61 80-9-100 68.2-100 JCM Stone
inhabituales 2007*
cfz 1 1 3 cep 85.7 77.3
amp 0 1 6 80.9 68.2
sam 0 4 0 83.3 81.8
pip 0 0 1 88 95
cefep 0 0 0 88 100
ctx 0 0 0 85.7 100
VITEK 2 DETECCIN BLEE
BACILOS GRAM NEGATIVOS NO
FERMENTADORES IDENTIFICACION

N cepas Tiempo Concordancia Autor


Pseudomonas spp, 88 6.7 92.1 JCM Wellet
Acinetobacter spp 2005
otros BNF
Pseudomonas spp, 181 4-10 96.7 Diag microbio,
Acinetobacter spp Nakasone*
otros BNF 2007
Psae/abau 22 11.3 100 JCM Eigner*
2005
Bacilos gram 623 4-6 96.8 Proveedor
negativos
BNF susceptibilidad
N VME ME mE Conc. Conc.
cepas esencial categ Autor
Psae/aba 22 5,7 0 11.6 86.9 JCM Eigner
u 2005*
(suma)
Merop 33.3 0 18.2 (18.2)
Cefta 25 0 22.7(22.7)
Pip 14.3 0 0

Abau 112 BMC Infect dis


Imip 0 0 7.2 Kulah 2009
Psae 16 0 suma 98 Cong Chil infect
Cefep 20 25 (45) Roman 2009
P/T 27 0 (27)
Imip 19 19 (38)
Caz 17 6 (23)
Cipro 0 13 (13)
BNF susceptibilidad
N VME ME mE Conc. Conc.
cepas esencial categ Autor
BNF 228 Enf Infec Microb
Abau 85 clin Gmez *
P/T 0 0 11.8 98.2 Garcs 2009
Tige 0 0 11.8 88.2
Psae
P/T 50 8 0 2 90
Cipro 0 0 14 86
Tige 0 0 24 74
S malto 50
caz 8.8 2,5 5 83.8
Psae JCM Juretschko
aztr 30 1.7 0 28.3 S. 2007 *
Cefep 0 0 13.3
caz 3.3 0 23.3
Imip 6.7 0 25
P/T 21.7 0 -
CONTROL DE CALIDAD VITEK 1

Organismos control de calidad GNS

Utilizar E. coli (ATCC 25922) y Ps. aeruginosa (ATCC 27853).


Utilizar E. coli (ATCC 35218) en tarjetas GNS que contengan
amoxicilina/ cido clavulnico, ampicilina/sulbactam, piperacilina/tazobactam
o ticarcilina/cido clavulnico.
Utilizar E. faecalis (ATCC 29212) en tarjetas GNS que contengan
trimetoprima o trimetoprima/sulfametoxazol.
Utilizar E. coli (ATCC 51446) en tarjetas GNS que contengan el test
ESBL.
CONTROL CALIDAD VITEK 1

Organismos control calidad GPS

Utilizar E. faecalis (ATCC 29212) y S. aureus (ATCC 29213).


Sembrar E. coli (ATCC 35218) en una tarjeta GPS con
amoxicilia/cido clavulnico, ampicilina/sulbactam o ticarcilina/cido
clavulnico.
Sembrar E. faecalis (ATCC 51299) en una tarjeta GPS con un
pocillo de 6g de vancomicina y/o resultados de sinergia de
Gentamicina 500 y de Estreptomicina 2000.
Sembrar S. aureus (ATCC-BAA-1026) en una tarjeta GPS con la
deteccin de cefoxitina.
CONTROL DE CALIDAD vitek 2
 Gram Positivas Identificacin:

Enterococcus casseliflavus ATCC 700327


Kocuria kristinae ATCC BAA-752
Listeria monocytogenes ATCC BAA-751
S. aureus spp. aureus ATCC 29213
S. saprophyticus ATCC BAA-750 8
S. sciuri ATCC 29061
Streptococcus equi spp. zooepidemicus ATCC 43079 *
Streptococcus thermophilus ATCC19258
CONTROL DE CALIDAD VITEK 2
 Gram Negativas Identificacion:

Acinetobacter baumannii ATCC BAA-747


Enterobacter cloacae ATCC 700323
Klebsiella oxytoca ATCC 700324 *
Ochrobactrum anthropi ATCC BAA-749
7
Proteus vulgaris ATCC 6380
Shigella sonnei ATCC 25931
Stenotrophomonas maltophilia ATCC 17666
CONTROL DE CALIDAD VITEK 2
Gram Negativas Sensibilidad ( AST-N087):
 E. coli ATCC 25922 *
 Ps. aeruginosa ATCC 27853 *
 E. coli ATCC 35218 * 4
 K. pneumoniae spp. pneumoniae ATCC 700603 *

Gram Positivas Sensibilidad (AST-P577):


 E. faecalis ATCC 29212 *
 S. aureus ATCC 29213 *
 E. faecalis ATCC 51299 *
 S. aureus ATCC BAA-1026 * 6
 S. aureus ATCC BAA-976 *
 S. aureus ATCC BAA-977*
Hospital Roberto del Rio (Dra Benadof)
Encuesta Vitek 1 Hospital Dipreca (Dra Benadof)
Hospital San Juan de Dios (Dr. Chanqueo)
Aos incorp: 2003-2007
1.- Dificultad id coc+
En SCN no identifica bien, No es costo efectivo en Saur, No sirve en
Strepto B hemolticos. No lo utilizan para Staphylos solo Enteros.
2.- Susc Coc+
CIM vanco muy sensible a preparacin inoculo. No lo utilizan para
Staphylos solo Enteros s/probls
3.-Tiempo demora en informar coc+
6-8 horas
4.-dificultad Id BGN
Shigella y Salmonella solo gnero, mal S. maltophilia y B cepacia.
5.- Susc BGN
BLEE en no E coli
6.- Tiempo demora en informar
6-8 horas
Encuesta Vitek 1

7.- Necesidad de tcnicas alternativas adicionales id


Klebsiella indol, proteus indol, BNF oxidasas, enterococcus pigmento y
movilidad, coc+ catalasa y cefinasa.
8.- Necesidad de tcnicas alternativas adicionales susc
Blee en no coli, vanco por E test en invasivas, test hodge en
carbapenemasas
9.- Estudio de levaduras
lectura e incubacin diferida. En general bien
10.- Anaerobios.
No
-Hospital Militar Dra Porte
Encuesta Vitek 2 -Hospital Pto Montt Dra. Rioseco.
-Fusat TM Alejandra Farias/Patricia Silva
-HCUH: TM P Martnez, M Vidal, A
Aos incorp: 2008-2009 Canales; M Castillo; J Flores
1.- Dificultad id coc+
problemas de crecimiento o caractersticas atpicas no bien identificadas,
bajo porcentaje de discriminacin en Strepto viridans.
2.- Susc Coc+
Discordancia Nitrof en Enterococcus, Falsas R en SCOAN v/s E test,
discordancia nitrof y STX en Staphylo , Enterococcus Vanco I por R v/s E
test, si no entrega identificacin no entrega susc.
limitaciones de tarjeta
3.-Tiempo demora en informar coc+
4,5-11 hrs
4.-dificultad Id BGN
enterobacter como Klebsiella, Psae no identificaca, no discrimina Ps ptida
de fluorescens, no se usa en pac con FQ,
Encuesta Vitek 2
5.- Susc BGN
P/T enterobacter v/s dif en agar, Tigeciclina v/s E test, Klpne mucosas no
determina Blee, discordancia imip v/s E test en abau, carbapenmicos con
Abau y Proteus, corige los carbapenmicos cuando erta es R.
limitaciones de la tarjeta.
6.- Tiempo demora en informar
4,8 -10 horas
7.- Necesidad de tcnicas alternativas adicionales id
indol proteus, gelatina en pseudo putida y flouresc,
8.- Necesidad de tcnicas alternativas adicionales susc
cefinasa coc+, blee en proteus mirabilis, ATB no en tarjeta, E test para
strepto viridans y pneumo, levofloxacino en S maltophilia.
9.- Estudio de levaduras
necesidad de dos traspasos sucesivos para obtener buenos resultados
10.- Anaerobios.
No
CONCLUSIONES EQUIPOS AUTOMATIZADOS
IDENTIFICACIN Y SUSCEPTIBILIDAD
 Identificacin:
Alto nivel de identificacin de bacterias mas
frecuentemente aisladas en clnica.
 Susceptibilidad:
Errores mayores y muy mayores en general bajos.
Errores con ciertas drogas y bacterias.
Todos presentan limitaciones de ATB.
No se puede reemplazar totalmente la microbiologa
tradicional.
Resultados siempre analizar por profesionales competentes
en el rea de la microbiologa.
Grupos de usuarios de los sistemas deberan solicitar
incorporacin de paneles AST con ATB de acuerdo a
realidad nacional.
CONCLUSION II
 La decisin de cual equipo utilizar depende de:
Tamao equipo.
Costo (reactivos/adecuaciones/hrs extraord).
Facilidad de uso.
Evaluacin de cuales tcnicas se realizarn en
forma manual de acuerdo a la microbiologa local
(ID/AST).
Conocer las limitaciones del equipo.
Control de Calidad.
Facilidad manejo software
Post venta.
Apoyo tcnico del proveedor.
RECORDAR

El grado de impacto que pueda tener la


automatizacin en el laboratorio de
microbiologa depender de la capacidad del
staff mdico de modificar en forma
oportuna las conductas al lado del paciente.
No olvidar que la automatizacin no
reemplaza la experiencia del personal del
laboratorio de microbiologa (OJO del
microbilogo.
Muchas gracias
Bibliografa cocaceas positivas
1. Nakaone I., Kinjo Thoru, Nobuhisa Y., Laboratory based evaluation of teh colorimetric VITEK-2
Compact system for species identification and of the Advanced Expert System for detection of
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