RESUMEN

En el proceso de cultivo y aislamiento de bacterias se llevo a cabo el cultivo de

diversos microorganismos para su posterior observacin y control de
crecimiento. Este proceso se realiz en agar sangre (por el mtodo francs), y
en los agares nutritivo, EMB y MS (mediante el mtodo clsico). Seguidamente
se inocul un agar inclinado mediante el trazo de una estra en su superficie
inclinada. Finalmente, para la inoculacin en caldo nutritivo se tom una
muestra del microorganismo de inters y se agit dentro del medio lquido.

Todos estos cultivos fueron incubados a 37C por 24 y 48 horas, momentos en

los cuales se llev a cabo las observaciones.

Para el desarrollo de la prctica de metabolismo bacteriano, las muestras 3 y 7

fueron inoculadas en todos los agares (menos el agar almidn) y caldos
nutritivos, para luego ser identificadas. Adicionalmente, en el agar almidn se
utiliz un asa para inocular una gota de las tres cepas identificadas y
comprobar si podran desdoblar este compuesto.

Finalmente se realizo la prueba de la catalasa agregando una gota de cultivo

de todas las cepas y se adicion una gota de perxido. Dependiendo del
desprendimiento de gas (evidenciado en la formacin de burbujas) la prueba
era positiva o negativa.

Segn los resultados obtenidos se puede inferir que el crecimiento de bacterias

depende de las caractersticas en las que se desarrolla el medio, estas pueden
determinar el metabolismo, el tipo de bacteria y forma de sobrevivir
dependiendo del medio. En los resultados de el metabolismo bacteriano se
reconocen el tipo de reacciones bioqumicas que presenta la bacteria y as
conocer ms a fondo las caractersticas de esta adems de la identificacin de
un tipo especfico de bacteria de acuerdo al metabolismo que presenta.

INTRODUCCIN.

El crecimiento de los microorganismos no se puede estudiar individualmente

debido a su tamao tan pequeo, por lo que es necesario recurrir a medios
nutritivos artificiales, donde se puedan desarrollar rpidamente y producir
grandes poblaciones. En estas condiciones se pueden manipular y efectuar las
investigaciones deseadas.

Muchas especies bacterianas son tan parecidas morfolgicamente que es

imposible diferenciarlas solo con el uso del microscopio; en este caso, para
identificar cada tipo de bacteria, se estudian sus caractersticas bioqumicas
sembrndolas en medios de cultivo especiales. As, algunos medios contienen
un producto que inhibe el crecimiento de la mayora de las especies
Los materiales nutritivos donde se desarrollan y multiplican los
microorganismos contienen los nutrientes necesarios para su crecimiento, y se
denominan medios de cultivo, cuyos componentes son muy variados. La
eleccin del medio se basa en el propsito del estudio.

Otro mtodo para identificacin de microorganismos es por medio del

metabolismo bacteriano en donde las clulas de los microorganismos al igual
que las de todos los seres vivos, por medio de su metabolismo incorporan y
transforman los diversos compuestos obtenidos del medio ambiente, en
compuestos requeridos para vivir, para su crecimiento y para su reproduccin.
En estas transformaciones participan diferentes enzimas que catalizan
diferentes reacciones para degradar o sintetizas nuevos compuestos.

Asimismo, cada grupo de microorganismos muestran la capacidad enzimtica

diferente para transformar los compuestos, regida por su constitucin gentica
y por factores ambientales. Pueden poseer una bacteria reducida de enzimas
(actuando pocos sustratos) o pueden presentar amplia variedad de sistemas
enzimticos (actuando en gran diversidad de sustratos).

Segn estas descripciones la identificacin del microorganismo y como acta

de acuerdo a su bioqumica es ms fcil y segura generando as resultados
confiables para realizar investigaciones sobre el microorganismo que se
estudia.

OBJETIVOS

Identificar las diferentes caractersticas y composicin en varios mtodos

utilizados para el crecimiento de una gran variedad de bacterias,
teniendo en cuenta ciertas pruebas bioqumicas del medio en donde van
a crecer
.
Reconocer la manera en que influye la composicin del medio de cultivo
utilizado para el crecimiento de las bacterias, y como esta ayuda a la
obtencin de energa de la bacteria por medio de diferentes reacciones
bioqumicas.

Determinar como funciona un medio de cultivo utilizando los mtodos

mas conocidos como referencia para poder reconocer cierto tipo de
funciones nicas de cierto tipo de bacterias.
IDENTIFICACION DE METABOLISMO BACTERIANO

MATERIALES.

Cultivo de muestra Cultivo de E. coli.

desconocida No. 3 Cultivo de S. ureus.
Cultivo de muestra Cultivo de B. cereus.
desconocida No. 7
 Agar de kligler Agar blando
Agar de citrato de Simmons Caldo de Urea
Agar SIM Perxido de hidrogeno

Mtodos.

De acuerdo con lo aprendido con la prctica anterior, tenamos la
capacidad para sembrar en cualquier tipo de medio de cultivo. Para ello
primero flameamos la aguja y tomamos con mucho cuidado una
pequea muestra del cultivo a estudiar; con esta sembramos en los
medios de cultivos con la misma aguja y en el mismo momento
siguiendo el orden: kligler-citrato-SIM-AB-Azcar-urea este procedimiento
fue el mismo para las dos muestras desconocidas.
Para la prueba de almidn dividimos el agar solido en cinco secciones y
sembramos tanto las muestras desconocidas como las cepas de las que
tenamos su nombre cada una en la respectiva divisin con el mtodo
clsico.
En la prueba de perxido de hidrogeno usamos un portaobjetos para
cada muestra y agregamos una pocas gotas de perxido y observamos.

OBSERVACIN DE RESULTADOS


Resultados de la serie bioqumica.

MUESTRAS 3

Nombre de la bacteria: Shigella sp.

Kligler I C
U Car
n Mo at
Incli r bo
Cit d H2 tilid al
naci Fo e hid
o ad as
n a .
l a

K + - - - -
A - -

MUESTRA 7

Nombre de la bacteria: salmonella sp.

Kligler I C
U Car
n Mo at
Incli r bo
Cit d H2 tilid al
naci Fo e hid
o ad as
n a .
l a
 K - - + + +
A + +

Prueba de hidrlisis de almidn

Para la prueba de la hidrlisis de almidn se utilizo los siguientes

microorganismos: E-Coli, S-ureus, B-cereus, despus de incubarlos por
24 horas, se agrega una solucin de lugol a la placa de petri, de esta
forma se observa que la colonia de B- cereus, se forma un halo
transparente, indicando la presencia de amilasa por la hidrlisis del
almidn; por otro lado, alrededor de las colonias de las bacterias E-coli y
S- ureus no se formo un halo translucido, lo cual indica que no hay
presencia de amilasa. Por lo anterior concluimos que la prueba fue
positiva para B-cereus y negativa para: E-coli y S-ureus.

Prueba de catalasa

La prueba se realizo con las muestras conocidas y con las desconocidas,

los resultados de las muestras desconocidas se presentan en las tablas
de serie bioqumica.

Para las bacterias conocidas: E- coli, y S-ureus la prueba fue positiva

ya que en esos dos casos se vio presencia de burbujas al adicionar
perxido de hidrogeno a la bacteria (aerobias), B-cereus dio negativa la
prueba por ende es anaerobia.