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Criptococosis

Agente etiolgico identificado: Criptococcus gattii


Clave: 267

Caractersticas:
Cryptococcus gattii es un hongo levaduriforme perteneciente al filo Basidiomycota. Las clulas, de 4-
6 micras (m) de tamao, son esfricas o elipsoides y estn rodeadas de una cpsula polisacardica
gruesa que aumenta de tamao hasta los 25 m. Existen cuatro tipos de C. neoformans en funcin
de los antgenos capsulares (A, B, C, D). C. neoformans var. gattii comprende los serotipos B y C. Se
encuentra en forma de levadura, tanto en el medio ambiente como en el husped durante la
infeccin. Morfologa colonial: Colonias mucoides, limitadas, de color blanco-amarillento.
La forma teleomorfa, perfecta o micelial, se denomina Filobasidiella bacillispora. Esta forma slo ha
podido encontrarse en el laboratorio bajo ciertas condiciones. Las colonias pueden crecer a 37C y
tienen un aspecto mucoso, tpico de las cepas encapsuladas.
Importancia:
Cryptococcus gattii produce Criptococosis: la infeccin producida por C. gattii puede afectar a
personas sanas y, principalmente, a inmunodeprimidos. Los sntomas incluyen dificultad para
respirar, tos, fiebre, fatiga y dolor de cabeza. Tambin puede infectar el sistema nervioso central,
causando meningoencefalitis. Cuando la infeccin es diseminada, se pueden producir criptococomas
(crecimientos fngicos) en los pulmones, la piel, el cerebro u otros rganos.
Prodecimientos para la identificacin:
1. Del problema proporcionado se tom inculo y se sembr en medio SDA en tubo y en placa.
Se incubaron a 37 C por 48 horas. Observndose:
Morfologa colonial observada en la placa de SDA:

Colonias de forma circular, de borde entero, de color blanco-amarillento, lisas, hmedas, con
elevacin convexa y mucoides.

2. Del cultivo se procedi a realizar un examen directo con tinta china, observndose lo
siguiente:

Se pueden observar levaduras


con una pequea cpsula
refringente.

Examen directo con tinta china observado a 40X.


3. Se realiz la prueba de produccin de ureasa, se inoculo el medio lquido de urea con el
problema. Se obtuvo como resultado un positivo, porque se observ como el medio lquido de
un color rojo cambio a un color rosa, debido a que el microorganismo hidroliza la ureasa
liberando amonio alcalinizando el medio.
Prueba de ureasa positiva

4. Despus se procedi a sembrar la cepa problema en un medio Canavanina-glicina-azul de


bromotimol (CGB) observndose un crecimiento y un cambio en el medio a color azul,
indicando que el microorganismo resisti a la L-canavanina y asimil la glicina, liberando al
medio amonio lo que alcaliniza el medio, por lo hay un cambio a color azul. Esta prueba nos
indica que el microorganismo problema es C. gattii, ya que a diferencia de C. neoformans, si
resiste la canavanina y puede crecer en el medio.

Podemos observar el medio


CGB que cambio a color azul,
lo que indica que el
microorganismo resiste a la
canavanina, por lo que se
trata de C. gattii.

5. Posteriormente el microorganismo se sembr en el medio Niger o Agar Staib, que es un medio


selectivo para C. neoformas y C. gattii; junto con un microorganismo control. Se observ un
crecimiento de ambas cepas, y ambas de color caf, lo que indica que pueden transformar el
cido cafenico (que contiene dihidroxi-fenilalanina), lo que les confiere el color caf.
Discusin:
Las pruebas que nos ayudan a identificar al gnero de Cryptococcus es la prueba de ureasa
positivas y la presencia de cpsula en las levaduras. Las pruebas a nivel de especie que nos ayud
en la prctica para identificar al hongo levaduriforme fueron la siembre en agar Niger y la prueba en
agar CGB, siendo la ltima la que nos ayud a identificar la especie rpidamente, ya que de acuerdo
con la literatura slo C. gattii puede resistir a la canavanina y asimilar la glicina para su crecimiento,
lo que le lleva a producir como metabolito secundario amonio que alcaliniza el medio virando el
indicador de pH a color azul. El azul de bromotimol a un pH cido de 6 es de color amarillo, a un pH
de 6.9 es verde y a un pH de 7.6 o mayor es de color azul. Otras pruebas de las cuales nos
podramos apoyar para determinar la especie de Cryptococcus seran pruebas bioqumicas como
auxonograma, termotolerancia y la inoculacin de ratn. En cuanto a la cpsula de la levadura, no se
observaron muy grandes debido a que el microorganismo no fue aislado recientemente ni en un
paciente que presentara un cuadro de criptococosis, de ser as, hubiramos observado cpsulas
ms grandes.

Conclusin:
Es importante llegar a identificar el gnero y especie en esta levadura debido a que es un hongo
oportunista que puede enfermar al ser humano, y es necesario conocer la especie para dar un
tratamiento adecuado. Las pruebas que nos ayudan a diferenciar la especie en el gnero
Cryptococcus es la siembra en medio canavanina-glicina-azul de bromotimol, que nos ayuda a
diferenciar a C. neoformas y C. gattii, debido a que slo C. gattii puede resistir a la canavanina. La
prueba de en el medio Niger es tambin de ayuda para identificar las especies C. neoformas y C.
gattii.
En la prctica conocimos y realizamos as una prueba de API, para conocer el manejo y as como la
lectura de la misma, ya que estas son importantes para ayudarnos a identificar a un agente
etiolgico.

Bibliografa:
http://www.insht.es/RiesgosBiologicos/Contenidos/Fichas%20de%20agentes
%20biologicos/Fichas/Hongos/Ficha%20Cryptococcus%20neoformans%20var%20gattii.pdf
http://sisbib.unmsm.edu.pe/bvrevistas/dermatologia/v20_n1/pdf/a09v20n1.pdf
INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLGICAS

LABORATORIO DE MICOLOGA MDICA


REPORTE DE PRCTICA
Criptococosis

EQUIPO: 6
LAB. 1

INTEGRANTES:
VILA LAGUNA NELLY AIDEE
PREZ SANDOVAL LESLI JAZMN
GRUPO: 3QM1

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