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PRESENTADO POR:
NOMBRE DEL
GRUPO NOMBRE DEL CORREO DEL TUTOR
NOMBRE CODIGO DIRECTOR DEL
COLABORATIVO TUTOR VIRTUAL VIRTUAL
CURSO
Liliana
Carolina.jaim@unad.e
Diana Garca
Orlando Hernndez Arenas 358010_18 CAROLINA JAIME du.co
Vargas
PRESENTADO A:
ENTREGA DE INFORME:
BUCARAMANGA
NFORME LABORATORIO 1 Y 2 - COMPONENTE PRCTICO
1. OBJETIVOS
2. MARCO TEORICO
BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO
Los laboratorios de microbiologa estn regidos por normas de seguridad e higiene que deben
cumplirse a cabalidad para garantizar la proteccin contra infecciones de los estudiantes u otro
personal que labora en estas instalaciones, as como garantizar la calidad de las tcnicas y la
confiabilidad de los resultados.
METODOS DE SIEMBRA
Siembra en Estra Compuesta: Con ste procedimiento se puede conseguir una buena
separacin de las colonias y aislarlas fcilmente. Par ello Se flamea el asa redonda, se toma
la muestra del material a estudiar (agua residual), se coge parte de la muestra para colocarla en
el tubo de ensayo que contiene el agua peptonada Homogenizar, luego se Colca el inoculo en
uno de los extremos de la caja de Petri con el medio de cultivo indicado. Extienda el cultivo
haciendo 4 estras paralelas, sin romper el agar y Terminado la siembra, marcar las cajas en el
borde de la base de la caja y envolverla en papel vinipel para llevarlas a incubar a 37 C.
TCNICAS DE TINCIN
La tincin es una tcnica en la que se utilizan diferentes colorantes, que son captados por las
estructuras de las muestras biolgicas que se observan al microscopio, siendo cada estructura
a fin a un tipo determinado de colorante, por lo que se pigmentan de diferente color y se pueden
diferenciar e identificar.
Tincin simple: Un solo colorante. Se basan en el hecho de que las clulas tienen una
composicin qumica diferente a la de su entorno, de modo que ambos se comportan de forma
diferente frente a un colorante.
Tincin de Gram: Fue desarrollada empricamente por Christian Gram en 1884, a pesar del
tiempo transcurrido la tincin apenas se ha modificado y es unos de los primeros pasos que se
realiza para cualquier identificacin bacteriana. Ayuda a determinar rpidamente las
caractersticas morfolgicas, por lo que es til en la indicacin de los antibiticos. Esta tincin
tambin permite establecer si el material enviado al laboratorio para su cultivo posee la calidad
adecuada.
Medios Selectivos: Son aqullos que poseen uno o ms componentes aadidos, los cuales
inhibirn o prevendrn el crecimiento de ciertos tipos de especies de bacterias y/o
promovern el crecimiento de las especies deseadas. Uno puede ajustar las condiciones
fsicas de un medio de cultivo tales como el pH, la temperatura, para hacerlo selectivo para
los organismos de inters.
Medios Diferenciales: Permiten al investigador distinguir entre diferentes tipos de bacterias
con base en alguna caracterstica observable en su patrn de crecimiento en el medio, ya
sea por produccin de algn pigmento o por cambios de color en el medio debido a
indicadores de pH, o por halos de degradacin de algn componente en el medio de cultivo.
Medios de Enriquecimiento: Contienen algn componente que permite el crecimiento de
cierto tipo especfico de bacteria, pero no contienen sustancias inhibidoras.
Medios Enriquecidos: Se emplean para cultivar microorganismos que requieren un gran
nmero de factores de crecimiento. Generalmente contienen extractos biolgicos poco
usuales como sangre, suero en polvo, extracto de cerebro de res, yema de huevo, etc.El
procedimiento se hace mediante una siembra de la muestra en caja de Petri por medio del
mtodo ecomtrico y determinar el ndice de crecimiento absoluto (ICA).
Los factores fsicos y qumicos tienen un efecto notable sobre la vida de los microorganismos
en su medio ambiente natural. Algunos estimulan su desarrollo en tanto que otros lo retardan o
lo impiden. El conocimiento del efecto de esos parmetros medio ambientales no solo permiti
estudiar los microorganismos bajo condiciones controladas de laboratorio para favorecer su
crecimiento sino que posibilit aprender la forma de controlarlos.
Cyanobacteria: Es el nombre de un filo del reino Bacteria (nico del dominio del mismo nombre)
que comprende a las cianobacterias y, en algn sentido, a sus descendientes por
endosimbiosis, los plastos. Las cianobacterias se caracterizan por ser los nicos procariotas
que llevan a cabo fotosntesis oxignica, por ello tambin se les denomina oxyphotobacteria.El
procedimiento se hace Colocando en el centro de la lmina portaobjeto una gota del agua que
trajo como muestra y colocar luego una laminilla encima de esta preparacin y esperar 2
minutos. Finalizado este tiempo montar al microscopio y observar en 10X, 40X y 100X con el fin
de ver las caractersticas de la bacteria mejor.
Microorganismo aerobio mesfilo son todas las bacterias, levaduras y hongos capaces
dedesarrollarse en condiciones de aerobiosis a 30C. Es un parmetro que sirve para estimar
laflora total, pero sin especificar tipos de microorganismos. Es uno de los indicadores ms
tilesdel estado microbiolgico de un alimento, agua, suelo entre otros. Tiene un valor
limitadocomo indicador de la presencia de patgenos o sus toxinas. Altos recuentos
microbianos seconsideran poco aconsejables para la mayor parte de los alimentos.
PRUEBAS DE ANTAGONISMO
La composicin de la micro flora y de la micro fauna de un ecosistema est regulada por las
interacciones de los microorganismos de una comunidad entre s y de los mismos con el medio
no bitico de lo cual surge un equilibrio dinmico. Si dos o ms especies que coexisten en un
lugar no se afectan mutuamente la relacin es neutralismo. Cuando algo de esto se modifica,
las especies comienzan a interactuar y las relaciones que se presentan pueden ser:
comensalismo, protocooperacin, simbiosis, amensalismo, predacin, parasitismo. La
evaluacin de estas relaciones in vitro permiten aislar y seleccionar microorganismos con
capacidad de Biocontroladores. En las pruebas de antagonismo se trabaja con la tcnica por
enfriamiento, el Mtodo de Igarashi y tcnica de estras.
En la tcnica por enfriamiento se toma la caja de Petri con el medio de cultivo nutritivo y se
divide en la parte trasera por la mitad con un marcador de vidrio y se seala la mitad de cada
una de las mitades previamente divididas. Se marca cual microorganismo va a inocular en cada
lado y finalmente por puncin sembrar los microorganismos. Incubar a 37C si uso bacterias o a
25C si uso hongos.
En mtodo de Igarashi Se toma una caja de Petri y se divide en 4/4 y sembrar por siembra
masiva con un asa redonda, en un espacio de tres (3) centmetros un microorganismo
seleccionado y finalmente siembre en el centro por puncin.
La tcnica por estras su proceso se hace en caja de Petri en la cual previamente usted
sembr con una estra en el centro una bacteria, sembrar a 0.5 cm, por medio de estras, cuatro
bacterias a evaluar. En el revs de la caja con marcador de vidrio seale que microorganismos
sembr. Incubar a 37C.
3. METODOLOGA
3.1 INSTRUMENTOS
Asa redonda
Cajas de Petri
Mechero
Incubadora
Vinipel
Marcador de vidrio
Portaobjetos
Cubreobjetos
Tubos de ensayo
Asa redonda o curva
Asa recta
Pipetas estriles de 1 y 2 ml
Estufa
Vaso de Precipitado de 500 ml
Contador de colonias
Microscopio
3.2 REACTIVOS
El medio de cultivo empelado en esta prctica es: Medios Selectivos: favorecen el crecimiento
de un tipo de microorganismo en particular, con la diferencia de ser slidos, diseados para el
aislamiento de microorganismos especficos.
Durante la prctica se emple la tcnicas de siembra por estra, para la elaboracin de esta
tcnica de siembra se us agar nutritivo que estaba dentro de una caja Petri previamente
esterilizada; este tipo de siembra se utiliza para un aislamiento primario.
Los medios slidos en placas Petri, ocupan una superficie lo suficientemente grande como para
poder visualizar perfectamente las colonias microbianas. El sistema en placa es uno de los
medios que permite mejor el aislamiento de microorganismos que puedan crecer en l.
Por cuestiones relacionadas con el clima, cuando regresamos al laboratorio para continuar con
las practicas, los cultivos no crecieron, por tal motivo la tutora de practica consigui un Ecoli el
cual fue sembrado por Estras y unos hongos tricoderma (ambiental) para poder continuar con
el desarrollo de la actividad.
5.2 RESULTADO PRACTICA No 2: TCNICAS DE TINCIN(Coloracin Simple)
Falta.
5.3 RESULTADO PRACTICA No 3: OBSERVACIN MICROSCPICA DE HONGOS
Microscpio 10X,
Microscpio 40X.
Microscpio 100X.
6. CONCLUSIONES
FALTA..
7. BIBLIOGRAFA
NORMAS DE LA AMERICAN PSYCHOLOGICAL ASSOCIATION (APA) PARA LA
CONFECCIN DE REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS: Biblioteca Central Luis Demetrio
Tinoco, http://www.cibem.org/paginas/img/apa6.pdf.