AO DEL BUEN SERVICIO DEL

CIUDADANO

UNIVERSIDAD NACIONAL
SAN LUIS GONZAGA DE
FACULTAD DE FARMACIA Y
ICA
BIOQUMICA

TEMA: PROTEOLISIS INTRACELULAR

CURSO: BIOQUMICA
DOCENTE: Dr
INTEGRANTES:
ALARCN DAZ KATHERYN
BALDEN CHUQUIHUA NATALI
MORN FERREYRA MARIA ESTHER
HERNANDEZ RAMIREZ ESTEFANY
MONTES TABOADA LISBETH
CALDERON YUPANQUI VERONICA
QUEVEDO FLORES MONICA
Dedicatoria

En primer lugar a Dios por habernos permitido llegar

hasta este punto y habernos dado salud, por ser el
manantial de vida y darnos lo necesario para seguir
adelante da a da para lograr nuestros objetivos ,
adems de su infinita bondad y amor ..
Y a nuestros familiares por habernos apoyado en todo
momento, por sus consejos, sus valores, por la
motivacin constante que nos hacen para ser unas
personas de bien, pero ms que nada por su amor y
apoyo incondicional.
AGRADECIMIENTO

Queremos agradecer en primer lugar a Dios

por darnos salud, por brindarnos sabidura y
as mismo agradecemos a nuestros padres ya
que son las personas que siempre nos estn

INTRODUCCIN
apoyando para que seamos personas de bien.
La protelisis juega un papel importante en muchos
procesos biolgicos; tales como la digestin, el recambio
de protenas y defensa de patgenos.
A la vez es la degradacin de protenas ya sea mediante
enzimas especificas llamadas Peptidasas, o Por medio de
digestin intracelular; si se degrada durante la digestin
actan peptidasas como tripsina, quimotripsina,
carboxipeptidasas y elastasas.
El sist. Ubiquitina es una pequea protena reguladora que
ha sido encontrado en la mayora de organismos de origen
eucariota, pueda asociarse a las protenas y marcarlas para
su destruccin. El marcaje de la ubiquitina puede dirige a
las protenas al proteosoma.
 PROTELISIS
INTRACELULAR
La protelisis es la degradacin de protenas ya sea
mediante enzimas especficas, llamadas peptidasas, o por
medio de digestin intracelular.

1.- PROCESO DE DEGRADACIN

Si se degradan durante la digestin, participan peptidasas
especficas como la tripsina, la quimotripsina, las
carboxipeptidasas y la elastasa.
La degradacin intracelular la lleva a cabo un complejo
multienzimtico denominado proteosoma, que acta en el
citosol. Se trata de una estructura cilndrica formada por
proteasas y dos extremos de complejos proteicos que
alimentan la cmara interna del cilindro al reconocer las
protenas. Las protenas que van a ser degradadas han sido
marcadas anteriormente con una pequea protena llamada
ubicuitina.

La protelisis tiene varias funciones para

la clula, entre ellas:
Eliminacin de metionina en el extremo N-terminal
tras la traduccin.
Eliminacin de las secuencias seal de pptidos
despus de su transporte a travs de la membrana.
Separacin de protenas virales que se traducen desde
un ARN mensajero monocistrnico.
Digestin de protenas de los alimentos como fuente
de aminocidos.
Conversin de protenas inactivas (proenzimas,
zimgenos, pre-hormonas) en sus formas funcionales
finales.
Degradacin de ciclinas y otras protenas requeridas
para la progresin en el ciclo celular.
La protelisis puede realizarse tambin en el interior de los
orgnulos llamados lisosomas, mediante unas proteasas
especficas llamadas catepsinas, de los que hay unos 50
tipos diferentes. El pH ptimo para su actuacin es de 5, y
se consigue gracias a una bomba de protones. La
degradacin lisosomal recicla los aminocidos de las
protenas que no son anmalas, por ejemplo, las que se
encuentran en la membrana, o se han incorporado a la
clula por endocitosis. No elimina protenas "incorrectas".
Son muy importantes en procesos como la regresin del
tero tras el parto, que en 9 das pasa de pesar 2 kg a 50 g,
o en la eliminacin de las membranas interdigitales durante
el desarrollo fetal.
2.- EFECTO PROTEOLTICO DE LOS
VENENOS
Algunos venenos, tales como aquellos producidos por
ciertas especies de serpientes, pueden tambin producir
protelisis. Estos venenos son de hecho, fluidos digestivos
que han evolucionado de modo que comienzan a actuar en
el exterior del cuerpo del animal. Los venenos proteolticos
pueden causar un amplio espectro de efectos txicos, tales
como:
citotxicos (muerte celular)
hemotxicos (afectacin sangunea)
miotxicos (afectacin muscular)
hemorrgicos (sangrado)

En la clula eucariota existen dos vas importantes de

degradacin de protenas: la ruta vacuolar y la ruta
citoplsmica. En la ruta vacuolar participan los lisosomas,
los endosomas y el retculo. La ruta citoplsmica est
mediada por el sistema ubiquitina-proteasoma. La ruta
citoplsmica es fundamental en la regulacin de protenas
de vida media corta.

3.- LA UBIQUITINA
es una protena de tamao modesto (peso molecular de 8,5
quilodaltons), cuya funcin es marcar las protenas
celulares para su destruccin Es, pues, la mscara de la
muerte bioqumica. La denominacin de ubiquitina hace
referencia a su ubicuidad al estar presente en todas las
estirpes celulares.

DESDE UN PUNTO DE
VISTA FILOGENTICO
La ubiquitina se ha conservado a
lo largo de la evolucin, de tal
suerte que entre la ubiquitina de
las levaduras y la humana solo cambian 3 de los 76
aminocidos que la constituyen.
DESDE UN PUNTO DE BIOQUMICO
El aminocido glicina del extremo carboxilo de la ubiquitina
se une covalentemente con los grupos -amino de varias
lisinas de la protena destinada a ser degradada. La energa
para la formacin de estos enlaces isopeptdicos procede
del hidrlisis del ATP, la principal moneda del metabolismo.
Se denominan enlaces isopeptdicos para distinguirlos de
los enlaces peptdicos entre aminocidos contiguos.

En la conjugacin de la ubiquitina con cada protena

intervienen tres enzimas:
E1: enzima activadora de la ubiquitina
E2: cataliza la conjugacin de la ubiquitina
E3: ligasa que cataliza la unin ubiquitina-protena
En una primera etapa
El grupo carboxilo terminal de la ubiquitina se une a un
grupo sulfhidrilo (-SH) de una cistena clave del enzima E1,
mediante un enlace tioster La formacin de este enlace
consume dos enlaces fosfato de una molcula de ATP (ATP
AMP).
En una segunda etapa
La ubiquitina as activada se engarza a una cistena clave
del enzima E2 (conjugacin de la ubiquitina).
En la tercera etapa
La enzima E3 cataliza la transferencia de la ubiquitina
desde E2 a un grupo -amino de la lisina de la protena
diana.
Si solo se une una molcula de ubiquitina a la protena, la
seal para su degradacin es dbil. Es preciso, pues, la
unin a la protena de varias molculas de ubiquitina, esto
es, la ubiquitinizacin de la protena. De hecho, lo
habitual es la unin de cuatro ubiquitinas para que la
degradacin de la protena sea realmente efectiva. La unin
de varias molculas de ubiquitina modifica la conformacin
del complejo adecundolo para que tenga lugar la
degradacin proteica; y, adems, permite que la escisin de
alguna ubiquitina no d lugar a la prdida de la seal de
degradacin.
La mayora de las clulas eucariotas tienen un nico tipo de
enzimas E1, pero muchos enzimas E2 y E3 distintos. La
protena E3 proporciona la mayor parte de la especificidad
del sustrato; pero las mltiples combinaciones E2E3
permiten afinar ms la discriminacin del sustrato.

4.- QU DETERMINA QUE UNA

PROTENA VAYA A SER UBIQUITINADA?

La vida media de cualquier protena celular depende de

cul sea su aminocido en el extremo N-terminal de la
protena.Las enzimas E3 actan como lectoras de los
aminocidos N-terminales de las protenas.

Existen otras seales pensadas para identificar las

protenas destinadas a la degradacin:
1. Las denominadas cajas de destruccin de ciclina:
secuencias de aminocidos que marcan las protenas para
su destruccin.
2. Las secuencias PETS (protenas ricas en los
aminocidos prolina, cido glutmico, serina y treonina).
La importancia de la destruccin programada de las
protenas celulares queda de manifiesto en algunas
enfermedades. Un ejemplo: el virus del papiloma humano
(HPV de su acrnimo en ingls, Human Papilloma Virus)
tiene un gen que codifica una protena que activa un
enzima E3 especfico. Esta protena da lugar a la
ubiquitinizacin de la protena p53 que regula la
reparacin del ADN. La protena p53 se etiqueta para su
destruccin, facilitando los errores en la reparacin del
ADN, aumentando la probabilidad de transformacin
tumoral de las clulas al perderse uno de los principales
mecanismos de reparacin de las mutaciones del ADN. De
hecho, aproximadamente el 90% de los carcinomas
cervicales son consecuencia tarda (al cabo de varias
dcadas) de la infeccin temprana por el virus del papiloma
humano. De ah la importancia de la vacunacin de nias
(y nios?) antes de su primera relacin sexual.
EL PROTEASOMA DIRIGE LAS PROTENA ETIQUETADAS
CON UBIQUITINA
La ubiquitina es la etiqueta que seala las protenas que
han de experimentar protelisis. La protelisis la lleva a
cabo el proteosoma (o proteasoma), un complejo proteico
de 26S. El proteosoma es una compleja proteasa integrada
por muchas subunidades proteicas. La energa para su
actividad cataltica proviene del hidrlisis del ATP. La
ubiquitina se recicla una vez realizada la tarea de
etiquetado de la protena a hidrolizar. El complejo proteico
(proteosoma) est formado dos componentes principales:
un conjunto de dos subunidades multiproteicas con funcin
cataltica y una subunidad, tambin multiproteica, con
funcin reguladora, con velocidades de sedimentacin de
20S y 19S respectivamente.
El complejo 20S est constituido por dos copias de 14
subunidades cada una, con un peso molecular global de
700quilodaltons. Las 14 subunidades son homlogas,
adoptando la misma estructura en conjunto. Las 28
subunidades del complejo 20S estn formadas por cuatro
anillos de 7 subunidades cada uno. La estructura espacial
adopta el aspecto de barril.
Los componentes de los anillos exteriores del barril se
denominan ; y los de los anillos internos del barril se
denominan . Los centros activos de la proteasa se sitan
en los anillos del interior del barril que contienen los
aminocidos treonina o serina en el extremo N-terminal. Los
grupos hidroxilo (-OH) de treonina o serina se convierten en
nucleoflicos (-O-) con la ayuda de los grupos amino
convertidos en amonio (-NH3+). Los grupos nucleoflicos
reaccionan con los grupos carbonilo de los enlaces
peptdicos formando derivados acilos de las enzimas (acil-
enzima). Este proceso permite secuestrar los centros
activos proteolticos de los sustratos potenciales
difundiendo en el interior del barril, como se de una planta
carnvora se tratase. Se produce la digestin de la protena
hasta la formacin de pptidos de entre 7 y 9 aminocidos.
El proteosoma 20S es como un barril sellado, de tal suerte
que su acceso est supervisado por un complejo regulador
19S, formado por 20 subunidades proteicas, con un peso
molecular global de 700quilodaltons.
El complejo regulador (19S) se une a ambos lados del
complejo catalizador para formar un complejo 26S, esto es
el proteosoma. Son las subunidades que forman el complejo
19S las que se unen a la protena etiquetadora ubiquitina.
Las subunidades clave del complejo 19S son seis enzimas
con actividad ATP-asa. La hidrlisis del ATP aporta la energa
precisa para la ubiquitinizacin; la unin de varias
ubiquitinas a las subunidades del complejo 19S
desencadena cambios en la conformacin del complejo 20S
que hace posible que la protena que ha de degradarse
entre en el barril.

El proteosoma degrada las protenas hasta el nivel de

pequeos pptidos de 7 a 9 aminocidos; stos son
hidrolizados hasta aminocidos por proteasas citoslicas
inespecficas.
5.- REGULACIN DE LA FUNCIN
BIOLGICA Y LA DEGRADACIN
PROTEICA. -
Los siguientes procesos biolgicos son regulados por la
degradacin de protenas:
Transcripcin gnica
Progresin del ciclo celular
Organognesis
Ritmos circadianos
Respuesta inflamatoria
Supresin tumoral
Metabolismo del colesterol
Procesamiento de antgenos

EL PROTEOSOMA
es un complejo proteico de 2500 KDa. Est estructurado en
tres subunidades:
Una subunidad 20S que es la partcula ncleo de 670
KDa, con actividad cataltica.
Dos subunidades 19S con actividad reguladora
La subunidad 20S tiene forma de barril y es un complejo de
cuatro anillos apilados. Cada anillo est compuesto de siete
protenas. Estos anillos son idnticos dos a dos, los dos
externos y los dos centrales, a los anillos externos se les
llama anillos alfa y a los centrales anillos beta. El sitio
activo encargado de romper el enlace peptdico se
encuentra en el interior de la cavidad de la subunidad 20S
entre los dos anillos beta. Los anillos alfa forman un
pequeo canal que permanece cerrado, las subunidades
reguladoras 19S permiten la apertura de este canal y la
entrada del sustrato al proteasoma.
Las subunidades reguladoras 19S son un complejo de cerca
de 1000 kDa formado por, al menos, 19 protenas. Las
subunidades 19S se pueden unir a los dos extremos de la
subunidad 20S formando el proteasoma 26S. Cada
subunidad 19S se puede dividir en dos subunidades: la base
y la tapa.
La base se localiza prxima a la subunidad 20S y contiene
seis ATPasas tipo AAA y cuatro subunidades no ATPasa
llamadas Rpn1, Rpn2, Rpn10 y Rpn13. Se piensa que las
seis ATPasas forman un anillo con capacidad de linealizar
protenas permitiendo su paso por el estrecho canal
formado por la subunidad 20S. Recientes estudios indican
que aunque exista una gran similitud entre estas ATPasas
sus funciones no son equivalentes. Algunas ATPasas abren
el poro, otras reconocen a la ubiquitina y otras se unen a
receptores de ubiquitina que tienen un dominio especfico.
La tapa est compuesta por ocho componentes. Seis de
ellos tienen un dominio PCI (Proteasome, CSN, eIF3), de
funcin desconocida, y dos tienen el dominio MPN
(Mpr1/Pad1 N-terminal) con actividad metaloproteasa que
elimina la ubiquitina del sustrato.
El proteasoma puede ser regulado mediante distintas vas.
Rpn4 es una protena capaz de estimular la induccin
concertada de los genes que codifican el proteasoma.
Segn las necesidades celulares se puede inducir la
expresin de todos los genes o solamente la induccin de
algunos de los genes que codifican el proteasoma.
El gen que codifica Rnp4 est sujeto a una compleja
regulacin en la que participan varios factores de
transcripcin para poder responder a los distintos estmulos
y tipos de estrs celular que puedan requerir un aumento
en los niveles de proteasoma. Se ha comprobado que las
regiones cercanas al promotor del gen Rnp4 son
reconocidas por factores de choque trmico (Hsfl), por dos
factores de transcripcin asociados a resistencia a frmacos
(Pdr1 y Pdr3) y por el factor de transcripcin Yalp
relacionado con la respuesta al estrs oxidativo, entre otros.
La protena Rnp4 tambin acta sobre los promotores de
ms de 20 genes relacionados con diversas funciones tales
como la ubiquitinacin, el metabolismo del ARN, la funcin
vacuolar y la utilizacin de glucosa. La propia protena Rpn4
tiene una vida media muy corta siendo su principal va de
degradacin independiente de ubiquitina, aunque tambin
puede ser degradada va ubiquitina establecindose una
retroalimentacin negativa en el mecanismo de sntesis del
proteasoma.

En la clula tambin existen mecanismos de regulacin de

los proteasomas ya sintetizados. De hecho la clula es
capaz de inducir la formacin de configuraciones
alternativas del proteasoma con propiedades que pueden
ser tiles bajo ciertas condiciones celulares. Por ejemplo, el
interfern gamma induce la sntesis de las protenas LMP2,
LMP7 y MECL1 que formarn parte de las 7 subunidades de
protena que componen cada anillo beta. El proteasoma que
contiene estas protenas en sus anillos beta es el implicado
en el procesamiento de antgeno para su posterior
presentacin va MHC de clase I.

Para que una protena sea reconocida y procesada en el

proteasoma es necesario que se encuentre marcada con
ubiquitina. El proceso de ubiquitinacin de una protena
requiere la participacin de tres tipos de enzimas:

La enzima activadora de ubiquitina E1

La enzima conjugadora de ubiquitina E2
La ubiquitina ligasa E3

Gracias a la accin de estas tres enzimas el grupo carboxilo

de la glicina del extremo carboxilo terminal de la ubiquitina
forma un enlace con el grupo epsilon amino de un residuo
de lisina del sustrato. Hay gran nmero de enzimas
implicadas en ubiquitinacin. Actualmente se cree que la
especificidad de la ubiquitinacin radica en el
reconocimiento de los sustratos por las enzimas de tipo E,
principalmente por la E3 ligasa. Se estima que en el
proteoma humano existen 16 enzimas del tipo E1, 53 del
tipo E2 y 527 del E3. Muchas lneas de investigacin
sugieren que el destino de la protena marcada depender
de la longitud y de la topologa de la cadena de ubiquitinas
que lleve.

6.- EL SISTEMA PROTEASOMA-

UBIQUITINA
es fundamental en el correcto mantenimiento de los niveles
adecuados de las distintas protenas celulares. Fallos en
este sistema pueden contribuir a la aparicin de
enfermedades como el Parkinson, el Alzheimer, la fibrosis
qustica o el mieloma mltiple. Debido a la desestabilizacin
en la concentracin de protenas supresoras de tumores o
de oncoprotenas importantes en la regulacin del ciclo
celular las alteraciones en el proteasoma pueden ocasionar
la transformacin de clulas normales en clulas
cancerosas. En varios estudios se relaciona niveles bajos de
la protena supresora de tumores p27 y una sobreexpresin
de Skp2. Skp2 es un tipo de enzima E3 que reconoce y
ubiquitina a p27. En el desarrollo de muchos tipos de
cnceres se han detectado niveles bajos de p27.

Algunos virus con periodos de infeccin largos tienen

mecanismos para interferir en la actividad del sistema
ubiquitina-proteasoma. Por ejemplo, los citomegalovirus
impiden la presentacin antignica va MHC de clase I
actuando sobre el proteasoma. El citomegalovirus codifica
las protenas US2 y US11 que se pueden unir a molculas
MHC promoviendo su ubiquitinacin y su posterior
degradacin. De este modo el citomegalovirus evita la
presentacin antignica.

Debido a la gran participacin del sistema ubiquitina-

proteasoma en la fisiologa de la clula este sistema supone
una diana teraputica potencial en muchas patologas.
Actualmente muchos frmacos que actan sobre el
proteasoma se encuentran bajo estudio como el
Bortezomib. El Bortezomib inhibe la actividad del
proteasoma al unirse de forma reversible a una treonina del
sitio activo de la subunidad 20S. La interaccin del
Bortezomib con el proteasoma favorece la apoptosis
afectando a un grupo importante de protenas reguladoras
incluyendo p53, NF-kappaB y Bax que es un inhibidor
proapopttico de Bcl-2. Dos ensayos clnicos que se
encuentran en fase 2 han demostrado que el Bortezomib
suministrado solo o combinado con dexametasona, es
eficaz en pacientes que sufren recadas de mieloma
mltiple. Y en un ensayo en fase 3 se comprob que el
Bortezomib era ms eficaz y seguro que la dexametasona.

7.- VA DE LA UBIQUITINA-PROTEOSOMA
Los sistemas intracelulares proteolticos reconocen y
degradan protenas lesionadas o mal plegadas. La va de la
ubiquitina proteosoma se encuentra implicada en el
recambio intracelular de las protenas y juega un papel
importante en la degradacin de protenas reguladoras de
vida corta, implicadas en una serie amplia de procesos
celulares tales como: regulacin del ciclo celular,
modulacin de los receptores de superficie y canales
inicos, procesamiento y presentacin de antgenos y
activacion de factores de transcripcin. Esta va utiliza una
cascada enzimtica, mediante la cual molculas de
ubiquitina se insertan covalentemente a la protena
sustrato. Un paso importante en la cascada proteoltica es
el reconocimiento del sustrato por una de las muchas
ubiquitina ligasas, E3, lo cual conduce a la
poliubiquitinacin o seal de degradacin. La modificacin
por poliubiquitinacin marca a la protena para su
destruccin y la conduce al complejo proteosoma 26S para
su degradacin proteoltica.
 CONCLUSIONES
La protelisis es la degradacin de protenas ya sea mediante
enzimas especficas, llamadas peptidasas, o por medio de
digestin intracelular.

El sistema proteasoma-ubiquitina es fundamental en el

correcto mantenimiento de los niveles adecuados de las
distintas protenas celulares.

La ubiquitina es una protena de tamao modesto (peso

molecular de 8,5 quilodaltons), cuya funcin es marcar las
protenas celulares para su destruccin Es, pues, la mscara
de la muerte bioqumica.
 BIBLIOGRAFA
http://www.encuentros.uma.es/encuentros52/proteolisis.html

http://www3.uah.es/bioquimica/Tejedor/BBM-II_farmacia/T13-
reacciones.pdf

http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/mecanismos
%20degradacion%20proteina2.html

http://www.conicet.gov.ar/ubiquitina-la-importancia-de-las-
pequenas-cosas/