Manual para El Diagnostico de Sifilis PDF

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REDES EN SALUD PBLICA Fecha prxima revisin: 2014/07

Aprobado por: Mara Elena Realpe Coordinadora Grupo Microbiologa
Fecha: 2011/07/14
MANUAL PARA EL DIAGNOSTICO DE SIFILIS
MANUAL PARA EL DIAGNSTICO DE

SFILIS
CODIGO: MNL-R01.001.5030-013
VERSION: 00
INSTITUTO NACIONAL
DE SALUD
REDES EN
SALUD PBLICA
REFERENCIA EN SALUD PBLICA
AUTORES: SADITH TREJOS MONCAYO, BACTERILOGA GRUPO DE

MICROBIOLOGA.
JENNY ZAMBRANO, BACTERILOGA GRUPO DE MICROBIOLOGA.
Aprobado por: Mara Elena Realpe Coordinadora Grupo
Microbiologa
Fecha: 2011/07/14
MANUAL DE PRUEBAS DIAGNSTICAS PARA SFILIS
JULIO DE 2011
TABLA DE CONTENIDO
1. INTRODUCCION 3
2. OBJETIVO 4
3. ALCANCE 4
4. RESPONSABILIDAD 4
5. DEFINICIONES 4
6. CONDICIONES GENERALES 5
7. FUNDAMENTO 5
8. BUENAS PRACTICAS DE LABORATORIO 5
9. EQUIPOS Y MATERIALES 5
9.1 Equipos 6
9.2 Materiales 6
9.3 Reactivo 6
10. CONTENIDO 6
10.1 TAXONOMA DE TREPONEMA PALLIDUM 6
10.1.1Clasificacin Taxonmica 6
10.1.2Factores de virulencia 7
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10.2 EPIDEMIOLOGIA 8
10.3 DIAGNOSTICO 13
10.3.1Pruebas no treponemicas 13
10.3.2Pruebas no treponemicas microscpicas 13
10.3.3Pruebas no treponemicas macroscpicas 18
10.3.4Pruebas treponemicas 21
10.3.5Syphilis TPHA Liquid 23
10.3.6Prueba rpida para determinacin de sfilis en sangre total 26
10.4. TRATAMIENTO. 28
10.4.1 Tratamiento de La sfilis gestacional 28
10.4.2 Tratamiento de La sfilis congnita 29
10.4.3 Tratamiento de sfilis en lactantes y nios mayores 29
10.4.4 Alergias a la penicilina 29
11 DOCUMENTO DE REFERENCIA. 30
12 CONTROL DE REGISTROS. 32
13 CONTROL DE REVISIONES. 32
14 ANEXOS 32
1. INTRODUCCION
La sfilis es una enfermedad de transmisin sexual, infecciosa, crnica, multisistmica, producida por la
bacteria espiroqueta Treponema pallidum, subespecie pallidum. La evolucin clnica de la sfilis se divide
en tres fases. La fase inicial o sfilis primaria se caracteriza por la formacin de una o ms lesiones
cutneas (chancros) en el lugar de entrada de las espiroquetas, este aparece generalmente a los 21 das
del contacto infeccioso. Aunque las bacterias se diseminan a travs del torrente circulatorio poco despus
de la infeccin, el chancro representa el sitio principal de replicacin inicial. El examen histolgico de la
lesin revela la presencia de endarteritis y periarteritis. (Caractersticas de las lesiones sifilticas en todas
las fases) e infiltracin de la lcera por leucocitos polimorfo nucleares y macrfagos. Las espiroquetas
son ingeridas por las clulas fagocticas, pero suelen sobrevivir. En la sfilis secundaria aparecen los
signos clnicos de enfermedad diseminada con importantes lesiones cutneas distribuidas por toda la
superficie corporal, estas manifestaciones clnicas aparecen generalmente 6 a 12 semanas despus del
periodo infectivo. Pueden ocurrir remisiones espontneas despus de las fases primaria y secundaria o
bien la enfermedad puede progresar a la ltima fase, la sfilis tarda en la que se pueden afectar
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prcticamente todos los tejidos. El enfermo queda asintomtico y la enfermedad pasa a su estado latente,
sfilis latente es la fase asintomtica de la sfilis, cuando se resuelven las manifestaciones de la sfilis
primaria y secundaria, aunque no implica ausencia de progresin de la enfermedad.
La sfilis latente precoz se extiende hasta 1 o 2 aos despus del contacto infectante, puede ser
asintomtica durante todo su curso o ste verse interrumpido por los sntomas de recurrencia de la sfilis
secundaria.
Despus de 1 o 2 aos se habla de sfilis latente tarda, la que es asintomtica, todos los pacientes con
sfilis latente tarda deben ser evaluados clnicamente buscando aortitis, neurosfilis, gomas e iritis.
Despus de un tiempo variable que se mide en aos, 33% de los no tratados pueden desarrollar
manifestaciones clnicas de sfilis terciaria, ella comprende: sfilis terciaria benigna (gomas), sfilis
cardiovascular y neurosfilis.
De los no tratados se estima que entre 8 y 40% tendrn neurosfilis asintomtica, desconocindose
cuales de ellos progresaran a formas sintomticas.
La sfilis meningovascular generalmente ocurre entre 5 y 10 aos despus de la infeccin primaria,
mientras que la neurosfilis parenquimatosa (tabes y parlisis general) es ms tarda, hacindose
manifiesta dcadas despus de la lesin primaria (10-20 o ms aos) (1) .
Cada fase representa una multiplicacin localizada de espiroquetas y la destruccin tisular, aunque la
replicacin es lenta, en el chancro inicial existe un elevado nmero de microorganismos al igual que en
las lesiones de la sfilis secundaria, lo que hace que el paciente sea muy infeccioso en estos estadios. T.
pallidum (trepo: giro; nema, hebra ;hebra que gira) es una espiroqueta delgada enroscada que mide 6 a
12 m de longitud y 0,25 m de dimetro, posee de 6 a 14 espirales regulares, es mvil, se reproduce por
fisin binaria. No se colorea (de all su nombre pallidum: plido; en referencia a la ausencia de tincin de
estos microorganismos con los colorantes convencionales) y slo puede observarse en el microscopio de
campo oscuro o mediante la tincin con anticuerpos especficos antitreponema marcados con colorantes
fluorescentes (2,3, 4).
T. pallidum es muy lbil al calor, cambios de pH, humedad, desecacin, detergentes y desinfectantes.
Estas espiroquetas son incapaces de desarrollarse en los cultivos acelulares. Las espiroquetas se
consideraron inicialmente bacterias anaerobias estrictas; sin embargo, actualmente se sabe que pueden
usar la glucosa de manera oxidativa.
2. OBJETIVO
Establecer la metodologa para el diagnstico serolgico de sfilis mediante la realizacin de pruebas
treponmicas (TP-HA) y pruebas no treponmicas (VDRL y RPR) en el Grupo de Microbiologa, RNL del
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INS y para el desarrollo de la evaluacin externa del desempeo en serologa de sfilis (Prueba de
Idoneidad en Serologa de Sfilis PISS).
3. ALCANCE
Este documento se tomar como referencia nica para realizar pruebas serolgicas (VDRL, RPR, TP-
HA) para el diagnstico de sfilis en el Grupo de Microbiologa del INS.
4. RESPONSABILIDAD
Funcionarios/ Contratistas del Grupo de microbiologa, INS.
5. DEFINICIONES
Pruebas Treponmicas: pruebas que usan el Treponema pallidum o componentes de ste como
antgeno.
Pruebas no Treponemicas: pruebas realizadas con antgeno de naturaleza lipidico que miden
anticuerpos tipo Ig G e IgM formados por el husped como reaccin a lipoprotenas y cardiolipinas
consecuencia del dao celular producido.
VDRL: (Venereal Disease Research Laboratory) es una suspensin alcohlica que contiene cantidades
estandarizadas de cardiolipina, lecitina y colesterol.
USR: Unheated Serum Reagin. Prueba no treponmica mas estabilizada con la cual no hay necesidad de
inactivar la muestra, ni de prepararse diariamente el antgeno.
RPR: (Rapad Plasma Reagin) suspensin estabilizada que contiene cardiolipina, lecitina y colesterol. a la
cual se le ha adicionado partculas de carbn.
TP- HA: Microhemaglutinacin pasiva para Treponema Pallidum, prueba treponmica
FTA-Abs: Absorcin de anticuerpos fluorescentes para Treponema Pallidum, prueba treponmica.
Floculacin: El proceso mediante el cual las partculas finas son forzadas a agruparse en flculos, estos
flculos pueden tender a flotar en la superficie.
Reaginas: anticuerpo inducido por alergeno del tipo IgE que se asemejan a los mastocitos y que se
producen en el asma y fiebre del heno. En las reacciones antgeno-anticuerpo desencadena la liberacin
de histamina y de otros mediadores por degranulacin de los polinucleares que provocan sntomas
atpicos
Cardiolipinas: Son fosfolpidos presentes principalmente en las membranas mitocondriales internas y en
las membranas plasmticas bacterianas; se emplean en pruebas no treponmicas para el diagnostico de
sfilis
6. CONDICIONES GENERALES
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N/A remitirse el numeral 8.
7. FUNDAMENTOS
Cada fundamento aparece con la prueba respectiva.
8. BUENAS PRCTICAS DE LABORATORIO

Empleo de normas de bioseguridad, condiciones de limpieza, sanitizacion del rea y materiales de
trabajo. Ver Manuales de Bioseguridad (MNL-R01.003.5030-016), Lavado de material para anlisis
Microbiolgico (INT-R01.003.5030-004), Control de equipos y procedimientos en las determinaciones
microbiolgicas (INT-R01.003.5030-008), Limpieza en los laboratorios (INT-R01.003.5030-003).
9. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS
9.1 Equipos:
Agitador de Manzini
Bao serolgico
Centrfuga
Mechero de Bunsen
Microscpio de luz
Micropipetas de diferentes volumenes
Termmetro de ambiente
9.2 Materiales
Crioviales
Elementos de proteccin personal
Laminas de vidrio con anillos de cermica o parafina de 14 mm de dimetro y fondo plano.
Marcador
Puntas para pipetas automticas
Toallas de papel
9.3 Reactivos
VDRL
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RPR
MHA-TP
Prueba Rpida
Solucin salina
10. CONTENIDO
10.1TAXONOMA DE TREPONEMA PALLIDUM

10.1.1Clasificacin taxonmica
Treponema es uno de los gneros patgenos de la familia Spirochaetaceae, e incluye las especies
patgenas humanas:
Treponema pallidum (subespecie pallidum): agente etiolgico de la sfilis venrea.
Treponema pallidum (subespecie endemicum): agente etiolgico de la sfilis endmica o Bejel
Treponema pallidum (subespecie pertenue): agente etiolgico de la frambesia o pian.
Treponema carateum: agente etiolgico de la pinta o mal de pinto.
Estas especies son indistinguibles desde el punto de vista morfolgico y antignico. Su individualizacin
se debe a caractersticas clnicas y epidemiolgicas as como a su distribucin geogrfica (5).
Sus caractersticas clnicas fueron precisadas por Fournier en el siglo XIX, en 1905 el zologo Fritz
Schaudinn y el dermatlogo Erich Hoffmann descubrieron su agente causal: Treponema pallidum. En
1906 se desarrollaron por primera vez las serorreacciones de la sfilis por Wasserman, Neisser y Bruck.
Entre 1909 y 1910 se introdujo el Salvarsn por Paul Ehrlich utilizado en la teraputica de la sfilis.
En 1911 Noguchi cultiv el treponema y en 1913 se aisl en el sistema nervioso central de un tabtico.
En 1943 se impuso el primer tratamiento con penicilina y 6 aos ms tarde, en 1949 se realiz la prueba
de inmovilizacin del Treponema pallidum por Nelson y Mayer.
10.1.2. Factores de virulencia

La incapacidad de T. pallidum para crecer in vitro ha limitado la deteccin de los factores de virulencia
especficos de este microorganismo. Sin embargo, varios investigadores han logrado
clonar genes de T. pallidum en Escherichia coli y han aislado sus productos proteicos, varios productos
gnicos se han asociado de manera especfica a las cepas virulentas aunque an no se ha definido su
funcin en la patogenia.
Las protenas de la membrana externa intervienen en la adherencia a la superficie de las clulas del
organismo anfitrin y las espiroquetas virulentas producen hialuronidasa, la cual facilita la infiltracin peri
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vascular. Las espiroquetas virulentas estn recubiertas por fibronectina de la clula del organismo
anfitrin, la cual puede protegerlas frente a la fagocitosis (2).
A partir de anticuerpos formados en la evolucin de infecciones animales de experimentacin y
treponemas comensales cultivables se conocen cuatro grupos de antgenos:
1. El hapteno lipdico de Wasserman o cardiolipina: componente importante de los

antgenos treponmicos es un fosfatidil-glicerol presente en los Treponemas y en otras
bacterias, plantas y otros tejidos animales, sobre todo en el msculo cardiaco. Las llamadas
reaginas son verdaderos anticuerpos que se forman contra este hapteno por lo que
este nombre tiende al desuso con el fin de evitar confusiones con la IgE de la alergia
atpica.
2. Antgeno proteico especfico de grupo: se localiza en los endoflagelos (filamento axial)

de los treponemas comensales y patgenos. Se demuestra con suspensiones de Treponema
de Reiter por reaccin de fijacin del complemento, actualmente es de poco valor en el
diagnstico.
3. Antgenos proteicos especficos: intervienen en la respuesta de base celular con fenmenos de

hipersensibilidad retardada que ocurren en el desarrollo de la sfilis, parecen ser idnticos en las tres
especies de treponemas.
4. Antgenos polisacridos especficos: intervienen en las

reacciones serolgicas especficas para Treponema pallidum (inmunofluorescencia,
hemoaglutinacin) y son iguales en las tres especies. Se ha determinado adems, la
presencia de otros antgenos de la vaina que actan inhibiendo la muerte de los
microorganismos mediada por anticuerpos y complemento.
En general, en el hospedero humano Treponema pallidum da lugar a la formacin de

dos clases de anticuerpos de importancia en el diagnstico serolgico de la sfilis:
a. Anticuerpos antitreponmicos o especficos que inmovilizan, matan, producen reaccin de fijacin del
complemento e inmunofluorescencia positivas en presencia de T. pallidum vivos.
b. Reaginas o anticuerpos inespecficos que dan aglutinacin y fijacin del complemento
en presencia del antgeno de cardiolipina. La determinacin de ambos tipos de anticuerpos
se utiliza actualmente para el diagnstico de la sfilis.
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Las pruebas anticardiolipina han sido designadas como pruebas serolgicas para
sfilis para distinguirlas de las pruebas antitreponmicas desarrolladas en aos recientes.
Debido a que la cardiolipina es un constituyente normal de los tejidos del hospedero existen
controversias sobre si el primer estimulo antignico para el desarrollo de los anticuerpos de
Wasserman (anticardiolipina) proviene de los microorganismos invasores o del hospedero
en una respuesta auto inmune.
10.2 EPIDEMIOLOGIA
La sfilis tiene una distribucin universal y es la tercera enfermedad bacteriana de transmisin sexual ms
frecuente en EE.UU. despus de las infecciones por Chlamydia y Neisseria gonorrhoeae. Las infecciones
de transmisin sexual (ITS) se encuentran entre las principales causas de enfermedad en el mundo. Las
complicaciones afectan principalmente a mujeres y a nios, la sfilis puede afectar a la mujer
embarazada y transmitirse al feto. Se estima que dos terceras partes de estos embarazos resultan en
sfilis congnita aborto espontneo, complicaciones que podran ser totalmente prevenibles con
tecnologas asequibles y de bajo costo segn estimaciones de la OMS, en 1999 el nmero de casos
nuevos de sfilis en el mundo fue de 12 millones. En Amrica Latina y el Caribe se estim un total de tres
millones de casos nuevos, la sfilis en Amrica Latina y el Caribe (ALC) afecta a personas sexualmente
activas y presenta prevalencias elevadas en grupos vulnerables (6). La incidencia de la enfermedad ha
disminuido como consecuencia de la introduccin del tratamiento con penicilina en los aos cuarenta,
aunque se han descrito incrementos peridicos asociados a modificaciones de los hbitos sexuales.
Entre los aos 1958 y 1960 hubo un descenso en la incidencia de esta enfermedad y ocurri otro
aumento a partir de los aos 70 (segn datos de la OMS). Se consider desde esa poca la existencia de
millones de sifilticos repartidos en forma desigual entre todas las naciones y se explic la diseminacin
de la enfermedad y a veces la reaparicin a la mezcla cada vez mayor de poblaciones distintas y a los
puertos como grandes reservorios de treponemas.
T. pallidum es un microorganismo muy lbil incapaz de sobrevivir a la desecacin o a la accin de los
desinfectantes; por tanto, la sfilis no se puede propagar por el contacto con objetos inanimados como los
retretes. La va ms frecuente de propagacin es el contacto sexual directo, la enfermedad se puede
adquirir tambin de forma congnita o mediante la transfusin de sangre contaminada.
La sfilis no es muy contagiosa, el riesgo de que un individuo contraiga la enfermedad despus de un
nico contacto sexual se estima en alrededor del 30%. Sin embargo, la contagiosidad depende de la fase
de la enfermedad del individuo infeccioso. El periodo de incubacin de esta enfermedad puede ser de 10
das a tres meses, por lo comn tres semanas. La transmisin de la sfilis de la madre al feto es ms
probable si ella est en la fase temprana de la enfermedad, pero puede producirse durante todo el
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Fecha: 2011/07/14
perodo de latencia. Los pequeos infectados pueden tener lesiones muco cutneas hmedas, ms
generalizadas que en la sfilis del adulto y constituyen una fuente posible de infeccin.
Como se dijo previamente, las espiroquetas no pueden sobrevivir en las superficies secas de la piel. Por
tanto, T.pallidum se contagia fundamentalmente durante las primeras fases de la enfermedad, cuando
hay muchos microorganismos presentes en las lesiones cutneas o mucosas hmedas.
Durante las primeras fases del proceso, el paciente tiene bacteriemia, la cual puede persistir hasta 8
aos en ausencia de tratamiento. La transmisin congnita de la madre al feto puede tener lugar en
cualquier momento durante este perodo.
Despus de 8 aos, la enfermedad puede permanecer activa, pero no se cree que ocurra bacteriemia con
la introduccin de tratamientos antimicrobianos eficaces, la incidencia de la sfilis tarda (terciaria) ha
disminuido de manera considerable. Aunque el tratamiento antibitico ha comportado una disminucin de
la duracin de la fase de infectividad de los individuos infectados, la incidencia de la sfilis primaria y de la
sfilis secundaria ha continuado siendo alta como consecuencia de los hbitos sexuales, especialmente
de la prostitucin destinada a costear el consumo de drogas La incidencia de la sfilis congnita se
corresponde con el patrn de sfilis en las mujeres en edad frtil. Se debe tener en cuenta que cuando
existen lesiones genitales activas, el paciente tiene un mayor riesgo de transmitir y de adquirir el virus de
la inmunodeficiencia humana (VIH) (2,7).
Entre los factores de riesgo para la transmisin de la sfilis se encuentran:
a. Las prcticas sexuales de alto riesgo (por ejemplo la prctica del sexo vaginal, oral o anal sin
proteccin).
b. El inicio de la actividad sexual a una edad temprana.
c. La actividad comercial sexual y el VIH/SIDA.
d. El consumo de drogas ilcitas y el alcohol, que muchas veces dificulta la toma de medidas preventivas.
La susceptibilidad es universal, aunque solo cerca del 30% de las exposiciones culminan en infeccin. La
infeccin genera inmunidad contra Treponema pallidum en forma gradual y en cierta medida contra
treponemas heterlogos. A menudo no se genera inmunidad si el paciente se ha sometido a tratamiento
temprano en las fases primaria y secundaria. La infeccin concurrente por el VIH puede aminorar la
respuesta normal del husped contra T. pallidum (8).
Comportamiento del evento en Colombia
En Colombia, desde la XXIV Conferencia Sanitaria Panamericana en 1994, se dio inicio al cumplimiento de la
propuesta de disminuir la tasa de incidencia de Sfilis Congnita a 0,5 casos por 1000 nacidos vivos antes del
ao 2000, a travs de medidas graduales encaminadas a realizar el diagnstico temprano y proporcionar el
tratamiento adecuado a las gestantes que presentaran la infeccin.
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El pas ha asumido el reto de la eliminacin de la sfilis congnita adoptando las siguientes medidas:
Incluyo la sfilis congnita y gestacional como eventos de inters en salud publica, contando desde el ao
2007 con notificacin caracterizacin individual de cada una de los casos notificados.
Implemento las normas tcnica de deteccin temprana de alteraciones del embarazo - proteccin
especfica para atencin del parto y la de atencin del recin nacido e implemento la gua de atencin
de la sfilis congnita en la resolucin 412/2000.
La Resolucin 3384 de 2000, modific la resolucin 412 asignando responsabilidades en el cumplimiento
de las normas y guas de atencin y estableciendo las metas de cumplimiento para las aseguradoras.
La poltica nacional de salud sexual y reproductiva formulada en el ao 2003, incluy para sfilis acciones
dirigidas a la promocin de factores protectores y prevencin de riesgos, el acceso de la poblacin a la
deteccin y el tratamiento adecuado de las ITS.
El Plan Nacional de Salud Pblica (Resolucin 30397/2007) estableci dentro de la lnea de salud infantil,
que todas las IPS debern tener implementadas estrategias para la prevencin y el control de la sfilis
gestacional y congnita.
La resolucin 1446/2006 estableci la sfilis congnita como evento adverso, definiendo la obligatoriedad
de reporte de los casos a la superintendencia de salud por parte de las aseguradoras.
Pero a pesar de estos avances en la actualidad lejos de acercarnos al cumplimiento de la meta
establecida de 0.5 por 1000 NV para el ao 2000, la proporcin de incidencia de la sfilis congnita a
pasado de 1 a 2.6 casos por 1000 NV y la razn de incidencia para sfilis gestacional de 1.3 a 5.8 casos
por 1000 NV en los ltimos diez aos.
10.3 DIAGNOSTICO
Historia de las pruebas diagnsticas para sfilis

Microbiologa
Fecha: 2011/07/14
Fuente: SIVIGIL
Fecha Autor Hallazgo
Incidencia IncidenciadeSifilis
1903 Metchnikoffde Sifilis
y Roux Inoculan chimpanzs para transmitirles la sfilis
Congenita Colombia GestacionalColombia
1905 Shaudin
1998 y-Hoffmann
2008 Relacionan la Espiroqueta pallida con sfilis
20032008
1906 Wasserman, Neisser y Brck Primera prueba sorolgica no treponemica
8
1909
3,0 Coles Describe
6 el empleo del campo oscuro
1964
2,0 Yobs, Brown y Hunter 4
Desarrollan La prueba de inmunofluorescencia directa
para 2anticuerpos contra Treponema pallidum (DFA-TP).
1,0 0
1991
0,0 Grimprel Describe La PCR para diagnostico de sfilis congnita.
2003
2004
2005
2006
2007
2008
1
8
9
9
1
0
2
1
0
2
0
2
3
0
2
4
0
2
5
0
2
6
0
2
7
0
2
8
0
2
Aplica la PCR para el diagnstico de neurosifilis.

Noordhoek Razndeincidenciapor1000NV
Incidenciapor1000NV
Fuente American Public Healt Association
Las pruebas diagnsticas serolgicas disponibles para sfilis se han agrupado en no treponmicas y
treponmicas. Desde luego, la accesibilidad a los servicios de salud es uno de los mayores
determinantes para la seleccin de las mismas. Las pruebas no treponmicas ms extendidas son el
VDRL (Venereal Disease Research Laboratory) y el RPR (rapid plasma reagin). Una prueba no
treponmica reactiva puede indicar Infeccin actual, infeccin reciente tratada o no tratada o un resultado
falso positivo. Un resultado falso positivo ocurre en 1%-3% de la poblacin general Las pruebas no
treponmicas se negativizan con el tiempo despus del tratamiento; sin embargo, en algunos pacientes
los anticuerpos no treponmicos pueden permanecer con un ttulo bajo durante un largo tiempo e incluso
durante toda la vida. La serologa secuencial en un paciente debe ser realizada con una misma prueba
VDRL RPR y preferiblemente por el mismo laboratorio. Los resultados cuantitativos del RPR y VDRL no
pueden ser comparados entre s. Las pruebas treponmicas pueden llegar a ser complejas y costosas,
como por ejemplo el TPHA (Treponema pallidum haemagglutination assay), el TP-PA (Treponema
pallidum particle agglutination), o el MHA-TP (microhaemagglutination assay for antibodies to Treponema
pallidum), el FTA-Abs (fluorescent treponemal antibody absorption)
Hay que tener en cuenta que la mayora de las personas infectadas permanecern con un resultado
positivo a las pruebas treponmicas durante aos o durante el resto de la vida independientemente del
tratamiento. Por lo tanto, al utilizar nicamente una prueba treponmica (TPHA, TP-PA, FTA-abs,
pruebas rpidas) se registrar un aumento en la prevalencia de pruebas serolgicas positivas para la
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sfilis. Por consiguiente, las pruebas treponmicas deben reservarse para confirmacin de resultados de
pruebas no treponmicas, dependiendo de las posibilidades de los servicios de salud.
Las pruebas TPHA y TP-PA son tcnicas comunes para determinar otras patologas y no requieren
entrenamiento especial. La FTA-Abs requiere microscopa de fluorescencia y puede resultar costosa.
Las tcnicas de mayor complejidad (inmunoblot, Western blot, PCR) no deben ser utilizadas de
forma rutinaria ya que su aplicacin diagnstica no es costo efectiva ni en funcin de sensibilidad o
especificidad diagnstica.
El trmino prueba rpida se utiliza para tcnicas diagnsticas en tiras o cojines que utilizan una gota de
sangre entera o suero; se basa en la utilizacin de protenas del Treponema como antgeno y tiene un
tiempo de lectura de 1-3 minutos; es por lo tanto, una prueba diagnstica de infeccin por treponema.
La eleccin de la prueba rpida (en tiras) est sujeta a consideraciones de lugar, nmero de muestras y
prevalencia. La prueba rpida puede ser una estrategia para mejorar cobertura en
poblaciones de difcil acceso o bien para confirmar los resultados de pruebas no treponmicas en lugares
donde no hay otras pruebas disponibles. Es importante resaltar que la prueba rpida no permite realizar
un seguimiento del tratamiento en algunos pacientes, si la sfilis se trata adecuadamente y de forma
temprana en la etapa primaria, su serologa, especialmente la treponmica, puede permanecer negativa
por la falta de tiempo para desarrollar una respuesta inmunitaria de seroconversin (8).
10. 3. DIAGNOSTICO
10.3.1 Pruebas no treponmicas
Toda prueba no treponmica mide anticuerpos tipo IgG e IgM producidos por el hospedero en respuesta
a material lipidico liberado por las clulas afectadas tales como sustancias lipoprotenicas y cardiolipina.
10.3.2 Pruebas no treponmicas microscpicas

Se encuentran estandarizadas las pruebas VDRL y VDRL-USR.
PRUEBA DE VDRL- USR EN SUERO

Fundamento:
La prueba de VDRL-USR es una prueba microscpica que utiliza un antgeno no treponmico, el cual al
unirse a los anticuerpos en el suero o lquido cefalorraqudeo de pacientes con sfilis y ocasionalmente en
pacientes que cursan con ciertos procesos agudos o crnicos, produce el fenmeno de floculacin. La
prueba USR es una modificacin del VDRL que contiene cloruro de colina fortalece la reactividad en
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Fecha: 2011/07/14
sueros no inactivados adems en la prueba USR no se necesita preparar ni descartar el antgeno

diariamente.
Las pruebas de floculacin en lmina para sfilis son afectadas por la temperatura ambiente. Para obtener
resultados confiables y reproducibles, la prueba debe realizarse en un ambiente con temperatura entre
los 23 y 29 C; a temperaturas ms bajas la reactividad de la prueba disminuye y a temperaturas ms
altas la reactividad de la prueba aumenta.
Muestra
Suero, plasma Lquido Cefalo Raqudeo (LCR).
Si la prueba se realiza con plasma ste puede obtenerse empleando heparina, EDTA u oxalato de sodio
como anticoagulantes.
Las interferencias conocidas son la hemlisis e hiperlipemia. Los sueros pueden conservarse hasta una
semana en refrigerador (2 a 8 C), el plasma puede emplearse solo hasta 24 horas despus de la
extraccin.
MATERIALES Y REACTIVOS
Jeringa desechable o aguja
Tubo seco
Algodn
Desinfectante
Termmetro para temperatura ambiente
Centrfuga
Lmina de vidrio con crculos en relieve
Pipeta automtica de 50 microlitros
Puntas para pipeta automtica.
Kit de Reactivo VDRL-USR
Agitador mazzini revoluciones graduables de 100 a 200 por minuto
Reloj
Microscopio
Guardin.
PRUEBA CUALITATIVA EN SUERO

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PROCEDIMIENTO
Cada vez que realice la prueba se debe utilizar los sueros control de reactividad conocida
(reactivo, dbil reactivo y no reactivo) para determinar la calidad del antgeno con la cual se va a
realizar la prueba. Las reacciones con los sueros control deben reproducir exactamente el patrn
de reactividad establecidos para tales sueros.
La muestra de suero debe ser limpia y obtenida por centrifugacin de sangre recolectada sin
anticoagulante.
Se debe examinar cuidadosamente los sueros y centrifugar nuevamente los sueros que
presenten partculas, hemates o turbidez.
Inactivar el suero calentndolo a 56C en bao de mara por 30 minutos antes de realizar la
prueba, si la tcnica que va a realizar as lo exige (Si utiliza la tcnica USR, este paso no ser
necesario).
En el momento de realizar la prueba, los sueros deben estar a temperatura ambiente (23 a 29
C).
Con una micropipeta, coloque 50 l de suero dentro de un crculo de la lmina de vidrio.
Con un palillo plstico o de madera o con la misma punta de la pipeta extienda el suero en la
superficie de la placa de vidrio demarcada por el anillo.
Mezcle muy bien el antgeno que va a utilizar para la prueba y adicione una gota de este sobre
cada uno de los sueros con el gotero dispensador que cada kit trae para este fin.
Rote las lminas durante 4 minutos en un agitador mecnico a 180 2 rpm.
Leer las pruebas inmediatamente despus de la rotacin, con el microscopio y objetivo 10x.
Informar los resultados de la siguiente manera:
Lectura Interpretacin
Floculos grandes y medianos Reactivo (R)
Floculos pequeos Reactivo dbil (RD)
No formacin de grumos No Reactivo
Fuente: A manual of tests for syphilis
Reactivo Reactivo Dbil No Reactivo

Microbiologa
Fecha: 2011/07/14
NOTA: ocasionalmente puede presentarse el fenmeno de prozona. Este fenmeno se observa cuando
hay exceso de anticuerpos y se presenta una completa o parcial inhibicin de la reactividad en un suero
no diluido. En ocasiones dicho fenmeno es muy grande, dando reacciones dbilmente reactivas o
ligeramente grumosas en sueros no diluidos. Por lo anterior se recomienda que a todo suero que
presente reaccin dbil reactiva o ligeramente grumosa en la prueba cualitativa, se le haga la prueba
cuantitativa antes de dar el resultado de la prueba VDRL.
Toda prueba con resultado Reactivo o Reactivo Dbil en la fase cualitativa debe titularse para
informarse cuantitativamente.
PRUEBA CUANTATIVA EN SUERO (TUBO)
Realizar la prueba cuantitativa a todos los sueros reactivos, reactivos dbiles o no reactivos grumosos,
titulando hasta una dilucin en la que sean no reactivos.
Para las diluciones se marcan los tubos as: (1:1 suero sin diluir), 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:64 y as
sucesivamente.
Coloque 200 l solucin salina 0,9 % en cada uno de los tubos de ensayo utilizados para titular a
partir del 1:2.
Adicione 200 l de suero al tubo 1:2, mezcle muy bien y transfiera 0,2 ml de la suspensin al tubo 1:4
y continuar haciendo dilucin en cascada, para obtener las diluciones 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:64,
etc.
Tomar 50 l de cada una de las diluciones (comenzando por el suero ms diluido) y colocarlo dentro
de un crculo de la lmina de vidrios previamente marcados.
Microbiologa
Fecha: 2011/07/14
Agregue una gota de la suspensin de antgeno sobre cada una de las diluciones de los sueros con
el gotero dispensador que cada kit provee para este fin.
Rotar la lmina de vidrio durante 4 minutos en agitador mecnico a 180 2 rpm.
Leer las pruebas inmediatamente despus de la rotacin con el microscopio y objetivo 10x.
Reportar hasta el ltimo titulo de la dilucin en que se observ claramente la floculacin como se
observa en la siguiente tabla.
Reporte cuantitativo de resultados en suero

Cualitativa Cuantitativa
Dilucin de Suero Reporte
Sin dil. (1:1) 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32
Reactivo RD N N N N Reactivo 1 dil.
Reactivo R RD N N N Reactivo 2 dils.
Reactivo R R RD N N Reactivo 4 dils.
Dbil Reactivo W R R RD N Reactivo 8 dils.
No Reactivo grumosa W R R R N Reactivo 16 dils.
Dbil Reactivo N N N N N Dbil Reactivo 0 dils.
PRUEBA DE VDRL EN LIQUIDO CEFALORAQUIDEO
Preparacin de la suspensin de antgeno:
Adicionar una parte de solucin salina al 10% a una parte de la suspensin de antgeno VDRL-
USR.
Mezclar suavemente por rotacin o por inversin por 5 minutos.

La sensibilidad antgeno VDRL para LCR es buena solamente por dos horas despus de su
preparacin.
Procedimiento prueba cualitativa

Microbiologa
Fecha: 2011/07/14
En el momento de realizar la prueba, la muestra debe estar a temperatura ambiente (23 a 29 C).
Depositar 50 l de LCR en una lamina plana con cavidades circulares de 14 mm de dimetro
utilizando las normas de bioseguridad para la manipulacin.
Mezclar suavemente el antgeno.
Agregue una gota de la suspensin de antgeno sobre la muestra de LCR con aguja despuntada,
por precaucin dispense algunas gotas para asegurarse que no salgan con aire, la gota
adicionada al LCR equivale a 10 l
Si la atmosfera donde se realiza la prueba es muy seca elaborar una cmara hmeda y cubrir la
lamina para evitar la excesiva evaporacin durante la rotacin.
Toda prueba con resultado Reactivo en la fase cualitativa debe titularse para informarse
cuantitativamente.
PRUEBA CUANTATIVA EN LCR
Para las diluciones se marca en los crculos cncavos de lamina as: (1:1 LCR sin diluir), 1:2, 1:4, 1:8,
1:16, 1:32, 1:64 y as sucesivamente.
Coloque 50 l solucin salina 0,9 % en cada uno de los crculos de la lmina utilizados para titular.
Adicione 50 l de LCR al crculo 1:2, mezcle muy bien y transfiera 50 l de la suspensin al crculo
1:4 y continuar haciendo dilucin en cascada, para obtener las diluciones 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32,
1:64, etc.
Descartar los 50 l restantes en el crculo de la ltima dilucin.
Agregue una gota de la suspensin de antgeno sobre la muestra de LCR con aguja despuntada y
jeringa en posicin vertical, por precaucin dispense algunas gotas para asegurarse que no salgan
con aire, la gota adicionada a el LCR equivale a 10 l.
describe en la tabla:
Microbiologa
Fecha: 2011/07/14
Reporte cuantitativo de resultados en LCR

Sin dil. (1:1) 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32
Reactivo N N N N N Reactivo 1 dil.
Reactivo R N N N N Reactivo 2 dils.
Reactivo R R N N N Reactivo 4 dils.
Reactivo R R R N N Reactivo 8 dils.
No Reactivo grumosa R R R R N Reactivo 16 dils.
10.3.3 Pruebas no treponmicas macroscpicas
Las pruebas de floculacin microscpicas estandarizadas son la RPR y TRUST
PRUEBA RPR EN SUERO
Fundamento:
El antgeno usado en este anlisis es una modificacin del antgeno VDRL el cual contiene cloruro de
colina para eliminar la necesidad de inactivar el suero y microparticulas de carbn para aumentar la
diferencia visual entre un resultado Reactivo y No Reactivo. Si una muestra contiene anticuerpos anti-
reaginicos, se observa una aglutinacin de las partculas antgeno-carbn.
Muestra
Plasma, suero inactivado o no inactivado por calor. Las muestras deben estar libres de contaminacin y
no hemolisadas. Las muestras de suero fresco se pueden almacenar a una temperatura de 2 a 8 grados
centgrados por 5 das a -20 grados centgrados por 4 semanas.
MATERIALES Y REACTIVOS
Termmetro para temperatura ambiente
Lmina de cartn con crculos en relieve
Pipeta automtica de 50 microlitros
Microbiologa
Fecha: 2011/07/14
Puntas para pipeta automtica.

Kit de Reactivo RPR
Agitador mazzini revoluciones graduables de 100 a 200 por minuto
Reloj
Guardin.
PRUEBA CUALITATIVA EN SUERO
PROCEDIMIENTO
Cada vez que realice la prueba se debe utilizar los sueros control de reactividad conocida
(reactivo y no reactivo) para determinar la calidad del antgeno con la cual se va a realizar la
prueba. Las reacciones con los sueros control deben reproducir exactamente el patrn de
reactividad establecidos para tales sueros.
La muestra de suero debe ser limpia y obtenida por centrifugacin de sangre recolectada sin
anticoagulante.
Se debe examinar cuidadosamente los sueros y centrifugar nuevamente los sueros que
presenten partculas, hemates o turbidez.
En el momento de realizar la prueba, los sueros y reactivos deben estar a temperatura ambiente
entre 23 a 29 C.
Con una micropipeta, coloque 50 l de suero dentro de un crculo de la lmina de cartn.
Con un palillo plstico o de madera o con la misma punta de la pipeta extienda el suero en la
superficie de la placa de cartn demarcada por el anillo.
Mezcle muy bien el antgeno que va a utilizar para la prueba sacndolo por succin directamente
con la aguja conectada en el frasco dispensador, adicione una gota de ste sobre cada uno de
los sueros. Nunca agitar el antgeno.
Rote las lminas durante 8 minutos en un agitador mecnico a 100 2 rpm.
Leer las pruebas inmediatamente despus de la rotacin microscpicamente a luz directa
Informar los resultados de la siguiente manera:
Lectura Interpretacin
Aglutinacin gruesa en el centro y periferia Reactivo (R)
Presencia de pequeas aglutinaciones al borde del circulo.
Microbiologa
Fecha: 2011/07/14
Suspensin homognea No Reactivo

PRUEBA CUANTATIVA EN SUERO
Realizar la prueba cuantitativa a todos los sueros reactivos y a los no reactivos tosco, titulando hasta una
dilucin en la que sean no reactivos.
Para las diluciones se marcan los tubos as: (1:1 suero sin diluir), 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:64 y as
sucesivamente.
Coloque 200 l solucin salina 0,9 % en cada uno de los tubos de ensayo utilizados para titular a
partir de 1:2
Adicione 200 l de suero al tubo 1:2, mezcle muy bien y transfiera 200 l de la suspensin al tubo 1:4
y continuar haciendo dilucin en cascada, para obtener las diluciones 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:64,
etc.
Tomar 50 l de cada una de las diluciones (comenzando por el suero ms diluido), dentro de un
crculo de la lmina de cantn previamente marcados.
Agregue una gota de la suspensin de antgeno sobre cada una de las diluciones de los sueros, con
el gotero dispensador que cada kit provee para este fin.
Rotar la lmina de cartn durante 8 minutos en agitador mecnico a 100 2 rpm.
Leer macroscpicamente a la luz las pruebas inmediatamente despus de la rotacin,.

Microbiologa
Fecha: 2011/07/14
observa en la siguiente tabla.
Reporte cuantitativo de resultados en suero

Sin dil. (1:1) 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32
Reactivo (floculacin mnima) N N N N N Reactivo 1 dil.
Reactivo R N N N N Reactivo 2 dils.
Reactivo R R N N N Reactivo 4 dils.
Reactivo R R R RD N Reactivo 8 dils.
Reporte de pruebas no treponmicas

Se hace siguiendo los lineamientos establecidos utilizando el formato de resultados, (REG-R01.001.5030-
119, REG-R01.001.5030-118), se pasan por fax y luego se enva por empresa de correo.
10.3.4 Pruebas treponemicas
Las pruebas treponmicas usan al T. pallidum o componentes de ste como antgeno y se basan en la
deteccin de anticuerpos contra componentes treponmicos. Estas pruebas se utilizan para verificar la
reactividad de las pruebas no treponmicas, pueden ser usadas para confirmar una sospecha con
evidencia clnica de sfilis, como ocurre en la sfilis tarda, y cuando las pruebas no treponmicas son no
reactivas.
Se tiene como pruebas treponmicas estandarizadas, el FTA-ABS (fluorescent treponemal antibody
absorption test), FTA-ABS-DS (fluorescent treponemal antibody absortion double staining), MHA-TP
(microhemaglutinacin de anticuerpos contra T. pallidum).
Segn la definicin de caso de sfilis gestacional, establecida en el pas se ha determinado la utilizacin de

la prueba treponemica en los casos en los que la prueba no treponemica (VDRL o RPR) tenga resultados
menores de 8 diluciones.
La utilizacin de las pruebas rpidas se considera pertinente para los siguientes casos:
Gestantes detectadas durante brigadas medicas en sitios de difcil acceso, donde es difcil volver
para entregar un resultado.
Microbiologa
Fecha: 2011/07/14
Gestantes detectadas en control prenatal que pueden no volver

Aquellas instituciones de salud que prestan servicios de control prenatal y parto que no tengan
laboratorio clnico en su rea de influencia cercana no cuenten con un laboratorio clnico que supla
esta necesidad, deben asegurar este procedimiento de tamizaje a travs de pruebas rpidas.
No Treponmicas Treponmicas
Caractersticas VDRL (Venereal Disease Research TP-PA

Laboratories) MHA-TP,
RPR (rapid plasma reagin) FTA-ABS
USR (Unheated serum reagin) EIA
TRUST (Toluidine red unheated serum test) Pruebas rpidas
Ventajas Ampliamente difundidas y disponibles No sirven para seguimiento

Algunas requieren
Permiten seguimiento al poderse valorar instrumental y personal calificado.
la respuesta al tratamiento y diagnosticar Las pruebas treponmicas
infecciones recurrentes de sfilis. suelen permanecer
positivas para toda la vida,
por lo que no permiten
distinguir entre sfilis activa
y pasada.
La cuantificacin de las
pruebas Treponmicas no
es fiable.
Desventajas Baja especificidad Permanece positiva de por

Subjetividad vida.
Costos Bajos Altos
Complejidad Baja Variable
Fuente: Gua de manejo sfilis congnita MPS
10.3.5 Syphilis TPHA Liquid
Fundamento
Es una prueba de hemoaglutinacin indirecta para la deteccin de anticuerpos especficos para

treponema pallidum. Eritrocitos de ave son recubiertos de antgenos de Treponema pallidum, en
presencia de anticuerpos sifilticos las clulas sensibilizadas se aglutinan para formar patrones
caractersticos en las placas de microtitulacin.
Microbiologa
Fecha: 2011/07/14
Tiene la ventaja de alta especificidad, la cual es comparable con FTA-ABS, da pocas reacciones
falsamente positivas y adems el requerimiento de equipos es mnimo.
Muestra:
Suero (no utilizar plasma), las muestras debed estar libres de contaminacin y no hemolizadas, las
muestras frescas pueden ser mantenidas hasta por 48 horas a una temperatura de 2 a 8 grados C. o por 4
semanas a -20 grados C.
PROCEDIMIENTO
Cada Kit contiene un frasco de buffer diluyente, clulas sensibilizadas control y clulas sensibilizadas de
prueba, controles positivo y negativo listos para usar.
Prueba Cualitativa
Atemperar muestras y reactivos, temperatura ambiente controlada entre 23 y 29 grados

centgrados.
Marcar en la microplaca los nmeros de muestra, controles negativo y positivo
Dispensar en el primer pozo 100 l de diluyente, en el segundo pozo 25 l y en el tercero 25 l, de
tal manera que por cada muestra se utilizarn tres pozos.
Adicionar 25l de la muestra en el pozo 1, mezclar el contenido del pozo con la pipeta 8 veces
evitando formar burbujas.
Transferir 25l del pozo 1 al pozo 2 y mezclar con la pipeta 8 veces evitando formar burbujas.
Transferir 25l del pozo 2 al pozo 3 y mezclar con la pipeta 8 veces evitando formar burbujas,
descartar los 25 l restantes.
Mezclar por inversin las clulas sensibilizadas de control SCC y adicionar 75 l al pozo 2.
Mezclar por inversin las clulas sensibilizadas de test SCT y adicionar 75 l al pozo 3.
Agitar la placa suavemente para homogenizar la solucin.
Incubar la Microplaca a temperatura ambiente, sobre una superficie lisa, blanca, evitando
vibraciones y la luz solar directa durante mnimo 1 hora antes de leer los resultados.
INTERPRETACIN:
1. Resultado positivo es indicado por una aglutinacin total o parcial (fondo liso de clulas
aglutinadas o un fondo liso rodeado por un circulo de clulas) en el pozo 3, estas muestras pueden ser
cuantificadas en el pozo 2 se debe observar un botn central de clulas no aglutinadas. Una reaccin
Microbiologa
Fecha: 2011/07/14
en el pozo de control indica la presencia de aglutininas no especficas en la muestra y la prueba se

debe reportar como no vlida.
2. Resultado indeterminado muestra un botn de clulas con un pequeo aro en el centro (se parece
a un anillo grueso estrecho con un fondo claro). La muestra debe repetirse.
3. Un resultado negativo es indicado por un botn compacto de clulas sin aro o con un aro muy
pequeo en el centro del pozo.
Fotografa Grupo de Microbiologa INS MHA-TP
Prueba Cuantitativa
Dispensar diluyente como en la prueba cualitativa pero continuar dispensando 25 l desde el pozo
4 hasta el 10 en la misma lnea.
En lugar de desechar el ltimo volumen de la dilucin del pozo 3 transferir 25 l al pozo 4, mezclar,
transferir al pozo 5 y as sucesivamente. Desechar el ltimo volumen de 25 l de la dilucin del suero del
pozo 10.
Dispensar 75 l de SCC al pozo 2 y 75 l de STC a los pozos 3 al 10.
Continuar como en la prueba cualitativa
Interpretacin de Resultados
Un suero que presenta hemoaglutinacin en los pozos de prueba deber reportarse como positivo si no se
presenta ninguna aglutinacin en el pozo control. El titulo se define como la dilucin final que muestra una
reaccin positiva (pozo 3, 1:80; pozo 4, 1:160 y as sucesivamente). Muestras con ttulo de a 1:80 deben
ser consideradas como reactivas a anticuerpos de T. pallidum.
Control de Calidad
Los controles positivo y negativo deben analizarse con cada serie de muestras. Al titular el control positivo
debe producir un ttulo de 1:2560 un grado y el grado de hemoaglutinacin debe disminuir sucesivamente
desde el pozo 3 hasta el pozo 9.
Microbiologa
Fecha: 2011/07/14
Nota: muestras de suero con resultado no valido (aglutinacin en el pozo control) deben ser absorbidas:
tomar 25 l del suero y aadir 0.5 ml de SCC, mezclar el tubo y dejar reposar por 30 a 60 minutos,
centrifugar las clulas por 5 minutos, el sobrenadante absorbido debe ser reanalizado mezclando 25 l del
sobrenadante con 75 l de STC en un pozo. Continuacin e interpretacin como se describe en la prueba
cualitativa.
La desventaja de esta prueba es que tiene menor sensibilidad en sfilis temprana, sfilis latente y sfilis
tratada. Se puede realizar bajo dos modalidades, MHA-TP (Microhemagglutination Treponema pallidum)
que utiliza eritrocitos de carnero y TPHA (Hemagglutination treponemal test), ambos de sensibilidad y
especificidad similar.
Advertencias:
Leer completamente el instructivo del Kit, ya que cada casa comercial tiene estandarizada su
tcnica; las cantidades de muestra, diluyente y tiempos de lectura pueden ser diferentes.
Las instrucciones debern respetarse estrictamente para tener resultados precisos.
La profesional que realice la prueba debe estar capacitada.
Usar elementos de bioseguridad durante el procedimiento.
Decontaminar y desechar las muestras, equipos de reaccin y material potencialmente
contaminado, como si fueran desechos infecciosos.
Reporte de pruebas treponmicas

Se hace siguiendo los lineamientos establecidos utilizando el formato de resultados (Anexo 2), se envan
por fax y luego por empresa de correo.
10.3.6 Prueba rpida para determinacin de sfilis en sangre total
Fundamento
Las pruebas rpidas para la determinacin de sfilis son un ensayo inmunocromatogrfico en fase slida
para deteccin cualitativa de anticuerpos tipo Ig G, Ig M e Ig A contra Treponema pallidum.
Los tipos de muestra con que se ha estandarizado este mtodo son sangre total, suero y plasma, otros
fluidos no son recomendados para realizar la prueba.
Las muestras que son obtenidas prematuramente durante el periodo de infeccin, pueden tener niveles
no detectables de anticuerpos. Si se obtiene un resultado negativo y la clnica del paciente es
sospechosa, se debe repetir la prueba despus de un tiempo segn criterio mdico.
MATERIALES
Lanceta desechable.
Tubos capilares o pipetas plsticas.
Algodn.
Alcohol yodado(desinfectante)
Dispositivo de prueba rpida.
Reloj.
Guardin para descartar material contaminado.
Microbiologa
Fecha: 2011/07/14
PROCEDIMIENTO
Rotular el dispositivo de prueba rpida con el nombre o nmero del paciente.

Limpiar la zona de puncin con algodn impregnado en alcohol, secar con un algodn seco y limpio.
Presionar el dedo seleccionado para hacer llenado capilar.
Puncionar con la lanceta la parte lateral de la yema del dedo.
Con la pipeta plstica o tubo capilar tomar la cantidad de sangre necesaria para la prueba.
Adicionar la cantidad requerida de sangre segn la tcnica utilizada dentro del pozo de muestra.
Agregar las gotas necesarias de diluyente (de acuerdo a la tcnica utilizada) dentro del pozo de
muestra .En este paso se debe esperar a que se absorba cada gota de diluyente antes de agregar la
siguiente.
Interpretar la prueba dentro del tiempo sealado en la tcnica.
INTERPRETACIN
En la ventana de resultados aparecer una banda de color en la lnea de control sealada con la
letra C, lo que indica que la prueba est funcionando adecuadamente.
En la ventana de resultados, en la lnea sealada con la letra T aparece el resultado del paciente:
Negativo: Solamente aparece la banda de color en el control C.

Positivo: Aparecen dos bandas de color, la banda control C y la banda test T.
Invlido: Cuando no aparece ninguna banda de color en la lnea de control C, se debe repetir la prueba
con un dispositivo de prueba nuevo.
Incluso una banda de color dbil en T, indica un resultado positivo. Puede ocurrir que se presenten
diferentes intensidades de color en las bandas test T, esto ser irrelevante en la interpretacin del
resultado.
Interpretacin de los resultados para el diagnstico de sfilis
Diagnostico PRUEBA NO TITULO PRUEBA

TREPONEMICA CONFIRMATORIA
Infeccin activa Reactiva Menor 1:8 Reactiva
Sfilis latente Reactiva A menudo <1 : 4 Reactiva
Falsos positivos Reactiva Generalmente <1 : 4 Negativo
Tratamiento Reactiva disminucin de 2 concentraciones (por ej., Reactivo

exitoso No Reactiva de 1:16 a 1:4)
Nota: Prueba reactiva menor de 8 diluciones: Una prueba reactiva menor de 8 diluciones requiere de la
confirmacin a travs de una prueba treponmica, con el fin de disminuir el tiempo entre el diagnostico y el
inicio temprano del tratamiento, debe eliminarse cualquier tipo de barreras ya sea de orden administrativo
Microbiologa
Fecha: 2011/07/14
o procedimental, por lo que es necesario que esta prueba sea montada a todo resultado por debajo de las
8 diluciones sin que para ello tenga que mediar una segunda autorizacin por parte de la aseguradora o la
solicitud segn criterio medico.
De no haber pruebas adicionales disponibles, todos los pacientes con pruebas no treponmicas reactivas
deben recibir tratamiento.
Segn el decreto 1543 Los resultados de las pruebas para diagnstico de la infeccin por el Virus de
Inmunodeficiencia Humana (VIH) y los de diagnstico para las Enfermedades de Transmisin Sexual (ETS)
debern ser entregados al paciente por un profesional de la medicina u otra persona del equipo de salud
debidamente entrenada en consejera.
10.4 TRATAMIENTO
Segn la gua del CDC las decisiones de tratamiento deben ser hechas sobre:
Identificacin de la sfilis en la madre.
Lo adecuado del tratamiento recibido por la madre.
La presencia de estigmas paraclnicos y/o radiolgicos en el infante.
Comparacin de los ttulos de las pruebas serolgicas no treponmicas de la madre al momento
del parto y el recin nacido utilizando la misma tcnica y el mismo laboratorio.
10.4.1 Tratamiento de la sfilis gestacional
El tratamiento de la sfilis gestacional debe incluir el tratamiento farmacolgico, la bsqueda de

otras ITS, y la educacin, segn lo establecido en la gua de atencin de las enfermedades de
transmisin sexual.
El tratamiento farmacolgico depende inicialmente de si la gestacin contina o no en curso, ya

que solo si la gestacin ya termin pueden ofrecerse terapias diferentes a penicilina.
Si la gestacin contina en curso, el tratamiento farmacolgico debe hacerse siempre con

penicilina, desensibilizando por va oral en caso de que sea probable la presentacin de
reacciones de hipersensibilidad. El esquema a elegir depende de s la edad gestacional. Si es
mayor de 34 semanas, debe utilizarse penicilina cristalina endovenosa a 4 millones de UI cada 4
horas durante 10 a 14 das. Si existe amenaza de parto pretrmino se remitir por alto riesgo.
Debe intentarse el diagnstico del compromiso fetal.
Si la edad gestacional es menor de 34 semanas el esquema se seleccionar segn el

estadio, as:
Sfilis de evolucin indeterminada o latente tarda o terciaria excepto neurosfilis: penicilina

benzatnica intramuscular a 24 millones de UI cada semana por tres dosis.
Sfilis primaria o secundaria o latente temprana: penicilina benzatnica intramuscular a 24

millones de UI una dosis.
Neurosfilis: penicilina cristalina endovenosa a 4 millones de UI cada 4 horas durante 10 a 14

das.
Microbiologa
Fecha: 2011/07/14
Adems como parte de la atencin de un caso de sfilis en una mujer gestante se debe garantizar
el tratamiento de todos sus contactos sexuales con el fin de evitar la reinfeccin de la gestante.
10.4.2 Tratamiento de la sfilis congnita
Los neonatos deben ser tratados para sfilis congnita si cumplen la definicin operativa de caso
de sfilis congnita.
Los dos esquemas antibiticos recomendados para el tratamiento estn basados en el uso del
medicamento de eleccin que es la penicilina, y no existen otras alternativas que garanticen la
curacin de la enfermedad. Por lo tanto slo la penicilina se debe usar para tratar un caso de
sfilis congnita.
Los esquemas antibiticos especficos son los dos siguientes:
Penicilina Cristalina G acuosa 100,000 a 150,000 unidades/kg/da intravenosa, administrados en

dosis fraccionadas de 50,000 unidades/kg cada 12 horas durante los 7 primeros das de edad, y
cada 8 horas despus, por un total de 10-14 das. Si hay compromiso de sistema nervioso central
durante 14 das.
Penicilina G procanica 50,000 unidades/kg/dosis intramuscular, una vez al da durante 10-14

das. Si el tratamiento se interrumpe, debe reiniciarse. Este ltimo esquema de tratamiento con
penicilina procanica no requiere atencin intrahospitalaria.
Si el recin nacido tiene VDRL positivo en lquido cefalorraqudeo, el tratamiento se har con
penicilina cristalina durante 14 das.
10.4.3 Tratamiento de la sfilis en lactantes y nios mayores
A los lactantes (nios de 1 mes de edad a 2 aos) y nios mayores de 2 aos de edad en
quienes se diagnostica sfilis deben ser examinados, se les debe revisar la historia clnica
materna y perinatal para diferenciar si es congnita o adquirida.
El rgimen de manejo recomendado para todo nio mayor de un mes de edad con sfilis es el
siguiente:
Penicilina Cristalina G acuosa 200.0000 a 300.0000 unidades/kg/da intravenosa

administrados en dosis fraccionadas de 50.000 U/kg/cada 4-6 horas por un total de 10-14
das.
10.4.4 Alergia a la penicilina

Microbiologa
Fecha: 2011/07/14
Los pacientes peditricos o las mujeres gestantes que requieren de tratamiento para la sfilis,
pero que tienen una historia de alergia a la penicilina deben ser desensibilizados y tratados con
penicilina. Las pruebas cutneas de sensibilidad a la penicilina pueden ser tiles en algunos
casos.
No existen tratamientos alternativos a la penicilina con eficacia comprobada para tratar la

neurosfilis, la sfilis congnita o la sfilis en la mujer gestante. En los Estados Unidos se ha
reportado un 3 - 10% de la poblacin adulta que ha presentado urticaria, angioedema o anafilaxis
(obstruccin respiratoria alta, broncoespasmo, o hipotensin) con tratamientos de penicilina. La
readministracin de penicilina en estos pacientes puede causar reacciones inmediatas de tipo
severo. Ya que este tipo de reacciones alrgicas puede llegar a ser fatal, se debe remover la
sensibilidad anafilctica mediante desensibilizacin aguda.
Sin embargo, slo aproximadamente el 10% de las personas que reportan una historia de
reacciones alrgicas severas a la penicilina son an alrgicas. Con el paso del tiempo despus
de una reaccin alrgica severa, la mayora de las personas que han experimentado una
reaccin severa paran de expresar IgE especfica contra la penicilina. Estas personas pueden
tratarse con penicilina de manera segura.
11. DOCUMENTOS DE REFERENCIA
1. Guidelines for treatment of sexually transmitted disease. MMWR 1998; 47(RR-1):1-118.

Hutchinsom CM, Hook EW. Sfilis en adultos. Clin Med N. A.1990; 6: 1451-76.
2. Norris JS, Pope V, Johnson ER, Larsen AS. Treponema and Other Human Host-Associated
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4. INS. Gua para el taller de serologa de sfilis. Subdireccin de Epidemiologa y Laboratorio

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de acceso 15 de Mayo 2008, URL Disponible en: http://www.who.int/reproductive-
health/publications/es/congenital_syphilis/congenital_syphilis_strategy_es.pdf
Microbiologa
Fecha: 2011/07/14
7. Sfilis: pasado y presente, Berdasquera Corcho D. 2004, Instituto de Medicina Tropical "Pedro
Kour. La Habana, Cuba. E-mail: denis@ipk.sld.cuInstituto
8. OPS. Eliminacin de sfilis congnita en Amrica Latina y el Caribe: Marco de referencia para su
implementacin. Washington, D.C; 2004. Fecha de acceso 15 de Mayo 2008, URL Disponible
en: www.paho.org/Spanish/AD/FCH/AI/EliminaSifilisLAC.pdf.
9. OPS. Eliminacin mundial de sfilis congnita, fundamentos y estrategia de accin, 2008; Fecha
de acceso 15 de Mayo 2008, URL Disponible en: http://www.who.int/reproductive-
health/publications/es/congenital_syphilis/congenital_syphilis_strategy_es.pdf
10. OPS, Unidad VIH/SIDA. Hoja informativa sobre sfilis congnita. Washington, D.C., febrero 2004.
Hallado en: http://www.paho.org/Spanish/AD/FCH/AI/sfilis_cong_hi.pdf. Acceso: 1 de mayo de
2004. Valderrama, Julia
11. Boletn de la Organizacin Mundial de la salud, rganos de salud mundial Bol, vol.82 no.6
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12. Genc M, Ledger WJ. Sfilis durante el embarazo. infecciones transmitidas sexualmente 2000;
76:73 - 9
13. Larsen A. S., Creighton T. E. Rapid Plasma Reagin RPR test. En Pope V., Johnson R.E.,
Kennedy E.J., editors. A Manual Of Test For SYPHILIS. 9 th. Edition. Washington, DC. APHA;
1998. Cap. 10 P. 201-203.
14. Kennedy E.J., Creighton T. E. Unheated Serun Reagin (USR) test. en Larsen A. S., Pope V.,
Johnson R.E., editors. A Manual Of Test For SYPHILIS. 9 th. Edition. Washington, DC. APHA;
1998. Cp. 9 P.188 -191.
15. Kennedy E.J., Serodia Treponema Pallidum Pasive Particle Aglutination (TP-PA) Test . En Larsen
A. S., Pope V., Johnson R.E., editors. A Manual Of Test For SYPHILIS. 9 th. Edition. Washington,
DC. APHA; 1998. Cp. 20 P.365 -378.
Microbiologa
Fecha: 2011/07/14
12. CONTROL DE REGISTROS
CONTROL DE REGISTROS
IDENTIFICACION ARCHIVO DE GESTION ARCHIVO CENTRAL ARCHIVO
HISTRIC
O
ORDENACI TIEMPO METOD
METODO
ON RESPONSA DE O RESPONSA TIEMP
COD NOMBRE LUGAR UTILIZAD
DOCUMEN BLE RETENCI UTILIZA BLE O
O
TAL ON DO
REG- Formato Se ordena El Archivo 3 aos Se Archivo 5 Eliminaci

R01.001.5 de cronolgica profesional de Sfilis trasfiere Central aos n
030-118 resultado mente responsabl Satlite al
de sfilis e del archivo
VDRL- programa central
MHA-TP
Se
REG- Formato Se ordena El Archivo 3 aos trasfiere Archivo 5 Eliminaci
R01.001.5 de cronolgica profesional de Sfilis al Central aos n
030-119 resultado mente responsabl Satlite archivo
de e del central
RPR.MHA- programa
TP
13 CONTROL DE REVISIONES
FECHA
VERSIO APROBACION DESCRIPCIN
N AA MM D
D
00 201 07 14 Creacin de Documento
1
14. ANEXOS
N/A
Microbiologa
Fecha: 2011/07/14

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8. BUENAS PRACTICAS DE LABORATORIO 5

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Cada fundamento aparece con la prueba respectiva.

8. BUENAS PRCTICAS DE LABORATORIO

9. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS

10.1TAXONOMA DE TREPONEMA PALLIDUM

10.1.2. Factores de virulencia

1. El hapteno lipdico de Wasserman o cardiolipina: componente importante de los

2. Antgeno proteico especfico de grupo: se localiza en los endoflagelos (filamento axial)

3. Antgenos proteicos especficos: intervienen en la respuesta de base celular con fenmenos de

4. Antgenos polisacridos especficos: intervienen en las

En general, en el hospedero humano Treponema pallidum da lugar a la formacin de

Comportamiento del evento en Colombia

Historia de las pruebas diagnsticas para sfilis

Fecha Autor Hallazgo

Aplica la PCR para el diagnstico de neurosifilis.

Fuente American Public Healt Association

10.3.2 Pruebas no treponmicas microscpicas

PRUEBA DE VDRL- USR EN SUERO

sueros no inactivados adems en la prueba USR no se necesita preparar ni descartar el antgeno

PRUEBA CUALITATIVA EN SUERO

Con una micropipeta, coloque 50 l de suero dentro de un crculo de la lmina de vidrio.

Rote las lminas durante 4 minutos en un agitador mecnico a 180 2 rpm.

Informar los resultados de la siguiente manera:

Reactivo Reactivo Dbil No Reactivo

PRUEBA CUANTATIVA EN SUERO (TUBO)

Rotar la lmina de vidrio durante 4 minutos en agitador mecnico a 180 2 rpm.

Reporte cuantitativo de resultados en suero

PRUEBA DE VDRL EN LIQUIDO CEFALORAQUIDEO

Preparacin de la suspensin de antgeno:

Mezclar suavemente por rotacin o por inversin por 5 minutos.

Procedimiento prueba cualitativa

PRUEBA CUANTATIVA EN LCR

Descartar los 50 l restantes en el crculo de la ltima dilucin.

Rotar la lmina de vidrio durante 8 minutos en agitador mecnico a 180 2 rpm.

Reporte cuantitativo de resultados en LCR

10.3.3 Pruebas no treponmicas macroscpicas

Las pruebas de floculacin microscpicas estandarizadas son la RPR y TRUST

PRUEBA RPR EN SUERO

Puntas para pipeta automtica.

PRUEBA CUALITATIVA EN SUERO

Leer las pruebas inmediatamente despus de la rotacin microscpicamente a luz directa

Informar los resultados de la siguiente manera:

Suspensin homognea No Reactivo

PRUEBA CUANTATIVA EN SUERO

Leer macroscpicamente a la luz las pruebas inmediatamente despus de la rotacin,.

Reporte cuantitativo de resultados en suero

Reporte de pruebas no treponmicas

10.3.4 Pruebas treponemicas

Segn la definicin de caso de sfilis gestacional, establecida en el pas se ha determinado la utilizacin de

Gestantes detectadas en control prenatal que pueden no volver

Caractersticas VDRL (Venereal Disease Research TP-PA

Ventajas Ampliamente difundidas y disponibles No sirven para seguimiento

Desventajas Baja especificidad Permanece positiva de por

Costos Bajos Altos

Complejidad Baja Variable

Fuente: Gua de manejo sfilis congnita MPS

10.3.5 Syphilis TPHA Liquid

Es una prueba de hemoaglutinacin indirecta para la deteccin de anticuerpos especficos para