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Extraccin de ADN de vegetales y frutas

El cido desoxirribonucleico, abreviado como ADN, es un cido nucleico que contiene


instrucciones genticas usadas en el desarrollo y funcionamiento de todos
los organismos vivos conocidos y algunos virus, y es responsable de su transmisin
hereditaria. El papel principal de la molcula de ADN es el almacenamiento a largo plazo
de informacin. Muchas veces, el ADN es comparado con un plano o una receta, o
un cdigo, ya que contiene las instrucciones necesarias para construir otros componentes
de las clulas, como las protenas y las molculas de ARN. Los segmentos de ADN que
llevan esta informacin gentica son llamados genes, pero las otras secuencias de ADN
tienen propsitos estructurales o toman parte en la regulacin del uso de esta informacin
gentica.

Material necesario
- Un pltano - Batidora de mano - Matraz
- Filtro tipo cafetera - Embudo para filtrar - Alcohol 96 muy fro
- Pipeta Pasteur - Tubo de ensayo - Gradilla
- Vaso para batir - Agua destilada - Esptula
- Vaso de precipitados - Detergente tipo lavavajillas - Un poco de sal comn

1. Batir un pltano en 250 ml de agua destilada (o mineral en su defecto, pero no


del grifo) durante 15 a 20 segundos hasta obtener una papilla homognea.
2. Por otra parte, en un vaso de precitados pequeo se mezcla una cucharada de
champ o lavavajillas lquido con dos pizcas de sal de mesa.

3. Aadir 20 ml de agua destilada a la mezcla de champ y sal.


4.
Aadir ahora tres cucharaditas del pur de pltano a lo anterior y mezclar con la esptula
durante 5 10 minutos evitando formar espuma.
Durante este tiempo se pueden preparar los tubos de ensayo como se describe en el
siguiente punto y discutir la accin que desempean el detergente y la sal.
5. Preparar un tubo de ensayo con alcohol etlico por cada grupo y poner a enfriar lo
mximo que sea posible, por ejemplo en bao de agua con hielo. Mejor an si se ha
mantenido refrigerado hasta el momento de realizar la prctica.

6. Con los pasos anteriores hemos conseguido liberar el ADN en la disolucin acuosa,
la cual contendr tambin diversos restos tisulares y celulares. Para eliminar esos restos
dejamos filtrar la solucin durante varios minutos en papel de filtro, filtro de cafetera o un
pao de algodn suave, hasta obtener unos 5 ml de filtrado.
7. Para precipitar el ADN separndolo de la disolucin, se toma una parte del filtrado
con una pipeta Pasteur y se aade suavemente al tubo de ensayo que contiene el alcohol
muy fro. El filtrado, ms denso que el alcohol y algo turbio, se deposita en el fondo del
tubo. Dejar reposar durante 2 3 minutos sin moverlo en absoluto.

8. Veremos precipitar ADN de color blanco en la interfase con el alcohol y ascender


lentamente formando un grumo de aspecto algodonoso.
9. Podemos teirlo aadiendo unas gotas de azul de metileno o verde de metilo al
tubo.
10. Se puede extraer ADN del tubo recogindolo cuidadosamente con una varilla de
vidrio o un instrumento similar que se hace girar lentamente.

11. Ahora se pone un poco de ese ADN sobre un portaobjetos y se tie con azul de
metileno durante 3 minutos. Se limpia el porta y se lleva al microscopio para su
observacin.
12. Otra posibilidad es conservar el ADN obtenido por uno de los siguientes mtodos:
- en un frasco bien cerrado con alcohol etlico al 50% o 70%.
- dejndolo secar al aire extendido sobre papel de filtro.

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