RECUENTO DE HONGOS Y LEVADURAS

PNT-AL-021 Basado en la norma ISO 7954.

1. Definicin:
Comnmente se da el nombre de mohos a ciertos hongos multicelulares, dotados de un
micelio verdadero, microscpicos y cuyo crecimiento en alimentos se conoce por su
aspecto aterciopelado y algodonoso. Las levaduras son hongos que crecen generalmente
en forma de agregados sueltos de clulas independientes. Debido a su amplia dispersin
en todos los estratos biticos e inertes se desprende su fcil y frecuente aparicin como
contaminante en productos alimentarios, ya que estos, constituidos por sustancias
inorgnicas y orgnicas ms o menos complejas, constituyen excelentes medios de
reproduccin y crecimiento. La presencia de contaminantes fngicos en alimentos no
solo se interpreta como una fuente potencial de deterioro sino la posibilidad de que
muchos de ellos pueden producir micotoxinas.

2. Materiales
Pipetas estriles
6 cajas de petri estriles

3. Medios de cultivo
Agar Oxitetraciclina-glucosa-extracto de levadura (OGY), Agar extracto de levadura-
glucosa-cloranfenicol (YPG) o agar Rosa de Bengala-cloranfenicol.

4. Reactivos
Frasco de dilucin con 90 mL de agua peptonada bufferada
2 tubos de 16 x 150 mm tapa rosca con 9 mL de agua peptonada bufferada
Oxitetracilina (cuando se utiliza agar OGY)

5. Equipos
Incubadora a 25oC
Balanza
Contador de colonias
Pipeteador

6. Procedimiento
* Realice diluciones seriadas utilizando el procedimiento descrito en el PNT-01
* Sembrar por duplicado, en profundidad, 1 mL de las diluciones seleccionadas.
* Agregar el Agar fundido OGY (adicionar antes de servir la oxitetraciclina, siguiendo
las instrucciones de la casa comercial) o YPG (15 20 mL) y enfriarlo.
* Mezclar segn las instrucciones descritas en el PNT-01
* Una vez solidificado el Agar aplicar una capa sellante.
* Incubar a 25C por 5 das

NOTA: Cuando se carece de estos medios puede utilizarse el agar Rosa de Bengala-
Cloranfenicol, que tiene la caracterstica de inducir la esporulacin en los hongos,
delimitando el tamao del hongo y facilitando su recuento.

7. Recuento.
Contar las colonias de cada placa a los 3, 4 y 5 das de incubacin

8. Expresin de resultados

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 RECUENTO DE HONGOS Y LEVADURAS
PNT-AL-021 Basado en la norma ISO 7954.

* Despus de cinco das de incubacin, retener las placas que contengan un mximo de
150 colonias, si es posible al nivel de dos diluciones sucesivas.
* Calcular el nmero N de levaduras y hongos por mililitro o por gramo con la
expresin:
N = _______C ___ (1)
V.(n1) + (0.2 *n2) * d

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