UNIVERSIDADE FEDERAL DE PERNAMBUCO

CENTRO DE CINCIAS DA SADE

DEPARTAMENTO DE CINCIAS FARMACUTICAS
PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM CINCIAS FARMACUTICAS
DISSERTAO DE MESTRADO

DESENVOLVIMENTO FARMACOTCNICO INDUSTRIAL DA FORMA

FARMACUTICA COMPRIMIDO ASSOCIAO EM DOSE FIXA PARA
TRATAMENTO DA AIDS

DANILO AUGUSTO FERREIRA FONTES

RECIFE
2011
 UNIVERSIDADE FEDERAL DE PERNAMBUCO
CENTRO DE CINCIAS DA SADE
DEPARTAMENTO DE CINCIAS FARMACUTICAS
PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM CINCIAS FARMACUTICAS
DISSERTAO DE MESTRADO

DESENVOLVIMENTO FARMACOTCNICO INDUSTRIAL DA FORMA

FARMACUTICA COMPRIMIDO ASSOCIAO EM DOSE FIXA PARA
TRATAMENTO DA AIDS

Dissertao submetida ao Programa de Ps-Graduao em

Cincias Farmacuticas da Universidade Federal de
Pernambuco, como requisito parcial para obteno do grau
de Mestre em Cincias Farmacuticas na rea de
concentrao: Produo e Controle de Medicamentos.

Orientador: Prof. Dr. Pedro Jos Rolim Neto

RECIFE
2011
Fontes, Danilo Augusto Ferreira
Desenvolvimento farmacotcnico industrial da
forma farmacutica comprimido associao em dose
fixa para tratamento da AIDS / Danilo Augusto Ferreira
Fontes. Recife: O Autor, 2011.
123 folhas: il., fig., ; 30 cm.

Orientador: Pedro Jos Rolim Neto.

Dissertao (mestrado) Universidade Federal de

Pernambuco. CCS. Cincias Farmacuticas, 2011.

Inclui bibliografia e anexos.

1. AIDS. 2. Lamivudina. 3. Zidovudina. 4.

Efavirenz. 5. Comprimido. I. Rolim Neto, Pedro Jos.

II.Ttulo.

UFPE
615.43 CDD (20.ed.) CCS2011-180
 UNIVERSIDADE FEDERAL DE PERNAMBUCO

REITOR
Prof. Dr. Amaro Henrique Pessoa Lins

VICE-REITOR
Prof. Dr. Gilson Edmar Gonalves e Silva

PR-REITOR PARA ASSUNTOS DE PESQUISA E PS-GRADUAO

Prof. Dr. Ansio Brasileiro de Freitas Dourado

DIRETOR DO CENTRO DE CINCIAS DA SADE

Prof. Dr. Jos Thadeu Pinheiro

VICE-DIRETOR DO CENTRO DE CINCIAS DA SADE

Prof. Dr. Mrcio Antnio de Andrade Coelho Gueiros

CHEFE DO DEPARTAMENTO DE CINCIAS FARMACUTICAS

Prof. Dr. Dalci Jos Brondani

VICE-CHEFE DO DEPARTAMENTO DE CINCIAS FARMACUTICAS

Prof. Dr. Antnio Rodolfo de Faria

COORDENADOR DO PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM CINCIAS

FARMACUTICAS
Prof. Dr. Nereide Stela Santos Magalhes

VICE-COORDENADORA DO PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM

CINCIAS FARMACUTICAS
Prof. Dr. Ana Cristina Lima Leite
 AGRADECIMENTOS

A Deus, por ter me acompanhado por toda minha vida.

Aos meus pais (Daniel e Eliana) e irmos (Renata e Davi) pelo apoio e incentivo nas minhas
escolhas.

Aos meus familiares, em especial a meus avs: vov Ana e vov Dod (in memoriam), pela
confiana depositada em mim.

minha namorada Amanda Tavares, pelo companheirismo e aprendizado durante estes anos
de convivncia.

Ao Professor Pedro Rolim pela sua amizade e oportunidade a mim concedida no Laboratrio de
Tecnologia dos Medicamentos (LTM), que me proporcionou um imenso aprendizado. Continue
sempre nessa sua misso de formar pessoas, no s academicamente, mas para a vida. Saiba do
meu respeito e admirao por voc, muito obrigado!!!

equipe AIDS, Mnica, Lariza, Alexandre e Cludio, alm de Larissa, Mal e Raphael,
pela fora a mim prestada durante estes anos de projeto. Muito obrigado.

Aos demais companheiros do LTM, sempre prestativos e empenhados a ajudar quem quer
que seja.

Ao Programa e professores da Ps-Graduao em Cincias Farmacuticas da Universidade

Federal de Pernambuco (PPGCF UFPE), pela contribuio na minha formao.

Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Nvel Superior (CAPES) pela bolsa

concedida e FINEP Financiadora de Projetos, pelo apoio financeiro concedido para
realizao deste trabalho.

E a todos aqueles que direta ou indiretamente contriburam para a realizao deste trabalho.

Muito obrigado a todos!!!

Em cada medicamento que alivia as dores da
humanidade, est a cincia do farmacutico.
Autor desconhecido
 RESUMO
O presente trabalho apresenta o desenvolvimento tecnolgico de um novo produto comprimido
contendo a associao em dose fixa dos antirretrovirais zidovudina (AZT, 300 mg), lamivudina
(3TC, 150 mg) e efavirenz (EFV, 300 mg), de primeira escolha no tratamento antirretroviral. O
produto visa agregar novas vantagens terapia atual, devido ao menor nmero de comprimidos e
reduo dos custos produtivos, ao modificar a posologia do EFV e ao associar este ao produto
combinado contendo AZT e 3TC. Foi realizado estudo de compatibilidade frma-frmaco, tendo
por finalidade compreender as possveis interaes no estado slido entre os insumos
farmacuticos ativos (IFA); avaliando a possibilidade de se process-los em um nico produto,
sem mecanismos de segregao dos ps. O estudo possibilitou observar que a associao destes
no apresenta impedimentos fsicos, desde que estes no sejam fundidos durante o processo.
Observou-se tambm uma influncia positiva no incremento do percentual dissolvido do EFV
[devido a sua baixa solubilidade aquosa ( 9 g/mL)], quando associado aos outros dois IFA. O
desenvolvimento tecnolgico do comprimido apresentou trs principais entraves tecnolgicos
solucionados, dentre estes a dissoluo do EFV, a compatibilidade da formulao e a obteno
de um comprimido com dimenses adequadas, devido ao grande aporte de frmaco. Foi
realizado estudo de compatibilidade frmacos-excipiente, selecionando assim, os melhores
excipientes para a formulao. O comprimido foi obtido com peso de 900 mg, sendo 750 mg de
IFA e 150 mg de excipientes (celulose microcristalina, croscarmelose sdica,
polivinilpirrolinona, estearato de magnsio, dixido de silcio coloidal e lauril sulfato de sdio).
Todos os IFA apresentaram caractersticas inadequadas de fluxo, evidenciando a necessidade de
um processo produtivo de compresso por granulao via mida para a sua produo. Por meio
do teste de dissoluo desenvolvido e validado obteve-se, em 30 minutos, os valores mdios de
91,5% para o 3TC, 95,0% para o AZT e 90,2% para o EFV. As condies estabelecidas para o
teste de dissoluo foram aparato p com rotao a 100 rpm e 1000 mL do meio de lauril sulfato
de sdio a 1% (pH 6,8) a 37C 0,5C. O doseamento do comprimido foi realizado por mtodo
analtico desenvolvido e validado utilizando coluna cromatogrfica C18, fase mvel gradiente de
acetonitrila e gua purificada, 248 nm e tempo de corrida de 14 minutos. Conclu-se que a
abordagem integrada da tecnologia farmacutica proporcinou a obteno de um novo produto
farmacutico dentro das exigncias regulatrias e requisitos tcnicos selecionados.

Palavras Chave: efavirenz. Lamivudina. Zidovudina. Formulao. Comprimido.

Compatibilidade. Dissoluo.
 ABSTRACT

The present work presents the technological development of a new tablet containing the fixed
dose combination (DFC) of the antiretroviral drugs AZT (300 mg), 3TC (150 mg) and EFV (300
mg), of first choice for the antiretroviral therapy. The product aims to add new benefits to current
therapy, since modify the EFV dosage and associates this to the combination product of AZT
and 3TC. The drug-drug compatibility study aimed to understand the possible interactions
between them on solid state, evaluating the possibility to process them in a single product,
without different compartments and the effect of the interaction of them with water, present on
the manufacture process. This study allowed to observe that the association of these API had no
physical impediments to the association, provided that they were not melted during the process.
We also observed a positive influence on the EFV dissolution value, when combined to the
others API. The technological development of the tablet had three main technological problems
solved, among them the dissolution of the EFV, the compatibility of the formulation and obtain a
tablet with a small format. The drug-excipients compatibility study has selected the best
excipients for the formulation. The tablet was obtained weighing 900 mg, being 750 mg of API
and 150 mg of excipients (microcrystalline cellulose, croscarmellose sodium,
polivinilpirrolinona, magnesium stearate, colloidal silicon dioxide and sodium lauryl sulfate). All
API had presented inadequate flow characteristics, highlighting the need for a manufacture
process of compression by wet granulation. By means of dissolution test developed and validated
was obtained in 30 minutes, the values of 91.5% for 3TC, 95.0% for AZT and 90.2% for EFV.
The conditions for dissolution were paddle apparatus with rotation of 100 rpm and 900 mL of
medium of sodium lauryl sulfate 1% (pH 6.8) at 37C 0,5C. The tablet assay was performed
by a developed and validated method using a C18 chromatographic column, mobile phase
gradient of acetonitrile and purified water, 248 nm and 14 minutes running time. We concluded
that the pharmaceutical technology integrated approach allowed a new pharmaceutical product
within the regulatory requirements and selected technical requirements.

Keywords: Efavirenz. Lamivudine. Zidovudine. Formulation. Tablet. Compatibility.

Dissolution.
 LISTA DE ABREVIATURAS

3TC Lamivudina
CH3CN Acetonitrila
ADF Associao em Dose Fixa
AIDS Sndrome da Imunodeficincia Humana, em ingls
ANOVA Anlise de Varincia
Anti-HIV Contra o Vrus da Imunodeficincia Humana
ANVISA Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria
AZT Zidovudina
C Concentrao
CGE Eletroforese Capilar em Gel
CIEF Eletroforese Capilar com Focalizao
CITP Isotoforese Capilar
CLAE Cromatografia Lquida de Alta Eficincia
CM Celulose Microcristalina
CMS Croscarmelose Sdica
CV Coeficiente de Variao
CZE Eletroforese Capilar de Zona
DAD Detector de Arranjo de Diodos
dAP Densidades Aparente
DAS Anlise Espectromtrica Derivativa
dCP Densidade Compada
DP Desvio Padro
DS Disperso Slida
DSC Calorimetria Diferencial Exploratria
DSC-HCH Calorimetria Diferencial Exploratria com Aquecimento,
Resfriamento e Aquecimento, em ingls
DTA Anlise Trmica Diferencial
DTG Termogravimetria Derivada
EC Etilcelulose
EFV Efavirenz
ELC Eletroforese Capilar
EMEA rgo Regulatrio de medicamentos da Europa
EMg Estearato de magnsio
Endo Endotrmido
Exo Exotrmico
FDA rgo Regulatrio de alimentos e medicamentos dos Estados
Unidos
FEO Fluxo Eletroosmtico
FINEP Financiadora de Estudos e Projetos
FIOCRUZ Fundao Oswaldo Cruz
FTIR Infra Vermelho com Transformada de Fourier
GAS Glicolato de Amido Sdico
HAART Terapia Antirretroviral de Alta Eficincia, em ingls
HIV Vrus da Imunodeficincia Humana
HPC Hidroxipropilcelulose
HPMC Hidroxipropilmetilcelulose
ICH Conferncia Internacional de Harmonizao, em ingls
IFA Insumo Farmacutico Ativo
ISSN Nmero Internacional Normalizado para Publicaes
ITRN Inibidores da Transcriptase Reversa Anlogos de Nucleosdeo
ITRNN Inibidores da Transcriptase Reversa no anlogos de Nucleosdeo
IV Infravermelho
LAC 70 Lactose malha 70
LAC 80 Lactose malha 80
LAFEPE Laboratrio Farmacutico do Estado de Pernambuco
LSS Lauril Sulfato de Sdio
LTM Laboratrio de Tecnologia dos Medicamentos
M Molar
MEKC Eletroforese Capilar Micelar
MEV Microscopia Eletrnica de Varredura
MO Microscopia ptica
MS Ministrio da Sade
MCD metil--ciclodextrina
NVP Neviparina
ODS Octadecilsilano
OMS Organizao Mundial de Sade
PD Produto de Degradao
PEG Polietilenoglicol
PF Ponto de Fuso
PLS Tcnica de Regresso por Mnimos Quadrados
PLSR Regresso por Mnimos Quadrados Parciais
PM Peso Molecular
PVP Polivinilpirrolidona
Q Valor Dissolvido, em percentual
R Rotao
RMN Ressonncia Magntica Nuclear
SAP Princpio da Atividade Espectrofotomtrica
SCB Sistema de Classificao Biofarmacutica
SGS Suco Gstrico Simulado
TG Termogravimetria
UFPE Universidade Federal de Pernambuco
UNAIDS Programa Conjunto das Naes Unidas sobre AIDS
UR Umidade Relativa
USP 33 Farmacopeia dos Estados Unidos, em ingls
UV-Vis Ultra-Violeta Visvel
V Volume
 SIGLAS E SMBOLOS

% Percentual
< Inferior a
> Superior a
Mais ou menos, aproximadamente
Delta ou Variao
H Variao da energia entalpica
m Variao da massa
T Variao de temperatura
Marca Registrada
C grau Celsius
cm-1 por Centmetro
g/moL Grama por quantidade de matria
h Horas
J Joules
Jg Joule por grama
K Kelvin
Kg Kilograma
kHz Kilo Hertz
KJ Kilo Joules
L Litro
Log P Coeficiente de partio em octanol/gua
M Molaridade
mg Miligrama
mg/mL Miligrama por Mililitro
min Minutos
mL Mililitro
mL/min Mililitro por Minuto
mm Milmetro
mol Quantidade de matria
nm Nanmetros
p/p Peso/Peso
p/v Peso/Volume
pH Potencial Hidrogeninico
pKa Constante de dissociao cida
pKb Constante de dissociao bsica
ppm Partes por milho
psi Libra fora por polegada quadrada
r2 Coeficiente de correlao linear
rpm Rotaes por minuto
T onset Temperatura inicial da reao
Tf Ti Intervalo da reao, em temperatura
Tg Tranciso vtrea
UR Umidade Relativa
UV Ultravioleta
UV Vis Ultravioleta Visvel
v/v Volume/Volume
W/m2 Watt por Metro quadrado
Beta ou Razo de aquecimento
Comprimento de onda
g Microgramas
L Microlitro
L/mL Microlitro por Mililitro
m Micrometro
s Microsegundo
 LISTA DE FIGURAS
ARTIGO II
Figura 1. Diagrama de fluxo para a avaliao da interao frmaco-frmaco..............................52
Figura 2. Curvas de DSC de AZT+3TC+EFV (1:1:1), sob diferentes razes de aquecimento (a)
05Cmin, (b) 10Cmin, (c) 15Cmin e (d) 20Cmin, sob atmosfera de N2 em fluxo de 50
mL/min..........................................................................................................................................56
Figura 3. de DSC (a) AZT, (b) 3TC, (c) EFV, (d) AZT+3TC (1:1, p/p), (e) 3TC+EFV (1:1, p/p),
(f) AZT+EFV (1:1, p/p), (g) AZT+3TC+EFV (1:1:1, p/p/p), sob 10C.min -1 e atmosfera de N2
sob fluxo 50 mL/min.....................................................................................................................57
Figura 4. Curvas de TG de AZT+3TC+EFV (1:1:1) sob diferentes , sendo (a) 10Cmin, (b)
15Cmin e (c) 20Cmin, sob atmosfera de nitrognio em fluxo de 50 mL/min...........................59
Figura 5. Curvas de TG de (a) EFV, (b) AZT, (c) AZT+3TC+EFV (1:1:1) e (d) 3TC, sob de
10Cmin, sob atmosfera de nitrognio em fluxo de 50 mL/min...................................................60
Figura 6. Espectro de IVTF-ATR dos frmacos AZT, 3TC e EFV, suas mistura binria
AZT+3TC (1:1, p/p), EFV+AZT (1:1, p/p), EFV+3TC (1:1, p/p) e a mistura ternria
AZT+3TC+EFV (1:1:1, p/p/p)......................................................................................................71
Figura 7. Espectro de RMN 13C no estado slido de AZT, 3TC e EFV e AZT+3TC+EFV (1:1:1,
p/p/p).Figura 8. Proposta de mecanismo de degradao trmica do EFV.....................................73
Figura 8. Curvas de DSC-HCH de (a) AZT, (b) 3TC, (c) EFV e (d) AZT + 3TC + EFV (1:1:1,
p/p/p), sob atmosfera de nitrognio em fluxo de 50 mL/min........................................................75
Figura 9. (a) AZT + 3TC (1:1), (b) 3TC + EFV (1:1), (c) AZT + EFV (1:1), (d) AZT + 3TC +
EFV (1:1:1) , sob atmosfera de nitrognio em fluxo de 50 mL/min.............................................75
Figura 10. Cromotograma da mistura de AZT+3TC+EFV (1:1:1) aps a fuso..........................77
Figura 11. Sugesto do mecanismo de formao do PD1 da mistura fundida de AZT + EFV
(1:1)................................................................................................................................................78
Figura 12. Sugesto do mecanismo de formao do PD2 da mistura fundida AZT + EFV
(1:1)................................................................................................................................................79
ARTIGO IV
Figura 1. Cubo dos efeitos para o frmaco EFV, em percentual (%), com suas diferenas........112
 LISTA DE TABELAS

ARTIGO II
Tabela 1. Ilustrao do processo de fuso das amostras por microscopia ptica com
aquecimento...................................................................................................................................65
Tabela 2. Valores dos eventos trmicos ocorridos no processo de fuso das amostras por
DSC................................................................................................................................................67
ARTIGO III
Tabela 1. Lista de excipientes utilizados no estudo de pr-formulao........................................86
Tabela 2. Resultados do estudo de compatibilidade frmaco-excipiente por
termogravimetria...........................................................................................................................95
Tabela 3. Informaes dos frmacos aplicveis no desenvolvimento de um produto farmacutico
e sua avaliao...............................................................................................................................97
Tabela 4. Formualao selecionada para o produto.......................................................................98
Tabela 5. Controles de qualidade realizados para o produto.........................................................99
Tabela 6. Perfil de dissoluo comparativo.................................................................................101
ARTIGO IV
Tabela 1. Solubilidade dos frmcos EFV, AZT e 3TC em diversos meios.................................109
Tabela 2. Especificaes das variveis e seus respectivos sinais................................................110
Tabela 3. Resultados da seleo de variveis, em 30 minutos de dissoluo..............................110
Tabela 4. Efeitos mdios das variveis isoladas e em interao para o EFV (%).......................111
 SUMRIO
1 INTRODUO .......................................................................................................................17
2 OBJETIVOS ............................................................................................................................19
2.1 OBJETIVO GERAL ...............................................................................................................19
2.2 OBJETIVOS ESPECFICOS .................................................................................................19
3 JUSTIFICATIVA ....................................................................................................................20
4 CAPTULO I.............................................................................................................................21
4.1 DESAFIOS DE UMA ASSOCIAO EM DOSE FIXA
4.1.1 Artigo I - Questes tcnicas e desafios associados ao desenvolvimento de uma associao
em dose fixa na forma slida (Artigo a ser submetido Revista de Cincias Farmacuticas
Bsica e Aplicada; Qualis Capes para Farmcia: B5).................................................................22
5 CAPTULO II...........................................................................................................................48
5.1 ESTUDO DE COMPATIBILIDADE FRMACO-FRMACO
5.1.1 Artigo II - Estudo de interao frmaco-frmaco aplicado ao desenvolvimento de
formulao slida contendo a associao em dose fixa de zidovudina, lamivudina e efavirenz
(Artigo a ser submetido ao International Journal of Pharmaceutic; Qualis Capes para Farmcia
A1)..................................................................................................................................................49
6 CAPTULO III..........................................................................................................................82
6.1 DESENVOLVIMENTO FARMACOTCNICO
6.1.1 Artigo III - Desenvolvimento de novo comprimido antirretroviral contendo zidovudina,
lamivudina e efavirenz associados em dose fixa. Artigo a ser submetido ao AAPS PharmSciTech
Journal; Qualis Capes para Farmcia: B2).................................................................................83
7 CAPTULO IV........................................................................................................................104
7.1 DESENVOLVIMENTO E VALIDAO DO TESTE DE DISSOLUO
7.1.1 Artigo IV - Desenvolvimento e Validao de Teste de Dissoluo para Comprimido
contendo a Associao em Dose Fixa de Zidovudina, Lamivudina e Efavirenz. Artigo submetido
ao Journal of Pharmaceutical Sciences; Qualis Capes para Farmcia: A2).............................105
8 CONCLUSO GERAL .........................................................................................................115
9 PERSPECTIVAS ...................................................................................................................115
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ....................................................................................116
ANEXOS ....................................................................................................................................11
 17

1 INTRODUO
Segundo a UNIAIDS, cerca de 33,3 milhes de pessoas vivem com AIDS e a grande
parte dessa populao infectada reside nos pases em desenvolvimento, visto que o acesso
preveno primria e o diagnstico so restritos e muitas vezes inexistentes. Apenas em 2009,
mais 2,6 milhes de pessoas foram acometidas com a doena (UNIAIDS, 2010).
Segundo o boletim epidemiolgico do Departamento de Doenas Sexualmente
Transmissveis, AIDS e Hepatites Virais da Secretaria de Vigilncia em Sade do Ministrio da
Sade, houveram 544.846 casos de AIDS diagnosticados e notificados durante os anos de 1980 e
2009 (BRASIL, 2010). Contudo No Brasil, estima-se que o nmero total da populao infectada
residente no Brasil seja de aproximadamente 730 mil, classificando o pas como o de maior
incidncia de casos da Amrica Latina (UNAIDS, 2010).
As conseqncias clnicas da infeco por esse vrus devem-se sua capacidade em
desarmar o sistema imune do hospedeiro, devido depresso dos linfcitos que expressam,
superficialmente, o antgeno CD4+ que em conjunto com alteraes qualitativas e quantitativas
do sistema imune leva susceptibilidade do organismo s infeces oportunistas (GOLDMAN
& BENNET, 2001).
O acesso ao tratamento anti-retroviral aos pacientes infectados pelo HIV uma
prioridade de sade pblica mundial. Tendo em vista a necessidade de viabilizar alternativas que
aumentem a adeso e conseqentemente a eficcia teraputica, atravs do desenvolvimento de
formas farmacuticas que garantiro maior eficcia ao tratamento, menor custo de produo,
alm de acarretar uma melhora na potncia, durabilidade e convenincia da terapia anti-HIV
(FARIAS et al., 2006).
Desde 1996, ano da publicao da Lei 9.313, o Ministrio da Sade vem garantindo o
tratamento com anti-retrovirais a todos os portadores de HIV que se enquadram nas
recomendaes teraputicas vigentes no Brasil. Estas recomendaes so revistas e atualizadas
sempre que surgem novas drogas ou que as evidncias demonstram necessidade de mudana no
manejo das mesmas (BRASIL, 2007).
Atualmente, a terapia padro conhecida como terapia anti-retroviral de alta atividade
(HAART, sigla em ingls), a qual combina pelo menos trs frmacos, sendo dois inibidores da
transcripitase reversa anlogos de nucleosdeo (ITRN) associados a um inibidor da transcripitase
reversa no-anlogo de nucleosdeo (ITRNN) ou um inibidor de protease, sendo o primeiro, em
 18

geral, de posologia mais simples facilitando a adeso ao tratamento (LAURENT et al., 2005;
ROLIM-NETO et al., 2006).
A associao Zidouvidina/Lamivudina como ITRN mantida como dupla de primeira
escolha pelo Ministrio da Sade para compor o esquema anti-retroviral inicial, possuindo a
vantagem de ser disponvel em co-formulao, contribuindo para a comodidade posolgica,
amplamente utilizada em todo mundo e apresenta menor custo comparativo dentro da classe, o
que fortalece a sustentabilidade do acesso universal ao tratamento. Paralelamente dentro da
classe de ITRNN, o efavirenz continua sendo preferencial nevirapina, exceto para gestantes.
Essa opo est fundamentada na sua elevada potncia de supresso viral, comprovada eficcia
em longo prazo e ao menor risco de efeitos adversos srios (BRASIL, 2007).
O governo brasileiro vem sendo reconhecido, h muitos anos, como lder mundial
na defesa e garantia dos direitos de indivduos infectados por HIV/AIDS, estabelecendo o acesso
aos anti-retrovirais, para o tratamento da infeco pelo HIV, como direito de todos os seus
cidados. Mas, ao lado da distribuio, vem ganhando importncia a produo nacional de
medicamentos, que apresentada como uma estratgia fundamental para a manuteno do
programa de distribuio (BRASIL, 2001).
 19

2 OBJETIVOS
2.1 OBJETIVO GERAL
Desenvolvimento de Forma Farmacutica Slida (comprimido) Associao em Dose Fixa
base de Zidovudina, Lamivudina e Efavirenz para tratamento da AIDS.

2.2 OBJETIVOS ESPECFICOS

Realizar estudo de compatibilidade frmaco-frmaco entre os insumos farmacuticos

ativos da formulao;
Realizar estudo de pr-formulao dos excipientes candidatos a serem utilizados na
formulao para a obteno dos lotes de bancada;
Realizar controles de qualidades da forma farmacutica desenvolvida;
Desenvolvimento e Validao de mtodo de dissoluo para o comprimido;
Realizar o estudo de estabilidade acelerada e longa durao, segundo a RE n 1/2005
(ANVISA).
 20

3 JUSTIFICATIVA
Os esforos atuais focalizam na simplificao dos esquemas teraputicos de modo a
aumentar a adeso ao tratamento e o manejo dos efeitos colaterais. Para isso, vem sendo
desenvolvida formulao multifrmacos, denominadas dose fixa-combinada, que atravs da
associao de frmacos combinados em uma mesma forma farmacutica, trs como vantagens o
baixo custo, maior adeso ao tratamento, menor nmero de comprimidos/cpsulas administrados
(LANCELLOTTI & GAGLIANI, 2005).
Atualmente, cerca de 180 mil pessoas recebem seu tratamento gratuitamente pelo Sistema
nico de Sade, sendo a despesa de cerca de R$ 1 bilho por ano (BRASIL, 2008).
Com o desenvolvimento e a produo de um comprimido, pretende-se a administrao oral
de quantidades corretas dos frmacos; com suas integridades qumicas protegidas de modo
adequado, durante o intervalo de tempo e no local desejado. Portanto, objetiva-se do presente
estudo a obteno de comprimidos associao em dose fixa, utilizando-se de tcnicas variadas,
sendo adotados parmetros farmacopicos oficiais como padres de qualidade.
O desenvolvimento farmacotcnico e analtico reaalizar-se- sob os mais atuais critrios
nacionais e internacionais de estabilidade, planejamento, segurana, eficcia e rastreabilidade.
Alm disso, os estudos sero realizados por meio da parceria do Laboratrio de Tecnologia dos
Medicamentos (LTM) da Universidade Federal de Pernambuco (UFPE) e o Laboratrio
Farmacutico do Estado de Pernambuco (LAFEPE) que visa a produo do novo medicamento
que ser distribudo pelo Ministrio da Sade.
 21

4. Captulo I
4.1 DESAFIOS DE UMA ASSOCIAO EM DOSE FIXA

4.1.1. Artigo I - Questes tcnicas e desafios associados ao desenvolvimento de uma associao

em dose fixa na forma slida

Artigo a ser submetido Revista de Cincias Farmacuticas Bsica e Aplicada

Qualis Capes para Farmcia: B5
 22

4.1.1. Artigo I - Questes Tcnicas e Desafios Associados ao Desenvolvimento de uma

Associao em Dose Fixa na forma Slida

FONTES, D.A.F.1; SOARES, M.F.L.R.1,2; ALVES, L.D.S.1; LUZ, C.C.M.1; MOURA, M.L.C.1;
FERRAZ, L.R.M.1; ROLIM, L.A.1; ROLI-NETO, P.J1.

1
Laboratrio de Tecnologia dos Medicamentos, Departamento de Cincias Farmacuticas,
Universidade Federal de Pernambuco. Rua Arthur de S, s/n, Cidade Universitria, 50.740-521,
Recife PE, Brasil.
2
Ncleo de Tecnologia Farmacutica, Departamento de Bioqumica e Farmacologia,
Universidade Federal do Piau, Campus Universitrio Ministro Petrnio Portella, Ininga, 64.049-
550 Teresina PI, Brasil

RESUMO
A associao em dose fixa (ADF) pode ser entendida como uma combinao de razo fixa de
dois ou mais frmacos em uma mesma forma farmacutica. O desenvolvimento de uma ADF
est se tornando cada vez mais importante a partir de uma perspectiva de sade pblica. Tais
combinaes de drogas esto sendo usadas no tratamento de uma ampla gama de condies e so
particularmente teis no tratamento de HIV/AIDS, malria e tuberculose, que so consideradas o
principal ameaas de doenas infecciosas no mundo de hoje . Do ponto de vista industrial, de
maior interesse a utilizao de frmacos sintticos compondo uma ADF, do que associaes de
drogas vegetais, devido as vantagens tecnolgicas no controle de qualidade e estabilidades dos
frmacos sintticos. H diversas dificuldades no desenvolvimento destas associaes, uma vez
que a maior parte da legislao atual regula o registro e a produo dos produtos monofrmacos,
tendo que se estabelecer novos consensos para os casos associados. Sendo assim, o presente
artigo aborda assuntos relacionados ao desenvolvimento de uma ADF, enfatizando seus desafios
regulatrios, mercadolgicos, clnicos, farmacotcnicos e analticos.

Palavras Chave: Associao em Dose Fixa. Legislao. Mercado. Mtodos Analticos.

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INTRODUO
Desde os primrdios da histria registrada, combinaes de substncias naturais com
atividades teraputicas tm sido utilizadas para tratar disfunes orgnicas. A fitoterapia, um dos
segmentos da Medicina Tradicional Chinesa, exemplo vivo desta prtica. O advento
tecnolgico ocorrido no sculo XX possibilitou a manipulao de compostos qumicos extrados
da natureza, transformando o arsenal teraputico em produtos monofrmacos sintticos. Tais
produtos garantem, com maior facilidade, a padronizao de dosagem e a manuteno da
qualidade qumica, alm de uma maior estabilidade e, consequentemente, a ocorrncia de
menores falhas teraputcias e efeitos adversos. Estabeleceu-se ento na sociedade uma averso e
incredibilidade a traramentos associados, correlacionado este a terapias txicas, excessivas e
inconvenientes (CHOU, 2006).
Contudo, na ltima dcada do sculo passado, a sociedade retornou a procura por terapias
associadas, uma vez que esta foi desmistificada, reconhecendo-se as suas inmeras vantagens
teraputicas. Do ponto de vista industrial, de maior interesse a utilizao de frmacos sintticos
compondo uma associao em dose fixa (ADF), do que associaes de drogas vegetais, devido
as vantagens tecnolgicas no controle de qualidade e estabilidades dos frmacos sintticos
(GAUTAM & SAHA, 2004).
A ADF pode ser entendida como uma combinao de razo fixa de dois ou mais
frmacos em uma mesma forma farmacutica (BRASIL, 2010). O desenvolvimento de ADF est
se tornando cada vez mais importante a partir de uma perspectiva de sade pblica. Tais
combinaes de drogas esto sendo usadas no tratamento de uma ampla gama de condies e so
particularmente teis no tratamento de HIV/AIDS, malria e tuberculose, que so consideradas o
principal ameaas de doenas infecciosas no mundo de hoje .
Para registro destas, devem ser seguidos regulamentos tcnicos, que podem sofrer
variaes de acordo com o pas. No Brasil, por exemplo, o rgo regulador, a Agncia Nacional
de Vigilncia Sanitria (ANVISA), recomenda associaes com no mximo trs frmacos em
uma mesma forma farmacutica, ou quatro frmacos, sendo este ltimo a cafena. Porm pode
haver excees, como as novas associaes para o combate da tuberculose, que esto sendo
formuladas com quatro frmacos, seguindo novos regulamentos. Essas associaes sempre
visam segurana e eficcia clnica (BRASIL, 2010).
 24

H diversas dificuldades no desenvolvimento destas ADF, uma vez que a maior parte da
legislao atual regula o registro e a produo dos produtos monofrmacos, tendo que se
estabeler novos consensos para os casos associados. Diante do exposto, esta reviso busca trazer
ao leitor casos de sucesso e insucesso na pesquisa e desenvolvimento de produtos multi-
frmacos, sendo um guia para o delineamento de um produto ADF.

DESAFIOS MERCADOLGICOS
O desenvolvimento de produtos ADF ainda tem pouco embasamento terico e
regulatrio, possuindo um custo maior de desenvolvimento devido maior complexidade,
estimulado principalmente pelo maior custo analtico do mesmo e custos com pesquisas clnicas
ampliadas (GAUTAM & SAHA, 2004). Contudo, a produo industrial deste de custo
reduzido se comparado soma dos custos decorrentes da produo individual dos medicamentos
monofrmacos, uma vez que se economiza em custo produtivo, pessoal e operacional, alm de
adjuvantes farmacotcnicos, material de embalagem, rea de armazenamento, transporte e
registro.
A convenincia econmica para o desenvolvimento de produtos de combinao em dose
fixa pode ser difcil de determinar, devido aos desafios comerciais. Alguns destes podem ser
destacados como, provar que o produto diferenciado, que detm um benefcio teraputico,
compreenso do mercado para a associao e preo de produto adequado (BEST PRATICES,
2011).
H pases em que o acesso de medicamentos se d por aquisio individual, portanto,
preo mais elevado compromete de maneira significativa a adeso ao tratamento. Nos pases em
que o Estado garante a distribuio de medicamentos, como o Brasil, a preocupao com o custo
dos medicamentos crucial, pois, sendo mais alto, acaba por comprometer recursos, reduzindo o
acesso universal (WANNAMACHER & HOEFLER, 2007).
Para contornar este impasse, pesquisadores da tecnologia farmacutica vm atuando
profundamente nesse ramo de associao em dose fixa, a fim de atingirem pblico alvo, do qual
estejam necessitando de tais medicamentos. Facilitaes posolgicas aumentam a eficcia
teraputica, por meio do aumento da adeso terapia medicamentosa, alm da reduo de custos
 25

na produo e tolerabilidade semelhantes a outros esquemas teraputicos (SOARES SOBRINHO

et al., 2007).
Mais de um tero de todos os medicamentos novos introduzidos em todo o mundo
durante a ltima dcada foram preparaes em ADF. A tendncia variou de pas para pas. No
Japo, apenas 10% dos novos produtos foram ADF, enquanto que em pases europeus como a
Espanha, chegou a 56%. No entanto, no h dados concretos para pases subdesenvolvidos, pois
h uma estimativa de produo e uso, que ainda no se destaca. Na sua maioria, estas
preparaes compreendem vitaminas, antitussgenos, anti-diarreicos, preparaes de ferro,
anticidos, analgsicos e tnicos (PRESCRIPTION DRUG, 2010).
A Organizao Mundial de Sade (OMS) listou cerca de 350 medicamentos essenciais,
sendo que destes, apenas 24 esto formulados na forma de ADF. Em 2010, trs anos depois, o
quantitativo o qualitativo dos ADF da lista dos medicamentos essenciais da OMS no foi
alterado, estabilizou. Confirmando que a produo de uma associao requer mais tempo para
ser produzido, devido a procedimentos analticos que comprovem a qualidade e a relevncia do
produto, e ser mais caro quando se fala em ensaios clnicos que comprovem a eficcia
(RATHNAKAR et al., 2011).
Na ndia, no ano de 2007, foram listados cerca de 354 medicamentos essenciais, porm
apenas cerca de 14 estavam em formulads em ADF. Essa pequena proporo em relao aos
outros pases consequncia de uma grande cultura de medicamentos genricos no pas, onde a
produo de larga escala e a segurana e eficcia so aceitveis, sendo, portanto, de grande
consumo. Alm disso, recentemente, alguns produtos dose fixa foram retirados do mercado
indiano por falta de testes clnicos necessrios comercializao. (WANNAMACHER &
HOEFLER, 2007; PHARMA INFO, 2011).
Um bom exemplo para as vantagens que a produo de um novo medicamento ADF pode
nos trazer, est no novo esquema teraputico da tuberculose no Brasil. Este, produzido pela
Farmanguinhos Fundao Oswaldo Cruz (FIOCRUZ), com o apoio da OMS, uniu quatro
frmacos (Rifampicina, Isoniazida, Pirazinamida e etambutol) e, visa baratear o custo para o
tratamento da doena, e aumentar a adeso do paciente ao tratamento. Pois reduz de seis para
dois o nmero de comprimidos dirios que devem ser tomados pelos pacientes, facilitando a
adeso ao tratamento que, por ser longo (no mnimo seis meses), tem alto ndice de abandono.
 26

Segundo a OMS, nos pases que passaram a usar o medicamento essa taxa de abandono que era
de 8% caiu para 5%.
O projeto, realizado em parceria com laboratrio indiano Lupin, vai permitir que o Brasil
economize na aquisio de medicamentos contra a doena, que anualmente tem um custo de R$
11 milhes aos cofres pblicos. O custo para cada paciente, considerando o valor total da
medicao tomada nos seis meses, custava 40 dlares. Agora, com o novo medicamento ADF,
quatro em um, ir custar menos de 30 dlares por paciente (BRASIL, 2011).
muito mais difcil produzir um equivalente genrico para uma combinao em dose
fixa que para um monofrmaco; principalmente se o produto tiver propriedades especiais de
liberao. Dessa forma, muitos fabricantes lanam mo de uma formulao ADF para assegurar
sua posio no mercado farmacutico (WANNAMACHER & HOEFLER, 2007).

DESAFIOS REGULATRIOS
Atualmente, no h diretrizes especficas no que diz respeito obteno de produtos
ADF. Algumas autoridades tm desenvolvido suas prprias normas para o desenvolvimento
dessa classe de medicamento. Outros, buscam informaes contidas no Anex 5 do Expert
committee on specifications for pharmaceutical preparations da Organizao Mundial da Sade
(OMS), denominado International guidelines that relate directly to fixed-dose combination
finished pharmaceutical products, que presta assessoria aos pases que no tm ainda
orientaes para este tipo de produtos.
Tais informaes so provenientes de uma reunio ocorrida em maro de 2004 em
Botswana, onde foi estabelecida uma conferncia cientfica, a qual emitiu o Scientic and
technical principles for xed dose combination drug products; um projeto que oferece os
principais passos para a obteno e desenvolvimento das associaes medicamentosas. Alm
disso, fornece as principais informaes necessrias para a aprovao desses medicamentos,
como: as medidas necessrias para a realizao de ensaios farmacolgicos e toxicolgicos,
comprovao de segurana e eficcia e at mesmo em relao aos testes de bioequivalncia
caractersticos para ADF (WHO, 2011).
Nos Estados Unidos, as diretrizes relacionadas regulamentao de associaes de
medicamentos podem ser encontradas no site da FDA atravs da pesquisa com o termo Fixed
dose combination, onde encontraremos diversos documentos tcnicos, matrias e questionrios
 27

disponveis para consulta.

O documento Current Good Manufacturing Practice for Combination Products, datado
de setembro de 2004, Current Good Manufacturing Practice for Combination
Productsestabelece orientaes sobre a aplicabilidade das boas prticas de fabricao para
produtos combinados. Assegurando assim, que o produto no seja adulterado, possua qualidade,
identidade e pureza, e esteja em conformidade com os padres desejados para comercializao.
Estas orientaes no abordam mtodos/tcnicas de fabricao, ou recomendaes nas
instalaes/infraestrutura de fabricao (FDA, 2004).
O documentoEarly Development Considerations for Innovative Combination Products
datado de setembro de 2006, Early Development Considerations for Innovative Combination
Products estabelece orientaes sobre o desenvolvimento de produtos inovadores que
combinam dispositivos, drogas e / ou produtos biolgicos. Destina-se a fornecer um contexto
para as discusses iniciais sobre o tipo de informao cientfica e tcnica que possam ser
necessrias para aplicaes de investigao ou de marketing para estes produtos combinados.
Os conceitos tambm podem ser teis para o co-desenvolvimento de dispositivos, drogas
e produtos biolgicos que so utilizados concomitantemente, mas que no se enquadram na
definio de regulamentao de um produto combinado. (FDA, 2006).
O documento Fixed dose combination and co-packaged drug products for treatment of
HIV, datado de maio de 2004 aborda apenas trabalhos envolvendo antiretrovirais utilizados na
terapia anti HIV, servindo de referncia para as demais classes de frmacos. Este, demonstra a
participao da FDA nas fases de pesquisa e desenvolvimento com os requerentes que
apresentarem propostas de combinaes plausveis, justificadas e que garantem, por exemplo, a
segurana e eficcia do produto. Este documento conta com um apndice que consiste de trs
anexos. O anexo A descreve o cenrio da regulamentao para a aprovao de medicamentos
ADF; o anexo B, lista exemplos de combinaes duplas e triplas de frmacos que j dispes de
dados clnicos, reviso literria e apoio da prpria FDA no que diz respeito eficcia e
segurana do produto; e por fim o anexo C, que lista as combinaes consideradas no aprovadas
pelo FDA.
Como exemplo, indexado ao anexo B, est um trabalho que avalia e compara a atividade
e a segurana das cpsulas contendo revestimento entrico base de didanosina, administrada
uma vez por dia com estavudina e nelfinavir, com o de um esquema trplice de frmacos de
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referncia de zidovudina mais lamivudina e nelfinavir. No seu estudo, concluiu-se que a eficcia
antiviral de um regime de combinao tripla contendo didanosina (como revestimento entrico)
administrada uma vez por dia semelhante ao de uma combinao esquema trplice de
referncia (FDA, 2006b; GATHE-JR et al.; 2002).
Outra associao encontrada neste apndice a de Zidovudina+Lamivudina, que j
aceita pela FDA e comercializada pelo nome de Trizivir e o Combivir como medicamento de
referncia, assim, qualquer estudo que envolva essa associao e passa pela submisso da FDA
pode ser indexado como base literria de referncia o anexo B.
J no Anexo C, destacam-se aquelas combinaes que j foram reprovadas pela FDA, como
Estavudina+Zidovudina e Didanosina+Zalcitabina, as ADF apresenta diminuio do potencial
antiviral e/ou sobreposio de toxicidade (YENI et al.; 2002).
Uma vez avaliadas pela a FDA e reprovadas, ora por no cumprir com os requisitos
necessrios, ora por negligncia da justificativa; as formulaes ADF podem ser promovidas
para as naes dotadas de menor recurso. A autoridade norte-americana alega que o produto
pode oferecer vantagens em custo, facilitando a adeso do paciente a este tipo de terapia, desde
que sejam feitos todos os testes de segurana e eficcia que garante a qualidade do medicamento.
Uma aprovao provisria para estas associaes pode ser emitida pela FDA mesmo para
aqueles frmacos que no so comercializadas nos Estados Unidos. Esses so submetidos a
constantes revises supervisionadas pela FDA, devendo assegurar a mesma segurana e eficcia,
bem como os padres de qualidade como estudos de bioequivalncia das demais substncias j
referenciadas. (FDA, 2006b).
Assim como a FDA no Estados Unidos, outra entidade governamental trata dessas
normas na Europa, a European Medicines Agency (EMEA). A EMEA apresenta guias prprios
para o desenvolvimento de produtos ADF (Guideline on fixed combination medicinal products
e Guideline on clinical development of fixed combination medicinal products), que amparado
em suas bases jurdicas pelos artigos 10b e 8.3 do Directive 2001/83/EC. Alm da obrigao de
entrega de relatrios que comprovem a segurana e eficcia da combinao dos medicamentos,
os requerentes que desejam submeter suas propostas ao EMEA devem emitir uma justificativa
que contenha a razo da escolha dos medicamentos e a finalidade teraputica proposta. O parecer
da entidade indispensvel nessa fase da regulamentao (EMEA, 2009).
 29

Na Austrlia, situada no continente ocenico, mesmo contendo uma agncia reguladora, a

Therapeutic Goods Administration, segue as orientaes regidas pela EMEA. Apresentando em
seu site, cpias idnticas dos documentos elaborados pela agncia europia para as associaes
em dose fixa (TGA, 2004).
No Brasil, a Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria (ANVISA) dita as orientaes para
a elaborao de uma nova associao de medicamentos atravs do Guia para registro de novas
associaes em dose fixa.
O registro preconiza que as novas formulaes tenham trs frmacos ou at quatro,
sendo um deles a cafena. Os dados de segurana e eficcia devem ser obtidos a partir de estudos
clnicos utilizando a prpria combinao dos frmacos em ADF ou administrando isoladamente
as drogas concomitantemente. Nesse ltimo caso, so necessrios estudos de bioequivalncia
entre as monofrmacos para que os dados dos estudos clnicos possam ser extrapolados para a
associao que se pretende registrar.
Assim como o guia da FDA, a ANVISA possibilita trs diferentes situaes em que a
proposta de registro deve estar enquadrada. Dentre elas: quando os frmacos da associao j
esto presentes em um regime de tratamento com o uso concomitante dos monofrmacos, onde a
segurana e eficcia so atestadas por dados clnicos; quando os monofrmacos possuem perfil
de segurana e qualidade bem estabelecidos, porm no na dose que ser utilizada na associao,
sendo ento necessrios novos estudos clnicos de Fase II e Fase III; e quando um ou mais dos
ativos so substncias novas no pas, portanto se faz necessrio a conduo completa dos estudos
clnicos e no-clnicos (BRASIL, 2010).
Porm, se a ANVISA achar necessrio, poder editar em conjunto com sociedades
mdicas especializadas, guias de orientao cientfica para o registro sanitrio desses produtos,
citando as associaes com maior potencial de enquadramento s citaes acima.
Os solicitantes ainda devem expedir uma carta de justificativa da racionalidade da nova
associao. Esta deve conter informaes bsicas como os efeitos de sinergismo ou somao
obtidos com a combinao, reduo de efeitos adversos comparados os monofrmacos e /ou
maior eficcia.
Contudo, se o requerente de qualquer nao apresentar uma proposta a qual no se aplica
a nenhuma das diretrizes publicadas nos seus respectivos guias, pode-se emitir uma justificativa
e provas plausveis de segurana e eficcia e a garantia do controle de qualidade dos novos
 30

medicamentos ADF, desde que esses relatrios sejam submetidos aprovao pelas autoridades
locais.
O pedido de autorizao de introduo no mercado de produtos ADF pode incluir: dados
inteiramente originais, de reviso literria e relatrios hbridos. Este ltimo caso mais comum.
Isso pode ser explicado pela quantidade de dados cientficos contidos na literatura.
Para isso, as indstrias podem recorrer , um projeto nico que rene as
autoridades regulatrias da Europa, Japo, Estados Unidos e especialistas da
indstria farmacutica das trs regies para discutir os aspectos tcnicos e cientficos do registro
de medicamentos.
Essa entidade tem por objetivo International Conference on Harmonisation of Technical
Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use
(ICH)fazer recomendaes sobre as maneiras de alcanar uma maior harmonizao na
interpretao e aplicao das diretrizes tcnicas e exigncias para registro do medicamento, a
fim de reduzir ou eliminar a necessidade de repetir os testes realizados durante a pesquisa e
desenvolvimento de novos medicamentos. A ICH oferece diretrizes como: fatores tnicos,
estudos de eficcia, ensaios clnicos e pr-clnicos (ICH, 2006).

DESAFIOS CLNICOS
amplamente aceito que a maioria dos medicamentos deva ser formulada com frmacos
isolados. O registro de uma associao medicamentosa se justifica quando h uma populao de
pacientes definida para a qual uma combinao particular de ativos em uma razo fixa de doses
tenha se demonstrado ser segura e eficaz, e quando todos os princpios ativos contribuem para o
efeito teraputico (ANVISA, 2010; GAUTAM & SAHA, 2004). Alm disso, a combinao de
frmacos tambm pode produzir efeitos farmacocinticos de tal forma que a atividade
teraputica de um frmaco pode ser potencializada ou reduzida pelo outro frmaco associado
atravs da regulao de sua absoro, distribuio, metabolismo e excreo (JIA et al., 2009).
Neste sentido, a combinao de frmacos tem sido amplamente utilizada tanto em formas
isoladas como na forma de ADF, tornando-se a principal escolha para o tratamento de doenas
crnicas como hipertenso, diabetes e AIDS. Nessa fase da enfermidade, cujo tratamento exige o
uso continuado de medicamentos, a ocorrncia de falhas na terapia frequente, uma vez que os
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regimes de tratamento requerem um forte compromisso do paciente, que em algumas

circunstncias, precisa mudar seu estilo de vida para cumpri-las (ROCHA et al.; 2008). As
causas mais comuns de falhas durante um tratamento so devido aos efeitos colaterais, reaes
adversas, o preo do produto, nmero de doses, entre outros (OIGMAN, 2006).
Dentre as vantagens de se desenvolver uma associao esto, alm dos custos reduzidos
na produo e logstica; a eficcia, melhor adeso do paciente, simplificao posolgica, devido
ao menor nmero de comprimidos/cpsulas, evitando troca entre os medicamentos e
tolerabilidade semelhantes a outros esquemas teraputicos. A simplificao posolgica uma
das mais importantes caractersticas, visto que a situao contrria justamente o principal
motivo da ineficcia de grande parte dos tratamentos (SOARES-SOBRINHO et al., 2007).
Combinaes de duas ou mais drogas antirretrovirais, como aquelas enumeradas no
Anexo B da FDA, no so o nico tipo de ADF adequada para as combinaes. Por exemplo,
o Kaletra (lopinavir/ritonavir), uma ADF aprovada, um antirretroviral combinado com
um reforo metablico, uma dose baixa de ritonavir (um inibidor do citocromo P450 3A)
usada para aumentar as concentraes plasmticas de lopinavir, o componente responsvel pela
a eficcia antiviral (WHO, 2005).
No Brasil, pode-se encontrar no Formulrio Teraputico Nacional 2010, diversas
formulaes ADF utilizadas pelo Ministrio da sade, com suas devidas justificativas e, atuantes
em diversos acometimentos de sade. Como exemplo, na classe de anestsicos e adjuvantes
encontramos Paracetamol+Codena, na classe de Sulfonamdeos e antisspticos urinrios
encontramos Sulfametoxazol + trimetoprima, na classe dos Contraceptivos hormonais orais
encontramos Etinilestradiol + levonorgestrel, dentre outras formulaes (BRASIL, 2010b).
Destaca-se como exemplo de associaes obtidas com xito a combinao de
artemisinina e lumefantrina, primeira ADF base de artemisinina a atender os critrios de pr-
qualificao da OMS para a segurana, eficcia e qualidade Organizao Mundial da Sade.
Ambos artemisina e lumefantrina so antimalricos, possuem farmacocintica complementares e
diferentes modos de ao e, portanto, atividade anti-malrica sinrgica. Artemisinina
rapidamente eliminada do plasma com uma meia-vida de 2-3 horas, enquanto lumefantrine
eliminado mais lentamente com uma meia-vida de 3-6 dias e oferece uma alta taxa de cura a
longo prazo aps um tratamento de curta durao. A combinao fornece, assim, o afastamento
rpido da parasitemia e sintomas mais relacionados com a malria, juntamente com a preveno
 32

da recrudescncia (MAKANGA & KRUDSOOD, 2009).

Outro exemplo de combinao de medicamentos de sucesso observado na formulao
de cido acetilsaliclico e cafena. A cafena quando administrada simultneamente com o cido
acetilsaliclico capaz de potenciar os efeitos do cido, enquanto que isolada, no possui efeito
algum analgsico ou antiinflamatrio. Vrios autores tm demonstrado que a cafena capaz de
potencializar os efeitos antinociceptiva de cido acetilsaliclico ou cetoprofeno em vrios
modelos de dor (FERNNDEZ-DUENAS et al., 2008).
Esforos tm sido feitos para promover a teraputica com ADF, no entanto, ao longo dos
anos problemas como falha na biodisponibilidade, instabilidade das formulaes,
desenvolvimento de resistncia e aumento dos efeitos txicos e alrgicos, devido a formulaes
irracionais, denegriram a imagem destas associaes em algumas naes. (CAVALCANTI et al.,
2009). A preocupao mais premente com ADFs irracionais, que elas expem os pacientes a
riscos desnecessrios de reaes adversas a medicamentos, por exemplo: formulaes peditricas
de nimesulida e paracetamol. Nimesulida sozinho mais antipirtico que o paracetamol, mais
antiinflamatrio que o cido acetil saliclico, e equivalente em analgesia a qualquer um dos
antiinflamatrios no esteridais isoladamente. Portanto, os pacientes podem estar sujeitos a um
aumento dos efeitos hepatotxicos devido combinao, pois trona-se desnecessria a
associao com o paracetamol (GAUTAM & SAHA, 2004).
Apesar de existirem associaes irracionais no mercado, devemos tambm destacar que
muitas outras foram feitas de forma racional e confivel, a ponto de serem inseridos aos
programas de sade pblica em diversos pases como um exemplo: programa de combate
HIV/AIDS e tuberculose no Brasil, associao com Lamivudina+Zidovudina e
Etambutol+Rifampicina+Isoniazida+Pirazinamida respectivamente; programas contra a malria
na frica sub-saariana com a combinao de artesunato e amodiaquina dentre outras (BRASIL,
2010b; DNDi, 2007).

DESAFIOS TCNICOS E PRODUTIVOS

No Brasil, os medicamentos referncias registrados como ADF incluem diferentes
apresentaes para terapia de doenas variadas, prevalecendo as formas farmacuticas slidas
comprimidos e cpsulas gelatinosas duras, tendncia esta observada em todo o mundo (BRASIL,
2010).
 33

Pesquisas na rea da tecnologia farmacutica so de suma importncia no

desenvolvimento dessas associaes. Pois, deve-se levar em considerao essencialmente a
associao racional das matrias primas ativas e inertes, visando conferir compatibilidade fsica
e qumica entre os mesmos.
Apesar das formas farmacuticas slidas apresentarem menores instabilidades qumicas
quando comparado s formas lquidas, devido a menores interaes qumicas entre frmacos e
adjuvantes, as propriedades inerentes desses precisam ser considerados no desenvolvimento
farmacotcnico industrial. Diante deste aspecto, durante a produo dessas formas so utilizadas
diferentes estratgias que possibilitem a associao de frmacos, principalmente quando se trata
de frmacos com propriedades diferenciadas de reologia, solubilidade e biodisponibilidade.
Um dos primeiros pontos a serem considerados no processo de fabricao a tcnica de
produo a ser utilizada, sendo sua escolha dependente principalmente das caractersticas de
compressibilidade e escoabilidade dos frmacos para a compresso (BOLHUIS &
ARMSTRONG, 2006).
As mquinas compressoras de alta performance, com rendimentos de produo de
100.000 a 200.000 comprimidos/h, exigem materiais com excelentes propriedades reolgicas e
de compactao (JATO, 1997). Alm disso, para a indstria farmacutica, a compresso direta
tem sido apontada como o procedimento de escolha para a produo de comprimidos dada a sua
rapidez, simplicidade e menor custo, quando comparado aos mtodos tradicionais de granulao.
Por outro lado, os comprimidos elaborados por esta tcnica so mais estveis do ponto de vista
fsico-qumico e microbiolgico, uma vez que se reduz consideravelmente o nmero de etapas de
fabricao, evitando expor os princpios ativos umidade ou a estresse luminoso, trmico e
mecnico, inerentes aos mtodos de granulao (S BARRETO & CUNHA-FILHO, 2009).
Logo, a produo de ADF por esta tcnica prefervel nos casos em que os frmacos apresentam
caractersticas fsicas favorveis a este processo.
No caso da possibilidade de aplicao da compresso direta ou mesmo de outra tcnica,
mas que os frmacos apresentem incompatibilidade, impedindo a juno destes numa mesma
fase da forma farmacutica, pode-se optar por uma compresso multicamadas.
Apesar de todas as vantagens relacionadas compresso direta, estima-se que menos de
20% dos materiais farmacuticos sejam capazes de serem submetidos a este processo, devido as
propriedades de fluxo, coeso ou lubrificao insatisfatrias (GOHEL & JOGANI, 2005); j que
 34

a maioria dos frmacos possuem caractersticas elsticas, e no permanecem compactados aps a

compresso (PAULA & RIBEIRO, 2001).
Logo, grande parte das formas farmacuticas slidas atuais, principalmente os
comprimidos, so obtidos por granulao via seca ou mida, sendo esta ltima a mais
frequentemente empregada, devido aos granulados apresentarem boas caractersticas de fluxo e
coesividade(CURY, 2007). A granulao por via mida um processo muito difundido e que
apresenta boas caractersticas, principalmente quando envolve formulaes que sofrero
processos de revestimento, uma vez que fornece um granulado de melhor qualidade
(GENNARO, 2004).
A granulao por via seca empregada quando o frmaco apresenta instabilidade frente a
umidade ou ao calor da operao de secagem, ou quando excessivamente solvel nos lquidos
umectantes utilizados (SOARES & PETROVICK, 1999). Em geral, a maior vantagem desse tipo
de granulao a ausncia de gua ou de solventes orgnicos, sendo especialmente atrativa para
frmacos susceptveis a degradao pela ao da umidade ou temperatura, empregadas no
processo de obteno por granulao mida. Adicionalmente, tambm muito utilizada para
frmacos que so muito solveis em gua (BANKER & ANDERSON, 2001; KLEINEBUDDE,
2004).
Na utilizao dos processos que utilizam a granulao, o principal objetivo de obter
granulados que diminuam a segregao dos constituintes devido a diferena de tamanho e/ou
densidades dos componentes; alm de melhorar as propriedades de fluxo da mistura e de
compactao da mistura de frmacos e adjuvantes (AULTON, 2005). Logo, os grnulos, por
serem mais densos do que a mistura pulvrea, ocupam um menor volume, proporcionando a
uniformidade da forma farmacutica, sendo esta caracterstica de fundamental importncia na
associao de frmacos em que seja alto o aporte de frmacos.
Uma abordagem utilizando granulao e compresso, pode ser exemplificada na
produo de ADF de Zidovudina (AZT) associada a lamivudina (3TC) e a Nevirapina (NVP),
nas dosagens 300 mg, 150 mg e 200 mg respectivamente. Quando os lotes foram produzidos por
compresso direta, o aporte de Insumos Farmacuticos Ativos em relao ao peso mdio do
comprimido limitou a ao dos excipientes, apresentando friabilidade, dureza inferior ao
especificado e aderncia aos punes durante o processo de compresso, ocasionando uma alta
 35

variabilidade no peso dos comprimidos. J por granulao via mida, os lotes produzidos
atenderam s especificaes definidas previamente (LAVRA, 2006).
Quando o alto aporte dos frmacos um fator limitante, devido a pouca flexibilidade na
formulao, pela utilizao restrita de adjuvantes/excipientes necessrios ao processo de
compresso, pode-se optar pela formulao em cpsulas.
No caso da utilizao das cpsulas gelatinosas duras, utiliza-se grnulos para o
enchimento destas, eliminando o fator presso, exercido pela compresso em comprimidos,
diminuindo a interao fsica e qumica entre os constituintes e consequentemente das possveis
interaes indesejveis que possam vir a ocorrer. Ainda levando em considerao esse aspecto,
tambm possvel o desenvolvimento de grnulos produzidos separadamente contendo frmacos
diferentes, que podero ser veiculados juntos em uma nica dosagem.
So necessrios estudos de compatibilidade qumica e fsico-qumica entre os frmacos e,
desses, com os possveis excipientes; ensaios de degradao sob condies de estresse de cada
componente da associao; testes de uniformidade de contedo antes da compresso ou
preenchimento da forma farmacutica.

CONTROLE DE QUALIDADE E DESAFIOS ANALTICOS

Em geral, as metodologias citadas em compndios oficiais para doseamento de frmacos
se restringem a trs mtodos: volumetria por neutralizao ou oxi-reduo, espectrometria de
ultravioleta e visvel e cromatografia de alta eficincia (CLAE) com detector Ultra-Violeta
Visvel (UV-Vis). Contudo, para o doseamento simultneo de frmacos, como o caso das ADF,
a literatura e alguns compndios oficiais, como a USP 33, citam como mtodos mais comuns
para doseamento de tais formulaes o CLAE acoplado a espectrmetro de massas ou com
detector UV-Vis ou de arrajo diodo (DAD), alm da eletroforese e espectroscopia no ultravioleta
e infravermelho, associada quimiometria.

Cromatografia Lquida de Alta Eficincia

Para o doseamento simultneo de frmacos em ADF, deve-se inicialmente avaliar as
propriedades fsico-qumicas dos frmacos em questo, e realizar um levantamento bibliogrfico
sobre os principais mtodos analticos existentes para doseamento dos frmacos separadamente.
 36

Diante desse levantamento, a a etapa inicial no desenvolvimento do mtodo, visto que a

maioria das indstrias farmacuticas possuem apenas cromatgrafos acoplados a escolha do
detector UV-Vis ou a DAD, devido ao custo mais acessvel. Porm outros detectores tambm
podem ser utilizados e so descritos na literatura, especialmente para doseamento de
multifrmacos com polaridades semelhantes de difcil separao cromatogrfica.
Paralelamente, as caractersticas qumicas dos frmacos em associao tambm so
determinantes para tal escolha, pois a utilizao do CLAE acoplado ao DAD pode ser
exemplificada em duas situaes corriqueiras. A primeira trata-se de quando o detector
utilizado apenas no desenvolvimento do mtodo, como Leal e colaboradores (2007) que
desenvolveram um mtodo capaz de dosear simultaneamente quatro frmacos utilizados no
tratamento de doenas reumatolgica: prednisona, ciclobenzaprina, diacerena e meloxicam,
sendo utilizado apenas um comprimento de onda (230 nm) para o monitoramento, visto que os
frmacos apresentaram absortividade semelhante neste comprimento de onda. A segunda
situao seria quando os frmacos no apresentam absortividade semelhante e, portanto, o
doseamento necessita ser monitorado em dois ou mais comprimentos de onda, como o descrito
por Soares e colaboradores (2010) no doseamento simultneo de frmacos antirretrovirais:
lamivudina, zidovudina e efavirenz, que precisa ser monitorado em 248 e 274 nm.
Adicionalmente ao detector, outras variveis devem ser analisadas durante o
desenvolvimento de um mtodo analtico por CLAE, como a composio da fase mvel ou
sistema eluente. Os modernos sistemas de bombeamento consistem de uma ou mais bombas
controladas por computador que podem ser programadas para variar a relao de componentes
da fase mvel, como exigido por um composio da fase mvel ou sistema eluente gradiente
de solventes, ou a mistura isocrtica de fases mveis (ou seja, fases mveis em um fixo
proporo de solventes). Estes sistemas suportam presses de funcionamento de at 5000 psi ou
superior, com taxa de entrega de at cerca de 10 mL por min.
Frmacos com polaridades distintas, como o caso do sulfato de albuterol e o ipatrpio,
utilizou-se um gradiente de uma soluo tampo de fosfato de potssio monobsico acidificada
(pH 4) e acetonitrila em varias propores variando de 85:15 a 50:50 para o doseamento
simultneo destes frmacos e suas substncias relacionadas. Nestes casos, gradientes de fase
mvel so utilizados para que a composio da fase mvel varie ao decorrer da anlise,
 37

modificando assim a polaridade da mesma para eluio de frmacos com diferentes polaridades
(KASAWAR & FAROOQUI, 2010).
Por outro lado, quando os frmacos so quimicamente semelhantes com relao
polaridade, o mtodo analtico para doseamento simultneo resulta de adaptaes dos mtodos
para doseamento dos frmacos isolados. Como exemplo, podemos citar o doseamento do
mebendazol e o tiabendazol que foram quantificados simultaneamente em CLAE-DAD com
coluna C18, utilizando fase mvel de tampo fosfato de potssio monobsico 0,05 mol.L -1 e
metanol na proporo de 40:60 (v/v), em um fluxo de 1,0 mL.min-1, mtodo bem semelhante ao
j descrito em compndios oficiais para os frmacos isolados (USP, 2010).
Alm das variaes de composio da fase mvel e fluxo tambm possvel avaliar a
variao da fase estacionria, bem como a alterao da viscosidade da mesma ao variar-se a
temperatura de anlise. A fase estacionria mais utilizada no caso de fase estacionria, bem
como a alterao da viscosidade da mesma separao de frmacos quimicamente semelhantes
so as colunas com enchimento octadecilsilano (ODS), tambm conhecidas como C18, visto seu
maior poder de separao frente a molculas pequenas, como o caso da maioria dos frmacos
(LAVRAS et al., 2008).
Para a maioria das anlises farmacuticas, a separao alcanada pela partio dos
compostos na soluo de ensaio entre as fases mvel e estacionria. Sistemas constitudo por
fases estacionrias polares e fases mveis apolares so descritos como fase normal, enquanto o
arranjo oposto, fases mveis polares e fase estacionria apolares, chamado de cromatografia
em fase reversa. Adicionalmente, cromatografia de partio quase sempre utilizado para os
compostos solveis em hidrocarbonetos de peso molecular inferior 1000 (USP, 2010).
Em geral, para o doseamento de uma ADF, a cromatografia de fase reversa mais
utilizada, sendo a fase estacionria de partculas de 3 a 10 mm de dimetro, mas os tamanhos
podem variar at 50 mm ou mais para colunas preparativas. Enquanto que o dimetro interno
varia de 2 a 5 mm; sendo que as utilizadas para a cromatografia preparativa so de maior
dimetro. Em relao polaridade da coluna a dependncia est na polaridade dos grupos
funcionais ligados, que variam de relativamente apolares, como silano octadecil, a grupos muito
polares como nitrilo. Visando separaes mais eficientes, as colunas tambm podem ser
aquecidas durante a anlise visando diminuio da viscosidade da fase mvel. Contudo,
raramente so utilizadas temperaturas acima de 60 C por causa da degradao potencial da fase
 38

estacionria ou volatilidade fase mvel (USP, 2010). Comumente as temperaturas mximas

utilizadas so de 40 C.
Porm como j citado anteriormente, as condies cromatogrficas dependero
essencialmente das caractersticas qumicas de cada frmaco a ser doseado. Porm todas as
variveis apresentadas devem ser analisadas para manuteno dos parmetros cromatogrficos
dos picos correspondente a cada frmaco ADF durante a utilizao do mtodo na rotina.
Visto a crescente necessidade de doseamento simultneos de frmacos, os compndios
oficiais comeam a inserir monografias de formas farmacuticas ADF em seu elenco. Como
exemplo, podemos citar a monografia de comprimido de zidovudina e lamivudina, em que a
USP 33 descreve a metodologia analtica para doseamento simultneo dos frmacos, sendo esta
um possvel mtodo indicativo de estabilidade, pois relatada sua capacidade em detectar e
quantificar impurezas de sntese dos frmacos simultaneamente. O mtodo descrito consiste em
um gradiente complexo de trs solues eluentes, sendo uma acidificada, e um longo tempo de
anlise. Esses podem ser considerados problemas que so encontrados normalmente no
desenvolvimento de mtodos indicativos de estabilidade (USP, 2010).

Eletroforese
O termo eletroforese refere-se migrao de espcies eletricamente carregadas, quando
dissolvidas ou suspensas em um eletrlito atravs do qual passa uma corrente eltrica. A
utilizao de capilares como canais de migrao em eletroforese aumentaram o desempenho da
separao eletrofortica, comparvel ao da CLAE. Este mtodo comumente conhecido como
eletroforese capilar (ELC) (USP, 2010).
A habilidade de obter alta eficincia de separao por aplicao de diferena de potencial
atravs de um capilar, foi introduzida em 1981, por Jorgenson e Lukacs. Por ser ecologicamente
mais correta e mais econmica a tcnica de separao de mais rpida expanso em anlises
farmacuticas, gradualmente se estabelece como uma tcnica alternativa e de suporte para
CLAE. ELC j utilizada na rotina em anlises farmacuticas, forenses, clnicas e ambientais,
mas sua utilizao tornou-se mais evidente com o projeto genoma humano e o sequnciamento
de protenas (ALTRIA & ELDER, 2004). O processo de separao se d pela aplicao da
voltagem, de tal forma que ctions migram para o plo negativo (ctodo) e anions para o plo
positivo (nodo), e partculas neutras no so atradas para nenhum dos plos (USP, 2010).
 39

A mobilidade eletrofortica de uma espcie qumica em geral determinada pelo seu

tamanho e nmero de cargas dos ons. Hipoteticamente, para separar ons com diferentes cargas
e tamanhos, o menor e de maior carga sair antes. Porm, uma desvantagem a no separao de
molculas neutras numa mistura, sendo esta tcnica utilizada somente para molculas ioizadas
(GRAEF, 2007).
Existem cinco formas de operao de ELC: Eletroforese capilar de zona (CZE) tambm
chamada de ELC em soluo livre, eletroforese capilar em gel (CGE), eletrocromatografa
capilar micelar (MEKC), eletroforese capilar com focalizao isoeltrica (CIEF) e isotacoforese
capilar (CITP) (USP, 2010), sendo a mais comum para o doseamento simultneo de frmacos a
CZE.
O mecanismo de separao da CZE est baseado nas diferenas apresentadas pela razo
carga/raio inico, das espcies analisadas. A combinao entre a mobilidade eletrofortica e a
magnitude do fluxo eletro-osmtico, leva a separao das espcies eletricamente carregadas
(USP, 2010), permitindo a separao de ctions e nions na mesma corrida, mas no de espcies
neutras. Pode ser utilizada para solutos solveis e insolveis em gua. A separao regida pela
mobilidade eletrofortica e pelo fluxo eletro-osmtico (FEO) (SANTORO et al., 2000).
De forma semelhante ao CLAE a eletroforese tambm possui uma srie de variveis a
serem analisadas no desenvolvimento de um mtodo analtico, como a diferena de potencial
aplicada, mobilidade eletrofortica das molculas, o FEO e comprimento do capilar.
Comparando este mtodo ao CLAE o comprimento do capilar corresponde ao comprimento da
coluna, o FEO corresponde ao fluxo da fase mvel, a mobilidade eletrofortica, polaridade da
molcula e a diferena de potencial aplicada, composio da fase mvel com sua polaridade
especfica (GRAEF, 2007).
Um mtodo analtico para doseamento simultneo da ADF de primeira escolha para o
tratamento da tuberculose foi desenvolvido por CZE com as seguintes condies eletroforticas:
polaridade positiva, utilizando como eletrlito de fundo tampo fosfato 40 mmol/L a pH 9,0;
capilar de slica fundida revestido de poliimida com 64,5 cm de comprimento (56 cm efetivos) e
50 m de dimetro interno; a diferena de potencial aplicada de 20 kV, equivalente a uma
corrente efetiva de 50 A (269,5 nm), com tempo de anlise de 5 min (GRAEF, 2007).
Semelhante s anlises por CLAE, o mtodo de eletroforese pode ser acoplado a diversos
detectores, sendo o mais utilizado o UV-Vis.
 40

Espectroscopia no Ultravioleta E Infravermelho associada Quimiometria

A quimiometria uma rea que se refere aplicao de mtodos estatsticos e
matemticos, assim como aqueles baseados em lgica matemtica, a problemas de origem
qumica. Com a sofisticao crescente das tcnicas instrumentais, impulsionada pela invaso de
microprocessadores e microcomputadores no laboratrio qumico, tornaram-se necessrios
tratamentos de dados mais complexos do ponto de vista matemtico e estatstico, a fim de
relacionar os sinais obtidos (intensidades, por exemplo) com os resultados desejados
(concentraes).
As anlises quantitativas que eram realizadas na maioria das vezes por "via mida" como
titulao, precipitao e reaes especficas, que so demoradas e muitas vezes pouco precisas,
esto cada vez mais sendo substitudas por tcnicas instrumentais mais sensveis e precisas,
como: Ressonncia Magntica Nuclear, espectroscopia no infravermenlho, espectroscopia no
visvel/ultravioleta, espectroscopia de massa, cromatografia, polarografia, anlise por injeo em
fluxo, etc., que aliam a velocidade de anlise com uma boa qualidade de resultados. Nessas
tcnicas instrumentais no obtida uma informao direta do resultado, mas sim uma grande
quantidade de sinais (curvas, picos) que podem ser tratados para uma possvel quantificao das
vrias espcies presentes.
Muita nfase tem sido dada aos sistemas multivariados, nos quais se pode medir muitas
variveis simultaneamente, ao se analisar uma amostra qualquer. Nesses sistemas, a converso
da resposta instrumental no dado qumico de interesse, requer a utilizao de tcnicas de
estatstica multivariada, lgebra matricial e anlise numrica. Essas tcnicas se constituem no
momento na melhor alternativa para a interpretao de dados e para a aquisio do mximo de
informao sobre o sistema. De todos os ramos da qumica clssica, talvez a qumica analtica
tenha sido a mais afetada pelo desenvolvimento recente da instrumentao qumica associada a
computadores.
De fato, a "Chemometrics Society", organizao internacional dedicada ao uso e
desenvolvimento de mtodos em quimiometria, composta principalmente por qumicos
interessados em problemas analticos. Atualmente muito raro se encontrar qualquer peridico
respeitvel sobre pesquisas em qumica analtica, que no traga artigos reportando dados obtidos
com o auxlio de microcomputadores, ou tratados por matemtica multivariada ou mtodos
 41

estatsticos, sempre com o objetivo de melhorar a qualidade dos resultados ou facilitar a sua
interpretao.
Um mtodo espectroscpico pode ser desenvolvido para o doseamento simultneo de
frmacos com o emprego de alguma tcnica quimiomtrica, pois tcnicas espectroscpicas no
so capazes de separar a mistura de frmacos da amostras, como o caso do CLAE e
eletroforese.
Silva e colaboradores em 2007, citam que dentre as tcnicas de calibrao multivariada
pode-se citar a tcnica de regresso por mnimos quadrados parciais (PLS). Em 1998,
Spiegelman e colaboradores, demonstraram que a seleo da regio espectral a ser modelada
pode melhorar o desempenho dessa tcnica de calibrao em relao aos modelos que empregam
o espectro inteiro. Regies especficas (ou sinais infravermelhos) so selecionadas onde a
colinearidade no est to presente, gerando modelos mais robustos. Na prtica, a otimizao dos
modelos de regresso multivariados, est baseada na identificao de subconjuntos dos dados
completos (sub-regies espectrais), que combinados ou no, minimizam os erros de predio.
No PLS a calibrao multivariada realizada utilizando a informao do espectro inteiro para
construir um modelo da regresso, relacionado propriedade de interesse. Por esta razo
chamado de mtodo full-spectrum (BORIN & POPPI, 2005). Neste trabalho o PLS foi utilizado
em ambiente MATLAB, o qual integra computao matemtica, visualizao e linguagem
eficiente em ambiente flexvel para computao tcnica.
Silva e colaboradores em 2007 demonstou ser possvel a construo de modelos de
calibrao multivariados, empregando dados de espectroscopia no infravermelho com
transformada de Fourier com acessrio de reflexo total atenuada (FTIR-ATR), para a
determinao simultnea de sulfametoxazol e trimetoprima em medicamentos
comercializados no Brasil. Os resultados obtidos mostram que bons modelos podem ser
obtidos tanto com os espectros por inteiro (PLS), como por determinadas regies espectrais
(iPLS) com 1/10 ou 1/25 do total das variveis (SILVA et al., 2007).
A espectrofotometria no ultravioleta ou visvel tambm pode ser utilizada associada a
quimiometria, como Maluf e colaboradores em 2009, demonstrado foi avaliada a potencialidade
da utilizao das ferramentas matemticas do princpio da aditividade espectrofotomtrica
(SAP), da anlise espectromtrica derivativa (DSA) e da regresso por mnimos quadrados
parciais (PLSR) para a determinao simultnea de paracetamol e cafena, associadas
 42

espectrometria UV-Vis. Quando da aplicao do mtodo de calibrao convencional, segundo o

SAP, foi observada uma significativa sobreposio dos sinais de absoro dos frmacos. Em
contrapartida, a utilizao da DSA ou da PLSR, como ferramentas matemticas de calibrao,
combinadas espectrometria UV-Vis, permitiram a obteno de resultados adequados
determinao concomitante do paracetamol e da cafena a partir do meio etanlico proposto.

CONCLUSO
Como vimos, a associao em dose fixa de medicamentos no considerada uma
novidade no mercado farmacutico, mas carece de muitas informaes a respeito da sua
produo, regulamentao, clnica e controles analticos. Devido a uma maior complexidade em
termos de pesquisa, muitas empresas acabam por deix-las de lado e optar pela produo de
medicamentos monofrmacos.
Entretanto, nos ltimos anos, novas associaes esto inserindo-se no mercado,
proporcionando todos os benefcios que advm desta formulao ao paciente, quando feitas de
maneira racional.

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 48

5. Captulo II
5.1. ESTUDO DE COMPATIBILIDADE FRMACO-FRMACO

5.1.1. Artigo II - Estudo de interao frmaco-frmaco aplicado ao desenvolvimento de

formulao slida contendo a associao em dose fixa de zidovudina, lamivudina e efavirenz

Artigo a ser submetido ao International Journal of Pharmaceutic

Qualis Capes para Farmcia: A1
 49

5.1.1 Artigo III: Estudo de interao frmaco-frmaco aplicado ao desenvolvimento de

formulao slida contendo a associao em dose fixa de zidovudina, lamivudina e
efavirenz

SOARES, M.F.L.R.1,2; FONTES, D.A.F.1; ALVES, L.S.D.1; MUNSON, E.J.4; GORMAN,E.4;

BERENDT, R.4; STELLA, V.J.4; FARIA, A.R.3; ROLIM-NETO, P.J1.
1
Laboratrio de Tecnologia dos Medicamentos, Departamento de Cincias Farmacuticas,
Universidade Federal de Pernambuco. Rua Arthur de S, s/n, Cidade Universitria, 50.740-521,
Recife PE, Brasil.
2
Ncleo de Tecnologia Farmacutica, Departamento de Bioqumica e Farmacologia,
Universidade Federal do Piau, Campus Universitrio Ministro Petrnio Portella, Ininga, 64.049-
550 Teresina PI, Brasil
3
Laboratrio de Sntese Orgnica Aplicada a Frmacos, Departamento de Cincias
Farmacuticas, Universidade Federal de Pernambuco. Rua Arthur de S, s/n, Cidade
Universitria, 50.740-521, Recife PE, Brasil.
4
Department of Pharmaceutical Chemistry, University of Kansas (UK) EUA

RESUMO
Com o objetivo de investigar possveis interaes frmaco-frmaco o presente trabalho teve
como proposta a verificao desses eventos entre os insumos farmacuticos ativos Zidovudina,
Lamivudina e Efavirenz. Foi utilizado um fluxograma de tomada de decises afim de nortear o
uso das tcnicas e a abordagem a ser tomada durante o estudo. Foram utilizadas tcnicas como
DSC, TG, FTIR, MO, RMN entre outras. Os resultados apontam que interaes fsicas
associadas a verdadeiras reaes no estado slido no so evidenciadas, interaes fsicas so
observadas na mistura aps atingir temperatura de fuso de um dos ativos, ocorrendo os
fenmenos de missibilidade e deslocamento da faixa de fuso e decomposio. Alm das
interaes fsicas j citadas, uma interao qumica no estado lquido foi verificada (mistura
Zidovudina-Efavirez), responsvel pela formao de dois produtos de degradao.Tal estudo
permitiu uma compreenso aprofundada, relativo a estabilidade de uma forma farmacutica
contendo esses trs ativos.

Palavras Chave: Efavirenz. Lamivudina. Zidovudina. Estudo de compatibilidade.

 50

INTRODUO
O estudo de interao frmaco-frmaco no estado slido uma etapa fundamental no
desenvolvimento de formas de dosagem slidas em associao de dose fixa (ADF). As
interaes ocorridas entre as molculas dos frmacos podem ser de ordem fsica e/ou qumica,
determinadas ou no como incompatibilidades. Tais interaes podem alterar a estabilidade e/ou
biodisponibilidade dos frmacos, influenciando a segurana e/ou eficcia clnica do produto
ADF.
As reaes fsicas no estado slido incluem transies polimrficas, formao de solvatos
de diferentes estequiometrias; formao de formas solvatadas e no solvatadas, alm de
transies fsicas de formas amorfas e cristalinas (BYRN; PFEIFFER; STOWELL, 1999). Dois
tipos de interaes qumicas tm sido descritas entre frmaco-frmaco, as que correspondem as
interaes qumicas intrnsecas da degradao dos frmacos, como hidrlise, oxidao e fotlise,
mas sem grandes reaes qumicas covalentes; e as correspondentes reaes covalentes entre
os frmacos (DAMIEN, 2004).
Para estudos de compatibilidade, o uso da calorimetria exploratria diferencial (DSC)
interpreta as variaes na temperatura de fuso associadas a entalpia como indicao de
interao. A associao de tais resultados a algumas tcnicas complementares, como
espectroscopia no infravermelho (IV), microscopia ptica (MO) e ressonncia magntica nuclear
no estado slido (RMN), evita o estabelecimento de concluses equivocadas.
O desenvolvimento da forma slida ADF a base dos antirretrovirais zidovudina (AZT),
lamivudina (3TC) e efavirenz (EFV), almeja alcanar a viabilidade produtiva e a eficcia
farmacolgica, possundo como principais desafios a dissoluo do efavirenz, de baixa
solubilidade aquosa e responsvel por diversos casos de reprovaes em estudos clnicos.
Paralelamente as interaes frmaco-frmaco podem alterar as propores e/ou velocidades de
dissoluo e consequentemente, a biodisponibilidade dos frmacos quando associados em uma
dada proporo, alm do grande aporte de insumo farmacutico ativos, restando limitadas
alternativas para otimizao de formulao e processo produtivo. O presente estudo, teve como
objetivo investigar possveis interaes frmaco-frmaco, fator limitante para o desenvolvimento
da forma farmacutica ADF.
 51

MATERIAIS E MTODOS
MATERIAIS
Os insumos farmacuticos ativos foram cedidas pelo LAFEPE, Brasil, sendo: AZT
(Northeast, lote DY070041), pureza de 97,9%; 3TC (Hangzhou, lote 071208), pureza de
100,0% e EFV (Cristlia, lote 1289/07), pureza de 98,0%. Os solventes utilizados foram gua
purificada e acetonitrila (J.T. Baker grau HPLC, lote G15C55).

Protocolo do Estudo
O diagrama de fluxo (Fig. 1) apresenta o protocolo utilizado para a avaliao da interao
frmaco-frmaco. Em primeiro lugar, medidas de calorimetria exploratria diferencial (DSC) e
termogravimetria (TG), com investigao detalhada dos fenmenos trmicos ocorridos por meio
da microscopia ptica com aquecimento (MO), somados os resultados da anlise de isotermas da
absoro de vapor dgua dos frmacos, misturas fsicas binrias e ternria foram selecionadas
para rpida interpretao. Tais resultados possibilitam a identificao do ponto euttico das
misturas e correlao com a solubilidade.
A investigao das possveis interferncias responsveis pelas alteraes no perfil
trmico dos compostos foi procedida por espectroscopia no infravermelho com transformada de
Fourier e refletncia total atenuada (FTIR-ATR) e ressonncia magntica nuclear no estado
slido (RMN). O detalhamento do carter da reao foi viabilizado por meio de DSC de
aquecimento e resfriamento (DSC-HCH) e posterior anlise do material fundido por
cromatografia lquida de alta eficincia (CLAE).
 52

Figura 1 - Diagrama de fluxo para a avaliao da interao frmaco-frmaco.

Frmacos e
Misturas Fsicas
Frmaco-Frmaco

Microscopia ptica com

aquecimento
Adsoro/Absoro de
DSC e TG
Vapor H2O

Estudo de misturas eutticas

e solubilidade

Compatvel. Presena de
interaes suts (ex. foras NO Sinais de Interao?
de Wan der Waals)

SIM

DSC-HCH
(aquecimento e RMN no estado slido IVTF-ATR
arrefecimento)

CLAE das amostras

fundidas

Indicao de Interao
Sinais de Interao? NO
Fsica

SIM

Obteno das amostras

recristalizadas aps fuso

Isolamento e purificao dos

produtos formados

Fonte: Contruo Prpria

 53

Preparao das Amostras

As misturas fsicas binrias e ternria foram preparadas na propores de 1:1 e 1:1:1 (p/p)
atravs de agitao em Vortex (Barnstead Thermolyne Maxi Mix II, 37600, Lote 39296EJ) por
15 minutos, para as anlises gerais. J propores variadas foram utilizadas na avaliao do
ponto euttico das misturas binrias. A proporo de 1:1:1 (p/p), foi escolhida para maximizar a
probabilidade de interaes entre as matrias, sem neste momento correlacionar com propores
farmacolgicas dos ativos [2:1:2 (p/p), de AZT, 3TC e EFV, respectivamente]. Para o
detalhamento do carter da interao entre frmacos as amostras foram fundidas em forno Baxter
Vacuum Drying Oven DP-32 e logo aps o processo de fuso das mesmas, estas foram
recristalizadas sob banho de nitrognio lquido. Para a anlise visvel do processo de fuso por
MO as amostras foram preparadas sob leve pulverizao em gral por 15 minutos, a fim de se
aumentar a interao entre os cristais.

Calorimetria exploratria diferencial (DSC)

Amostras pesando 5 mg foram colocados em porta amostra hermtico de alumnio aberto
por meio de um furo na face superior, devido a volatilizao do produto de degradao trmica, e
aquecido de -40 a 200C a 10C.min-1 utilizando o calormetro DSC Q100 com sistema de
refrigerao (TA Instruments, EUA). A razo de aquecimento de 10C.min -1 foi selecionada
aps anlise prvia sob 5, 10, 15 e 20C.min-1. Nitrognio foi usado como gs de purga a uma
taxa de fluxo de 50mL.min-1. A calibrao da temperatura e do fluxo de calor foi realizada com
amostras padro de ndio e zinco. As anlises de aquecimento resfriamento - aquecimento
(DSC-HCH) foram realizados sob taxa de 10C.min-1 na seqncia -40C a temperatura final de
fuso para cada frmaco e misturas fsicas, seguido de resfriamento a uma taxa de 20 C.min-1 at
-80C e novo aquecimento da amostra a 10C.min-1 at a temperatura de decomposio da
amostra. Todas as amostras foram realizadas em triplicata.

Termogravimetria (TG)
Amostras pesando 8 mg foram colocadas em porta amostra de platina e aquecidas at
400C, nas razes de aquecimento de 10, 15 e 20oC.min-1 em termobalana TGA Heat Exchanger
 54

Q50 (TA Instruments, EUA). Nitrognio foi usado como gs de purga, com 60% de sua
distribuio destinada amostra e 40% balana. As anlises foram realizadas em triplicata.

Microscopia ptica com aquecimento (MO)

As caractersticas morfolgicas das amostras foram analisadas utilizando um microscpio
Olympus BX51 equipado com um adaptador de cmera Olympus (modelo U-TV0.5XC-2;
Olympus Corporation, Tokyo, Japo) e PAXcam cmera digital (Modelo: PX-CM; MIS, Villa
Park, IL, E.U.A.). As amostras foram aquecidas de 25 a 200C a uma velocidade de 10C.min -1
utilizando uma base Linkam de aquecimento/arrefecimento com controlador (Modelos: LTS350,
ci94; Linkam Scientific Instruments, Tadworth, Surrey, Inglaterra).

Estudo do ponto euttico da mistura

Variaes na temperatura de fuso e entalpia evidenciadas por meio dos resultados obtidos com
a DSC para diferentes propores das misturas binrias de AZT+3TC, AZT+EFV e 3TC+EFV,
que variam de 100% a 0%, identificou-se o ponto euttico de cada mistura.

Isotermas de absoro de vapor dgua

A absoro de vapor de gua das amostras contendo os frmacos AZT, 3TC e EFV
isolados e associados foi medida atravs de VIT-SA Vapor Sorption Analyzer (TA Instruments,
EUA). As amostras, de aproximadamente 30 mg, foram adicionadas ao porta amostra de quartzo
seco e submetidas a uma secagem inicial sob vcuo a 40C at equilbrio de peso, com critrio
de equilbrio escolhido de 0,01% de variao de peso em 2 minutos, por no mximo 60 minutos.
A amostra seca foi resfriada temperatura experimental de 30C e, em seguida, exposta
seqencialmente por diferentes taxas de umidade relativa (UR) que variam de 0% a 90% em 5%,
com critrio de equilbrio escolhido de 0,01% de variao de peso em 5 minutos, por no mximo
180 minutos.

Espectroscopia no infravermelho (FTIR-ATR)

Espectros de infravermelho foram obtidos utilizando um espectrmetro Tensor-Bruker
(Bruker Daltonics Inc., Alemanha), com transformada de Fourier e refletncia total atenuada
(Miracle ATR) e Opus Spectroscopy Software version 6. As amostras foram introduzidas
 55

diretamente a cavidade do dispositivo de ATR e pressionadas por meio de uma prensa hidrulica
com ponta giratria e presso micrmetrica, excercendo presso de 530 psi sobre a amostra, a
fim de se conferir um intimo contato desta com a superfcie do cristal. Os resultados foram
obtidos por meio das mdia entre as varreduras, obtidas de 4000 a 400 cm-1.

Ressonncia Magntica Nuclear no estado slido (RMN)

13
Todos os espectros de RMN 13C CP/MAS foram adquiridos em 75,4 MHz para C
usando um Chemagnetics CMX-300 e um espectrmetro da sonda Chemagnetics equipado com
um mdulo de lpis de giro. As amostras foram acondicionadas em rotores de 7,5 mm de
zircnia usando tampas de Kel-F e girou no ngulo mgico em 5,2 kHz. Espectros foram
adquiridos com faixa lateral total suppression (TOSS), a 3,0 s reciclar atraso, dissociao e um
campo de cerca de 60 kHz. O pulso 1H 90 foi de 4,5 s, e o tempo de contato foi de 5 ms. Um
total de 2048 transientes foram adquiridas para cada espectro. O tempo de defasagem para o
espectro dissociao interrompido (no mostrado) foi de 50 s. Espectros foram externamente
referenciados tetramethylsilane usando o pico metilo do hexamethylbenzene (ppm 17,35). Todos
13
os C CP/MAS espectros de RMN foram escalados para o maior pico em cada espectro. Os
deslocamentos qumicos relatados so reprodutveis em 0,1 ppm.

Cromatografia Lquida de Alta Eficincia (CLAE)

Aps a fuso da amostra dos frmacos isolados, misturas binrias (1:1, p/p) e mistura
ternria (1:1:1, p/p/p) por meio do DSC-HCH, as panelas de DSC foram rompidas e, as amostras
contidas no interior, solubilizadas em quantidades conhecidas de fase mvel acetonitrila:gua
(50:50) a fim de se obter suas quantificaes por meio do mtodo descrito por SOARES et al.,
2011). O experimento foi realizado em triplicata.

RESULTADOS E DISCUSSO
Interao Frmaco-Frmaco por Calorimetria Exploratria Diferencial
Avaliou-se o processo de fuso da mistura fsica dos trs frmacos por meio de quatro
diferentes razes de aquecimento (), com a finalidade de se avaliar o deslocamento e/ou
aumento do intervalo da reao (Tf Ti) e variao do consumo de energia. A amostra
apresentou o primeiro evento endotrmico, sob de 5Cmin, em T 92-103C com H 52 Jg;
 56

sob de 10Cmin, em T 92-105C com H 46 Jg; sob de 15Cmin, em T 94-106C com

H 47 Jg e sob de 20Cmin em T 92-107C com H 41 Jg (Fig 2). O referncial terico trs
para frmacos isolados, conduzindo no geral, para o aumento no valor de , um aumento nas
temperaturas Tonset, Tpico e Tf, sem alterar H, uma vez que a partir do incio da fuso, o
efeito do aumento da temperatura custa do aumento da razo de aquecimento minimizado
devido absoro de calor (evento endotrmico) pelo material medida que ele funde (MATOS;
MERCURI; BARROS, 2009).
Diferentemente do apresentado, a amostra contendo a mistura fsica de trs diferentes
frmacos, apresentou aumento de T onset e T pico gradual em concordncia com o aumento de
, devido ao menor tempo para a ocorrncia da interao entre as matrias slidas, diminuindo o
efeito de missibilidade dos mesmos e aumentando a faixa de fuso, contudo houve uma
diminuio de H a cada aumento de , provando que a mistura no se comporta como os trs
frmacos isolados, pois neste caso H seria independente. Com base no exposto escolheu-se
de 10Cmin para a continuao dos experimentos por ser mais usual na prtica cientfica.

Figura 2 - Curvas de DSC de AZT+3TC+EFV (1:1:1, p/p/p), sob diferentes razes de

aquecimento

Temperatura (C)

(a) 5Cmin, (b) 10Cmin, (c) 15Cmin e (d) 20Cmin.

A Figura 3 ilustra as curvas de DSC para os frmacos misturas binrias e ternria, nas
quais pode-se avaliar que o(s) evento(s) endotrmico(s) caracterstico(s) de fuso. O AZT (a)
 57

apresentou T (117-123C) e H 96 Jg, em concordncia com os valores publicados

anteriormente (ARAJO et al., 2003; ARAJO et al., 2005, RODRIGUES et al., 2005). O 3TC
(b) apresentou T (171-177C) e H 113 Jg, em corcordncia com os valores publicados por
Harris e colaboradores (1997) para a forma polimorfica II, anidra, de provvel inferior
solubilidade aquosa que a forma I (PF 126C, H 114 Jg, com 1 mol de gua para cada 5 moles
de frmaco). O EFV (c) apresentou T de 130 a 137C e H 50 Jg em acordncia a forma
polimorfica I de maior estabilidade trmica e provvel menor solubilidade aquosa, tal frmaco,
apresenta mais quatro outras formas polimrficas metaestveis, as quais convertem-se na forma I
(PF - forma II: 116C, forma III: 108C, forma IV: 95C e forma V: 108C) (RADESCA et al.,
2004) e forma amorfa (DONEY, 2007).

Figura 3 - Curvas de DSC dos frmacos isolados e suas misturas binrias e ternria.

AZT+3TC+EFV (1:1:1)

AZT+EFV (1:1)

3TC+EFV (1:1)

AZT+3TC (1:1)

EFV

3TC

AZT

(a) AZT, (b) 3TC, (c) EFV, (d) AZT+3TC (1:1, p/p), (e) 3TC+EFV (1:1, p/p), (f) AZT+EFV
(1:1, p/p), (g) AZT+3TC+EFV (1:1:1, p/p/p), sob 10C.min -1.

A mistura binria de AZT + 3TC (1:1, p/p) (d) apresentou um primeiro evento
endotrmico com T1 (110-120C) e H1 53 Jg caracterstico ao AZT e segundo evento
 58

endotrmico com T2 (140-163C) e H2 19 Jg correspondente ao 3TC. O comportamento da

mistura evidencia a missibilidade dos frmacos aps a fuso do AZT ocorre quase total
solubilizao do 3TC neste, restando apenas uma pequena parcela, representada por um pico
alargado e de baixa intensidade, devido a grande variao dos pontos de fuso individuais.
A mistura binria de 3TC + EFV (1:1, p/p) (e) apresentou primeiro evento endotrmido
com T1 (118-125C) e H1 26 Jg associado ao EFV e segundo evento endotrmico com T2
(143-171C) e H2 44 Jg correspondente ao 3TC, o comportamento da mistura evidencia uma
antecipao da temperatura de fuso para o EFV, contudo o 3TC no se solubiliza em grande
proporo no mesmo, devido a diferena de polaridade, ainda ocorrendo a presena de uma
banda de fuso alargada referente ao 3TC.
A mistura binria de AZT + EFV (1:1, p/p) (f) apresentou um T de 94 a 102C e um H
de 66 Jg, evidenciando uma antecipao da fuso do AZT seguida da fuso do EFV dentro de
uma mesma faixa de fuso alargada, explicando a ocorrncia de uma maior difuso da
temperatura entre as molculas no estado lquido, fazendo com que a fuso do EFV seja
significativamente deslocada. Tal fato pode ser corroborado pela menor distncia apresentada
entre as faixas de fuso dos frmacos, apesar de haver uma grande diferena de polaridade entre
as molculas.

Interao Frmaco-Frmaco por Termogravimetria

Avaliou-se a decomposio trmica da mistura fsica dos frmacos por meio de trs
diferentes razes de aquecimento (), com a finalidade de se avaliar o deslocamento da
temperatura inicial da reao (T onset), o aumento do intervalo de reao (Tf Ti) e a possvel
ocorrncia de novas etapas de decomposio.
A amostra apresentou da mistura de AZT+3TC+EFV (1:1:1, p/p/p), sob de 10Cmin,
uma etapa com variao de massa, sendo T de 184-303C com m de 62%; sob de 15Cmin,
a amostra apresentou duas reaes, sendo T 1 de 203-283C com m1 de 39% e T2 de 83-
312C com m2 de 23%; e sob de 20Cmin, a amostra apresentou duas reaes, sendo T 1 de
198-252C com m1 de 13% e T2 de 252-316C com m2 de 48% (Fig. 4). A mudana da
razo de aquecimento altera a cintica das reaes existentes.
 59

Figura 4 - Curvas de TG de AZT+3TC+EFV (1:1:1, p/p/p) sob diferentes razes de

aquecimento.

Perda de massa (%)

Temperatura (C)

(a) 10Cmin, (b) 15Cmin e (c) 20Cmin.

Logo, aps a determinao dos perfis de decomposio trmica dos frmacos e das
mistura ternria, observou-se as curvas de TG das mesmas, realizadas em triplicata (Fig. 5). O
AZT (267,24 gmol) apresentou, at 400C, dois eventos com variao de massa, sendo os
valores mdios das triplicatas T1 204-250C com m1 31,71%, equivalente a 85 g/mol, e T 2
250-284C com m2 33%, equivalente a 88,5 g/mol, restando aps a temperatura de 284C a
massa equivalente a 94 gmol, que decomposta em uma terceira etapa temperaturas mais altas
que 400C. Tais resultados no reproduzem totalmente os resultados publicados anteriormente,
havendo variaes de T e m.
 60

Figura 5 - Curvas de TG dos frmacos isolados e sua mistura ternria.

Perda de massa (%)

Temperatura (C)

(a) EFV, (b) AZT, (c) AZT+3TC+EFV (1:1:1, p/p/p) e (d) 3TC, sob de 10Cmin.

Segundo Arajo e colaboradores (2003), a primeira etapa (153-249C) apresenta m1

52% (129 gmol), equivalente a formao da timina (126 g/mol) com liberao dos gases (N 2 +
2-furano metanol + furano metanol = 138 g mol), a segunda etapa consequencia da clivagem do
grupamento azido (37 g mol) responsvel pela perda da timina e liberao dos gases (CO + CO 2
+ C) (249-357C), apresenta m2 20.3% (54 gmol), e a terceira etapa (360-650C) apresentando
m3 28.2% (75 gmol), referente a liberao de material carbonceo.
Com base no exposto, dentro da faixa de temperatura avaliada, pode-se correlacionar a
decomposio verificada com a literatura. Na primeira etapa ocorreu a liberao do composto
furano metanol, 2-furano metanol e nitrognio. Na segunda etapa houve a liberao de 88 g/mol
correlacionada diretamente com perda a timina pela clivagem do grupamento azido (126 g/mol),
tendo restado o azido na termobalana (37 g/mol).
O 3TC (229,3 gmol) apresentou, at 400C, evento com variao de massa, sendo a T
de 238 a 296C com m de 49%, equivalente a 113 g/mol, sendo correlacionvel com o seu
principal produto de degradao e tambm precursor de sntese, a citosina (112 g/mol) (BEDSE
et al., 2009), restando aps a temperatura de 296C a massa equivalente a 116 g/mol, equivalente
ao 4-metiol-2-oxatiolana (118 g/mol), no sendo este decomposto at 400 C. A ausncia de uma
 61

etapa de desidratao evidencia a presena do polimorfismo no hidratado, correspondente a

forma II (HARRIS et al., 1997).
O EFV (315,68 gmol) apresentou, at 400 C, uma reao com variao de massa,
correspondente a T de 198 a 265C com m de 89% (278 g/mol), equivalente a liberao de
um intermedirio ionizado instvel do amino lcool devido a atmosfera inerte da reao (287
gmol), restando aps 265C a massa equivalente a 36 g/mol, correlacionvel com carbonila (28
gmol). A rota dedratativa descrita na literatura aponta a degradao do EFV em amino lcool e a
associao deste ao gs carbnico, formando o composto quinolina (271 g/mol) (MAURIN et al.,
2002; RIBEIRO et al., 2007; VIANA et al., 2008).
A mistura dos frmacos tambm apresentou, at 400C, apenas uma reao com variao
de massa, com valores mdios de T 186 a 308C e com m de 63%. Neste caso observa-se que
a associao dos frmacos diminue a estabilidade trmica dos mesmos, uma vez que T onset do
processo de decomposio da mistura menor do que para todos os frmacos isolados. Associa-
se tal fato ao deslocamento do processo de fuso da mistura, que ocorre em uma faixa de
temperatura mais anema (93-105C), fazendo com que ocorra um longo perodo de contato das
amostras lquidas antes do incio da decomposio do sistema em 186C.
A mistura apresenta um comportamento singular, contudo tendencia ao comportamento
de decomposio trmica do efavirenz, supostamente devido a menor interao deste com as
outras duas molculas de polaridade semelhantes (Fig. 5). A perda de massa do sistema de 63%,
equivale a 511 gmol, assumindo que os frmacos associados degradam-se isoladamente nos seus
respectivos produtos da reao inicial, verificando-se que a m da decomposio da mistura
engloba todos os ms da primeira reao de cada um dos frmacos, podendo-se supor que a
degradao da mistura forma o 2-furano metanol para o AZT, a citosina para o 3TC e o
intermedirio ionizado do amino lcool para o EFV, obtendo-se a massa de 498 gmol, havendo
uma diferena de 14 gmol.
Tal diferena pode ser explicada devido a pequenas variaes nas integraes manuais
dos decamentos ou ao incio de uma segunda etapa de decomposio isolada de um dos
frmacos, sendo a massa pequena demais para ser correlacionada com a formao de um produto
de degradao oriundo de incompatibilidade destes produtos quando associados no estado
lquido.
 62

Interao Frmaco-Frmaco por Microscopia ptica com aquecimento

Uma das abordagens mais simples a se usar na busca da compreenso dos deslocamentos
ocorridos no processo de fuso e diminuio destas entalpias para as misturas contendo os
frmacos associados est na anlise visual do processo de fuso.
Por meio das imagens obtidas, ilustradas na Tabela 1 (linhas A, B e C), pode-se observar
que os trs cristais estudados apresentam formas morfolgicas diferenciadas e bem
caractersticas, com processos de fuso bem definidos. Contudo, no podemos associar a
morfologia do cristal solubilidade do composto, uma vez que o EFV apresenta cristais na
forma de agulha, com menor rea superficial e mesmo assim possui devido a sua apolaridade, a
menor solubilidade dentre os compostos.
importante ressaltar que ao aquecer o sistema, desta vez sob atmosfera ambiente ao
invs de inerte (N2) em um sistema de menor preciso quanto a medio e difuso do calor
adicionado ao sistema, por meio do aquecimento constante a 10Cmin, a verificao dos
processos foi evidenciada a olho n e com isso, podem ocorrer pequenas variaes nas
temperaturas do processo de fuso quando comparadas as temperaturas verificadas por meio do
diferencial do fluxo de calor no DSC.
A mistura fsica de AZT + 3TC (1:1, p/p) apresentou uma maior reduo do tamanho do
cristal para o AZT durante a leve pulverizao em gral, uma vez que morfologicamente seu
cristal apresenta-se em uma forma mais retangular, proporcionando maiores pontos de quebra
em relao a forma morfolgica do cristal de 3TC, carcaterstico por apresentar arestas com
dimetros mais proporcionais (Tabela 1, linha D). Os cristais de AZT acomodaram-se na parte
exterior dos cristais de 3TC, com fuso iniciando-se em 104C, confirmando a antecipao deste
processo, estendendo-se at 115C, solubilizando grande parte dos cristais de 3TC, que iniciou
sua transio de fase at atingir um equilbrio (slido e lquido euttico). O equilbrio foi
interrompido a 134C com a fuso do restante de 3TC do sistema, tendo tal processo finalizado
em 140C. O baixo consumo de energia para concluir a transio de fase do 3TC (19 Jg),
confirma que grande quantidade de frmaco j havia sido transformada.
Para as misturas fsicas de AZT + EFV (1:1, p/p) e 3TC + EFV (1:1, p/p), apresentou-se
maior reduo do tamanho do cristal para o EFV durante a leve pulverizao em gral, uma vez
que morfologicamente seu cristal apresenta-se em uma forma de agulha, proporcionando maiores
pontos de quebra em relao as formas morfolgicas dos cristais de AZT e 3TC (Tabela 1, linha
 63

E e F). Na mistura de AZT + EFV os cristais de EFV acomodaram-se na parte exterior dos
cristais de AZT, a fuso do frmaco AZT presente na mistura iniciou-se a temperatura de 100C.
O AZT fundido foi capaz de solubilizar completamente o EFV aderido externamente ao seu
cristal, devido ao tamanho reduzido deste, a maior difuso da temperatura entre as molculas no
estado lquido e pela estreita distncia entre as faixas de fuso dos frmacos, apesar de haver
grande diferena de polaridade entre as molculas. Paralelamente a este processo, o AZT
continua a se fundir devido ao maior tamanho de partcula e ao compartilhamento do calor do
sistema com o processo endotrmico do EFV (Tabela 1, linha E).
Na mistura de 3TC + EFV (1:1, p/p) os cristais de EFV acomodaram-se na parte exterior
dos cristais de 3TC, iniciando sua fuso a 124C, no sendo capaz de solubilizar completamente
o 3TC aderido externamente ao cristal, devido a diferena de polaridade. Este sistema
permaneceu em equilbrio (3TC slido + EFV lquido euttico) at fuso do 3TC em 175C,
estendendo-se at 178C (Tabela 1, linha F).
Para a mistura ternria, evidenciou-se cristais de EFV em tamnho reduzido ao redor de
cristais de AZT e 3TC. A fuso da mistura ocorre em uma nica fase, contudo percebe-se a olho
n, a completa solubilizao do AZT e 3TC em uma nica sub-fase e posterior solubilizao do
EFV remanecente em uma sub-fase secundria (Tabela 1, linha G).

Avaliao do estudo do ponto euttico da mistura

Com base na observao da influncia da mistura dos frmacos na diminuio da
estabilidade trmica das misturas binrias e ternria, com antecipao da temperatura de fuso e
decomposio desta e, visando correlacionar os resultados obtidos com um possvel aumento da
solubilidade aquosa destes compostos e minimizar o impacto relativo a baixa solubilidade do
EFV em uma possvel forma farmacutica associao em dose fixa (ADF), realizou-se este
estudo.
Para tal, avaliou-se por meio de DSC o processo de fuso das misturas binrias em
diferentes propores (de 0 a 100%) (Tabela 2) e a mistura ternria foi avaliada na proporo de
AZT+3TC+EFV (1:1:1, p/p/p), para se maximizar as possveis interaes e na proporo de
AZT+3TC+EFV (2:1:2, p/p/p), sendo esta a proporo teraputica desta associao. A
solubilidade aquosa a temperatura ambiente (25C) do EFV (0,009 mgmL), AZT (77 mgmL) e
3TC (1020 mgmL) (CAFFARO; DEZANI; SERRA, 2009). O menor ponto de fuso ocorrido
 64

em um nico processo de fuso para o sistema, definido como ponto ou proporo euttica, foi
de 80:20 para AZT+3TC, de 50:50 para AZT+EFV e de 20:80 para 3TC e EFV. A mistura
ternria de AZT+3TC+EFV apresentou menor ponto de fuso para a proporo teraputica
(2:1:2, p/p/p).
 Tabela 1 - Ilustrao do processo de fuso das amostras por microscopia ptica com aquecimento.
65
Amostras Linha 25 C Etapas do processo de fuso: frmacos, misturas binrias (1:1) e ternria (1:1:1)

AZT A

110C 112C 115C 117C 120C 122C 125C

3TC B

165 C 167C 170 C 172C 175C 182C 185 C

EFV C

125C 125C 126C 126C 127C 127C 128C

AZT
+ D
3TC
104C 109C 112C 115C 134C 139C 140C

AZT
+ E
EFV
100C 107C 113C 115C 108C 119C 121C
3TC
+ F
EFV
124C 126C 149C 175C 176C 177C 178C
AZT
+
3TC G
+
EFV 102C 104C 112C 119C 122C 123C 131C
 66

Interao Frmaco-Frmaco por isotermas de absoro de vapor dgua

O isoterma obtido videnciou a baixa adsoro de gua pelo EFV, sendo este no
hidroscpico, uma vez que sob atmosfera com 90% UR, a massa de gua ganho pela amostra
foi equivalente a 0,05 moles de guaamostra (m de 0,32%).
Para o AZT, o isoterma obtido apresentou at a atmosfera de 50% UR um ganho de
peso da amostra crescente e positivo (m de 0,07%), equivalente a 0,01 moles de
guaamostra, j em 55% UR o ganho de massa se manteve igual, tendendo ao equilbrio,
contudo a 60% UR, a amostra iniciou uma perda de massa, havendo a liberao da massa
adsorvida pelo amostra de AZT, restando na amostra uma m de 0,06%), j em atmosfera de
70% UH o valor final da massa adsorvida ficou negativo, evidenciando completa perda de
toda a massa adsorvida e o inicou de um processo de decomposio do AZT. Sob atmosfera
de 90% UR, identificou-se perda de massa total da amostra de -0,18%. No processo de
desadsoro, ao proceder-se o decamento da umidade, o processo de decomposio do AZT
apenas continuou a ocorrer linearmente, chegando a 5% UR com variao de massa de
0,39%.
De acordo com a molcula do AZT, a massa de 0,39% equivalente a 1 gmol, sendo
equivalente a perda de um hidrognio (Figura 11 e 12). Poderamos discutir que este
hidrognio perdido corresponde ao hidrognio da imida, uma vez que a gua estaria atuando
como uma base fraca de Lewis e este hidrognio seria lbil, contudo, a perda da massa
correspondente ao elemento hidrognio deveria ocorrer at atmosfera de 90% UR e
posteriormente, no mximo de manter constante, mas a 90% UR a massa desprendida da
amostra era inferior a 1 gmol.
Para o 3TC a variao da massa adsorvida e desadsorvida foi menos proporcional
para as UR mais baixas, mais especificamente abaixo de 35% de UR. A amostra apresentou
sob 90% UR uma variao de massa de 0,10%, equivalente a 0,01 moles de guaamostra.
 Tabela 2 - Valores dos eventos trmicos ocorridos no processo de fuso das amostras por DSC.
67

nico Ponto de Fuso Pontos de Fuso Distintos

Frmaco de menor Ponto de Fuso Frmaco de maior Ponto de Fuso
Amostra Proporo (%) T
P. Fuso H T onset P. T P. T
endset H T onset H T onset
(C) (Jg) (C) Fuso endset PA Fuso endset PA
(C) (Jg) (C) (Jg) (C)
(C) (C) (C) (C)
100 - 0 124,33 112,1 116,26 133,05
80 - 20 115,01 99,42 100,37 126,34
60 - 40 113,06 73,36 100,04 119,63 AZT 137,96 6,566 127,75 147,81 3TC
AZT:3TC 50 - 50 114,95 57,53 100,38 125,0 AZT 148,61 16,52 133,36 171,16 3TC
40 - 60 112,77 47,48 94,19 119,36 AZT 152,5 37,75 125,80 161,23 3TC
20 - 80 114,72 23,13 104,39 122,31 AZT 164,73 83,16 130,62 175,19 3TC
0 - 100 177,62 124,6 169,1 186,19
100 - 0 124,33 112,1 116,26 133,05
80 - 20 116,42 96,56 94,66 126,61
60 - 40 103,89 87,23 92,56 126,10
AZT:EFV 50 - 50 101,63 75,22 92,05 123,66
40 - 60 109,57 65,93 92,02 124,81
20 - 80 105,18 49,88 94,36 123,66
0 - 100 137,97 53,33 128,74 143,19
100 - 0 177,62 124,6 169,1 186,19
80 - 20 123,88 4,885 119,97 133,32 EFV 174,02 104,3 160,01 181,63 3TC
60 - 40 125,27 23,87 115,52 134,39 EFV 170,72 56,81 145,07 177,87 3TC
3TC:EFV 50 - 50 124,62 28,90 115,80 131,17 EFV 170,81 47,65 140,80 177,6 3TC
40 - 60 126,46 32,73 118,11 134,12 EFV 170,64 35,63 147,19 177,34 3TC
20 - 80 128,57 45,80 117,41 136,54
0 - 100 137,97 53,33 128,74 143,19
1:1:1 113,03 36,99 101,18 121,24
AZT:3TC:EFV
2:1:2 104,33 42,18 98,62 122,33
 68

Para a mistura binria de AZT+3TC a amostra apresentou comportamento parecido com

o do frmaco 3TC. Sob atmosfera de 10 a 40% UR ocorreu um variao de massa positiva e
proporcionalmente crescente, chegando a 40% UR, com uma variao da massa adsorvida pela
amostra de 0,04%, havendo perda de 0,01% desta massa advorvida anteriormente na faixa de 40-
45% UR (m de -0,001%, equivalente a 0,04% - 0,04%), ainda no sendo negativa em relao a
massa do frmaco, sendo apenas uma perda da umidade adsorvida at tal umidade.
Para a mistura binria de AZT+EFV a amostra apresentou aumento de massa at
atmosfera de 40% UR, com ganho de massa de 0,02%, e em 45% UR, o ganho de massa caiu
para 0,02% (queda de 0,01%), ficando nula em 50% UR e negativa apartir de 55% UR. A queda
de massa da amostra foi crescente at 70% UR (decaimento total de -0,36% da massa da
amostra), com ganho de massa entre 70-90%, finalizando mesmo assim em um percentual
negativo de massa de -0,17% adsorvida. Ao levar em considerao a massa da amostra de
AZT+EFV (582,92 gmol), tal massa equivalente a 1 gmol, valor idntico a perda de massa do
AZT isolado).
A mistura binria de 3TC+EFV apresentou ganho de massa, at a atmosfera de 40% UR,
de 0,04%, com decamento da massa adquirida em 60% UR, na qual a amostra anulou o ganho
de massa, apresentando perda -0,06% em 70% UR, com posterior ganho de massa de 70-90%
UR, atingindo a m de 0,17%. Correlacionando a perda de massa ao peso molecular de
3TC+EFV (544,98 gmol), temos 0,33 gmol. O processo de desadsoro de umidade foi uma
parbola, contudo, terminou com perda de massa inicial do sistema, chegando a 5% UR com m
-0,12%, equivalente a perda de 0,65 gmol da amostra.
A mistura dos 3 frmacos apresentou ganho de massa apenas em 10% UR, com ganho de
0,01% da massa. De 10-90% UR o sistema perdeu massa para o ambiente com finalizao em
90% UR, com -2,1% de massa, levando em cosiderao o peso molecular da mistura (812,22
gmol), tem-se o equivamente a perda de 17 gmol da mistura. Para a desadsoro de umidade a
perda de massa foi quase que nula, finalizando a amostra em 10% UR com -2,33% de massa,
equivalente a perda de 18,96 gmol da amostra.
Com base nos resultados pode-se afirmar que os frmacos no so higroscpicos e no
apresentam a formao de formas hidratadas, geralmente de menor solubilidade do que a forma
anidra, podendo ser manipulados por granulao mida e em ambientes com percentuais normais
de umidade relativa.
 69

Discusso das evidncias de interao frmaco-frmaco

Na interpretao dos resultados apresentados at o momento pode-se afirmar a ocorrncia
de interaes entre as misturas de frmacos analisadas, no sendo puramente sobreposies de
caractersticas ou fenmenos individuais. Contudo, no possvel classificar estas interaes, ou
interpretar possveis impactos destas na qualidade de um futuro produto farmacutico.
H evidncias de missibilidade entre os frmacos, sendo esta uma interao entre dois
lquidos ou um sistema em equilbrio, composto por um slido e um lquido euttico, no sendo
verdadeiras reaes no estado slido, contudo, no se sabe se estas interaes so de carcter
apenas fsico, ou se so interaes qumicas intrnsecas da degradao dos frmacos, como
hidrlise ou oxidao, mas sem grandes reaes qumicas covalentes; ou reaes
correspondentes reaes covalentes entre os frmacos.
Sem tais informaes, as interaes no podem ser associadas a incompatibilidades, uma
vez que, como verificado na reduo do ponto de fuso do sistema e possvel aumento da
solubilidade do mesmo, tais interaes podem ser vantajosas e propositais. Dando continuidade
ao estudo continuou-se os experimentos sugeridos por meio do diagrama de fluxo para a
avaliao da interao frmaco-frmaco, disponvel na Figura 1.

Interao Frmaco-Frmaco por Espectroscopia no Infravermelho

O espectro da mistura binria de AZT+3TC apresenta predominantemente as bandas
caractersticas do AZT, em relao ao 3TC. Contudo as bandas referentes a carbonila (1683 e
1608 cm-1, respectivamente), apresentaram alteraes referentes, provavelmente, devido a
interao fsica entre as amostras, podendo estar correlacionadas a formao de ligaes de
hidrognio entre os hidrognios e as carbonilas dos respectivos frmacos. Nos espectros das
demais misturas binrias, AZT+EFV e 3TC+EFV, ocorreu a sobreposio das bandas, com
prevalncia do EFV.
O espectro da mistura ternria apresenta essencialmente as bandas caractersticas do
EFV, que so: 3314 cm-1 (vibrao de estiramento N-H); 2249 cm-1 (vibrao do estiramento
CC); 1726 cm-1 (vibrao de estiramento C=O); 1486 e 1606 cm-1 (vibrao de estiramento
C=C do anel benzeno); 1322 e 1188 cm-1(vibrao de estiramento C-O). Na regio de menor
freqncia, podemos atribuir s bandas de 1074 e 1039 cm-1 as vibraes de deformao C-H no
plano e em 976 e 927 cm-1 na deformao C-H fora do plano. Devido a metodologia utilizada,
 70

no foi possvel visualizar as vibraes de estiramento de C-F e C-Cl, que se encontram nas
freqncias abaixo de 900 cm-1 (Fig. 6).
Logo pode-se inferir que, a partir do mtodo realizado, no possvel verificar nenhuma
interao qumica entre os frmacos fsicamente associados e submetidos a uma presso de 530
psi, superior a todas as presses envolvidas no processo de fabricao de uma forma
farmacutica slida, incluindo a etapa de compresso dos ps, sendo neste caso a interao entre
as matrias, a temperatura ambiente, essencialmente fsica.
 71

Figura 6 - Espectro de IVTF-ATR dos frmacos AZT, 3TC e EFV isolados e suas misturas
binrias e ternria1.

Misturas binrias AZT+3TC (1:1, p/p), EFV+AZT (1:1, p/p), EFV+3TC (1:1, p/p) e a mistura ternria
AZT+3TC+EFV (1:1:1, p/p/p).

1
As figuras individuais e ampliadas do espectro de IVTF-ATR encomtram-se no ANEXO A.
 72

Interao Frmaco-Frmaco por RMN-C13 no estado slido

Obteve-se os espectros de Ressonncia Magntica Nuclear de Carbono 13 (RMN C13) no
estado slido. A figura 7 apresenta os respectivos espectros da Zidovudina, Lamivudina e
Efavirenz, isolados, assim como da mistura equimolar das trs substncias (AZT + 3TC + EFV).
Percebe-se que, no espectro da mistura equimolar (AZT + 3TC + EFV), todos os sinais dos
carbonos, verificados nos espectros isolados, apresentam apenas sobreposio. No foi
verificada variao nos deslocamentos qumicos dos sinais e nem aparecimento de novos sinais,
o que nos fornece fortes indcios de que no houve interao qumica ou fsico-qumica entre as
substncias no estado slido.
Outro aspecto relevante da anlise dos espectros de RMN C13 foi a duplicao de sinais
no espectro da Zidovudina pura (AZT). Esperava-se apenas um sinal para cada carbono, se
tivssemos apenas uma forma morfolgica. Este resultado nos fornece tambm fortes indcios de
que a Zidovudina slida, empregada na anlise, apresentava duas formas morfolgicas. Tal fato
no ocorre com a Lamivudina (3TC), onde o espectro da substncia pura apresenta um nico
sinal para cada carbono, respectivamente. A utilizao de RMN, no estado slido, uma
ferramenta importante no estudo do polimorfismo de slidos. Com relao ao EFV, o espectro de
RMN C13, no apresentou duplicao explcita de sinais, como no da Zidovudina, no entanto,
alguns sinais, como os carbonos do anel ciclopropnico, assim como um carbono acetilnico,
parecem tambm estar duplicados, o que nos leva a crer tambm na possibilidade de
polimorfismo.
Uma vez que por meio dos experimentos de anlise trmica realizados no se evidnciou
diferentes formas polimrficas das matrias primas zidovudina e efavirenz, realizou-se
novamente o DSC destas duas matrias primas isoladas aumentando a razo de aquecimento,
com a finalidade de se evidenciar diferentes processos de fuso de ocorrncia em temperaturas
muito prximas. Contudo, a curva de DSC obtidas, evidenciaram apenas um processo de fuso
para cada amostra, no sendo possvel estabelecer uma correlao entre os resultados de anlise
trmica com os resultados do RMN no estado slido, havendo a necessidade de se continuar a
investigao de possveis presenas de diferentes formas polimrficas das amostras.
 73

Figura 7 - Espectro de RMN 13C dos frmacos no estado slido.

Interao por DSC Aquecimento-Resfriamento-Aquecimento

As curvas de DSC-HCH foram obtidas para se verificar o comportamento termodinmico
da amostra recristalizada e se correlacionar tais resultados com a possvel transio de fase
slida. O AZT apresentou no primeiro aquecimento um evento endotrmico caracterstica de
fuso em T (119-125C) e H 96 Jg, seguido de resfriamento rpido com a finalidade de
congelamento da amostra e segundo aquecimento com o aparecimento de um evento
caracterstico de transio vtrea (T g) com T (35-37C) do frmaco, com ausncia de fuso,
confirmando a formao de AZT liofilizado, seguido de processo exotrmico de decomposio
com T (184-240C) e H 1111 Jg, seguido de dois processos endotrmicos que podem ser
correlacionados com o incio de um segundo processo de decomposio trmica que se inicia
com a absoro de energia para que ocorram rompimentos de ligaes qumicas e volatilizao
do composto qumico formado (Fig. 8).
 74

O 3TC apresentou no primeiro aquecimento um evento endotrmico caracterstica de

fuso em T (176-178C) e H 117 Jg, seguido de resfriamento rpido com a finalidade de
congelamento da amostra e segundo aquecimento com o aparecimento de uma reao
caracterstica a transio vtrea (T g) com T (69-70C) do frmaco, caracterstica de substncia
amorfa, com pico de exotermico de cristalizao com T (131-148C) com H 35 Jg, seguido
imediamente com a fuso deste, T (158-161C) e H 28 Jg, no sendo este um polimorfo
descrito na literatura, e posterior pico de decomposio da amostra (Fig. 8).
O EFV apresentou no primeiro aquecimento uma reao endotrmica caracterstica de
fuso em T (137-138C) e H 53 Jg, seguido de resfriamento rpido com a finalidade de
congelamento da amostra e segundo aquecimento com o aparecimento de uma reao
caracterstica a transio vtrea (Tg) da parcela amorfa com T (38-40C) do frmaco, pico de
exotermico de cristalizao com T (98-107C) com H 41 Jg, seguido imediamente com a
fuso deste nas mesmas condies da primeira fuso, sendo a forma polimrfica recristalizada a
mesma utilizada inicialmente, a forma polimrfica I, e posterior pico de decomposio da
amostra com T (234-266C) com H 386 Jg (Fig. 8).
A mistura ternria dos frmacos apresentou no primeiro aquecimento uma reao
endotrmica caracterstica de fuso em T (96-108C) e H 48 Jg, seguido de resfriamento
rpido com a finalidade de congelamento da amostra e segundo aquecimento com o
aparecimento de uma reao caracterstica a transio vtrea (T g) em T (71-75C), caracterstica
a slido amorfo, seguido de pico de exotermico de decomposio, sem a ocorrncia de
cristalizao ou fuso (Fig. 8).
A mistura binria de AZT+3TC apresentou no primeiro aquecimento duas reaes
endotrmicas caractersticas da fuso de AZT e 3TC, respectivamente, nas temperaturas da
apresntadas (Fig. 3), seguido de resfriamento e segundo aquecimento com o aparecimento de
uma reao caracterstica a transio vtrea (T g) com T (50-57C) do frmaco, com ausncia de
cristalizao ou fuso, confirmando a formao de um slido amorfo, seguido de processo
exotrmico de decomposio (Fig. 9).
 75

Figura 8 - Curvas de DSC-HCH dos frmacos isolados e sua mistura ternria.

(a) AZT, (b) 3TC, (c) EFV e (d) AZT + 3TC + EFV (1:1:1, p/p/p).

Figura 9 - Curvas de DSC-HCH das misturas binrias e ternria.

(a) AZT + 3TC (1:1, p/p), (b) 3TC + EFV (1:1, p/p), (c) AZT + EFV (1:1, p/p), (d) AZT + 3TC
+ EFV (1:1:1, p/p/p).
 76

A mistura binria de AZT+EFV apresentou no primeiro aquecimento duas reao

endotrmicas caractersticas da fuso de AZT e EFV, respectivamente, nas temperaturas da
apresentadas (Fig. 3), seguido de resfriamento e segundo aquecimento com o aparecimento de
uma reao caracterstica a transio vtrea (Tg) com T (44-47C) do frmaco, com ausncia de
cristalizao ou fuso, confirmando a formao de um slido amorfo, seguido de processo
exotrmico de decomposio (Fig. 9).
A mistura binria de 3TC+EFV apresentou no primeiro aquecimento duas reao
endotrmicas caractersticas da fuso de EFV e 3TC, respectivamente, nas temperaturas da
apresntadas (Fig. 3), seguido de resfriamento e segundo aquecimento com o aparecimento de
uma reao caracterstica a transio vtrea (T g) com T (54-57C) do frmaco, com ausncia de
cristalizao ou fuso, confirmando a formao de um slido amorfo, seguido de processo
exotrmico de decomposio (Fig. 9).

Interao por Cromatografia Lquida de Alta Eficincia CLAE

J se comprovou anteriormente a alterao das caractersticas trmicas dos frmacos
quando associados, com isso aps a fuso das amostras contidas no interior dos porta amostras
de DSC, as mesmas foram resfriadas e solubilizadas em fase mvel a fim de se investigar a
presena de interaes qumicas entre os frmacos ou comprovar apenas a ocorrncia de
interaes fsicas por missibilidade das amostras.
Os frmacos fundidos isoladamente apresentaram mesmo tempo de reteno e rea sobre
o pico proporcional aos padres no fundidos, evidenciando a adequada recuperao da amostra
por esta tcnica. Contudo, a mistura ternria apresentou aps fuso cinco picos cromatogrficos,
sendo dois destes associados a produtos formados durante a interao da amostra no estado
lquido. Os produtos formados representam 1,59% da rea total dos 5 picos. Tais resultados no
podem ser expressos de forma quantitativa, devido a ausncia de padres para os dois produtos
formados (Fig. 10).
Ao analisar as amostras fundidas das misturas binrias evidenciou-se a formao destes
dois produtos de degradao (PD1 e PD2) apenas na mistura binria de AZT + EFV (1:1, p/p),
comprovando a identidade desdes compostos pela anlise do espectro no ultravioleta-visvel
obtido pelo detector de arranjos de diodo dos mesmos. Ao se correlacionar o lambda mximo
dos PD1 (=250 nm) e PD2 (=248 nm) com os espectros no UV-Vis dos frmacos AZT (=
 77

266 nm) e EFV (= 246 nm), pode-se evidenciar a semelhana destes com o espectro do EFV,
apresentando estes lambdas mximo em comprimento de onda semelhantes ao EFV.

Figura 10 - Cromotograma da mistura de AZT+3TC+EFV (1:1:1, p/p/p) aps a fuso.

Os picos formado nos tempos de reteno 6.662 e 7.462 correspondem aosmprodutos de

degradao formados.

Ao se investigar a possvel causa da formao destes dois produtos de degradao,

analisa-se que provavelmente estas no ocorrero em condies normais de temperatura e
presso no estado slido. A formao do PD1 plausvel de ser formado nas condies de
temperatura de fuso no estado lquido, uma vez que a zidovudina promove a tautomerizao do
efavirenz (Fig. 11).
A formao do PD2 plausvel nas condies de temperatura de fuso no estado lquido,
uma vez que ocorre uma ligao covalente instvel entre os dois compostos, resultante na
recuperao da zidovudina e de um plausvel sub-produto do efavirenz (Fig. 12).
 78

Uma vez que a hidroxila do AZT reage com o EFV, degradando a molcula e o frmaco
3TC tambm possui tal grupamento, pode-se supor que esta reao ocorreria entre AZT + 3TC
tambm, porm os resultados obtidos no evidenciam tal interao. Pode-se explicar o ocorrido
uma vez que a mistura binria de AZT+EFV apresenta processo de fuso integrado, j a mistura
de 3TC e EFV no apresenta fuso completa em uma nica faixa de temperatura, no sendo o
EFV capaz de solubilizar completamente e deslocar significativamente a temperatura de fuso do
3TC.

Figura 11 - Sugesto do mecanismo de formao do PD1 da fuso de AZT + EFV (1:1).

O
H O
Me
H HN
N O Me
HN O
N H

O O O N
Cl HO O N
O
Cl O
CF3 O
CF3
N3
N3

e fa vire n z z id o vu d in a

z id o vu d in a

H
N OH
N O

O
Cl O
Cl
CF3
CF3

s u b -p ro d u to p la u s ve l
(ta u t m e ro d o e fa vire n z )
 79

Figura 12 - Sugesto do mecanismo de formao do PD2 da fuso do AZT + EFV (1:1).

O
H O
Me
H HN
N O Me
HN O
N H

O O O N
Cl HO O N
O
Cl O
CF3 O
CF3
N3
N3

e fa vire n z z id o vu d in a

O
O
Me
Me H HN
HN
O H
N
NH2 O O O N
O O N
O O
Cl
O O
Cl
CF3
CF3 N3
N3

CO2

NH

O
NH2 CF3
Me Cl
z id o vu d in a
HN
CF3
Cl O N
O

N3 s u b -p ro d u to p la u s ve l
 80

CONCLUSES
Interaes fsicas associadas a verdadeiras reaes no estado slido no so evidenciadas,
interaes fsicas so evidnciadas na mistura aps atingir a temperatura de fuso de um dos
frmacos, ocorrendo os fenmenos de missibilidade e deslocamento das faixas de fuso e
decomposio. Alm das interaes fsicas uma interao qumica no estado lquido foi
evidnciada entre a mistura binria de zidovudina e efavirenz, responsvel pela formao de dois
produtos de degradao (PD1 e PD2), havendo a necessidade de se realizar o isolamento e a
caracterizao destes.

REFERNCIAS
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 82

6. Captulo III
6.1. DESENVOLVIMENTO FARMACOTCNICO

6.1.1Artigo III - Desenvolvimento de novo comprimido antirretroviral contendo zidovudina,

lamivudina e efavirenz associados em dose fixa.

Artigo a ser submetido ao AAPS PharmSciTech Journal

Qualis Capes para Farmcia: B2
 83

6.1.1. Artigo III - Desenvolvimento de novo comprimido antirretroviral contendo

zidovudina, lamivudina e efavirenz associados em dose fixa

FONTES, D.A.F.1; SOARES, M.F.L.R.1,2; ALVES, L.D.S.1; VIEIRA, A.C.C.1; MOURA,

M.L.C.1; LUZ, C.C.M.1; ROLIM, L.A.1; ROLIM-NETO, P.J.1

1
Laboratrio de Tecnologia dos Medicamentos, Departamento de Cincias Farmacuticas,
Universidade Federal de Pernambuco. Rua Arthur de S, s/n, Cidade Universitria, 50.740-521,
Recife PE, Brasil.
2
Ncleo de Tecnologia Farmacutica, Departamento de Bioqumica e Farmacologia,
Universidade Federal do Piau, Campus Universitrio Ministro Petrnio Portella, Ininga, 64.049-
550 Teresina PI, Brasil

RESUMO
O presente trabalho apresenta o desenvolvimento tecnolgico de um novo comprimido contendo
os frmacos antirretrovirais de primeira escolha teraputica Zidovudina, Lamivudina e Efavirenz
[AZT (300 mg), 3TC (150 mg) e EFV (300 mg) respectivamente] associados em dose fixa. O
produto visa agregar novas vantagens terapia atual ao modificar a posologia do EFV e associar
este ao produto combinado AZT+3TC. Ao se reduzir o nmero de comprimidos administrados
ao dia, se reduz o custo da terapia e se amplia a adeso do paciente, possibilitando maior acesso
ao tratamento e reduo de erros na admistrao. O desenvolvimento apresentou trs principais
entraves tecnolgicos solucionados, dentre estes a dissoluo do EFV, a compatibilidade da
formulao e a obteno de um comprimido com dimenses adequadas, devido dificuldades de
deglutio de produtos com grandes dimenses. O estudo de compatibilidade frmaco-
excipiente, selecionou os melhores excipientes para a formulao. O comprimido foi obtido com
peso de 900 mg, sendo 750 mg de insumos armacuticos ativos e 150 mg de excipientes
(celulose microcristalina, croscarmelose sdica, polivinilpirrolinona, estearato de magnsio,
dixido de silcio coloidal e lauril sulfato de sdio). Os resultados dos ensaios de controle de
qualidade aplicados forma farmacutica desenvolvida apresentaram-se de acordo com as
especificaes da Farmacopeia Brasileira, e na ausncia destas, definidas durante o
desenvolvimento do produto. Por meio do teste de dissoluo desenvolvido e validado obteve-se,
 84

em 30 minutos, os percentuais dissolvidos de 91,5% para o 3TC, 95,0% para o AZT e 90,2%
para o EFV, apresentando-se em acordncia com os produtos de referncia disponveis no
mercado. Conclu-se que a abordagem integrada da tecnologia farmacutica proporcionou a
obteno de um novo produto farmacutico dentro das exigncias regulatrias vigntes.
Palavras chave: Associao em dose fixa. Antiretrivirais. Formulao. Comprimido.
Compatibilidade frmaco-excipiente.

INTRODUO
At 1995, o tratamento antirretroviral consistiu-se principalmente em esquemas
teraputicos compostos por monodrogas ou associaes binrias de frmacos, apresentando
sucesso limitado. Atualmente, frmacos de diversas classes farmacolgicas e mecanismos de
ao em diferentes estgios de replicao viral tm sido associados. A terapia antirretroviral
composta pela associao de trs ou mais frmacos denomina-se de altamente ativa (HAART)
(DAY, 2003).
Quando tomado de forma diligente, tais terapias tm melhorado o prognstico dos
pacientes, retardando o aparecimento de linhagens resistentes ao vrus, assim como, retardando a
progresso da infeco pelo vrus da AIDS. No entanto, a eficcia da HAART depende do
paciente aderir quase perfeitamente ao tratamento, sendo a adeso enfraquecida pela
complexidade dos regimes posolgicos e pelos efeitos colaterais (MARIER et al., 2007).
Nesse sentido, no s a posologia combinada destes frmacos antirretrovirais se torna de
interesse para a maior eficcia do tratamento, mas a associao fsica desses frmacos em um
nico produto farmacutico, uma associao em dose fixa (ADF). Esta, oferece simplificao do
regime posolgico, proporcionando maior adeso do paciente ao tratamento. A fabricao
nacional de produtos em ADF acarreta tambm na reduo do custo produtivo deste
medicamento, ampliando o poder de compra dos governos e garantindo o acesso universal a um
nmero cada vez maior de pacientes (SOARES et al., 2011 a; LAVRA et al., 2008).
A HAART tem como terapia de primeira escolha a associao de dois inibidores da
transcriptase reversa anlogos de nucleosdeos (ITRNs), a zidovudina (AZT) e a lamivudina
(3TC), e um frmaco inibidor da transcriptase reversa no-anlogo de nucleosdeos (ITRNN), o
efavirenz (EFV). Tais frmacos, so atualmente disponibilizados ao mercado para
comercializao em dois produtos farmacuticos, 3TC (150 mg) associado a AZT (300 mg) na
 85

posologia de dois comprimidos ao dia e, EFV (600 mg) na posologia de um comprimido ao dia,
totalizando uma administrao de 3 comprimidos ao dia (WHO, 2009). O desenvolvimento do
comprimido em ADF a base dos antirretrovirais zidovudina (AZT, 300 mg), lamivudina (3TC,
150 mg) e efavirenz (EFV, 300 mg), almeja alcanar segurana e eficcia clnica, alm de
viabilidade produtiva.
Tal desenvolvimento possui trs principais desafios tecnolgicos. O primeiro desafio est
relacionado com a dissoluo do frmaco EFV nos fludos gastrintestinais, devido a baixa
solubilidade aquosa deste ( 9 g/mL) (SATHIGARI et al., 2009). Paralelamente, o segundo
desafio est relacionado com as interaes frmaco-frmaco e frmaco-excipiente, que podem
vir a ocorrer, alterando a estabilidade do produto farmacutico (SOARES et al., 2011 b;
SOARES-SOBRINHO et al., 2010 a; JIN; MADIEH; AUGSBURGER, 2007). Por fim, o
terceiro desafio est relacionado ao grande aporte de insumos farmacuticos ativos (IFA)
presentes na formulao (750 mg), que limita a adio de quantidades significantes de
excipientes para otimizao da formulao e do processo produtivo. Desta forma, limitou-se a
trabalhar com formulaes de no mximo 900 mg de peso, uma vez que tambm deve-se levar
em considerao a adeso do paciente ao tratamento, devido a inconvenincia da administrao
de uma forma farmacutica slida de grande tamanho.
Diante do exposto, o produto desenvolvido caracteriza-se como um novo medicamento,
uma vez que estabelece uma nova posologia para o efavirenz. Portanto, a anlise do perfil de
dissoluo comparativo entre o medicamento em ADF desenvolvido e os medicamentos de
referncia deve ser analisado caso a caso. O AZT e o 3TC apresentam medicamento de
referncia isolados e associados, devendo ser submetidos a estudos de bioequivalncia. O EFV,
por no possuir medicamento de referncia no mercado, nesta nova concentrao, deve ser
submetido a estudos de biodisponibilidade. O produto tambm deve ser submetido a um estudo
clnico de Fase III, para a confirmao da eficcia e segurana desta nova posologia proposta ao
EFV, sendo os endpoints do estudo a medio da carga viral e de clulas T CD4+ (BRASIL,
2010 c; EMEA, 2009; FDA, 2006; WHO, 2005).
Neste sentido, o desenvolvimento deste produto visou avaliar a compatibilidade entre os
frmacos e os excipientes, criar microambientes que favoream a solubilizao dos frmacos,
alm de obter um comprimido dentro das especificaes da Farmacopeia Brasileira 5. ed.
 86

(BRASIL, 2010 a) e, na ausncia destas, definir as novas especificaes durante o

desenvolvimento do produto.

MATERIAL E MTODOS
Material
Os frmacos foram cedidos pelo Laboratrio Farmacutico de Pernambuco (LAFEPE),
sendo: AZT (Northeast , lote DY070041), com pureza de 97,9%; 3TC (Hangzhou, lote
071208), com pureza de 100,0% e EFV (Cristlia, lote 1289/07), com pureza de 98,0%. Os
excipientes selecionados esto listados na Tabela 1.

Tabela 1 - Lista de excipientes utilizados no estudo de pr-formulao.

Classe Excipiente Origem - Fornecedor
Diluente Amido de milho pr-gelatinizado Colorcon - IN516910
Celulose microcristalina 101 ( 50 m)
(CM) Blanver - 326/05
Lactose malha 70 ( 230 m) (LAC 70) Quanti Q - L0913A4033
Lactose malha 80 ( 177 m) (LAC 80) Quanti Q - L0722A4003
Agregante polivinilpirrolidona K-30 (PVP) ISP - 05500138511V06
Hidroxipropilmetilcelulose (HPMC) Metrocel - 12105/10
Hidroxipropilcelulose (tipo NF) (HPC) Lafepe - 16345
Etilcelulose (10 STD PR, tipo IF) (EC) Colorcon - TH30013T01
Desagregante Croscarmelose sdica (CMS) Blanver - 8027/05
Glicolato de amido sdico (GAS) Blanver - 19191/05
Lubrificante Estearato de magnsio (Est. Mg.) Opo Fenix - 2009121200
Deslizante Dixido de silcio coloidal (DSColoidal) Degussa - 3158071326
Surfactante Lauril sulfato de sdio (LSS) Vetec - lote 1008436
 87

ESTUDO DE COMPATIBILIDADE FRMACO-EXCIPIENTE

Tcnica de obteno das misturas ternria e binrias
Aps estudo prvio de compatibilidede frmaco-frmaco dos trs frmacos de interesse,
por meio de misturas binrias de AZT+3TC, 3TC+EFV e AZT+EFV (1:1, m/m) e trnria
AZT+3TC+EFV (1:1:1, m/m/m), iniciou-se a investigao da compatibilidade frmaco-
excipiente. Para anlise, preparou-se a mistura fsica ternria dos frmacos AZT, 3TC e EFV
(1:1:1 m/m/m), nomeada de ADF, sendo esta submetida agitao em vortex (Barnstead
Thermolyne Maxi Mix II, 37600,) durante 5 minutos. Em seguida, preparou-se as misturas
fsicas binrias de ADF:excipiente (1:1 m/m), para cada um dos excipientes isolados, agitando
cada amostra em vortex durante 5 minutos.

Termogravimetria (TG) e Anlise Trmica Diferencial (DTA)

As curvas TG e DTA foram obtidas atravs do aparelho DTG 60/60H Shimadzu. As
condies estabelecidas foram: porta amostra de platina, peso da amostra de 3,0 mg (10%),
faixa de temperatura avaliada de 30 a 600C, razo de aquecimento de 10C/min e atmosfera
dinmica de nitrognio sob fluxo de 50 mL/min. Antes dos ensaios, verificou-se a calibrao do
instrumento empregando-se uma amostra de ndio e zinco.

Desenvolvimento farmacotcnico do comprimido

O desenvolvimento do comprimido foi realizado por meio de testes preliminares,
planificao quali-quantitativa dos IFA e excipientes selecionados, juntamente com a otimizao
do processo produtivo. Lotes de bancada de 300 g foram produzidos para ajuste da formulao e
lotes de bancada de 2 Kg foram produzidos para ajuste do processo produtivo. O processo
produtivo escolhido foi o de compresso por granulao via mida, devido as caractersticas dos
IFA envolvidos.
Os ps foram devidamente pesados em balana semi-analtica (Denver Instrument, APX
3202). A mistura dos ps foi realizada em saco plstico com mistura manual por 20 minutos. A
molhagem dos ps ocorreu em malaxadeira, com a adio lenta da soluo hidrolcoolica
molhante. A granulao ocorreu manualmente, submetendo a massa contra a malha de 2,5 mm.
A secagem dos grnulos ocorreu em estufa de ar circulante (Fabbe-Primar, 17104) a 50C pelo
tempo necessrio ao grnulo atingir a umidade especificada como desejvel, de 1 a 3%. A
 88

calibrao dos grnulos ocorreu manualmente, submetendo a massa contra a malha de 1,5 mm.
A mistura do grnulo aos excipientes da fase externa ocorreu em saco plstico com mistura
manual por 5 minutos para os excipientes de desempenho farmacotcnico (desintegrante e
surfactante) e por 2 minutos adicionais, para os excipientes de desempenho produtivo
(lubrificantes/deslizantes). Os comprimidos foram obtidos em compressora rotativa de 16
punes (Neuberger, MN-16) com punes circulares de ao inoxidvel de 13 mm de dimetro.
Os controles de qualidade foram realizados segundo Farmacopeia Brasileira 5. ed
(2010), sendo estes: umidade residual do grnulo (balana de resistncia, Sartorius, MA35);
dureza (durmetro, Vankel, modelo K-200), peso mdio (balana analtica, Shimadzu, AUX
220), friabilidade (friabilmetro, Vankel, FRI-001) e desintegrao (desintegrador, Nova tica,
301AC). A dissoluo (dissolutor, Varian, modelo VK-7000/7010/750D) foi realizada por meio
de mtodo de dissoluo desenvolvido e validado e o doseamento (cromatgrafo, Shimadzu
Prominence, 228/45001/32, com bomba de presso, LC20AT) por meio de mtodo analtico
publicado para o comprimido (SOARES et al., 2011 a).

Avaliao da liberao in vitro dos frmacos

O medicamento desenvolvido teve o seu perfil de dissoluo comparado a dissoluo de
dois produtos disponveis no mercado. Para o AZT (300 mg) e 3TC (150 mg) utilizou-se como
comparao o medicamento COMBIVIR do LAFEPE (lote, 09090226), no lugar do
medicamento de referncia BIOVIR da Glaxosmithkline. Para o EFV, como no existe
medicamento de referncia na dosagem selecionada, utilizou-se, apenas como carter
informativo, o medicamento EFAVIRENZ (600 mg) da Aurobindo (lote EA0609008), genrico
do medicamento de referncia STOCRIN da Merck Sharp & Dohme.
Como a concentrao do frmaco no meio de dissoluo afeta a saturao do meio e
consequentemente a forma de liberao do frmaco, 20 comprimidos do EFAVIRENZ da
Aurobindo foram pulverizados e, transferido o equivalente a 300 mg do frmaco para uma
cpsula de gelatina dura incolor. Esta cpsula foi acondicionada em uma ncora e a sua
dissoluo ocorreu simultaneamente com o COMBIVIR, na mesma cuba, simulando os trs
frmacos em uma mesma formulao.
O teste de dissoluo foi devidamente desenvolvido e validado de acordo com a
Farmacopia Americana 33-NF 28 (USP, 2010) e, os perfis de dissoluo comparativos entre o
 89

medicamento teste e os referncias, foram realizados segundo a Farmacopeia Brasileira 5. ed.

(2010). A liberao dos frmacos do comprimido no meio de dissoluo foi avaliada por 12
unidades do medicamento teste, assim como para os produtos de referncia. A cintica de
liberao foi avaliada por meio de 5 pontos de coleta: 15, 20, 30, 45 e 60 minutos.
O meio de dissoluo selecionado foi a gua adicionada de lauril sulfato de sdio (LSS) a
1% (pH 6,8), com volume de 1000 mL; p como aparato de dissoluo, com velocidade de
rotao de 100 rpm, e temperatura do meio de 37C 0,5C. No desenvolvimento do teste de
dissoluo realizou-se a avaliao quantitativa da solubilidade dos frmacos na faixa de pH
fisiolgico (1,2; 4,2 e 6,8, em 37C 0,5C), pelo mtodo de saturao do meio. Os resultados
obtidos apontaram o meio com pH de 6,8 o de melhor desempenho, e eliminou outras faixas de
pH, pois alm de ocorrer a degradao da lamivudina em mio cido (pH 1,2), o meio com pH
6,8 foi o nico capaz de apresentar um percentual de dissoluo (Q) satisfatrio e constante para
todos os trs frmacos (BRASIL, 2010 a; BRASIL, 2010 b; SOARES-SOBRINHO et al., 2008
a).

RESULTADOS E DISCUSSES
Aspectos gerais
Considera-se a solubilidade do EFV, frmaco de classe II (alta permeabilidade e baixa
solubilidade) de acordo com o Sistema de Classificao Biofarmacutica (SCB) (AMIDON et
al.; 1995), o maior entrave tecnolgico do desenvolvimento deste produto. Desta forma, as
abordagens iniciais englobaram estratgias de melhorar a solubilidade aquosa deste, visando sua
posterior formulao em um produto de ADF.
Inicialmente, projetou-se sistemas de disperses slidas (DS) frmaco-polmero, obtidos
com os polmeros PVP K-30, PEG 4000 e 6000, em diferentes propores, por meio de trs
tcnicas produtivas: fuso, malaxagem e rotaevaporao. Alm de DS frmaco-frmaco,
utilizando os trs frmacos envolvidos na formulao, por meio da tcnica de fuso. Em relao
aos polmeros, o PVP K-30 mostrou-se como o mais eficiente na solubilizao do EFV em
relao aos PEGs (LIMA et al., 2011; CASTRO et al., 2010).
Paralelamente, ao analisar-se o perfil de dissoluo das DS com PVP K-30 nas
propores 1:1, 2:1 e 4:1 (EFV: PVP K-30), observou-se que a DS malaxada 4:1 obteve a taxa
de dissoluo mais efetiva (59%) dentre as demais e em relao ao frmaco isolado (15%), uma
 90

vez que altas propores de PVP proporcionaram a formao de uma malha consistente que
levou a uma liberao lenta e incompleta do EFV a partir dos sistemas obtidos (ALVES, 2010).
Apesar das vantagens apresentadas, a preparao prvia de um grnulo isolado de efavirenz na
forma de DS pelo mtodo de malaxagem no mostrou-se adequada em uma escala de bancada,
impossibilitando a aplicao dessa tcnica.
Buscou-se ento a obteno de disperses slidas frmaco-frmaco por meio da tcnica
de fuso. A mistura ternria de AZT+3TC+EFV (2:1:2, proporo teraputica) foi fundida
obtendo-se uma massa amorfa com menor ponto de fuso, 104C, e temperatura de transio
vtrea compatvel com a estratgia. Esta abordagem permite a excluso do aporte de polmero da
disperso slida, densificando a massa, sem aumento do peso do produto final e sem a formao
da malha consistente que prejudica a dissoluo do EFV. Contudo, estudos evidenciaram a
formao de compostos relacionados aps a fuso dos mesmos, sendo esta uma reao qumica
no estado lquido, impossibilitando tal abordagem, sem estudos qumicos detalhados (SOARES,
2010).
Buscando-se uma nova alternativa a esse entrave tecnolgico, avaliou-se a dissoluo do
EFV complexado com ciclodextrinas naturais e modificadas, assim como a obteno de sistemas
multicomponentes utilizando a ciclodextrina mais efetiva associada ao polmero PVP K-30,
visando a diminuio da concentrao de ciclodextrina (menor custo) e uma maior efetividade
(SOARES-SOBRINHO et al., 2010 b).
Dentre as ciclodextrinas testadas, a metil--ciclodextrina (MCD) proporcionou o maior
incremento de solubilidade aquosa quando em soluo. Ao se obter sistemas multicomponentes
no estado slido com a MCD (20 mM) e o PVP K-30 (1%), pelo mtodo de malaxagem,
observou-se a dissoluo de cerca de 75% de frmaco, mostrando-se como uma alternativa
promissora (VIEIRA, 2010). Contudo, o alto aporte de excipientes utilizados tambm
impossibilita a utilizao desse sistema multicomponente no desenvolvimento do comprimido de
ADF.
Apostando em uma estratgia mais simples e vivel tecnologicamente, uma vez que
atravs das tcnicas citadas anteriormente observou-se que a diminuio de tamanho de
partculas e da tenso superficial facilitavam a solubilizao, optou-se por testar o processo de
micronizao do frmaco. Apesar da hiptese testada ter se mostrado verdadeira, apenas a
diminuio das partculas no se mostrou significativa para o incremento da solubilidade aquosa.
 91

Nesse caso, outros fatores esto relacionados e so prevalentes sobre esse. Como exemplo,
podemos citar a alta repulo das partculas pela gua, devido a sua caracterstica hidrofbica.
Outro aspecto importante a ser observado de que o EFV um cido fraco e possui alta
solubilidade em meios alcalinos. Observando-se essa caracterstica, idealizou-se a criao de um
microambiente alcalino, atravs da adio de bicarbonato de sdio na fase externa ao grnulo do
EFV. O principal objetivo dessa estratgia seria de permitir que quando o bicarbonato entrasse
em contato com o fluido estomacal cido, possibilitasse a neutralizao do mesmo, atravs da
formao de gua e dixido de carbono, levando elevao do pH. Consequentemente,
facilitaria a dissoluo do frmaco a partir da forma farmacutica e aumentaria a
biodisponilidade do mesmo. Contudo, atravs de testes prvios, concluiu-se que a concentrao
de bicarbonato necessria para a viabilizao dessa estratgia est acima da capacidade de
veiculao em um comprimido com as dimenses pretendidas, alm do desconforto de formao
de gs no estmago do paciente.
Concluiu-se com tais estudos prvios, que a dissoluo do EFV deveria ser otimizada por
meio da adio estratgica de adjuvantes farmacotcnicos, onde os mesmo agiriam como
incrementadores da dissoluo, sem que houvesse um grande aumento na massa final da
formulao. Ainda assim, caso esta abordagem no se demonstrasse interessante, a sntese de um
pr-frmaco do EFV seria uma alternativa vivel.

Estudo de compatibilidade frmaco-excipiente

Aps estudo prvio de compatibilidade frmaco-frmaco com os trs frmacos de
interesse, pode-se comprovar que no h interaes fsicas associadas a verdadeiras reaes no
estado slido entre os mesmos. Interaes fsicas so evidnciadas na mistura ternria aps
atingir a temperatura de fuso de um dos frmacos, ocorrendo os fenmenos de missibilidade e
deslocamento das faixas de fuso e decomposio. Alm das interaes fsicas, uma interao
qumica no estado lquido foi evidnciada entre a mistura binria de AZT e EFV, formando
compostos relacionados. Tal interao qumica no impeditiva para o desenvolvimento de um
produto farmacutico slido associado uma vez que h necessidade de fuso prvia dos frmacos
para a sua ocorrncia (SOARES, 2010).
A mistura ternria de AZT+3TC+EFV (1:1:1) apresentou fuso na faixa de 100 a 112C,
com o consumo de energia de 58 Jg, evidenciando uma associao dos comportamentos
 92

individuais. Aps a fuso do AZT, ocorre a missibilidade do 3TC no AZT fundido, maior
difuso da temperatura e deslocamento do ponto de fuso do EFV para uma nica faixa alargada
de fuso. A mistura dos trs frmacos apresenta menor estabilidade trmica do que as amostras
isoladas, uma vez que esta mistura no pode ser submetida a processos produtivos que envolvam
temperaturas maiores que 100C. Contudo, a mesma obteve a vantagem de apresentar uma maior
solubilidade aquosa, uma vez que necessita de uma menor quantidade de energia para
desorganizar o sistema supramolecular (SOARES, 2010).
Na anlise dos resultados do estudo de compatibilidade frmaco-excipiente por
termogravimetria (Tabela 2), observou-se que para a escolha do diluente da formulao os
melhores resultados foram para os compostos celulose microcristalina (CMC) e amido,
respectivamente, sendo ambos selecionados para o estudo de formulao. A lactose um aucar
redutor que reage facilmente com aminas primrias, sendo esta reao conhecida como reao de
maillard (ROWE; SCHESKEY; QUINN, 2009). Dentre os trs frmacos estudados, o 3TC, o
nico que possui uma amina primria disponvel para a ocorrncia desta reao. Contudo, tal
reao no foi evidnciada por meio dos resultados obtidos. Desta forma, a lactose no se
apresentou como um excipiente incompatvel, mas tambm no se apresentou vantajoso. No
houve diferenas significativas entre as lactoses de diferentes tamanhos de partculas.
O amido pr-gelatinizado um amido que foi fisicamente modificado por meio de um
aditivo qumico, um surfactante. Uma parte ou todos os grnulos foram rompidos, melhorando a
sua solubilidade, aumentando seu tamanho de partcula e melhorando suas propriedades de
fluxo. Tipicamente, o amido pr-gelatinizado contm 5% de amilose livre, 15% de amilopectina
e 80% de amido inalterado. Sua utilizao se d como diluente (5-75%) e desintegrante (5-10%)
(MEDEIROS, 2006). A CMC possu caractersticas que dependem diretamente da umidade
presente na celulose. Sua utilizao se d como diluente (5-75%), desintegrante (5-10%) e
adsorvente (ROWE; SCHESKEY; QUINN, 2009).
Apesar do estudo de formulao ter sido realizado para ambos excipientes selecionados,
pode-se adiantar que, por meio dos resultados na termogravimetria, a CMC apresentou menor
percentual de gua de hidratao em relao ao amido, alm de proporcionar uma maior
estabilidade fsica da mistura, por meio de um deslocamento positivo da temperatura inicial do
processo de decomposio (Tabela 2).
 93

Na seleo do agente agregante os melhores resultados foram dos compostos PVP e

HPC, respectivamente. Contudo, todos os excipientes foram aprovados, uma vez que no houve
prejuzo aos frmacos em nenhuma associao. Em relao ao PVP K-30, apesar deste possuir
14% de gua de hidratao, seu uso na formuao se d por meio de uma soluo hidrolcoolica,
no influenciando para a tomada de deciso o seu percentual de gua residual. O PVP possu
ampla popularidade na indstria farmacutica devido a sua adequao capacidade de agregao,
o que diminu o custo da matria-prima e aumenta o nmero de fornecedores do mesmo,
justificando sua seleo para o estudo de formulao (Tabela 2) (PICKER-FREYER; DRIG;
2007; TURI, 1997).
Para a escolha do agente desagregante, observou-se que ambos excipientes estudados
possuam um percentual significativo de gua residual (10%), no sendo este um parmetro
diferenciador. Tal percentual aceitvel e esperado, uma vez que estes excipientes possuem alta
afinidade por gua. A CMS um polmero reticulado da carboximetilcelulose sdica, solvel em
gua, hidroflico e altamente absorvente. O GAS um sal sdico de ter carboximetil de amido,
contendo 2,8 a 4,2% de sdio (MEDEIROS, 2006; TURI, 1997). Segundo a curva TG, a CMS
foi capaz de deslocar o incio da termodecomposio da mistura binria em 10C, uma vez que a
ADF inicia a sua decomposio em 189C, e a mistura binria apresentou incio em 200C. Com
base em tais resultados selecionou-se a CMS para o estudo de formulao, por ter atuado de
forma mais eficaz como polmero, agregando maior estabilidade fsica amostra (Tabela 2)
(GOHEL et al., 2007 a; GOHEL et al., 2007 b, JIN; MADIEH; AUGSBURGER, 2007).
O EMg, agente lubrificante, reduz a adeso entre os ps e as partes metlicas da
compressora. Por ser hidrofbico, sua utilizao se d em concentrao, de 0,25 a 5,0%, devendo
ser utilizado na menor concentrao possvel (ROWE; SCHESKEY; QUINN, 2009). O
DSColoidal, agente deslizante e adsorvente, melhora as propriedades de fluxo de ps, devido ao
seu pequeno tamanho de partculas e grande rea de superfcie. considerado um adsorvente
fraco, capaz de formar ligaes de hidrognio com molculas de gua (ROWE; SCHESKEY;
QUINN, 2009). Para a escolha dos lubrificantes/deslizantes observou-se que ambos os
excipientes testados, EMg e DSColoidal, no apresentaram incompatibilidades com os frmacos.
Tais excipientes so largamente utilizados e com isso, ambos foram selecionados para o estudo
de formulao (PATEL; KAUSHAL; BANSAL, 2007).
 94

O LSS, analisado como surfactante, foi utilizado com o objetivo de se criar um

microambiente para a solubilizao dos frmacos, principalmente o EFV. Adicionalmente, o
LSS possu propriedades lubrificantes em formas farmacuticas slidas (1-2%) (ROWE;
SCHESKEY; QUINN, 2009). Este excipiente no apresentou incompatibilidades fsicas com os
frmacos e por isso foi selecionado para o estudo de formulao (Tabela 2). A utilizao do LSS
deve ser moderada, uma vez que este solubiliza os lipdeos presentes no trato gastro-intestinal,
podendo, de acordo com as concentraes, alterar os processos fisiolgicos.

Desenvolvimento farmacotcnico do comprimido

Aps a seleo dos excipientes que no apresentaram incompatibilidades com os
frmacos ou melhoraram alguma propriedade dos mesmos, iniciou-se o processo de formulao
do produto. As inadequadas propriedades reolgicas dos frmacos, com destaque para a baixa
densidade e a alta carga esttica do EFZ, inviabilizam um processo produtivo por compresso
direta. Desta forma, optou-se pelo processo de compresso por granulao via mida.
Adicionalmente, devido ao grande aporte de frmacos na formulao, no foi possvel a
utilizao de excipientes multifuncionais para a correo das propriedades reolgicas dos ps,
que possibilitaria a viabilizao da tcnica por compresso direta.
Durante o processo de granulao mida percebeu-se a necessidade de molhar a massa
dos ps de forma lenta e constante. A molhagem excessiva desses durante o processo de
malaxagem, causa a formao de uma resina de caracterstica reolgica plstica, que inviabiliza
o processo de granulao. Este fenmeno foi anteriormente descrito durante o desenvolvimento
de comprimidos do EFZ (VIANA et al.; 2006).
Apesar de ser possvel a obteno de um comprimido sem diluente, com peso final de
800 mg, sendo apenas 50 mg de excipientes, os estudos realizados demonstraram que o
desenvolvimento de um comprimido de 900 mg, adicionando-se 100 mg, de um diluente fase
interna do grnulo, diminui significativamente a perda de doseamento do lote e a
desuniformidade do mesmo (Tabela 3). Esta hiptese foi confirmada atravs dos controles de
qualidades realizados nos lotes previamente fabricados.
 95

Tabela 2. Resultados do estudo de compatibilidade frmaco-excipiente por termogravimetria

FRMACOS ISOLADOS ADF

TG DTA TG DTA
T (C) m (%) T (C) H (J/g) T (C) m (%) T (C) H (J/g)
198-254 37 Endo: 121-124 Endo: 137
AZT
254-288 33 Exo: 210-237 Exo: 2000
Endo:100-112 58
Endo: 176-179 Endo: 185
3TC 229-340 52 189-320 62 Exo 1: 158-197 688
Exo: 254-269 Exo: 83
Exo 2: 299-309 403
Endo: 137-140 Endo: 57
EFV 187-274 86
Exo: 266-277 Exo: 74
EXCIPIENTE ADF + EXCIPIENTE
TG DTA TG DTA
T (C) m (%) T (C) H (J/g) T (C) m (%) T (C) H (J/g)
DILUENTES
34-100 (H2O) 3
34-100 (H2O) 8
AMIDO --- --- 253-308 40 Endo: 117-121 17
265-347 68
308-342 18
142-155 3 139-153 2 Endo 1: 116-123 16
Endo1: 146-150 107
LAC 80 210-260 28 189-239 26 Endo 2: 192-202 78
Endo2: 212-217 358
276-324 27 272-328 18 Endo 3: 212-216 358
140-156 3 138-155 2
Endo1: 145-149 71 Endo 1: 111-122 17
LAC 70 221-268 13 193-242 26
Diversos diversos diversos diversos
270-334 49 254-312 22
256-312 27
CMC 296-379 71 Endo: 353-361 540 Endo: 227-281 112
324-375 29
AGREGANTES
Endo 1: 41-60 191 34-100 (H2O) 8 Endo 1: 40-63 10
34-100 (H2O) 14
PVP Endo 2: 369-376 47 258-333 29 Endo 2: 115-123 33
366-465 77
Endo 3: 426-431 305 396-458 26 Endo 3: 237-293 139
29-100 (H2O) 7 Endo: 45-55 54
197-305 36 Endo: 119-123 14
HPMC 247-362 74 Exo1: 299-337 1580
305-381 39 Exo: 175-216 279
438-474 5 Exo2: 429-460 1470
Endo1: 284-321 266 213-315 30 Endo: 118-122 10
HPC 310-404 88
Diversos diversos 315-402 56 diversos diversos
Endo1: 305-311 51 208-295 26 Endo 1: 115-122 23
EC 299-387 89
Endo2: 376-379 18 295-385 60 diversos diversos
DESAGREGANTES
34-100 (H2O) 10 34-100 (H2O) 5 Exo: 125-209 438
CMS Exo: 281-297 290
258-326 38 200-346 47 diversos diversos
34-100 (H2O) 10 Exo: 132-200 891
GAS Exo: 61-178 169 188-321 56
236-338 44 diversos diversos
LUBRIFICANTES / DESLIZANTES
Endo 1: 119-123 8
DS
--- --- --- --- 195-337 37 Endo 2: 172-176 11
Coloidal
Endo 3: 244-275 69
55-100 (H2O) 5 Endo1: 54-56 249-326 44 Endo 1: 73-80 17
EMg 10
303-411 71 Diversos 359-404 11 diversos diversos
SURFACTANTE / LUBRIFICANTE
190-221 26
221-240 29 Endo 1: 90-98 203-248 35 Endo 1: 94-100 15
LSS 41
240-253 10 Diversos 276-310 14 diversos diversos
253-270 5
T: variao de temperatura. H: variao de entalpia. m: variao de massa. Endo: processo
endotrmido. Exo: processo exotrmico.
 96

Dentre os diluentes selecionados (amido e CMC), a CMC apresentou o melhor

desempenho no processo de granulao. Aps o processo de secagem e compresso, os
comprimidos obtidos com tais grnulos ficaram com menor espessura, menor umidade residual e
de colorao mais esbranquiada, alm de ter melhorado a dissoluo dos frmacos, em relao
ao comprimido obtido com o amido.
O processo de granulao dos ps atravs da molhagem com o agente agregante disperso
em soluo hidrolcoolica foi realizado em diversas concentraes de PVP (0,25; 0,5; 0,75 e
1,0%) e percentual de lcool na soluo hidrolcoolica (25, 50 e 75%). O EFV apresenta por si
s caractersticas de agregao, no sendo necessrio mais do que 0,5% de PVP para a obteno
de um grnulo resistente e ao mesmo tempo deformvel. A soluo hidrolcoolica com 50% de
lcool confere a massa um aumento de densidade do grnulo (devido a gua) e agilitade no
processo de secagem em estufa (devido ao lcool). Paralelamente, o lcool dispersa melhor o
polmero PVP, possibilitando a formao de uma rede polimrica desejvel.
Em relao ao processo de molhagem, a malaxadeira possibilita a obteno de um
grnulo denso, necessrio para a obteno de um comprimido com dureza desejvel. Enquanto
que em batedeira planetria as caractersticas da massa formada so inadequadas para a obteno
tecnolgica do comprimido, devido a baixa densificao dos ps.
Na tabela 3, descreve-se a formulao selecionada aps o estudo quali-quantitativo dos
excipientes e otimizao do processo produtivo. Apesar das concentraes selecionadas dos
lubrificantes/deslizantes estarem em concentraes altas, principalmente por se tratar de uma
formulao que necessita de uma melhor dissoluo, a presena destes excipientes so
fundamentais para a realizao do processo produtivo em larga escala. Ao se diminuir as
concentraes do DSColoidal (0,5; 1,0 e 1,5%) e/ou EMg (0,5; 0,75 e 1,0%), observou-se a
aderncia dos grnulos nos punes, alm de menor fluxo da massa granulada para compresso,
impossibilitando a obteno de comprimidos lisos e uniformes.
Neste sentido, a adio do LSS na fase externa ao grnulo se justificou como uma
estratgia tecnolgica que possibilita a formao de um microambiente capaz de diminuir a
tenso superficial entre os frmacos e os fludos biolgicos, e ao mesmo tempo contribui como
agente lubrificante de caracterstica hidroflica.
 97

Tabela 3 - Informaes dos frmacos aplicveis no desenvolvimento de um produto farmacutico e sua avaliao.
Informaes Zidovudina (AZT) Lamivudina (3TC) Efavirenz (EFV)
Dosagem (12 h) 300 mg 150 mg 300 mg
Medicamento
RETROVIR - Glaxosmithkline EPIVIR - Glaxosmithkline STOCRIN - Merck Sharp & Dohme
Referncia no Mercado
AZT + 3TC - BIOVIR Glaxosmithkline
Anti-HIV. Inibidores da Transcriptase Reversa No-Anlogos
Classe Teraputica Anti-HIV. Inibidores da Transcriptase Reversa Anlogos Nucleosdeos (ITRN)
Nucleosdeos (ITRNN)
P cristalino branco a quase branco P cristalino branco a quase branco
Caractersticas P cristalino branco a levemente amarelo
Necessita proteo contra luz No higroscpico e lipoflico
Class. Biofarmacutica I I II
Levemente solvel em gua (10-50 mg/mL a 17C), Soluv. em gua (70 mg/mL), facilmente soluv. em
Solubilidade metanol e diclorometano. Solubilidade H2O aumenta acima de
solvel em lcool lcool, lev. soluv. em metanol
pH 9 (perda do prton da amina do carbamato)
pH-partio Base fraca Base fraca cido fraco
Formula molecular C10H13N5O4 C8H11N3O3S C14H9ClF3NO2
Massa molecular 267.24 g/mol 229.3 g/mol 315.68 g/mol
pKa ou pKb 9.86 4,3 10.3
Log P (hidrofobicidade) 0.05 -1.4 4.18
Rotao Optica []D25 (c=1.0% p/v- alcool) Faixa: +60.5C a []D25 (c=1.0% p/v- metanol) []D25 (c=0.50% p/v- metanol)
(base anidra) +63.0C Faixa: +135C a +145C Faixa:100C a -89.0C
Isomerismo No Sim No
Ponto de Fuso 120-127C 174-180C 134-138C
2 formas descritas em farmacopeia 5 formas descritas em farmacop.. Selecionou-se a forma 1,
H formas descritas na literatura.
Polimorfismo Forma 1: 126 C, Forma 2: 177 C. Selecionou-se a mais estvel termodinmicamente. Forma 1: 138 C, Forma 2:
No h formas descritas em Farmacopeia.
forma 2. 116 C, Forma 3: 108 C, Forma 4: 95 C, Forma 5: 108C
Perda por dessecao No mais que 1% p/p No mais que 1% p/p No mais que 0.5% p/p
Resduo de Ignio No mais que 0.25% p/p No mais que 0.2% p/p No mais que 0.2% p/p
Metais Pesados No mais que 20 ppm No mais que 20 ppm No mais que 20 ppm
Concentraes plasmticas de 1,6-9,1 M so atingidas com
Rapid. absorvido pelo TGI c metabolismo de 1 Rapid. absorvido aps adm. oral e conc. plasmticas
adm. VO, existindo uma absoro diminuda em doses mais
passagem. Biodisponib. oral de aprox. 60 a 70%. mx. so atingidas em 1 h. A biodisp. oral aprox. 80-
Biodisponibiliade Oral elevadas (farmacocintica no-linear). Biodisponibilidade oral
As conc. plasmticas mx. ocorrem aps 1 hora. 87%. A absoro retardada, mas no reduzida, pela
de aprox. 40% a 45%. A presena de alimentos gordurosos
Retardo da absoro na presena de alimentos. ingesto de alimentos. A biodisp. oral de 80 a 87%.
podem aumentar significativamente a absoro do frmaco.
Lig. s p.p. de at 36%. Atravessa a BHE, produzindo Alta lig. s p.p. (aprox. 99,5-99,75%). Conc. no LCR entre
Atravessa a BHE (LCR/plasma de aprox. 0,5), a
LCR /plasma de aprox. 0,5. e 0,26 e 1,19% (mdia de 0,69%) da conc. plasm.
Farmacocintica: placenta e distribudo no leite materno. Ligao
aproximadamente 0,12. Atravessa a placenta e correspondente. Metabolismo heptico por hidroxilao com
Distribuio s p.p. de 34 a 38%. T plasm. aprox. h.
distribudo no leite materno. Baixo metabol. heptico. glucuronidao subseqente. T plasm. relativamente longo
Metabolismo Excreo Inativao heptica por glicuronidao. Excreo
Excreo renal na forma inativa. por excreo renal (52 a 76 h). Excreo renal de 14 - 34%, sendo menos de 1 %
renal na forma inalterada alterada.
ativa. T plasm de 5 a 7 h. na forma inalterada.
Dens. apar. 0.42 g/mL, dens. compac. 0.67 g/mL. Dens.apar. 0.56 g/mL, dens.compac. 0.86 g/mL. Densidade apar. 0.25 g/mL, densidade compac. 0.39 g/mL.
Propriedades Reolgicas ngulo e vel. de escoamento com fluxo infinito. ngulo e vel. de escoam. com fluxo infinito. ngulo e vel. de escoamento com fluxo infinito.
Reologia: Indice de Hausner 0.42; Ind.de Carr 67%. Reologia: Ind. de Hausner 0.56; Ind. de Carr 86%. Reologia: Indice de Hausner 0.25; Indice de Carr 39%.
 98

Os resultados dos controles de qualidade aplicados ao produto desenvolvido esto

apresentados na Tabela 5, confirmando a adequao do comprimido as especificaes
farmacopeicas. A determinao do peso para formas farmacuticas em dose unitria, no caso
de comprimidos no revestidos com 250 mg de peso ou mais, deve ser 100,0% 5,0%. Para
doseamento se manteve a lgica dos produtos contendo tais frmacos isolados, de 90 a 100%.
Para a dissoluo, uma vez que o produto associado de AZT+3TC comprimido apresenta
limite farmacopeico de Q80% em 60 minutos e para EFV comprimido apresenta limite
farmacopeico de Q80% em 45 minutos, estabeleceu-se o valor de Q de 80%, e o tempo de
30 minutos, para a nova formulao, de acordo com os resultados obtidos no perfil de
dissoluo.
Quanto uniformidade de contedo, realizou-se atravs do doseamento dos
componentes ativos de dez doses unitrias para determinar se os frmacos esto dentro dos
limites especificados, devendo possuir sua uniformidade controlada para garantir maior
segurana clnica do produto (BRASIL, 2010 a).

Tabela 4 - Formulao selecionada para o produto.

Componentes Percentual no lote (%)
EFV 33,3
AZT 33,3
3TC 16,7
Fase interna ao
Celulose Microcristalina 101 10,7
grnulo
Croscarmelose Sdica 1,0
Polivinilpirrolidona
0,5
(em sol. hidroalcolica 50:50)
Estearato de Magnsio 1,0
Fase externa ao Dixido de Silcio Coloidal 1,5
grnulo Croscarmelose Sdica 1,0
Lauril Sulfato de Sdio 1,0
 99

Tabela 5 - Controles de qualidade realizados para o produto.

Controles de Qualidade Especificao Resultado
Umidade do granulado
Aceita-se entre 1 e 3% 1,2%
(Parmetro Interno)
Peso Mdio 900 mg, aceita-se entre
897,5 mg
(Farm. Brasileira V edio) 855 e 945 mg ( 5%)
Dureza Aceita-se de
15,58 Kgf
(Parmetro Interno) 12 a 18 Kgf ( 2Kgf)
Friabilidade
1,5% 0,07%
(Farm. Brasileira V edio)
Desintegrao
30 min 2,5 min
(Farm. Brasileira V edio)
Dissoluo
(ANVISA RDC 31/2010)
AZT Q 80% em 30 min 95,0%
3TC 87,2%
EFV 90,2%
Doseamento
(Parmetro Interno)
AZT 100%, aceita-se de 90 a 110% 99,2%
3TC 91,6%
EFV 97,1%

Avaliao da liberao in vitro dos frmacos

Pelos critrio da Farmacopeia Brasileira 5. ed. (2010), tanto os produtos de referncia
como os medicamentos teste possuem liberao imediata, com dissoluo muito rpida
(dissoluo mdia de 85% em 30 minutos) (Tabela 6), no sendo discriminativo aplicar os
modelos matemticos de diferena (F1) e semelhana (F2) para os perfils.
Para produtos de dissoluo muito rpida, geralmente se aplica perfis de dissoluo
com coleta nos pontos: 5, 10, 15, 20 e 30 minutos. Sendo que no ponto de 15 minutos o valor
do coeficiente de variao (CV) dos dados no deve exceder o recomendado, de 10%
(BRASIL, 2010 a; BRASIL, 2010 b). No estudo conduzido, apesar de se ter escolhido pontos
de coleta em tempos maiores, as quantificaes realizadas no ponto de 15 minutos
apresentaram CV de 4,0% (3TC), 4,7% (AZT) e 3,4% (EFV). Com base nos resultados,
pode-se determinar com segurana que a especificao de Q 80% em 30 minutos,
adequada para a anlise do produto desenvolvido.
Dentre os frmacos o 3TC foi o que apresentou menor dissoluo, contudo, este fato
pode ser correlacionado com o menor valor de doseamento apresentado para o lote analisado
 100

(Tabela 5). No ponto de coleta de 30 minutos todos os valores de dissoluo dos 12

comprimidos, assim como a sua mdia, apresentaram-se acima dos critrios de aceitao para
o teste de dissoluo de formas farmacuticas de liberao imediata, sendo maior ou igual a
Q + 5%, equivalente a 85% de frmaco dissolvido (BRASIL, 2010 a; BRASIL, 2010 b).
A anlise dos perfis de dissoluo comparativos foi vivel apenas em meio de LSS a
1% com pH 6,8; uma vez que em pH 1,2 visualizou-se a degradao de um percentual da
lamivudina, acarretando no aparecimento de picos cromatogrficos relacionados, provocando
a alterao dos tempos de reteno dos picos dos frmacos no cromatograma, uma vez que o
mtodo utilizado para o controle de qualidade de rotina no seletivo para os frmacos e seus
produtos de degradao simultneamente. Alm disso, houve grande variao dos resultados
obtidos em meio de pH 1,2 e 4,2, apresentando altos valores de coeficientes de variao,
valores estes fora dos estabelecidos como aceitveis para processo de validao.
O produto desenvolvido foi aprovado em seu controle de qualidade (Tabela 5) e seu
perfil de dissoluo no difere dos perfis dos medicamentos de referncia (Tabela 6). Para
fins de registro, o comprimido desenvolvido apresenta-se pronto para iniciar o seu estudo de
estabilidade e em seguida ser submetido a estudos de biodisponibilidade/bioequivalncia,
alm de um Estudo Clnico de Fase III.

Tabela 6 - Perfil de dissoluo comparativo.

Dissoluo 3TC (270 nm) AZT (270 nm) EFV (248 nm)
Tempo (min) Ref. (%) Teste (%) Ref. (%) Teste (%) Ref. (%) Teste (%)
15 96,9 94,1 107,3 103,0 104,7 84,2
20 95,2 93,1 105,8 101,9 110,4 88,8
30 95,1 91,5 105,6 95,0 111,7 90,2
45 92,5 90,4 103,2 97,6 107,7 97,1
60 94,7 90,3 105,4 98,0 110,2 99,7

CONCLUSES
O desenvolvimento do comprimido contendo os frmacos antirretrovirais associados
em dose fixa, zidovudina (AZT, 300 mg), lamivudina (3TC, 150 mg) e efavirenz (EFV, 300
mg), superou todos os desafios tecnolgicos apresentados. Apesar de se ter trabalhado
inicialmente apenas com o EFV, buscando compreender o melhor mecanismo de se
incrementar a sua solubilidade, a associao deste aos dois outros frmacos de interesse, de
maior solubilidade, e a um estratgico uso dos excipientes farmacuticos, alterou
completamente a dinmica do sistema; incrementando a dissoluo do frmaco EFV. Apesar
 101

do grande aporte de IFA (750 mg), obteve-se um comprimido com peso final de 900 mg, sem
interaes frmaco-frmaco e frmaco-excipiente, comprovadas por meio do estudo trmico.

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 104

7. Captulo IV
7.1. DESENVOLVIMENTO E VALIDAO DO TESTE DE DISSOLUO

7.1.1.Artigo IV - Desenvolvimento e Validao de Teste de Dissoluo para Comprimido

contendo a Associao em Dose Fixa de Zidovudina, Lamivudina e Efavirenz.

Artigo submetido ao Journal of Pharmaceutical Sciences

Qualis Capes para Farmcia: A2
 105

7.1.1. Artigo IV - Desenvolvimento e validao de teste de dissoluo para comprimido

contendo efavirenz, lamivudina e zidovudina associados em dose fixa

FONTES, D.A.F.1; SOARES, M.F.L.R.1,2; ALVES, L.D.S.1; VIEIRA, A.C.C.1; LUZ,

C.C.M.1; ROLIM, L.A.1; ROLIM-NETO, P.J.2

1
Laboratrio de Tecnologia dos Medicamentos, Departamento de Cincias Farmacuticas,
Universidade Federal de Pernambuco. Rua Arthur de S, s/n, Cidade Universitria, 50.740-
521, Recife PE, Brasil.
2
Ncleo de Tecnologia Farmacutica, Departamento de Bioqumica e Farmacologia,
Universidade Federal do Piau, Campus Universitrio Ministro Petrnio Portella, Ininga,
64.049-550 Teresina PI, Brasil

RESUMO
O presente trabalho apresenta o desenvolvimento e validao de um teste de dissoluo
destinado ao controle de qualidade do comprimido contendo os frmacos antirretrovirais
zidovudina (AZT, 300 mg), lamivudina (3TC, 150 mg) e efavirenz (EFZ, 300 mg) associados
em dose fixa. Inicialmente, o meio de dissoluo foi definido por meio da determinao da
solubilidade e condio sink dos frmacos em diversos candidatos meio. Para isso, adotou-
se o EFZ como referncia crtica devido a sua baixa solubilidade aquosa ( 9 g/mL). Aps a
seleo da composio do meio, gua purificada adicionada de lauril sulfato de sdio (LSS)
(pH 6,8), realizou-se um planejamento fatorial com as variveis de interesse: velocidade de
rotao do aparato p (75 e 100 RPM), o volume do meio (900 e 1000 mL), e a concentrao
do surfactante LSS (0,75 e 1,0%). Foram definidos como melhores parmetros: meio de LSS
a 1,0%, volume de 1000 mL, aparato p na velocidade de 100 RPM, considerando a
temperatura do meio de 37C 0,5C. O desenvolvimento do teste foi realizado em perfil,
avaliando-se a dissoluo nos tempos 15, 20, 30, 45 e 60 minutos. Contudo, os resultados
evidenciaram que para o controle de qualidade de rotina do produto, a anlise pontual, em 30
minutos, j se demonstra satisfatria para a dissoluo dos frmacos. A validao do teste
seguiu a USP 33 (2010). O teste foi considerado validado uma vez que apresentou preciso
por meio da anlise da repetitividade, com coeficiente de variao entre as replicatas de
2,82%, 1,32% e 2,44%, para EFZ, AZT e 3TC, respectivamente. Por meio da preciso
intermediaria, o mtodo demonstrou preciso com resultados equivalentes entre dias [F
calculado: EFZ (0,06), AZT (0,27) e 3TC (0,88); F crtico: 6,61] e entre analistas [F
calculado: EFZ (1,04), AZT (3,28) e 3TC (0,48); F crtico: 5,05], por meio da ANOVA fator
duplo. A robustez foi determinada pela comprovao da eficincia da filtrao na
interrupio da dissoluo, no sendo crtica a utilizao de filtro com porosidade de 8 m de
dimetro em relao ao empregado usualmente de 28 m [F tabelado: EFZ (1,53), AZT
(12,40) e 3TC (3,10); F crtico: 18,51, segundo teste T Student]. O teste tambm domonstrou-
se robusto em relao estabilidade de 24 horas dos frmacos no meio de dissoluo [F
calculado: AZT (6,78), 3TC (5,32) e EFZ (4,87); F crtico:, segundo teste T Student] e
 106

desaerao do meio [F calculado: EFZ (2,27), AZT (3,78) e 3TC (2,54); F crtico: 18,51,
segundo teste T Student]. Por fim, a anlise da dissoluo do comprimido desenvolvido
atingiu em 30 minutos o percentual dissolvido de 91,88% 1,33 para o EFZ, 93,39 % 3,28
para o AZT e de 98,33% 3,69 para o 3TC.

Palavras chave: validao. Dissoluo. Efavirenz. Lamivudina. Zidovudina. Planejamento

Fatorial.

INTRODUO
O tratamento antirretroviral de primeira escolha para a AIDS combina dois inibidores
da transcripitase reversa anlogos de nucleosdeo [zidovudina (AZT) e lamivudina (3TC)]
associados a um inibidor da transcripitase reversa no-anlogo de nucleosdeo [efavirenz
(EFZ)]. Este esquema considerado de primeira escolha, exceto para gestantes e crianas
menores de trs anos, onde subistitui-se o EFZ por nevirapina (BRASIL, 2008; BRASIL,
2009; RAJESH et al., 2010).
Tais frmacos so atualmente disponibilizados ao mercado para comercializao em
dois produtos farmacuticos, 3TC (150 mg) associado a AZT (300 mg) na posologia de dois
comprimidos ao dia e EFZ (600 mg) na posologia de um comprimido ao dia, totalizando uma
administrao de 3 comprimidos administrados ao dia.
O presente trabalho apresenta um teste de dissoluo desenvolvido para o controle de
qualidade de novo produto que associa estes trs frmacos em uma nica forma farmacutica,
reduzindo o nmero de comprimidos administrados de 3 para 2 ao dia, simplificando o
regime posolgico e aumentando a adeso ao tratamento.
No desenvolvimento desta associao em dose fixa (ADF) deve-se levar em
considerao que os frmacos apresentam caractersticas diferentes de solubilidade e
biodisponibilidade, e que a formulao proposta deve alcanar a biodisponibilidade
satisfatria para cada um dos frmacos. Devido a sua baixa solubilidade aquosa ( 9 g/mL),
o EFZ, comporta-se de forma diferenciada dos demais (SATHIGARI et al., 2009), sendo
necessrios ajustes especficos de formulao para a sua solubilizao nos fludos corporais,
ajustes estes que ficam limitados devido ao grande aporte de insumos farmacuticos ativos na
formulao (RATHBONE; HADGRAFT; ROBERTS, 2003; KARAVAS et al., 2007).
Diante disso, o teste de dissoluo desenvolvido deve ser capaz de avaliar a liberao
dos frmacos in vitro, de forma correlacionvel com as condies reais do trato gastro-
intestinal, in vivo.
 107

MATERIAL E MTODOS
Material
Os materiais utilizados foram: lauril sulfato de sdio (LSS, Vetec), polissorbato 80
(PLS 80, Vetec), cido clordrico (HCl, Dinmica), cloreto de sdio (NaCl, Dinmica),
acetonitrila (CH3CN, Carlo Erba) e gua purificada (Sistema Milli-Q academic,
Millipore). Papel de filtro de 8 e 28 m (Quanty).
Os insumos farmacuticos ativos utilizados foram: AZT (Northeast , lote
DY070041), pureza de 97,9%; 3TC (Hangzhou, lote 071208), pureza de 100,0% e EFV
(Cristlia, lote 1289/07), pureza de 98,0%.
O produto acabado utilizado foi o comprimido ADF composto pelos frmacos AZT
(300 mg), 3TC (150 mg) e EFZ (300 mg) e, excipientes Celulose Microcristalina,
Croscarmelose Sdica, Polivinilpirrolidona, Estearato de Magnsio, Dixido de Silcio
Coloidal, Croscarmelose Sdica e Lauril Sulfato de Sdio.
Este, foi desenvolvido pelo Laboratrio de Tecnologia dos Medicamentos (LTM-
UFPE), apresentando teor dentro das especificaes (100 5%).

Planejamento Fatorial
O desenvolvimento do mtodo foi realizado atravs da anlise da solubilidade dos
frmacos em candidatos a meios, e posteriormente atravs de um planejamento fatorial 2,
onde variveis so modificadas ao mesmo tempo, de forma cuidadosamente programada,
atravs de um planejamento experimental. Desta forma, devido ao menor nmero de
experimentos executados, dados apropriados so coletados com reduo de tempo e custos
(NEVES et al., 2002).

Estudo de solubilidade
O estudo de solubilidade foi realizado em triplicata, utilizando banho-maria (Dubnoff
NE-2099, Nova tica), por meio da solubilizao simultnea dos trs frmacos de interesse
em diferentes meios de dissoluo. Os candidatos previamente selecionados foram: LSS (1%;
0,75% e 0,5%); suco gstrico simulado (SGS) composto por HCl 0,1 M + NaCl 0,1 M; SGS
+ LSS (1%; 0,75% e 0,5%); PLS 80 (1%; 0,75% e 0,5%); HCl 0,1 M e gua purificada. Em
tubos de ensaio, foram adicionados os frmacos aos meios; obtendo-se um excesso
equivalente a cinco comprimidos ADF em uma cuba de 1000 mL de meio. As amostras
foram colocados sob agitao 37C 0,5C por 24 horas. Logo aps, foram filtradas em
papel filtro com porosidade de 28 m, diludas 10 vezes e analisadas por cromatografia
 108

lquida de alta eficincia (CLAE) (LC-20A Prominence, Shimadzu). O pH dos candidatos a

meio foi aferido atravs de pHmetro (Micronal, B474) antes da realizao do estudo.

Desenvolvimento do Teste de Dissoluo

Aps a seleo da composio do meio, gua purificada adicionada de lauril sulfato

de sdio (LSS) (pH 6,8) temperatura de 37C 0,5C (BRASIL, 2010), realizou-se um
planejamento fatorial com as variveis: velocidade de rotao do aparato p (75 e 100 RPM),
volume do meio (900 e 1000 mL), e concentrao do surfactante LSS (0,75 e 1,0%). Este
estudo foi realizado em dissolutor (Varian, VK-7010) utilizando os comprimidos ADF e
coleta em ponto nico no tempo de 30 minutos. As amostras foram coletadas e filtradas em
papel filtro com porosidade de 28 m (Quanty), diludas na proporo de (35:65) em soluo
de acetonitrila e gua (50:50) e filtradas em filtro com membrana Millipore 0,22 m de
poro, 13 mm (Millex). As amostras foram analisadas por CLAE.

Anlise quantitativa dos frmacos

O mtodo cromatogrfico utilizado para a quantificao dos percentuais solubilizados
foi devidamente desenvolvido e validado por SOARES e colaboradores (2011), para o
controle de qualidade do produto desenvolvido. A presenta do meio de dissoluo juntamente
ao sistema solvente (35:65), no influenciou a performance do sistema.

Validao
Aps o desenvolvimento do mtodo avaliou-se os parmetros de preciso e robustez,
durante o processo de validao, seguindo como referncia a USP 33 (2010). A preciso foi
determinada atravs dos mtodos de repetitividade e preciso intermediria. A repetitividade
foi determinada pela anlise de amostras individuais em sextuplicata e a preciso
intermediria em triplicata, ocorrendo em dois dias e executadas por dois analistas. A
robustez foi determinada em triplicata a partir da variao do dimetro dos poros do filtro de
dissoluo (8 e 28 m), do meio de dissoluo com e sem desaerao e, da estabilidade dos
frmacos no meio de dissoluo por 24 horas.
 109

RESULTADOS E DISCUSSO
Estudo de solubilidade
Os resultados obtidos para a solubilidade dos frmacos esto presentes na Tabela 1.
Apesar dos dados de solubilidade dos trs terem sidos analisados, um enfoque diferenciado
foi atribudo ao EFZ, devido a sua baixa solubilidade aquosa ( 9 g/mL). Para o AZT e o
3TC todos os meios atingiram, aps 24 horas, a condio sink. A condio sink pode ser
definida como uma quantidade de solvente no inferior a 3 vezes o volume de meio
necessrio para solubilizar a dosagem do frmaco.
Para o EFZ, os piores meios foram: gua, SGS e HCl 0,1M. Para estes, aps a
diluio padro das solues, no foi possvel ao menos quantificar o EFZ solubilizado,
estando a concentrao do frmaco abaixo do limite de quantificao do mtodo
cromatogrfico. Ainda para o EFZ, os melhores meios foram: LSS a 1,0% (927,9 g/mL) e a
0,75% (747,8 g/mL). Portanto, optou-se por selecionar estas concentraes para um estudo
mais aprofundado, agora, com a utilizao do produto farmacutico e tempos de coleta
representativos do teste de dissoluo (15, 20, 30, 45 e 60 minutos).

Tabela 1. Solubilidade dos frmcos EFZ, AZT e 3TC em diversos meios.

FRMACOS EFZ (g/mL) AZT (g/mL) 3TC (g/mL)

Conc. da terica de 100% da ADF em
300 300 150
1000 mL
Meios pH EFV AZT 3TC
gua 5,27 --- 2089,6 811,2
SGS 1,82 --- 2271,2 1014,8
SGS+LSS 1,0% 1,24 546,9 2331,9 531,4
SGS+LSS 0,75% 1,80 550,6 2550,0 665,7
SGS+LSS 0,5% 1,94 449,3 2375,3 661,4
LSS 1,0% 6,8 927,9 2324,0 861,1
LSS 0,75% 6,50 747,8 2534,9 917,6
LSS 0,5% 6,37 507,3 2279,0 994,6
PLS 80. 1,0% 6,47 650,9 2352,1 896,7
PLS 80. 0,5% 6,30 584,4 2394,8 947,2
HCl 0,1 M 1,80 --- 2469,3 1056,2
(---) No foi possvel quantificar pelo mtodo utilizado.

Desenvolvimento do Mtodo Analtico de Dissoluo

Aps a seleo da composio do meio de dissoluo foram escolhidas algumas
variveis potencialmente relevantes para a dissoluo e, atribudo s mesmas, dois sinais: um
 110

positivo (+) e outro negativo (-), representando o maior e o menor nvel da varivel
respectivamente, como demonstrado na Tabela 2.

Tabela 2. Especificaes das variveis e seus respectivos sinais

SINAL ROTAO VOLUME (ML) CONC. (% LSS)
(+) 100 1000 1,0
(-) 75 900 0,75

Atribudos os sinais, foram realizados oito experimentos, em triplicata, modificando-

se todos os nveis das variveis, sendo possvel estabelecer uma correlao simultnea entre
eles. A razo para isso que as variveis podem se influenciar mutuamente e o valor ideal
para uma delas pode depender do valor da outra. Nesta fase, os efeitos das variveis crticas e
suas interaes so quantificados atravs dos mtodos de anlise de varincia, os quais so
usualmente aplicados aos dados gerados pelos planejamentos fatoriais (SANTANA et al.,
2008; NEVES et al., 2002). Os experimentos e seus resultados esto plotados na Tabela 3.

Tabela 3. Resultados da seleo de variveis, em 30 minutos de dissoluo

ROTAO VOLUME CONCENTRAO EFZDP (%) AZTDP (%) 3TCDP (%)
- - - 82,50 2,73 82,98 10,45 90,87 6,27
+ - - 94,66 2,20 90,26 7,32 99,59 0,33
- + - 69,40 2,04 77,31 1,90 74,67 2,35
+ + - 88,48 2,49 95,54 2,18 101,02 2,09
- - + 75,93 1,05 77,85 1,29 83,77 0,40
+ - + 93,33 0,93 91,78 1,23 97,24 1,65
- + + 73,21 4,08 77,68 1,29 74,73 1,86
+ + + 91,88 1,33 93,39 3,28 98,33 3,69
DP: Desvio Padro
Na interpretao destes resultados, continuou-se estabelecendo o EFZ como
referencial para a escolha dos parmetros. A Figura 1 apresenta de forma grfica a influncia
destes parmetros na dissoluo do EFZ.
Mediante os resultados dos experimentos, foram calculados os efeitos das variveis
isoladas e das interaes entre si, como mostra a Tabela 4, para o frmaco EFZ. Os valores
positivos do efeito da varivel demonstram incremento no percentual dissolvido e valores
negativos evidenciam a diminuio do percentual dissolvido, em mdia.
Foi empregado o teste t de Student para avaliar se os efeitos calculados so
estatisticamente diferentes de zero. No nvel de 95% de confiana e 16 graus de liberdade, o t
 111

tabelado de 2,31. Apenas considerado estatisticamente significativo o efeito cujo valor

absoluto excede intervalo de confiana (2,45) (BARROS, 2010; SANTANA et al., 2008). Os
efeitos cujos valores foram menores que 2,45 no so significativos e so provenientes dos
erros aleatrios que so inerentes ao processo e/ou do produto analisado.

Tabela 4. Efeitos mdios das variveis isoladas e em interao para o EFZ (%).
Variveis % Significncia
Rotao (R) 16,92
Volume (V) -5,77
Concentrao (C) -0,12 --
RxV 1,97 --
RxC 2,75
VxC 3,72
RxVxC 1,32 --
: Valor significativo com 95% de confiana.
O efeito principal da rotao apresentou, em mdia, uma dissoluo 16,95% maior
para o nvel (+) em relao ao nvel (-), demonstrando a grande importncia da rotao em
seu maior nvel, 100 RPM. Observa-se um efeito bem mais pronunciado (24,7%), quando a
concentrao encontra-se no nvel (-) e o volume no nvel (+). H efeito de interao
significativo entre a rotao e a concentrao.
O efeito principal da concentrao, em mdia, no demonstrou significncia, contudo,
em alguns casos a influncia da concentrao bastante relevante. Como exemplo, quando o
volume se encontra em seu nvel (-), a influncia da concentrao negativa, reduo de 6,3
e 1,4% na dissoluo, mas quando o volume est no nvel (+), as influncias das
concentraes so significativas, aumento de 9,4 e 3,4%. H interaes significativas da
concentrao com as variveis, rotao e volume.
J o volume demonstrou que h decaimento de 5,77% do percentual dissolvido, em
mdia, quando partimos do nvel (-) para o seu nvel (+). Analisando-se a figura 1 podemos
visualizar os efeitos provenientes da mudana do nvel (-) para o (+) do volume e,
constatamos que h uma reduo na dissoluo em todos os casos, sendo mais pronunciado
quando a concentrao e a rotao esto no nvel (-), reduo de 18,4%.
Podemos notar tambm que a influncia do volume mais pronunciada quando a
concentrao est no nvel (-), reduo de 18,4 e 6,2%, e menos pronunciada quando se
encontra no nvel (+), reduo de 2,7 e 1,4%, chegando a ser no significativa nestes ltimos
casos.
 112

Figura 1. Cubo dos principais efeitos para o frmaco EFZ, em percentual (%) com suas
diferenas.

Analisando os casos expostos, podemos citar como melhores parmetros para a

dissoluo do novo comprimido ADF, a rotao no nvel (+), 100 RPM, e a concentrao no
nvel (+), LSS 1,0%. J o volume, fica facultativo a sua escolha, pois nestas condies
observa-se uma reduo de 1,4% quando samos do seu nvel (-) para o (+), valor este, abaixo
do intervalo de confiana, ou seja, no significativo.
Embora, haja esse decaimento na dissoluo em relao ao aumento da concentrao,
o efeito mdio do seu cruzamento com o aumento da rotao, produz um aumento mdio de
2,75%, sendo ainda melhor optar pela concentrao em seu nvel (+), devido a sua
capacidade de incremento quando associada ao aumento da rotao. Este fato de extrema
importncia para explicarmos que uma varivel pode se modular em funo de outra, ou seja,
ela pode ser mais ou menos pronunciada quando alteramos uma segunda.
Portanto escolhemos o nvel (+) do volume, 1000 mL, como melhor parmetro para a
dissoluo. Esta escolha torna-se mais respaldada, quando associamos o fato de
conseguirmos obter uma condio sink para 300 mg do EFZ, em LSS 1,0% um volume de
1000 mL, como mostra os resultados do estudo de solubilidade, tabela 1.
Assim, aps os estudos realizados, foram adotadas como as melhores condio de
dissoluo, quando associadas, as seguintes especificaes: meio de LSS a 1,0%; volume de
1000 mL e rotao a 100 RPM.
 113

RESULTADOS DA VALIDAO
Preciso Repetitividade
A repetitividade apresentou coeficiente de variao entre as replicatas de 2,82%,
1,32% e 2,44%, para EFZ, AZT e 3TC, respectivamente.

Preciso Intermediria
No houve diferenas estatisticamente significativas entre os resultados obtidos em
diferentes dias e por meio de diferentes analistas, no nvel de 95% de confiana. A
comparao entre dias diferentes, apresentou um F calculado de 0,06 (EFZ), 0,27 (AZT),
0,88 (3TC) e F tabelado 6,61. Entre analistas diferentes, o F calculado foi de 1,04 (EFZ), 3,28
(AZT), 0,48 (3TC) e F tabelado 5,05.

Robustez
Todos os parmetros foram analisados segundo teste t Student no nvel de 95% de
confiana. Para o parmetro dimetro dos poros do papel de filtro, verificou-se que no
houve diferenas estatisticamente significativas entre a mdia das concentraes resultantes,
apresentando um F calculado de 3,67 (EFZ), 0,68 (AZT) e 2,31 (3TC), frente a um F
tabelado de 18,51. Adotou-se, ento o papel de filtro com dimetro de poro de 28 m como
usual para o teste, sendo este eficinte para interromper o processo de dissoluo das
partculas dispersas. Para o parmetro de desaerao do meio verificou-se que no h
diferenas significativas entre as mdias resultantes, apresentando um F calculado de 2,27
(EFZ), 3,78 (AZT) e 2,54 (3TC), frente a um F tabelado de 18,51. Devido ao fato da
desaerao no ter influnciado o resultado do percentual dissolvido, optou-se por se definir
como usual a no desaerao do meio de dissoluo. Para o parmetro estabilidade da
amostra por 24 horas, verificou-se que no h diferenas significativas entre as mdias
resultantes, apresentando um F calculado de 5,72 (EFZ), 2,78 (AZT) e 3,32 (3TC), frente a
um F tabelado de 18,51. Com base neste resultado, permite-se que amostras oriundas da
dissoluo podem ser armazenadas em vial e lidas dentro do intervalo de 24 horas, sem
prejuzo para o resultado.

CONCLUSO
O estudo de solubilidade dos frmacos apresentou-se uma adequada ferramenta para a
seleo dos candidatos a meios de dissoluo, permitindo o desenvolvimento detalhado do
teste de dissoluo com um menor nmero de meios, e consequentemete, de amostras. O
 114

planejamento fatorial demonstrou-se uma ferramenta eficaz no planejamento do estudo,

influenciando diretamete na forma de discusso dos resultados e na tomada de deciso dos
melhores parmetros. Por meio da validao, comprovou-se a adequao do teste e a
segurana dos resultados, demonstrando que o mtodo desenvolvido, adequa-se ao seu
objetivo de controle de qualidade de um produto comprimido de associao em dose fixa.

REFERNCIAS
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8 CONCLUSO GERAL
O estudo de compatibilidade frmaco-frmaco evidenciou que a associao destes em
uma nica forma farmacutica no apresenta impedimentos fsicos, desde que os
frmacos no sejam fundidos durante o processo produtivo. Evidenciou-se tambm
uma influncia positiva na solubilidade dos mesmos, quando associados;
O estudo de compatibilidade frmaco-excipiente colaborou na escolha dos melhores
excipientes para a formulao e no evidenciou incompatibilidades entre os mesmos;
O comprimido foi obtido por compresso por granulao via mida, gerando um
produto com peso de 900 mg, sendo 750 mg de insumos farmacuticos ativos e 150
mg de excipientes (celulose microcristalina, croscarmelose sdica,
polivinilpirrolinona, estearato de magnsio, dixido de silcio coloidal e lauril sulfato
de sdio);
O teste de dissoluo foi devidamente desenvolvido e validado;
O controle de qualidade do produto apresenta um mtodo analtico desenvolvido e
validado segundo a resoluo especfica RE 899 (BRASIL, 2003 c), para a realizao
dos testes de rotina (dissoluo e teor).

9 PERSPECTIVAS
Isolar por cromatografia em coluna preparativa os dois produtos de degradao
formados pela reao no estado lquido da mistura fsica de AZT + EFV, aps
processo de fuso. Caracterizar tais produtos de degradao por tcnicas
instrumentais, elucidando os compostos e as reaes ocorridas.
Realizar o estudo de estabilidade do produto desenvolvido no LTM: fotoestabilidade
(anlise nos meses: 0), estabilidade acelerada (anlise nos meses: 0, 1, 2, 3, 4, 5 e 6) e
estabilidade de longa durao (anlise nos meses: 0, 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 36 e
48). Avaliando, principalmente, ao final de cada perodo o decamento do doseamento
dos frmacos e o incremento de produtos de degradao, por meio de mtodo
analtico indicativo de estabilidade desenvolvido e validado. Realizar a identificao e
qualificao de cada um dos produto de degradao formados, caso haja a
 116

necessidade, aps a anlise dos percentuais dos produtos de degradao segundo os

conceitos apresentados no Guia do ICH Q3B(R2) (ICH, 2006 b). A qualificao
estabelece a segurana biolgica de um produto de degradao individual ou de um
perfil de degradao de um produto no limite especificado.
Em parceria com a indstria parceira, LAFEPE, realizar e notificar ANVISA a
produo de trs lotes pilotos do produto, visando a realizao do estudo estabilidade
formal para registro e em seguida, realizar estudos de biodispobinilidade e/ou
bioequivalncia para os frmacos contidos no comprimido, alm de estudo clnico de
fase III, necessrio para a confirmao da eficcia da nova posologia proposta ao EFV
e, consequentemente o registro do produto.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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 118

ANEXOS

ANEXO A. Espectros IVTF-ATR dos frmacos EFZ, AZT e 3TC e suas misturas binrias e
ternria.

ANEXO B. Comprovante de submisso do Artigo IV: Desenvolvimento e Validao de

Teste de Dissoluo para Comprimido contendo a Associao em Dose Fixa de Zidovudina,
Lamivudina e Efavirenz. Artigo submetido ao Journal of Pharmaceutical Sciences;
 119

ANEXO A

Espectro IVTF-ATR dos frmacos AZT e 3TC e sua mistura binria AZT+3TC (1:1).
 120

Espectro IVTF-ATR dos frmacos EFV e AZT e sua mistura binria EFV+AZT (1:1).
 121

Espectro IVTF-ATR dos frmacos EFV e 3TC e sua mistura binria EFV+3TC (1:1).
 122

Espectro IVTF-ATR dos frmacos AZT, 3TC e EFV e sua mistura AZT+3TC+EFV (1:1:1).
 123

ANEXO B
25-Jul-2011

Dear Dr. Rolim-Neto:

Your manuscript entitled "Development and Validation of the Dissolution Test for
a Tablet Containing Efavirenz, Lamivudine and Zidovudine Associated in a Fixed
Dose" has been successfully submitted online and is presently being given full
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