Biofisica4 PDF

Biofsica
Modelos de membranas e potencial de membrana
Prof. Dr. Walter F. de Azevedo Jr.
2010 Dr. Walter F. de Azevedo Jr.

azevedolab.net
Modelos de membrana celular
A principal funo da membrana celular manter, de forma seletiva,

molculas to diversas como protenas e pequenos solutos no interior da
clula. A membrana funciona de forma eficiente para regular seletivamente
sua permeabilidade, ou seja, a facilidade com a qual molculas e ons
atravessam a membrana. A composio da membrana celular tem sido
estudada de forma intensa, a partir do uso de diversas tcnicas e mtodos
fsicos, discutiremos a seguir os principais modelos da membrana celular.
No livro clssico de Oparin, A Origem da Vida, esse props que para
qualquer forma de vida faz-se necessria uma barreira fsica, que separe a

parte viva do meio que a cerca. Esse trabalho destaca a necessidade de
uma membrana para isolar, at mesmo as formas de vida mais simples, do
meio exterior.
O modelo de bicamada lipdica para membrana celular foi proposto

originalmente por Gorter & Grendel em 1925, o estudo de eritrcitos indicou
que o contedo lipdico das membranas ocupava uma rea duas vezes
maior que a superfcie da clula. Neste estudo os autores detalhavam a
retirada dos lipdios das membranas dos eritrcitos, usando-se acetona
como solvente. A soluo contendo lipdio era colocada numa cuba com
gua. A rea total ocupada pelo lipdio foi determinada usando-se uma
barreira mvel inserida na cuba, tal barreira juntava toda superfcie onde
estava o lipdio, como mostrado no diagrama esquemtico a seguir. A rea

total do filme de lipdio, sobre a superfcie da gua, era aproximadamente
igual duas vezes a rea do eritrcito. Tal observao levou hiptese da
bicamada lipdica, com uma parte polar voltada para os meios intra e extra
celular e a parte hidrofbica voltada para o interior da membrana,
escondida do solvente.
Balana Cuba
Monocamada lipdica
Superfcie
sem filme

Flutuadores gua
Cuba para experimentos com filmes de monocamada lipdica

Modelo de Robertson (1957). Posteriormente Schmitt e colaboradores, a

partir de estudos de polarizao da luz, propuseram que eritrcitos
apresentavam lipdios perpendiculares ao plano da membrana, como
espera-se de uma bicamada (Schmitt et al., 1937, 1938). Outros cientistas
propuseram a presena de protenas nas membranas (Danielli & Davson,
1935), com a participao protica estendendo-se at 60 % da membrana.
Baseado nessas informaes Robertson (1957, 1981) props que as
protenas estivessem distribudas sobre a superfcie da membrana.

O modelo de Robertson era coerente com a informao sobre a presena de

protenas nas membranas, bem como com a presena da bicamada lipdica,
contudo falhava ao colocar protenas globulares na superfcie da membrana.
A presena de uma camada de protena na membrana formava uma
blindagem na superfcie da membrana, o que impossibilita a comunicao
entre os meios intra e extra-celular.
Bicamada
lipdica

Protena
globular
Modelo de Robertson para membrana celular

Protena extrnseca
Protena intrnseca, ou
transmembrana
Experimentos mais detalhados
mostraram deficincias nos diversos
modelos de membrana. Em 1972
Singer e Nicolson propuseram um
modelo de mosaico fluido,
constitudo de uma bicamada
lipdica, onde encontram-se inseridas
protenas. Neste modelo temos dois
tipos de protenas, uma que

atravessa toda a membrana,
chamada protena intrnseca, ou
O modelo de mosaico fluido indica duas protena inseridas na
transmembrana. O segundo tipo de bicamada lipdica (elipsides cinzas). A protena da esquerda
uma protena extrnseca e a da direita uma protena
protena localiza-se sobre a intrnseca. Os fosfolipdios so indicados com a cabea polar
membrana, sendo encontrada tanto em preto e a cauda hidroffica pelas linhas que saem da
esfera preta.
no exterior como voltada para o
Referncia Singer SJ, Nicolson GL. Science. 1972
citoplasma. Esse segundo tipo de ;175(23):720-31.
protena chamado extrnseca.
Protena extrnseca
Protena intrnseca, ou
transmembrana
Esse modelo prev a passagem
seletiva de ons pelas protenas
intrnsecas, que so chamadas de
canais ou bombas como veremos no
estudo do potencial de
membrana. Outra caracterstica
desse modelo liberdade de
movimentao das protenas na
bicamada. De acordo com

caractersticas bsicas do modelo,
mosaicismo e difuso, previu-se a
liberdade lateral e rotatria, assim
como a distribuio aleatria de
componentes moleculares na
membrana.
Referncia Singer SJ, Nicolson GL. Science. 1972 ;175(23):720-31.
Composio lipdica da membrana
Biomembranas so baseadas a) O
principalmente em lipdios, com CH2 CH CH2 O P O X

predominncia de fosfolipdeos. A
estrutura qumica geral de uma O O O-
molcula de fosfolipdio mostrada na O C C O

ao lado (figura a). Essa molcula Fosfolipdio
R1 R2
basicamente um glicerol (figura b),
sobre a qual foram atachadas as b)
cadeias de cidos graxos (R1 e R2), via

H
ligaes do tipo ster, ao fosfato pode-
se ligar qualquer molcula, designada HO CH2 C CH2 OH
na figura a por X.
OH
Glicerol
Composio lipdica da membrana
Um dos cidos graxos tpicos, encontrados nos fosfolipdios, chamado cido

palmtico. A molcula de cido palmtico apresenta 16 carbonos e 31 hidrognios
(molcula da direita, sem indicao dos hidrognios). Esse cido graxo dito
saturado, pois apresenta o maior nmero de possvel de hidrognios. A presena de
ligaes duplas na cadeia de cido graxo indica que o mesmo no-saturado. As
duas cadeias R1 e R2 no precisam ser homogneas, ou seja, podem apresentar
cadeias de tamanhos distintos. Nos fosfolipdios uma parte da molcula polar, a
cabea hidroflica, e a parte no-polar composta pelas duas cadeias de cidos
graxos. O diagrama esquemtico abaixo ilustra uma molcula de fosfolipdio.
Molculas que apresentam parte polar e parte hidrofbica so chamadas anfipticas.

Na figura da direita temos a representao CPK do fosfolipdio.
Cabea polar
Cabea polar
Caudas hidrofbicas
Caudas hidrofbicas
Simulao da membrana
Um grande nmero de modelos

computacionais de membranas celulares
Hidroflica
foram construdos e submetidos
simulao de dinmica molecular. Esses
modelos usam diferentes componentes
para a formao da bicamada, no exemplo
Hidrofbica
ao lado foram usadas de molculas de 1-
palmitoil-2-oleoil-sn-glicerol-3-
fosfatidilcolina, formando uma caixa
retangular onde temos molculas de gua
Hidroflica

interagindo com a parte polar da bicamada.
No modelo computacional ao lado vemos
claramente que as caudas hidrofbicas no
interagem com molculas de gua.
Referncia: Heller, H., Schaefer, M. & Schulten, K. (1993). J. Phys. Chem. 97:8343-8360.
Interao com a membrana
As estruturas de protenas
transmembranares indicaram que
tomos da cadeia principal tinham que
participar ligaes de hidrognio,
protegendo-se do contato com as
cadeias polares da membrana. Uma
estrutura secundria, com
caractersticas de proteger os tomos
da cadeia principal de participarem de

ligaes de hidrognio a hlice alfa,
mostrada ao lado.
Peptdeo de 14 resduos de aminocidos, destacando
as cadeias laterais na figura da esquerda, que esto
expostas ao solvente, na direita um diagrama
esquemtico da hlice alfa do mesmo peptdeo.
Como exemplo de protena

transmembranar temos o complexo
protico, centro de reao fotossinttico da
bactria prpura R. viridis, que o local da
etapa inicial da captura de energia
luminosa na fotossntese. Esse complexo
protico composto de quatro cadeias
polipeptdicas, indicadas na figura ao lado,
nas cores azul, vermelha, cinza e dourado.

H tambm quatorze cofatores de baixo
peso molecular, indicados em amarelo.
Entres os cofatores temos cromforos, que
absorvem a energia de excitao, que
convertida em potencial eletroqumico,
atravs da membrana.
Referncia: Deisenhofer, J. & Michel, H. (1989) EMBO J. 8:2149-2170.

Na presente viso a molcula est

deslocada aproximadamente 90o em
relao anterior, considerando-se o eixo
vertical paralelo tela. Ambas vistas
mostram a estrutura com todos os tomos
das protenas, como esferas. So
excludas desta representao os tomos
132
de hidrognio. Esse complexo protico foi
a primeira protena de membrana a ter sua

estrutura 3D elucidada, usando-se
tcnicas de cristalografia em 1989
(Deisenhofer e Michel, 1989), fato esse
que foi laureado com o prmio Nobel. Esse
complexo protico apresenta dimenses 72
aproximadas de 72 x 72 x 132 ,
sendo 1 = 10-10 m.
Nessa representao os resduos de

aminocidos hidrofbicos esto em cinza,
os polares em verde, os cidos em
vermelho e os bsicos em azul. tomos
Hidroflica
pertencentes aos co-fatores esto em
ciano. Vemos claramente uma
heterogeneidade na distribuio de cargas
Hidrofbica
132
na superfcie das protenas. No centro
temos uma regio hidrofbica, e nas

partes superior e inferior uma
Hidroflica
concentrao de resduos de aminocido
carregados e polares.
72
A cadeia azul a protena chamada

citocromo, as cadeias vermelha e cinza
so chamadas subunidades L (Light) e M
(Medium), respectivamente e a cadeia
dourada chamada cadeia H (Heavy).

A representao esquerda indica os

elementos de estrutura secundria,
notadamente: hlices, fitas beta e regies
de coil. As cadeias L e M apresentam
preponderantemente hlices, enquanto o
citocromo e a cadeia H apresentam outros
elementos de estrutura secundria.
Observao: As coordenadas atmicas
usadas para representar a estrutura do

centro de reao fotossinttico esto
depositadas no banco de dados de
estruturas PDB (Protein Data Bank) com
cdigo de acesso: 1PRC. O endereo do
PDB www.rcsb.org/pdb .
Hlice alfa estrutura secundria

comumente encontrada em segmentos
transmembranares de protenas de
membranas, constituindo-se na grande
maioria de protenas encontradas na
membrana plasmtica e nas
membranas internas das organelas
celulares. Normalmente temos a
combinao de vrios segmentos de

hlice, formando feixes de hlices
transmembranares, como na estrutura
da cadeia M da estrutura do centro de Cadeias L e M do centro de reao fotossinttico.
reao fotossinttico mostrada ao lado. Cdigo PDN: 1PRC
A partir da anlise da estrutura do centro de reao fotossinttico podemos

propor um modelo para interao da protena com a membrana. Neste
modelo temos que a parte hidrofbica, formada por hlices alfa, interage
com a membrana.
Meio extracelular

Citoplasma
Interao das cadeias L e M do centro de reao fotossinttico com a bicamada lipdica.

Nas estruturas de feixes de hlices alfa

transmembranares verifica-se que o
lado da hlice, que toca os lipdios,
relativamente mais apolar que o lado
que participa do contato hlice-hlice, e Hlice transmembranar
uma hlice isolada transmembranar
mais homogeneamente apolar. No
diagrama esquemtico ao lado temos
um feixe de 4 hlices alfa, onde vemos

que a regio entre as hlices mais
hidroflica que a regio em contato com
a bicamada lipdica.
Superfcie mais hidrofbica
Superfcie mais hidroflica Feixe de 4 hlices transmembranares

Outra estrutura possvel, para protenas

transmembranares a folha beta. Um
arranjo onde a folha beta fecha-se
sobre si forma um arranjo similar a um
barril, sendo denominado barril beta. A
estrutura em barril proporciona as
caractersticas fisico-qumicas
desejveis para um protena
transmembranar, tal como blindagem

dos tomos da cadeia principal que
participam de ligaes de hidrognio. A
figura ao lado mostra a estrutura de
uma porina.
Barril beta da porina de Rhodopseudomonas blastica.
Cdigo de acesso PDB: 8PRN
Meio extracelular Porina

Citoplasma
Interao do barril beta da porina de Rhodopseudomonas blastica com a bicamada lipdica.

Toxinas da vespa solitria

Anterhynchium flavormarginatum
micado. Essa vesta injeta seu veneno
em lagartas e deposita seus ovos
prximos vtima. Devido ao txica
de seu veneno a lagarta fica paralisada,
mas viva. Ao eclodirem, as jovens
vespas tero um banquete fresco e vivo.
Tal comportamento, indicou que o
veneno da A. flavormarginatum micado,

poderia ser uma rica fonte de molculas
com atividades antimicrobianas.
Podemos imaginar o veneno dessas
vespas como um coquetel de molculas. Foto: Cortesia do Dr. K. Konno.
A questo : qual ou quais molculas
apresentam as atividades biolgicas de
interesse?
Mastoparanos. Essas molculas so

peptdeos isolados em vespas e
abelhas, muitos deles apresentam
atividade biolgicas, tais como,
degranulao de mastcitos,
atividades antimicrobiana e hemoltica.
Essas molculas atuam principalmente
na membrana, provavelmente
rompendo a integridade da bicamada
lipdica. O mastoparano, identificado

no veneno da A. flavormarginatum
micado (EMP-AF), apresenta atividade
hemoltica e de degranulao de
mastcitos (Sfora et al., 2004). Foto: Cortesia do Dr. K. Konno.
Referncia: Sfora, M. L., Oyama, S. Jr., Canduri, F., Lorenzi,
C. C., Pertinhez, T. A., Konno, K., Souza, B. M., Palma, M. S.,
Ruggiero Neto, J., Azevedo, W. F. Jr., Spisni, A. (2004).
Biochemistry 43:5608-5617.
Abaixo temos as estruturas primrias (sequncia de resduos de aminocido) de um

mastoparano tpico e do EMP-AF, os resduos Asn, Lys e Ser so polares. Ambos
peptdeos apresentam 14 resduos de aminocido. Uma das caractersticas desses
peptdeos que eles apresentam o C-terminal amidado, como pode ser visto no final
da estrutura primria. A numerao acima da sequncia indica o nmero do resduo de
aminocido. As sequncias so indicadas com o cdigo de trs letras, com o cdigo de
uma letra entre parnteses abaixo do cdigo de trs letras.

Mastoparano tpico
EMP-AF
Referncia: Sfora, M. L., Oyama, S. Jr., Canduri, F., Lorenzi, C. C., Pertinhez, T. A., Konno, K., Souza, B. M., Palma, M. S.,
Ruggiero Neto, J., Azevedo, W. F. Jr., Spisni, A. (2004). Biochemistry 43:5608-5617.
Abaixo temos as estruturas secundrias de um mastoparano tpico e do EMP-AF, os

resduos de asparagina Asn (N) e serina Ser (S) so indicados em rosa. Os resduos
de lisina Lys (K) indicados em vermelho. Os peptdeos apresentam estrutura em hlice
alfa, com o resduos polares de um lado da hlice e resduos apolares do lado oposto,
o que d um carter anfiptico ao peptdeo.

Mastoparano tpico EMP-AF
Referncia: Sfora, M. L., Oyama, S. Jr., Canduri, F., Lorenzi, C. C., Pertinhez, T. A., Konno, K., Souza, B. M., Palma, M. S.,
Ruggiero Neto, J., Azevedo, W. F. Jr., Spisni, A. (2004). Biochemistry 43:5608-5617.
Toxinas da vespa solitria

Anoplius samariensis. Essa vesta
injeta seu veneno em aranhas e
deposita seus ovos prximos
vtima, da mesma forma que a A.
flavormarginatum micado. A ao
txica de seu veneno paralisa a
aranha, que ser comida viva pelas
vespas ao eclodirem.

Foto: Cortesia do Dr. K. Konno.
Referncia: Konno, K., Hisada, M., Fontana, R., Lorenzi, C. C., Naoki, H., Itagaki, Y., Miwa, A., Kawai, N., Nakata, Y.,
Yasuhara, T., Ruggiero Neto, J., de Azevedo, W. F. Jr., Palma, M. S., Nakajima, T. (2001). Bioch. Biophys. Acta. 1550:70-80.
Anoplin. O veneno da A. samariensis
uma possvel fonte de molculas
com atividades biolgicas. O peptdeo
Anoplin, uma decapeptdeo com o C-
terminal amidado e sequncia,
GLLKRIKTLL, foi identificado no
veneno da A. samariensis. Testes de
atividade biolgica mostraram ao
antimicrobiana desse peptdeo, sendo
o menor peptdeo que se tem notcia

a apresentar tal ao. A verso sem o
C-terminal no-amidado apresenta
Foto: Cortesia do Dr. K. Konno.
atividade antimicrombiana reduzida,
quando comparada com o Anoplin-
NH2.
A membrana celula apresenta uma bicamada lipdica de aproximadamente

60 de extenso, o que possibilita que protenas como os canais inicos
atravessem a membrana, contudo peptdeos pequenos, como os
mastoparanos e o anoplin, possuem comprimento de 21 e 15 ,
respectivamente, no permitindo que esses peptdeos atravessem a
membrana celular. Resta a questo sobre a forma de ao desses
peptdeos, visto que evidncias experimentais indicam que os mesmos
atuem na membrana, desestabilizando-a. Uma possvel forma de ao
desses peptdeos, por meio do desmonte da camada externa da

membrana, o que levaria sua desestruturao e consequente quebra da
membrana celular.
~60
O anoplin apresenta um comprimento por volta de 15 e o mastoparano por

volta de 21 , ambos so mostrados abaixo e apresentam dimenses
menores que a espessura da membrana celular, contudo so capazes de
romp-la.
15
21

Mastoparano EMP-AF Anoplin
A interao do peptdeo com a membrana um fenmeno complexo, que

no possvel acessarmos diretamente por tcnicas experimentais.
Contudo, baseado nas estruturas tridimensionais dos peptdeos e da
membrana, foi possvel propor diversos modelos para interao do
peptdeo mastoparano com a membrana. Um dos modelos prope que esta
interao um processo de diversas etapas (indicada abaixo e no
esquema do slide seguinte).
1) Ancoragem do peptdeo na membrana celular;

2) Incio da desestabilizao da membrana celular;
3) Incio da desmontagem da primeira camada lipdica;
4) Incio da desmontagem da segunda camada lipdica;
5) Desmontagem da bicamada lipdica;
6) Fluxo de substncias para o interior e exterior da clula leva morte da
clula.
5)
3)
1)
~60 ~60 ~60
6)
4)
2)
~60 ~60 ~60

Bomba de +
Na /K +
A bomba de sdio e potssio uma protena intrnseca com atividade enzimtica.

Ela catalisa a clivagem de ATP (adenosina trifosfato). ATP uma reserva de
energia qumica para o metabolismo celular. O mecanismo de funcionamento da
bomba de Na+/K+ pode ser descrito nas seguintes etapas.
1) A bomba de Na+/K+ , com ATP ligado, liga-se a 3 ons de Na+ intracelulares.

2) ATP hidrolizado, causando a fosforilao de um resduo de Asp, da bomba de
Na+/K+ com a liberao de ADP.
3) A mudana conformacional, da bomba de Na+/K+ , expe os ons de Na+, que
por apresentarem baixa afinidade pela bomba de Na+/K+, so liberados para o meio

extracelular.
4) A bomba de Na+/K+ liga-se a 2 ons de K+ extracelualres, isto causa a
desfosforilao da bomba, trazendo-a de volta sua conformao anterior,
transportando K+ para dentro da clula.
5) A forma desfosforilada da bomba de Na+/K+ apresenta afinidade mais alta por
ons de Na+, os ons de K+ so liberados, a molcula de ATP liga-se bomba.
6) O sistema est pronto para um novo ciclo.
Bomba de +
Na /K +
Na+
1 2
Na+
ATP ADP PI PI
6 3
ATP K+
PI

5 4
ATP PI
Canais de K+ so os canais usualmente abertos na membrana plasmtica de

neurnios em repouso. Assim h sada de ons K+, o que deixa um excesso de
carga negativa no interior da clula, e como resultado um potencial negativo.
Bomba de +
Na /K +
Aproximadamente um tero de todo ATP

da clula usado para o funcionamento
da bomba de Na+/K+, o que indica a
importncia para o metabolismo celular
da bomba de Na+/K+. Em 2007 foi
elucidada a estrutura tridimensional da
Na+/K+, mostrada na figura ao lado
(Morth et al., 2007). A anlise da
estrutura indicou uma diviso clara de
regies hidrofbicas e hidroflicas, que
sugerem a insero na Na+/K+ na

membrana conforme o modelo mostrado
no prximo slide.
Referncia: Morth JP, Pedersen BP, Toustrup-Jensen MS,

Srensen TL, Petersen J, Andersen JP, Vilsen B, Nissen P.
Nature. 2007;450(7172):1043-9.
Bomba de +
Na /K +
Meio extracelular
Citoplasma

Referncia: Morth JP, Pedersen BP, Toustrup-Jensen MS,
Srensen TL, Petersen J, Andersen JP, Vilsen B, Nissen P.
Nature. 2007;450(7172):1043-9.
Potencial de membrana
A membrana pode ser aproximada em situao de repouso (sem estmulos externos)

a um circuito RC. Vamos rever alguns conceitos simples de eletricidade para
modelarmos a membrana. Colocando-se eletrodos dentro e fora de um neurnio
temos uma diferena de potencial (ddp) de 70 mV, ou seja, h um potencial negativo
de 70 mV no interior do neurnio em relao ao meio extracelular. O instrumento
usado para medir a diferena de potencial o voltmetro, sua colocao est
representada do diagrama esquemtico abaixo.
V Voltmetro

Eletrodos V
- +
Neurnio
Corrente eltrica (I): o movimento de cargas eltricas em meios condutores,

medida em Ampres (A), o que equivale a 1 Coulomb/segundo, uma unidade
relativamente grande para os propsitos da biofsica, assim normalmente trabalha-se
com submltiplos desta unidade fsica, tais como, miliampre (mA, 10-3 A),
microampre (A, 10-6), nanoampre (nA, 10-9) e picoampre (pA, 10-12 A). As cargas
para os fenmenos eltricos na membrana celular so ons, tais como, Na+,K+, Ca++ e
Cl-.
Ampermetro
A

I
- +
Axnio
Amplificador
-70mV
Neurnio Eletrodos Oscilscopio
Dois eletrodos,
+++++++++++++++++++++++++ inseridos no axnio de
Meio extracelular
um neurnio em

repouso, detectam a
--------------------------------------------
Meio intracelular pequena diferena de
-------------------------------------------- potencial, entre os
meios extra e
intracelular, esse sinal
+++++++++++++++++++++++++ amplificado e
mostrado num
osciloscpio.
Do ponto de vista eltrico, podemos fazer a analogia da membrana celular com um

circuito RC (Resistivo-Capacitivo). O C indica a capacitncia, e R a resistncia
eltrica. Capacitncia a quantidade de carga eltrica (Q) acumulada, dividida pela
tenso aplicada. Quanto maior a carga eltrica acumulada (Q), para uma dada tenso
(V), maior a capacitncia (C). A capacitncia medida em Farads (1 F = 1 C/V).
Devido diferena de potencial nas placas h uma corrente eltrica (I) presente no
circuito. Na figura do lado direito vemos o modelo da membrana com a distribuio de
cargas eltricas, similar distribuio de cargas num capacitor.
I ++++++++++++++++++++++++

R
+++++
Q
V
-----
------------------------
Circuito RC Modelo de membrana celular
A equao abaixo expressa a capacitncia (C) em funo da tenso aplicada s

placas do capacitor (V) e a carga eltrica acumulada em um dado instante (t). A
modelagem da membrana celular como um capacitor suficiente para explicar o
surgimento da tenso, bem como a resposta a estmulos eltrico da clula (prximos
situao de repouso). Estmulos eltricos na membrana, abaixo de um valor limiar,
levam a membrana a responder de forma anloga ao capacitor. Inicialmente numa
situao de carga e posteriormente num sistema em descarga. A carga eltrica (Q)
nesta situao fica dependente do tempo, bem como a tenso.
I
Q Q

C V
+++++
R V C
Q
V
-----
Circuito RC
O resultado lquido da ao conjunta da bomba de Na+/K+ e do canal de K+ uma

diferena de potencial entre o meio extra e intra-celular, com uma tenso
caracterstica. Tal tenso da ordem de algumas dezenas de milivolts negativos.
A ao contnua da bomba de Na+/K+ leva a um acmulo de ons de Na+, no meio
extra-celular, e um acmulo de ons de K+ no meio intra-celular. Tal situao
ocorre com o gasto de energia, obtida da molcula de ATP. Concomitante ao
da bomba de Na+/K+ h um canal de K+, que fica aberto, permitindo a sada do
excesso de ons de K+. O resultado uma tenso negativa do meio intra-celular
com relao ao meio extra-celular. Tal tenso chamada de potencial de
repouso, pois no necessrio a aplicao de estmulo na clula para que

ocorra.
Amplificador
-70mV
Potencial de repouso
Considere uma cuba com gua onde

foram dissolvidos um on, indicado pelo
crculo vermelho. No instante inicial
temos uma alta concentrao inica do
lado esquerdo [on]esquerdo , e do lado
direito uma baixa concentrao
[on]direito . As duas metades da cuba
so separadas por uma membrana
semipermevel. Temos duas foras
principais atuando no sistema, a fora

difusional (FD) e uma fora eltrica (FE).
FD RT ln

on esquerdo

on direito

FE Vr zeA
Onde R constante dos gases, T a temperatura absoluta, Vr a diferena de
potencial, z a valncia do on, e a carga do eltron e A o nmero de Avogadro.
Depois de um certo tempo atingimos

um equilbrio entre as duas foras,
assim temos:
FD FE
RT ln

on esquerdo
Vr zeA

on direito

RT on esquerdo

Vr ln

zeA on direito

Esta equao chamada de equao

de Nernst e determina a diferena de
potencial (Vr) devido diferena de
concentrao inica presente num
sistema separado por uma membrana
semipermevel. Tal sistema uma
aproximao da membrana celular,
onde teremos as concentraes
extracelular ([on]extracelular ) e intracelular
([on]intracelular ) na equao, como

segue:
Vr ln

RT on extracelular

zeA on int racelular


Concentrao
Constante universal dos gases do on monovalente
fora da clula
Temperatura absoluta
RT ln ( [on]fora )
Vr = Concentrao
zeA [on]dentro do on monovalente
dentro da clula
Nmero de Avogadro

Carga eltrica do eltron
Valncia do on
Diferena de potencial atravs da membrana

RT ln ( [on]fora )
Vr =
zeA [on]dentro
8,315 J/mol.K 293 K [on]fora

Vr = -19 23
ln ( )
1. 1,602.10 C.6,022.10 1/mol [on]dentro
[on]fora

Vr = 25 mV ln ( )
[on]dentro
Concentrao
do on monovalente
fora da clula
[on]fora
Vr = (58 mV) log ( )
[on]dentro
Concentrao

do on monovalente
dentro da clula

Concentrao
do on potssio fora
da clula
[K+]fora
Vr = (58 mV) log ( + )
[K ]dentro
Concentrao

do on potssio dentro
da clula

A equao de Nernst uma idealizao, que considera que a membrana celular

permevel a apenas um tipo de on. Tal idealizao leva expresso simples da
equao de Nernst, contudo, a sua aplicao, no consegue prever o valor final do
potencial presente na membrana celular, levando-se em considerao a ao dos
diversos ons presentes nas regies intra e extra celular. Outra considerao sobre a
forma simplificada da equao de Nernst, da forma apresentada ela vlida para ons
monovalentes, para ons de outra valncia necessrio dividir pela valncia do on (z),
como mostrado na equao abaixo.

[on]fora
Vr = (58 mV) log ( )
[on]dentro
z
eletrodo 1
Introduzindo dois microeletrodos no
Corrente no eletrodo 1
neurnio, conforme o esquema na
figura ao lado, temos o primeiro
eletrodo injetando corrente eltrica
e o segundo medindo a tenso.
Inicialmente temos um potencial Tempo(ms)
negativo, no interior da membrana eletrodo 2
(potencial de repouso), sem injeo

de corrente pelo eletrodo 1. O Tenso no eletrodo 2
eletrodo 1 estimula o axnio com 0 Tempo(ms)

um pulso de corrente de 1 nA e
durao de 1 ms. A subida da
tenso da ordem de mV, sem
contudo ficar positiva, o neurnio Potencial de repouso
retornar ao potencial de repouso.

eletrodo 1
Como foi destacado anteriormente,
Corrente no eletrodo 1
a membrana do neurnio tem um
comportamento eltrico similar a um
circuito resistivo-capacitivo (RC).
Vejamos a figura ao lado, ao
estimularmos a membrana, a Tempo(ms)
mesma responde com uma subida eletrodo 2
suave da voltagem (grfico inferior,

seta vermelha), este Tenso no eletrodo 2
comportamento similar a um Tempo(ms)

capacitor em situao de carga.
Aps algum tempo, a tenso cai Descarga do capacitor
suavemente (seta azul), num
comportamento similar a um Potencial de repouso
capacitor em descarga eltrica.
Carga do capacitor
Referncias
Danielli, J. F. & Davson, H. (1935). J. Cell. Comp. Physiol., 5:495-508.
Garcia, E. A. C. Biofsica. Editora Savier, 2000.
Gorter, E. & Grendel, F. (1925). J. Exp. Med. 41:439-443.
Purves, W. K., Sadava, D., Orians, G. H., Heller, H. G. Vida. A Cincia da Biologia. 6a
ed. Artmed editora. 2002.
Schmitt, F. O., R. S. Bear, and E. Ponder. (1937) . J. Cell. Comp. Physiol 9: 89-92.
Schmitt, F. O., R. S. Bear, and E. Ponder. (1938) . J. Cell. Comp . Physiol. 11 :309-313.
http://www1.umn.edu/ships/9-2/membrane.htm

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Modelos de membranas e potencial de membrana

Prof. Dr. Walter F. de Azevedo Jr.

2010 Dr. Walter F. de Azevedo Jr.

A principal funo da membrana celular manter, de forma seletiva,

2010 Dr. Walter F. de Azevedo Jr.

O modelo de bicamada lipdica para membrana celular foi proposto

2010 Dr. Walter F. de Azevedo Jr.

2010 Dr. Walter F. de Azevedo Jr.

Cuba para experimentos com filmes de monocamada lipdica

Modelo de Robertson (1957). Posteriormente Schmitt e colaboradores, a

2010 Dr. Walter F. de Azevedo Jr.

O modelo de Robertson era coerente com a informao sobre a presena de

2010 Dr. Walter F. de Azevedo Jr.

Modelo de Robertson para membrana celular

2010 Dr. Walter F. de Azevedo Jr.

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principalmente em lipdios, com CH2 CH CH2 O P O X

molcula de fosfolipdio mostrada na O C C O

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Um dos cidos graxos tpicos, encontrados nos fosfolipdios, chamado cido

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Um grande nmero de modelos

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Como exemplo de protena

2010 Dr. Walter F. de Azevedo Jr.

Referncia: Deisenhofer, J. & Michel, H. (1989) EMBO J. 8:2149-2170.

Na presente viso a molcula est

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Nessa representao os resduos de

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A representao esquerda indica os

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Abaixo temos as estruturas primrias (sequncia de resduos de aminocido) de um

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Abaixo temos as estruturas secundrias de um mastoparano tpico e do EMP-AF, os

2010 Dr. Walter F. de Azevedo Jr.

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