ANLISIS DE ALMIDN

OBJETIVO: Determinar el (%) de almidn de producto terminado pastas.

INTRODUCCIN: El almidn es un producto comestible que se encuentra
principalmente en los cereales y en sus derivados como pueden ser las harinas,
los productos hechos en base a una masa como el pan o las galletas, etc.
Tambin algunos alimentos mal considerados hortalizas que en realidad son
tubrculos como la papa, la batata o la mandioca, son todos alimentos que
contienen una alta proporcin de almidn. El almidn puede ser consumido tanto
de manera natural, es decir, a travs del consumo de esos alimentos, como de
manera artificial, cuando es separado de su origen y agregado a preparaciones
especiales como espesante.
MATERIALES Y REACTIVOS:
Balanza
Estufa
Reciente para realizar la coccin capacidad 1 litro
Tubos de centrifuga graduados a 10 ml
Recipientes de plstico
Paleta plstica
Jarra 1 lt de capacidad
Recipientes plsticos
Filtro

METODOLOGIA:

1. Pesar en la balanza 100g de la muestra a analizar.

2. Tomar en una jarra pltica 1 litro de agua y colocar en una olla hasta el
punto de ebullicin.

3. Colocar la muestra en el agua.

4. Determinar el tiempo de coccin a cada formato analizado, en tiempos

de 10 a 12 min dependiendo del formato.

5. Sacar del fuego y tomar 10 ml de agua de la coccin en el tubo de

centrifugacin.

6. Colocar el tubo en la centrifuga verificando que exista el respectivo

equilibrio entre los polos.

7. Centrifugar 10 min a una velocidad de 1447 rpm (nivel 4)

8. Botar el sobrenadante del tubo de centrifuga y medir cuanto almidn
queda en el tubo.

DETERMINACIN DE FIBRA BRUTA

OBJETIVO: Determinar el % Fibra mediante soluciones de cido sulfrico e
hidrxido de sodio en condiciones especficas.

INTRODUCCIN: Fibra bruta es el residuo orgnico combustible e insoluble que

queda despus de que la muestra se ha tratado en condiciones determinadas y
est formado principalmente por celulosa, lignina y pentosas.

Las cantidades presentes oscilan desde menos de 1% en algunos frutos jugosos y

ciertas verduras, hasta ms del 30% en la canela. Las cscaras de nuez y los
huesos de las frutas sin la almendra llegan a tener hasta un 60% Dentro de la
terminologa utilizada para referirnos a la fibra, es importante diferenciar tres
conceptos que todava aparecen con relativa frecuencia en la literatura general:
fibra cruda, fibra vegetal y fibra diettica.

MATERIALES Y EQUIPO:
Balanza analtica con sensibilidad de 0.1 mg
Esptula o cucharilla
Bolsas para fibra (ANKOM F57)
Sellador de bolsas (ANKOM 1915)
Equipo Digestor/Analizador ANKOM 200/220
Estufa con temperatura regulada a 100+2C
Equipo de seguridad personal (bata, guantes resistentes a temperaturas
elevadas)

REACTIVOS:
Solucin de cido Sulfrico 0.255 N +/-.005 N
Solucin de Hidrxido de Sodio 0.313N N +/-.005 N
Pesar 12.5 g de Hidrxido de sodio y disolver en agua destilada. Completar
a 1000 ml y acetona grado reactivo.

METODOLOGA:

1. Marcar con lpiz la numeracin correspondiente a las bolsas para anlisis

de fibra (ANKOM F57).

2. Pesar la bolsa en balanza analtica registrando el peso.

3. Pesar aproximadamente 1 g (+/- 0.05g) de muestra molida en malla de 1

mm directamente en la bolsa.
4. Sellar la bolsa dejando aproximadamente 0.5 cm a partir del borde con
ayuda del sellador de bolsas.

5. Colocar las bolsas con muestra en el suspendedor de bolsas (colocar 3

bolsas por canasta), del equipo de digestin e introducir dicho suspendedor
en el equipo, poniendo la pesa sobre la ltima canasta para mantener el
suspendedor sumergido.

6. Aadir 2000 ml de la solucin de cido sulfrico 0.255 N a la cmara del

digestor.

7. Cerrar la tapa del equipo.

8. Encender los botones de agitacin y calentamiento del equipo y dejar por

46 min en extraccin. La temperatura ser controlada automticamente a
100C.

9. Despus de 46 min. Apagar los botones de calentamiento y agitacin.

10. Abrir la vlvula de escape y drenar la cmara de digestin antes de abrir la

tapa del equipo.
 CROMATOGRAFA EN COLUMNA
OBJETIVOS:
a) Conocer la tcnica de cromatografa en columna, sus caractersticas y los
factores que en ella intervienen.
b) Utilizar la cromatografa en columna para la separacin de mezclas de
compuestos orgnicos.

INTRODUCCION: La cromatografa en columna se usa para separar grandes

cantidades de material: >100 mg. El proceso de cromatografa consta de una fase
mvil (eluyente) y una fase estacionaria (adsorbente), los cuales dependen de las
sustancias que se deseen separar. El proceso de cromatografa en columna se
controla por cromatografa en capa fina, de tal manera que se puede separar cada
componente de la mezcla.

MATERIALES Y EQUIPO:
Columna para cromatografa
Matraz redondo plano 125 ml
T de destilacin
Refrigerante p/agua c/mangueras
Colector
Tapn esmerilado
2 vasos de pp. De 100 ml
2 vasos de pp. De 150 ml
Vidrio de reloj
Agitador de vidrio
2 pipetas de 5 ml
2 probetas de 25 ml
1 piseta de 125 ml c/eluyente
Esptula
3 Frascos p/cromatografa c/tapa
6 Portaobjetos
4 tubos capilares
8 frascos viales
Embudo de vidrio
3 pinzas de tres dedos con nuez
Recipiente elctrico para B.M
REACTIVOS:
cido benzoico
Azul de metileno
Silicagel para columna
Silicagel para cromatografa
Acetato de Etilo
Hexano
Sulfato de sodio anhidro
Yodo

METODOLOGA:

1. Se le proporcionar una mezcla slida de cido benzoico contaminado con

azul de metileno, los cuales se separan por cromatografa en columna.

2. Para empacar la columna sujtela en el soporte con las pinzas. Si la llave

es de vidrio, engrsela ligeramente y mantenga la posicin de cerrado.
Introduzca hasta el fondo un pequeo pedazo de algodn ayudndose con
la varilla de vidrio, agregue 8 mL de eluyente (acetato de etilo) y presione
suavemente el algodn para que quede bien colocado y sin burbujas.

3. Preparar una suspensin de.l0 g de qel de slice para columna en 40 mL de

eluyente y agite por 5 min. para eliminar las burbujas de aire. A travs del
embudo de vidrio vierta la suspensin en la columna golpeando ligeramente
con los dedos para que el empacado sea uniforme. Abra la llave para
eliminar el exceso de disolvente teniendo cuidado de no dejar la gel de
slice sin disolvente.

4. En un vaso de precipitado de 100 mL disuelva 0.4 q de la mezcla problema

con la mnima cantidad de eluyente (4 o 5 mL), ayudndose con el agitador,
virtala con cuidado para que quede distribuida uniformemente encima de
la superficie de la gel de slice. Abra la llave para colectar el disolvente y
que se adsorba la muestra aplicada (cuidando que no se seque la
columna).

5. Colectar fracciones (eluatos) de 6 mL en los frascos viales y verifique la

separacin haciendo cromatoplacas (Notas 3 y 4) de cada una de las
fracciones usando una muestra testigo.
6. Eluya las cromatoplacas en mezcla de hexano-acetato de etilo (2:1) y
observe en cuales fracciones hay presencia del compuesto separado. En
cada cromatoplaca observe el cambio de la coloracin de la mancha del
producto principal (a menor concentracin menor intensidad de color).

7. La elucin y separacin termina en el momento en el que ya no se observa

en la cromatoplaca presencia del producto separado. En un matraz rena
las fracciones que contienen producto.

8. Para recuperar la sustancia: destile el exceso de disolvente utilizando una

destilacin simple, calentando el matraz en un bao mara , deje en el
matraz un residuo de 5 mL aproximadamente y virtalo en un vidrio de reloj
o en un vaso, para que termine de evaporarse en la campana.

CROMATOGRAFA CAPA FINA

 (SEPARACIN DE UNA MEZCLA DE AMINOCIDOS)
OBJETIVOS:
La CCF es una tcnica analtica y tiene como objetivo el anlisis de una mezcla de
componentes.

INTRODUCCION

En la cromatografa en capa fina (CCF) la fase estacionaria consiste en una capa

delgada de un adsorbente (como por ejemplo gel de slice, almina o celulosa)
depositada sobre un soporte plano como una placa de vidrio, o una lmina de
aluminio o de plstico.

El proceso es similar a la cromatografa de papel con la ventaja de que se

desarrolla ms rpidamente, proporciona mejores separaciones y se puede elegir
entre diferentes adsorbentes. La CCF es una tcnica estndar en el laboratorio de
qumica orgnica. Debido a su simplicidad y velocidad, la CCF se utiliza a menudo
para monitorizar las reacciones qumicas y tambin para el anlisis cualitativo de
los productos de una reaccin, puesto que permite conocer de manera rpida y
sencilla cuntos componentes hay en una mezcla.

MATERIALES Y EQUIPO:
Cromatoplacas de gel de slice de 0,2 mm
Cmara de desarrollo
Nebulizador para lquido de revelado
Capilares de vidrio

REACTIVOS/DISOLVENTES:
Disoluciones patrn de aminocidos: 1mg/ml en etanol al 96 %, 0,5 M en
HCl. Patrn 1: fenilalanina. Patrn 2: -alanina. Patrn 3: cido asprtico.
Disolucin de revelado: Ninhidrina al 0,3 % (p/v) en n-butanol/cido actico
al 3 % (v/v)
Fase mvil: N-propanol:NH3 30 % (7:3, v/v)
Disolucin problema (puede contener uno o varios aminocidos)

METODOLOGA:
 1. Preparar capilares de vidrio siguiendo las instrucciones del profesor.

2. la cmara de desarrollo con la fase mvil (nivel del lquido dentro de la

cmara de aproximadamente 0,5 cm). Cerrar la cmara para que la
atmsfera interior se sature de disolvente.

3. Trazar en la cromatoplaca muy suavemente, sin daar la superficie del

adsorbente, y con la ayuda de una regla y un lpiz, la lnea de aplicacin de
muestras a aproximadamente 1 cm del borde inferior. (NOTA: no usar
nunca tinta para marcar la cromatoplaca).

4. Depositar, con la ayuda de un capilar de vidrio, una microgota de los

patrones y la muestra a analizar sobre la lnea de aplicacin de muestras de
la cromatoplaca, espaciadas un mnimo de 1 cm entre s y respecto a los
bordes laterales de la cromatoplaca.

5. Dejar que se seque el disolvente e introducir la cromatoplaca en la cmara

de desarrollo.

6. Dejar que el disolvente ascienda por la cromatoplaca hasta un nivel de

aproximadamente 1 cm por debajo del borde superior. Extraer la
cromatoplaca de la cmara y marcar el frente del disolvente con la ayuda
de un lpiz.

7. Dejar que se seque el disolvente (se puede acelerar el proceso de secado

mediante el uso de un secador de mano) y revelar la cromatoplaca por
nebulizacin con la solucin de ninhidrina.

8. Calcular el valor de Rf tanto de los patrones como de la muestra problema.

9. Establecer la composicin de la muestra problema en base a los patrones,

mediante la comparacin de sus respectivos factores de retardo.

CROMATOGRAFA EN PAPEL
OBJETIVOS:
El objetivo general de la prctica es introducir los parmetros y conceptos
fundamentales de las tcnicas cromatogrficas y su aplicacin para la separacin
de mezclas de cationes.

INTRODUCCION:
La cromatografa en papel es un proceso muy utilizado en los laboratorios para
realizar anlisis cualitativos ya es sencilla de implementar y no requiere de
equipamiento sofisticado. En esta tcnica la fase estacionaria est constituida
simplemente por una tira o circulo de papel de filtro. La muestra se deposita en un
extremo colocando pequeas gotas de una solucin de la muestra y evaporando
el disolvente luego de cada aplicacin.
MATERIALES Y EQUIPO:
2 Capsulas de petri
Capilares de vidrio
Papel de filtro
Tijeras

REACTIVOS:
Mezcla de solventes (eluentes):
Eluyente 1: Alcohol:agua (70:30)
Eluyente 2: Alcohol:agua (70:30) + dimetilglioxima + NH4OH
Solucin de cationes: Soluciones 0,05 M de nitratos de Cu(II), Fe(III), y
Ni(II)
Solucin de reveladores: Solucin de dimetilglioxima y solucin de NH4OH

METODOLOGA:

1. Se toman dos capsulas de petri (ver figura 1), identifquelas con los nmeros
1 y 2. Agregue a la capsula 1 15 mL del eluyente. Haga lo mismo con la
capsula marcada con el 2. Tape ambas capsulas y deje que se equilibren
(temperatura y presin de vapor) a temperatura ambiente. Seguidamente se
enciende la plancha de calentamiento, cuidando que la temperatura no se
eleve ms de 40 C. Luego de esto se toman dos filtros de papel, tomando la
previsin de manipularlos con extremo cuidado por los bordes. Empleando las
tijeras se recortan en ambos una tira hasta cerca del centro, tal como se
muestra en la figura
2. Hecho esto, con un tubo capilar se hacen tres aplicaciones de cada una de
las soluciones patrn de (Cu(II), Fe(III) y Ni(II), tal como se muestra en dicha
 figura. Luego de cada aplicacin se debe permitir la evaporacin de la
solucin; para esto se lleva a la plancha de calentamiento. Evite calentar
demasiado; el desarrollo de un color pardo-obscuro es indicativo de esto
ltimo. Realizadas las tres aplicaciones de cada una de las soluciones, se
dobla hacia el centro la tira recortada, se retira la tapa de la cmara de
desarrollo y se coloca el papel sobre los bordes cuidando que la tira quede
sumergida en el eluyente.

3. Inmediatamente se tapa de nuevo la cmara de desarrollo y se deja que el

eluyente fluya (debido al fenmeno de capilaridad) a travs del papel hasta
que recorra una distancia no menor al 90 % (8/9) de su radio.

4. Aplicando las tres soluciones patrn (soluciones de los cationes) en un nuevo

papel, pero esta vez aplique todas en el mismo punto de aplicacin; tal como
se indica en la figura

5. Cuando el recorrido del frente del eluyente alcance un 90%, se retira el papel
e inmediatamente se marca, con un lpiz de grafito, el frente del solvente y el
de cada una de las manchas visibles de cada componente separado. Cuando
ambos papeles se sequen completamente, se toma nota de las caractersticas
de las manchas observadas, si las hubiere, y se miden las distancias
recorridas por el frente del eluyente y cada una de las manchas de los
cationes.

6. Tome un nuevo papel de filtro y preprelo como antes. Pida a su profesor la

solucin de la mezcla problema y tomando en consideracin los resultados
obtenidos en las experiencias anteriores proceda a separar e identificar
mediante un desarrollo cromatogrfico los cationes presentes en la muestra.
Compare los resultados con los obtenidos anteriormente reportando la
identidad de los cationes presentes en la mezcla problema.