UNIVERSIDAD DEL QUINDO

FACULTAD DE CIENCIAS BSICAS Y

TECNOLOGAS

Lab N3: Marzo 06 de 2017

pH Y AMORTIGUADORES: TAMPONES
Tema: FISIOLGICOS 3 Preparacin de
soluciones amortiguadoras.
Docentes: Clara Mara Meja Doria. Qca, M.Sc.
Alejandro Lozano B. Qco.

OBJETIVOS
Preparar una disolucin amortiguadora.
Establecer el funcionamiento de una disolucin amortiguadora.
Entender la importancia de los tampones fisiolgicos en el organismo.

INTRODUCCIN
Una propiedad fundamental en la fisiologa de todos los organismos, es la capacidad
para mantener un entorno de equilibrio dinmico favorable, es decir, mantener la
homeostasis. En este proceso tiene gran relevancia los sistemas amortiguadores o
sistemas tampones, que equilibran la incorporacin y eliminacin de sustancias cidas
y bsicas para mantener el pH dentro de los mrgenes fisiolgicos (7.35 7.45).

En los organismos vivos se producen continuamente cidos orgnicos procedentes de

reacciones metablicas, catabolismo de protenas y otras molculas biolgicamente
activas. Conservar el pH en los lquidos intra y extracelulares es primordial, ya que ello
interviene en la actividad biolgica de molculas como las protenas, las enzimas, las
hormonas; en la distribucin de iones a travs de membranas, permitir el transporte y
liberacin adecuada del oxgeno a los tejidos, entre otros procesos. Los medios con los
que cuenta el organismo para regular el pH dentro de los lmites compatibles con la
vida son: 1) los tampones fisiolgicos y 2) la eliminacin de cidos y bases por
compensacin respiratoria y renal.

Los amortiguadores fisiolgicos son la primera lnea de defensa frente a los cambios de
pH, entre los que sobresalen: el tampn fosfato, el tampn bicarbonato y el tampn
hemoglobina.

AMORTIGUADORES, BUFFER O TAMPONES

El pH de los medios biolgicos es una constante bsica para la preservacin de los
procesos vitales. La actividad enzimtica y las reacciones qumicas de las clulas se
realizan dentro de unos estrechos mrgenes de pH. En el ser humano los valores
extremos compatibles con la vida y con el mantenimiento de las funciones vitales
flucta entre 6,8 y 7,8; siendo el estrecho margen de 7,35 a 7,45 el de normalidad.
Igualmente, en el trabajo de laboratorio, es indispensable el mantenimiento de un pH
para la realizacin de muchas reacciones qumicobiolgicas. Los sistemas
responsables de impedir grandes cambios en el valor de pH se denominan
disoluciones amortiguadoras, buffers o tampones. Son por lo general soluciones
binarias de cidos dbiles y de sus bases conjugadas o de bases dbiles y sus cidos
conjugados. Los amortiguadores soportan la adicin de cidos como de bases.

ECUACIN DE HENDERSONHASSELBALCH
La concentracin de H+ est relacionada al carcter del electrolito dbil. Un cido dbil
se considera, de modo genrico como HAc, su equilibrio de disociacin sera:

HAc Ac + H+

GUAS DE LABORATORIO DE BIOQUMICA I-2017

 LABORATORIO DE BIOQUMICA: UNA VISIN PRCTICA

La ecuacin de HendersonHasselbalch relaciona el pH con el pK:

[base conjugada o sal]

pH= pK +log
[cido o base ]

Si en la ecuacin la concentracin de cido es igual a la de la base, el cociente es 1,

siendo el log de 1 = 0, se tiene que pH = pK, entonces, se puede definir el pK como el
valor de pH de una solucin amortiguadora en el que el cido y la base se encuentran
en concentraciones equimoleculares o al 50% cada una.

TAMPONES FISIOLGICOS
Son los sistemas responsables de conservar el pH de los medios biolgicos dentro de
los valores compatibles con la vida. Este equilibrio permite la realizacin de funciones
bioqumicas y fisiolgicas de las clulas, tejidos, rganos, aparatos y sistemas. Segn
su carcter qumico, los amortiguadores se clasifican en orgnicos e inorgnicos y,
atendiendo a su ubicacin, se distribuyen en plasmticos y tisulares.
MATERIALES Y REACTIVOS
MATERIALES Y MATERIALES
Pipetas de 1 y 5 mL Peras de succin
Papel indicador Vasos de precipitado de 25 mL y
100mL
Papel indicador pHmetro
Esptula Balanza
Frasco lavador Balones aforados de 50 mL
REACTIVOS
NaOH 0.1 M K2HPO4
HCl 0.1 M KH2PO4
Azul de bromofenol Na2CO3
Fenoftalena Agua destilada
REACTIVOS
PROCEDIMIENTO
Cada grupo preparar una solucin amortiguadora, teniendo en cuenta los reactivos y
el pH que se les asignar. En la tabla 1 se consignarn las cantidades necesarias para
su preparacin, en volumen o en gramos, segn el caso. El pH se verificar con papel
indicador y pH-metro.

Tabla 1. Datos para preparar las soluciones amortiguadoras.

pH
49Reactivos
6,2 7,2 8,2 5,0 6,0 7,0 5,8 4,8 3,8
K2HPO4
GRUPO A
KH2PO4
Na2CO3
GRUPO B
NaHCO3
cido actico TODOS LOS GRUPOS
REALIZAN ESTOS
Acetato de sodio CLCULOS
HCl 0,1 M
NaOH 0,1 M

Se probar la capacidad amortiguadora de cada solucin empleando jugo de limn y un

anticido.

GUAS DE LABORATORIO DE BIOQUMICA I-2014

 LABORATORIO DE BIOQUMICA: UNA VISIN PRCTICA

GRUPO A. Los siguientes grupos, realizaran los clculos para la preparacin

de una solucin amortiguadora de fosfatos a pH de 6.2, 7.2 y 8.2 (Dorancelly
Fernndez-Nelson Forero-Elkin Snchez y Mara Juliana Prez-Diego Giraldo)

GRUPO B. Los siguientes grupos, realizaran los clculos para la preparacin

de una solucin amortiguadora de bicarbonatos a pH de 5, 6 y 7. (Jhon
Sebastin Oviedo, Einy Nayibe Bedoya-Marly Vanessa Giraldo y el grupo de
Jhon Jairo Ocampo- Cristian Javier Lpez- Felipe Fager)

NOTA: Todos los grupos realizaran los clculos para la preparacin de una
solucin amortiguadora de cido actico/acetato de sodio a pH de 5.8, 4.8 y
3.8. Si no traen resueltos los clculos, no podrn ingresar al laboratorio.

CUESTIONARIO
Qu es capacidad amortiguadora?
Por qu el tampn bicarbonato se considera un sistema abierto?
Qu especies del sistema fosfato estn presentes en condiciones fisiolgicas?

BIBLIOGRAFA
Arilla, E (1998). Preparacin de disoluciones. En: Gonzlez de Buitrago JM, Arilla E,
RodrguezSegade M, Snchez A (eds): Bioqumica Clnica, 1 Edicin. Madrid:
Editorial Alhambra, pp. 529 552.
50
Berezov TT, Korovkin BF (1992). Blood. En Berezov TT, Korovkin BF (eds):
Biochemistry, 1 Edicin. Mosc: Editorial Mir Publishers Moscow, pp. 415 445.

Devlin, TM (2004). Estructura celular eucariota. En Devlin TM (ed): Bioqumica, 4

Edicin. Barcelona: Editorial Revert, pp. 3 26.

DOcon MC, Garca MJ, Vicente JC (1998). Estudio del equilibrio cido-base. En: DOcon
MC, Garca MJ, Vicente JC (eds): Fundamentos y Tcnicas de Anlisis Bioqumico, 1
Edicin Madrid: Editorial
Paraninfo, pp. 27 38.

McEnerney K (1995). Fisiologa acidobsica. En: Anderson SC, Cockayne (eds):

Qumica Clnica, 1 Edicin Mxico D.F.: Editorial Interamericana McGrawHill, pp. 410
441.

McKee T, Mckee JR (2003). El agua: el medio de la vida. En Mckee T, McKee JR (eds):

Bioqumica. La Base Molecular de la Vida, 3 Edicin Madrid: Editorial McGrawHill
Interamericana, pp. 65 91.

GUAS DE LABORATORIO DE BIOQUMICA I-2014