Cooper « Hausman sexta edicion Fe OMAR out Ae Geoffrey M. Cooper « Robert E. Hausman Boston Universityste ce Ps ft ere kar ven ie Ms Schoo pra eer son dee cneyprs mtorr: a ip 21 een Bann en 18, De Caper pln La Cgc hs aa els ae ‘ncontnnc sv esis y inde ee tmprate spn een La esp Sa De |, Coie cen nnn de aes eb prot ee recpneen vr ese (Guinean pelea ery ome ar progr Ha pin lows cr 1 ‘Tab denvnamio scons clon sony ene ater ora Prt Delay drea) e i a neie ‘Sout’ neces Chg hie es tas a imeatgets sehr tacos Js rps cen dco muciary Uren cree {Poca de sme even mn etc cn Maa ie a Woe ‘tsp si een vl Ural eae, Achaloate pone Cane ser op ce Su map ome ess as th Seka ¥ [ligne cara cn a oe ns spats ae Ia eet Cpt sm espe mls tae ‘essen deacon comma ga © 2014 6a {© 2012,2011, 2010, Dats) Goi es Ptir Asin Bg © MARBAN Notion Spe Rema logue Stee Songun Mari Lp, 72 Se Mts OM Ne Se Easel remy lt Sin on Be are Cap ‘Tete: (34) 91 54388 35 Slrtcchinbay: Lane fon Nee cn Fax: (4) 91 $34 13 80 ‘he comin ee Soi) menos Sede ‘wwwanarbanlibros.com ‘coun nat bo Elartestopemttl Edicion espaol de: The Cell « Molecular Approach, 6th eiton Geotty M. Cooper and Robert Hausman Este libres dedicnds 0 Spenser Eicién original _gracias por tanto aon de crmpatta¥ apoyo {© Sue Associates, lnc. rl “Tratlatedund plished by rangement swith Sinver Alas, Inc, Sunderland, Massachuses, USA. “ac: Wet Gergana tp Suess toon lt (At 278) finde low ies eta por ep get cl commento dei, eg fansenlusen per i feopa or gen epee gt MARBAN xa ghd {one tit pt maa nih ry nk san 9766.70.47 MARBAN Edin cn put) ISon eau uo (SA Ela nek) ci nnn A MaussOrigen y evolucién de las células 4 La primera célula 4 Evoluciin del metabolisma 6 Procariotasactuales 8 (Células eucariotas 9 Elorigen de los eucariotas 10 Desarrollo de organismos smulticelulares 13, Células como modelos experimentales 17 E.coli 17 Levaduras 18, Caenorhabditis elegans 18 Drosophila melanogaster 19 Arabidopsis thliona 19 Vertebrados 20 Instruments de la biologta celular 22 Microscopia Optica 22 Microscopia electronica 28 Separacin subcelular 31 CCrocimionto de ls clulas animales en cultvo 32 Cultivo de eélulas vegetales 36 Virus 36 EXPERIMENT CLAVE Catv colalar animal 34 [MEDICINA MOLECULAR: Vis y cincor 37 Resumen y palabras lave 39 Preguntas 40 Bibliografin 41 Moléculas de las cétulas 43 Carbohidratos 44 Lipids 46 ‘cidos nucleicas 50 Proteinas 52 ‘Membranas celulares 58 Lipidos de membrana 58 Proteinas de memibrana 60 ‘Transporte a través ‘de membranas celulares 62 Proteémica: el andlisis a gran ‘scala de las proteinas ceclulares 65 Hentiticaién de proteinas colulares 65 Anilisis global de la localizacion, de proteinas 67 Interacciones protecas 68 EXPERIMENTO CLAVE Plegamieno de las cadenas plnepticcas 54 [EXPERIMENTO CLAVE: Exructa de las membvanas celles 60 Resumen y palabras clave 70 Preguntas 71 Bibliograia 72 Papel central de la ‘como catalizadares| Diolégicos. 73 Actividad cataizadora des enzimas 73, Mecanisms de callisis cenzimatica 74 Coenzimas 76 Regulacion de a actividad enzimitica 79 Energia metabélica 81 Energia libre y ATP 81 Generacién da ATP ‘apatir de glucosa 84 rocuccién de energia 1a partir de otras moléeulas organicas 89 Fotosintesis 90 sintesis de los componentes celulares 91 Carbohidratos 92 Lipidos 93 Proteinas 94 Acids nucleicos 96 [MEDICINA MOLECULAR: Feriletonuria 98 EXPERIMENTO CLAVE: Antimetaboios yquimiteapia 97 [Resumen y palabras clave 99 Preguntas 100 Biblografa 11 ie,ADN recombinante 116 Endonucleasas de rstrccin 118 Generacion de moléeulas erencia,genesy ADN 103 dde ARN recombinante 120 Genes y cromosomas 103, Vectores para ADN. Genes yenzimas 105 recombinante 121 ldentifiacion del AD Secuenciaciin de ADN 124 como el material genético 107 _Expresidn de genes clonades 126 Estructura del ADN’ 108 . Repliacién del ADN! 108 Deteccién de cidos nucleicos y proteinas 127 ExpresiGn de la informacion Amplificacién de ADN ‘enética 110 con la reaccién en cadena Colineaidad de genes ‘dela polimerasa 127, y proteinas 111 Hibridacion de écidos Papel el ARN mensajero 112 nucleicos 129 édigo genético 113 Sonda de anticuerpos Virus ARN transcripcion aa proteinas 133, inversa 115 ‘Cromosomas y ctomatina 171 Cromatina 171 Centeémeros 175 Telémeros 179| Complejidad de los genomas de eucariotas 153, Intrones y exones 155 Secuencias de ADN Anlisis sistematico repetitivas 158 de la funcion génica 181 Duplicacion génica Regulacién de la expresin y pseudogenes 161 génica 182 ne Variacién ene individuos pandas yy medicina gerémica 184 Genomas de bacterias yIevadu- —_expgRIMENTO CLAVE: ras 163 Descubinieno de os ntrones 156 Los genomas de Crenorhltis _EXPERIMENTO CLAVE: elegans, Dresophila melanogaster El genoma humano 167 yy otto invertebradas 165 Resumen y palabras clave 186 Genomas de plantas 165 Preguntas 187 ‘Genoma humano 166 Bibliogratia 188 ‘Genomas de otros vertebrados 169, — Fauncién de los genes fen eucariotas 135 Anslisis genético en levaduras 135. ‘Transferencia de genes fen plantas y animales 136 Mutagéresis de ADN clonadys 139 Introducrén de mutaciones en gens celulares 140 Interferencia con la expresiin ‘genica celular 142 EXPERIMENTO CLAVE: ‘Hipsiesis el provins de ADN 117 EXPERINENTO CLAVE: Ieverra por ARN 146 Resumen y palabras clave 146 Preguntas 148 Bibliografia 148, Repliacén del ADN 191, ADN polimerasas 192 Horguila de replicacin 193 Fidelidad de eplicacién 200 (Origenese iniciacion de la replicacin 201 ‘Teldmeresy telomerasa: el mantenimiento ellos externas ellos comosomas 204 Reparacisn del ADN 205 Inversir directa del ADN dafiade 207 Reparaciin por esisin 209 Reparaciin por esis de bases 210, Repareciin por escisién de nuceétides 210,Reparacién acoplada ‘ala transripcién 213, Reparacién no complementaria 13 Sintosis de ADN translesién 216 Reparacién de roturas ddedoble hebra 216 Reorganizacién del ADN 217 -Recombinacign espectica de-sitio 219 “Transposician via intermediaries de ADN 227 ‘Transposicion via intermediatios de ARN 228 Amplificacion génica 232 EXPERIMENTO CLAVE Reorganzacn dels genes de amunoglobulinas 220, [MEDICINA MOLECULAR: ‘Cincer de colon yreparacién del ADN 25 Resumen y palabras clave 233, Proguntas 235 Bibliografia 236 “Transeripeldn en procarfotas 259 ARN polimorasa y transcripeién 240 Control negative de la transcrip- ion y represores 242 ‘Control positive ‘dela tanseripeion 245, ARN polimerasas eucariotas 1 factores de transcripeién ‘generales 245. ARN polimerasas eucariticas 245, Factores de transripcién gunerales e iniciacion de la ‘ranseripcin por la ARN polimerasa Il 246 ‘Transcripcin por las ARN ppolimerasas Ly IL 249 Regulacion de la transeripcién ‘en eucariotas 251 Secuencias de regulacién en cis promotor y estimulares 252 Sitios de unién para factores de transcripcicn 253 Proteinas de regulacién transcripcional 258, Estructura y fancién de ls activadores de la transripcién 260 Represores encaristicns 263 Regulacién de la elongacién 264 Relacion entre la estructura cromatinica y la weanscripciin 264 Regulacin de la transcripcion por ARN no codificantes 271 Metilacin del ADN 273 Maduracién y renovacién ‘del ARN 275; ‘Madluracin de los ARN ribosdimicos ¥y de transferencia 275, Maduracién del ARN ‘en eucariotas 277 Mesaniamoa de corte yempalme o spicing 279 ‘Corte y empalme alternative 286 Correccign del ARN 288, Degradacién cel ARN 289 EXPERIMENTO CLAVE: ‘Ailamiento de un factor de anserp- ‘in evcoidtco 259 EXPERIMENTO CLAVE: Descubvimonto de RNP50 284 ‘Resumen y palabras clave 291 Preguntas 293 Bibliografia 294 Sintesis de proteinas, ‘Procesamiento yregulacién 297 “Traduccién del ARN 297 ARN de tansferencia 298 Rivosoma 299 Onganizacin de los ARN mensajerose inicio dela traduccion 305 ‘Mecanismo dela teadvecién 307 Regulacin de la traduccién 313 Plegamiento y procesamiento de proteinas 319, CChaperonas y plegamiento de proteinas 319 Enzimas que caalizan cl plegamiento proteico 322 EscisiGn de proteinas 323 Glicosilacién 325 ‘Anclaje de lipides 327 Regalacin de a funcién, je as proteinas 329 Regulacién por pequedas rmoléculas 329 Fosforilacién de proteinas 330 Interacciones proteina-proteina 334 Degradacién de proteinas 335 Via de la ubiquiina-proteasoma 35 Protedlisis lisosmica 338 EXPERIMENTO CLAVE Papel eatin del ARN sibosimico a4 EXPERIMENTO CLAVE ‘Descurimiont de las protenatresna quinsas 333, Resumen y palabras clave 339 Proguntas 340 Bibliografia 341Envuelta nuclear y tréfico entre ‘el micleo y el citoplasma 345 [Estructura de la envuelta nuclear 345 Complejo det poro nuclear 350 Transporteselectivo de proteinas desde y hacia el micleo 353, Regulacion del transporte dle proteinas al mileo 256 ‘Transporte de ARN 257, Organizacin interna del micleo 359 (Organizacisn de los eromosornas Y expresion genética 359 Sub-compartimentos nucleares 362 'Nucléolo y procesamiento del ARN¢ 368 Genes de ARN riboséimico y organizacién del nucléolo 365 ‘Transcripcién y procesamiento dol ARNr 366 Ensamblaje de ribosomas 368 Ciras funciones del mucléolo 368 (MEDICINA MOLECULAR: Enfermedades de la limina clear 348 EXPERIMENTO CLAVE: Hntitcain de as efales de locszacin nuclear 382 Resumen y palabras lave 370 Preguntas 371 Bibliogratia 372 Reticulo endoplismico 373 Reticulo endoplésmico y sececion de proteinas 374 ‘Marcaje de las protinas para Girgise al reticulo ‘endoplismico 376 Insercign de las proteias ‘nla membrana del RE 381 Plegamiento y procesamiento dela proteins en el RE 3865 Control de calidad en el RE 388 IRE liso y sintesis de ipidas 392 [Exportacin de proteinas {lipides desde el RE 395 Aparato de Golgi 388 ‘Organizacion del Golgi 398 Glicosilacion de proteinas ence Golgi 400, Metabolismo de lipidos y de polisacitidos en el Golgi 401 Distibucin y eportacién ‘de protenas desde ol aparato de Golgi 403 “Mecanismo de transporte de las vesiculas 405, Aproximaciones experimentales al conocimiento del transporte de las vesiculas 406, Seleccién cela mercancta, proteinas dela cubierta Yy gemacin vesicular 407 Fusién dela vesfulas 410 isosomas 412 “Hirolasas lisosimicasdcidas 412 Endocitoss y formacién el isosoma 414 Fagocitosis y autofagia 416 EXPERIMENTO CLAVE: Hipiess dla seal 378 MEDICINA MOLECULAR: Enfermedad de Gaucher 413, Resumen y palabras clave 417 Proguntas 419 Bibliografia 419 Mitocondiias 421 Organizacién y funcién ddelas mtocondrias 422 Sistema genético de las miloconcrias 424 Internalizacén de proteinas y {formaci6a de las mitocondirias 425 Mecaniemo de la fosfrilacién oxidative 431 Cadena detransporte de clectones 431 Acoplamiento quimiosmitica 432 ‘Transporte de metabolitos a través dela membrana intema 436 Cloroplastosy otros plistidos 38 Estructura y foncién, de los claoplastos 438 Genoma del cloroplasto 439 Interalizacén y distribucién de la pratenas dl eloroplasto 441, (Otros plistidos 443 Fotosintesis 446 ‘Transported olectrones 446 Sintesis de ATP, 49Peroxisomas 450 ‘Funciones de los peroxisomas 451 Formacién del peroxsoma 453 [MEDICINA MOLECULAR: Eniemedades dels mitocondis rneuropata dic herwharia dhe Leber 426 EXPERIMENTO CLAVE Teaa quimiosmeica 434 Resumen y palabras clave 455 Preguntas 457 Bibliograffa 458 Estructura y organizacion de los flamentos de actina 459 Ensamblaje y desensamblaje ellos filamentos de actina 460 COrganizacin dels filamentos ‘deactina 465 Asociacién de los filamentos de actina con la membrana plasmitca 467 Protabeeaneiac dela ouperficie celular 470 ‘Actina, miosina y movimiento celular 472 ‘Contraccién muscular 472 Asociaciones conritiles de actna y miosina en células ‘po musculares 477 Miosinas no convencionales 478 FFormacign de extensiones ¥y movimiento celular 480 Microtibulos 482 Estructura y organizacin dindmica de los rmicrotbulos 482 Ensamblaje de microtibulos 485 Organizacién de los microtlbulos cenlas élulas 488 Motores microtubulares ymovimientos 489 Identticacién de las proteinas ‘motoras mierotubulares 490 ‘Transporte de mercancias yy organizaci6n intracelular 494 Cilio y lagelos 495 Reonganizaciin de los microti Tos durante la mitosis 498 Movimiento cromosémico 500 Filamentos intermedios 502 Proteinas de os flamentos intermedios 502 “Ensamblaje de los flamentos intermedios 503, (Organizacion intracelular de los filamentos intermesios 505 Funciones de los filamentos intermedios: querainas y enfermedades de la piel 507, XPERIMENTO CLAVE: ‘Aislamienta dela quinesin 491 EXPERIMENTO CLAVE: a expresién de uno queratina muzante ‘aa en desaroloancmalo fen fa pel 508 Resumen y palabras lave 510 Proguntas 512 Bibliografia 513 ‘Membrana 13 plesndice 513 Estructura de la membrana plasmstica 513 Bicapalipiica 513 Proteinas de membrana 51? Movilidad de las proteinas dela membrana 522 Glicoctix 528 ‘Transporte de moléculas equefias 524 Difsiénfacilitaday proteinas transportadoras 525, Canales ignicos 527 ‘Teansperte activo dtigide por la hidréiss de ATP $35 ‘Transporte activo drigido por gradientesidnicos 538 Endocitosis 540 Fagocitosis 542 Endocitosis mediada por receptor 542 ‘Trafic de proteinas ena endoctosis 548, EXPERIMENTO CLAVE: Receptor de fs LDL 546 [MEDICINA MOLECULAR: Fibrosis quistica 539 Resumen y palabras clave 551 Proguntas 552 Bibliografa 553, Paredes colulares 557 Paredes clulares bacterianas 557 Paredes celulares evcariotas 558 Matriz extracelulary las interaciones eélula-matriz 564 Protoinaseatructrales de la matrz 564 Polisacaridos de matrz. 558, Proteinas de adhesin ala matriz. 59 Interacciones etula-matriz 570 Interacciones célulacélula 574 Uniones adhesivas 574 Uniones estrechas 577 Uniones de tipo gap 578 Plasmodesmas 581 EXPERIMENTO CLAVE Caracterizacin deta integina 572 MEDICINA MOLECULAR: Enfermedades por ls uniones de ipo gap 580 Resumen y palabras clave 582 Preguntas 583 Bibliografia 584 |Seijalizacin celular 589 15 Molécuassefalizadras Yau receptors 589 Tips deefalizacin ‘eluleula 590 Hoxmonasesteroieas yy superamila de receptores de esteroides 5 Grid nico y mondido de cxrbono 593 Nevroransmisors 584 Hormona peplicas 9 factors de crecimiento 5 cosas 596 Honmonas veges 598 Funciones de lo receptores de la superficie celular 99 Receptares asociados a proteinas G 40 Receptores protine-tirosina quinasa 602 Receptores de citoquinas Y proteina-tirosina quinasas no receptoras 606 Roceptores asociados a otras actividades enzimtias 607 ‘Vias de transdueci6n Intracelular de sefales 608 ‘Via del AMPc: segundos mensajeros yfosforilaciin de proteinas 608 GMP cilco 611 Fosfolipidos y Ca°+ 612 Las vias PI3-Quinasa/Akt ymTOR 615 bes Via de las quinasas MAP 617 Vias JAK/STAT y TGFb/Smad, o Sefalizacién via NEKB 625, Vias Hedgehog Wt y Notch 625 Transduecién de sefales ¥citoesqueleto 628, Integrinas ytransduecion de sofiales 628 Sefalizacion mediante moléculas ‘de adhesién celular 630 Rogulacién del ctvesqueeto ‘deactina 620 Redes de sealizacién 632 Retroalimentacién yselaciones cruzadas 632 Redes de transduccién ‘dea seal celular 633 EXPERIMENTO CLAVE: Receptoresacoplads a prothnas G 'ydtecidn de olores 607 [MEDICINA MOLECULAR: CCincer,ransdvccéin de sefales oncogenes 2s 620 ‘Resumen y palabras dave 635 Preguntas 637 Bibliografia 638 1G Gite cetuiar 641 Ciclo celular eucariota 641 Fases del ciclo celular 642 Regulacin del ciclo celular por el crecimiento celular Y porsefales extrcolulaes 644 Puntos de control del ciclo collar 6:6 Restringr ht replicacin del ADN ‘a ana ver por ciclo celular 646 Reguladores de la progresién del ciclo celular 617, Proteinas quinasas y la egulacién del ciclo celular 647, Familias deciclnas y quinasas depenclentes de cicinas 653, Factores de crecimiento {la regulcion de las Cdk deGl 655 Puntos de control. delesiones enel ADN 658 Acontecimientos dea fase M 659 Btapas dela mitosis 659 Paso a la mitosis 662 Panto de control de ensamblaje del huso 7 progresin hai anafase 65 Gitocinesis 667 Meiosis y fecundacin 668 Proceso dela meiosis 668 Rogulaciénde la meiosis en Jos ooditos 671 Fecundacién 673, EXPERINENTO CLAVE: Descubrimieno del MPF 49 FEXPERIMENTO CLAVE: {a identicaviin dela citina 652 Resumen ypalabras clave 675, Preguntas 577 Bibliografie 678,Enfoques molecules 19 Muerte celular programada 651 Desarrollo causas deleincer preven y delecin 3 Concrete 2 : pone Caspases: Los ejecutores Tipos de cincer 713 ‘Tratamiento 750 spies Les det Derm eee 715 Reguladores centrales Causas del cineer 716 EXPERIMENTO CLAVE: de la apoptosis: la familia Propiedades de las células Descubrimiento ae Chere 78 ie pteenages 70 ee Trmormacon delet MEDCKA MOLEC ca . erealte 72 Int aa ce “sree ype 69 eb coger as alternativas de muerte ‘Virus tumorales 723 752 > FIGURA 1.2 Autorplicacion propa del ARN. Lae pares complements ‘re lo nists denna A on usc [Ul guanine [0 can conn amin que una habra de ARN siva core roids paralasinoss da una muck fn con la sscunclacomplomertar,Seccién | + Introduccion 6 FIGURA 13. Recubrimiento det [ARN de sutorreplcacion con una ‘membrana de fesflpidos. Se ‘os qveln pmsl aug dt ‘ormiono da AN ‘hrarepleansy sus meeuas Seoctados por ura monorana ompuneta de fosttpido, Ceca ‘molecu de osetaoe presenta ‘on arpa cole srteacas ‘tee a guna aio, Las ‘ola cotdblens estan ember (nisbicepa iin ie eabesas ‘Refi extn emueias sot ‘ambos asos dea membrana, ARN y los aminoscidos evoucionaroe lo que hos eel eéigo genetio,y teventalmente el ADN reemplaas al ARN como el material gentico, ‘aly comose describe en detaleen el capitulo todas la lls actua- tes utiliza ADN como material genético, y emplean los mismos mecsnis- ‘mot bison para In replicaciin del ADN y In expresiin de la informacin | ‘enetica. Los genes son las unas funcionales tela herenca,y corzes- pPonden a seginenios de ADN que codifican proetras a molecule ce ARN, Ta secuencia de nucestdes de un gen se copia a ARN mediante un proce: 50 denominado tanscripcidn. no eao de los AEN que codifican prot nas, su seeuendia de nucledtidos se emplea despots para determinat el «den de los aminoscidos de una protinaenel procao de waducti6n. Se presupone que la priaera lula surgi de le envoltura del ARN de r= plicacin propia en una membrana compuesta po: fosfolipidos (Fig. 13). “aly como se expondrd en detalleen el primo capitulo los fostolipides san los componentesbisicos de todas las membranasbiologicas presents hy dla, incuyendo a membrana plasmatica do etl procaviotssy uc ‘ola. La carateritca clave de lon fsflipidos que Forman las memioranas {que son maléculasanfipiics, To que quiere decir que una porcion de a ‘moléula es soluble en aga y In tra porcin no, Las osfolipidos presentan largas cadens hideocarboradas insalubes en agua(hidoobicas)unidas a ‘grupos solubles en agua (hidroilcos) que contioren fsfatos. En contacto ‘nel agus os fosflipidos expontneamnte se agrupan en una bapa con los grupos que cntienen fsfatos ene extrir en entaco con el agua ss ‘ola hidrocarbonadasenel interior en contacto uns con otras, Esta bicaps fosflipdica forma tna bareraesable entre dos eompastimentos acon por empl, separanda elineror dea clula desu ambiente extern. Tia envoitra del ARN sutorpliconte y las moleculas asocindas 4 und membrana lipicica se han mantenido, por tanto, como una unidad,eapaz de reproducitse as aloma y evouconar La sntsi de proteinas a partir fle] ARN pudo ya haber evolucionao, en cuyo exo la primera ela con Sst en un ARN de replicaciin propia y sus protsnas eodiicadas Evolucién del metabolismo ‘Debido aque las culas se orginacon en un mar demoléeulas orgies + taseran capaces de obtener aliments y ener direstamente dei ambient ero una stuacin como éta es imiacla en sf misma, por lo que ls hae necesitaron evalucionar sus propios mecaniamos de ceacin de energia¥7 Visién global de la célula e investigacién celular FIQURA A Ganeracién de enorala hosts Iretabie, (apes rs a > exo, EE Sebi dela gucona eno ito Laotostae Alona enrla hones sei etzo Uoteel prcencria siege doth ‘ Guosnas pir ceG0,y 0 fbeande 0; coe posi. 10, oorhaals Reo a Sateen sae coors ohio sR coe Meewaerwaretn Sn _ Ree Smenrgaer teeta tates EH + 10, —+ 800, + 10 Sintotizar las moléculas necesaras para su replicase, La ewacia y la ill- {acisn contolada de a energia meabelia ex primordial para todas Is acti Widlaces celular, y los procesos principales de motabolismo energético (enalizados en detallen el Cap. 3) se han conservado prcticamente intactos ‘en ls clulas actuals, Toda las flu uilizan adenosina 5triorfato (ATP) como fuente de energia metabelica pao llevara cabo la sintess de los constitayentseaulates conduclr otras actividades que requeren ener, ‘como el movimiento (p. ela contraccién muscular). Los mecanisms uti adds por las elulas para generar ATP han evoluconad en tes laps > "Hespondientosa a evolucion dela glass, otosintesisymetabolismo ox dativo (Fig. 14, Bl desarrollo de estos procesos metabslicos cambié Ia smesfera de la Tera alterando en conseduencia ol auso de a evolu, "En amésferaanaeroba inal dela Tera as prmeras reacciones e- neradras de energia presumiblemente implicaron la escison de moléculas brgénleas en ausenca de oxigen, Estas reacclones parecen ser una forma dea actual glicslisis la rotura anaerotia dea glucor a ido letco, con la ganancia neta de energia de dos moléelas de ATP-—. Ademas de wiizat ATP come su fuente de encreia quimicaitacelulat todas as clulasactua- lesilevan cabo la gliclists, de acuerdo com I idea de que estas reacciones surgeon muy pronto en la evolucién. ‘a glcdisis proporcioné un mecanismo mediante el cual la energa en moléculas orginieas ya fermadas (p I glucose) podia convetise en ‘ATP, que podia ser ulllzado como fuente deeneryia para digit otas race ‘ones metabicas, I desarrollo dela fotosintesis fue el siguiente pasa ns importante de la evolucén, que permits la lula generar enengia a partir dea luz solar y see independientes de a ullzaion dels moléculas Dnginicas ya existent, La primera bacteria ftosinttica probablemente tlizaba HS para convert CO, en moléculas orgénicas —todavia algunas bcteriasutilzan un proceso de fotosintess similar La uiizacion de 1,0 como donante de electrones e hirogeno para la conversion del CO: a compuesto orginicasevolacons ‘encia de cambiar I almsena de fotosintéticas produce O; libre; se ere que ete mecaismo ha seo el res pnsable de hacer la stmésfera de a Tierra tan abundant en O, ensme- fo que tivo lugar hace unos 2400 millones de aos [LE liberaién ele 0, como consectenciade la fotosntesis abi el medio lena quelascelulasevoluconaron, y se cee que determing el desarrollo del Ielabolismo oxidativo. Alterativamente, el metabolisma oxidativo po its haber evolucionado antes que La fotosatesis,y el aumento del Op at ‘masféricoproporcionsra una importante venaj eletiva alas organismses : ‘xpaces dle uilizarO; en las reaciones de generac de emerge. En cual {quer cos0 1 es una molculaallamente react, y el metaboismo ox slativo, undo esta reatvidad, ha proporcionado un mecanismna de gene tac de energia a partir de moléculasornicas mucho mis eciente que ‘a gloss anaerobia. Por ejemplo, la rotuza oxidative completa dela ge cost en CO, y H.0 produce enerpla equivalente 2350 38 moléeulasde ATP, ‘en comparacin eon las dos moleculas de ATP que se forman en la plicdlisks — 5) _aerobi (vase Fig. 18). Con pocas excepelones, as elas actuales util * Laexisterca de organismes ) _zan sacconesoxidativas como fuente principal deencrgin, encondiciones extremes he dado Lugaralahipéteis de quela ide Procariotas actuales podia exis on ambientes ‘Los proariotas actusles, que incluyen todos os tipo debaters, stn divi Smiaros n oes gare do dios en dos grupos —lasargucbacteria y las eubcteriae— que Se diferen- sistema solr. El campo dea ‘Ssoronal principe la evolueign. Algunas arqosbacelas viveh en condiio- | astobolgiao exobilona) hes exteenas, que hoy en dia son inusuales pero que pier prevaleces en busca encontrar series de esta 1a prmitiva Tierra, Por ejemplo los termoacidiss viven en paso calentes | vids exraterest, | desulfuro con emperaturashasta de) "Cy valoresde pe, Las eubacte- “— _/ is incluyen las formas omnes que estan presents en restos dist ‘amplio grupo de organisms que viven en una grandad de ambiente, como a tier el agua y otros organisms (pls patigenos humans). La mayoria delas cules bateranas son esfriem en forma de bast, © “pial con diimetros que aselan de 10m, Su contenido de ADN varia desde unos 6 millones a5 millones de pares de bese, canided suciente ‘rganieme (mnilones do pares deberes) gonan srqteobactaos Momanecces mech aw 170 utectre Mycosis os ‘7 Eco 46 300 ‘pmtactrum | a 5200 veal uncon Seehyryces cron 2 000 Beyoatt ascot 4 200 Pramecti 2 0500 Ckermsemonse we 450 vewar 2 4500 Pants ‘rabies lane 18 28000 se 220 ‘000 nape 70 7.00 ‘nina (Caoromanat age rer or 900 reswehia msgstr ireecada at 10 14000 ele uz zo2300 Poxeetrs +70 20.25m0 oropu ecala 4700 satan. ae 2.000 2025000 Humane 3000 20250009 Visién global de la célula e investigacién celular para codificar unas 00 proeina diferentes. Les procarotas mis grandes Y complejos son las canobactrtas,bacterias en ns que evolucioné la foto Sintesis (abla 12), Ta estructura de célala procariota tipi es la de Escherichia col (E col), un habitante comin del rato intestinal humano (ig. 1.5). La célu Ia tiene forma ee bastén, alrededor de 1 ym de didmetro y cera de 2 ux se longitud. Como la mayoris de les otros procaritas, col est rodeada por una pared celular bacterianaefgida compuesta de polisacéridos péptidos. Dentro dela pared celular se encuentra la membrana plasmiti 2, que es una bicapa de fosfolipidos y proteinas asoindas, Mientras que la pared cellares porosay puede ser penctada por una variedad le mo- leculas, la membrana platmétiea proporciona una separacion funcional ‘entre ol interior dela celulay su meso extemo, ELADN de E cles una rmolécula circular tnia en el nucleoide, que, en comparacion con el ne leo de los evcariotas, no ests rodeado por una membrana que lo spare ‘del citoplasma, EI citoplasma contine sproximadamente 3.00) ribos0- ‘mas ugar del sintesis de protinas), que destacan por su aparienciagra- ular (Célutas eucariotas ‘Como las edlulas procaiots, todas las clulas cucariots estén rodeadas por membranas plasmaticasycontlenenribesomas. No obstant, las elas ‘euearlotas son mucho mas compleas y contienen un cle, variedad de ‘orpinulos citoplasméticos,y un etoesqueeto (Fig. 1.6). E] onganulo mae ‘grande y prominent de las ceulaseucaiotas esl ceo, con un disenetro proximado de 5 ym. El mleo contiene la informacion genética de acl a, que en los eucariotas se encuentra organizada deforma linear en lugar dle moléculas de ADN circa El ncleo e el sitio de a replicacién del SDN dolnsmosel ARN, radeon del ARNen potas tench BOURA Marea crea {gar ens ribosomas del ctoplasma tra ared coblr donated entaoe ‘Adem de un cleo, las cflulascucariotascontionen una variedad de guenale membrana pasatiea EL ‘ongénulos delimitades por memiranas dentzo del ctoplasma, Estos org- A 8m/ocaiea eno mien. Ls ‘xogataha seo colada ate ‘hulos proporcionan diferentes compartimentos en lo que se lcalizan ls 98 dlistintas actividades metabalcas, Las elulas eucaristicn son por lo gene zal mds grandes que las clus procritas con frecuencia presentando un volumes celular cen veces mayor. La compertimentalizaciin proposcions 4a por ls organuls ctuplasmaticos es lo que permite las caulaseucaro tas funcionar con eficienia. Dos de estos ons, las milocondrasy los cloroplastos,juegan papelesimprescindibles en el metabolismo eneraio Las mitocondslas, que se encuentran en cs todas las cuss evcaiots som Jos centros del metabolism oxidativo y son por tanto los respansables de generar la mayoria ee] ATP derivado de la rotura de maléculasorginics. {Tos eloroplastos son los centros donde x lleva a abo Ia fotosintessy sen cuentrarexclusivamenteen las células dela plantas yalgas verdes. Los Tisosomas y ls peroxisomas tambien proporcionan compartimentos meta- bios especializades para la digestion de macromolécls y varias rei clones oxidatvas, respectivamente. Adem, la mayor de las eulas de las plantas contionen grands vacuolas que desarollan variedad de funco- nes incluyendo la digestion de macromolecule almacenaje de produc: tos dedesecho ynuttente. Debio al tamatioy compleidad de las céulaseucarotas, el transporte de proteins a sus destinos dentro dela clu es una labor formidable Dos ‘orgaulos ctoplasmsticos, el etfculo endoplasmuticeyelaparato de Gal- Bi; estin espetfcamente dedicados ala diferenciacién y transporte de las protenas destinadas ala serena Ia incorparacén en la memirana pase rndticay la ineorporacin en os lsosomas Hl reticlo endoplasmic esSeccién I + Introduccién *° Four tras de ae os animale ‘una ted extensa de membranasintracelulaes, que se extienden desde la ‘membrana nuclear hasta atravesar todo el ctoplaxma, No sala actin en el proceso y transporte de protelnay, sino tambien en la siness de lpidos. Bsmt ycontenanun ndcee”Pesdoal rticule endoplarmatice, la protinas son wanapor eds leiee le ‘hopiabmicos en comn-Lasceklas Pequeias vesiculas al aparato de Golgh dene iguen steno prosesadas \egeaies tain estan rodeaes por clasiicadas para el transporte a ss destinos finals. Adem de esta fh ta pared cally carter ‘on de transporte de proteins el aparato de Golgi presenta sntsis de i= ‘Poopisiosyeciolas grandes. dos y (en edulas de las plantas) sintess de algunos polsacridos que com ponen la pared elas, a onganizacn itera de ls clulas eucarotsesté mantenida por el, ‘itoesqueleto, ura red de flamentos proteinicos qu se exionden por el i= ‘oplasma, Fl toesqueleto proporcona el marco estitural dea ceula de- terminando la forma elulry la organtzacon general del ctoplasm. Ade Insel citoesqueeto es responsable de los movimlestos de tas as clas (Pc la contracain de las efulas maseslares), del transporte inroclular Y la posiion de los ongénulos y otras estructura, incluyenda los movi- ‘entos de los cromosomas durante la divisgn cel ar Elorigen de los eucariotas Un paso cxtco en Ia evolucion de las clus eucarlas fue la adguisicién| se organulos subcelularesencerrados por membranas, permitiendo el de- sarolo dela compleidad caractristica de estas ceil. Los onganlos de Jos eucarots se eee que han surgido por endostmbisis una eélula vi viendo en el interior de otta— En concrto los orgsinilos eucartcos se ‘ree que han evolucionado a partir de eeulssprocitas que vivian ene Interior de los encestros de lo eucvitas," Visién global de la célula e investigacién celular LL hiptesis de que ne células eucarotasevolucionaron por endlosi biosis ets especialmente blen apoyada con Tos estudios de Tas mitocon- dias y los cloroplasts, los cuales se cree que han evolucionado desde ‘acters ue viva wt cela ramen, Ly ita y 1s lero tos tienen un tamato similar al de las bactevas,y como elas, se Teprodu- ‘cen mediante sescsin bipartita. Lo mas importante esque las ltocon- ‘tis y los coroplastoscontenen s1 propio ADN, que codifia algunos de fs componentes, ELADN de las mitacondriasy eloroplatos se replica ada vez qu el orginal se divide, ylos genes que contiene se transcribe Sento del orgénuto y se taducen en Tos stbosomas de este. Por Io tanto, Jas mitocondriasy lor coroplasto contenen sus props sistemas genet 0s, que san diferentes del genoma niclear dea ella Ades, los ibo- Somas y los ARN ribosémicos de estos orpulosestin mas relacionados ‘con los bacterianos que aquellos codifiaces por los gonomas nucleaes de Tos eucarotas. "En general, se ha aceptado un orgen endosimbiaico de stosorgénulos, suponiend que Ia mitocondria ha evolucionado a partir de las eubacteias sefobasy os cloroplastes de las eubacteria folesinttias, como las ano. bacteria, La adguisiin de bacerosaorobis podria proven de una c= ln anaerobia con la habla de evar a eabo un metabolismo oxidative, La sudquisicin de bactorasfotosintéicas podria provenir dela independencie ‘ulricional eonseguida al dosarolla a fotos. Por tant, estas asoca- ‘ones endosimbotices resultaon muy benefcioss pra sus scciades que fueron selecconados en el cu dela evoluc. Ateaves del tempo [a mae yorla de los genes originalmente presentes en estas bacteras en aparencia pasaron a incorporarse dentro del genoma nuclear dela hla as que sla-Seccién | + Introduccién 2 et algunos compontnic dln mien yp gunn {Denes pr keynes oe scene reign pesto ds las ures age sed un ena in - scmaag ) star ent competence enn + hiro pot avon) Se scencas de ABN ay see Lt de scimks ngcbonanapeeaue | tun dun cnscscomtaia accor ence on | Shan comsondzemottesn | orl am uaso my eaves sis golciee en inan scabotttesiesspae | neg de dosnes seekers ee ee ers Sohenpedade icocomin, dando gat sv rgb yates es ae ) Gta hs tie deem aguns crm ene Parti de cabana pat deampntncenas Seen fo ones ects nln vgemerebone ee fhe ots sr minaniine agin anuckeceiane Te treat pra nears eur ee te et cen pennies deamuraac eran pa aes ee thant cabot Ounces Sapam te de os gene sucutan ladon coe {Como lepine ADK, ease ye a Prone dl rqcicens, monroe saree ‘ci neo con proces oper os ae oe es Inglclns ys dr nine) datearie ae Una hpotds recent excel matuse de esse Se nas cua popoicnequed gromaseiscreneen gee ‘Sine grant angesbarinoy ebaccsns ie ae ee tones propria ana moan cota see tn auc kp den le des AQAKE He Canctecires meacias Plas Animales devesbies) Protas FlQURA 1.7 Evlucion des ost, Lis elles aaualoe evotuconaran| cede i atepasido provaroia cme, ‘res tga ices oe Secondo ‘treo gers as eeqsopactarasy Srp subsets. Lo oan susan ueden abr euro por ssscteton Ehdgembidea don ovbsctera acne tba con una arquocctors, ‘ fando wm dessa Ttoondas dems da fxmacion ‘dat genera suemrstion can genes \arvade tao de eben como ‘Se arqucotnctona Lo optaion ‘tcluetoraron posterermante come ‘esta delaasociacoy scosinbitca do ura clanobactea sPrstancese deus pan. modelo parala mation ce [irs cia eucatouea ee bead fle C-Aivemy A. Lake 2004 = ‘otras 38 PanesB Visién global de la célula e investigacién celular os, danclo lugar a un genoma eucarstico ancestel ‘con contribaciones tanto de eubacterias como de ar- ‘queobacterias. La vers mas sencilla de ets hips tess es que una relacién endosimbikic nical de tuna eubacteri qe viva en el interior de una a¥ {qucobactera, di lugar no sd las mitocondrias Sino tambien al genome de Tas ceulas eucartcas, sonteniendo genes derivados de ambos ancestros procardticos Desarrolio de organismos multicelulares Muchos eucariotas son organismos unicellares que, coma Tas bocterias, se componen de thulas ‘icas capaces de su propia replcacion, Los euca- ‘iotas mis simples son Tan Las levaduras son mis eomplejas que las bacterias, pero mucho ‘nds poqueias y simples que las ellos animales 0 vegetal. Por Gemplo, la lavadura hasta ahora mas = estudiada tiene un did- Sun eto aproninada de any coniene 12 mllones Mcrogrialectrnica de aro do epars debows de ADN (hip. Sin embargo, Seecbaramyons cree: ogra con ctr ail ‘otros eucariotas unicelulares son células mucho mas _ comply, con genomes substancialmente tale grandes y complejos. Estas inchyenorganismes es pevalizados pata desarollar gran varied de Fanciones, nclayende la fosintsis el movimiento y acapturae ingest de ouos organismes como alimento El protozoociliado Parmer, por ejemplo, estinn cla grande $y compleja que puede alcanzar hasta 350 4m delongiud, yest especial {doen el movimiento y la ingest de baceriasy levadtas (Fg 1.9). Cu- tlosamente el genta del Paaneca comtiene casi el doble de genes hhumano (véase Tabla 12) hecho representativ de que nie tamaho del e- 1noma nel numero de genes estan directamente relacionados can la com- plejdad de un organism, Otros eacariotasunicelares, com el alga verde CChsmyomonas (vase Fig 1.9), contionen clooplastos y son eapaces de ea Tar la fotosintesis Nicrogrtiasépticas de Paramecium {Ay Cntomydemonas 8) (por cores da Dav aSeccién | + Introduccién a FIGURA 110 Alga verde muticoular. ga Vohox ot compuest por unas ‘®calulas genes y 2000 eae sorateas nets ea ates delstnosa Pr caress da Gave Kr) Se cree que a evolucin de los organismos muicelulares «partir de eu- ful Blancos (granulocitos, monacitos, macrofagos¥ lifoctes)fancio- ‘an as ecco inlamatrss ye espoeta mune El do ne ‘ino eats frmad por elas nerions neuroma ue stn allamente {specilizada en a train de seas a teas dl euerp, Varios ipsSeccién | + Introduccién 16 (a9 Conduct ie (0 tmastne Microgratiaséoticas Ge clas arimalos representatives. (8 Geutasaptctals oe boca ina [nina tistics ruse}, ‘conductor ntsine (8) oes ‘ovolastos son cola dani onocivo caterzades pos foona ‘etuoo arpa, () Error, ‘genus, infoctosy menoctos on Einar humera, dle elas sensorial, como las clas del oo estén atin mas es pesilicadas en la ecepcin desenales del ambiente Finalmente, diferentes "pos de elulas musculares son responsables de la prducign de fuerza y ‘Laevolucién de Ios animales claramente implica el desarrollo de una dic versdad y especiaizacin considerable a nivel celuar.Entender los mea rnismos que contolan el crecimiento y difernciacisn de estas culos tan complejas y especaizaas desde la fetllzacin deun solo huevo, es und ste los mayores desaflos del biologa celular y molecular contemporaine,7 Visién global de la célula e investi Células como modelos experimentales [Lx evoluin de as elas actuals pti eu antepasac comin tee im portanesimpliccins pra la bologa csula y molecular coma cena ex perimental Debido aque is propiedades Fundamentals de todas las elas ean conservado durante Ia evaucin, los princpios bisicos obtenidos de Jos experimentos desarollados cn un slo tipo de ella son generalmente plicables eras tle, Por ota parte, debido als dversidad de a las ‘actuals muchos de los experiments son mas cles de vara cabo ean un tipo de clulas en higa de cra, Se tizan diferentes pos de cus y orga ismos coma modelos experimentales para estudiar diversos azpectos Ge Ia biologi celular y molecular Las aracteristicas ce algunas de ests cus se sesullan partiularmente ventajosas como modelos experimentales se discs ‘emer a siguientes seccones. En muchos casos la dsponibilided de secuen ‘tas genaeas completa incrementael valor de ests ganna como sie ‘ma modelo par a comprensin dela biologia molecular de las clas. Ecol Debido a la simplicidad de su comparativa, las edlulas procaritas(bace- ras) son os modes ideals para el estudio de los aspecosfundamentales {ea bloga molecular In Biogen. La especie de bacteria mejor et Giada 6 cli, que ha sido ol organismo por excelenca en la invesigaciin 'e lox mecanimos bisicos dela genética molecular La mayorfa de los con- ‘eptos actuals de a bilogia molecular —incuyendo esta comprensn Sobze la replicaisn del ADN, el eidigo genético, la expresion génica y la Sintesis de protenas— derivan de ls estutios sobre esta usmle bacteria, ata resultado especialmente itl para los blogs molecules bir doa su elatvasimplicdad la acildad para propagate oot estudiada en 1 Taboratori. Fl genoma cle Ecol, por ejemplo, consiste en aproximada- ‘mente 46 millones de pares de bases y contene aproximadamente unos 44300 genes El genoma humano es cas mil veces mayor (aproximadamente S bones de pares de bases) y se ere que contene de 200 3 Z314N genes (ase Taba 12) E tama pequetio del jenoma de cal (que sesecuendié por completo en 1997 propereona clara: ventaas paral andiss genético. Losexperimenis genticoe molecules se ven faitados por el ripido cre cimiento de Ec bao condiciones de aborterio predetecminadas. ao coe iio pina de clive, Ecalse divide cada 20 minutos. Adems una po- baci cldica de cen a gue todas as elas se derivan davis de luna nia eilul erga se puede aslarfcmente como una colonaen cre mento en un medio que contenga agar semislido (Fig 1.14). Debido aque as {lonia hacteranas que cntieren mis de 10 ofl se pueden desseollar en ‘una noch, aelccion de variantes genetics de una cepa de E call por eat lo, matanis que sn resisters aun anibiio, com la poicina = ci Ysipida La fciidad con la que estos mtantes pueden ser seleceionados y ‘malirados rests lave para el xo dels experiment que deinen lon pi ‘ipiosbsis dela genética molecular, dseutides en el Captus. Tas mezclasnutativas en las que Ec se divide més répidamente inclu yen glucoa, sles y varios compuesto orginicos tales como aminoscidos, ‘itaminas y precursores de dccos mceico. No obstant,E. el también [puedo crecer en un medio mucho mas simple que contenga solamente als, "ta fuente de nitrégeno (come el amonfao),y una fuente de carbs y ener fia (como la glucosa). Bn este medi, la bacteria erece un poco mas lenta (conun tiempo de dvisin de unos dD snus) ya que ene que sintizar todos sus aminosidos,nuclastidesy otros compuestos organics. La hab- Tidad dF cal para evar a cabo estas reseciones bisintticas enn medio simple ha hecho que ea extremadammente iil para el deseubvimiento de os procesos biogutmicos implicados. Por tanto, el répido crecimiento y los FIGURA 1.14 Colonine de bacteria Fotogyata de coon de ct (recta en perio oun medio Soaga.Seccién I + Introduccién 18 a FIGURA 1.18 Micrografa elect (a de Sacchoromyess cerevisloe. FIGURA 1.16 Caanomabtti fe simples requisites nutrcionales de E aha f:tado lo experimentos Tandamentales de a biologia molecular y Ia biogutmica, Levaduras ‘Aungue las bacteras han sido un maxdelo de vale incalculable pat eles io de muchas de las propiedad conservadas de las ciulas,éstas obvia- mente no pueden se utlizadas pars estudiar aspects de la estuctura y func eelares que son Gnlcos de eucarota. Lis levadurag os cuca ‘asm simples, aportan numerosas ventajasexperimeatales similares las de E cl Bn consecueneia las levaderas han proporcionado un modelo ‘rucal para el estudio de muchos de ls aspectosfundamentales de a Bio- Toga celular eucariota "EL enoma de a lovadura que con mi recuenca sha estudiado, Saa- ‘omer ees, costo en 12 millones de pares de bases de ADN y contie- ‘ne alrededor de 6000 genes. Angi el genoma dels levadits es aprox ‘madamente es veces mayor que el de al eslta mse mangjable us los _genomas de eucariotas mas complejos, como de suman, Inekisd ens ‘Smplicidad,laaflula de levaduraexhibe las caractrstiss pleas de as oh las eucarots (Fg, 1.15) Contene un nie distin rdendo por na m= brana nuclea su ADN genimico etd onganizadaen 16 cromnomas linge yYsu dtoplasma contene un cigesqueletoy oganos sabceulars. {as levacluras pucelen creer coafacilidad en ellaboratorioy pusden ee ‘stiadas bao muchos de los mismos protocols gendticos moleculares ‘que han resultado saisfactorios co F cal. Aunque las levauras no sr Plican tan rpidamente como las bactenas, se dividencaca 2 horas y pus ‘len crecerfcilmente dando haga a colonia ptr de una sla cul Las levaduras se pueden ulizar en variedad de manipulaciones genetics sie ares aaquellas que se pueden realirar utilizando 2acteras, sta earactorsticas han hecho als levacors hs elas eucarotas mis accesiles dese punto de vsta de a biologga moleal Las levadurss ‘antes han zesltado importantes para la comprensi de muchos process fundamentals en eucaroas ncyendo la epic del ADN, transcrip ‘in, procesamiento del ARN, ensamblje de proteins y Ia reglacin de a vst celular, tal y como disctiremas en cpttuls siguientes. La anda ‘ea biologi eelar moleculat se presenta cara debi al hecho de que los rincipios generals de a estructura yfancin celuaes revelados porlos = fds ce as levaduras se pueden apiara tas a Sulas euros. ‘Caenorhabditis elegans Lslevaduras unielulares son modelo importants para el estudio desc Iulaseucarioas, pero entender el desaeolla de os enganismes multicellares requiete ls anlss experimentales de plantas y animals, organisms gue ‘sont mucho mas camplejos Fl nemstodo Caenorhchditis elegans (Fi 119) [see diversas caracterfsticas notables quehacen gue sea uno de los modelos ‘me utilzados en los estuios de deaollo animal dietencocén cellar ane De J.e.Sumonyi RNa, Fame ne reco no {rr Bev 90:10)19 Visién global de la célula ¢ investigaci Aungue el genom de C. elegans (aproximadamente 100 millones de po ses de bases) et mayor que los evceloas unlcsulares es mis simple y mas ‘rangjable que es genomas de ln mayoria de ls animales. St sectenca ha ‘do determinada por completo, evelando quel genoma de C. lags con tiene aproximadament 19000 genes —altededor de tes veces ma que snmero de genes de levaduras,y un guinto del nimero de genes previsi bles en humanos—. Biologicamente, C elegans es tambiga un organismo rulticelularrelativamente simple: Las lombrice alas solamente s com ponen de 959 edule samsticas de 1.00 a 2.000 clas germinales. Ade tas, C-clegons pede ser reproducida con faciidad y ser sometida a mani Palaciones genéticas en el aboratoria, La simplicidad de C-legans ha permitida que el curso desu desarllo se haya estadiad en deal mediante observaciin microcipics, Estos oni sishan trazado stsfctriamentoel rigen embrionari ye naj de todas Ins elulas en la lombriz adult, Los eshudios gentlicostambidn han ident Fado algunas de las mutacionesresponsables de anormalidads del dex rmollo,condaciendo al aslamientoy deseipein de genes claves que cm teolan el desarrollo y difrenciacién del nematode. Cabe destacar que se han enontrado similares genes que fncionan en animales complejo (in cluyendlo humanos), resoltando C.elgens un importante modelo para los ‘studios del desarole animal Drosophila melanogaster Al igual que .slepmis, la mosca deta fruta Drosophila melanogaster (Fig L.u7pna sido un modelo de organism cricalen la biologie del desarole Bl genoma de Drosophila es de 18) allones de pate de bases, mayor que el «de elegens, per al genoma de Drsopil ole contine unos 14.000 genes. [Adem el corto ciclo de eproduccion de Drovophil (nas 2 semanas) Lt onviere en un organisa muy dil para los experimentos genic, Mie ‘thos coneptos fndamentales de a genética como relaciin ente gene= yr cromosomas-— se derivaron de le estudios en Droop a principios del igi veinte (véase Cap. 6) Lo exhnustivosaniiss genstcos en Drosopia han descubierto machos os fenes que controlan el desarolo yl diferencia sien los mlto- fos acuales de Ia biologia molecular los que han permitido el snaiss en ‘detalles Fenciones de estos genes, Como consscvenca los estudios de Driephil han permite avanzaren el entendimiento de ios mecanstnos moleculaes que gobiernan el desarolo animal, paricilarmente respect 2 ' formacion del cuerpo de onganismos multicelulares compleos. Alig que C. elegans, en verabrados existen genes y mecanistios similares, all dando el uso de Drospida como uno de los modelos experimentales mas importantes dela biologi contomporinea del desarolo. Arabidopsis thaliana estudio del desarrollo Ia biologie molecular vegetal es un campo activo y en expansidn de considerable portancia esandmica a gual que de inte *intelectal: Des ques genomas dee plantas bre una dimension dd complejidad comparable alos genomas simales(véase Tabla 12), un ‘modelo pin para el estudio del desarrollo vegetal seria un organiema r- atvamente simple qe poseyera alguna dela ventajs de Clans y Dro= ‘op. La pest planta con flor Arabidopsis thaltane (orga (Fig. 1.18) ‘eoge estos citer, por lo que ae utiliza como modelo para el estudio de in bilogia molecular en plantas Anbidepsts es notable por penoma de tan slo unos 128 millones de patos de bases, Sin embatgo, Arpbidopsscontiene un total de wns 25.00 [enes, muchos de os cules estin repetidos, deforma que el némero de ge ‘es ineos de Arabidopsis es de aprenimadamente 1500) —una compleidad FIGURA 1.17 Drosopila ‘melanogaster FIQURA 1.18 Arabidopsis thatona.Seccién | + Introduccion 20 IGURA 1.19 Huevos dea rane Xenopus (Coneetde Mest Cane Kenbory Fay dios sobre el desarrollo biologic y ha proporcionado Similar ala de C legs y Drosophila. Ademds, la Arabidopsis es fil de cultivar ene laboratono,y ya se han desarrllade metodos para su mani palacion genética molecular Estos estudios han Tevad ala identiiacin fe genes implicados en varios aspectos del dearvolo vegeta, como es el ‘desarrollo de as flores El andiss de estos gene indica la existecia de = ‘merosas smilies, pero tambien diferencias notables ene los mecanis ‘moe que cantrolan ef desarrollo de vegtales y animale, Vortebrados ‘Los animales mas eomplejosson os vertdbrados,neuyendoa loshumanos y| ‘fos mamiferos El genoma humano se compone aproximadamente de 3B les de pares de bases alrededor de 20-30 ves mds que ln genomas de elegans, Drasopila © Arabidopsis y contiene entre 20.000 y 2500 genes ‘Amis, el cuzrpo humano se dompone de ms 20 lass diferentes det os de clulasespecializadas Esta complejidad hice quelosvertebradas sea Siicles de estar desde of punto de vista dela biologi ella y molcul, !unque el mayor interes de lasers bilogicasnace del deseo de entender ‘organismo humano, Adem, entender muchas de las cuestiones sobre Sampoctanca de la prcticoinmesiata (pj, en macnn) deben estar basadas ‘enestudios de clas humanas (0 esttechamenterlacionad). ‘Un avance importante en elestadio de célulashumanas ye los maase- ros el eeimiento de culo aisladas en eal, donde pueden ser mani puladas bajo condiciones delaboratoro controlales. Fuso de clus cul ‘vadas ha permitdo realizar estudios sobre diversos aspectos de la bilogia Celular de los mamiteros, nelayendo expenmertos que han ihiminado los smecarismos de la weplicacién del ADN,expresingnica,snteslsy proce- Samiento de proeinas,y division celular Adem In habilidad de cultivar txlulasen un medio qumnico definido ha permit realizar estudion sobre Jos mecanismos de sefales que normalmente cetrolan el crecimiento y la Aliferenclacin celslar on el organism intact. ‘Las propiedades expecalizadas de algunos tipos de fllasallamentedi- ‘ereneinda han hecho de elas importantes movelos ara el eetudio de 3: pectos determinados de Ia biologa celular Les elslas muscalares, por ‘jemplo, etn altamentsexpecalizadas para realizar la contrac, produ ‘endo fuerza y movimiento. Debido a eta espeilizacién, las eéulas mus tales son un modelo crucial para el estudio dal movimiento celelar 9 ni ‘vel molecular Otro jemplolo proporcions as clas nerviosa (neurones), {que estn especilizadasen Ia conduccig de sefales eletroquimicas a lar {ga distancia. Ea humans, los ones de ss edelas nervic~ as pueden tener mis de un mete de largo, y algunos iver tebrados, como ol calamat, tienen neutonas gigantes con axons de hasta mm de dlameto. ebido as estrus fancin tan especializadas estas neuronas gigantes han sido importantes madelos en el estudio del transporte de ones 2 través de a membrana, y del papel del cltaesqueleto en el transporte de argnulos ctoplasratios, [ean Xeojus laevis es sn rodeo importante paras studios del desarrollo tempraro de los vertabrados. Los huevos de Xeroprs son nermalmente grandes eélulas, con Lun digmetro aproximado de 1 mm (Fig 119). Debido 3 que fetos eves se desarrollanfuerade la madre, todas las ear as del desarrollo desde el hueve hats el enactno = pus den estudiar con faciidad en el laboratero. Ademés, los ME tuovos de Xenopus se pueden obtener en grandes cantida- Tam des, faclitando el andlissbioguinica, Gracias a estos avan- slots” 025 Unico, e ha utlizado Xenpus amplament en esi6n global de la célula e investig: o IGURA 1.20 Pex cobra. Ernbrn do 24 hoes. 6) Pez act (cores de Chaves Kimmel, Urey of Oregon) importantes descubrimientosen los mecanismas que controlan el desaro- Tl, diferenciacgn y divs celular del emi il pes cobra (Fig 1.20) posse mameroeas ventas para los exude gendti- os del desarrilode los vertebra. Este pequeno pes fei de mantener (va aboratario se reprduce con rapidez con un tempo de genaraion de S:tmeses. Ademés, los embriones se desarolan fuera de Ia madre y =0n ‘eansparentes, palo que ls pemerssetapas dl destrola pueden ser cbt ‘vader con clviad, Se han desarlladométodos poderosos pars facitar el aislamiento de las mataciones que afectan a desarrollo del pez cebra, consi [endo la identificaion de varios cientos de estas masons. Ya quel pez (br es un verebrado de cl esto, pometeser el punts entre los huna- ‘sls sistemas mas simples de inverebrades coma C legons'y Desepi "Eze los mamas eatin es el mss smanejable pra los analisi genetios, fo ‘lal a faites con la rate Raliza- ‘Sin dea secvencacin del genoa del rato, Aunque las clifultadesténicas muchas apicacones dentro dela. ‘mcroscopia do uorosconcia. Loe puntos cudnticosfuorecen con ‘mayor nina y son ms ‘stables quo ls marcaderos ‘orescontes vadisonales, | FIOURA 1.27 Micoscopia de fucrescencia. (A La uz pasa a avd dun fv de oxtcién para Seleccionar au de nga de onda fp, aru que ence ne urescante.Despuls un wpe Aleroico desi er excada naa muss. La rescue era porla nea ove) Basa arms cum espa cio y an segundo fo iro baer) prs slocioar az 3 angus {fonda erat por! ine. (| Mietogmia uorescens dun pon Seton en el que el ADN os tendo de au yee mcrtibdos sn @ toplame de verdeSeccién | + Introduccién 25 FIGURA 1.28 Mleroscopia de ‘uorescencia de unm protein ‘mareade con GFP. Dh pth [tecede s sotubuloe hconada ‘on GFP fue noel an neurones Imunnas on uve y Weualeads ‘madarte mroscoba oe ‘uorescacle Los nls se tieron se azat (De A. Caton, 2008. Nato case e309) © LAGE? se deriva dla rmoduiea dol Paten Asquora u victoria Las protenas que Sm fuorecen on cforentes olores han sido aisladas apart de otros organismos marines ‘una ampli gama de proteins ene interior de Salas vvas (Fig 1.28. Mo ‘as proteins lsorescenten relacionadas con emisiones azul amar Is tmbin se encucran sponbles expand an nai ce ¢St tee al pri visualize vas prea imaléneamente, Se han desallado un varedad decodes pra seuiel movimiento 3 as intraccones de profs marcas con GE en entero e ean ‘vas. Un méodoamptamante lao para etc ls movinientes de proteinas mareadas con GFP es larecuperacion de fluoescencia tas fl fotoblanqueado (FRAP: faorescente recovery afer photobleaching) fig. 129) Em en terira angi de intro aac qos saps uns protetha mateads con GHP ex Blanguenda mediante la exponcin na tz deals inenidad. La fsrescenciase eure ato ngo dl emp de Dido al movimiento demoléals marcadas cor GP? na Uangqucadas hala laren lanqueada, permite determina sas la quel protein se reve endl nkrior deal. Foxelamusnda "Las intraeloes de dos protease fn einer de una cule pueden aralizarse mediante una tniea deraminada tanserenca de Energia deresoancia fluorescent FRET. forscence resonance energy transfer (ig. 1.30) los expertents FRO Is des poten de tes seunen a diferentes maeadore ireseney, come tos Varnes de a GP Las varanes de GFP son seleconada para absorber yer la de Aerts ongtdes de onda, deforma que nl ena por ana dae ‘ovintes GFF exlaassegnda Lantern ene dos protein pte fenfoncesdetctarse, mediante la slominacin de aclu con una hs de meEseag® —tongind de onda qu excita a primera arate de GPP anaiarlalong FIGURA 1.29 Recuperacién dele uorescencia ta fotoblanquoado (RAP). (Una regin ds un tll qo express una pater marcas con GP es, ‘bangueada recarts lacs La eeuperacion de a atesonei ogo dt "iampo a mati cus molcuis marcasas con GFP no bangucaddfencen hac leregn Danqueada, La ara ae rosperaion dein furescanea propor, bot ‘amt, una odio las de movmeto da pten on ltr cocion27 Visién global de la célula e investigaci ‘Sniaaeion FIGURA 1.30 Transferencia de energie resonancla a ne ‘uorescente (FRET). Se hsionan cox polsnes a dos Yrotas aa ve therotos dole GFP (GrP1y GrP2) con dttasongtucos de onda pate la ection ine, celeclonadas dea fra gues uz fii por GFPI ech "GFP2. A concn, clues Son Thminaa con ia ur do gt de nda al que eta a Si Iae pats no eracoiona luz ena por GFP sera Getetede Sin onbargo sas protenassilraccionan GFP ncaa a GPPS, ya eri por Pe ae dteeade etm lu de onda de Ia her emitida. Si as proteinas unidas a estas variants de (CEP inferacclonan ene interior dela lula, ls moléculas fuceescentes se ‘eacontarn cere y In i emia pola primera vaeante GFP excita ala Segunda variant, dando como resultado is emlsion de una lz de logit ‘de onda caactertia dea segunda variante GFP. Las imagenes obtnidas por microscopia de Nuorescencla convencional son borrosas eomo consecuencia de a fuorescencia no enfocada, Estas ‘imigenes pueden ser mejoradas mediante un tratamiento informatio de- ‘hominado desconvoici ee imagenes, en el que un ordenador analiza fas imagenes obtenidas de diferentes profundidades de focoy genera una ‘agen més nia como cabrla esperar a partir de un dnico punto focal Alternativamente, la microscopia confocal permite a obtenciom de image- pose eulvastey detaleinesernentedos, meant cl anaios dela Nor ‘encia den sola punto de Ia mest. Un peqaetio punto de lu, normal- mente prodicido por un Iier se enfoca en la muestra a una profundidad ‘eterminada. La Tua usrescente emda se recoge ulizand un detector, ‘oma una videocémara, Antes de que Ia Iz emutida alcance el detector ‘tn debe atravesr el agujero de una agua (llamado apertura focal) situa- ‘da precisamente en el punto donde la luz emitida desde la profundidad ‘log de Ia muestra es enfocada (Fig. 1.31. Por tanto, solamente la luz ‘miida desde el plano de enfoque es capax de alcanzar el detector Elbe ‘rida alo largo de la muestra genera una imagen del plano de enfoque en Als dimensiones, una imagen mucho ms dtalads que la cbtenida con la Imicrascopia uorescente habitual (Fig. 1.32). Ademds, es posible fundir tina serie de imigenes obtenidas a distintas profundidades para recons leuirna imagen tidimensional dela muestra ‘La microscopia de exctacion multfotnica es una alterativa a lami croscopia tridimensional que tambign puede aplicarse alas edllas vivas {Ca mest ein con una liz de una longitude onda tal que la exc= ‘acidn del tnt uorescenterequieralaabsorcn simeltanea de dos © mds fotones (Fig 1.33}. La probabilidad de que lo des fotones exten simul rneamente a inte fugrescente solamente es importante en el punto dela ‘muestra en el que else std enfocado, de tal manera que la Muorescencia Slo se emite desde el plano de enfogue de la luz. Esta potonteexcitacién Droporcone aulomdticamente una slucién tridimensional, sin necesidad FIOURA 91 tieroscopi confocal Unum da rfoonss ens ‘mutes ina deta deteraned, Yaz nsreacente erie eo recog {nun dolactor Artes de sleancar Sects nr fuoresearite emia Porla muses debe posara aves de tie parva confocal stad en unten ques emda donde ‘anon cle de amuse se ‘toca Goma resutaco colar se ‘atect a enfocda emia desde fecisanca segs des rmsSeccién | + Introduccién 28 Microscopia por ‘Seton ge doe fotonee- <2 ‘gue abeseonsatines co ‘os fotanes para ex elite ‘treat Eeto abo eucede ent punto ce\a miner conde ce enoca [aia deta tera guna ue orecents sl ate den a ‘Sano elegde dole muesta, Msrogetis confocal de cblas hamanee Locos 0 ana de Verdes los nocteos estan do a dle que la luz emitidaatzaviese In apertura de ‘una aguja, como na microseapia confocal ‘demas, la localizacin de In exitacionrecace dao de a muosta, permitlendo imagenes tr dimensional de clas vives, ‘Microscopia electrénica Debido 2 a tmitads resokucn del miroscopio ‘ptico, el analisis dels detalles dela estructura cellar ha necestado una tenica de mieroscopia ‘mucho mas paderos, lamada mictoncopia elec: {nica que fue desarollada en los aos 1930 y aplicada por primem vez a muestra biokigias por Albert Claude alth Portery George Palade los afos 1940 y 1950. EL miroscopio elect nico puede aleanzas wna esaucon mucho mé- {yor que la obteni con el microscopio Sptico [puesto que la longjtud de onda de os electrons es meno que le a uz {Le longitud de onda de los eletrones en un meroncopioelscténico puede ser de hast 0,004 nm —aleededo de 100.000 veces ms corta que la fog ud de onda de a fuz visible. Tesrieamente, esta langitud de onda pure sleanzar una resalucién de 02 nm, pero tal wsclcion no ha podide abe nerseenlaprctcs, puesto que no solo est detrminada por ongitud de ‘onda sino tambien por la apertura numérica dela lente del erosopio. La ‘aperture numérica es un factor liitante pare la microscopia electnies [Pesto que las propiedad nherents de Ilene clecttomagnicslimitan ‘is dinguls de apertura alrededor de 0.5 grado corespomhentes» aber "as numérica de solo 0,1. Por tanto, bajo condiciones Optima el poder de resolu del micrscopi clectrénio e aproimadamente de 02 nm. Ade= mds la esolucicn quese pede obtener con musts biolgeas est limi. ‘da por a fala de contaste inherent. En consecienca, en muestras bid «easel limite pectico de resolucion para el micescopio electrinic es dese 119 21m, Aunque esta resolucin €s mucho menor que Ia predicha por ls longitud de onda de los electrones, epresenta una mejora de mas de cien vows del poder de resol cel micrscopio pte. Enel estudio de as eal soutlizan dos ips de ‘1 —transmisién y barido En principio, In croscopia clots29 Vision global de la célula e investigacién celular pee nes cerrn ed e ae ere pra et aes pe efit parts ney ao ea ee Sauralaslpmdsone maaesmecnss cgay Sel rnn scence Sa ya maz pr twp meni aciuaicpade pay Salposeprs a Sete ee te rn ee Stinnett tenemos meni eS ranlastaass amen anc nisaats coll i iad eat ee parte = ae cir aS A ance weiechracaniansamanet n eater Ses ea ephemera ‘wubuorbecsah act Srnanin felt iatnetaer eerste Gag ee mo ‘rnc bce ae i ttrcn’ anaes tart Face aeo ner ater a usnmenmndnicnessneetncns ‘fel cn Someones ner a sare et aac Stieaidirmigcnaienanais ome seners satel ts tee eae rama tome anne imate a Cee eae eres tevanpeeatiea tyes resent tess Sian atpsbaceaeanetee cise cinta te nae eget roa sri er etisalat Eis rishi youre om Seiticy url ure antlers penantear acoso hacen rence Siaiteracr emcee et srumna! sans ities ipso ema maulciesceaeaniuacancanemanemaed Swaine [RQUAA 1.35 Tintin negative. lerogata de taremlen oo oo ‘tone de famentos de acta tendos ogatvarorte. certs ds Roger (Graig, Unveray of Massachusats Neaioa CanerSeccién | + Introduccién 30 Sombrosdo de meta ecografa lector de amen oaeinamodna del eteoquseta Preparace meds sonexeado rea La pmparacin de las muestras smediantela en combinacion fon el scmbredo de meta, ha rest tad paticularmente ixportante en los entdios dela estructura de la ‘mombana, Las muestra se cong Tan en mitrégeno guido (2196 "C) ye separa cone filo de un bist. proce con fecuencia separa la bicapa lita, mostrando las xray Jetions de le membrana celular (ig. 137) La mucsta se sombrea ins tarde con platno,y ef materal biologic se dtuelveen Sido, pro- ducirdse una réplica de metl de lasuperficie del musta El examen de tals relics en el mitoecopo le tednicorevela muchas slteraciones de Ia superfide, que coreesponden a as proteinas que ocupan la Leapa lptaica, Una Varacén dela separaciin por ‘cngelacn Imada grabado por congelacicn permite ls observacion dels superficie extemas de las membranasclulares ademas de sus cara interas. EL sepunl tipo de microscopia electra a se ulliza para obtener una imagen tidimensional dels culos (fig. 138). En la micrscopia eletdinica de bari ol haz de electeones no ‘asa a través dela muestra. En su lugar la supercede la lula se recubye fe un metal pesado, y se utiliza vn hoz de eectrones que barre toda lo ‘muestra Los electonesalslados oemitidosporla superficie de la mesa ongelacin (A La seperacen por ‘Sagelason ae beara pes, ‘Sjnde x proteins ember Imembranaacoctadas awa dla dot partes des membrana. (2) Merogiera ‘en merorana plasatons Ge oe ‘shins adjacantce sapradan por ‘engin Las potenas que cue [Ebeaoe suracen como parce ‘ntememancess ash31 Vision global de la célula e investigacién celular se rocogen para onerar una imagen tridimensional la vez que el haz de elestrones se muevea To largo de la cflla.Debido a que la resolucion de la ‘nicroscopiaelstrnca de bazrdo solo es de unos 10 nm, st uso est res {rngldo al estudio de ctlulas completa en hugs de suborganulos celulares fo macromolécuas, ‘Separacién subcelular “Aunque el meroscoploelectrnico ha permitida una observacén detallads Gea estructura celular, ln mieroscopia en exclusiva no resulta suficente ‘pov define ls funciones de los numesosos comporentes de las clulas ‘carota, Pare contestar muchas de las preguntas que alan ala funcin {eos ongénisoscelulaes ha sido necewnoaislara los oxgnulos de las folaseucarotas de forma que pusdan utlizarse para estudiosbiogutmios. NNormalmente, esto se realiza mediante Ia ceatetfugacin diferencia —un mmélode desarrollade por Albert Claude, Chistian de Duve y sus olabor Ares en ls as 1940 y 1950 para separar los components de la clulas ‘de aeuetdo con sus tamatos y deneidades El primer pao en la separacidn subelar esl rotura de Ja membrana plasmas bajo condiciones que no destruyan los components internas dela fla Se utizan diferentes métovds, que inluyen la sonicacin (exposicn "sonidos de alta frecuencia), reduclon en un homogencizador mesic, 0 ‘tratamiento con una Batidora de alta velocidad, Todos ests procedimien- {os ompen la membrana plasmsticayelretculo endoplasmatico en peque- os fragmentos mientras qe dean a ties componentes de la olla (Comoe ‘ils, Hsosomas,peoxisoms,mitocondriay elooplasios)inactos. Li suspensin de Ine clas rota (llamado lsado u homogencizad) se fracciona en sts componentes mediante una serie de centefagaciones en tin ullacenrifuga que procesa las muesras a una alta velocidad (mas de 10,000 rpm) para produce fuera alrededor de 500,000 veces mayores qe Ia gravedad. Eats fuerza determina que los components ceulares se sltien Al fondo dal tubo de centsfugacion y que formen un precpitado (proceso llamado seimentacin) en un grado que depende del tamano y It dens dad, sedimentndose las estructras mis grandes y pesadas con mayor re Didor (Fig 1-39). Normalmente el hemogeneizado celular se centrifuga Ta Primera veza vloedad lena, que sediments solamente los edulas que no Shan rot y las grandes estructurascelulares —losneleos—, Por tanto, se [puede obtener una fraccion rica en ncleos del precpitado que se forma en [i cntnfugacén a velocidad lets mientras que otros components elu ‘es cantintan suspends en el sobrenadante (el resto dela solucién)- EL sorenadante xe entifiga despa a velocidad rpida para sediment mi- tpcondlas clroplasos, lsosomas y peroxsomas, La recentrifugacion del sobrenadantea gran velocidad sedimenta fragmento dla membrana pas- matics y dal etealoendoplasinatca, Una cuarta cenrifugacion a gran ve- locidad sedimentarbosomas,dejando exclusivamente la porcion soluble «el ctoplasma (ites) ene sobrenadante ‘as fracionesobtenidas dela contrifugacion diferencia correspond proparaciones de orgs enrquecidas, pero 0 puras. Se puede obtener Un mayor nivel de prifiacn mediante la centrftgacion en gradient de Alensica, en Ta que los orgéntloe se separan meant Ia sedimentaccn en Fanci al gradiente de una sustancia dens, como la sacaros, En a centr fagacion por velaldad, el material plmario we estraiia en el gradiente de sacaton (Fig. 140), Patculas de diferentes tomatos se sedimmentan por el gradionte an diferentes escalas, moviendose como bandas disretas, Des pues de Ia centrifagacin, la coleccin de fracciones individuals del gra- lent proporelona la informacin necesatia para separa los organulos de famarios similares come mitocondriaslisosomas y peroxisomas, FIGURA 1.38 Microscopie lectrSn- (de bard. Mlctoorata econ 2 ds camao de un macotago. Fracclonamiento calla Ura ver ros ls psn, ss castes suoaules sn "Fessonse esate ‘irs tps de ciigasonSeccién | + Introduccién ‘apnea mtn TS Faas seme SEIS awe ‘ost fms “ais ca ene iene orenis nef om paa, my etre Entonaris. Se avanat sun mt on 198, cuando Hay Eagle describ el primer medio defini qu sistontaba el crecimiento de lar eas animales ‘eed salen geo metic para io clos de cis animales cone vans sm ‘elds viamiay, qe ls cle no posden pro- {scr por st imma Emo eet hs hs ella aimales en clive tambien ine ‘oer, quesive om fueie de foe de ein to poles qu von necesrion pars estima divin ela Shanti varios foes de Cries. Actin cmos dele inet a siecle organs ‘leurs proporonando seals means or ieee ane comencen una on ete Force, we hncon importante deo soa tos dea piel en el animal nace la protean ‘wondo we necesita repmat dato cx por un ‘oe 0 na herds Sr visi est desencadenda porn factor decent eo ors plague fs cranelncoagulcn, evn fm dela prolifera dele beast de enor Gel tj dato. La enizacin dele actors de ‘Snertoividules ha eco pont avo ds ‘na valedad de ells en un medio Hone de ero {redo ene gueel sero sto remplsndo por {aco de rtm epee nese pa esters en eer). selves les de cis eblecos por tu de un tide se denominaneulivos prmaios (Fig. 142). elas en un caltvo primero norma cnnedenatig | eo =e ame Ses mente creer asta cub Te supercede a placa de Cultivo. Despus pueden ser retiradas de In placa eponerse a baja densidad para formar clivosse- FIGURA 1.42 Cultvo de cuts animales. Las c$héae procecetes oun lo a cutan an cio mua en css Pet Epo ctv cbendo ae daneminacutvo ‘undaris, Pte proceso se puede repetir mich ve es, aunque a mayerfa de Ine oulas normales no ‘pucden crecerenculivoindefinidament. Por ejemplo, es fbrobastoshuma- ‘nos normaesaiten desde 50 a 100 duplicasones dela peblain, despa sle Tas cuales paran de creer y mucre, Pre contaria, las las que se de ‘svan de tumores con frecuencia prolifera indeinkdamente en culo yr ‘ben el nombre de lneasclulares inmostales. Adem, se ha conseido ais Jar un importante nimero de ines celulaes inmortalizadas de rosdores roaedentes de cultivs de Hbrolastos normales En garde morir coma la ‘mayor de sus homdlogos algunas culas de estos cultves cota peli ‘erancoindeiidamene ormondo linea elares com aquellas que se d= sivan dels tumors. Tle eas elulares permanentes han restltado muy sles para muchos tpos de experimentos ya que proposcionan una Fuente continua y uniform de aaulas qe pueden ser manipulada,clonadasy cul- ‘vada indefnidament en el aboratorio, Tcluso bajo condiciones 6ptimas, el empo de division de la mayors de Jas edlas animales que erecenactivamente es del orden de 20 horas ez pra.Seccién | + Introduccién 36 veces mis ang quel tiempo de divin dels levaduras— Por tanto los expeimentos con clas animales cltveds son me cho mas fees y mas lanans que aquellos con bacteriasy leva- ‘duas. Por ejemplo, el eecimiento de una colonia visible de ola Toe animales partir de una so cella dara una semana © ms, rmieneas que lis colonas de Fal ode evaduras se desarollan durante una noche. No obstant, las manipulacionesgenias de las elu animales en cultvo resin indispenebles para el en- tendiniento dela estructura yfunccn de la ella. Cutivo de céuas vegetales Lelia gern an odin tas ena native que carga as malcaes epopiday pr a ele (del caecimianioAl contro gut farts Ge cece Polippitcas qu regan a prleracion de a mayoria de as ‘Estes ennaicy lo Solves del cect dea clas “wn puma pe deste ape {cMlorvept Cuando se sumanisien meri apopladss con QUA 149 ula woes er nas moles requires del cient mods Gpos de tas vegeta alto, ra rsa se 8 prlfern er civ, podusend una mam delay no dfencedas GUS SIDETES Geese? deaminase (Pg), Sis Te import tener en cuona que mth ofl vegas on apaces de formar cualquiera deo dite po cella tds near ara ‘rgeera ura pln completa, En cnsecuence matin a manpulcn ‘propia deen yeas mola relator del cect, liar yee diaries on cla Pan csp tar ald! de ior veges intyendo rae tls y hos En Chos cay inci ne plata eles pu repmerarae pr ura sola fl er culivo. deme de re tedric iu hablidad de produc una nev pln desde sla mala cn clive ce pola i troduction de ateacone gendicas ena plans abcd mjporanies po ‘biidads pn ie ngerso pentn ago Virus Los vinassonparssitosntacelulares incapaces de replicase por sf mismos Se reprodiucen mediante la nfeci6n deedlulas huesped y Ta tisirpaciéin de a ‘mageinaria celular para producir a particule viral. En sus formas ms ‘simples os virus conssten solamen- “ @ teen cico nucleo genomico (ADN, ‘©ARN] dead de una cubierta pro teinia (lig, 1.44). Los virus son im portants para la biologia moleclar a Y celularporgue proporcionan site ‘as simples que pueden ser utliza dl pazainvestgar ls funclones de Ins ellis, Ya que la replicacin de Jos virus depende del metabolism de as elas infectadas, lon estucion Sobre vinis han revelado muchos de Tos aspecns fundamentals dea b= logis cellar. Estudios sobre los virus bacteriaros contribuyeron sustan lalments a la comprension de los FIGURA 1.44 Estructura de un virus aia. Pariouas ei pantomavius —mecanismes béscos de la pent ‘qu conignen ua peavera molecule de ADN heuer oncapsulada cn ura.- trolly fueron os exponents ubieta de protenas a capsta)(B) Kecrogatia acres do partes co ‘eu de paptor humana, Se hn an cloes eral. con virus Vegetales (con o virus del WN Prine does eam37 Enfermedad cer inciy n onto Selonracadee evctrandse pra ppolferacn colar necro, Elemento dns tla arenes rel eat cider ‘ela para artnet recess dl organere al Comptia Po lear a han ‘arcargenscrcanaermanera ‘ezcononds,macendo «| erence el tats de eos Y rganesrormaee El carcar esa agua casas comun a mute (Gespucs de ss enforces ‘aocas en Estados Unto Deroxnadnene ure ceca tse ‘Srureans desarar once ‘errr aranas on su aan, cade wn de cada cst ‘marca moa de eat Selerrace,Enondeas cause dl cary cxsarolo de owas todos start en por ‘ios principales bsthos dela vestgeon macs, Bases motoculares colulores Actuatmartesabenos quel cincer as ‘resid de mutaonas nce ures pie nomalnert carton [eprobretn enue Lae teubrimlerosfrdarerse que han consid alaidonacn do (tos genes si deo ‘sind ds us qe ease cncer on ‘males el rtepe dels cules ue Silda pot Peyton ou wr 1991, Rus aces qu os crcomae {uncdre: dijo conection alos pesen vane medi un ‘eu, o RSV ls enna Vin (a Sarcoma do Rows Dea. {que FS en unre conn ‘geromace ana 19.200 pares aus, epoca comets a ans molec macho a acters gue Virus y céncer ‘es compldos gnomes des patte ‘Sta etal annals, sto estan order ai erfeacén dun gon ‘spoon camara dl cance (encogéanspvico por lus, Gescabrmenta de gene racionadoe ‘nla las normals dood os ‘ipso estas eens a loshumanea. gino cneares ani humanos se abe que estan cod Potvin oo estan de Imutacone ns gees 6 sous romase fom simi rn ‘ncopinoticado one SN. Provancién y tratamiento ‘atcados por vine tuyn el evil Yotros cineeres anogsais us de aploma, cancer de geo (os de [shwatts By Cy alunos pos ce lifer rus Epsar-ary aves ‘umanotsoépen den ah into esos oscars indian por ‘rus represrtan odedor dl 20% de [Stnlsnas cdr en mind Enprnaa.etos cancers vo pcan “us esponsabe eorsigatndose un progres corscerable en ste en RESIS Visién global de la célula e investigacién celular ecarale de ua vacua eect ‘armel vs dela hapa paplemavus tumanos, “los cinemes umenoe etn «as ora mutacin do genes on ‘aula reales much ea os ‘eure rt ie dl ni on ged heres os esti sobre Jesus causante de cnenres han ‘rpeconado ldetican oo ‘muchos genes reporsabes os Crowes ne reates porns, ‘rtrdmianto eos mecanmos ‘alec reporebles co), oasrote dt cance: Se oti cod vests eters pare Utero okey oar et Cire para centre sero mcs ‘seu atom De hecho mer toga de deaf ease tama (cancer rumano frog rao Imo ovo, ero cnl Ca. "ue eerie on gen my sinter a oneapin ASN Reteroncia reanortsrtads del qu ura al ev da sor as, Isao dl abe) los que demostron por primera ver poten ‘ods ARN. Lovins han propor processes ees Inveaigasonesdevrin actividades el us aon Trépidececiniento yl pequt mao dear baceis hacen de elas umelement exelent pts xpesimeris cn loa olen, sveSeccién I + Introduccién 38 FIGURA 1.45 Places de Dactoristagos. Las paces de 74 son ‘bles ent taps oe € eo Coda le efor par replat de {ina soa paral dl vs. (© Losin animales a menudo ‘son za en leap genien ‘come transporiador de genes parainveductos en as eda. 1s bacteranos (bacteriéfagos) han simplificada el estudio de ta genética buacteriana. Uno delos batenofagos mas importintes es TH que infeta 56 replica en Eco La infeecion con una sola prteula de T4 candace aa for- :macién de una progenie de apronimadamente 20 partcuas vials en 20° ‘minutos. La céllainectada inicialmente despu etal (se is} iberando Jas partculas vials al medio, donde pueden infects a neva oSulas, En un eltvo de bacteriascreciendo en un medio cn aga Ta replies de Te ‘conduce ala formacion de una zona caea de clas lsadas (una lacs) en tuna plancha o «csped de bacteria (Fig- 148) 5 las particulas vials in {eccioss son files de reproduc y de manipula, los mutants vitales—p. «j. vimis que crecerin en tna cepa de Fea perono en otra ron files de slr Por tanto, T4 se manipila con mayor fremencia que Ecol en est dios de genética molecular. Adems, el yenoma de Pex 23 veces mena ‘que el de E coli —aproximadamente 02 millores de pares de bases —10 ‘ua facta el ands genético. Otros bactriagos tienen Incuso genomas ‘mds pequeios —el mus simple consste en moleculas de ARN de tan solo 3,600 nucleotides Los virus bacterianos han proporcinado, portant, lunos sistemas de experamentacinextremadamente stiles para la entica ‘molecular. Los estudios de estos virus son les sesponsables del descubti- !mienio de principiosfundamentaes de a biologa molec, Debido al aumento dea compleidad del genom de as elas animales, ls virus han sda atin mas importantes en los estas de las lla anim les que en los estudias de las bacteras. Macho virus animales se replcan y se estan mediante formacion de placas en los elevos celles ch nds que os baterifagos Ademss, los genome de los virus animales son similares en comploida als vires bacterianos rariand eproximadamen te desde 3.0 30000 pares de bases), deal forma que los virus animales son mucho mas mangables que los de sus culasiuesped Exisien diversi de virus animals cada inode cllosprsentanedo ADN o ARN como material genético (Tabla 13). Uma fama de virus animales —oa ‘elroviris—corienengenomas de ARN en sus particule por sine ‘an na copia da ADN desu genom las clasinfcaca. Eto vies pro Potcanan un buen ejemplo de la importanca de is vis como modelos, ya de metal Separaion por ‘conglacion,aquauerie conglado, ‘mlroscoia letra de bare ecterolego, retrovirus 1. :Qué demostraron los experimentos de Sankey Miler sobre Ia forma- ‘nde moléclasongnicns? 2. Qué tipo de macromelécula es capaz de digi su propa autorepiacén? 4. Diseute las evidencias que apuntan que as mitocondriasy os eloxo- ‘laste se orginaron a partir debacterias que fueron interalizadas por El precursor de as clulas caries 4, Por qué se cree quel fotosintsisha favorecio la evolucién del meta- boli oxidative? 5, Dado quel dimetra de una cua baceriana de. suneus ede um yet slimetto de un mactlago human ex de ur, jeidntas Sulas de Se ‘us caben ene interior de un solo macdfagohhamano? Asame qu as ce Telos son erica 6. :Quéorganismo modelo proporsions el sistoma mas sencilla para ees {uo de a replicacion del ADN eucaitico? 1. tis estudianda un gen implicadoen el desaroleembrionario mama ‘io, Que onganismo modelo sera el ms aprepiado para us studios?a Visién global de la célula e investigacién celular 4, ,Quéresolucén se puede obtene con un miroscopiodptico sla mes {tase cbverva al ait en lugar de através de aceite? Asume gue Ia long td de onda de a luz visible e505 pm. 9. Estésa punto decomprar un microscopio de investigacin para tu abo ‘atoro,y puedes gi ene dos lentes ebjeivasdieretes, Una posce ‘un aumento de 100 y un apertura rumésica de L1.La ota posee un ‘namento de X60 y una apertura numérica de 13. Suponiendo que el precio noes un problema, ual de esto objetivoseleghas? 10, ;Qué venta pose el uso de a protein vende fluoresoznte (GFP) soe ‘empleo de anticuerpos marades con sondas fuorescentes pare estudio ‘Sel Toclizacin y movimento ce una protein eel interior celular? 11. Identifica as diferentes cracteristicaso propiedades de los organulos «que permiten Ia separacin por centitugaci de velocidad, en comps- ‘hed con una centtugacion de equilibrioen an gradiete de sucrsn 12. Por qué generalment es necesarioe suero en el medio empleado para ‘leullivo de clulas animales? 18, Difreniar entre cultivosdeeulasprimarias y linea celulaesinmor tallzadas 1 :Por qué es importante la capacidad de cultivar culas made embrio- Bibliografia een yea des oles Ma yt nc in. “Anderson 5.G EA Zomorodipog [Bs New York WAL Feeman- MESSE ALCO em as btn 1 al GLASER Gal MA ae IPS i 3 Koran Wm The gent ence Miler, $. L, 1953. 4 produetion of arnino SESE Ome iat ett cna plato at RNA Pres Na, tc, and 27 oes. 2010, Genomic MELT Ra seealeorat ee Darl and WF Dalit 186 Spee sans Se “mane ov hey ie elon yer ya Card] Atal 204 Thecngat Pe No Amt esas ricer | SRM G andl A ate a Teg Debine, 297 The arigin af vtagons'» ea elarce Nurut GE 1 I, sappsiathnmetoreonee Saki Sega) 8D ong La pai. Bennane iac a0 “Syme 5 Sacremento 0, The ne ons Sr eed ae Sawa Geptand EER Cehang] Adis ofonh eG Tonia inne le gay 4, Ata Co rd Pas ‘spn of nace nay, Sore meetup rican Sted Rta Ane Cou como modelos AEN we tea ‘experimentales me ath Aplnpmatungys in Mma MD. ad 1% hers 200. The So A ‘ew segs Be me at SR REIS Ae Hong J and Sf. 20 eae grr G Pt LC A Roch paar recent LCA Th ns "Then bran Rig aio: amecoeeae fdeocimer kee Par Vain rd Je se fe Geet rt Ra "Sts Tk cy PSS Grd, Ome 8 ‘Sra Saar amp ene misery ee seu BA Cereal ey Ere taiaTe Py See == ooo nino ra mae ees Sarno ean os [Py mndeioffaman scme ha Sacco e Meme 0 Reker ‘SEelgmene Sue 2 THE 8 Stipa f the mouse genome. Ne ot ‘si ine rae gs ‘tee ts ° Fi ieee —_—_ Instrumantos dea biologi eltor ers, W- 8. 85 Chesian de Doe and Sine Bet 30 ASecci6n I + Introduccién i$. Set 2. an ei). tp Be Coca aon, ren, Nice ‘Spring Hatbor Laboratory Cha M209. Ging up Pe. Ald Se Uae at 08) Che, A175, The coming of a8 of he doer en ©1975 Eapring eth ca ‘Hinge Same Se Ea, M858 Nuttin neds of ine in, 5, 1 WE Rc and Fi nfo Coe aii se Sec Washington, DC: pans Re Rc Te Rare hte eet Shsianeatly se at oi 5 Tita it Si See eee Sciehictsscin se tf psa ogee th een Saar ne aie Sela se ftp Bee ‘ie Crit i 4586-850) pense che receipe cera sha a at is fetta es et sanenaryat wreath er ea pe a Renae ne Se Troma ra eget ‘rep beak Bet 966-818) mca an Tenet Ts Seaplane sab emg aves “eee HeyCapitulo 2 Moléculas do as céulas 43 Membranas celuares 58 Protedmic: el anlisis ' gran escala de las proteinas calulares 65 EXPERIMENTO CLAVE: Pegarit oes ‘ences polpapeas 5 EXPERIMENTO CLAVE: srt one Tnevana eu 60 Composicién de las células {Las células son estuturasinceiblemente compleasy arada,capaces no slo de autorreplcarse —la propia esencia de la vida sino tambien de realizar una amplia gama de eas especalizadas en organisms pluicelse fares. Sin embargo, las culas siguen las mismas lees dea quimicay laf sca que determinan el comportamiento de los sstomas inertes, En conse ‘uencia, la biologia molecular moderna tata de entender los procesos ‘molecularesen trminos de reacciones sca quimicas, Este capitulo considera la composicin quimca de las elas I pro- pisslades de las moléculas responsable en timo temina de todas as St Vidades celulares, Se confieré alas proteinas especial énfass debido a sus papeles diversos en la clu, incuyendo actuar como enzimas que catal= aca todas Ins teaccione bioldgicasy como componente clave de Ine ‘embranasexulares. En es sltimos acs han sido desaroladas on ve ‘edad de asevastenicas que permit el andisis de protenasa gran esc [a, Se espera que este campo crecente de ls protemica tenga in gran in Beto sabre nesta comprensin de la expreson enteracen de proteins {vel interior cella, de forma parecida al impacto que la secuenciaciGn a stan eseala del genoma ha tenido sobre nuestra comprensdn de contenido fencticn dels culos yorganisnos, Moléculas de las células {a suis etn compeste de ag, ones norgénicon ymolécls gue Consenen eno orginal Fas a mola ms abundant ens ‘ful eprsetand el 7a mde Se a ar ela fot En coc Gi Iinfersecon nt lan let de on components elles cen ue opti centrale nus ogc spread cn dl aga l especto ee queer una mela polar dnd os tomos deh drogen pneen an ang igcramene poses xin pone or ft igeramente neat (Fp 23) bi su atures poly as moles Eo itagee pain Remar enews mnt hedge ie oom thts lec pare corm interac con ns cdo posta Spatvamente Cone read de ates interac on ones no. icolspolares som linet sabes en ag hii). Preleonte to ls melas nope, qe no pase tera on oa on {sciesmente sos en un adi tuo (hdrofobs) En consetuenci itsmoleans no plas enden a inna su contacto con el gon re Gonandose eaten ente Com era mis adelante en ate PE tla interactones de moles poles no plates con el agua yen 1 devmpetan paps rua erm forma de rte pc,( Eleduloorante atl Secci6n I + Introduccién 44 Formacién de enlaces. ta pelmeracin de eae, ‘iodo yrs para Torr plsoaraes, Palpeotdes Sc Ices, respecte, Onmeauensdels formic once comes sucalosa (Splenda) es un Aerva sinc del azicar comin one que algunos de fos ‘grupos hidronto del azicar han So sustudos por coo, FIQUAA.2. Caracerstons dl agua, (A El agua és una mléeula pla con ie carp berate nema an estonia do oagane yuna conga Iaerament postive) 2 lo toras co crogene, Deo aoa plored, moteur dessin user formar alas 9 pues heregaro Gnaas| ‘Sacentruss| ber ert so oon ovasmelecuas poles 3} stand So FRtsmctore Gn lone opto ‘como las membranas claves, Los ones inorgiaicos de la oul, incluyen- ‘do el Sodio (Na), potasio (I), magnesio (My), calio (Ca), fostato {GHPOF), clon (C1 y bicarbonate (HCO), constzuyen un 1% o menos de ‘masa clulr total Estos ones extn implicades en numerosos Aspects cel inetabolismo celular, y de este modo, desempenan importantes papeles en I funcicn cella. Sin embargo, las motculas orgénicas son los nics componente carac- teristics dels fllas, La mayeria de estos companentes organicos pete rnecenauna de cuatro dase de moléeulas: carbonidratoslpidos protlnss Yds nucleicos. Las proteinas los dcidon nuleicasy In mayoria de os ‘atbohidrstos (poistiridos) son macromeléculs formadas por Ia sin (olimerizacion) de clentos 0 miles de precursores de bajo peso molecular aminodeidos, nuclestidos o azdcares simples, espectivamente. Dichas ma- ‘romoléeulas constituyen entre el 8 y 90% del peso en seco de a mayeria {eas clus. Las lipids son el oto coasttayerte principal dels ells EL resto dela masa ccular se compane de una veriedad de peucrias mole culls, ncluyende los precursors macromolecule. La quimica basa de las elas puede asi entnderse en teminos dens exticturas yfanciones de cuato pos principales cde macromolsculos orgies. Carbohidratos Los carbohlarats incuyen alos azicaressimplesy aos plisactridos. tos azicaes simples, como la glucoa, sn los utrienes prinapaes de as cl 1s. Como se trata en el Capitulo 3, su degradacon proporcionan sol a fuente ce ene collar sino ol material intial pra la snst de oes com nents clues. Las polsaceidos son formas e reserva cde los azar Y ‘onsttuyen components estructural de la edule. Adem, ls polis lee y polimaros mis cortos de azdcaes action como marcadote sie una ‘arid de procesos de rconoctmlnto celulasiclayendo laadheson ete ‘las y el transporte de proteins los destin ntereulares apropindos [estructura de os atiares simples (monoscsrdos) ms representa va aparece en la Figura 22. La formula basics de estas molécas es (CHO), a pur de a cual procedeol nombre decatbohidrata (C— scarbo> Y H,0 ~ shidratos). Hania de seis tomos de enrbono (n= 6), la glucons, (C,H,.0) es especialmente important en Tas clas, ya qe proporciona Ia principal fuente de energi cellar Otros atiares simples tienen ene tes Y sete dtomos ce earbono,slendo los azdcares d tes y cinco casbons os mds comunes. Los azicares que continen cinco ms somes de carbon pueden ciclarse para formar estruturas anulares que constituyen las for nas predominantes de estas moléulas dentro delas culos Coma lle jen la Figura 22, los azGcares ciclados exist en dos formas altemativas Ilamadas co fi dependiendo de la configuraciér del earbono {Los monosaciridos pueden unlise entre sf mediante reacciones de dosh tratacisa, donde se extrae H,0 y se unen los azecores atedionte un enlace ‘slicosidico o glucosidico entre dos de sus stomos de earbono (Fig 23.51 sto se unen unos pocos aztcares el polimero rsltante xe denomina oll= ‘osacirido. ise implcan un uimeroelevado (ents o miles) de aztcares, Jos polimeresresultantes son macromoléclisclerominadas plisscsrdos, {as dos polisacridas communes —glucdgeno y alsin son I formas ste depésito de crbohidratosen las clulas de animales y plantas respective4s Tosss (E03) bon ® 0 Composicién de las células FIGURA 22 Estructura des axicares simples. Se Iosean es atearessmelea a opreneiatvos con rs, ‘neo y ses somos do carboro toa, pntosesy osu etpectvarengyLogarizre’ concn Some os carborepuodon class para fo alos ‘Sistn an ds lente atrativasfamacas 2 By ‘ependlendo es contgrason clean —— — od we ‘mente. Tantoel luego como el almidén estén compu ‘Os completamente de meléculas de glaccna en I config sacién a (Fig 2. Fl enlace principal se establece entre el trbono I dena glucnsa y el eatbono ¢de un segusda jlucoss. dems, tanto el glucdgeno como una forma de Slmidén (amilopectina} contienen enlaces ocasionales 1-6), en los que el carbone T de una glucosa se neal faxbono 5 de uns segunda glacons, Como seve en a Fig 1224, estos enlaces conllevan ala formacin de amis ‘ones que mesltan dela unin de dos cadenas indepen: dienes de enlaces o(l-> 4). Estas ramificaciones estan presents en el glucdgeno y la amulopectina, aunque otra forma de amide (amilosa) es una moléeula sin amis [De este modo, las estructuras del glug y del ali- <6 som similares bisicamente como fo ss fanaa ‘onarglucosa La celulona, en contrast, ene una fancion bien definida como principal componente extctural de a pared de las ollas de las plants. Quiz sorprendentemen- te portant a cellos tasbn se componeenteramente ce moléculas de glucesa. Las resus de plucos dea ceelona, ‘embargo, preenfar ra configuracén en ver dea Ia culosa es un poisctrdo no ramifcada (véase Fig. 2, La “unin de oe esos deglucosa por medio deena (I> {en gar de e(I-r) hace que la elulsa forme largas co leas linens que se empaquetan una junto aoa para ae 4 4 FIGURA2:3 Formacién de un enlace slcosieo. ‘os acer ple oun dirt una earion 4s doanaretacon una reaoson ena quo ao exe Sova. Er clojonplotustado, dos molcues do Sjucocs un conan sts nen mediate Un frlaceenetos axteancey 4 gue pra ree rombredeelaceqheosdeo alt)Seccién | + Introduccion 46 rapactog in) ‘cucsgene ‘con (arlopectna) tebe ‘recatan orator races {9}, que avon come patos So ‘Sigs lune dos coders Indopondontos 1 ‘mar fbr con gra fuerza mecca, E!homslogo del cellos en los anima {es esa quitng un polisciido de residuos dephacosa modifica unidos ‘or enlaces forma ls exec deci y enon “Adem de sss papel ene lmacenamiento de energin y en I etruc- tura cella, los oligoracidos y los poisasridos som importantes en una ‘ariedad de process de seilizacia celular. Por ejemplo, los oligosacr- ‘dos se encuentran frecuentementeligedos a protenas, donde fancionan ‘como marcadores para cirgir ne proteinas a lasuperfcie cellar o para i ‘orporarla a dstntas organelas aubesulares Lov ollgosacridos y ls po- lisaesrides tombign funcionan como marcaderes en la superficie cellar, dlesempenanda importantes papeles en el recenocimlento eluar y en as Interacelones cate células en os teas de los organisms prielulares Lipidos {os lipidos desempenan tos funciones bicasen las clus. Primero, pro porcianan una importante fuente de energi. Después, de granimportancs| ‘nla biologi ellos ipids son el componente principal dela membra- ‘ascelulzes.¥ por tilima, los lipides deserporan importantes papeles ena sefalizacin calla, bien como hormonaseserides (pesto te ‘osterona) 0 come mensaeros molecuazes que tasladan sfales desde los _sceptores dela supertice celular hasta dianas dentro dela oul, {slips mas simples son les dcidos grasa, consstntes en Targa co- rneipaes moléeulas dei Kerman dela cul El écido desoximrbonuceice (ADN) desempefia in papel unio como material genetico, queen las lls eucariotas se encuen- fraten el milo, Distintos pos de icido rbonucleico (ARN) paricipan en Alstintas actividades celuares Fl ARNetensa ero (ARNm) transpora in formacign desde el ADN a los vibosomas, donde sieve cma molde para la nei de protenas. Otros dos tipos de ARN (ARN ribosémico y ARN de ttansferencia estan iaplicados en la sitesis de proteinas. Adem otras formas de ARN stn implicadas en la mgulacdn de la expres gna y ‘en el procesamiento y transporte tanto del ARN como de proeinas. Ade ms de actuar como ina molecula informativael ARN tambien es capaz de Catalizar diversas reaccones quimics. En las elas actuales, estas inci yen reacionesimplicadas tanto en la sntesispoteica como en el proces mento del ARN, ELADN y el ARN son polimeros de nucletidos, que consisten en bases de purina y pirimidina lgadas a azsicaesfostoilados (ig, 210, EI ADN ‘sein i ‘rine (6) Woes 5 Nackie51 Composicién de las células FIOURA2.11 Pollmeregcén de los necletides. Los cides sun Iredante enaces foster ene lor grupos oslo 36 externa Se Una cadena co nclatites termina anu gpa falta, yelexeeno 3 finlza en contene dos purinas(adenina y guanina)y dos primidinas(cltosina yt nina) Adenina, guanina y eitesina también estsn peesentes en el ARN, pero! ARN contiene urailoen lugar de tina, Las bases estin igadas 3 {Eicazes (2-desoxirsibosa en el ADNoribosa en el ARN} para format ns Cfedsidos. Las nucledtidos ademas contienen uno o ms grupos fost fi fos alcarbono 5 de los azcars dels mcecsidos La poimerzacin de nucletidos para formar dcidos aucleicos implica fa formacion de enlaces fosfodiéster entree forfato de un nacedtida y el Iidroailo de otto (Fig. 21). Los oligonacledtidos son pequefios plimerse _quecontienen slo unos pocos nuclestdas; los polinsicletidos mayores {que componen el ARN y ADN celular pueden contener mies omillnes de rucledtidosrespectvamente. Es importante seRalar que una cadena polini= ‘eotidiea ene un sentido, con un extreme de la cadena terminando enn grupo 8 fosfato y el ou en un grupo. hidrosilo. Los polinucledtides Sempre sesintetizan en direceidn 5 a3 atadigndose un wscletid libre sl grupo 3 OH del cadena en formacin, Por convencién Ia secuencia de bases ene! ADN o ARN tambidn se eseribeen la dccciin 543 [La informacion del ADN y del ARN se tansmite por el orden dels ba- ses en Ia cadena polinucleotidics, LADN es tna molécla de doblehebra {que consste en dos cadanas de polincledtidos qu discrren en dinecio- res opuesas (vase Cap. 4), Las bases se encuentran en la parte intema de [i molecu, ls dos cadenas etn snidos por enlaces de higeno ents pres de bases complementarias. La guanina se aparea on la tosinay Ia $denina lo hace con la ina (Fig 2.12) La princtpalconsecuencia de ete ‘emparejamiento complementaria es que una hebra de ADN (o de ARN) puede actuar como molde para dirigit la sntesis de wna cadena comple: Imentaia, Los dcidos nuclicos son por tanto excepeionalmentecapaces de slrigir so propia autereplicacicn,permitindoes funeionar com las ml ‘les de ifort adaneieles de eee afore por tacla por el ADN y el ARN dri la sntesis de proteinas especifcas, Que contolan la mayoria dela actividad celular Los aucestidos no slo son importantes como los lailos de construc- ‘i de los dcdsnucleicos; tambien desempetan papelesvitaes en ofos process cellares. Quiz al ejemplo mas destacado evel adenosin 5 trios: fate (ATP), que es la prindipal forma se energiaqutmica dentro dels lis, Orros nuclestides fandonsn de manera similar como transportadores ddeenergiao de grupos quimicos reactivs en una gean vatieda! de reaeio es metabalicas. Adem, alguns nucletidos (pe), AMP ci) son t= Pottantes moléculas de sealizaion dentro de las fla (wéae Cap, 13). Heo? a. Hi,” FIGURA212 Emparsmiento ‘complomentao entre bases det ‘eige muclico. Latormacon de Snscos de crdgena err bases on Fabrasopucsas ce ADN cone Spawanenio sspeeieo de ganna (Gheom cosine} de scan A) ‘omintimna Pe on WeSecci6én | + Introduccién 52 canara Proteinas ‘Mientras que ls cidos nulolostransportan a informacii gendtiea de a ‘ula, ln exponeabilided Bfsica de las proteinases cuta as tareas di mee [J &. BBE cvs gitar por eva informacion. Las proteins son ls mds varadas de todas las I ‘hacromolsculas y cada clulaConticne varios miles de protinasdiferen- tes, que rwalizan una amplia gama de funcians. Ls papeles de las pote FlGURA 213 Estructura de tos us ncluyen servir como companentes estructarales de ellasy tds, ac fminosoidoe. Ceca amncacio _tuarenel taneporte yalmacenamiento de pecueias moléculs (pe en el arasienn toma decaoor transported oxen por la hemogiobing),tansmitir informacion ence Genvaleleatero tgado aun jus. homnonas protic,» propacorar nt defen fete aa n= cemoewaeniatgua. sere stem aneyone feces (pc anticuerpes). La propiedad funcamental de as proteinas, sin ‘acana ern ospecticn embargo, Su eapacdad pare actuar como enzimas, que como se tata en {GonominadeF}-ApHs0l6g¢0, Ia siguiente secon caalizan csi todas las eociones quien en os te fantoel gupo carbon como! mas bogies, De este modo, las protetnas digenvirualmente todas las {cvidades dela ceua Laimportancn entra de spots ena qu ‘bilge viene deteminad por su nob, derivado dela plas ge ‘pes que sien de pier rango> is protinasson polinert de 20 aminosidos dstintos, Ca aminos- cido corti en un some decarbono (latad) eons oid un gu Sasa pocampal (CO0+ un grupo aming (NE, un aomo de hdrogenoy ow ania oe) raat cats 21) Lp guile consi eles pots 0s | Cs elas cere cadena lefts deo anodes determinan os cmon pape de cada aminodcido ena etrctrayfuncen protec, Los sino: cinpotangcome elas pueden aprpare en ato apis caegoradependendo de is eerste ce | enya Oy 218, Oe gies tc = aternes to plaes que nteracconan con agua La lina fret ei ee Spo a ei ea eS sniaol 2 alpina valing, eucnaiclecina Genen cadena teres anoles uno seenctentan | rcatbonadas conpucsas por hala cate Smo de coon, Las cade slaps tan cm | pantera do ext srnos ton elas y deh qe endan oc Tease enel interior de ls potas, donde noe encuenzan en contac con ‘agua Del mismo moda a ferdaarna ye titan Heron cadens ate {ai muy hdres con anil sromation La prin tambien tore sa Cadena lateral idrctbonada pero esta Onc cya caea tral etn dal ntzogen del grupo amino adem deslarbon formando una e> trata clin Las dons tata de dow anasto cin y mein { Lasprinas mumston ra) fu contenen somos de au La metionina Bsn Hida, pero vera eb Aguas ‘iin no loan grad 4s grupo slo (3). Camo comentare ‘rotsinas poco frecuentes ‘mos posterionment, el grupo sulthidilo de Ia cstefna es may importante en {nestuctua protic, porque pueden formarseenlaces ura ene as 1 Prosnas de canto qe son | dena Itrals de disor ess deci frploaesporinspecsbes "| “Cinco amioatldos enn cdenas aera sin caga per plac. tos parvedhrte ales siperices | incuyen la seria la eonina y la osina (qu enen grup dria ex Eumergdas bap fogea ows cadenas laterals) ax como la aparragi In gltaina (ue ene Gaentfeos eset | grupos amid (O=C~NHt) pole). Debid «qu as cadena tera de Ceearotar eas proteus para | Scr aminoscidos puede ema enlacs degen eo el aga, eon sue tal eno Smads son uafobsytenden oars em I pars etems de feganertnc rerininte | lat proteins tnicorosves Tis eminocidos sna nginnn histidine ene cadens laterals con we Lewetadelnesiadelacibe | gripes sens cargadoe Laisa in arin on aminodidos my bt Doras x ertremadamente | £05-y us cadenas laterals estén cargadas pesitivamente dentro de la ee Tiger fexble perocas tan | 1a Portanto, son muy hidrofilosy se encuentan en contacto con el agua en fete como Kevlar queso” | 1a superficie de las proteinas. La histidina pad estar sin carga o cargada cmplea para faba ios posiivamentea pH fisioligico asf que con lecwencia desempera un papel chhaecoe antes. Siva en reaccones enzimsticas que impican et ntercambo de ions hi Adxdgeno, como se wataen ol Capitulo 3,53 Composicién de las células pe Cian (e)C_Narna Mo _Fonslara Phe) Tiga TW a 8 #8 & co si Halo coo" Hyhi—¢ uli-G-c00" Hah secon Wai-e-c00- “$= C00" Trem Aaa A ota cna nie te i-fcoe——wii-f-c00- i f Ui Ach A He fesoaneio tin) hat inca ie FIGURA 214 Aminodcidos. Se Indica neat ee una la pra eada amnotrso, Los For timo, dos aminoscds, el dco aspctico ye ido glutimico, tie. gminoacléce se apt eh Guero ‘en cadens laterals dedas que terminanen grupos cabo. Estos ami anne ego cepa de ‘dcidos etn cargados negatvamente dents dela celulay por tantoa. fs prpedede Goo coerat ‘mero se denomtan aspera Y lutamao, Como los minsos bac ae Po pour, ores, as ‘cos, estos aminodcidos son muy hidrofilos y habitualmente se localizan en ¥ 8°} Invupesie de as protean, [Lo aminodeidos estan uinidos por enlaces pepiicos entre el grupo a amino de un amined ye grupo carbon del siguiente (rig 205) Los Polipéptids son endenas incales de minoscides,Babitualimente de Cee tose miles de aminodcdos de lngitud. Cada cena polipeptigica tiene dos extremes ditinven, uno ferminand en un grpo camino extreme amino, oN terminal ye to en un grupo a carbo exten cao ‘°C terminal Los polipsptidonesineizan dene eleatemo ainoal ear= ‘Rotura de reduecin de los puentes dlsulturo on la rbonucleasa| Michael Se, Fredock H. Wie Gran B.Antasen ator Insies oF Heath, Bethesda, MD ‘Soleo, Vola 125, 1087, pigs 681-82 Conterto Lae prtahas fanciers son fesuchesterie mac mais ‘amples alas cadens ais do ‘Samos. Lafrtacten oo eines ‘Suna odo oes potas eave ‘&peminto de cadens Polpepiscas on corigraconee {idmaraonalsprocos. ste ‘Senden spots as ‘aconas plpptiias platen frogunse ences con eletn ala ‘evans el extra unlon Ernprat posi deci eas Inuiles contgurasores poses que dan ser asotades peur Pokeuped, yc sa ntreza de Feivomaclon que oie Dlegomonte ds potines? ze clascos exermarioe seals por Cvatn Anan sus ohboraderes poooreenen| ‘tiand ls rc bonus Prien yas calabro nace prion FIQURA 215 Formacién de un enlace peptislea El fupo aro fisunaminoseca sa > ‘ino. 010 capuces de demos quotas rolrasdesratalzads eden epg espontneamete ‘oeptnd ora eankguseln ta, Portman reacé ecu fara expecticar ia conguracon ‘srerional onocta go ura pocpa ‘contend en su seouorca prima arate. Una se 2 (sos ocporreros loo a ainean& IGomeusen de qa estctre mening nave o uraprotra se fareapende as canfomacen termosniicomenta masa, ‘itera prs eraones ne Susemnodcces constinertes. Ls hseracioes onan cue ondleror aa formaacen de este flee cu ten comuricades facto ariel de 857 pr Cestin ‘rfneon Micha Slay Pred Whi Experimantos ‘Aringen er bonuceesa bovna, tna pequete protein de 28 a amino ua cones custo fonaces cna (8) ertelas honran stn de estos ‘Senn nacido ennai doa ‘oonacisa poder deena par sualéed pare ceada AP 8 ucts, propordorandoura bolus sri cea uncon dla prota tals Ess acid (raat co pra comletanante ‘lara ebonaseac ss eomet \atamitos qu ateraan ov oiaces no corres. ts enlcos de Ficrgeny 0 dessblanlos ences Salon ecu agro Suelo GH La olor ‘eanatustaadapoecia a eta on “Sl ite y Aten observe, flag enn aed ecco ‘oxo termina, a secuencia de ainodcidos en un polipéptido se ecribe (orconvencin) en el mismo orden. Ls eavateritica defnitora de las protenat esque son olipéptidos con secaencia de aminosciosespesfics. En 1953, Frederick Sanger fe e pr ‘mer en determinar Ia vecuencia completa de aminoseidos de wna proteina, Tr hormona inslin. Se eneanté quel insula estaba costituida por dos cdenas polipeptigies nidas por enlaces diulfuro entre residuos de cis tein (Fig 210), Loque cra mds importante, elexperimento de Sanger reve- 1 que cada protena consist en una secuenca espetfica de amtnoscidos. [Actualmente Ins secuencis protekas ce suelex deduce a partir de secuen- ‘Gas de ARN, y se han determinado las secuencias amianacideas de mis ‘4e 100000 proteins, Cada una consiste en unasecuencia Unica deaminose- tds, determinada por el orden de los nuceiosen un gen (véase Cap.) La secuencin de aminndcidos de una prot e dla et primer elemento dos estructura, Enver de ser cadenas prolangades de aminodcidos, as protenas adoptan configuracionestsdimensionalescaracteristcas que son spa su func Estas configdracones tedimensionates de las55 Composicién de las células SEES 109 ‘Resa Se oe resitado do | oe rewutac conalonstoligeae—. La [St ouratcr eowrrenrinin Sb omodarica st ace ee erent Gora prs races bs Sims pesccseopas de docks ATino4ctos constutves ages Ttonontn Lasctwaderorsen”” coiguacin tmersorl elas onoporattads naciaasscris BRAS eat eterna mone ‘irectarente por su secumneia de Srinotron Paso qu ne \cprucondosen ABN mpectoa ls ‘inna noses dun dose cnlcecels sided ct, ncaa quase _aetcade mneiiscedeun go = habinretgase saicowguacen Gonads ornrionneceaa ‘inate aun} Dobos euro arate etuca ‘Stasapeeoneningin oe {Ritversona does posto potaca empora car odo fire el tab de roan of itm part soaps base ermeanain 08 Fopunits pote aredo pca Gogoi pce conporeare ‘capes Sstarcarenseniasecnnca pean dows prosmso conan Bria de ampesctos dea cadene San un rea ga etgnen ai Rs Soles Speman peace | parece leptons ‘sored comp, odne ‘Shoumtemomddensnque Impacto ‘onan iemaces deere fersloameadsa papers Expefnetceposaiows dethiounis Sahara hareie ina Felogucayteomene iss crnas condsonastap a nla frou crectrrrt eu soar {Eutr. Enetoscperrrion sn reonae rengtsaade tampa ons se | ‘canoe agers cena, ecupetba comput en eee Yaewraimchedacencmcss coruauarsiayssaawiny boule cu pase Ierpertva noire enantanpsn suiaicaesabicencolasbpsese. tostumas cscs eens ‘Soles onpreetca a0, Exe termadnaicnGaipgarasto. pascal senrsasincaercees pooumerioteeanondicende powcr eomeoreeanuransiva itunes peas Cop. 8 Fesgumosutdioy ais reomacin Mamersral tra pots Peomieriepomeocormesen | derek Sao Duarisete”coneapondes eral Sresamossundsatocoraslenta | frocessnonemaeetpesauomesnamicanenemiseaabeen ymesDetgea, | roteinas some resultado de as interaciones entre ss aminoscidos const- fuyentes, asf que la forma de las proteinas viene determinada por su se- ‘enc de aminoscidon sto hue demostrado por primera vez por ls expe rimentos deChnstian Antinsen en os que alter lnestactoa tridimensional Ae as proteinas mediante tratamientos tales como cl calentamiento, que tompen ls enlaces no covalentes un proceso denominaco desnatralza {Hou 210 Secamcia deamination, {insuva contene dos eateraspepepisias una de 2 y ‘ira do 0 arinodcisea read sein sis Srovatwras do uraict) La cadena rs de tosSeccién I + Introduce FlOURA217 Desnaturateaeion ‘yropiagemiantoprtalc. Lionuctesa ARN os ona protana do 124 sina Ilene pr naraos) La eosin males ota pogada on su ‘omiguracen nat, gue centane ‘lato enlaces sure fences Samo alos prcados 0 ‘epresantan residues de tera, FIOURA210 etuctura {rsdimensional dela mioglobing. La regina os una rotena cs 108 [minogcoe qu ets inpleada on tape de exigeno. Le cadens Poipeptcica ast plegada adc {atgrp hemo ae sve como ger {fo erace de oxgeno catamaran ‘ann get taco ed 56 [is aves sansa wee | Suscoageres mina = cién Fig. 217) Despocs dela incubacin en smiiones mss favorabes, dlichasproeinasdesnstraliadas con facut epesan espontinesmet tea nus configutaconesnativasfdcando que esos configuraciones etn dleterminados drctaments por ia scence aminosido a estractrs need pote se ania con may ese cia poreistalograia de rayon Xana enc cde lta esoicn gue pede de termina edenamiento ce tomo indvidls der der mole Se lrg unkar de rayorX locales deta prota qu se does anally pn de ryos Xue pan a aves del cristal proteins se deta en ana Pll de rayon XA mada lou ayes X can cota ral oon de eradasen pttnes crates detrinades pr el ordnsieno dean $emos en le moliuls, Lestrade la moles puede portant se dee ‘ida prt del pain ders X ispersads (pain de diac Ti 55 jot Ken oe el pita en etomia a estacor tdi- ‘mensional de una proeia, la miogiobine —ana protena celatvamente Simple de 153 sminoscidos (Fig 28), Dead entonens neha determin ols estructura timensional de ies de petenas. La mayor, om a ‘globin, sn profenaegldbulaes con casas polpepilea pegadae {nestractures compacts, snque algunas com ar proteina extrtrsles els tds conectivs) son argas moléals fibres, EL avis dela os tractrs dimensional de estas proteinases vaio peincipios bs SScos qe gobieran el plegamienta protic, aunque I eetrctura pote {estan comple qi prec next ridmensional dena proteina ‘lrectamente a parti des secuenci de aminoscdoseximponbe [etrctura protic generalmente se dace en conto nivel La es trac prmare de ws proteinase scien de sminodidos dou cav ena plipeptigia, La esrcture secundaris el ordenamieno regular do ‘minaidos dentro de reioneslcalizadas el polipepide, Dos pes de tstrucurnsecundavs, que fueron propucsto or primera ver por Linus Pauling Robert Corey en 1951, son patculaments comune alice ay Inja fh Ambneextrctures secundaria se ranenen por enlaces de plo, enol que una molécula sobre la que aetda un enzima (denominada Sus-Seccién I + Introduccién 74 | Las anzinas son unos catalzedore nrebles, ganas ‘erzimas son capaces de inerementarlatasa de una reacein tanto como 10" veces ‘en comparacén eon una reaccibn Sin eats, do modo que un proceso que normaimento {ardarablonos do aos puede "tener lugar en menos 69 un | sogundo. Cstalizadores y activacion Se ls onergia. onaeacclin ‘ini wa era drnyels ‘ard do orriaracesra ara alec estado de ‘ore, ported ae ‘Sreocn ngage une voesdad aod, ren ae 35a —— FIGURA 1 Resestones catalizadas Yyno extalradas. Lavaccion hse Pes caneriin ample de un ‘avele 8 @un producleP. Debio 8 ‘ue cesta fel ae crag de Poo toner que ede, ls reaesionprosre- Sage ard a doveena. Pare quota ‘action tong og sn smoarg, S ‘Seb pasar primera por unos do ‘tamiian ce major anergi. La regi eau pra eanzar ete taco de vanscio fa sega de ‘vac represmts urn rere Alesaroto dele reaccon y porto tltrmna nvetolded a acu rcctn avarea St embargo, 09 [resncla aon canlendr una rama, a nog de acthacin ‘emmy yo eacsen se prosuce a (ine rad sokrad ‘rato [Sse converte en un product (P) com resultado dela vaccién. En assencia de enzima, a reacion puede escrbie como sigue: ar El equllibrio quimleo entse Sy # depend dela eyes de la termoding rica (como se trata ms adelante en la sigierte seein de este eaptul) y -serepreenta como la razn de as veloeidadesde las reaciones directa versa (542 y PS, respectivamente).En presencia de la enzima apropisda, In conversion de Sa? se acer, pero el equiv ene 5 y Pno se alter, Por lo tanto, la ensima debestaacclerar Ios reaciones directa e inverse ‘gualment, La venccén pu eccribrse com sigue" ‘Obsérvese que Ia ensima (E) nose altera porlaresein, asf que el equ ‘rio quimico se mantene inaltevado, determinado tan slo por las propie- dladestermodinémicas de Sy ?. El efecto de In enzima en no react com esta se lusta mejor por los catnbios energtios que deben ocurre durante fa conversion de S a P (fig, 3.1) EL quire de a reacci viene delerminado por el estado ener étco final de Sy que no eat afecados por la cass enzimaic. Fara ‘que la eaccion enzimatica pueda produce, sin embargo, el sustato debe “Sonvertirse primero aun estado ce mayor ners, denominado eslado de transicion. La energia necesaria para alcanzar el estado de transicin (la ‘energia de activacion) constituye una barrera para el desarrollo de la reae ‘on imitando la velocidad de Ia reaecin. Las enalmas(yottoseatalizado- +) acian reduciendo Ia encrgla de acivacdn, inrementando de este ‘mode Ia velocidad dela reseci, El ineremerto de velocidad es el msi, ‘ano ela drecion directa como en la inven, ya que ambas deben pasar porel mismo estado de warsicion, {La actividad catalitiea de ls encima imglica su unig alos sustatos pare forma sn complejo enzia-sustrato (25). El sustzato se une @ una re [ion espectics de a enzima, denominada lugar activo, Mientras est ligado Sl lsgar active strato se converte en el producte dela reaceén, que et lonces ve separa elo enim, La reaclon citalizeda por ensimas pucde ‘por tanto exeibirse como sigue: Stee a ‘Obsérvese que E aparece inalterada en ambaslados de la ceuscin, asf que < exiioo no se feta Sin embargo, a enzma proporciona una super ‘este la que las eacclones que convierten Sen pueden tener hig mss fciimente, Ero e el resultado de las teraciones entre la enalma y sus teato que disminayen Ta energia de activacin yfavorecen la formacian del cetada detransicion. ‘Mecanismos de cataliss enzimatica La uni de sustrato al sii activo de una enzima es una interaccién muy copecfica Los lugares actives on greta o hondiuras en ln superficie de tana enzima,habitoalmente composts de arsinoseidos de diferentes par ‘es de la cadena poipeptidca que se aproxinan con le estructura trcaria {ea proteina plegada: Los sustratos sc gan iniialmente al higar acto ‘mediante iteraciones no covalent, incluyendo enlaces de idrgeno err laces nic inferacciones hides, Una rez que el sustrato ets uid al lugar active de una enzima, miltipies mecarismos pueden aclerar st fonversin en el product dela race, ‘Aunque este sencillo ejemplo tratado en lt seccin anterior implicaba ‘una nica molécula de rubra, la mayorta ce las reaclones blogumicas Implicaninteracionesentee dos o ms sustas diferentes. Por ejemplo, ia5 Metabolismo celular Componente formacin de un enlace peptidico implica la union de dos aminodcidos. Para reacciones come est, la unin de dos 0 mas sustratos al lugar activo ena poscion yorientacin adecuada acolra la reaecin (Fig, 3.2) La en ima proparciona un molde sobre el que los reacantes e aproximan y se Sreniaa coreclamente para favoree a formacisn del estado de transicin fenel gue interactian, Las encima también accleran ls reaciones ltrand la conforma de su sustatos para aerate al del estado de tans, El modelo mas ene Tce interaccion enzima-sustrato es el modelo de a lave y lan ceradura, en el que el sustratoencaj perectamene en el sto activo Fig, 338), En m= ‘hes casos, sn embargo, las contiguraciones tanto del enzima cm dels rato son modifadas por la unign del sustrato —un proceso deneminado jst indcido (Fig. 38) En entos cass la conformacin del nistrato se thera de tal forma que se asemej mas ala del estado de transi, El ste plucido por esta distosion en el susrato puede faciitar ain mas su con- ‘erin hasta aleanzarc estado de tansicion deen enlaces erases ‘Adem el estado de wansicin so stabliza por su estecha unica 2 lnerzima,disminyenda de este modo la energia de activacén _@ 3 FIGURA.3.2 Catilisisensimition de in recelén entre dos sustston {Bore propercona un melee sobre uo reacties co Sprounanen pos y orentscion ‘uae pra raccione’ eo requerida w sues “Aparte de reunirmaitiplessustrats ydistorsionat la confor smaai dels usta pata apresimaricn esta ce ancien muchas enzimas partipan directamente ete proceso caalio, En estos ass, as cadena ateralesespctias de aminodcidas en clsito active pueden seacionar cam el sustrato y format enlaces ‘on intermednrios dela eaccn, Las anid deidosy st ‘osestin frecuentemente implicados en estos mecanismes ctal- ‘os como se demuesita en la siguiente diseusion sobre In qui tipsins como un gemplo de catlisisenzimatcn. La guimotripsinn es miembro de una familia de enzinas aes in protasas) que digieten las proteins catalizando la hide de ® Ios enlaces peptiices. La reacen puede ecabie como sigue ee Pena + HO + Péptido, + Pepi, Peto ‘Los diferentes miembros dela familia dela serin prteasas Aincluyend quimotpsina, tripsina,elastsay tsombin) tne | ‘especfcidades de sustratocaractertics; rompen prefetente” agua Modelee dala nerocién mente enlaces peptidicos adyacentes a diferentes aminoscidos. (ena aco dal y or jmplo mentzasque a quimotspsia dipereenlacsadya>_eeeaa otto reaaperecanons ‘ent a aminadcios drfoon com eltptlanoy Infenala» _etelioactve de sara) Enel ros de ina Te tepsina digire enlaces Junto a aminodcidosUdsices, ata avd, unt dla diatroora ‘come la sina yl arginina. Tela ns serin protesa sin embar- ‘Br contomacine ano iver coe det ‘Stoo. ata deren aprosina a asta a 0, son similares en estructura y emplean el mismo mecanlsmo Sanlomueti del ete asia, Ae cts. Los sitios activor de estas enzimas contienen tes azabendo dees mado rescaln