Laboratorio de procesos qumicos N 01

PROCESOS QUMICOS
INDUSTRIALES
Laboratorio N 01

CATLISIS ENZIMTICA

INFORME

Integrantes:
Castaeda Chacn, Danny
Quispe Aylas, Sharon

Seccin: C11 4 B

Profesor: Hinostroza, Robert

Fecha de realizacin: 20 de febrero

Fecha de entrega: 06 de marzo

1
Laboratorio de procesos qumicos N 01

INDICE:

Resumen pg. 3
Objetivos pg.3
Diagrama de flujo. pg.3-6
Discusin de resultados pg. 6-8
Conclusiones pg.8
Cuestionario. pg.
Bibliografa pg.

2
Laboratorio de procesos qumicos N 01

RESUMEN:
En el presente trabajo desarrollaremos el anlisis cualitativo de enzimas y sus
aplicaciones, tomando como referencias sus propiedades catalizadoras en una
reaccin qumica, Adems cabe recalcar que otra de los anlisis que se realiza es el
reconocimiento de azucares reductoras, tomando como referencia los reactivos de
Fehling.
En nuestra primera experiencia compararemos la importancia de una enzima en
una reaccin de descomposicin (perxido de hidrogeno). Mientras que en la
segunda experiencia analizaremos detectaremos la aparicin de azucares
reductores mediante la solucin de Fehling. Mientras que la experiencia tres
analizaremos azucares en presencia de alcohol yodado. Mientras que en la
experiencia cuatro analizaremos la importancia de los catalizadores enzimticos
frente a una reaccin de azucares.

OBJETIVOS:

Describir y analizar la accin de una enzima como biocatalizador.

Argumentar acerca de las reacciones con catlisis enzimtica marcando
diferencias y semejanzas con las que no la tienen.
Relacionar la catlisis enzimtica con procesos industriales donde es
necesaria su aplicacin.

DIAGRAMA DE FLUJO:
Experiencia 1:

Vaso
Vaso de precipitado con 25precipitado con 75 ml
ml de perxido dede perxido de hidrgeno
hidrgeno + hgado

Comparar

3
Laboratorio de procesos qumicos N 01

Experiencia 2:

Almid
Glusos Sacaros
n a a

Aadir 1ml de Fehling A + 1ml de Fehling B

Experiencia 3:

1ml1 ml 1ml
Almid
Glusos Sacaros
n a a

Aadir 1ml Lugol

4
Laboratorio de procesos qumicos N 01

Experiencia 4.1:

Aadir 8 gotas 2ml

HCl Sacarosa

Bao mara 5

1ml de Fehling A
+ 1ml de Fehling
B

Bao mara 2

Experiencia 4.2:

37.5 ml de Almidn
3 gotas de HCl
Agitar
Ebullicin

15 1ml dede
1ml
la Aadir 2 gotas de
1ml de solucin Lugol
la
solucin

5
Laboratorio de procesos qumicos N 01

10
1ml de
la
solucin

Experiencia 4.3:

37.5 ml de Almidn
2 ml de saliva
Agitar
Calor 2

15 1ml de
5
Aadir 2 gotas de
1ml de 1ml de Lugol
la la
solucinsolucin

10
1ml de
la
solucin

6
Laboratorio de procesos qumicos N 01

DISCUCIN DE RESULTADOS:
Experiencia 1: Accin cataltica de una enzima
H2O2(ac) H2O(l) + O2(g)

En este primer experimento se observ que en el primer vaso el perxido de

hidrogeno se descompone lentamente dando como productos oxgeno y agua. Sin
embargo, en el segundo vaso la descomposicin fue rpida debido a que se
observ instantneamente una gran cantidad de espuma, pues en este caso
usamos un catalizador biolgico (catalasa) para acelerar la reaccin.

Experiencia 2: Prueba de Fehling

Formac
Soluci i Coloraci
N Tubo n de
n n
de Precipi
Glucosa ta do Rojo
1 S
Ladrillo
Azul
Sacaros
2 No oscuro
a
(soluci
Azul
3 Almidn No oscuro
(emulsi

El ensayo con el licor de Fehling se fundamenta en el poder reductor del

grupo carbonilo. ste se oxida a un cido carboxlico y reduce la sal de
cobre(II) en medio alcalino a xido de cobre (I), que forma un precipitado
de color rojo.
De acuerdo a la estructura de glucosa y la sacarosa, el primero tiene
grupo carbonilo (-CHO) y el segundo no. Por lo tanto, la glucosa es un
azcar reductor debido a la presencia del grupo carbonilo en su
estructura, mientras que la sacarosa es un azcar no reductor.

Por otro lado, el almidn es una mezcla de dos tipos de polisacridos: la

amilosa y amilopectina. La amilosa es un polisacrido de tipo lineal, cuyas
unidades de glucosa estn unidas por enlaces -1.4. La amilopectina es
un polmero de glucosa muy ramificado. Al tratarse de una mezcla de
polisacridos, carece de grupo carbonilo, por lo que no ser un azcar
reductor.

7
Laboratorio de procesos qumicos N 01

Experiencia 3: Prueba de Lugol

Coloracin
N Tubo Solucin al
de agreg
Glucosa ar
1 -
Sacarosa
2 -

3 Almidn Negro
azulado

La prueba del yodo se utiliza para descubrir pequeas cantidades de almidn en

una solucin. El almidn produce un color negro azulado oscuro, cuando se mezcla
con el reactivo de Lugol. Esta prueba se puede utilizar para observar la hidrlisis del
almidn, ya que el color cambia lentamente a medida que el almidn se degrada y
se convierte en nuevos productos de cadenas ms cortas.
Por lo tanto, la prueba dio positiva solo en el tubo N 3, debido a que se contena la
solucin de almidn, generndose un color azul intenso, mientras que en los otros
tubos de ensayo (que se tenan monosacridos y disacridos) no hubo cambio
alguno.
La aparicin del color azul intenso, manifiesta la formacin de un complejo de
almidn con yodo.

Experiencia 4: Hidrlisis cida de un azcar no reductor

La sacarosa es un carbohidrato de tipo disacrido que est compuesta

por una unidad de glucosa y fructosa. El enlace ocurre entre el grupo
aldehdo de la glucosa y el grupo cetona de la fructosa.
Por lo tanto, el grupo aldehdo de la glucosa como el grupo cetona de la
fructosa estn relacionados en el enlace, la sacarosa no tiene grupo
aldehdo, ni grupo cetona, potencialmente libres, y no es un azcar
reductor. Esta es la razn por la cual da negativo a la Prueba de Fehling.
Sin embargo, la sacarosa puede ser hidrolizada por cidos o por
enzimas, como en este caso que se us cido clorhdrico. Esta
hidrlisis de sacarosa produce una mezcla de fructosa y glucosa,
llamada azcar invertida.

Experiencia 5: Catlisis mediante cidos y enzimas

8
Laboratorio de procesos qumicos N 01

Amilasa (Saliva)

La hidrlisis parcial del almidn se puede lograr mediante enzimas y

cidos, por lo que en la prueba de Lugol, se debi formar un color
rojizo debido a la presencia de dextrinas, producto de la hidrlisis.

CONCLUSIONES:

CUESTIONARIO:
1. Qu es una enzima?
Una enzima es una protena que se combina con uno o ms compuestos de forma
que reaccionan especficamente a mucha mayor velocidad que lo haran sin el
enzima. Las enzimas son como las dems protenas, tienen estructura primaria y se
pliegan en una conformacin particular de manera que sus grupos reactivos estn
dispuestos del modo apropiado para dar al conjunto actividad biolgica. Los grupos
reactivos de una enzima tiene dos misiones. Una es unir los compuestos
particulares en proximidad al sito donde tiene lugar la catlisis y la otra funcin es
realizar el mecanismo cataltico. [1]

2. Explique las teoras que explican la accin enzimtica.

El carcter protenico de las enzimas lleva a pensar en una interaccin entre el
sustrato y una porcin de la superficie de la protena enzimtica (en centro activo)
para explicar la accin enzimtica de las enzimas. Por otra parte, el estudio cintico
de las reacciones enzimticas nos muestra que la accin procede a travs de la
formacin de un complejo enzima-substrato; para una reaccin monosubstrato.

E es la enzima, S el substrato, P el producto de la reaccin y ES el complejo

enzima-substrato.

La suposicin de que la reaccin tiene lugar en la superficie de la molcula de

enzima da un carcter de catlisis heterognea a la accin enzimtica, de ah que
su velocidad pueda expresarse por una relacin anloga a la isoterma de
adsorcin de Langmuir.
Por otra parte, la especificidad de las reacciones enzimticas nos indica que la
interaccin enzima-substrato esta medida a travs de una disposicin altamente
precisa de los grupos qumicos de la enzima, de forma que solo pueden entrar al
centro activo las molculas que encajen perfectamente en los mismos. De esta
forma, una pequea variacin en la estructura molecular del substrato podra

9
Laboratorio de procesos qumicos N 01

impedir su fijacin al centro activo, estas ideas fueron adelantas por Emil Fischer en
1894, cuando propuso su conocida analoga de la llave y la cerradura para explicar
la especificidad enzimtica; una enzima es especifica hacia su substrato de la
misma forma que una cerradura solo puede ser abierta por una llave determinada.
Esta idea se ha mantenido bsicamente inalterada durante dcadas, y ha dado
lugar a lo que podramos llamar el modelo de interaccin estereoqumica que
explica no solo la accin enzimtica, sino muchos otros fenmenos biolgicos que
tienen lugar a travs de la interaccin de una protena y un ligando (por ejemplo, la
accin hormonal y el efecto de frmacos).
A pesar de su general aceptacin, el modelo de la llave y la cerradura no explica
algunos fenmenos en Enzimologa. Para eliminar estos inconvenientes Koshland
en 1959 amplio la hiptesis de la llave y cerradura para dar origen a la teora de
ajuste inducido, segn la cual, la fijacin del substrato al centro activo altera la
configuracin de la enzima de modo que acerca los grupos encargados de su
transformacin a sus objetivos especifico. Este punto de vista est mas de acuerdo
con lo que hoy sabemos de la estructura proteica, que imaginamos mucho ms
flexible que lo que supona; y as mismo encaja con el modo de accin de los
llamados efectores- alostricos. Esto no quiere decir que se haya abandonado la
idea de la llave-cerradura; de hecho, la accin de muchas enzimas se puede
explicar en esa lnea; el ajuste inducido no ha hecho sino ampliar su significado; en
un smil mecnico, podramos hablar de llaves y cerraduras flexibles para exponer
nuestro actual concepto de la accin enzimtica. La teora del ajuste inducido
conduce a un desarrollo ulterior sobre la accin enzimtica. Esta puede ser descrita
en trminos de estabilizacin del estado de transicin. El estado de transicin es
una especie qumica inestable, situada en un mximo de energa potencial, con una
configuracin tridimensional que no es ni la de los reactivos ni la de los productos,
sino una forma intermedia.[2]

10
Laboratorio N01 de procesos qumicos

Qu es una hidrlisis de un carbohidrato? Explique con una ecuacin

qumica.
La hidrlisis de un carbohidrato se exclusivamente en los disacridos y
polisacridos, ya que el objetivo es separar en molculas individuales
(monosacridos).

3. La hidrlisis de un carbohidrato slo puede ser enzimtica o de qu

otra manera se puede lograr?
Puede observarse la hidrlisis enzimtica de una protena por la disminucin de la
reaccin de Biuret o por la formacin de grupos amnicos o por la aparicin de
sustancias positivas a la ninhidrina.

4. Enuncie la ecuacin de Michaellis- Menten y explique el significado de

la misma.
El carcter protenico de las enzimas lleva a pensar en una interaccin entre el
sustrato y una porcin de la superficie de la protena enzimtica (en centro activo)
para explicar la accin enzimtica de las enzimas. Por otra parte, el estudio cintico
de las reacciones enzimticas nos muestra que la accin procede a travs de la
formacin de un complejo enzima-substrato; para una reaccin monosubstrato.

E es la enzima, S el substrato, P el producto de la reaccin y ES el complejo

enzima-substrato.
La suposicin de que la reaccin tiene lugar en la superficie de la molcula de
enzima da un carcter de catlisis heterognea a la accin enzimtica, de ah que
su velocidad pueda expresarse por una relacin anloga a la isoterma de
adsorcin de Langmuir. [2]

5. Indique ejemplos de la industria donde se explique la catlisis

enzimtica.
FERMENTACIN ALCOHOLICA.

11
Laboratorio N01 de procesos qumicos

El trabajo de Pasteur mostro que las fermentaciones son procesos vitales que
desempean una funcin de importancia fisiolgica fundamental para la vida
de muchas clulas. El desarrollo posterior de los conocimientos acerca de la
naturaleza de la fermentacin surgi como resultado de una observacin
accidental hecha por H.Buchner en 1987.Al intentar conservar un extracto de
levadura, preparado moliendo clulas de levadura con arena, Buchner aadi
una gran cantidad de azcar y quedo sorprendido al observar un
desprendimiento de dixido de carbono acompaado de formacin de alcohol.
Se haba descubierto as una preparacin enzimtica soluble, capaz de llevar
a cabo la fermentacin alcohlica.

La fermentacin alcohlica es un ejemplo conocido de los

procedimientos en que se efectan alteraciones enzimticas, tanto cuando se
agrega alguna enzima como cuando se aade algn microbio vivo (levadura).
Primero se calienta el grano amilceo para gelatinizar el almidn, y luego se
aade malta (que contienen enzimas diastticas) para convertir el almidn en
azcar fermentable (maltosa). Si el producto que se desea obtener

12
Laboratorio N01 de procesos qumicos

6.
7. es alcohol, se agrega entonces levadura. El empleo de amilasa en forma de
malta es indudablemente la mayor aplicacin industrial que tiene las enzimas,
pero no es del todo conocida la accin de estas amilasas. La elaboracin de
vinagre con alcoholes es un proceso enzimtico producido por un microbio vivo
(Acetobacter aceti). Como el alcohol es oxidado y convertido en cido actico
con oxgeno de la atmsfera. Aislada de las bacterias, la enzima cataliza
igualmente la oxidacin, pero es mucho ms econmico valerse de la clula viva
intacta.
8.
9.
10.
11. BIBLIOGRAFA:

12.
Arias, E. B. (2013). Compendio de enzimologa. Espaa: Ediciones
universidad salamanca.
McGilvery, R. W. (1997). Conceptos bioqumicos. Espaa: Editorial Revert.
13.
14.
15.

13