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Departamento de Ciencias.

Biologa II Medio
Profesoras: Bernardita Barraza
Profesora M Soledad Ros.

Gua de laboratorio: Observacin de clulas en mitosis


Nombre:______________________________________________________________________________Curso:_
_______Fecha:____________

Objetivos:
-Observar e identificar las diferentes etapas de la mitosis en las clulas del tejido
meristemtico de la cebolla.
-Determinar

Instrucciones
-Entrar al laboratorio con su delantal y su gua de trabajo.
-Formar grupos de 5 a 6 estudiantes.
-Dejar la mochila o bolso en los colgadores, para evitar la obstruccin en el
pasillo.
-No correr en el laboratorio.
-Manipular con cuidado los reactivos que puedan ser nocivos para la salud
-Identificar las salidas de emergencia, extintores en caso de algn peligro o
accidente.
La mitosis
Todos los seres vivos, uni y pluricelulares tienen como misin fundamental la de reproducirse
preservando sus caractersticas esenciales a travs de las generaciones. Los fenmenos que
tienen lugar durante la reproduccin celular corresponden a una de las etapas del proceso
conocido como ciclo celular. Este ciclo resulta de la coordinacin de una serie de procesos
que involucran la integracin de diferentes seales que conducen a la duplicacin de DNA, su
condensacin, segregacin y posterior descondensacin. Dentro de este ciclo, la mitosis es la
etapa durante la cual una clula da origen a dos clulas hijas con igual dotacin de
cromosomas. Aunque la mitosis, de por s es un proceso continuo, para su estudio se divide
en diferentes etapas consecutivas de acuerdo a los cambios morfolgicos que va
experimentando la clula y que se continan
Normalmente la mitosis concluye con la formacin de dos ncleos separados, seguido de la
particin del citoplasma (citocinesis), para formar dos clulas hijas. La mitosis completa, que
produce clulas genticamente idnticas, es el fundamento del crecimiento, de la reparacin
tisular y de la reproduccin asexual.

Material biolgico:

Para el estudio de clulas vegetales en mitosis puede usarse cualquier tejido meristematico,
sin embargo los mejores para este propsito, por su facilidad de obtencin, son los
meristemas radiculares. Estos meristemas, por ser de races jvenes en continuo crecimiento,
tienen ndices mitticos mayores que aquellos de races ms viejas y con menos velocidad de
crecimiento.
Cerca del extremo apical de las races se encuentra un conjunto de clulas que proliferando
hacen que crezca la raz. Es la zona meristemtica cuyas clulas sufren ciclos celulares
continuos y en condiciones normales no tienen sincronizacin alguna entre ellas.

Tejido meristematico: son responsable del tejido vegetal, sus clulas son pequeas, sus
paredes celulares son muy finas y son clulas abundantes. Se caracterizan por ser clulas
jvenes y poco diferenciadas
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Materiales

Microscopio ptico Colorante acetato-carmn


cebolla HCL (1 normal)
Portaobjetos Corta cartn, tijeras.
Cubreobjetos Vaso de precipitado
Pinzas Vidrio reloj

Procedimientos

Los pices de las races se obtienen sumergiendo los bulbos de cebolla en agua, de modo que
esta cubra la zona de donde emergern las nuevas raicillas. Al cabo de cuatro das, las races
comienzan a crecer, y cuando alcanzan una longitud aproximada de 1 cm pueden ser
cortadas.

1-Corta con las tijeras unos 2-3 mm del extremo de las raicillas y depostalo en un vidrio de
reloj.
2. Para fijar las raicillas, ponlas 5 minutos en una solucin de cido clorhdrico (HCl) 1
Normal. Luego lava las raicillas con agua para eliminar el exceso de HCl (pide ayuda a tu
profesor).
3. Retira las raicillas y colcalas en otro vaso con el colorante.
4. Calienta durante 5 minutos, moviendo lentamente para evitar ebullicin.
5. Extrae las raicillas y colcalas de a una en un portaobjetos, agrega una gota de colorante y
tapa con un cubreobjetos.
6. Coloca sobre el cubreobjetos un papel de filtro varias veces plegado y presiona tratando de
lograr una buena dispersin y disociacin de los tejidos.
7. Comienza la observacin con objetivo menor (4 X) e identifica las fases de la mitosis en tu
preparacin.

Resultados

Observe al microscopio las preparaciones realizadas y reconozca en ellas las distintas


etapas clsicas del proceso de divisin celular mittico. Calcule el ndice mittico e ndice
de fases de su preparacin y determine la duracin relativa de cada una de ellas.

Prctica de Divisin Celular


1.- En las lminas preparadas a partir de meristema de races de cebolla (Allium cepa),
localice las cuatro fases principales de la mitosis y clulas en interface. Dibuje cada fase y
describa brevemente qu caracteriza a cada fase.

INTERFASE: PROFASE:
Aumento: Aumento
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METAFASE: ANAFASE:
Aumento: Aumento:

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TELOFASE:

Aumento:

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3. .-Utilizando aumento mediano y para tres campos diferentes cuente las clulas que se
encuentran en cada una de las fases de la mitosis: Profase, metafase, anafase, telofase y
tambin las que aparecen en interfase.

Campo 1 Campo 2 Campo 3


Interfase
Profase
Metafase
Anafase
Telofase
Determinacin del ndice mittico (IM)

ndice mittico (IM)= N de clulas en mitosis en una poblacin celular dada x 100
N total de clulas de dicha poblacin.

ndice mittico(IM): proporcin de clulas en cualquier fase de la mitosis dentro de la


poblacin celular analizada. De los datos obtenidos se calcula la duracin relativa de la
mitosis y de la interfase, siempre y cuando la poblacin celular este en equilibrio.

ndice de fases (IF): corresponde al porcentaje de clulas en cada una de las fases dentro de
una poblacin celular en mitosis. Es posible estimar el ndice profsico (IP), ndice metafsico
(IM), ndice anafsico (IA) y el ndice telofsico (IT)

ndice profsico (IP): N de clulas en profase x 100


N total de clulas en mitosis

Calcule el ndice mittico (IM) utilizando los datos anteriores, de acuerdo a la siguiente
frmula:

ndice Profsico (IP):

ndice Metafsico (IM):


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ndice anafsico (IA):

ndice telofsico (IT):

Preguntas:

1-Por qu piensas que se eligi el tejido meristemtico de cebolla para observar clulas en
mitosis?

2. Para qu crees que se debe ejercer presin sobre la preparacin?

3. Cul crees que es la importancia de emplear un colorante en este experimento?

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