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Quim. Nova, Vol. 26, No.

1, 75-80, 2003

APLICAO DE LIPASES MICROBIANAS NA OBTENO DE CONCENTRADOS DE CIDOS GRAXOS


POLIINSATURADOS

Reviso
Patrcia de Oliveira Carvalho*, Paula Renata Bueno Campos, Maximiliano DAddio Noffs, Joaquim Gilberto de Oliveira,
Mrio Tsunezi Shimizu e Daniela Martins da Silva
Curso de Farmcia, Centro de Cincias Biolgicas e da Sade, Universidade So Francisco, Av. So Francisco de Assis, 218,
12916-900 Bragana Paulista - SP

Recebido em 7/12/01; aceito em 11/7/02

APPLICATION OF MICROBIAL LIPASES TO CONCENTRATE POLYUNSATURATED FATTY ACIDS. Several polyunsaturated


fatty acids (PUFA) belonging to the mega 6 series, such as cis-6,9,12 -linolenic acid, as well as those of the mega 3 series,
such as cis-5,8,11,14,17-eicosapentaenoic acid and cis-4,7,10,13,16,19-docosahexaenoic acid are of considerable interest due to
their nutritional and therapeutic properties. Methods used for the concentration of PUFA from natural sources include urea adduct
formation, solvent winterization, supercritical fluid extraction and lipase-catalyzed reaction. Lipases are known to have little
reactivity on PUFA and these acids can be enriched by selective hydrolysis, direct esterification of glycerol with PUFA and
interesterification. Since lipase reactions are advantageous with respect to fatty acid, positional specificities and mild incubation
condition, these enzymes are considered to be suitable for the production of PUFA concentrates for medical purposes.

Keywords: polyunsaturated fatty acid; lipase; fatty acid selectivity.

INTRODUO

A importncia dos cidos graxos essenciais (cido linolico e


cido -linolnico) na dieta humana foi assunto de grande interesse
nas dcadas passadas. Estes cidos que contm duas ou mais
insaturaes so chamados poliinsaturados e representados por sm-
bolos numricos, como C18:2 (9,12) que representa o cido linolico
e o C18:3 (9,12,15), o cido -linolnico, sendo que o nmero jus-
taposto ao smbolo C indica o nmero de tomos de carbono e o
segundo nmero, a quantidade de duplas ligaes. A posio da li-
gao dupla na cadeia hidrocarbonada indicada entre parnteses,
pela identificao do tomo de carbono mais prximo da carboxila
implicado na respectiva insaturao. Os cidos graxos tambm po-
Figura 1. Metabolismo de cidos graxos essenciais pertencentes famlia
dem ser divididos em famlias ou sries, dependendo da localizao
mega-3 (w3) e mega-6 (w6)
da ltima ligao dupla em relao ao seu grupamento metlico ter-
minal: famlia mega-6 (6) representada pelo cido linolico e a
famlia mega-3 (3), pelo cido -linolnico. se em relao preveno e tratamento de diversas patologias
Esses dois tipos de cidos graxos so chamados essenciais por- cardiovasculares. A administrao de leos ricos em AGPI, ou seus
que no podem ser sintetizados pelo organismo humano e devem ser concentrados, em humanos tem demonstrado efeitos benficos na
fornecidos atravs da dieta. Aps a ingesto, os cidos graxos, uma aterosclerose, trombose e arritmia2-4. Outros efeitos resultantes da
vez absorvidos por clulas e tecidos, podem ser dessaturados e alon- ingesto dos AGPI foram observados em certos processos inflama-
gados a outros cidos poliinsaturados de cadeia longa1. Os proces- trios e alrgicos, como eczema atpico5, psorase6, asma7 e artrite
sos de alongao e dessaturao do cidos linolico e -linolnico reumatide8. Tambm observaram-se efeitos na sndrome pr-mens-
ocorrem nos animais e, vagarosamente, nos homens originando di- trual9, diabetes10 e de certos tipos de cncer11,12. Estudos enfatizam
versos metablitos, como representado na Figura 1. que estes cidos afetam tambm as funes imunolgicas, inibindo
Na atualidade, pesquisas tm enfatizado o importante papel dos a proliferao de linfcitos, a produo de anticorpos e de citocinas
metablitos poliinsaturados, tais como cido -linolnico (18:3 pr-inflamatrias 13,14.
(6,9,12)) da famlia 6, cido eicosapentaenico (20:5 (5,8,11,14,17)) Embora os AGPI possam ser sintetizados no corpo a partir da
e cido docosaexaenico (22:6 (4,7,10,13,16,19)) da famlia 3, re- biotransformao dos cidos graxos essenciais por reaes de
presentados por EPA e DHA, respectivamente. dessaturao e elongao, a ingesto direta dos metablitos ativos
Os diversos dos cidos graxos poliinsaturados (AGPI) no meta- tem se mostrado eficiente, principalmente para gestantes, idosos,
bolismo de lipoprotenas, sntese de eicosanides e funcionamento lactantes, crianas prematuras15 e para indivduos que apresentam
das plaquetas e das paredes dos vasos, os tornam de especial interes- insuficincia da enzima 6-dessaturase, decorrente de carncias
nutricionais ou do prprio envelhecimento16. O mercado mundial
apresenta uma gama bastante ampla de suplementos alimentares
*e-mail: patcarvalho@saofrancisco.edu.br (encapsulados) de AGPI 6 e 3 e de produtos nos quais estes ci-
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dos so incorporados, como leites e derivados, frmulas lcteas in-


fantis, biscoitos, pes, ovos, massas e sucos de frutas.
Em vista deste grande potencial, pesquisas voltadas a esta rea
tm relatado a aplicao de diferentes mtodos fsicos, qumicos e
enzimticos visando a obteno de concentrados de AGPI, a partir
de substratos como leos vegetais, animais e microbianos. Este tra-
balho tem por objetivo enumerar e discutir as principais publicaes
relacionadas aplicao de lipases microbianas na obteno de pro-
dutos com nveis aumentados em AGPI. Na primeira seo deste
artigo, so relatados os estudos das reaes catalisadas por lipases
microbianas, que tm sido empregadas para obteno dos concen-
trados de AGPI a partir de diferentes fontes e em variadas condies
experimentais e, em seguida, uma comparao do processo enzimtico
com outros mtodos fsicos e qumicos que permitem remover os
componentes mais saturados do leo.

REAES CATALISADAS POR LIPASES PARA


CONCENTRAO DE CIDOS GRAXOS
POLIINSATURADOS (AGPI)

As lipases verdadeiras (triacilglicerol acilhidrolases E.C.3.1.1.3)


so enzimas que catalisam a hidrlise total ou parcial de triacilglicerol
(TAG) fornecendo diacilglicerol (DAG), monoacilglicerol (MAG),
glicerol e cidos graxos livres. Estas enzimas apresentam uma ca-
pacidade nica de agir apenas na interface leo/gua. Esta definio
exclui as enzimas que agem em steres solveis em gua (esterases)
ou que hidrolizam outros lipdeos (acilidrolases, colesterolesterase,
tioesterases e outras)17.
A partir dos trabalhos de Tsujisaka e colaboradores18 ficou com-
provado ser possvel reverter a hidrlise de TAG no sentido da rea- Figura 2. Representao esquemtica das reaes de hidrlise, esterificao
o de esterificao, pelo controle do teor de gua no meio. Com e interesterificao catalisadas por lipases
base nisto, tornou-se possvel tambm a utilizao de lipases como
biocatalisadores da interesterificao de leos e gorduras19. Esta re-
ao traz alteraes na composio e distribuio dos cidos graxos vegetais (colza, mostarda e lupino) tm demonstrado possuir este tipo
da molcula de TAG. Genericamente, a reao de interesterificao de especificidade. Lipases no especficas - catalisam a hidrlise de
refere-se troca de radicais acil entre um ster e um cido (acidlise), TAG para cidos graxos livres e glicerol, de modo aleatrio. No mos-
um ster e um lcool (alcolise), ou ainda de um ster e outro ster, tram especificidade com relao natureza do grupo acil ou posio
na forma de glicerdeos ou de monoster, reao intitulada por al- em que este est esterificado no glicerol. Exemplos so as lipases de
guns autores de transesterificao. As reaes catalisadas por lipases Penicilium cyclopium, Corynebacterium acnes, Pseudomonas
esto demonstradas esquematicamente na Figura 2. fluorescens, Staphylococcus aureus e Candida cylindracea. Lipases
Estas enzimas encontram-se largamente distribudas na natureza cido graxo especficas - catalisam a hidrlise de tipos especficos de
em animais, vegetais e microrganismos. Apresentam peso molecular grupos acilas nas molculas de TAG. Um representante tpico deste
entre 40-50Kda com cerca de 300 resduos de aminocidos. So grupo a lipase de Geotrichum candidum que hidrolisa preferencial-
glicoprotenas nas quais a parte glicosilada hidrofbica circunda o mente grupos acila de cadeia longa, que contenham dupla ligao cis
stio ativo. As lipases provenientes de microrganismos so as mais na posio 9.
utilizadas industrialmente porque alm de apresentarem procedimen- A reao enzimtica de interesterificao tem algumas caracte-
tos mais simples de isolamento partir do caldo fermentativo so, rsticas em comum com as reaes da qumica clssica correspon-
geralmente, mais estveis e com propriedades bem mais diversificadas dente, mas os princpios que governam a regioespecificidade so
que as lipases de outras fontes. So, em sua maioria, extracelulares, diferentes e justificam, em muitos casos, a utilizao dos processos
favorecendo sua extrao, isolamento e purificao20. O interesse em enzimticos. Conforme a ilustrao esquemtica da Figura 3, os pro-
utilizar estes biocatalisadores na modificao estrutural de leos e dutos resultantes da reao de interesterificao de uma mistura de
gorduras tem recebido considervel ateno devido, em especial, TAGs (3b) ou entre TAG e cidos graxos livres (3d), catalisada por
sua especificidade em relao ao substrato21,22. lipases regioespecficas para as posies 1 e 3, permite que o proces-
Segundo Macrae e Hammond23, as lipases microbianas tm sido so seja dirigido para a formao de produtos com composio e pro-
classificadas em trs grupos, em funo de sua especificidade com priedades peculiares. O mesmo pode ser constatado com o uso de
relao ao substrato: Lipases 1,3 especficas - catalisam a liberao lipase cido graxo especfica (3e). Em contrapartida, os produtos
de cidos graxos especificamente das posies sn-1 e sn-3 dos obtidos com o uso de lipases no regioespecficas so similares que-
acilgliceris. A hidrlise total pode ocorrer se a reao for por tempo les obtidos por interesterificao qumica, onde ocorre uma
prolongado, considerando-se que o 2- MAG ou 1,2 (2,3)- DAG for- redistribuio aleatria (randomizao) dos cidos graxos nos TAGs
mados, ambos quimicamente instveis, podem ser isomerizados es- (3a e 3c) dificultando, em muitos casos, a obteno de produtos com
pontaneamente para as posies 1 ou 3. As lipases de Rhizopus delemar, propriedades desejadas e com maior pureza24.
Aspergillus niger e Mucor miehei pertencem a este grupo. A lipase Embora as lipases tenham sido estudadas por muitos anos e pos-
pancretica uma tpica lipase sn-1,3 especfica, e algumas lipases sam ser produzidas em larga escala, estas enzimas tm sido de uso
Vol. 26, No. 1 Aplicao de Lipases Microbianas na Obteno de Concentrados de cidos Graxos Poliinsaturados 77

AGPI. Considerando que, em sua maioria, os AGPI dos leos de


peixe e outros leos vegetais esto localizados na posio sn-2 do
TAG28, os acilgliceris resultantes da hidrlise parcial por lipases
com especificidade posicional sn-1 e sn-3 perdero os cidos
saturados e monoinsaturados normalmente presentes nestas posies,
resultando em aumento no contedo de AGPI e permitindo, por exem-
plo, a obteno de sn-2 eicosapentaenoil glicerol e sn-2 docosaexae-
noil glicerol aps hidrlise com a lipase obtida de Mucor miehei
(Lipozyme IM-20) 29.
Lipases inespecficas obtidas de Candida cylindracea26,30-33 e
Pseudomonas fluorescens34 tambm podem ser eficientes para enri-
quecer os AGPI nos produtos da hidrlise. A atuao da lipase
inespecfica de Candida cylindracea chegou a triplicar a concentra-
o original de DHA aps 60% de hidrlise do leo de peixe. O
autor atribuiu este fato hidrlise preferencial de alguns cidos
saturados e poliinsaturados e possvel discriminao desta enzima
em relao ao DHA, baseado na especificidade quanto ao tipo de
cido graxo pela enzima31, ou, conforme postulado posteriormente,
especificidade pela molcula inteira de TAG que contenha o DHA32.
Esta lipase mostrou ser mais eficiente no enriquecimento de DHA
do leo de atum quando comparada com outras lipases inespecficas
obtidas de Aspergillus niger, Chromobacterium viscosum,
Pseudomonas sp31 e com lipase obtida de Geotrichum candidum
(especificidade de cido graxo) e de Rhizopus delemar (sn 1,3 espe-
cfica)33. Nveis superiores a 50% de AGPI 3 em leo marinho fo-
ram obtidos utilizando lipase imobilizada de Candida cylindracea26,35.
Outros AGPI importantes, como o cido -linolnico e o cido
araquidnico, tm recebido considervel ateno. Hills e colabora-
Figura 3. Produtos resultantes da reao de interesterificao qumica e dores deram incio a uma srie de estudos visando concentrar o ci-
enzimtica de diferentes lipdeos (adaptada da ref. 24). 3a. reao de diferentes do -linolnico obtido de fontes vegetais. Os autores descreveram a
glicerdeos por catlise qumica ou com lipase no especfca; 3b. reao de hidrlise de leo de prmula (Oenothera biennis L. contendo 9,5%
diferentes glicerdeos catalisada com lipase 1,3 especfica; 3c. reao de de cido -linolnico) catalisada por lipase vegetal (Brassica napus
glicerdeos e cidos graxos livres por catlise qumica ou com lipase no L.)36. Nas fraes MAG e DAG, o contedo de cido -linolnico
especfca; 3d. reao de glicerdeos e cidos graxos livres catalisada com resultante foi de 45 e 28%, respectivamente, demonstrando resistn-
lipase 1,3 especfca; 3e. reao de glicerdeos e cidos graxos livres catalisada cia do cido -linolnico atuao enzimtica. Syed Rahmatullah e
por lipase com especificidade para cido graxo A e B colaboradores37 relataram posteriormente que lipase de Candida
cylindracea tambm se mostrou eficiente para o enriquecimento de
cido -linolnico aps hidrlise parcial do leo de semente de
restrito da maioria das indstrias. Muitos estudos tm sido realiza- prmula (Oenothera biennis L.) e borragem (Borago officinallis L.).
dos com o intuito de otimizar os processos de modificao de leos
de gorduras catalisados por lipases; estes estudos incluem a imobili- ESTERIFICAO
zao da enzima, estudos cinticos e desenvolvimento de
bioreatores19,25,26,56. A reao de esterificao entre lcoois polidricos e cidos graxos
A aplicao de lipases com o objetivo de obter concentrados de livres a reao inversa da hidrlise do acilglicerol correspondente.
AGPI de importncia nutricional ou mdica depende, em primeira A relao entre as velocidades da reao direta (hidrlise) e da rea-
instncia, da capacidade de absoro destes cidos pelos humanos. o inversa (esterificao) usualmente controlada pelo contedo
conhecido que os steres de AGPI com lcoois primrios apresen- de gua do meio de reao. Um grau elevado de incorporao dos
tam absoro praticamente nula e podem resultar em metablitos AGPI ao glicerol foi relatado por Osada e colaboradores38 com as
txicos. Por sua vez, os AGPI livres apresentam uma extenso de lipases de Chromobacterium viscosum (89-90%) e Candida
absoro significativa, mas possuem a desvantagem de sofrerem fa- cylindracea (70%), sugerindo ser este um mtodo praticvel para
cilmente deteriorao oxidativa. Em contrapartida, os AGPI produo de acilgliceris ricos em AGPI. Posteriormente, foi relata-
esterificados ao glicerol na forma de acilgliceris so melhores ab- do que a lipase obtida de Mucor miehei tambm era capaz de incor-
sorvidos, sendo esta forma a mais facilmente obtida pelas reaes porar os AGPI ao glicerol39.
enzimticas catalisadas pela lipase. Os estudos enzimticos comen- Li Zu Yi e Ward40 relataram a obteno de acilgliceris contendo
tados a seguir esto relacionados obteno de produtos enriqueci- aproximadamente 70% de AGPI (EPA + DHA), respectivamente,
dos em AGPI na forma de mono, di e triacilgliceris. aps 24 h de reao de esterificao em mistura de reao contendo
2,0 g de glicerol, 0,4 g de AGPI, 3,0 mL de hexano, 5% de gua e
HIDRLISE 5.000U da lipase de Pseudomonas sp. Os mesmos autores relataram,
posteriormente, um mtodo enzimtico para produo de 80% de
Os trabalhos pioneiros iniciaram-se com Bottino e colaborado- MAG contendo 76,2% de AGPI por lipase microbiana obtida de
res27, os quais demonstraram que os componentes EPA e DHA pre- Mucor miehei em meio com solvente orgnico41.
sentes em leo de baleia resistiam ao hidroltica por lipase pan- O grau de esterificao altamente dependente das condies de
cretica, resultando acilgliceris parciais com nveis aumentados em reao, em especial do contedo de gua reacional para que a hidrlise
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seja evitada. Medina e colaboradores42 relataram a obteno de 93,5% A incorporao de AGPI 3 em leo de soja aps trans-
de TAG contendo 25,7% de EPA e 44,7% de DHA usando como esterificao catalisada por lipase de Candida cylindracea formou
substrato o leo de peixe e a obteno de 89,3% de TAG contendo TAGs com 34,7% e 32,9% de EPA e DHA, respectivamente54. Akoh
45,6% de EPA e 43,4% de cido araquidnico usando como substrato e colaboradores55 descreveram a reao de transesterificao entre
a microalga Phaeodactylum cruentum, em meio reacional orgnico, leo de prmula (cido -linolnico) e ster etlico de EPA como
isento de gua. A adio de solventes orgnicos no meio tem doadores de grupo acil, catalisada por lipase imobilizada de Candida
sido usada como forma de impedir a hidrlise e aumentar a solubili- antarctica. A incorporao de EPA foi de 34%, enquanto os nveis
dade de substratos hidrofbicos, tornando vivel a reao de de cido -linolnico no sofreram mudanas significativas, o que
esterificao. resultou em uma modificao favorvel na taxa de 3/6 de 0,01
A lipase obtida de Geotrichum candidum foi relatada como sen- para 0,60 aps reao de transesterificao. Alguns estudos tm uti-
do capaz de esterificar os cidos olico (18:1 (9)), linolico (18:2 lizado com sucesso a lipase obtida de Candida antarctica na catlise
(9,12)) e -linolnico (18:3 (9,12,15)) com butanol, enquanto os da reao de transesterificao de diferentes steres (acilgliceris e
cidos graxos de cadeia carbnica maior que C18, como o cido steres com lcool primrio) na obteno de leos enriquecidos com
ercico (C22:1 (6)), ou cidos insaturados como cido -linolnico AGPI para propsitos nutracuticos56.
(18:3 (6,9,12)) e petroselnico (18:3 (6)), mostraram uma taxa de A Tabela 1 traz um sumrio das principais referncias dispon-
esterificao nula43. Esta possvel discriminao pode ser aprovei- veis, a partir da dcada de 90, sobre a obteno de concentrados de
tada para a obteno de concentrados de AGPI na frao no AGPI usando lipases.
esterificada. A concentrao de cido -linolnico de 24,9% em rela-
o aos cidos graxos totais do leo de borragem (Borago officinalis) MTODOS FSICOS E QUMICOS PARA
subiu para 71,8% na frao cidos graxos no esterificados com CONCENTRAO DE CIDOS GRAXOS
butanol aps 48 h de reao44. A reao preferencial de esterificao POLIINSATURADOS (AGPI)
do butanol com os cidos palmtico, esterico, olico e linolico
obtidos do leo de Mucor sp foi utilizada para obter concentrados de O processo de interesterificao qumica realizado atravs do
cido -linolnico na frao cidos graxos no esterificadas aps aquecimento de misturas de leos e cidos graxos na presena de
catlise por lipase de Geotrichum sp45. catalisadores como o sdio metlico, metilato ou etilato de sdio e
O aproveitamento dos constituintes oleosos do caldo (efluentes) outros alquilatos de metais alcalinos (Na, K e suas ligas). Durante
da indstria de enlatados de sardinha, visando o enriquecimento do este processo, a mistura aquecida e os cidos graxos trocam de
EPA e DHA neste leo, aps hidrlise com a lipase de Candida ru- posio na molcula do TAG. A variabilidade na qualidade do
gosa, seguida da esterificao seletiva com a lipase de Lipozyme catalisador, a necessidade de um perodo de induo e perdas de
(Rhizomucor miehei) foi objeto de estudo de Schmitt-Rozieres e leo pela formao de sabes de steres metlicos so algumas das
colaboradores46,47. desvantagens da interesterificao qumica. Alm disto, na
interesterificao qumica ocorre a redistribuio aleatria dos ci-
INTERESTERIFICAO dos graxos nos TAGs (randomizao), dificultando que leos e gor-
duras obtidos demonstrem propriedades desejveis23.
Na reao de interesterificao, o TAG reage com um cido graxo, Os estudos relatados na literatura para extrao, concentrao e
um lcool ou outro ster, resultando em rearranjo na distribuio dos purificao dos AGPI incluem mtodos fsicos e qumicos, tais como
cidos graxos do TAG formando um novo TAG, com propriedades complexao com uria64,65, resfriamento por solvente60, cristalizao
qumicas e fsicas diversas. O rearranjo o resultado de reaes con- fracionada baixa temperatura67, extrao com fluido super crtico68 e
correntes de hidrlise e esterificao. Em geral, sob condies nas extrao baseada na solubilidade dos sais de cidos graxos em dife-
quais a quantidade de gua no sistema restrita, a hidrlise de gor- rentes solventes orgnicos69. A separao seletiva de AGPI por outros
dura pode ser minimizada de tal forma que a interesterificao seja a mtodos como cromatografia lquida de alta eficincia em fase reversa70,
reao dominante48. A reao de interesterificao tem demonstrado coluna de troca inica usando zeolita71, e o mtodo de Corey72,73
aumentar significativamente os nveis de AGPI nos acilgliceris re- constituram outras alternativas relatadas em nvel experimental.
sultantes. A obteno de acilgliceris contendo 70% de AGPI 3, O mtodo de fracionamento com complexao (incluso) com
em especial DHA (48%) e EPA (12%), foi realizada via inter- uria baseia-se na separao pelo grau de insaturao, sendo que os
esterificao de leo de fgado de bacalhau e concentrados de AGPI cidos graxos mais insaturados so menos includos nos adutos de
livres, ou seus steres, catalisada por lipase imobilizada de Mucor uria. Haagsma e colaboradores64 relataram a preparao de um con-
miehei49. A mesma enzima foi usada para a obteno de leo de sar- centrado de cidos graxos 3 via complexao com uria contendo
dinha contendo 25% de EPA e 40% de DHA aps acidlise entre o 85% de AGPI na forma livre.
leo de sardinha e AGPI livres na ausncia de solvente50. Na seleo O mtodo de extrao em fluido super crtico com dixido de
de lipases microbianas utilizadas para aumentar os nveis de AGPI carbono tem recebido destaque nas publicaes mais recentes. Esta
do leo de sardinha aps reao de acidlise, a lipase de Pseudomonas tcnica tem sido apontada como de larga aplicao em alimentos e
sp apresentou a maior capacidade entre as lipases testadas, tendo o produtos farmacuticos, que envolvem o manuseio de compostos
contedo total destes cidos graxos atingido 44% nos acilgliceris, bioativos e termolbeis. Bons resultados foram obtidos usando steres
comparado com 29% do leo de sardinha original51. metlicos ou etlicos de AGPI, apesar do alto custo operacional e do
A reao de interesterificao tambm tem sido utilizada para pequeno interesse comercial nestes steres75.
tornar os leos vegetais mais ricos em AGPI de interesse nutricional. O procedimento usando duas etapas, incluso em uria seguida
Li Zu Yi e Ward52 relataram a incorporao de aproximadamente de cromatografia lquida de alta eficincia (HPLC) preparativa em
20% (em relao aos cidos graxos totais) de AGPI nos leos de coluna de fase reversa C18, permitiu a obteno de concentrados de
milho, girassol, amendoim, oliva e soja usando lipase imobilizada EPA e DHA a partir do leo de fgado de bacalhau e da microalga
obtida de Mucor miehei e de Pseudomonas sp, a qual mostrou alta Isochrysis galbana. A associao dos mtodos, embora de alto cus-
atividade cataltica e permitiu o uso repetido da enzima imobilizada to, mostrou-se eficiente, resultando em um concentrado contendo
sem perda significativa na sua atividade53. 95% de AGPI livres74.
Vol. 26, No. 1 Aplicao de Lipases Microbianas na Obteno de Concentrados de cidos Graxos Poliinsaturados 79

Tabela 1. Enriquecimento de AGPI por reaes de hidrlise, esterificao e interesterificao usando lipases de diferentes fontes
Enzima Estado Reao catalisada AGPI enriquecido Referncia
CC e AN Livre Hidrlise EPA/DHA/ DPA 30
CC e CV Livre Esterificao EPA/DHA/GLA 38
MM e LN Imobilizada Esterificao DHA/GLA 57
MM Livre Hidrlise GLA 58
MM Livre Esterificao GLA 58
CC Livre Hidrlise DHA 31
MM e CV Livre Esterificao EPA/DHA 39
MM Imobilizada Interesterificao EPA/DHA 53
CC Imobilizada Hidrlise GLA 37
MM Imobilizada Esterificao GLA 59
GC e RD Livre Hidrlise EPA/DHA 33
CV Imobilizada Esterificao DHA 60
GC Imobilizada Esterificao GLA 44
GC Livre Hidrlise EPA/DHA 61
CC Livre Hidrlise AA 62
CA Imobilizada Interesterificao GLA/EPA 55
RD Livre Esterificao DHA 63
CC Imobilizada Hidrlise EPA/DHA/DPA 35
CC Imobilizada Hidrlise EPA/DHA 26
MM Imobilizada Hidrlise EPA/DHA 29
CA Imobilizada Esterificao EPA/DHA 42
MM Imobilizada Esterificao EPA/DHA 46
CC e MM Imobilizada Esterificao EPA/DHA 47
CA Imobilizada Interesterificao EPA/DHA 56
MM: Mucor miehei (Lipozyme); LN: Lipase vegetal de nabo; CC: Candida cylindracea (rugosa); CA: Candida antarctica; AN: Aspergillus
niger; CV: Chromobacterium viscosum; GC: Geotrichum candidum; EPA: cido eicosapentaenico; DHA: cido docosahexaenico; DPA:
cido docosapentaenico; GLA: cido -linolnico; AA: cido araquidnico; RD: Rhizopus delemar; PF: Pseudomonas fluorescens

CONCLUSES AGRADECIMENTOS

As lipases tm um importante papel devido ao fato de serem Os autores agradecem FAPESP e ao CNPq pelo apoio finan-
disponveis comercialmente, obtidas a partir de diferentes fontes, ceiro.
serem seletivas em relao aos seus substratos e tambm catalisadores
muito eficientes mesmo sob condies brandas de operao, nas quais REFERNCIAS
os grupos acila no sofrem alteraes indesejveis. De modo especi-
al, a reao de interesterificao delinea possibilidades muito inte- 1. Lands, W. E. W.; Nutr. Rev. 1986, 44, 189.
ressantes. A ao da lipase nas posies 1 e 3 do TAG possibilita a 2. Dyeberg, J.; Bang, H. O.; Stoffersen, E; Moncada, S.; Vane, J. R.; Lancet
1978, 2, 117.
obteno de gorduras com caractersticas especiais promovendo uma 3. Drevon, A. C.; Nutr. Rev. 1992, 50, 38.
troca de grupamentos acil apenas nestas posies, o que no pode 4. Horrobin, D. F.; Prog. Lipid Res. 1992, 31, 163.
ser alcanado por via qumica. Alm disto, a interesterificao qu- 5. Manku, M. S.; Horrobin, D. F.; Morse, N. L.; Wright, S.; Burton, J. L.;
mica consome muita energia (alta temperatura e presso), deixa res- Br. J. Dermatol. 1984, 110, 643.
6. Barlow, S.; Infofish Mark. Dig. 1987, 1, 38.
duos txicos e os cidos graxos obtidos so escuros e impuros, devi-
7. Masuev, K. A.; Ter. Arkh. 1997, 69, 31.
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