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INFORME DE

MICROBIOLOGA
Practica de Laboratorio

ESTUDIANTE: VILLANUEVA DAZ, Zuly Maximila


PROFESOR: Mblgo. Anthony Caldern Salazar
INSTITUCIN: Universidad Catlica Sedes Sapientiae
FACULTAD: Ingeniera Agraria
CICLO: IV

NUEVA CAJAMARCA-PER
2017

PREPARACION Y ESTERILIZACION DE
MEDIOS DE CULTIVO
I. INTRODUCCIN
Facultad de Ingeniera Agraria
Carrera Profesional de Ingeniera Ambiental

II. MARCO TERICO

Un medio de cultivo es una tcnica de laboratorio que consta de un gel o una


solucin que contiene los nutrientes necesarios para permitir, en condiciones
favorables de pH y temperatura, el crecimiento
de virus, microorganismos, clulas, tejidos vegetales o incluso
pequeas plantas. Segn lo que se quiera hacer crecer, el medio requerir
unas u otras condiciones. Generalmente se presentan desecados en forma de
polvo fino o granular antes de ser preparados; ya preparados pueden
encontrarse en estado slido, semislido o lquido. El objetivo ltimo del cultivo
es variado: antibiograma, identificacin, multiplicacin.

Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin


de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias
artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en el que crecen
los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los
microorganismos es el Cultivo. Se han preparado ms de 10.000 medios de
cultivo diferentes.

Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial


debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de
humedad y presin de oxgeno adecuado, as como un grado correcto de
acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y
factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante.

Segn sus cualidades fsicas

lquidos

semislidos

slidos
Segn su origen

naturales: son los preparados a partir de sustancias naturales de origen animal


o vegetal como ser extractos de tejidos o infusiones y cuya composicin qumica
no se conoce exactamente.

sintticos: son los medios que contienen una composicin qumica definida
cualitativamente y cuantitativamente. Se utilizan para obtener resultados
reproducibles.

semisintticos: son los sintticos a los que se les aaden factores de


crecimiento bajo una forma de un extracto orgnico complejo, como por ejemplo
extracto de levadura.

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Facultad de Ingeniera Agraria
Carrera Profesional de Ingeniera Ambiental

Segn su formulacin

qumicamente definidos: se conoce la cantidad exacta de cada uno de los


compuestos que hay en el medio.

complejos: se realizan a partir de extractos naturales (extracto


de levadura, sangre, etc.); no se conoce exactamente cul es la composicin del
medio; sin embargo, presenta la ventaja de que ya estn presentes todos o casi
todos los elementos que una clula puede requerir.
Segn su uso

medio general: medio en donde crecen todo tipo de microorganismos, excepto


los que necesitan condiciones especiales (por ejemplo, agar CLED).

medio selectivo: permite seleccionar el crecimiento de una especie o grupo


determinado (hongos, bacterias entricas, protozoos...).

medio diferencial: permite identificar una especie con otra, ambas en el mismo
medio. Puede ser por su crecimiento, su metabolismo,su respiracin, etc. (por
ejemplo, medio de McConkey).

medio de enriquecimiento: contiene los nutrientes necesarios para apoyar el


crecimiento de una amplia variedad de microorganismos, se utiliza para la cosecha
de diferentes tipos de microorganismos en un mismo medio.

medio mnimo: contiene la mnima cantidad de nutrientes posible que permite


el crecimiento de una especie.

medio de transporte: preparado para servir como almacenamiento temporal a


especmenes transportados o en transferencia; mantienen su viabilidad y su
concentracin

III. OBJETIVOS:
Objetivo General:
Conocer el uso de los medios de cultivo

Objetivos Especficos:
Identificar aspectos importantes cuando se prepara
los medios de cultivo
Conocer la forma adecuada de preparar los medios
de cultivo.

IV. MATERIALES
A. Materiales:
1. Materiales de vidrio
matraz
Luna de reloj
Probeta
Placas petri

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2. Materiales biolgicos
Agua destilada

3. Otros materiales:
Pinza
Mechero
Agar Mac Conkey
Agar Mueller Hinton

B. Equipos:
1) Autoclave
2) Cocina elctrica
3) Balanza electrica
V. PROCEDIMIENTOS:
1) Preparacin del medio de cultivo
Los ingredientes debern ser medidos en la cantidad
exacta y en un recipiente adecuado.
En la actualidad los medios de cultivo se elaboran de
tal forma que su formulacin completa viene lista solo
para agregar el volumen de agua necesario.
Agregar el volumen de agua correspondiente
preferentemente en dos partes, agregar primero la
mitad del volumen para disolver los ingredientes y
luego completar.
Si se trata de un medio que contiene agar agar ser
necesario el empleo de calor para su disolucin, esto
reconoce por la desaparicin de los granulos de agar
agar y la desaparicin de la turbidez del medio.
De ser posible se debe medir el pH del medio ya
preparado para confirmar. Y el agua que se debe
emplear debe ser destilada o desionizada con un pH
neutro a cercano a este valor.
a) Esterilizacin:
El medio ms usado para la esterilizacin de medios de
cultivo es el empleo del autoclave(calor hmedo), en
el cual el vapor de agua a alta presin y la T son los
agentes esterilizantes.
La esterilizacin con autoclave requiere de las siguientes
condiciones:
T= 121 C
P= 15 lb/pulg2 (1 atm)
T: 15 minutos

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Bajo estas condiciones se logra la esterilidad total del


medio incluyendo la destruccin de las endosporas
bacterianas.
El medio se debe colocar en frascos recipientes
preferentemente de vidrio trmico los cuales luego
sern cerradas con un tapn de algodn, el volumen de
medio que se coloque en el recipiente no debe exceder
de las 2/3 partes de la capacidad total del recipiente.
Una vez que el periodo de esterilizacin se haya
completado se apaga el equipo y se deja el el autoclave
vuelva a la Presin atmosfrica normal para poder
retirar los medios esterilizados.
Se debe dejar enfriar el medio de cultivo hasta una
temperatura de mas o menos 42C en la cual el medio
aun se encuentra en estado liquido para distribuirle en
los recipientes donde sern utilizados como placas Petri
o tubos de ensayo. Dichos recipientes tambin debern
encontrarse esteriles en este caso se emplea el calor
seco mediante un equipo llamado horno esterilizador
o pupinel cuyas condiciones de esterilizacin son:
T= 160 C 180 C
T= 1 hora
es importante tener en cuenta que antes de colocar los
distintos medios de cultivo con su recipiente se debe:
desinfectar el rea a utilizar con leja (hipoclorito)
o alcohol.
El mechero debe estar encendido 5 minutos antes
de realizar la colocacin de medios de cultivo a
respectivos recipientes; debido a que el mechero
nos permite 15-20 cm de dimetro de esterilidad.

VI. RESULTADOS:
Composicion:
Agar Mac Conkey
Digerido pancretico de gelatina ..17,0 g
Digerido pancretico de casena ..1,5 g
Digerido pptico de tejido animal ..1,5 g
Lactosa ..10,0 g
Mezcla de sales biliares ..1,5 g
Cloruro de sodio 5,0 g
Agar .13,5 g
Rojo neutro .30,0 mg
Cristal violeta ..1,0 mg
Agua destilada 1.000 mL

Agar Mueller Hinton

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Infusin de carne
300.0g/l
Peptona cida de casena
17.5g/l
Almidn
..1.5g/l
Agar
15.0g/l

VII. CONCLUSIONES:
Se logr conocer el uso de los medios de cultivo en
la microbiologa.
Asimismo se logr conocer los cuidados que se
debe tener al momento de hacer algn medio de
cultivo para que este no este contaminado y no
sea muy til.
Se logr conocer las propiedades que debe
presentar este medio de cultivo para ser
considerado un buen medio para el desarrollo de
bacterias, hongos, etc.
VIII. RFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:
https://www.google.com.pe/webhp?sourceid=chrome-
instant&rlz=1C1RLNS_esPE733PE733&ion=1&espv=2&ie=UTF
-8#q=agar+Mueller+Hinton+composicion
http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/maconkeyag
ar.htm
https://www.google.com.pe/url?
sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=1&cad=rja&uact=8
&ved=0ahUKEwjPv9K9i7DTAhVDRyYKHRAzBKwQFgghMAA&url

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=http%3A%2F%2Fwww.condalab.com%2Fpdf
%2F1075.pdf&usg=AFQjCNHhFyhS-
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