Vous êtes sur la page 1sur 7

Quel est le problme ?

pathologie frquente Problme de sant publique


=
Virus de lHpatite C gravit potentielle consensus
- Physiopathologie - htrognit dvolution inter-patient
plusieurs VHC
htes ne se ressemblent pas
effets secondaires thrapeutiques frquents
et potentiellement graves
Pierre-Marie Roger
Service dInfectiologie,
Centre Hospitalier Universitaire de Nice
opposition Sant Publique / Soins individualiss ?
Mai 2004
INTERET DE LA PHYSIOPATHOLOGIE

Structure du VHC
Approche du problme
Nature des virus VHC
Histoire naturelle de la maladie VHC
que fait notre immunit ?
Impact des traitements
quels rsultats ?
Physiopathologie des hpatites chroniques C
-Virus envelopp, ARN+ simple brin de la famille Flaviviridae
Quelles perspectives ? - gnome de 9600 nuclotides, codant pour 1 polyprotine
- simple mais importantes variations gntiques
Penin F, Clin Liver Dis 2003

Le cycle viral
Les variations gntiques du VHC
v Cibles cellulaires: hpatocytes, cellules B et
- 3/an
Taux de mutations nuclotidiques : 10 monocytes et cellules biliaires ?
Production virale: 10 12/jour v Rcepteurs: CD81, rcepteurs aux VLDL et
taux de mutations variable glycoaminoglycans
interactions protines virales / humaines variables v protases virales et cellulaires:
notion de quasi-espces polyprotine 10 protines
Structurale: core, E1,E2
Plus de 90 gnotypes rpertoris, 6 groupes Non-structurale: de NS2 NS5B
principaux Interactions gnome / protines structurales virions
Rpartition ingale sur le globe v Diamtre de 30 50 nm, mais variabilit potentielle
v Beaucoup dincertitude par quasi-absence de culture
cellulaire

1
Modles existants de cultures de VHC (1) Modles existants de cultures de VHC (2)

Structures et fonctions de la plupart des protines Depuis 1999, 2 modles sont potentiellement utilisables
connues Culture primaires dhpatocytes
Mais interactions protine / protine et interactions mais rsultats encore dpendants des donneurs et des souches
virus / cellule hte mconnues infectantes

Objectifs: trouver de nouvelles cibles Souris transgniques avec foie humain


thrapeutiqueset donc de nouveaux traitements Technique des rplicons
modification gnomique avec dltion des rgions structurales,
Echecs des cultures sur lignes cellulaires; production insertion dune amorce de virus de rplication aise
faible et non reproductible culture exclusivement dans ligne Huh- 7, mais pas de virions
Modle animal rduit lutilisation du chimpanz complets

Approche du problme
lensemble des travaux portant sur
Nature des virus VHC
les modles
Histoire naturelle de la maladie VHC
cellulaires / tissulaires/ animaux de que fait notre immunit ?
culture du VHC Impact des traitements
conduisent au constat de labsence quels rsultats ?

de pouvoir pathogne vident Physiopathologie des hpatites chroniques C


Quelles perspectives ?

Modalits volutive s de lhpatite C

Laurer G.M., Walker B.D., N Eng J Med 2001

2
Immunit anti-VHC
Mcanismes daction non
VHC immunostimulants et pouvoir transformant
dmontrs: Donnes pidmiologiques
Immunit inne en grande partie inconnue
les donnes convergent pour variabilit inter- individuelle +++ non lie la souche virale
immunit humorale spcifique non protectrice
voquer une efficacit indirecte, par Immunit saltrant dans le temps, quelque soit les modalits volutives
Donnes bio-cliniques
lamlioration Ac dtectables en fin de 2me mois aprs contamination

des dfenses immunes IgM non spcifique de la primo


0.001% infect sans anticorps
- infection

ces Ac spcifiques nempchent pas la rinfection par la mme souche


virale

Immunit cellulaire spcifique Rechute infection VHC


aprs perte des T CD4 spcifiques
La majorit des travaux se sont intresss aux facteurs
dradication virologique 38 patients avec hpatite C aigu, suivi longitudinal
analyse activit T : prolifration aprs exposition Ag
Intensit de la rponse T CD4+ associe lradication virale VHC, synthse IFN- et IL-4, relation disparition T
Interactions favorables entre T CD4+ et T CD8+
spcifique et rebond CV
Rechute virologique associe laltration de cette rponse T volution favorable:
chappement virologique possiblement par mutants rsistants > 70% rponse Ag viraux versus < 34% si rechute
Induction dune apoptose des cellules T
concernent +++ les T CD4+
Amlioration de cette rponse T sous interfron scrtion IFN- +++ et pas d IL-4; maintient profil
mais un seul travail en ce sens cytokinique TH1 en longitudinal
Gerlach et al, Gastroenterology1999

Approche du problme Impact du virus sur la voie IFN-

Nature des virus VHC VHC interfre avec la signalisation IFN-


Histoire naturelle de la maladie VHC NS5A interfre avec la PKR (RNA-stimulated protein kinase)
Par inhibition de sa dimrisation
que fait notre immunit ? Si mutations: efficacit thrapeutique, documente pour gnotype 1b
Impact des traitements Une rgion dtermine de NS5A (ISDR = Interferon Sensitive
Determining Region), lieu de mutations, interfre directement
quels rsultats ?
avec cette signalisation
Physiopathologie des hpatites chroniques C E2 pourrait galement interfrer avec la signalisation via IFN-
Par phosphorylation de PKR
Quelles perspectives ?

3
JM Pawlotsky, Antiviral Research 2003 JM Pawlotsky, Antiviral Research 2003

Approche du problme
Mcanismes daction non
dmontrs: Nature des virus VHC
les donnes convergent pour Histoire naturelle de la maladie VHC
que fait notre immunit ?
voquer une efficacit indirecte, par Impact des traitements
lamlioration quels rsultats ?
des dfenses immunes Physiopathologie des hpatites chroniques C
Quelles perspectives ?

Immunit / Charge Virale Cellules immunocomptentes du foie normal


au cours des hpatites chroniques C
Evolution vers lhpatite chronique = rgle usuelle

Pas de donnes immunologique sur 20 ans


Rarfaction des clones T CD4 + anti-protines non structurales
Quasi-absence des clones T CD8+ spcifiques
relation entre ces T CD8+ spcifiques et le taux de transa
Dissociation CV et quantit de cellules T spcifiques
dissociation entre CV plasmatique et CV tissulaire

4
Pourquoi des diffrences de rponses immunes Dynamique et homostasie cellules T
entre individus ?
au cours des infections virales ?
modles mathmatiques...
Dpendantes des antignes
Recrutement lymphode
Quelques molcules impliques -
via IFN
Recrutement sous- populations
dans la coopration cellulaire... T variable dans le temps
d abord T CD4
puis T CD8
cellules B viro -dpendantes
recrutement spcifique
cytokines
superantignes
interactions cellules T- APC
production thymique
Jankovic D., Zhugong L., Gause W.C. et al,
Trends in Immunology, 2001
rgulation par apoptose

Lien homostasie cellules T Raisons thoriques/exprimentales pour un rle


et volution hpatite chronique C ? de lapoptose des cellules T dans la
physiopathologie de lhpatite chronique C
Cellules T actives (non infectes)
Rle des B mineurs, rle des T CD4+ majeur
Hpatocytes Infection chronique = inflammation chronique
VHC+ VHC - Ag viraux = afflux de cellules immunocomptentes
Activation chronique des cellules T
VHC+ VHC VHC+ - Apoptose et Hpatocytes: prsentation Ag mais stimulation T imparfaite
dommages collatraux Expression de la voie Fas/Fas-L
Hpatite Induite physiologiquement
Hpatite ? ?
chronique chronique Induite par des protines virales
T
minime svre Perturbation chronique du rseau des cytokines
Mcanismes ? Excs de TNF, dfaut dIL-2, balance IL-10 / IL-12 ?
T CD8 cytotoxiques par induction dapoptose

REALITES DU PHENOMENE APOPTOTIQUE (1)


Apoptose cellules T et Score METAVIR
Analyse au Hoechst

CD4 + T cells CD8 + T cells


100

90

80 P = 0.001 P = 0.045
70

60

50

40

30

20

10

-10
MHD SHD MHD SHD

Intensit fluorescente

5
Pourquoi des
Premires constatations diffrences de
rponses immunes
Compartimentalisation immunitaire
intrt tude des lympho priphriques ? entre individus ?

Diffrence apoptose contrles / VHC

Apoptose cellules T : seul paramtre biologique


corrl l histo-pathologie
non lie la charge virale
% apoptose >> % cellules spcifiques
interactions virus - hte dltres Jankovic D. et al,
Trends in Immunology, 2001

Approche Molculaire Voies Variabilit dexpression de molcules


dactivation / apoptose participant lactivation T
Etude d expression multignique par PCR en temps rel
partir de PBMC de 5 volontaires sains 50
14

% double positives hpatiques


45 12
1000000,00
40
10
800000,00 35
% CD4 CD28 foie

< 1
8
600000,00 1 30
> 1

2 25 6

400000,00
20
3 4

200000,00 15
4 10
2

0,00
5
TNF-R1

0
FAS -l
IFN-g

5
CD4

TNF

FAS

CTLA4
Bcl-2

CD28
IL2

+
+

F+
IL2
FN

TN
3+
3+I

3+
CD
CD

CD
VHC+
Contrles

Cytokines Dynamique et homostasie cellules T


et donnes anatomopathologiques au cours des infections virales ?
Modles mathmatiques...
14
Dpendantes des antignes
% double positives hpatiques

12 Recrutement lymphode
Score METAVIR via IFN-
10
<1 Recrutement sous- populations
8 T variable dans le temps
>1 d abord T CD4
6
puis T CD8
4 cellules B viro -dpendantes
2
recrutement spcifique
cytokines
0
superantignes
interactions cellules T- APC
+

F+
+

IL2
FN

TN
3+
3+I

production thymique
3+
CD
CD

CD

rgulation par apoptose

6
VOIE Fas/Fas- Ligand
Impact dun anti-TNF-

,3

% of variation via anti-TNF


,2
,1
0
-, 1
patients
-, 2
controls
-, 3
VHC -
-, 4
VHC + -, 5
-, 6
-, 7
Liver T CD4 Liver T CD8

2 groupes selon l atteinte histologique


cirrhose et HCA (n = 23) versusHCP (n = 28)
Perspectives
Intgrer dans les potentialits volutives
dure maladie identique (8 ans en moyenne) lhtrognit inter-individuelle
mme facteurs de risque dacquisition des virus Polymorphisme des cytokines
mme ge (33 ans en moyenne), mme sex - ratio
Polymorphisme gnes de rgulation de lapoptose ?
Intox OH prsente de manire comparable
diffrences: Prendre en compte lvolutivit de lhpatite chronique
de statut immunitaire rplication virale ?
T CD4: 364 versus 110 Anergie T ou au contraire activation ?
T CD8: 705 versus 360
ATCD infection opportuniste Dissociation inflammation / fibrose: pas les mmes cellules ?
9/23 (39%) versus 22/28 (78%) Proposer une immunothrapie associe ou non au
traitement anti-viral
Roger PM et al, Press Med 1998.
Anti-TNF ?
Impact de lindividu Corticodes ?
Autres ?
sur lvolution de la co-infection ?