III MATERIAL:

- Suspensin bacteriana Mixta: Streptococos, Staphylococcus, E. coli.

- Asa bacteriolgica

- Mechero.

- Placas de Agar Nutritivo

- Placas de Agar Mc Conkey

 - Placas de Agar XLD
- Placas de Agar Manitol salado

- Placas de Agar SS
- Tubos con Agar Nutritivo inclinado.
- Tubos con Agar Nutritivo.

I. PROCEDIMIENTOS:

1. MTODO DE AISLAMIENTO.-

AISLAMIENTO POR DISEMINACIN (mtodo en superficie).

- Esterilizar un asa bacteriolgica y dejar enfriar por 5 seg.
- Con el dedo meique de la mano derecha quite el tapn de algodn del tubo con
suspensin bacteriana; flamee la boca del tubo; introduzca el asa bacteriolgica y
retire una asada de la suspensin; vuelva a flamear el tubo por sus bordes y
coloque de nuevo el tapn de algodn; deje el tubo en la gradilla.
- Flamear los bordes de una placa de agar nutritivo u otro medio. Levante la tapa de
la placa justamente lo necesario para introducir el asa bacteriolgica cuya carga es
diseminada por la superficie del agar mediante el proceso de estriacin por
agotamiento. Segn esto la primera estriacin contendr ms cultivo que la
segunda, esta ms que la tercera y as sucesivamente de modo que en las ltimas
estar suficientemente agotado para dar colonias sueltas.
- Marcar las placas sembradas, con plumn indeleble, a fin de que permitan su
identificacin posterior.
- Incubar las placas en posicin invertida a 37C por 24 hs.
- Realizar el estudio de las colonias y/o realice el Transplante de las colonias
para obtener cultivos puros.

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2. MTODOS DE TRANSPLANTE:
SIEMBRA POR ESTRAS EN AGAR INCLINADO:
- Esterilizar una aguja bacteriolgica. Dejar enfriar 5sg.
- Tomar con la mano izquierda una placa con colonias en
desarrollo, flamee los bordes de la placa y levante justamente lo
necesario para introducir la aguja bacteriolgica y extraer una colonia.
- Tomar un tubo con agar inclinado: con el dedo meique de la
mano derecha quite el tapn de algodn; flamee la boca del tubo;
introduzca la aguja bacteriolgica que contiene la colonia y realice la
siembra por estras sobre la superficie del agar inclinado .
- Retire la aguja bacteriolgica, vuelva a flamear el tubo por sus
bordes y coloque de nuevo el tapn de algodn. Deje el tubo en la
gradilla.
- Marcar los tubos a fin de identificarlos posteriormente.
- Incubar los tubos sembrados a 37C durante 24 hs.
- Realice el estudio de las caractersticas del cultivo.
SIEMBRA EN AGAR POR PICADURA
- Realice los pasos 1 y 2 del mtodo anterior.
- Tomar un tubo con agar no inclinado y con el dedo meique de
la mano derecha quite el tapn de algodn; flamee la boca del tubo;
introduzca la aguja bacteriolgica que contiene la colonia y realice la
siembra por picadura en el agar profundo.
- Retire la aguja bacteriolgica; vuelva a flamear el tubo por sus
bordes y coloque de nuevo el tapn de algodn deje el tubo en la
gradilla.
- Marcar los tubos a fin de identificarlos posteriormente.
- Incubar los tubos sembrados a 37C durante 24 horas.
- Realice el estudio de las caractersticas del cultivo.
SIEMBRA EN CALDO
- Esterilizar una aguja bacteriolgica. Dejar enfriar 5 seg.
- Tomar con la mano izquierda una placa con las colonias en
desarrollo, flamee los bordes de la plazca y levante justamente lo
necesario para introducir la aguja bacteriolgica y extraer una colonia.
- Tomar un tubo con caldo nutritivo; con el dedo meique de la
mano derecha quite el tapn de algodn, flamee la boca del tubo,
introduzca la aguja bacteriolgica que contiene la colonia y realice la
siembra por suspensin en el medio liquido.
- Retire la aguja bacteriolgica; vuelva a flamear el tubo por sus
bordes y coloque de nuevo el tapn de algodn. Deje el tubo en la
gradilla.
- Marcar los tubos a fin de identificarlos posteriormente.
- Incubar los tubos sembrados a 37C durante 24 horas.
- Realice el estudio de las caractersticas del cultivo.