1

REGLAS GENERALES............................................................................................................................... 2!
A.! COMPORTAMIENTO ............................................................................................................................ 2!
B.! INFORMES DE ANLISIS ...................................................................................................................... 4!
Informe Largo....................................................................................................................................... 4!
Informe Corto ....................................................................................................................................... 7!
C.! LIBRETA DE NOTAS.......................................................................................................................... 10!
D.! PROYECTO FINAL ............................................................................................................................. 11!
E.! EVALUACIN ..................................................................................................................................... 18!
REGLAS DE SEGURIDAD....................................................................................................................... 19!
QU HACER EN CASO DE ACCIDENTE .................................................................................................... 23!
IMPLANTACIN DEL PLAN DE HIGIENE QUMICA EN EL LABORATORIO DE ENSEANZA
DE QUMICA ANALTICA......................................................................................................................... 24!
USO DE LA BALANZA ANALTICA ...................................................................................................... 28!
CALIBRACIN DE EQUIPO VOLUMTRICO ..................................................................................... 34!
PRE-LAB.................................................................................................................................................... 35!
ACTIVIDAD ESPECIAL 2 ......................................................................................................................... 36!
PREPARACIN DE SOLUCIONES Y CURVA DE CALIBRACIN................................................. 36!
PRE-LAB.................................................................................................................................................... 37!
PRE-LAB.................................................................................................................................................... 40!
EVALUACIN ESTADSTICA DE INDICADORES CIDO-BASE................................................... 42!
PRE-LAB.................................................................................................................................................... 46!
ACTIVIDAD ESPECIAL: PREPARACIN DE AMORTIGUADOR SALINO DE FOSFATO ........ 48!
PRE-LAB.................................................................................................................................................... 52!
DETERMINACIN POTENCIOMTRICA DE MEZCLA DE FOSFATOS ....................................... 53!
Pre-Lab ................................................................................................................................................ 67!
PREPARACIN DE UN AMORTIGUADOR PARA MEDIDAS POTENCIOMTRICAS............... 68!
PRE LAB .................................................................................................................................................... 70!
DETERMINACIN POTENCIOMTRICA DE FLUORURO EN UNA MUESTRA UTILIZANDO
UN ELECTRODO SELECTIVO................................................................................................................ 71!
PRE LAB .................................................................................................................................................... 76!
DETERMINACIN DE MANGANESO EN ACERO MEDIANTE ESPECTROFOTOMETRA ..... 77!
PRE LAB. ................................................................................................................................................... 82!
SEPARACIN DE AMINOCIDOS MEDIANTE CROMATOGRAFIA DE CAPA FINA ............... 84!
PRE-LAB.................................................................................................................................................... 85!
 2

REGLAS GENERALES

A. Comportamiento

1. Est prohibido hablar en voz alta, cantar, fumar, comer, beber y recibir visitas dentro
del laboratorio. Si cualquier persona extraa al laboratorio desea hablar con usted,
podr hacerlo en el pasillo, nunca en el saln de laboratorio. Esto es aceptable slo
en casos de emergencia y de forma breve. Las interrupciones deben ser breves
y en casos excepcionales.

b. Limpie todo el equipo y rea que utiliza al comienzo y final del laboratorio. La mesa
de trabajo y el material deben mantenerse escrupulosamente limpios y en orden.
Todos los utensilios de cristal deben enjuagarse con agua destilada antes de
usarlos. Estos deben estar libres de grasa, de modo que humedezca uniformemente
su superficie interior. Tan pronto como se ha utilizado una pieza de un aparato, debe
sta limpiarse y colocarse de nuevo en su lugar.

Esta tarea ser supervisada diariamente por el ayudante de ctedra y ser

considerada en la nota de apreciacin.

c. Durante el curso de las operaciones mantenga cubiertos los recipientes para

prevenir la entrada de polvo, herrumbre de hierro de los anillos y soportes, etc.
Rotule todos los recipientes que contienen soluciones, lquidos o slidos para
prevenir casos de equivocacin y confusin.

Es requisito que todo recipiente tenga una rotulacin que identifique su

contenido y las iniciales de la persona que introdujo el contenido.

4. Mantenga limpias y en orden las botellas en el armario. No ponga los tapones sobre
la mesa ni los intercambie. Srvase nicamente la cantidad de solucin o de reactivo
necesaria. Nunca devuelva a la botella de reactivo alguna porcin del mismo
que no haya sido usada.

5. No eche al piso y mucho menos por los vertederos o las ventanas papeles u otros
desperdicios slidos (no qumicos). Use el zafacn.

6. No debe usarse una pipeta para retirar porciones de lquidos corrosivos o venenosos
a menos que no sea estrictamente necesario. Pregunte al profesor antes de hacer
dicha operacin.

7 No debe entorpecer el trabajo de su compaero con movimientos bruscos o conver-

saciones en voz alta. No debe haber ninguna distraccin mientras est haciendo
una operacin de cuidado. No monopolice la balanza ni equipo de uso comn.
Recuerde siempre que su compaero est esperando que usted termine para l
usarla.
 3

8. No debe haber prdida de tiempo en un laboratorio analtico. Si inevitablemente

tuvo que detenerse una determinacin o actividad, se debe comenzar otra. Sin
embargo, no deben apresurarse las operaciones porque la prisa puede conducir a la
prdida de tiempo por necesidad de tener que repetir el anlisis. Esto se evita
llegando preparado para la tarea que ha realizarse, especialmente habiendo
realizados los clculos necesarios antes de llegar al laboratorio.

9. Antes de comenzar una determinacin, el estudiante debe leer cuidadosamente las

instrucciones y estar seguro de que las entiende perfectamente. Debe obtenerse los
instrumentos y los reactivos requeridos y hacerse un plan mental de las operaciones.

10. Debe planificar las tareas del da, de modo que pueda completarlas dentro del
perodo de laboratorio. Esto incluye comenzar a tiempo y terminar unos veinte
minutos antes de concluir el periodo para poder limpiar y recoger. El trabajo
debe distribuirse en tal forma que pueda interrumpirse en un punto conveniente. Por
ejemplo, no debe comenzarse una filtracin a menos que pueda terminarse
inmediatamente despus el lavado del precipitado. A veces resulta ventajoso hacer
las precipitaciones al final del perodo de laboratorio de modo que el precipitado
pueda sedimentar y digerir, si fuese necesario, en las horas siguientes. Consulte al
instructor o ayudante de ctedra.

De no terminar el periodo de laboratorio a tiempo se penalizar con 5 puntos

del informe correspondiente

11. No se puede trabajar en ms de dos experimentos a la vez. Entregue el informe del

anlisis inmediatamente despus que lo termine.

o
12. Es costumbre secar las muestras en el horno a 110 C en la mayor parte de las
determinaciones. Como se comprender, una muestra que sea secada en esta
forma no puede librarse completamente del agua no esencial, pero el procedimiento
tiene la ventaja de proporcionar una muestra de composicin constante con respecto
al agua. No deje sus muestras en el horno ms tiempo del necesario. Recuerde que
son muchos los estudiantes que deben usar el horno. Asegrese de siempre tener
botellas de pesadas limpias en su desecador.

13. Es requisito que cada estudiante tenga en todo momento en el laboratorio: gafas de
seguridad, bata de laboratorio, una libreta encuadernada, jabn, papel toalla,
papel de aluminio, bolgrafo de tinta indeleble, un marcador para vidrio y
alcohol isoproplico.
 4

B. Informes de Anlisis

Informe Largo

1. Usted estar redactando un informe con formato largo durante el semestre (descrito en
la pgina 16) y su profesor le indicar para cul de los experimentos se aplicar dicho
formato.
2. El informe debe escribirse en computadora. Para escribir el informe puede usar las
facilidades de computadoras del Centro de Cmputos de la Facultad de Ciencias
Naturales o las facilidades del Centro de Recursos Educativos del Departamento de
Qumica (CREQ) localizado en el CNL A-316. El programado de procesar palabras y
para preparacin de hojas de clculos electrnicos y grficas disponible tanto en el
Centro de Cmputos como en el CREQ es Microsoft Word y Microsoft Excel,
respectivamente. Durante el semestre usted ser responsable de aprender los aspectos
bsicos del uso de dichos programados, de modo que pueda utilizarlos para los
informes.

Naturalmente, aquellos estudiantes que tengan una computadora disponible en su hogar

con dichos programados (o equivalente) no necesariamente tienen que usar las
facilidades arriba mencionadas.

3. Es deseable que las tablas y grficas sigan el formato de la Asociacin Americana de

Qumica (vea ejemplo). Las mismas deben integrarse al texto del informe de laboratorio.
 5

4. Repase cuidadosamente el informe antes de entregarlo. Una vez sometido, usted no

podr hacer ninguna correccin o entregarlo nuevamente corregido.

5. La referencia a las pginas donde aparecen las observaciones, clculos y

discusin de resultados en la libreta tiene que ser parte de las referencias o
bibliografa correspondiente al informe.

6. Un informe entregado despus de la fecha y hora asignada estar sujeto a un descuento

del 10 % siempre y cuando no se exceda de un periodo de laboratorio despus de la
fecha asignada. No se aceptar ningn informe que se entregue dos o ms periodos de
laboratorio despus de la fecha lmite, sino existe una razn justificada. Si por alguna
razn no pudo terminar el experimento en el tiempo correspondiente en el itinerario, es
deber del estudiante hacer los arreglos pertinentes para ponerse a la par con el grupo y
poder entregar el informe en la fecha asignada.

7. El informe largo ser evaluado por criterios de exactitud, precisin y contenido general.
De obtener menos de 35% en un informe entregado a tiempo, se le adjudicar dicha
puntuacin (35) independientemente de lo que obtenga por debajo de ese valor.
Un informe no entregado o entregado despus de la fecha lmite de entrega con
tardanza, obtendr CERO. Por regla general, NO SE REPETIRN EXPERIMENTOS.

8. Estar sujeto a perder el 5% del informe toda persona que al terminar el perodo de
laboratorio todava est trabajando en alguna determinacin sin una justificacin
que sea razonable para el profesor.

9. El profesor tendr disponible los informes corregidos para que estos puedan ver sus
fallas y la nota obtenida; sin embargo, los informes no se devolvern a los estudiantes
sino que permanecern en los archivos del profesor. Es responsabilidad del estudiante
tener en su libreta de laboratorio TODA LA INFORMACION CONCERNIENTE al informe
 6

(incluyendo todos los datos, los cmputos, anlisis estadstico, grficas (si aplica),
discusin de resultados y conclusiones) antes de entregar el informe. Es la libreta el
registro de todo el trabajo de laboratorio.

10. El ltimo da para entregar algn informe fuera de la fecha asignada ser
estipulada por el profesor.

Formato Informe Largo

Ttulo: Ttulo del experimento

Autor y # de muestra: Quin escribe el informe y el nmero de muestra que le fue

asignado (si aplica)

Extracto: Escriba un resumen, expresado con el mnimo de palabras

posible, del trabajo realizado. Esta parte debe contener la
contestacin a las siguientes preguntas: Qu se hizo?, porqu
o para qu se hizo? (cul fue el propsito?), cmo se logr el
propsito? (cmo se hizo?), cules fueron los resultados ms
relevantes?, cul fue la conclusin? (incluyendo los factores
ms relevantes que llevaron a los resultados). El extracto debe
redactarse lo ms breve posible sin perder la esencia de lo que
es el propsito, la metodologa y los resultados del mismo. Este
se redacta luego de finalizar todas las partes del informe, de
modo que ste sea un resumen de todo lo importante. Es
recomendable que luego de redactarse, se revise varias veces
para utilizar el lenguaje ms directo y evitar uso de palabras
innecesarias. Este se redactar en tiempo pasado e impersonal.

Introduccin: Incluya informacin de trasfondo que sostenga la importancia o

relevancia del experimento o anlisis. Incluya informacin sobre el
marco terico correspondiente a la tcnica anlitica, la
metodologa, la muestra, procesos matemticos, etc.
.
Materiales y Mtodo: En esta seccin se mencionarn los reactivos qumicos utilizados
con sus datos relevantes como: pureza, suplidor o manufacturero,
concentracin, etc. Esto puede incluirse como parte de la
redaccin del procedimiento. Se incluir un resumen corto (en
prrafo) del procedimiento llevado a cabo. ste ser redactado en
pasado y de forma clara, conteniendo toda la informacin
relevante para que cualquier qumico pueda repetirlo si as lo
desease.

Discusin de Resultados: En esta seccin se presentan los datos obtenidos organizados en

tablas, siempre que sea posible. Se incluirn pesadas, volmenes
y medidas hechas con instrumentos. Todas las tablas deben
contener un ttulo adecuado y las columnas debidamente
encabezadas. Todos los valores deben incluir las unidades
correspondientes y presentarse al nmero de cifras
correspondiente al equipo usado para la medida. Discuta todos
resultados obtenidos, explique su significado y/o implicaciones,
compare con los resultados esperados o informados en la
literatura, e incluya en el texto o haciendo referencia a las tablas,
grficas los resultados o valores que sustentan sus aseveraciones.
 7

Incluya un ejemplo de cada uno de los cmputos realizados para

obtener el resultado final. No describa el cmputo. No repita los
procedimientos. Asegrese de tener los ttulos e identificacin de
ejes de la grfica de modo correcto y lo suficientemente especfico
para que la grfica pueda ser interpretada por el lector del modo
esperado. Discuta detalladamente las posibles fuentes de error y
su impacto en los resultados.

Referencias: La bibliografa debe escribirse siguiendo el formato de ACS.

Puede obtener informacin de este formato en el primer ejemplar
del mes de enero de cada ao de la revista Analytical Chemistry o
en el libro The ACS Style Guide: A Manual for Authors and Editors,
Second Edition Dodd, J.S.;American Chemical Society:
Washington DC, USA, 1997. Ambos recursos estn disponible en
la biblioteca de la Facultad de Ciencias Naturales. Tambin puede
encontrar esta informacin en la seccin de enlaces de la pgina
electrnica del curso en blackboard.

Informe Corto

1. Usted presentar un total de 3 informes en formato corto. El mismo tendr dos partes: 1)
una plantilla de EXCEL con su nombre, # de estudiante, # de muestra o desconocido,
todos los datos tabulados, informacin til para llevar a cabo los cmputos (% de pureza,
masas molares, etc.) y los cmputos con los cuales se obtiene el resultado final
incluyendo el anlisis estadstico y grficas (si aplica), y 2) uno de los tres elementos
distintivos de un informe largo: extracto, introduccin o discusin de resultados. Para
cada informe corto, su instructor le indicar cmo deber quedar presentada la plantilla
en EXCEL y cul de los tres elementos antes mencionados se incluir. Note que se
requiere incluir tanto la plantilla con los resultados como la plantilla con las frmulas
utilizadas. En general, este informe debe ser entregado en papel. No obstante, su
profesor de laboratorio podra preferir la entrega a travs del correo electrnico en cuyo
caso l (o ella) le informar oportunamente.

2. El criterio principal en la evaluacin de los informes cortos es la exactitud, seguido del

uso y aplicacin correcta de las frmulas para obtener los resultados y finalmente la
parte escrita (extracto, introduccin o discusin de resultados). Esta ltima parte tiene el
propsito primordial de proveerle prctica redactando informacin que normalmente se
incluye en un artculo de investigacin cientfica. Usted siempre deber procurar que su
profesor(a) le indique sus fallas o deficiencias en estos informes para as desarrollar
adecuadamente su habilidad para comunicar informacin cientfica efectivamente.

3. Con excepcin del formato del informe y los criterios de evaluacin del punto No. 2, las
reglas que aplican a los informes largos aplican tambin a los informes cortos.
 8

Formato Informe Corto

Hoja electrnica (resultados)

Grficas:
 9

Hoja electrnica: Frmulas

Informes Especiales

Durante el semestre usted presentar 3 o 4 informes especiales correspondientes a las

siguientes actividades de laboratorio:
Calibracin de equipo volumtrico
Curva de Calibracin
Preparacin de Amortiguadores

Cada una de esas actividades tiene su propia gua para el informe.

NOTA IMPORTANTE:

En la redaccin de su informe, no es admisible copiar informacin alguna de un informe o

libreta que no sea la suya, ni de ninguna otra fuente. El copiar informacin, datos,
cmputos, discusin, conclusiones y resultados en general que no sean los que usted
obtuvo en el laboratorio constituye PLAGIO. Si usted comete plagio, estar sujeto(a)
sanciones que pueden ir desde obtener F en el curso hasta la expulsin sumaria de la
Universidad.
 10

C. Libreta De Notas
(Consulte la seccin de Laboratorio en Blackboard donde encontrar una descripcin ms
detallada de cmo llevar su libreta de laboratorio )

La veracidad de los datos es de crtica importancia en todo experimento o

anlisis. El no seguir estas reglas de documentacin, podra dar margen a
entender que los datos han sido manipulados y lo que puede interpretarse
como posible fraude, lo cual no es aceptable. Por tanto se descontar 2
puntos por cada error de documentacin, independiente de que sea el
mismo error, de la nota de la libreta.

1. Todas las observaciones deben hacerse directamente en la libreta de notas. Est

prohibido el uso de papeles sueltos y el de una segunda libreta para este propsito. Use
una libreta encuadernada de carpeta dura.

2. Use tinta indeleble. No borre. Si comete algn error o daa alguna determinacin anule
de manera que pueda leerse lo anulado (con dos lneas horizontales paralelas).
Escriba sus iniciales y la fecha lo ms cercano posible a lo tachado. Nunca escriba
sobre un dato o palabra para tratar de corregir. Mencione la razn por la cual se tacha en
caso que no sea obvia la razn. Si la correccin anula ms de un dato o una seccin
completa es necesario escribir la razn para ello.

3. Cada pgina debe estar numerada. Enumere todas las pginas de la libreta (ambos
lados) desde la primera pgina, antes de comenzar a usar la libreta. Nunca arranque
pginas a su libreta de laboratorio. Cada pgina de comienzo de un experimento o
continuacin de un experimento inconcluso debe estar encabezada por la fecha y
el ttulo de la determinacin que se est realizando.

4. La primera pgina de la libreta debe contener la siguiente informacin:

Nombre completo
Nmero del apartado
Nmero de la balanza
Nmero de muestra
Nombre del Profesor(a) / Oficina / Departamento

5. La segunda y tercera pgina deber reservarse para un ndice.

6. La libreta de laboratorio es su bitcora del trabajo de laboratorio y debe escribirse todo

cual se hizo con las fechas correspondientes al momento en que se hizo el trabajo. Debe
reflejar lo que usted hizo y no lo que las instrucciones decan que hiciera. Aunque debe
haber concordancia entre las instrucciones y lo que se hizo, hay circunstancias en que
se hacen leves modificaciones, las cuales deben aparecer documentadas. Tenga
especial cuidado de apuntar en su libreta todos los cambios al procedimiento, los
porcentajes de pureza, el peso molecular y cualquier otro dato relevante de las
substancias utilizadas.
 11

7. Deben distribuirse bien los datos de cada determinacin. En la etapa de preparacin

para el laboratorio debe visualizarse qu datos y / o observaciones se tomarn y
preparar, siempre que sea apropiado, tablas para tomar dichos datos. Se incluirn los
siguientes detalles: fecha o fechas del anlisis, mtodo del anlisis (generalmente es
suficiente la referencia a la fuente del procedimiento), peso de la muestra, peso del
precipitado calcinado en los procedimientos gravimtricos, lecturas de la bureta y
molaridades o normalidades en los procedimientos volumtricos, cmputos e informe de
los resultados incluyendo el anlisis estadstico pertinente. Se deben indicar todos los
calentamientos hasta peso constante. Las observaciones que tengan alguna relacin
con los resultados se deben anotar. En general, todo lo que se pide en un informe corto
debe aparecer tambin en la libreta. De hecho, la libreta debe mantenerse al da con
toda la informacin de un anlisis hasta su culminacin incluyendo la discusin de
resultados y conclusin. No es aceptable completar clculos, discusin/conclusin
en una fecha posterior a la fecha de entrega del informe de dicho experimento. De
no ser as no recibir crdito por esas partes en la evaluacin final de la libreta.

8. Se documentar todo en la libreta en el orden ejecutado, lgico y cronolgico. No se

dejar pginas ni espacios en blanco en ningn momento. De tener que intercalar datos
de algn experimento, al comienzo de la pgina se anotar el ttulo del experimento, la
fecha actual y referencia a las pginas de la cual es continuacin. Todo espacio dejado
en blanco, por error, debe cancelarse con una lnea diagonal, escribir las iniciales y la
fecha , para evitar aadir informacin no cronolgica. Si un experimento continuara en
pginas no subsiguientes debe hacerse referencia en qu pgina contina.

9. Toda documentacin de informacin tomada de un experimento debe ser verificada por

una segunda persona para as constatar fechas y datos tomados durante el periodo
de laboratorio. Para esto el estudiante trazar una lnea al terminar de anotar los datos
del da, pondr su firma y la fecha, luego el ayudante de ctedra o el profesor de
laboratorio pondrn sus iniciales y fecha.

10. Esta libreta debe entregarse en la fecha que se fije para entregar el ltimo informe
de laboratorio. Recibir nota de cero (0) por la libreta si no la entrega o si la
entrega despus del da y la hora sealados.

D. Proyecto Final
Luego de concludos los experimentos rutinarios del laboratorio, los estudiantes
organizados en parejas llevarn a cabo el anlisis de una muestra para determinar
cuantitativamente una especie qumica. Cada pareja llevar a cabo un proyecto asignado
por el profesor(a) y este utilizar un periodo del laboratorio para discutir los objetivos
generales de los proyectos, las fuentes de informacin que necesitan y los recursos
disponibles, entre otros aspectos. El producto del proyecto ser un informe escrito y una
presentacin oral. El informe escrito debe seguir el esquema de un artculo de la
literatura (siguiendo el formato de un informe largo):

Esquema General de la Presentacin Final

I. Extracto
II. Introduccin
a. Importancia del Anlisis
 12

b. Descripcin de la muestra incluyendo la concentracin del analito bajo

circunstancias tpicas
c. Origen de la seal analtica
III. Materiales y Mtodo
a. Reactivos y Equipo
b. Procedimiento
i. Proceso de muestreo
ii. Preparacin de la muestra para anlisis
iii. Justificacin de las cantidades tanto de muestra como de reactivos que
se usen para llevar a cabo el anlisis.
IV. Resultados
a. Los resultados, incluyendo los que provienen de la evaluacin estadstica, se
presentan en forma tabulada y/o grfica.
b. Se incluye un ejemplo de cmputos para cada serie de datos que aplique.

V. Discusin
a. Interprete los resultados de acuerdo a los objetivos del anlisis. Debe comenzar
esta parte indicando cuales eran los objetivos se pretendan alcanzar y cmo los
resultados evidencian el logro de los mismos.
b. Incluya una breve discusin de posibles fuentes de error que pudieron afectar
los resultados y en qu forma los afectaba.
c. En su discusin tambn debe incluir por lo menos un elemento de control de
calidad o validacin que haya usado o que pudo haber usado como evidencia
de que los resultados obtenidos fueron vlidos.

El informe oral debe ser una sntesis del informe escrito en el cual destaca la importancia del
anlisis (de qu trata el anlisis?), la descripcin del mtodo (cmo se llev a cabo el
anlisis?), los resultados (qu se obtuvo?), cmo se interpretan los resultados y conclusiones
relevantes. La puntuacin que se obtenga en esta presentacin tomar en cuenta entre otras
cosas: el uso apropiado del vocabulario aprendido en clase, la organizacin de la presentacin y
la claridad con que se exponen las ideas, la correccin en la aplicacin de los conceptos que se
presenten, y la preparacin que demuestren los presentadores a la hora de contestar preguntas
de la audiencia. Estas presentaciones sern evaluadas por el(la) profesor(a) del laboratorio, los
ayudantes de ctedra y el profesor de la clase. La puntuacin mxima por esta presentacin
(oral y escrito) es 50 puntos.
 13

Gua para la correccin del contenido del Proyecto Final del laboratorio

Esta rbrica toma en cuenta tanto el trabajo escrito como la presentacin oral. La puntuacin en
cada rengln refleja el valor promedio de esos dos aspectos del proyecto. El contenido
representa el 80% del proyecto. Los aspectos tcnicos de la presentacin constituye el otro
20%. Esos aspectos se recogen en una rbrica aparte (ver pgina 10).

Rengln Puntuacin
I. Extracto (5)
1) Qu y por qu se hizo? (planteamiento del problema) 1
2) Cmo se hizo? (mtodo/estrategia experimental) 1
3) Qu se obtuvo? (resultados) 1
4) Cules fueron las conclusiones e implicaciones? 2
II. Introduccin (9)
Indica la importancia del Anlisis 2
Describe la muestra incluyendo la concentracin del 3
analito bajo circunstancias tpicas
Describe el origen de la seal analtica. Se entiende por
seal analtica la propiedad que se mide y que guarda
proporcin con la cantidad del analito presente en la 4
muestra. En este caso el estudiante describe el proceso
fsico, qumico o fisico-qumico que est asociado a la
propiedad que se mide.

III. Procedimiento (16)

Redacta/Presenta adecuadamente el procedimiento 5
experimental
Describe brevemente el proceso de muestreo 3
Describe en trminos generales la preparacin de la
muestra para anlisis 2
Justifica el uso de reactivos 3
Justifica las cantidades tanto de muestra como de
reactivos que se usan para llevar a cabo el anlisis.
IV. Resultados (22)
Presenta los resultados de manera organizada (usa 4
tablas y grficas apropiadamente)
Lleva a cabo correctamente los cmputos pertinentes al 4
anlisis.
Incluye el cmputo de parmetros estadsticos y el 4
anlisis de error correspondiente.
V. Discusin (15 %)
Interpreta los resultados de acuerdo a los objetivos del 5
anlisis.
Incluye una breve discusin de posibles fuentes de error 5
que pudieron afectar los resultados y en qu forma los
afectaba.
Incluye por lo menos un elemento de control de calidad 5
que se pueda usar como evidencia de que los resultados
obenidos son vlidos.

VI. Referencias 3
Las referencias estn apropiadamente citadas y
redactadas siguiendo el formato del ACS
VII. Ejecucin Experimental 10
 14

Se prepar con anticipacin y trabaj con

organizacin, tena un plan de trabajo bien
estructurado
Aplic las tcnicas de laboratorio correctamente.
Ejecut de manera reflexiva y autocrtica (si
cometi errores, los detectaba y los correga).
Us los recursos disponibles con prudencia.
Recopil los datos en su libreta de laboratorio de
manera adecuada.

VIII. Presentacin (ver rbrica ampliada abajo) 20

Total Contenido + Presentacin


Rengln 1 2
Cabalidad No se incluyeron todas las
partes requeridas (trasfondo,
procedimiento, cmputos y
anlisis estadstico,
validacin) o lo que se incluy
no result ser apropiado.
Organizacin y La audiencia no pudo entender
Claridad la presentacin ya que no hubo
una secuencia lgica de la
informacin
Preparacin y No se percibi dominio alguno
Conocimiento del del tema.
Tema
Elementos Se usaron elementos visuales
Visuales superfluos o no us ninguno.
Correccin en el La presentacin tuvo 4 o ms
Lenguaje errores gramaticales.
Proyeccin de la El estudiante demostr mucha
Voz dificultad para proyectar su voz
de modo que personas ms
distantes en el saln
difcilmente pueden escuchar.
Hubo muchos errores de
pronunciacin o problemas de
diccin.
Manejo de las Tuvo mucha dificultad para
Preguntas de la contestar la mayora de las
Audiencia preguntas; las contestaciones
eran vagas, imprecisas o
15
3 4
Se incluyeron casi todas o Se incluyeron todas las Se incluyeron y elaboraron
todas las partes requeridas partes requeridas y se apropiadamente todas las
pero las mismas debieron elaboraron a un nivel partes requeridas y las
estar mejor elaboradas. apropiado pero se mismas se presentaron sin
observaron pequeos que hubiese errores
errores u omisiones de tipo conceptuales ni de
conceptual o de procedimiento.
procedimiento.
La audiencia sigui la La presentacin sigui una Se present la informacin
presentacin con dificultad secuencia lgica que la no solo en forma lgica sino
ya que la(el) estudiante audiencia poda seguir sin que se hizo de manera que
brinc de un tema a otro dificultad. despertaba el inters de la
sin que hubiese audiencia y la motiv a
transiciones adecuadas. conocer ms del tema.
La(el) estudiante se not un La(el) estudiante se sinti La(el) estudiante se prepar
tanto incmoda(o) con la cmoda(o) en la muy bien y demostr un
informacin que estaba presentacin, demostr conocimiento cabal de su
presentando buena preparacin, y se tema de presentacin.
expres con pocos titubeos.
Aunque se us uno que Aunque se usaron Hubo un nmero apropiado
otro elemento visual, se elementos visuales que de elementos visuales para
ech de menos un nmero estaban relacionados a la explicar y reforzar los
mayor de elementos presentacin, falt uno que conceptos y procesos que
visuales para clarificar los otro elemento visual para se presentaron.
conceptos o procesos que aclarar al menos uno de los
se pretenda presentar. temas presentados.
La presentacin tuvo 3 La presentacin no tuvo La presentacin no tuvo
errores gramaticales. ms de 2 errores errores gramaticales.
gramaticales.
El tono de voz del La proyeccin de la voz fue La proyeccin de la voz fue
estudiante fue bajo y a clara y la mayora de la clara y toda la audiencia
veces la audiencia tena audiencia escuch bien escuch bien toda la
dificultad para captar lo toda la presentacin. Se presentacin. No se
dicho en la presentacin. percibieron errores percibieron errores de
Se percibieron errores de menores de pronunciacin pronunciacin ni hubo
pronunciacin de algunas o diccin. problemas de diccin.
palabras o problemas de
diccin.
Tuvo alguna dificultad Contest la mayora de las Contest todas las
contestando preguntas pero preguntas con propiedad y preguntas con propiedad y
contest por lo menos la correccin. Tuvo dificultad coreccin. Demostr
mitad de ellas con alguna que otra dominio cabal del tema.

incorrectas. Al contestar no
demostr que conoca gran
parte del tema.
Manejo del No hubo buen manejo del
Tiempo tiempo. La presentacin result
muy corta (menos de 15
minutos) o muy larga (ms de
45 minutos)
correctamente. Al contestar pregunta que debi haber
demostr dominio de no contestado. Al contestar,
menos del 50% del tema. demostr dominio de no
menos del 75% del tema.
Se tuvo que usar parte del El tiempo se manej
tiempo de las preguntas bastante bien ya que se
para completar la tom muy poco tiempo de
presentacin. las preguntas para
completar la presentacin.
16
Hubo un excelente manejo
del tiempo ya que la
presentacin dur entre 20
y 30 minutos y hubo
suficiente tiempo para
contestar preguntas.

Presentacin

Puntuacin
Rengln Peso Subtotal Comentarios
(1-4)

Cabalidad x 1.00

x
Organizacin y Claridad
0.750

Preparacin y Conocimiento del

x 1.00
Tema

x
Elementos Visuales
0.500

x
Correccin en el Lenguaje
0.125

x
Proyeccin de la Voz
0.125

Manejo de Preguntas x 1.00

x
Manejo del Tiempo
0.500
 17

Total Presentacin
(20)

Gran total: (Contenido + Presentacin) 2: ________________

 18

E. Evaluacin

La distribucin de puntos en el Laboratorio es como sigue:

Informe Largo (1) 20 pts

Informes Cortos (3) 30 pts
Informes especiales 20 pts
(3)
Pruebas Cortas 40 pts
Libreta 30 pts

Apreciacin 10 pts
Presentacin 50 pts
Total 200 pts

Habr pruebas cortas durante el semestre en el laboratorio. Las mismas tendrn el

propsito de corroborar su preparacin para los experimentos y la comprensin de
los mismos. Generalmente las pruebas cortas sern al comienzo del periodo de
laboratorio. Cualquier estudiante que llegue luego de 10 minutos de haber
comenzado el periodo de laboratorio, perder los puntos correspondientes a la
prueba corta. La hora de culminacin de la prueba ser la misma para todos los
estudiantes, es decir, si llega tarde tendr menos tiempo para contestar la prueba.

La apreciacin toma en cuenta su puntualidad, su preparacin para los experimentos,

y su manera de trabajar en el laboratorio (sigue instrucciones, es organizado(a),
mantiene limpia su rea de trabajo, termina a tiempo, no interrumpe a sus compaeros
con conversaciones o ruidos innecesarios, no monopoliza los equipos, compaerismo,
uso efectivo del tiempo y los materiales, etc).

Si tiene tres ausencias no justificadas se le dar una baja administrativa del

curso.

Si obtiene menos de 70% en el laboratorio, reprueba el curso

independientemente de lo que obtenga en exmenes.
 19

REGLAS DE SEGURIDAD

Los experimentos que usted llevar a cabo han sido diseados cuidadosamente para
reducir los riesgos de accidentes a un nivel mnimo. Aun as, existe siempre la posibilidad de
que ocurra un accidente en cualquier laboratorio de Qumica. Por tanto, es nuestro propsito
recalcar la importancia de observar las siguientes reglas de seguridad bsicas, que aunque son
de naturaleza general. le permitirn desarrollar su proyecto de laboratorio con un mnimo de
riesgos para usted y sus compaeros.

El no seguir cualquiera de estas reglas se penalizar con 5% de la nota de

apreciacin por cada ocasin en que no se siga la regla y no se permitir
continuar el experimento si la reglas no se siguen. Esto conllevara el no poder
realizar la labor asignada y las consecuencias seran las mismas de una ausencia
no justificada.

1. Es responsabilidad del estudiante conocer cabalmente qu es lo que va a hacer antes

de empezar su trabajo experimental. Para eso, debe leer cuidadosamente las
directrices que se dan en el manual de laboratorio para cada experimento. Despus de
leer el experimento, piense en las directrices dadas, trate de visualizar el modo en que
va a efectuar el proyecto, el tipo de equipo y/o instrumentos que necesitar, qu
operaciones manuales requiere el experimento en cuestin y los posibles peligros de
accidente asociados con cada una de las etapas anteriores. Adems de esto, es
responsabilidad del estudiante familiarizarse con la Hoja de Datos de Materiales de los
reactivos qumicos que utilizar, particularmente la seccin que identifica los peligros,
las instrucciones sobre primeros auxilios, y la seccin sobre cmo controlar y
descontaminar derrames (vea el formato general de un MSDS en la prxima seccin).
Los MSDS de todos los reactivos que se utilizan en el laboratorio estn disponibles en
la pgina electrnica del curso. En esa pgina encontrar el Plan de Higiene Qumica
del Laboratorio de Qumica Analtica, con toda la informacin relacionada a la seguridad
en el laboratorio.

2. Use gafas de seguridad durante todo el tiempo que permanezca en el rea de

laboratorio. No hay excepciones a esta regla, incluso su instructor y los tcnicos de
laboratorios deben seguirla. No se permite el uso de lentes de contacto. Estos
pueden reaccionar con algn compuesto voltil. Adems, puede alojarse alguna
substancia nociva entre el lente y el ojo y causar dao permanente a su visin.

3. Es obligatorio el uso de una bata de laboratorio que est abrochada, la cual proteger
su ropa y su piel en caso de que alguna sustancia corrosiva o un solvente orgnico se
derrame sobre usted. Esta regla es especialmente importante en nuestros das en que
el uso de ropa fabricada con fibras sintticas (niln, poliester, etc.) es comn. Las fibras
sintticas reaccionan o se disuelven rpidamente en contacto con sustancias orgnicas.
El uso de sandalias o zapatos abiertos est prohibido. El uso de pantalones
cortos, blusas o cualquier pieza de ropa que deje reas considerables de tu piel al
descubierto no es permitido. El pelo largo debe estar recogido debidamente.
 20

4. El estudiante debe conocer la localizacin exacta de los artefactos de seguridad

comunes en un laboratorio de qumica, tales como: extintores de incendio, frazadas de
sofocar llamas en la ropa, duchas de seguridad, fuente de lavado de ojos, etc. De este
modo, podr trasladarse (o trasladar a la persona accidentada) rpidamente al lugar
apropiado para atender una emergencia.

5. Si el experimento que va a efectuar requiere el uso de sustancias voltiles y/o

inflamables, asegrese de que no hay llamas (mecheros funcionando) en las cercanas.
Mientras sea posible, recurra al uso de planchas o mantas de calentamiento, las cuales
cumplen el mismo propsito que la llama de un mechero pero sin los peligros de
incendio inherentes en esta ltima.

6. Al calentar, debe cuidar de que la salida del envase que est calentando (tubo de
ensayo. matraz , vaso, etc.) est apuntando hacia un rea donde no se encuentren
personas trabajando.

7. Todo experimento que requiere el uso de gases, lquido o slidos txicos debe
efectuarse en los aspiradores. Recuerde que si usted puede oler una sustancia es
porque la est respirando y consecuentemente llevndola hasta el interior de su
organismo, sus pulmones. Ningn reactivo que ha sido colocado en el aspirador debe
ser sacado del mismo, a menos que se indique lo contrario.

8. Est estrictamente prohibido fumar, comer o beber mientras se permanezca en el rea

de laboratorio y los pasillos cercanos. Fumar, comer o beber envuelve el acercar las
manos a la boca; resultando ser la manera ms directa de intoxicarse con sustancias
qumicas. Lave sus manos frecuentemente durante y despus de terminar su proyecto.

9. Las visitas de extraos y las conversaciones sociales entre estudiantes durante

el desarrollo del experimento quedan totalmente prohibidas. La distraccin es la
causa ms comn de accidentes. Cualquier situacin de emergencia en que sea
necesario comunicarse con algn estudiante se har a travs de la oficina de
coordinacin.

10. El trabajo se realizar de modo independiente a menos que se indique lo contrario.

11. No se permitir trabajar a un estudiante que no estuvo presente durante las

explicaciones del experimento a menos que demuestre al instructor que conoce y
domina las directrices del mismo.
 21

Secciones de la Hoja de Datos de Materiales (MSDS, por sus siglas en ingls).

SECCIN 1: IDENTIFICACIN
Nombre del producto:
SINNIMO
FAMILIA QUMICA
FORMULA:
NMERO DE REGISTRO CAS:
FABRICADO POR

SECCIN 2: DATOS DE RIESGO DE LOS COMPONENTES

COMPONENTES PELIGROSOS

NMERO CAS

LMITES DE EXPOSICIN :

PEL, TWA TLV REL

SECCIN 3: IDENTIFICACIN DE PELIGROS

PRINCIPALES EFECTOS SOBRE LA SALUD
Y EFECTOS ADICIONALES A LA SALUD:

SECCIN 4: INSTRUCCIONES PARA PRIMEROS AUXILIOS

CONTACTO CON LA PIEL:
CONTACTO CON LOS OJOS:
INHALACIN:

INGESTIN:

SECCIN 5: MEDIDAS PARA COMBATIR EL FUEGO

PUNTO DE INFLAMACIN: %LEL %UEL

RIESGO DE INCENDIO Y EXPLOSIN:

MEDIOS DE EXTINCIN:
INSTRUCCIONES ESPECIALES CONTRA INCENDIOS:

SECCIN 6: DERRAMES, SALPICADURAS ACCIDENTALES

procedimiento para controlar y descontaminar derrames

SECCIN 7: MANEJO Y ALMACENAMIENTO

Temperatura de almacenamiento:

SECCIN 8: CONTROLES DE EXPOSICIN /PROTECCIN PERSONAL

INFORMACIN DE PROTECCIN:
PROTECCIN RESPIRATORIA:
GUANTES:
OTRAS PRCTICAS DE PROTECCIN:
 22

SECCIN 9: PROPIEDADES FSICAS Y QUMICAS

FORMA:
OLOR:
ASPECTO:
SOLUBILIDAD EN AGUA:
Punto de ebullicin inicial de los componentes orgnicos: Densidad ,
Presin de vapor

Densidad del vapor

Velocidad de evaporacin

SECCIN 10: ESTABILIDAD Y REACTIVIDAD

INESTABILIDAD:
INCOMPATIBILIDAD:
DESCOMPOSICIN:
POLIMERIZACIN:

SECCIN 11: INFORMACIN TOXICOLGICA

PRINCIPALES EFECTOS SOBRE LA SALUD
Los principales efectos txicos debidos a ingestin, inhalacin y contacto con la piel o los ojos
descritos en la exposicin de animales a los componentes incluyen:

SECCIN 12: INFORMACIN ECOLGICA

Biocompatibilidad de la sustancia con el medio ambiente

SECCIN 13: CONSIDERACIONES DE ELIMINACIN

requerimientos de RCRA para la disposicin de la sustancia

SECCIN 14: INFORMACIN SOBRE TRANSPORTE

DOT Hazardous Material Classification: Nmero de EPA

SECCIN 15: INFORMACIN REGULADORA

Limites y valores, restricciones para disposicin final

SECCIN 16: OTRA INFORMACIN

Esta MSDS ( Hoja de Datos de Seguridad del Material) es una recopilacin de la informacin
suministrada en los MSDS's obtenidos de los fabricantes de los productos qumicos contenidos
en este producto. Se consult el 29 CFR 1910.1200 como gua del MSDS.
 23

Qu Hacer En Caso De Accidente

Si usted observa las reglas de seguridad disminuir considerablemente la posibilidad de tener

un accidente. Pero debido a que ellos an son posibles, debemos estar preparados para esta
eventualidad. Estudie y memorice cuidadosamente las directrices dadas a continuacin. Ello le
permitir reaccionar rpida y eficazmente en caso de peligro. Recuerde que en caso de
accidente, la rapidez de reaccin y el conocimiento de las medidas que deben tomarse pueden
salvar a usted o algn compaero.

1. Cualquier accidente, por pequeo que sea, debe ser inmediatamente informado al
profesor a cargo de la seccin. (El, mejor que nadie, tiene la experiencia y el
conocimiento necesario para actuar correctamente).

2. En caso de entrar en contacto con sustancias irritantes y/o corrosivas, proceda del
siguiente modo: Si la sustancia es un cido, lave el rea afectada con agua en
abundancia y pida que alguien le consiga bicarbonato de sodio, el cual se aplicar en el
rea afectada en forma de una pasta Si el rea afectada es de gran extensin, mtase
debajo de la ducha de seguridad y accinela para tratar de este modo de diluir el cido
lo ms rpidamente posible. No se preocupe por su ropa, ella puede ser reemplazada.
Si la sustancia es una base, lave repetidamente con agua en abundancia. Haga
examinar sus ojos por un oculista, asegrese mediante una opinin mdica que no hay
peligro para su visin.

3. En caso de incendio, retrese rpidamente del rea en llamas, alerte a sus vecinos,
consiga el extintor de incendio ms cercano y trate de sofocar el fuego dirigiendo la
descarga a la base de las llamas. No debe pegar la boquilla de salida del extintor al
rea de fuego, por lo que debe alejarse de la fuente del mismo.

4. Si usted o alguno de sus compaeros est en llamas, arrjese (o arrjelo) al suelo y

ruede (o hgalo rodar) sobre el piso. Consiga una frazada de incendio y sofoque con
ella las llamas. Esto se consigue arropndose (o arropndolo) con la frazada. Cuide de
no asfixiarse (o asfixiarlo), deje siempre la cabeza al descubierto. Consiga ayuda
mdica tan pronto las llamas hayan sido sofocadas.

5. Si por casualidad alguien inhala una sustancia txica, traslade el afectado a un rea
ventilada. Consiga ayuda mdica inmediatamente.

6. En caso de quemaduras pequeas (con llamas, objetos calientes, etc.) lave el rea
afectada con agua en abundancia y luego aplique un ungento para quemaduras.

7. Todo estudiante debe llenar la hoja de Informe de Suceso inmediatamente, la cual se

encuentra en la Oficina de Coordinacin en el Segundo Piso de este edificio.
 24

Implantacin del Plan de Higiene Qumica en el laboratorio de enseanza

de Qumica Analtica.

El plan de higiene qumica (PHQ) es un documento que contiene toda la informacin necesaria
para conocer el manejo y disposicin de material o sustancias que se utilizan en los
laboratorios, incluyendo una descripcin sobre los recursos de informacin de esas sustancias
(MSDS), el uso apropiado de equipo de seguridad y qu hacer en caso de accidentes. Este
documento orienta sobre prcticas seguras e incluye la definicin de los trminos que tienen
que ver con la clasificacin de las sustancias, su almacenamiento y controles de proteccin.
Tambin es un documento que gua a los encargados o coordinadores de laboratorio a
implantar sus planes particulares de seguridad de acuerdo a los procesos y sustancias que se
emplean en su laboratorio.

El presente documento implanta el PHQ estipulado en el documento maestro, y aplica a los

laboratorios de enseanza de Qumica Analtica (QUIM3255 y QUIM3025). A continuacin se
presenta un diagrama que resume dicho plan de implantacin.
25
 26

Plan de Implantacin

Orientacin da 1

El primer da que se rene el grupo, el profesor de laboratorio discute los aspectos generales
sobre los asuntos de seguridad en el laboratorio. Estos aspectos son:
Vestimenta apropiada
Ubicacin y uso apropiado de equipo de seguridad
Hoja de Datos de Materiales (MSDS)
Qu hacer en caso de accidentes

Luego de esta discusin y de orientar a los estudiantes sobre los recursos de informacin
disponibles, durante el segundo da el profesor de laboratorio le administrar una prueba a los
estudiantes para corroborar su comprensin de las reglas generales del laboratorio y sobre las
prcticas seguras en el mismo.

En cada anlisis

Previo a un anlisis se designaran al menos 3 estudiantes que estudien los MSDS de las
sustancias que se usarn en el anlisis y sirvan de recurso en la discusin previa a la prctica.

Durante la discusin, el profesor indicar la ubicacin de los MSDS de las sustancias que se
usarn en el anlisis y resaltar los siguientes aspectos:
Manejo apropiado de las sustancias
Equipo de proteccin
Efectos nocivos de las sustancias
Primeros Auxilios en caso de contacto
Disposicin apropiada

En esta discusin los estudiantes designados como oficiales de seguridad tomarn una parte
protagnica como expertos luego de haberse estudiado los MSDS correspondientes.

Inventario de Sustancias

Se mantendr un inventario primario de todas las sustancias en el laboratorio, en formato EXCEL

con la siguiente informacin:
Nombre Qumico
CAS No.
Compaa
Hazard ID (I,C,T,EX,BHZ,RAD,CG)
Estado de Agregacin (l,s,g)
Cantidad (g, mg, kg, L, lbs, gal)
Localizacin
Tipo (C,P,MCY,M,OT)
Estatus de MSDS
Fecha de Compra
Fecha de Expiracin
Fecha de Revisin
Nombre de persona que revis

Se mantendr tambin un inventario secundario de las sustancias por anlisis, con la siguiente
informacin:
Sustancia
Cdigo de Salud <<Health Code>>
Cdigo de Inflamabilidad <<Flammability Code>>
 27

Cdigo de Reactividad <<Reactivity Code>>

Cdigo de Contacto<<Contact Code>>
Equipo de seguridad
Cdigo de almaceamiento <<Storage Color Code>>
Anlisis (nombre de la experiencia de laboratorio en el que se usa)
Cantidad por seccin que se usa (masa total)
Volumen de desperdicio (gal)
Tipo de uso (proceso o final)
URL de MSDS

El inventario secundario ser actualizado al comienzo de cada semestre y entregado a la oficina

de OPASO en formato electrnico y papel.
 28

Uso De La Balanza Analtica

Siendo la balanza analtica el instrumento fundamental para todo tipo de trabajo analtico
cuantitativo en qumica analtica, es importante que el estudiante tenga un conocimiento total y
se familiarice con el diseo y construccin, la teora de operacin y la exactitud inherente de la
balanza.

La balanza analtica detecta diferencias en peso de una dcima de miligramo, o sea,

0.0001 gramo. Para hacer pesadas con esa exactitud se requiere buena tcnica y alguna
prctica y sobre todo, una balanza que ha sido manejada con cuidado y ha sido mantenida en
buenas condiciones.

Dado el hecho de que las muestras con que trabajamos se hallan entre 0.1 y 1.0 g
generalmente, y que tratarnos de obtener una exactitud de una parte por mil, es por esta razn
que se pesa con 0.0001 g de exactitud.

Hay varias clases de balanzas analticas y an dentro de las de un solo platillo hay varios
modelos, pero aprendiendo a operar un tipo se hace ms fcil aprender a operar otros.
 29

La balanza analtica electrnica: Sartorius TE124S

1. Tornillos para nivelar 7. Despliegue de la medida de masa

2. Interruptor ON/OFF 8. Platillo
3. Ver contenido en memoria 9. Ventanilla para top loading
4. Tara secundaria 10. Puerta Corrediza
5. Acceso a menu secundario 11. Indicador de nivelacin
6. Botn de Tara

Instrucciones para el manejo de esta balanza

I. Nivelando la balanza:
 30

Nivele la balanza usando los tornillos (presentes en los cuatros extremos de la balanza) para
nivelar (1), moviendo uno a la vez y bien lentamente hasta que la burbuja en el indicador (11)
..est en el centro.
II. Prendiendo la balanza:

Apriete levemente el botn azl (2) y un

sonido interno indica que la balanza est
automticamente cotejndose para estar lista a
ser usada. El autocotejo aparecer en el
despliegue de medida de masa (7).
 31

III. Autocotejo:

Luego de cada presin del botn "ON"

aparecer en la esquina superior izquierda una
figura de diamante. Espere unos segundos y
aparecer el 0.0000 g.

IV. Control de Calidad:

El resultado de un peso ser tomando slo

cuando aparezca el smbolo de estabilidad "g"
en el "display".

V. Tara
 32

Para hacer uso de la tara presione el

botn de tara (6). Aparecer en el
despliegue de la medida de masa (7)
"0.0000 g."

Debe tener en cuenta:

1. Recuerde que siempre que presione los controles lo har en forma suave para evitar que
se dae el mismo.

2. Cuando la balanza marque 0.0000 g entonces coloque suavemente el objeto a ser

pesado en el centro del platillo. Asegrese de que la ventanilla de vidrio est cerrada
tanto durante la calibracin como cuando est pesando el objeto.

3. Nunca coloque un objeto caliente, mojado o hmedo en el platillo. Siempre usar banda
de papel de aluminio o la tenaza para colocar o sacar objetos en y de la balanza.

4. Nunca pese substancias qumicas directamente en el platillo de la balanza.

5. Limpie inmediatamente todo material que caiga dentro o en los alrededores de la

balanza.

6. Cuando termine de usar la balanza, asegrese de limpiar la balanza y sus alrededores,

cubrirla con el gorro plstico y de haberla apagado.

PESANDO POR DIFERENCIA

Es prctica comn llevar a cabo un anlisis cuantitativo en triplicado para que se
establezca precisin. Se ha demostrado matemticamente que tres resultados es el nmero
mnimo que puede ser promediado y estar razonablemente seguro de que los resultados estn
correctos. Muchos procedimientos industriales se corren en duplicado para ahorrar en tiempo y
en algunos casos si el analista es de experiencia y est familiarizado con el mtodo hace una
sola determinacin.
 33

La tcnica de pesada por diferencia fue desarrollada de manera que varias muestras
puedan ser pesadas en el menor tiempo posible y con un mnimo de error. Se hace de la
siguiente manera:
Se pesa la botella de pesada con toda la muestra
Peso de botella pesada y muestra 25.8976 g
Se frena la balanza y se remueve material con una esptula o sujetando la botella con
tenazas o banda de papel de aluminio y golpeando levemente contra el envase donde
se echa la porcin de la muestra hasta descargar la cantidad que uno estime.

Botella de pesada con muestra 25.8976 g

Peso luego de remover la muestra 125.6321 g
Peso de muestra 1 0.2655 g

La segunda pesada viene a ser la de la botella con lo que queda de muestra luego de
haber removido la primera porcin. Se remueve una segunda porcin en forma igual a la
anterior.

Botella de pesada con muestra 25.6321 g

Peso luego de remover muestra 2 25.4001 g
0.2320 g
Este proceso se repite por tercera vez y conseguimos la tercera muestra: tres muestras con slo
cuatro pesadas.
 34

Calibracin de equipo volumtrico

Determinacin del volumen que verdaderamente descarga una pipeta de 5 mL.

Referencias: Quantitative Chemical Anlisis, 7e, Daniel Harris. Cap 2; Analytical Chemistry 6th
Ed. by G.D. Christian (2004) Wiley, (Captulo 2)

Objetivos:
Experimental
i. Evaluar la precisin y exactitud de la pipeta utilizada

Didcticos
i. Transferir un lquido usando una pipeta.
ii. Pesar un lquido usando la balanza analtica.
iii. Calcular la masa verdadera de un lquido tomando en cuenta el efecto de fuerza
boyante.
iv. Calcular el volumen de agua descargado por una pipeta con datos de masa y densidad
de agua a la temperatura del saln.
v. Realizar cmputos estadsticos para hallar el volumen promedio y su intervalo de
confianza al 95%, coeficiente de variacin y % error
vi. Usar el programado excel para organizar y procesar los datos.

Instrucciones generales para calibrar una pipeta de 5 mL:

1. Obtenga tres botellas de pesada con tapa. Asegrese de que las mismas estn limpias
y secas.
2. Obtenga una pipeta de 5 mL. Lave con agua de jabn, enjuague con mucha agua
potable y finalmente enjuague con no menos de tres porciones de agua destilada.
3. Pese cada botella de pesada previamente identificada con su tapa y anote el resultado
en su libreta. Use balanza analtica.
4. Saque la botellas de pesada y lleve a su rea de trabajo (no debe transferir lquidos en el
rea de las balanzas).
5. Use la pipeta para transferir 5 mL de agua destilada a cada botella de pesada. Una
vez transfiera, tape la botella.
6. Pese cada botella de pesada que contiene el agua y anote el resultado. Calcule la masa
de agua transferida por diferencia para cada botella. Use la misma pipeta, y la misma
balanza para cada botella. Asegrese de usar botellas de pesada que estn secas.

Procesamiento de datos

1. Obtenga de su instructor o mida la temperatura del saln (consulte a su instructor).

2. Calcule la densidad de agua a dicha temperatura y su incertidumbre absoluta. Use la
frmula a continuacin:
2 3
Densidad (g/mL)= a0 + a1T+a2T +a3T

donde: a0= 0.99989 g/mL

-5
a1= 5.3322 x 10 g/mL C
-6 2
a2= -7.5899 x 10 g/mL C
-8 3
a3= 3.6719 x 10 g/mL C
 35

3. Calcule la masa corregida del agua en cada botella usando la siguiente frmula:

, donde m es la masa medida, da = 0.0012 g/mL; dw= 8.0 g/mL y d =

densidad de agua.

4. Calcule la incertidumbre absoluta para cada masa corregida.

5. Calcule el volumen descargado en cada botella y su incertidumbre absoluta usando la

relacin:

6. Calcule el volumen promedio de agua descargada con la pipeta (de las tres
determinaciones) , la desviacin estndar y su intervalo de confianza al 95%.

7. Calcule el coeficiente de variacin y el % de error, partiendo de la premisa que el valor

esperado es 5.00 mL 0.01 mL.

8. Presente sus datos y los cmputos correspondientes en una plantilla de excel. Entregue
dos plantillas: la que tiene los datos y resultados y la que tiene las frmulas.

Pre-Lab

1. Un estudiante obtuvo los siguientes resultados para la calibracin de una pipeta de 5 mL:

Masa Masa Volumen de

No. de aparente de corregida de Agua
Determinacin agua (g) agua

1 4.9691
2 4.9414
3 4.9515

a. Complete la tabla utilizando las frmulas que apliquen. La densidad de agua a la

temperatura del experimento es 0.99705 g/mL.
b. Calcule el volumen promedio, su desviacin estndar y su coeficiente de variacin.

2. Calcule la densidad de agua a 28.3 C y la incertidumbre absoluta. Use la frmula que

aparece en la seccin de Procesamiento de Datos.
 36

Actividad Especial 2

Preparacin de soluciones y curva de calibracin

Objetivos
Experimental
1. Determinar la concentracin de una muestra desconocida y su incertidumbre
absoluta utilizando una curva de calibracin.
Didcticos
1. Determinar el equipo volumtrico ms apropiado para preparar las soluciones
requeridas.
2. Determinacin de la incertidumbre de la concentracin de cada una de las soluciones
que prepare.
3. Repasar el uso correcto del equipo volumtrico y la transferencia cuantitativa de una
muestra.
4. Repasar los cmputos y conceptos involucrados en la preparacin de soluciones
incluyendo la transferencia cuantitativa de una muestra.
5. Determinar la concentracin del desconocido mediante interpolacin
6. Presentar adecuadamente los datos en forma grfica y en tablas
7. Hacer uso apropiado del espectrofotmetro o colormetro

Parte I. Preparacin de Soluciones

El instructor le dar una demostracin de cmo preparar soluciones de concentracin conocida

por pesada y disolucin, y por dilucin de una solucin concentrada. En su explicacin le
indicar el uso apropiado del matraz volumtrico, la pipeta de volumen fijo y la bureta.
Adems le demostrar el concepto de transferencia cuantitativa.

En esta actividad slo usar el siguiente equipo para obtener medidas de volumen: matraz
volumtrico (25.00 y 100.00 mL), pipeta de volumen fijo (habrn pipetas de 5.00, 10.00, 25.00
y 50.00 mL disponibles para que escoja la apropiada) y bureta de 50.00 mL. Adems de ese
equipo, usar la balanza analtica para obtener medidas de masa.

Instrucciones Generales

Forme grupos de 2 estudiantes (se trabajar en parejas). Antes de iniciar con la prctica, su
grupo deber planificar cmo preparar cada una de las cuatro soluciones y escribir el
procedimiento a seguir en su libreta de laboratorio, y el instructor o TA revisarn previo a
comenzar. En su narrativo incluir los cmputos que sean necesarios. No tiene que realizar
los cmputos de la incertidumbre el mismo da, pero dichos cmputos s debern
aparecer en su libreta de laboratorio para que su instructor los coteje en el prximo
periodo de laboratorio. Prepare las soluciones de acuerdo al procedimiento escrito y
luego calcular las concentraciones reales de cada solucin.

I. Solucin I
Prepare 100 mL de CuSO4~ 0.1 M a partir del slido. Tome en cuenta la pureza del CuSO4
(s). La masa molar de CuSO4 es 159.60 g/mol. OJO: Asegrese de cotejar si el slido que
va a pesar es anidro (CuSO4) o pentahidratado (CuSO4 5H2O). Si fuera el pentahidratado, la
masa molar es 249.68. No olvide transferir cuantitativamente el slido al matraz
volumtrico! Anote en su libreta todos los datos de la pesada para luego calcular la
molaridad exacta del CuSO4 (ac). Calcule la molaridad de la solucin y su incertidumbre
aplicando las reglas de propagacin de errores. Ignore efectos de fuerza boyante en la
pesada.

II. Solucin II
 37

Prepare 25.0 mL de CuSO4 aproximadamente 0.04 M a partir de la solucin ~0.1 M ya

preparada. En su libreta deber aparecer la molaridad exacta (real) de la solucin diluida de
acuerdo a la molaridad que tenga la solucin concentrada (no necesariamente ser 0.1000
M). Calcule la molaridad de la solucin y su incertidumbre aplicando las reglas de
propagacin de errores. Ignore efectos de fuerza boyante en la pesada.

III. Solucin III y IV

Prepare 25.00mL de una solucin 0.015 M a partir de cualquiera de las dos soluciones
anteriores. Uno de los integrantes del grupo la prepara a partir de la solucin 0.1 M y el otro
la prepara a partir de la solucin 0.04 M. Note que en el laboratorio solo hay pipetas de 5.00,
10.00, 25.00 y 50.00 mL. Calcule la molaridad real de la solucin en ambos casos y sus
respectivas incertidumbres aplicando las reglas de propagacin de errores. Ignore efectos
de fuerza boyante en la pesada. Recuerde realizar los cmputos de ambos casos. De stas
dos soluciones descarte la que tiene mayor error y utilice la otra para preparar la solucin V.

IV. Solucin V

Usando la Solucin III o IV (la de menor error ), prepare 25.00 mL de solucin cuya
concentracin sea 2/5 partes de la concentracin de la solucin concentrada usada para su
preparacin (solucin III o IV). Esta es la solucin V.

Pre-Lab

1. Calcule los gramos de CuSO4 5H2O, cuya pureza es 99.10 %, para preparar 250.0 mL de
solucin 0.1000 M.

2. Calcule el volumen de CuSO4 5H2O 0.0800 M que se requiere transferir a matraz de 200
mL para preparar una solucin 0.00275 M.

3. Mencione el equipo volumtrico que debe usar para transferir el volumen que usted calcul
en el ejercicio 2.

1. Un estudiante tom 10.00 0.01 mL de una solucin de sacarosa 0.0500 0.0001 M

y la transfiri a un matraz volumtrico de 50.00 0.05 mL. Luego complet hasta la
marca con disolvente. Calcule la incertidumbre absoluta de la molaridad de la
solucin preparada segn se describe.

2. Realice los cmputos necesarios para la preparacin de cada una de las soluciones
descritas en el procedimiento a realizarse en el laboratorio en su libreta de
laboratorio bajo la seccin de Clculos Pre-Lab., luego de la seccin de
procedimiento.

Parte II. Curva de Calibracin

Introduccin

Una manera de determinar experimentalmente la concentracin de un soluto en solucin es

mediante el uso de una curva de calibracin. En general, la curva de calibracin se construye
llevando a grfica una propiedad como funcin de la concentracin de la sustancia de inters.
Para que funcione, la propiedad debe variar con la concentracin de acuerdo a algn modelo
matemtico bien definido. Comnmente el modelo matemtico que aplica es el lineal. El mismo
se representa con la siguiente ecuacin:

P = mC + b (1)
 38

donde P es la propiedad que se mide, m es la pendiente, C es la concentracin del soluto y b es

el intercepto en el eje de y.

En la prctica, el procedimiento a seguir para determinarle la concentracin a un desconocido es:

1. Preparar varias soluciones de concentracin conocida del soluto de inters en un

disolvente apropiado.
2. Medir la propiedad a cada solucin de concentracin conocida. Hacer regresin lineal de
los datos de P como funcin de C y obtener los parmetros estadsticos (pendiente e
intercepto)
3. Medir la propiedad a la solucin del desconocido.
1
4. Determinar la concentracin del desconocido mediante interpolacin despejando para
C en la ecuacin (1).
5. Presentar adecuadamente los datos en forma grfica y tablas
6. Hacer uso apropiado del espectrofotmetro o colormetro

En este ejercicio la propiedad que vara linealmente con la concentracin es la absorbancia. La

misma es una medida de cunta luz absorbe un soluto en solucin. En trminos simples, una
solucin coloreada concentrada absorbe ms luz (se ve ms oscura y tiene mayor absorbancia)
que una solucin diluida.

El instrumento utilizado para medir absorbancia a distintas longitudes de onda se conoce como
espectrofotmetro. El Spectronic 20 (modelo que tenemos en el lab) usa dos escalas de medida.
Una es el % de transmitancia (%T) y la otra es la absorbancia (A). Aunque la propiedad de
inters es A, es preferible leer la escala de %T, ya que la primera es logartmica y suele ser
confusa al estimar una medida cuando la aguja queda entre dos marcas (vase en la Figura 1
que la escala de transmitancia es uniforme mientras que la escala de absorbancia no lo es,
particularmente los valores que quedan a la izquierda).

Para convertir de %T a A, usamos la siguiente ecuacin:

escala de % T
escala de A

Figura 1
A= 2 log (%T) A= (2)

Procedimiento
1. Obtenga de su profesor(a) alrededor de la solucin desconocida A. Esta solucin
corresponde al tinte comercial que ser analizado (aplicacin)
2. Calibre el espectrofotmetro con agua destilada a la longitud de onda que le indique su
profesor(a). La misma debe estar alrededor de 630 nm y debe ser la misma para todas
las medidas que haga de aqu en adelante.

1
Al usar una curva de calibracin NO es aconsejable extrapolar para determinar una concentracin, ya
que no es certero suponer que la relacin entre P y C ser necesariamente lineal ms all de los lmites de
los estndares utilizados.
 39

3. Mida el %T de las 4 soluciones preparadas en la parte I en duplicado a la longitud de

onda indicada. Para hacerlo en duplicado, haga dos rondas de medidas sin repetir una
concentracin en una misma ronda. Esto implica que NO SE HACEN MEDIDAS
CONSECUTIVAS DE UNA MISMA CONCENTRACION. Anote los datos con sus
respectivas incertidumbres en su libreta. Calcule la absorbancia promedio.
4. Mida %T del desconocido A en triplicado. Calcule la absorbancia promedio
5. Aplicacin: Obtenga de su profesor(a) solucin desconocida B. Esta solucin
corresponde al tinte comercial que ser analizado. Determine la concentracin del tinte
vegetal azul en su forma concentrada (tal y como viene comercialmente). Use las
siguientes instrucciones como gua:

a. Como el tinte comercial es muy concentrado para ser cuantificado directamente

mediante espectrofotometra (en general, la respuesta del espectrofotmetro no es
confiable cuando la concentracin del analito es alta), hay que determinar su
concentracin diluyndolo hasta que alcance una concentracin cuyo valor est
entre las concentraciones de los estndares.
b. Determine la dilucin necesaria haciendo la siguiente prueba preliminar:

i. Diluya una o varias gotas del tinte (cuente las gotas) aadindole
agua hasta que la intensidad del color sea intermedio con relacin al
estndar ms concentrado y el ms diluido. Sabiendo
aproximadamente cunta agua tuvo que aadir para alcanzar el tono
de color intermedio. Recuerde que esto es una prueba preliminar y
que los datos que obtenga de la misma no sirven para propsitos
cuantitativos. Esto es solo una prueba para saber cmo realizar la
dilucin. De esta prueba puede hacer un buen estimado de la
dilucin exacta que llevar a cabo en su procedimiento y puede
determinar el equipo volumtrico que necesita utilizar para preparar
la solucin de modo cuantitativo.

c. Prepare la solucin del desconocido de modo cuantitativo utilizando los resultados

de la prueba preliminar.

d. Describa el procedimiento utilizado para la preparacin y determinacin de la

concentracin del desconocido B, incluyendo la prueba preliminar y su uso.

e. Mida el %T de la solucin desconocida a la longitud de onda indicada. Haga esto en

triplicado. Anote los datos en su libreta. Calcule la absorbancia promedio.

Procesamiento de Datos

1. Calcule la concentracin reales de las soluciones 1, 2, 3, 4, 5 y sus respectivas

incertidumbres
2. Calcule la absorbancia de todas las soluciones incluyendo el desconocido. Use la
ecuacin (2).
3. Prepare una tabla que identifique la solucin, la concentracin, %T y A, y sus respectivas
incertidumbres y complete la informacin para cada solucin incluyendo %T y A del
desconocido.

Anlisis Estadstico

1. Utilice el programado Excel para construir la curva de calibracin. Obtenga los

parmetros de la lnea recta (pendiente e intercepto)
 40

2. Calcule la concentracin de tinte en el desconocido A despejando por C en la ecuacin

de la lnea recta.

3. Calcule la concentracin para el desconocido B ( tinte comercial ) y exprese el resultado

en concordancia con su incertidumbre.
4. Determine la incertidumbre de la concentracin del desconocido utilizando las siguientes
frmulas:

2
s
sc = r
1 1
+ + 2
(y " y)
m k n m # ( x i " x )2

donde Sr es la desviacin estndar de la regresin lineal, Sc es la incertidumbre de la

concentracin del desconocido, m= pendiente, b = intercepto, n= nmero de puntos en la
! curva de calibracin, k= nmero de determinaciones del desconocido (rplicas), y =
absorbancia promedio del desconocido, x = absorbancia promedio obtenida con todos
los puntos de la curva de calibracin, xi es la concentracin de cada estndar, y es la
concentracin promedio de todos los estndares utilizados en la curva de calibracin.

Informe de Resultados

Organice y presente los resultados y cmputos, adems del procedimiento de la Aplicacin,

siguiendo el orden a continuacin:

I. Datos / Cmputos
- Prepare una tabla que identifique la solucin, la concentracin, %T y A, y sus
respectivas incertidumbres y complete la informacin para cada solucin
incluyendo %T y A del desconocido. En cuanto al desconocido, incluya la
incertidumbre de la concentracin calculada mediante Excel.
- Como la tabla para la curva de calibracin requiere calcular la absorbancia, las
concentraciones de los estndares y la del desconocido, debe demostrar dichos
cmputos con un ejemplo de cada caso.
- En otra tabla escriba los resultados del cmputo hecho por la plantilla de Excel
de la pendiente e intercepto, con sus incertidumbres.
- Presente las grficas de la curva de calibracin incluyendo la ecuacin de la
mejor recta y con sus ejes bien rotulados con las cifras correctas. Imprima las
tablas de datos y las grficas de la plantilla luego de hacer todas las
correcciones necesarias. Dado que son dos desconocidos el ejercicio debe
hacerse para cada uno por separado al usar la plantilla.
II. Procedimiento de la Aplicacin
- Escriba el procedimiento utilizado en la parte de Aplicacin.

Pre-Lab

1. Determine la molaridad de una solucin de cafena en metanol que se prepar transfiriendo

una alcuota de 10.00 mL 0.0200 M en cafena a matraz de 250.0 mL y completando hasta
la marca con metanol.

2. Para construir una curva de calibracin se necesitan no menos de 3 soluciones valoradas

(estndar) a las que se le mide la propiedad de inters (por ejemplo, absorbancia). Suponga
 41

que una estudiante del curso de Qumica Analtica desea preparar 3 soluciones acuosas de
-4 -4 -4
un tinte vegetal: 8.00 x 10 , 4.00 x 10 y 2.00 x 10 M. Las soluciones seran preparadas a
partir de 250 mL de una solucin madre, 0.0100 M. Para ello solo cuenta con una bureta de
25.00 mL, pipetas de 5.00, 10.00 y 25.00 mL, adems de matraces volumtricos de 50.00 y
100.0 mL. Sugiera una manera mediante la cual la estudiante pueda preparar no menos de
25 mL de cada solucin y que al final el volumen total de las soluciones preparadas no sume
ms de 300 mL. Note que no todas las soluciones tienen que tener el mismo volumen al
final.

3. Calcule la absorbancia de una solucin cuyo %T= 63.5

4. Un estudiante determin la concentracin de un tinte vegetal mediante el uso de la siguiente

curva de calibracin de medidas de absorbancia como funcin de concentracin molar:

Si la absorbancia del desconocido es 0.321, determine la concentracin molar del tinte en la

solucin.

5. Realice los clculos necesarios para preparar las soluciones requeridas para construir la
curva de calibracin.
 42

Evaluacin Estadstica de Indicadores cido-Base

Esta actividad sirve como una introduccin al uso de indicadores y a los conceptos de promedio,
desviacin estndar, prueba Q y prueba t. Usted va a comparar distintos indicadores en
trminos de su utilidad para determinar el punto final de la titulacin de la base tris con cido
clorhdrico:
+ +
(HOCH2)3CNH2 + H ! (HOCH2)3CNH3
Tris(hidroximetil)
aminometano
Reactivos

HCl ~ 0.1 M: Cada estudiante necesita alrededor de 500 mL de solucin no valorada de una
misma fuente que ser analizada por la clase completa.

Tris: Slido, estndar primario (~ 4 g/estudiante)

Indicadores: Azul de Bromotimol <Bromothymol Blue (BB)>, Rojo de Metilo <Methyl Red (MR)>,
Verde de Bromocresol <Bromocresol Green (BG)>, Anaranjado de Metilo <Methyl Orange
(MO)>, y Eritrosina <Erythrosine (E)>, disponibles en botellas con gotero.

BB: azul (pH 7.6) ! amarillo (pH 6.0) Punto final es la desaparicin del verde
MR: amarillo (pH 6.0) ! rojo (pH 4.8) Punto final es la desaparicin del anaranjado
BG: azul (pH 5.4) ! amarillo (pH 3.8) Punto final es la desaparicin del verde
MO:amarillo (pH 4.4) ! rojo (pH 3.1) Punto final es la aparicin del anaranjado
E: rojo (pH 7.6) ! anaranjado (pH 6.0) Punto final es la aparicin del anaranjado

Procedimiento

Cada estudiante llevar a cabo el procedimiento con un solo indicador. Como mnimo se deben
evaluar 4 indicadores, lo cual por lo menos involucra a 4 estudiantes. En el siguiente enlace
encuentra una buena demostracin sobre cmo titular:
http://www.youtube.com/watch?v=9DkB82xLvNE&NR=1

1. Antes de llegar al laboratorio, en su libreta, calcule la masa molar de tris y la masa que
se requerira para reaccionar con 25 mL de HCl 0.1 M. Pese aproximadamente esa
cantidad de tris transfiriendo a un matraz cnico de 125 o 250 mL.
2. Lave con agua de jabn una bureta de 50.0 mL, enjuague el exceso de jabn con agua
potable y luego con agua destilada. Finalmente, enjuague tres veces con porciones de
aproximadamente 2 3 mL HCl 0.1 M. Puede descartar cada una de las tres porciones
por el fregadero. Para enjuagar la bureta, primero cierre la vlvula y aada el HCl 0.1 M.
Luego vire la bureta en posicin horizontal, abra la vlvula y rote la bureta de modo que
el lquido impregne toda la pared interna. Finalmente, vire la bureta en posicin vertical y
deje que se vace el contenido a travs de la punta.
3. Llene la bureta con HCl 0.1 M hasta cerca de la marca de 0.00 mL. Asegrese de que
no queden burbujas en la punta de la bureta. Deje que el lquido se asiente y anote la
lectura a dos sitios decimales.
4. La primera titulacin se har para saber el volumen que toma alcanzar el punto final.
Coloque el matraz que contiene el tris bajo la bureta y aada alrededor de 10 mL del HCl
0.1 M para disolver el tris. Agite el matraz en forma circular hasta que todo el tris se
disuelva. Aada de 2 a 4 gotas de indicador, homogenice y comience a titular haciendo
adiciones de 1 mL. Despus de cada adicin, asegrese de homogenizar la solucin
agitando el matraz de forma circular o utilizando un agitador magntico. Cuando en la
solucin se vea un cambio de color que persiste donde cae la gota del titulante, siga
 43

aadiendo titulante en porciones menores hasta que la solucin cambie de color

permanentemente. Ese es el punto final de la titulacin.
5. Utilizando la primera titulacin como punto de referencia, si el volumen consumido
present una diferencia mayor de 5 mL de lo esperado (25mL), calcule cuntos gramos
de tris se requieren para consumir 25 mL del HCl y pese tres muestras de tris con
aproximadamente esa cantidad, transfiriendo a matraces cnicos de 125 250 mL. Si la
diferencia fue menor de 5 mL, pese tres muestras de tris con aproximadamente la
cantidad de tris en la primera titulacin, transfiriendo a matraces cnicos de 125 250
mL. Titule cada una de las muestras igual que la primera, comenzando con la que
contiene menor cantidad de tris. De acuerdo a lo que pes, calcule el volumen que sera
necesario para titular el tris. Ese volumen es el que se supone corresponda al punto
final. Titule el tris tal y como lo hizo en el paso 4, excepto que cuando est llegando al
punto final (cuando le falte menos de 2 mL), aada el HCl gota a gota hasta el cambio en
color. Cuando est bien cerca del punto final, aada MENOS de una gota a la vez. Para
lograr eso, suspenda una fraccin de gota en la punta de la bureta y toque la misma con
la pared interna del matraz. Vire el matraz de modo que la gota se mezcle con el lquido
y homogenice. Anote volumen de HCl (a dos sitios decimales) requerido para alcanzar
el punto final.
6. Calcule la molaridad del HCl (ac).
7. Repita la titulacin hasta tener al menos 4 medidas exactas de la molaridad de HCl.
8. Use la prueba Q para decidir si alguno de los resultados debe ser descartado. Informe
los valores que retenga, su promedio, desviacin estndar y coeficiente de variacin.

Recuerde que la correccin por fuerza boyante es:

donde da= 0.0012 g/mL; dw= 8.0 g/mL

9. Obtenga de su instructor la solucin de HCl de concentracin desconocida y anote el

nmero del desconocido. Haga una transferencia cuantitativa a un matraz aforado de
100.0 mL. Complete la dilucin con agua destilada. Utilice esta solucin como titulante
para la titulacin de tres porciones de tris. Pese aproximadamente la misma cantidad de
tris utilizada en las ltimas titulaciones. Realice las tres titulaciones igual que hizo las
anteriores pero utilizando el indicador que tericamente se espera que produzca los
resultados ms exactos.
Calcule la concentracin para cada una de ellas, la concentracin promedio, su
desviacin estndar, su intervalo de confianza y el coeficiente de variacin. En base a
estos resultados su profesor evaluacin la exactitud del anlisis.

Informe Corto ( Utilice programado de Excel)

Datos individuales utilizando el indicador asignado y con el indicador ms exacto

Tabule todos los datos en una o varias tablas segn le sea ms conveniente:
Prueba mbp IA(g) mbp-tris IA m tris IA tris IA
+tris (g) mc(g) ( g) m tris mc ( mc(g)
(g) ( g) g)
1
2
3
4
5
 44

Prue Vi IA Vf IA Vd IA M IA
ba (mL) Vi (mL Vf (mL) Vd(mL HCl (M)
(mL) ) (mL) )
1
2
3
4
5

Incluya en su informe la siguiente informacin:

Basado en la prueba Q, se debe descartar algn resultado? Si es as, cul?
Promedio de los resultados retenidos.
Desviacin Estndar.
Coeficiente de Variacin.
Intervalo de Confianza con 95% de probabilidad.

Informe de Datos Grupales

Obtenga los datos de la clase para cada indicador estudiado. Genere una tabla como la que se
presenta a continuacin:
b
Indicador Nmero Nmero de Concentracin sx (M) Coeficiente
a
de Estudiantes promedio (M) de
medidas (Ne) Variacin
(Nm)
BB 28 5 0.09565 0.00225 2.35
BG 29 4 0.08641 0.00113 1.31

a. Promedio calculado con todas las concentraciones de los estudiantes con un

indicador dado.
b. sx = desviacin estndar de todas las medidas (Nm) con Nm-1 grados de libertad.

Use la prueba t para comparar los dos promedios que se alejaron ms entre s y para
comparar los dos promedios que se acercaron ms entre s (dos comparaciones). Para
llevar a cabo esta prueba deber usar los valores de sx de cada indicador para calcular sp.
Recuerde usar la prueba F para corroborar que no haya diferencia significativa entre las
varianzas (vase suplemento Estadstica II) para poder usar la ecuacin a continuacin y
calcular t:

De haber diferencia significativa entre las varianzas, deber usar la siguiente ecuacin para
calcular t:

con los siguientes grados de libertad:

 45

Tabule sus resultados de la siguiente manera:

Indicadores sp Fcalc/Fcrit tcalc/tcrit

A modo de ejemplo, si usamos los datos de la tabla anterior, se obtienen los siguientes
resultados:

Indicadores sp Fcalc/Fcrit tcalc/tcrit

BB-BG 0.09565 0.08641 0.091063232 1.225/1.889 0.3762/2.004

Discusin de Resultados

Precisin de los resultados

La precisin se puede evaluar de dos maneras: la precisin de los resultados de los

estudiantes de manera individual y la precisin de los resultados globales del grupo que
trabaj con un mismo indicador. Discuta la precisin de los resultados individuales y
globales. Discuta la precisin de cada indicador y comprelos todos entre s.

Exactitud de los resultados

La exactitud de los resultados solo puede ser evaluada determinando la molaridad verdadera
del HCl. Esto se puede llevar a cabo valorando el HCl con un estndar y utilizando un
mtodo validado para detectar el punto de equivalencia. Por ejemplo, se puede valorar el
HCl con Na2CO3 tipo primario (slido de alta pureza), usando verde de bromocresol como
indicador. Al determinar la concentracin del HCl de esa manera, entonces se puede
comparar esa molaridad con los resultados obtenidos con el tris y los distintos indicadores.

A falta de conocer la molaridad verdadera del HCl, es posible seleccionar el indicador ms

apropiado basndose en la curva de titulacin del tris vs HCl (grfica de pH como funcin de
volumen de HCl) y el intervalo de transicin del indicador. En general, el pH del punto de
equivalencia debe estar dentro del intervalo de transicin del indicador. Lo ms deseable es
que dicho pH quede lo ms centralizado posible entre los extremos del intervalo. La curva de
titulacin de tris vs HCl se presenta en la grfica a continuacin:
 46

En cualquier
titulacin cido-
base el punto de
equivalencia coincide con el punto de inflexin de la curva (punto medio de la regin de
cambio abrupto). En el caso de arriba, dicho punto corresponde a pH= 4.7, volumen = 40
mL. Una caracterstica de estas titulaciones es que para un sistema dado, el pH del punto
de equivalencia vara muy poco independientemente del volumen del punto de equivalencia.
Por lo tanto, es posible generalizar que el pH del punto de equivalencia en la titulacin de tris
con HCl estar cerca de 4.7. Por tanto, a base del intervalo de transicin de los indicadores
estudiados, cul de ellos debera producir los resultados ms exactos? Cul producira
los resultados menos exactos? Cul sera el orden de exactitud esperado? Los intervalos
de transicin de los indicadores los encuentra en la seccin de reactivos. A base de su
respuesta a las ltimas dos preguntas, cul se considerara la molaridad verdadera del
HCl? Cul es el orden de exactitud experimental basado en esa concentracin? Explique
la diferencia y discuta las fuentes de error que pudieron impactar los resultados.

Comparacin de Indicadores (incluya esta informacin como parte de la discusin)

Compare los indicadores que se alejaron ms entre s y aquellos que se acercaron ms

entre s. Use prueba t con 95% de probabilidad. Hay diferencia significativa entre los
promedios de esas molaridades, entre las varianzas, entre su exactitud, entre su precisin?
Explique el origen de posibles diferencias y las implicaciones que eso tiene. Tambin
discuta las implicaciones en caso de que no haya diferencia significativa entre los
indicadores. Adems del indicador que usted seleccion en la seccin de Exactitud de los
resultados, demuestran los resultados de esta actividad que se podra utilizar ms de uno
de los indicadores estudiados para determinar la molaridad de HCl? Explique. De haber
obtenido resultados no esperados, mencione posibles causas para ello.

Pre-Lab

1. Calcule la masa de tris(hidroximetil)amino metano (MM: 121.138 g/mol) que se

necesitara para reaccionar con 35.00 mL de HCl 0.1000 M.
2. Por qu es necesario enjuagar la bureta con HCl antes de llenarla con esta solucin?
 47

3. Suponga que despus de enjuagar la bureta con agua destilada, procede a llenarla con
HCl (ac) obviando el paso de enjuagar previamente con el HCl. Qu error introducira
esa omisin al determinar la molaridad del HCl?
4. Cul es el intervalo de transicin (en unidades de pH) de los indicadores que se
utilizarn en esta prctica?
5. Para titular 0.800 g de tris, un estudiante requiri 31.20 mL de HCl. Cuntos mL de ese
HCl se requerir para titular 0.912 g de tris? Resuelva usando proporciones.
6. Dos estudiantes que trabajaron por separado con el indicador Bromothymol Blue
obtuvieron los siguientes resultados en la determinacin de la concentracin de HCl:

Prueba Estudiante 1 Estudiante 2

1 0.09882 0.09922
2 0.09901 0.09913
3 0.09875 0.09807
4 0.09894 0.09901
5 0.09897 0.09911
6 0.09889

a. Haga la prueba Q (Q90) a esos dos grupos de datos en caso de que haya algn
valor sospechoso dentro de un mismo grupo de datos.
b. Calcule el promedio, desviacin estndar y coeficiente de variacin de los dos
grupos de datos por separado. No incluya datos que fueron eliminados con la
prueba Q.
c. Haga una prueba t para determinar si hay diferencia significativa entre los
promedios con 95% de probabilidad. Suponga que no hay diferencia
significativa entre las varianzas de ambos grupos de datos.
d. Combine los dos grupos de datos (sin incluir los que elimin con la prueba Q) y
calcule el promedio global y su desviacin estndar, sx. Compare sx con sp (que
fue calculada en la parte c) y explique a qu se debe que una de esas
desviaciones estndar tenga un valor numrico ms alto que la otra.
7. Dos estudiantes con distintos indicadores obtuvieron los siguientes resultados para la
molaridad de HCl:

Parmetro Estudiante 1 Estudiante 2

Molaridad Promedio 0.0716 M 0.0998 M
Coeficiente de variacin 31.4 % 29.2 %

Al llevar a cabo una prueba t con 95% de probabilidad, no se encontr diferencia significativa
entre esos promedios, a pesar de que el porciento de diferencia entre ellos es relativamente alto
(32.9%). La conclusin a la que se puede llegar con dicha prueba t, es que los dos indicadores
son equivalentes para la determinacin de la molaridad de HCl mediante su reaccin con tris.
A pesar de que los promedios son tan diferentes, a qu se debe que no haya diferencia
significativa? Adems, comente sobre cun confiables son los resultados obtenidos y sobre la
validez de la conclusin sobre los indicadores.
 48

Actividad Especial: Preparacin de Amortiguador Salino de Fosfato

Una solucin amortiguadora mantiene un pH estable an en presencia de pequeas cantidades

de sustancias que tengan caractersticas cido-base. Cambios abruptos en el pH de una
solucin pueden alterar significativamente las propiedades de cualquier sistema qumico que se
est estudiando. Es por eso que, en el diseo de muchos experimentos en solucin, se requiere
un control estricto del pH, algo que se logra mediante el uso de soluciones amortiguadoras.

En la prctica, la mayora de los amortiguadores consiste de un cido dbil mezclado con su

base conjugada, tpicamente en concentraciones que fluctan entre 5 y 500 mM (concentracin
total de amortiguador). El pH alrededor del cual un par conjugado puede amortiguar
efectivamente coincide con la pKa del cido conjugado y se extiende alrededor de 1 unidad de
pH por encima o por debajo de ese valor.

Una de las soluciones que ms se emplea en aplicaciones bioqumicas es la solucin

amortiguadora de fosfato, particularmente en tcnicas tales como el cultivo de clulas. En
aplicaciones como esa se utiliza una solucin salina de fosfato (Phosphate Buffer Saline, PBS)
- 2-
en la cual, adems de estar presente la combinacin de H2PO4 / HPO4 , tambin hay NaCl y
KCl, en concentraciones compatibles con las del cuerpo humano en sangre. Esta solucin es
isotnica e inocua para las clulas. En muchas de estas aplicaciones el pH de la solucin es 7.4.

Hoy da la mayora de los laboratorios que llevan a cabo procedimientos rutinarios con
soluciones de PBS, obtienen esas soluciones de fuentes comerciales o mediante recetas. No
obstante, el saber preparar soluciones amortiguadoras es conveniente en situaciones en las que
se requiera hacer modificaciones a algn procedimiento experimental, sobre todo en el contexto
de un laboratorio de investigacin.

En esta actividad usted

a. Aprender a usar correctamente el metro de pH digital para hacer medidas, incluyendo

su calibracin.
b. Distinguir entre preparar un amortiguador mediante la mezcla del par conjugado y
mediante el ajuste de pH generando in-situ uno de los componentes del par.
c. Explicar por qu el uso de la ecuacin de Hendersson y Hasselbach (sin tener en
cuenta el efecto de fortaleza inica) no es adecuada para predecir con certeza el pH de
una solucin amortiguadora en la prctica.

Tarea:

Preparar 250 mL de una solucin amortiguadora de fosfato con la siguiente composicin:

NaCl 137 mM
KCl: 2.70 mM Preparar dos soluciones mediante dos mtodos
Fosfato (total): 10.0 mM (ver ms adelante)

Medidas de pH

a. Mantenga el electrodo de vidrio sumergido en solucin acuosa en todo momento,

excepto cuando vaya a transportarlo de una solucin a otra. La capacidad que tiene el
electrodo de vidrio para medir pH depende de que su superficie est hidratada. Es por
esa razn que evitamos que la superficie del electrodo se seque completamente.
 49

b. Antes de sumergir el electrodo de vidrio en una solucin nueva, deber enjuagar el

mismo con agua destilada, y luego de enjuagar, le remueve el exceso de agua que
queda en su superficie, tocando suavemente la misma con un papel de tejido fino (por
ejemplo, el papel marca Kinwipe). La superficie del electrodo NUNCA debe frotarse
con el papel.
c. Al sumergir el electrodo en una solucin, la superficie de vidrio NO PUEDE TOCAR las
paredes del vaso ni su fondo.
d. Si va a usar un imn para agitar la solucin mientras hace una medida de pH, evite que
la superficie del electrodo toque el imn.
e. Antes de medirle el pH a una solucin, calibre el electrodo con dos soluciones
amortiguadoras (por ejemplo, soluciones de pH= 4 y pH= 9 las que indique su
instructor).
f. El electrodo debe sumergirse de tal manera que la unin que conecta el electrodo de
vidrio con el electrodo de referencia quede cubierto por la solucin (ver la ilustracin a
continuacin).

Solucin Solucin de electrolito referencia

Amortiguadora
Cubierta de vidrio o plstico

Electrodo Ag/ AgCl Electrodo Ag/ AgCl referencia

Unin (conecta electrodo de

referencia con electrodo de
trabajo)

Superficie Hidratada Interna

Vidrio Seco
Superficie Hidratada Externa

Ilustracin: Electrodo de combinacin para medidas de pH

En el enlace a continuacin encuentra informacin general sobre cmo calibrar un electrodo de

pH:

http://www.dartmouth.edu/~chemlab/techniques/phD.html

Preparacin de soluciones

Solucin diluyente
Se recomienda preparar un litro de solucin que contenga NaCl 137 mM y KCl 2.70 mM.
De ahora en adelante a esta solucin la llamaremos solucin salina. La misma se
usar como disolvente para preparar las dems soluciones de esta actividad.

Solucin de NaOH~ 0.5 M.

 50

Pese suficiente NaOH para preparar aproximadamente 50 mL de NaOH 0.5 M (esta

concentracin no se tiene que saber con certeza) y disuelva con la solucin salina. Esta
solucin se usar para ajustar el pH mediante el segundo mtodo de preaparacin de
amortiguadores.

Amortiguador de pH 7.40 - Pesando el par conjugado. [Primer Mtodo]

1. Consulte en su libro de texto los valores de pK1, pK2 y pK3 de cido fosfrico y decida
qu par conjugado es el apropiado para preparar una solucin de pH=7.40
2. Obtenga los dos componentes del par conjugado (puede usar las sales de sodio o
potasio) y anote sus respectivas masas molares y pureza.
3. Calcule la masa de cada componente tomando en cuenta que el volumen es 250 mL, la
concentracin total de fosfato debe ser 10.0 mM y que el pH = 7.40. Use
.

4. Pese las cantidades calculadas y prepare la solucin en matraz volumtrico de 250 mL.
Use la solucin salina para diluir.

5. Despus de llevar hasta la marca con solucin salina, mida el pH de la solucin y

compare con el valor esperado.

Amortiguador de pH 7.40 Ajustando el pH mediante generacin de la base conjugada in-

situ. [Segundo Mtodo]

1. En este caso usar la solucin de NaOH 0.5 M para ajustar el pH a 7.40.

2. Calcule la cantidad de cido conjugado que necesita para preparar 250 mL de solucin
cuya [fosfato] = 10.0 mM.

3. Calcule el volumen de NaOH 0.50 M que necesitara aadirle al cido conjuado

calculado anteriormente para ajustar el pH a 7.40. Esto le dar una idea del volumen
que necesita.

4. Disuelva completamente el cido conjugado con 200 mL de solucin salina y coloque en

un vaso de 500 o 600 mL.
5. Coloque una barra imantada en el vaso para agitar la solucin. Coloque el vaso sobre
una plancha de agitacin.

6. Coloque el electrodo de pH que haya sido calibrado dentro de la solucin y comience a

hacer las medidas de pH, agitando suave pero homogneamente.

7. Usando una bureta, aada NaOH ~ 0.5 M a esta solucin, poco a poco, y haga lecturas
de pH hasta que el mismo se acerque a 7.4. Una vez est cerca, aada gota a gota
hasta que el metro lea exactamente 7.40. Anote el volumen transferido una vez
alcanzado este pH.

8. Despus de alcanzar el pH deseado, transfiera la solucin cuantitativamente a un matraz

volumtrico de 250 mL y lleve hasta la marca con solucin salina.

9. Corrobore que esta solucin as preparada tiene un pH= 7.40, midiendo su pH.

Informacin Adicional en la WEB

Soluciones Isotnicas:
 51

http://www.unmc.edu/pharmacy/wwwcourse/graduate/g_tonicity/ppframe.htm

Gua del informe de la actividad especial sobre preparacin del amortiguador de fosfato.

Preparacin de Solucin Salina

i. Masa de NaCl:
ii. Masa de KCl:
iii. Concentracin de NaCl (mM) (incluya los cmputos):
iv. Concentracin de KCl (mM) (incluya los cmputos):
v. Por qu se usa esta solucin salina para preparar el amortiguador de pH=7.4?
vi. En el contexto de su uso en aplicaciones bioqumicas, por qu ser que se usa KCl
tambin al preparar la solucin salina?

Solucin Amortiguadora (Mtodo 1)

i. Identidad del reactivo que acta como cido conjugado:

ii. Masa terica del reactivo que acta como cido conjugado (incluya los cmputos):
iii. Masa experimental del reactivo que acta como cido conjugado:
iv. Identidad del reactivo que acta como base conjugada:
v. Masa terica del reactivo que acta como base conjugada(incluya los cmputos):
vi. Masa experimental del reactivo que acta como base conjugada:
vii. pKa del cido conjugado:
viii. pH esperado de la solucin (segn Henderson-Hasselbach) de acuerdo a las
cantidades pesadas (incluya los cmputos):
ix. pH experimental:
x. Explique cualquier discrepancia observada entre el pH esperado y el pH experimental.

Solucin Amortiguadora (Mtodo 2)

i. Masa terica del reactivo que acta como cido conjugado (incluya los cmputos):
ii. Masa experimental del reactivo que acta como cido conjugado:
iii. Concentracin de NaOH (a dos cifras significativas, incluya los cmputos):
iv. Volumen terico del NaOH(ac) para ajustar el pH a 7.4 (incluya los cmputos):
v. Volumen de NaOH usado para ajustar el pH a 7.4:
vi. pH de la solucin despus de ajustar el pH y completar a 250 mL:
vii. Explique cualquier discrepancia observada entre el volumen terico y el volumen
experimental de NaOH usado para ajustar el pH.

Explique por qu el segundo mtodo de preparacin es ms adecuado que el primero.

 52

Pre-Lab

1. Describa cmo prepara un litro de solucin que contenga NaCl 137 mM y KCl 2.70 mM.
En su descripcin mencione el equipo volumtrico que necesita, las cantidades que se
deben pesar y el proceso a seguir para obtener la solucin deseada.
2. Describa cmo prepara 50 mL de NaOH 0.5 M teniendo en cuenta que la concentracin
de esta solucin no se tiene que conocer con certeza.
3. Busque los valores de pK1, pK2 y pK3 de cido fosfrico y decida qu par conjugado es el
apropiado para preparar una solucin de pH= 7.40.
4. Calcule la masa de las sales de sodio de cada componente del par conjugado
identificado anteriormente que se deben mezclar para preparar 250 mL de una solucin
cuya concentracin total de amortiguador sea 10.0 mM, de pH=7.40. No tome en cuenta
fortaleza inica. [Primer Mtodo- se mezcla el par conjugado]
Use:
n base
pH " pK a + log
n acido
nbase + ncido= ntotal
1. Calcule la masa de cido conjugado que necesitar para que al reaccionarlo con NaOH
0.5 M y llevar a 250 mL de solucin, la concentracin total del amortiguador sea 10.0
! mM. Adems, utilizando la ecuacin de Henderson-Hasselbach, calcule el volumen de
NaOH 0.5 M que necesitara aadirle al cido conjugado para que el pH se ajuste a 7.40.
[Segundo Mtodo- se genera la base conjugada in-situ]
 53

Determinacin Potenciomtrica de Mezcla de Fosfatos

Importancia

El cido fosfrico y sus derivados tienen muchos usos a nivel comercial: desde alimentos y
productos farmacuticos para el cuidado personal hasta su uso en detergentes, pinturas,
2
tratamiento de agua, fertilizantes, cermicas, etc. El cido ortofosfrico, H3PO4, es el ms
simple de la serie de cidos fosfricos que se pueden nombrar. Otros cidos relacionados lo son
el cido pirofosfrico, el tripolifosfrico, el trimetafosfrico, el tetrafosfrico y el anhidro fosfrico
(vase las frmulas estructurales a continuacin).

Figura 1. Estructuras de la familia del cido fosfrico

Propiedades Acdicas y Determinacin Cuantitativa del cido Ortofosfrico

El cido ortofosfrico es triprtico, es decir, tiene 3 tomos de hidrgeno ionizables. En solucin

acuosa este cido participa de los siguientes equilibrios:

-
H3PO4(ac) + H2O ! H2PO4 (ac) + H3O (ac)
+
Ka1 =
[H PO ][H O ] =7.5 x 10
2
"
4 3
+
-3

[H 3PO4 ]
- 2-
H2PO4 (ac) + H2O ! HPO4 (ac) + H3O (ac)
+
Ka2=
[HPO ][H O ] = 6.2 x 10
2"
4 3
+
-8

[H PO ]
2
"
4
!
2- 3-
HPO4 (ac) + H2O ! PO4 (ac) + H3O (ac)
+
Ka3 =
[PO ][H O ] = 5.0 x10
3"
4 3
+
-13

! [HPO ] 2"
4

Al examinar cada uno de esos equilibrios identificamos 4 posibles especies derivadas del cido
- 2- 3-
ortofosfrico. Estas son: H3PO4, H2PO4 , HPO4 , PO4 . La presencia de esas especies en
!
2
http://www.phosphatetesfacts.org/uses_apps.asp
 54

solucin acuosa depende del pH, como veremos ms adelante. Por lo pronto enfocaremos
nuestra atencin a la determinacin cuantitativa de cido ortofosfrico o a la de una mezcla de
cidos derivados de este.
Para determinar la concentracin total de cido fosfrico, al igual que la concentracin de cada
especie presente originalmente en una solucin acuosa, se pueden utilizar varios mtodos
dependiendo de la matriz y de la concentracin del cido. Cuando la cantidad total de cido en
-3
solucin es igual o mayor a 0.1 mmol (lo cual correspondera a 50 mL de una muestra 2 x 10
M), resulta conveniente determinar su concentracin mediante una titulacin potenciomtrica.
En lugar de un indicador visual, en este tipo de titulacin se registran cambios en pH como
funcin de volumen de titulante para detectar el punto de equivalencia. En el caso particular de
cido fosfrico, este mtodo es preferible a la titulacin visual debido a que los cambios en pH
alrededor de los puntos de equivalencia no son tan abruptos.

A continuacin se presenta una curva de titulacin que puede corresponder a la de un cido

triprtico (H3B):

B3-/NaOHexceso

B3-
HB2-/ B3-

HB2-
H2B-/ HB2-

H2B-

H3B/ H2B-

H3 B

Figura 2. Curva de titulacin de un cido triprtico y las especies que predominan como funcin
de pH. En este caso: pK1= 3.0; pK2= 6.0; pK3=9.0

Ntese la ocurrencia de tres cambios abruptos en pH a los volmenes 10, 20 y 30 mL,

respectivamente. Cada uno de esos cambios corresponderan al punto de equivalencia de las
siguientes reacciones:
 55

Ntese la ocurrencia de tres cambios abruptos en pH a los volmenes 10, 20 y 30 mL,

respectivamente. Cada uno de esos cambios corresponderan al punto de equivalencia de las
siguientes reacciones:
- -
1ro (primeros 10 mL) : H3B+ OH ! H2B + H2O
- - 2-
2do (despus de 10 mL hasta 20 mL): H2B + OH ! HB + H2O
2- - 3-
3ro (despus de 20 mL hasta 30 mL): HB + OH ! B + H2O

Tambin en esa curva se presentan las especies que predominan segn progresa la titulacin.
Note que antes de aadir titulante (Volumen de NaOH = 0), el pH de la solucin es bien bajo y la
- 2- 3-
especie predominante es H3B. Tras aadir NaOH, las especies H2B , HB y B aparecen en ese
orden segn sigue aumentando el pH del sistema. El porcentaje de cada una de esas especies
en solucin acuosa depende del pH, tal y como se ilustra en la siguiente grfica.

H3 B - 2-
B3-
H2 B HB

- 2- 3-
Figura 3. Composicin porcentual de las especies H3B, H2B , HB y B como funcin de pH.

Esa grfica consta de 4 curvas que corresponden a cada una de las especies derivadas del
- 2-
cido H3B cuyos pKa de los derivados cidos son 3.0 (H3B), 6.0 (H2B ) y 9.0 (HB ). En una
solucin cuyo pH sea bien bajo predomina la presencia de H3B. El % de H3B corresponde a la
curva que comienza en 100 % a pH=0. Segn aumenta el pH, el % de H3B va en descenso a
-
expensas del aumento en % de la prxima especie, H2B . A pH moderadamente cido (cerca de
-
pH= 4.5), predomina H2B . Por otro lado, cuando el pH est cerca de neutral (curva cuyo
2-
mximo corresponde a pH= 7.5), predomina HB . En el otro extremo, a pH alto (solucin bien
3-
bsica), predomina B . De esa grfica tambin se puede apreciar que a ciertos valores de pH
coincide la concentracin de dos especies conjugadas. Por ejemplo, a pH = 3.0 hay
-
prcticamente 50% de cada especie del par conjugado H3B y H2B . Eso es consistente con el
hecho de que cuando los componentes de un par conjugado tienen la misma concentracin,
 56

+
[H3O ] = Ka. Ntese que a pH= 6.0 y 9.0 los conjugados cuyos pKa corresponden a esos valores
de pH, tienen iguales concentraciones.

Volviendo a la curva de titulacin de un cido triprtico (Figura 2), debemos sealar que no todos
los cidos triprticos exhiben tres cambios abruptos en pH correspondientes a los puntos de
equivalencia. La presencia de un cambio abrupto en pH en esos puntos depende tanto de la
fortaleza absoluta como relativa de sus especies acdicas, y tambin de la concentracin del
agente titulante. En general, cuando la concentracin del agente titulante es alrededor de
0.1 M, para poderse apreciar un cambio abrupto en pH en los puntos de equivalencia, el
valor de pKa de la especie titulada (fortaleza absoluta) debe ser menor o igual a 10.
Adems, si se estn titulando dos o ms especies en solucin (como es el caso de un
cido poliprtico), la diferencia en sus pKa debe ser mayor a 2.8 unidades de pH para
poder distinguirlas (fortaleza relativa). En el caso de la grfica anterior, los valores de pKa
son 3.0, 6.0 y 9.0. Como la diferencia en pKas excede 2.8 y la especie ms dbil tiene un
pKa menor a 10, se pueden apreciar las tres zonas de cambio abrupto.

En el caso de cido fosfrico, cuyos pKas son: 2.1, 7.2 y 12.3, la curva de titulacin de 10.0 mL
de H3PO4 0.1 M con NaOH 0.1 M se vera as:

Figura 4. Curva de titulacin de cido ortofosfrico

Ntese que aunque la diferencia en pKas consecutivos es mayor a 2.8, tanto entre el primer y
segundo protn (2.1 y 7.2) como entre el segundo y tercer protn (7.2 y 12.3), solo se aprecian
dos zonas de cambio abrupto. En este caso el tercer protn no es titulable. Como la especie
2-
HPO4 es tan dbil (tiene pKa=12.3), la reaccin entre esta especie y NaOH no se completa, an
cuando se haya aadido una cantidad estequiomtrica de titulante. Por eso no se puede
apreciar un tercer cambio abrupto a los 30 mL de titulante.

Curva de titulacin de mezcla de fosfatos

-
En la titulacin de una mezcla de H3PO4 y H2PO4 tambin se espera que se observen dos zonas
de cambio abrupto, con la diferencia de que el volumen para alcanzar el primer punto de
equivalencia siempre ser MENOR al volumen entre el primer y segundo punto de equivalencia.
 57

En otras palabras, si V1 es el volumen del primer punto de equivalencia y V2 es el volumen del

segundo punto de equivalencia, entonces V2-V1 > V1. Recuerde que si se titula una solucin que
-
solo contiene H3PO4 entonces V2-V1 = V1. Cuando en la mezcla hay presente H3PO4 y H2PO4 ,
-
primero se titula H3PO4 convirtindose a H2PO4 . Pasado el primer punto de equivalencia se
-
titula todo el H2PO4 : tanto el que proviene de la mezcla original como el que proviene del H3PO4.
De ah que el segundo volumen equivale a ms del doble del primero. Tome el siguiente
ejemplo. Si usted titula una mezcla que contiene 0.50 mmol de H3PO4 y 0.75 mmol de H2PO4
con NaOH 0.1 M, va necesitar inicialmente 5 mL de titulante para consumir todo el H3PO4 y un
-
total de 12.5 mL adicionales para titular tanto los 0.5 mmol del H2PO4 proveniente del H3PO4
-
como los 0.75 mmol del H2PO4 original. En este caso V1= 5 mL y V2= 17.5 mL. Si solo hubiese
habido 0.5 mmol de H3PO4, entonces V1=5 mL y V2= 10 mL.

En esta actividad de laboratorio usted recibir una solucin acuosa con una mezcla de H3PO4 y
-
H2PO4 en proporcin y concentracin desconocidas. Su tarea ser determinar los mmoles de
cada especie en la solucin original luego de transferir su muestra lquida a un matraz aforado de
250 mL y titular alcuotas de 25 mL.

Notas importantes sobre las medidas de pH

1. Las medidas de pH en soluciones alcalinas deben hacerse en ausencia de CO2, el cual se

halla presente en el aire. De no ser posible evitar esta interferencia, deben hacerse las
medidas de pH lo ms rpidamente posible.
+
2. Los iones de Na seran una interferencia a pH sobre 11 (error alcalino).
3. El electrodo de vidrio se deteriora con el uso hasta que su respuesta de pH no es lineal.
Esta condicin se rectifica tratando el electrodo con solucin diluida de HF. La confiabilidad
del electrodo se coteja calibrando el metro a pH 9, por ejemplo, y luego sumergiendo los
electrodos en otra solucin de pH 4, por ejemplo. La lectura en esta segunda solucin no
debe diferir por ms de 0.05 unidades de pH. Este electrodo no debe rayarse ni golpearse.
Slo se puede limpiar con papel suave y nunca debe estar fuera de la solucin mientras se
est haciendo una lectura. Cuando no se estn usando deben estar sumergidos en agua
destilada.

Procedimiento

Valoracin de NaOH

En esta determinacin se usar NaOH (ac) como agente titulante. Verifique con su instructor la
cantidad de NaOH (ac) que vaya a preparar. Las instrucciones a continuacin aplican a la
preparacin de 1 L, por lo tanto, ajuste las cantidades proporcionalmente. Hierva poco ms de 1
L de agua destilada durante 10 minutos en un vaso de no menos de 1500 mL (aunque vaya a
preparar 1L recuerde que al hervir se pierde lquido por evaporacin). Despus que el agua
hierva por 10 minutos, deje enfriar sobre la mesa de laboratorio y coloque un cristal de reloj que
sirva de tapa mientras el agua se enfra. Pese la cantidad de NaOH (s) necesaria para preparar
1 L de una solucin cuya concentracin sea aproximadamente 0.1 M. No tiene que usar balanza
analtica. Cuando el agua hervida haya llegado a una temperatura cercana a la del saln (el
agua puede estar tibia), aada poco a poco el NaOH al agua hervida mientras va
homogenizando con un agitador de vidrio. No eche todo el NaOH de una vez ya que entre ms
slido haya en la solucin, ms difcil es disolverlo. Despus que TODO el NaOH se haya
disuelto y usted se haya asegurado de homogenizar bien la mezcla, guarde esta solucin en un
envase de PLSTICO con tapa. El NaOH reacciona paulatinamente con el vidrio y va
disminuyendo su concentracin si se deja mucho tiempo (das) en un envase de ese material.

Reaccin:
 58

Reciba de su instructor el estndar primario talato cido de potasio (KHP, 204.22 g/mol) y
squelo en un horno a 110C por 1-2 horas. Anote la pureza del KHP. Luego de secar el
estndar, mantngalo en el desecador por no menos 20 minutos antes de pesar por diferencia
tres porciones de muestras de entre 0.8 a 0.9 g, que descargar en matraces cnicos de 250
mL. Disuelva cada muestra con 50 a 75 mL de agua destilada. Adale a cada solucin de
muestra de 2-3 gotas del indicador fenolftalena y proceda a titular con la solucin de NaOH
hasta un tono levemente rosado que persista por 30 segundos. Asegrese de anotar
correctamente la lectura inicial y final de la bureta con incertidumbre de 0.02 mL. En el
siguiente enlace encuentra una buena demostracin sobre cmo titular:
http://www.youtube.com/watch?v=9DkB82xLvNE&NR=1

Preparacin del desconocido

1. Transfiera cuantitativamente la muestra lquida de fosfatos a un matraz aforado de 250 mL.

2. Complete hasta la marca con agua destilada recientemente hervida y homogenice.
3. Extraiga tres alcuotas de 25.00 mL en vasos de 250 mL. Aada a cada una de ellas 50 mL
de agua destilada recientemente hervida.
4. Lleve a cabo titulacion potenciomtrica a cada una de las tres alcuotas del desconocido
utilizando el NaOH previamente valorado como titulante.

Titulacin del desconocido (Titulacin Manual)

1. Calibre el metro de pH con soluciones amortiguadoras de pH 4 y de pH 9 o las que indique

el profesor.
2. La primera alcuota ser utilizada como gua. Sumerja los electrodos en el vaso que
contiene la muestra y con la bureta correctamente dispuesta, aada porciones de 0.5 mL
anotando el pH luego de cada adicin. Debe observar dos regiones con cambios bruscos
en pH.
3. Con la segunda alcuota va a titular haciendo adiciones de 2 ms mL al comienzo de la
titulacin y anotando el pH, pero cuando est cerca de 1.5 mL de la primera regin de
cambio brusco las adiciones se harn de 0.1 en 0.1 mL hasta pasado 1.5 mL de la regin
brusca. Har igual con la segunda regin de cambio brusco en pH. Pasado 1 mL despus
del segundo punto de equivalencia aadir dos porciones de 2 mL para completar la curva.
La tercera alcuota la usar en caso de que se dae alguna de las dos anteriores.
 59

Titulacin del desconocido (Titulacin Automtica)

1. Calibre el metro de pH con soluciones amortiguadoras de pH 4 y de pH 9 o las que indique

el profesor.
2. Prepare el sistema de MeasureNet para titulacin potenciomtrica, utilizando el cuenta
gotas, de acuerdo a las instrucciones del profesor.
3. Tome una alcuota de la solucin desconocida y lleve a cabo la titulacin hasta llegar a pH
cerca de 12. Asegrese de grabar los datos en la computadora del sistema y luego hacer
una copia electrnica. En este caso tendr muchos datos. Para la evaluacin de los datos
se recomienda utilizar datos de pH alrededor del punto de equivalencia de cada 0.1mL
para definir bien el punto de equivalencia experimental y de cada 0.5 ml o ms en las
regiones previas y posteriores a los puntos de equivalencia. Los datos sern reportados a
dos sitios decimales en concordancia con la incertidumbre absoluta del metro y de la
bureta.

Para la documentacin de datos en la libreta puede pegar una copia de la tabla de datos y
las grficas correspondientes.

Cmputos

1. Determine la molaridad del NaOH con los datos de masa y pureza del estndar primario y
los volmenes de NaOH descargados.
-
2. Determine los milimoles de H3PO4 y H2PO4 en la muestra original mediante los dos
mtodos grficos. Esto lo consigue obteniendo el volumen exacto de los dos puntos de
equivalencia haciendo uso de sus grficas de primera derivada ( !pH/!V vs Vpromedio) y de
Gran Plot (vase descripcin de cmo hacerlo con Excel ms adelante).

Informe

El informe a entregarse seguir el formato y las reglas descritas en el prontuario entregado al

comienzo del curso. Este informe ser preparado en computadora utilizando las herramientas de
Microsoft Excel y Word. Todas las grficas, tablas y cmputos sern parte del informe.

I. Valoracin del NaOH

Incluya los datos de masa de KHP y los volmenes de NaOH descargados al
titular KHP tipo primario. Calcule cada molaridad correspondiente a las masas y
los volmenes. Calcule el promedio e intervalo de confianza. La molaridad
debe tener NO MENOS de 3 cifras significativas (preferiblemente 4). Organice
los datos y las molaridades calculadas en una tabla, incluyendo la molaridad
promedio y su intervalo de confianza.

II. Titulacin de la mezcla de fosfatos: grficas y las tablas que se tienen que incluir

a. Grfica y tabla de pH vs. VNaOH experimental. En la curva de titulacin seale pKa1 y

al pKa2.
b. Grficas y tabla de primera derivada ( !pH/!V vs !V ) para cada uno de los puntos
de equivalencia (donde haca adiciones de 0.1 en 0.1 mL). Una grfica individual para
cada punto de equivalencia (vase descripcin ms adelante).
c. Grficas y tablas del Gran Plot. Una grfica individual para cada punto de equivalencia
(vase descripcin ms adelante).
-
d. Calcule los mmoles H3PO4 y H2PO4 en la muestra original mediante ambos mtodos
grficos y el % de diferencia en los mmoles de H3PO4 y H2PO4 al comparar el mtodo de
primera derivada con el mtodo de Gran. Recuerde que % de diferencia es:
 60

X1 " X 2
) 100
# X1 + X 2 &
% (
$ 2 '

Explique el posible origen de alguna discrepancia y de haberla, indique cul a su juicio es el

mtodo ms confiable y por qu.
!
Determinacin de los Puntos de Equivalencia: Primera Derivada

La curva de titulacin de un cido con base fuerte tiene una pendiente mxima (punto de
inflexin) en el punto de equivalencia. Por lo tanto, si se calcula la primera derivada de la curva
de titulacin como funcin de pH, el volumen que corresponde al mximo de esa curva equivale
al volumen del punto de equivalencia. La grfica de primera derivada se obtiene calculando las
diferencias entre valores adyacentes de pH y de volumen de titulante (V) y tomando la razn
entre ellos (!pH/!V). El punto de inflexion de la curva se identifica por el valor mximo de
!pH/!V al llevarlo a grfica como funcin del volumen promedio de los volmenes adyacentes.

Gua para calcular !pH/!V vs volumen promedio usando Excel.

Se construye la tabla con datos de pH y volumen de NaOH. Se usa una tercera columna para
V + V2 V + V3 V3 + V4
calcular el volumen promedio ( 1 , 2 , ,etc..) . Finalmente use una cuarta
2 2 2
"pH pH2 # pH1
columna para calcular la primera derivada: = ,etc .
"V V2 # V1

El ejemplo en la siguiente pgina demuestra los datos parciales de un estudiante (los

correspondientes a la regin alrededor del primer punto de equivalencia):
 61

Volumen de
"pH/"V
NaOH 0.10 M pH Vprom (mL)
(1/mL)
(mL)
1.59 2.25 2.08 0.101
2.58 2.35 3.03 0.109
3.49 2.45 3.91 0.120
4.33 2.55 4.70 0.134
5.08 2.65 5.40 0.152
5.73 2.75 6.02 0.176
6.30 2.85 6.54 0.206
6.78 2.95 6.99 0.245
7.19 3.05 7.36 0.294
7.53 3.15 7.67 0.355
7.81 3.25 7.93 0.433
8.05 3.35 8.14 0.531
8.23 3.45 8.31 0.654
8.39 3.55 8.45 0.807
8.51 3.65 8.56 0.999
8.61 3.75 8.65 1.237
8.69 3.85 8.72 1.531
8.76 3.95 8.78 1.887
8.81 4.05 8.83 2.312
8.85 4.15 8.87 2.802
8.89 4.25 8.90 3.341
8.92 4.35 8.93 3.889
8.94 4.45 8.96 4.380
8.97 4.55 8.98 4.732
8.99 4.65 9.00 4.869
9.01 4.75 9.02 4.758
9.03 4.85 9.04 4.426
9.05 4.95 9.07 3.945
9.08 5.05 9.09 3.401
9.11 5.15 9.13 2.860
9.14 5.25 9.16 2.365
9.18 5.35 9.21 1.935
9.24 5.45 9.27 1.572
9.30 5.55 9.34 1.274
9.38 5.65 9.43 1.031
9.48 5.75 9.54 0.835
9.60 5.85 9.67 0.678
9.74 5.95 9.83 0.553
9.92 6.05 10.03 0.454
10.14 6.15 10.28 0.374
10.41 6.25 10.57 0.312
10.73 6.35 10.92 0.262
11.11 6.45 11.34 0.224
11.56 6.55 11.82 0.193
12.08 6.65 12.37 0.170
12.67 6.75 12.99 0.152
13.32 6.85
 62

Los valores de las ltimas dos columnas son calculados por Excel. Simplemente se escriben las
frmulas pertinentes en la primera celda de cada columna, por ejemplo:
2.58 + 1.59
V prom = = 2.08 mL
2
2.35# 2.25
"pH /"V = = 0.101 mL#1
2.58 #1.59
y luego se arrastra hacia abajo para efectuar el cmputo en las dems celdas. (Corrobore los
resultados anteriores con la tabla)

Observe que las ltimas dos columnas tienen un par de datos menos (razone usted mismo por
qu eso tiene que ser as).

Al llevar a grfica los resultados obtenidos de esas dos columnas se obtiene

Para hallar el volumen correspondiente al punto de equivalencia, inspeccione la tabla de

resultados, y observe que el volumen que corresponde al valor mximo de la primera derivada
-1
es 8.99 mL (note que en este punto la primera derivada es 4.869 mL ). Por tanto, ese volumen
es el primer punto final. De modo similar, usted tambin puede determinar el segundo punto final
en su grfica.
 63

Aplicacin del Mtodo de Gran para mezcla de fosfatos

3,4
El mtodo de Gran, introducido originalmente por Gunnar Gran , es un mtodo de
procesamiento de datos para la determinacin del punto de equivalencia en titulaciones
potenciomtricas. En titulaciones cido-base, el mtodo se basa en la transformacin de los
datos de pH vs volumen de titulante justo antes del punto de equivalencia. A continuacin se
deriva la relacin matemtica del mtodo de Gran, suponiendo la titulacin de un cido dbil HA
con NaOH. Luego se introducirn los ajustes a las ecuaciones tomando en cuenta que en
nuestro caso se titula una mezcla que contiene un cido triprtico (H3PO4) y su conjugado
-
(H2PO4 ) .

Suponiendo que la actividad equivale a la concentracin de las especies involucradas, la K a se

puede expresar as:

Ka =
[H O ][ A ]
3
+ "

(1)
[ HA]
donde,
CNaOHVNaOH
! [A ] =
"

V0 + VNaOH
(2)

C V "C V
[HA] = HA 0 NaOH NaOH (3)
V0 + VNaOH

Aqu CNaOH es la concentracin del titulante, VNaOH es el volumen descargado del NaOH, V0 es el
volumen inicial del cido HA y CHA es la concentracin inicial del cido. Las ecuaciones (2) y (3 )
! aplican siempre y cuando no se haya alcanzado el punto de equivalencia.

La ecuacin (1) se puede transformar segn se demuestra por las ecuaciones (4), (5) y (6) hasta
obtener la ecuacin (8):

Ka =
[H O ] "C
3
+
NaOH VNaOH
(4)
C HAV0 # CNaOH VNaOH
(C HAV0 # CNaOHVNaOH )K a = [H 3O+ ] "CNaOHVNaOH (5)

(C HAV0 " CNaOHVNaOH ) K = [ H 3O+ ] #VNaOH (6)

a
! CNaOH
Como el volumen del punto de equivalencia viene dado por la ecuacin a continuacin,

C HAV0
! = Veq (7)
CNaOH

entonces la ecuacin (6) se puede expresar as:

! 3
Gran, G (1950): Determination of the equivalence point in potentiometric titrations, Acta Chemica
Scandinavica, 4, 559-577.
4
Gran, G (1952): Determination of the equivalence point in potentiometric titrations-Part II, Analyst, 77,
661-671.
 64

K aVeq " K aVNaOH = [ H 3O+ ] #VNaOH (8)

La ecuacin (8) tiene forma general b + mx = y, donde

!
x = VNaOH
+
y= [H3O ]* VNaOH
b = KaVeq (intercepto)
m= -Ka (pendiente)
+
Esto significa que una grfica de [H3O ]* VNaOH como funcin de VNaOH tiene forma de lnea recta
con pendiente igual a Ka e intercepto igual a KaVeq. Finalmente, para hallar Veq se divide el
intercepto entre el negativo de la pendiente:

int ercepto
Veq = " (9)
pendiente

Para aplicar el mtodo de Gran, se necesitan los puntos PREVIOS al punto de equivalencia.
Como gua general, uno puede utilizar los datos que comprenden entre el 80 y 99 % del
-pH
! volumen del punto de equivalencia para llevar a grfica VNaOH10 como funcin de VNaOH. Por
ejemplo, si el punto de equivalencia fuera alrededor de 10 mL, entonces se deben llevar a grfica
los valores de pH correspondientes a volmenes entre 8.0 y 9.9 mL..

Para hallar los puntos de equivalencia de una mezcla de un cido triprtico H3B y su conjugado
- +
H2B se tiene que tomar en cuenta que la relacin entre [H3O ] y VNaOH es ms complicada que
en la ecuacin (8), por lo que se deben hacer los siguientes ajustes:

Primer Punto de Equivalencia: Previo a la primera regin de cambio abrupto en pH, una
+
grfica de [H3O ]* (VNaOH+Veq2) como funcin de VNaOH produce una lnea recta donde
int ercepto
Veq1 = "
pendiente

Segundo Punto de Equivalencia: Previo a la segunda regin de cambio abrupto en pH,

+
una grfica de [H3O ]* (VNaOH-Veq1) como funcin de VNaOH produce una lnea recta donde
! int ercepto
Veq 2 = "
pendiente

Como puede apreciarse, para hallar uno de los puntos de equivalencia se requiere conocer el
otro punto de equivalencia. Afortunadamente, el valor que se use puede ser aproximado
! mediante inspeccin visual de la curva de pH como funcin de volumen y an as obtener
buenos resultados. A continuacin se presenta un ejemplo de cmo aplicar el mtodo de Gran
-
para la titulacin de una mezcla de H3PO4 y H2PO4 con NaOH 0.100 M.
 65

Para hallar el primer punto de equivalencia se tabulan los datos que queden dentro de 0.80V eq a
0.99Veq. En nuestro caso valores de VNaOH entre 5.00 y 5.94 mL caen dentro de ese intervalo,
estimando que el primer punto de equivalencia es alrededor de 6 mL. A continuacin se
presenta la tabla que se debe generar en excel. La primera y tercera columna contienen los
datos experimentales mientras que la columna del medio es calculada mediante el producto
-pH
(VNaOH + V2eq) * 10 . Por inspeccin visual de la curva de titulacin, V2eq es aproximadamente
16 mL.

-pH
Al llevar a grfica (VNaOH+V2eq)*10 vs VNaOH se obtiene una lnea recta:
 66

Observe la ecuacin de la linea cuya pendiente es -0.0145 e intercepto es 0.0872. Como

int ercepto 0.0872
Veq= " , entonces, Veq= " = 6.01 mL
pendiente 0.0145
-pH
El segundo punto de equivalencia conlleva llevar a grfica (VNaOH-Veq)*10 como funcin de
VNaOH dentro del intervalo 0.80V2eq a 0.99V2eq. En este caso se puede usar el Veq calculado
anteriormente (6.01 mL).!La tabla a continuacin presenta los datos en dicho intervalo:
!

Se deja al lector que calcule V2eq con los datos de la tabla anterior, llevando a grfica (VNaOH-
-pH
Veq)*10 como funcin de VNaOH y obteniendo la pendiente e intercepto de la grfica. Corrobore
usted mismo(a) que V2eq es 16.0 mL.
 67

Pre-Lab

1. Escriba una introduccin en su libreta de laboratorio que incluya la importancia de

los derivados de cido fosfrico en procesos fisiolgicos y los diferentes usos de
estos. Describa cmo se determina cuantitativamente una mezcla de fosfatos
mediante titulacin cido-base, la base terica para determinar el punto de
equivalencia usando tanto primera derivada como Gran Plot y la comparacin de
ambos mtodos en trminos de ventajas y desventajas.
2. Calcule los gramos de NaOH 98% puro que se necesitan para preparar 500 mL de
NaOH(ac) 0.10 M. Exprese a dos sitios decimales.
3. Por qu es necesario usar agua hervida en la preparacin de soluciones en la
determinacin de mezcla de fosfatos?
4. Reproduzca los datos de Vprom y "pH/"V que aparecen en la tabla de la seccin
llamada Determinacin de los Puntos de Equivalencia: Primera Derivada.
Corrobore que el volumen del punto de equivalencia es 8.99 mL.
-
5. Un estudiante recibi una muestra lquida con mezcla de H3PO4 / H2PO4 . La
muestra se transfiri a matraz volumtrico de 250 mL y se complet hasta la marca
con agua destilada. De esa solucin se titul una alcuota de 25.0 mL con NaOH
0.09377 M y mediante el mtodo de primera derivada se encontraron los volmenes
del punto de equivalencia a saber: V1= 8.95 mL; V2= 21.40 mL. Determine los
-
mmoles de H3PO4 y de H2PO4 en la muestra original.
6. Calcule la curva de pH vs volumen de NaOH 0.10 M que resultara al titular 10.0 mL
-
de solucin que contiene 0.75 mmol de H3PO4 y 0.25 mmol de H2PO4 . Utilice las
constantes de equilibrio que se presentaron en la introduccin. Complete la tabla a
continuacin
Volumen pH
(mL)
0.0
2.5
5.0
7.5
10.0
12.5
15.0
17.5
20.0

Use Henderson-Hasselbach para sus cmputos excepto en los puntos de

equivalencia:
# C KK &
% H 2 PO4" 1 2 (
Primer punto de Equivalencia: pH = log
% C + K1 ('
$ H 2 PO4"

pK 2 + pK 3
Segundo punto de equivalencia: pH =
! 2

!
 68

Preparacin de un amortiguador para medidas potenciomtricas

Consulte a su profesor(a) de laboratorio si va a llevar a cabo esta actividad. De todas maneras,

antes de proceder al experimento de determinacin potenciomtrica de fluoruro, debe leer las
siguientes pginas de modo que se familiarice con la preparacin del amortiguador para las
medidas en dicho contexto.

Esta actividad tiene el propsito de que usted prepare un amortiguador de pH= 5.50, que
4+ 3+
adems resista cambios en fortaleza inica y enmascare cationes metlicos tales como Si , Al
3+
y Fe . Este amortiguador (TISAB, por sus siglas en ingls, Total Ionic Strength Adjustment
Buffer) se usa en la determinacin de fluoruro en distintas matrices tales como pasta dental,
agua embotellada o agua potable.

Reactivos:

cido Actico Glacial

NaCl
Cyclohexylenedinitrilotetraacetic acid (CDTA)
NaOH 5.0 M
-
El amortiguador que se va a preparar es aplicable para la medida de F con un sensor
potenciomtrico (electrodo) selectivo. El pH de la solucin debe estar entre 5 6, de modo que
-
se mantenga una concentracin baja de OH (el cual interfiere en la medida), a la vez que
- -
predomine F sobre HF. El sensor es selectivo a F , no especfico. Eso significa que aunque el
-
mismo mide con preferencia el F , tambin puede responder, aunque con menos sensitividad, a
-
otros aniones monovalentes. Por eso, si el pH fuera muy alto, la presencia de OH dara una
-
seal como si fuera F , provocando una desviacin positiva del valor correcto de concentracin
-
de F .
-
Por otro lado, si el pH fuera muy bajo, el equilibrio entre F y HF estara desplazado hacia la
izquierda,

+ -
HF + H2O H 3O + F

disminuyendo as la respuesta del sensor, implicando una desviacin negativa.

Adems del control de pH, la solucin amortiguadora debe tener una alta fortaleza inica para
-
limitar variacin de ese parmetro segn vara la concentracin del F , tanto en los estndares
como en la muestra desconocida. Cuando la fortaleza inica es alta, un pequeo cambio en la
concentracin de especies cargadas traera consigo un cambio relativo insignificante en la
fortaleza inica del medio.

Finalmente, se aade un agente quelante (<<chelating agent>>) que reacciona con cationes
-
metlicos que podran complejar el F en solucin y que por tal razn interferiran en la respuesta
del sensor. A la accin del agente quelante de reaccionar con los metales catinicos para
-
proteger al F , se le conoce como enmascaramiento.

Preparacin del Amortiguador

- -5
Se usar el par cido actico / acetato (HAc / Ac , Ka= 1.75 x 10 ) como sistema amortiguador.
Por qu este par es adecuado para amortiguar a pH= 5.50?

Recuerde que el pH de un amortiguador se relaciona a la concentracin del par conjugado de

acuerdo a la ecuacin de Henderson-Hasselbach:
 69

Como HAc es neutral, "HAc equivale a 1. Aunque en principio se podra preparar el amortiguador
-
calculando las concentraciones de Ac y HAc que satisfagan la ecuacin, lo cierto es que el
- "
coeficiente de actividad de Ac ( Ac) no se conoce en este caso en el que la fortaleza inica es
5
bien alta . Por tal motivo, en vez de calcular las concentraciones de ambos componentes del par
conjugado, es preferible calcular la cantidad de uno de los componentes y ajustar
experimentalmente el pH con especie fuerte aadida.
6
En este caso, el componente del par conjugado ser cido actico glacial , y la especie fuerte,
NaOH 5.0 M.

IMPORTANTE: Consulte con su profesor(a) de laboratorio el volumen de amortiguador que

debera preparar. No proceda sin antes verificar esa informacin. El procedimiento que se
describe a continuacin aplica a la preparacin de 1.00 L. En caso de que vaya a preparar
menos cantidad, ajuste las cantidades de manera proporcional. Note, no obstante, que la
concentracin del amortiguador siempre ser la misma, 1.0 M, independientemente del volumen
final del amortiguador.

Procedimiento:
1. Disuelva 4 g de CDTA y 58 g de NaCl en aproximadamente 700 mL de agua destilada
en un vaso de 1.5 2 L. Coloque un imn dentro del vaso para agitar la solucin.
Coloque el vaso sobre una plancha de agitacin.
2. Aada suficiente cido actico glacial a la mezcla como para que la concentracin de
HAc sea 1.0 M al completar hasta 1 L. Para calcular el volumen de HAc que necesitar,
obtenga la molaridad del cido actico glacial o el %(p/p) y la densidad del mismo. Esa
informacin aparece en la botella del cido.
3. Calibre un electrodo de vidrio (para medidas de pH), entre pH= 4 y pH = 7.
4. Sumerja el electrodo de pH en la solucin y prepare el metro de pH para hacer las
medidas.
5. Encienda la plancha en el modo de agitacin para comenzar a agitar la solucin.
Asegrese de que la agitacin sea uniforme y que no haya salpicaduras.
6. Aada NaOH 5.0 M en porciones de 2-3 mL, y para cada adicin, mida el pH.
7. Cuando se vaya acercando al pH deseado, aada NaOH 5.0 M, gota a gota hasta que el
pH = 5.50 0.05.
8. Transfiera cuantitativamente a matraz volumtrico de 1.00 L y complete hasta la marca
con agua destilada. Homogenice bien.
9. Obtenga una pequea porcin de esta solucin y verifique su pH. Este ser el pH final
que se informar. Antelo en su libreta.
10. Transfiera la solucin a una botella apropiada y tpela. Antes de usar la solucin,
asegrese de homogenizar su contenido. Anote en la botella la siguiente informacin:
a. Identidad de la solucin (en este caso, TISAB)
b. Concentracin de NaCl
c. Concentracin de CTAB
d. pH final del amortiguador
e. Identidad y Concentracin del amortiguador.

5
Cuando # es bien alta (>>0.1), el coeficiente de actividad no se puede calcular con certeza
usando la teora de Debye-Hckel.
6
cido actico glacial es cido actico con alta pureza (99.5 100%). Se le llama as pues
forma unos cristales muy parecidos al hielo cuando su temperatura baja a 62F.
 70

Pre Lab

1. A una solucin con #= 0.0500 se le aade suficiente NaF como para que su concentracin
en la solucin sea 0.0250 M. A otra solucin con #= 0.500 se le aade suficiente NaF como
para que su concentracin en la solucin sea tambin 0.0250 M. Calcule el cambio relativo
en la fortaleza inica de la solucin al aadir NaF en cada caso. Exprese en forma
porcentual.

A la luz de estos resultados, qu ventaja tiene preparar un amortiguador con fortaleza

inica alta?

2. Busque en Wikipedia lo que es un agente quelante (Chelating Agent) y lo que es un agente

enmascarante (Masking Agent). De acuerdo a la informacin obtenida, comente sobre la
veracidad de las siguientes aseveraciones:

" Todo agente quelante es agente enmascarante.

" Todo agente enmascarante es agente quelante.
-
3. Explique por qu se trabaja a un pH=5.50 cuando se analiza una muestra para determinar F
mediante el uso de un electrodo selectivo a ese anin.

4. Ignorando el efecto de fortaleza inica, calcule el volumen de cido actico glacial (99.5 %;
d= 1.051 g/mL) y el volumen de NaOH 5.00 M requeridos para preparar 250.0 mL de
solucin cuya concentracin de amortiguador sea 1.00 M y el pH = 5.500.

5. Si se prepara el amortiguador utilizando las cantidades calculadas en el problema 4, se

encuentra en la prctica que el pH no da exactamente 5.500. Tome en cuenta el efecto de
fortaleza inica para predecir si el pH experimental ser menor o mayor a 5.500. Explique
basado en el efecto de # en el siguiente equilibrio:

+ -
HAc + H2O H3O + Ac

Aunque no tiene que hacer cmputos, s debe saber cmo tomar en cuenta la fortaleza
inica en la ecuacin de Henderson-Hasselbach, para as obtener un estimado relativo del
pH que se obtendra. Recuerde que "Ac no se conoce.
 71

DETERMINACIN POTENCIOMTRICA DE FLUORURO EN UNA MUESTRA

UTILIZANDO UN ELECTRODO SELECTIVO

INTRODUCCIN

Los electrodos selectivos de iones se pueden describir como sensores electroqumicos cuyo
potencial depende logartmicamente de la actividad en disolucin de una especie cargada (in),
de acuerdo con la siguiente ecuacin:

(1)

dnde z representa la carga del in y a su actividad. En el electrodo selectivo para fluoruro

3+
(Fig 1) la membrana que imparte la selectividad es un cristal de LaF3 dopado con trazas de Eu
-
para crear espacios vacantes donde el ion F se pueda movilizar produciendo corriente por
movimiento de cargas. La superficie externa del cristal est en contacto con una solucin del
analito mientras que la superficie interna est en contacto con una solucin 0.1 M en NaF y
NaCl.

Figura 1. Diagrama esquemtico del electrodo de fluoruro.

La determinacin se basa en la medida de la diferencia de potencial que se establece entre el

electrodo indicador, en este caso selectivo a in fluoruro, y un electrodo de referencia cuyo
potencial permanece constante. La celda de medida puede representarse como:
- -
Ag/AgCl, Cl (03 M), F (0001 M)/LaF3 ## Solucin bajo estudio $$ Eref. (2)
La diferencia en potencial para esta celda (!E) es la seal que se mide con el potencimetro y
se relaciona con la concentracin del analito a travs de la ecuacin de Nernst segn se
presenta en la ecuacin (3).

(3)

-
Donde: n representa el nmero de electrones del proceso y [F ] la concentracin de fluoruro
dentro y fuera de la membrana selectiva. El 0.05916 incorpora los valores de la constante de
gases ideales R, la temperatura T, y la constante de Faraday (F). (Note que la ecuacin de
Nernst original incluye el trmino de actividad en vez de concentracin, por ende se presume que
 72

el coeficiente de actividad es 1). Como el EREFERENCIA se conoce, al igual que [F-]dentro y n, se

-
pueden juntar en una constante y obtenemos que para el electrodo de F el Ecelda queda reducido
a:

0.05916
E CELL = k " log[ F " ] fuera (4)
1
-
Por tanto, puede apreciarse que variando la [F ], la representacin grfica de E en funcin de log
-
[F ] es una lnea recta de pendiente -0.05916 V. Note que la pendiente de la lnea tiene un valor
fijo igual a 0.05916.
! Esta es la sensitividad del electrodo y se puede utilizar para verificar si el
electrodo est dando una respuesta correcta, o sea, de acuerdo con la ley de Nernst. Para un
anlisis cuantitativo de fluoruro se utiliza una curva de calibracin de varios puntos. Se mide el
-
potencial a diferentes [F ] y se usa regresin lineal para obtener la mejor recta entre los puntos.
-
Se mide el potencial del desconocido y se extrapola de la grfica para obtener la [F ].

INTERFERENCIAS

Ningn electrodo selectivo responde exclusivamente a un solo ion. El electrodo de fluoruro

tambin responde a la concentracin de hidrxido y por esta razn, el pH de la solucin bajo
estudio debe ser controlado. El coeficiente de selectividad se define como la respuesta del
electrodo a la interferencia X entre la respuesta al analito A :

Respuesta a la interferencia(X)
kA ,X = (5)
Respuesta al analito (A)

Es importante recordar que la interferencia afecta la medida del potencial en el electrodo. Para
iones que interfieren y tienen la misma carga (n) que el analito se puede calcular
cuantitativamente
! el efecto de [X] en el potencial de la siguiente forma:
0.05916
E CELDA = k + log( [A] + k A,X [X] ...) (6)
1

!
 73

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

(Recuerde traer pasta dental o una muestra de agua, lo que su profesor le indique)
-
Verifique en que concentracin se encuentra tpicamente el F en la muestra y en que unidad es
reportado.

A. Preparacin de soluciones:

1. Amortiguador de fortaleza inica constante o TISAB (total ionic strength adjustment buffer)
usar la solucin preparada en el laboratorio anterior.
2. Seque aproximadamente 0.5 gramos de NaF a 110C por dos horas en el horno.
-
3. Prepare 250 mL de una solucin de 100ppm en F a partir de NaF usando agua nanopura
como disolvente.

4. Prepare 250 mL de una solucin de 10 ppm en F (FLUORURO) a partir de la solucin
patrn de 100 ppm.
5. Prepare 100 mL de 3 soluciones estndares entre 0.5 ppm (500 ppb) y 5.0 ppm a partir de la
-
solucin de 10 ppm F . Aada a cada solucin 50 mL de TISAB antes de completar hasta la
marca. Estas son las soluciones que usted usar para construir su curva de calibracin. La
muestra y el desconocido de control de calidad deben quedar entre los valores de los
estndares.
6. Escriba en su libreta el procedimiento utilizado para preparar cada una de las soluciones.

B. Determinacin del lmite de deteccin del electrodo:

Para poder obtener el lmite de deteccin del electrodo es necesario que prepare soluciones
cada vez ms diludas utilizando las soluciones estndares de arriba. Esto se hace con el
propsito de llegar a concentraciones que no puedan ser medidas por el electrodo. Prepare 2
soluciones por debajo de 20 ppb. Mientras le sea posible utilice volmenes no mayor de 50.00
mL. Recuerde aadir la cantidad necesaria de TISAB a todas las soluciones para poder
mantener la misma fortaleza inica en todas ellas. No mida stas soluciones primero sino ltimas
pues tienden a tomar ms tiempo en estabilizarse.

Figura 2. Determinacin Limite de Deteccin del Electrodo

-
C. Medidas de potencial vs. ppm F
 74

1. Pula la superficie del electrodo de fluoruro suavemente sobre un papel de filtro

humedecido. Enjuage el electrodo con suficiente agua nanopura y squelo con un papel
Kimwipes.

2. Mida el potencial de cada solucin estndar. Empiece con la solucin de menor

concentracin seguida de la ms concentrada, y as sucesivamente hasta completar todas
las soluciones. Es recomendable que agite la solucin magnticamente , per suavemente,
hasta que la lectura de potencial sea estable. Observe que no haya burbujas en la superficie
del electrodo.

2. Lleve a grfica los valores de Eobs como funcin de pF. La grfica debe consistir de dos
lneas rectas, una de ellas horizontal (ver Fig 2). El segmento horizontal proviene de las
-
medidas donde el electrodo ya no puede detectar el F . Si extrapola estas dos lneas
hasta donde se corten podr obtener en el eje de x el valor del lmite de deteccin del
electrodo.

D. Muestra desconocida
1. Obtenga la muestra desconocida y haga una transferencia cuantitativa a un matraz
aforado de 100.00mL. Complete la dilucin igual que lo hizo con las soluciones
patrn. Recuerde aadir la cantidad de TISAB necesaria.
2. Mida el potencial de la solucin del mismo modo que hizo con las soluciones patrn.
Esta lectura debe hacerse en el mismo perodo de laboratorio que las soluciones
estndares.
3. Cuando termine las medidas, enjuague el electrodo con agua nanopura y gurdelo
con un pedazo de Kimwipe humedecido.

E. Muestra de agua
1. Tome una muestra del agua que quiere analizar. Anote la informacin relevante de
la muestra (identidad, fuente, hora, localidad, etc). Diluya a 50.00 mL. Recuerde
aadir la cantidad de TISAB necesaria.
2. Mida el potencial de la solucin del mismo modo que hizo con las soluciones patrn.
Esta lectura debe hacerse en el mismo perodo de laboratorio que las soluciones
estndares.
3. Cuando termine las medidas, enjuague el electrodo con agua nanopura y gurdelo
con un pedazo de Kimwipe humedecido.

F. Muestra de pasta dental

1. Pese en vasos de 250 mL separados y previamente pesados dos muestras de pasta

dental de 0.2g. Para una de las muestras siga el siguiente procedimiento: Marque sta
como muestra #1. Pese el vaso con la muestra para que obtenga el peso de la muestra.
Ponga la muestra a secar en un horno por una hora a 105C y luego de enfriar a
temperatura de saln, pese la muestra nuevamente para obtener el peso de la muestra
seca.

2. Pese la segunda muestra de pasta y somtala al siguiente tratamiento: Aadale 50 mL

de TISAB y hierva por 2 minutos con buena agitacin. Enfre la solucin y fltrela por
succin. Transfiera el lquido cuantitativamente a un matraz volumtrico de 100 mL y
complete hasta la marca con agua nanopura.

Pequeas cantidades de slido pueden permanecer en el vaso sin afectar la precisin de

los resultados, ya que en este punto el fluoruro ha sido liberado a la solucin. Mida el
potencial de una porcin de esta solucin. Esta lectura debe hacerse en el mismo perodo
de laboratorio que las soluciones estndares.
 75

3. Cuando termine las medidas, enjuague el electrodo con agua nanopura y gurdelo con
un pedazo de Kimwipe humedecido.

Informe

El informe de laboratorio es un informe corto utilizando EXCEL y deber incluir:

Extracto: Utilice la gua de informe largo en su Manual de Laboratorio
Datos y Resultados:
1. Datos de pesada e informacin til de reactivos
2. La concentracin en ppm y M de todas las soluciones.
3. La curva de calibracin, expresada en trminos de E(mV) vs. pF, incluyendo el clculo
del lmite de deteccin del electrodo (ppm) y la ecuacin de la mejor lnea de la curva de
calibracin. (Recuerde que con sus datos se obtienen 2 lneas).
4. El por ciento por peso de agua en la pasta.
5. Concentracin de fluoruro (ppm) en la muestra. Si la muestra es pasta dental en %
(p/p) en la muestra hmeda y % (p/p) en una muestra seca.

PREGUNTAS (BONO)

1) Explique el efecto que hubiese tenido no mantener la fortaleza inica constante al llevar a
cabo las medidas potenciomtricas.
-3
2) Una solucin estndar de NaF 1.00x10 M ley -0.230V. La solucin de un desconocido ley -
-
0.300V. Cul es la [F ] en la solucin desconocida?
-3
3) Cul es el cambio en la medida del potencial si una solucin de NaF 1.00x10 M se
-4
intercambia por otra solucin de NaF 1.00x10 M?
+3 +3 -
4) Explique si Fe y Al interfieren en el anlisis de F y si el mtodo que usamos elimina estas
interferencias de alguna manera. Explique si es posible usar un pH menor de 5.25 para llevar a
cabo nuestro anlisis (pKa HF = 3.17).
6) Explique si la temperatura es un factor a tomar en cuenta durante las medidas
potenciomtricas.
 76

Pre Lab

1. Cuntos gramos de NaF se tienen que usar para preparar una solucin de 100ppm de
-
F?
2. Calcule el volumen necesario para preparar 100 mL de 3 soluciones estndares de 0.5
- -
1, 2.5 y 5.0 ppm de F a partir de la solucin de 10 ppm F .
3. Que datos usted tiene que llevar a grfica para poder determinar la concentracin de
fluoruro en este experimento? Dibuje de forma esquemtica la tendencia que obtendr
en la grfica
4. Explique porque es importante usar el TISAB en este experimento
5. Establezca la diferencia entre actividad y concentracin
6. Describa cmo funciona el electrodo selectivo de fluoruro
 77

Determinacin De Manganeso En Acero Mediante Espectrofotometra

El manganeso en el acero se halla en cantidades bien pequeas. Sin embargo, este metal le da
ciertas cualidades al acero mejorando sus propiedades como fortaleza, facilidad para rodar,
dureza, durabilidad y resistencia al uso. El manganeso en forma de su bixido se usa como
depolarizador. El manganeso es el responsable del color amatista en piedras y vidrios.

El mtodo ms usado para la determinacin colorimtrica del Mn se basa en la oxidacin del in

2+ -
manganoso, Mn , al permanganato, MnO4 , donde el Mn se halla en el estado de oxidacin de
+7. Para este fin se usa KIO4:

2+ - + - +
2Mn + 5IO4 3H2O 2HMnO4 + 5IO3 + 4H

Siendo el hierro el componente mayor del acero, hay una interferencia muy fuerte por parte del
frrico. La adicin de cido fosfrico elimina la interferencia mediante la formacin de complejo
Fe-fosfato incoloro. Algunas aleaciones de acero contienen nquel y cromo, as que en esos caso
se debe aadir una cantidad igual a la contenida de estos elementos en la solucin que se usa
para preparar la curva de calibracin (blanco).

Temas que deben ser discutidos por su instructor de laboratorio:

Radiacin electromagntica:
o Modelo ondulatorio: longitud de onda, frecuencia, velocidad y amplitud
o Modelo corpuscular (particulado): fotones, energa (E = h%), potencia de
radiacin (P)
Absorcin de energa radiante:
o Diagrama de Jablonski
Esquema general del espectrofotmetro (spectronic 20)
o componentes esenciales (fuente, monocromador, detector)
o medida de la transmitancia y absorbancia: T = P/Po; A= -log T A= 2-log%T
Anlisis Cuantitativo
o Espectro de absorcin
o Ley de Beer: A= &bC
o Curva de Calibracin
 78

INSTRUMENTACION

El Spectronic 20 de la Bausch & Lomb es el instrumento que usarn para la determinacin del
Mn. Es un instrumento muy verstil que rastrea el espectro entre 375 y 650 nm (aunque se
podra expandir aadiendo filtros). El funcionamiento del sistema ptico se entiende mejor si
hacemos referencia al siguiente diagrama.

Luz blanca emitida por la bombilla de tungsteno (LAMP) es enfocada en la rendija de

entrada (ENTRANCE SLIT). La luz es reenfocada en la rendija de salida (EXIT SLIT) luego de
haber sido reflejada y dispersada por la rejilla de difraccin (GRATING). Para obtener longitudes
de onda diferentes, la rejilla ("grating"), es rotada por medio de un brazo el cual se mueve
cuando el camn (WAVELENGTH CAM) se rota. La luz monocromtica que pasa por la rendija
de salida, incide sobre la muestra (SAMPLE), pasa a travs y cae en el detector (MEASURING
PHOTOTUBE). El detector traduce, cambia la seal ptica a una elctrica la cual es amplificada,
registrada y leda como %T o A.

El siguiente diagrama contiene las partes externas del instrumento:

 79

El control de longitud de onda (a) se rota hasta que la longitud de onda deseada aparezca en la
escala (d). El instrumento se prende rotando el amplificador controlado por (c) hacia la derecha.
Luego de dejar calentar por unos minutos se ajusta el control de amplificador (c) para traer la
aguja del metro (d) a que lea %T o una A infinita. El tubo de ensayo o cubeta que contiene la
muestra se coloca en el portamuestras (e). Cierre la cubierta del portamuestras. El control de luz
(f) debe ser rotado ahora hasta que el metro lea 100 %T (A = 0) cuando se est calibrando el
instrumento con la referencia. Luego se coloca la muestra en vez del blanco o referencia y se lee
el %T o la A.

Es aconsejable que se mueva la aguja del metro hacia adentro de la escala (d) cuando se va a
cambiar la longitud de la onda. Esto evita que haya la posibilidad de que se queme el metro a
pesar de que est electrnicamente protegido.

Procedimiento

1. Preparacin de soluciones patrn

Haciendo uso de los clculos obtenidos en el Pre-lab prepare 3 soluciones

acuosas de KMnO4 ,de modo tal que el rango de concentracin sea 20% de la
concentracin esperada en el desconocido. El volumen de las soluciones debe
ser el menor posible y suficiente para hacer las medidas requeridas. Las
soluciones se prepararn a partir de la solucin ~0.01M (Solucin KMnO4
Valorada) que ser proporcionada por el instructor de laboratorio .

a) Prepare las tres soluciones. Identifique cada solucin. Escriba el

procedimiento utilizado.
b) Utilizando los datos de valoracin proporcionado, determine la
concentracin real de la Solucin KMnO4 Valorada y su incertidumbre.
c) Determine la concentracin real y la incertidumbre de cada solucin.

2. Seleccin de longitud de onda mxima

Determine la absorbencia de la solucin II (concentracin intermedia) a las longitudes

de onda: 510, 520, 530, 540, y 560 nm. Haga una grfica de A vs. ' y escoja la
longitud de onda mxima, 'max .

3. Curva de calibracin y verificacin de la Ley de Beer

Determine la absorbencia de las soluciones I, II y III al 'max en duplicado. Si ya tiene

un valor de la solucin II, slo haga la segunda medida. Todas las medidas para la curva
de calibracin tienen que realizarse con el mismo instrumento y preferiblemente con la
misma celda.
 80

Haga una grfica de A vs. C; esta grfica se denomina curva de calibracin para
Permanganato de potasio, la cual debe ser una lnea recta que pase por (0,0). Esto
verifica la Ley de Beer.

4. Tratamiento de la muestra desconocida

a) Pese una muestra de acero, de aproximadamente 1 gramo. La muestra no hay

que secarla. Descargue en un vaso de 250 mL. Disuelva con 50-60 mL de
HNO3 diluido (1:3) calentando dentro del aspirador.

2-
b) Aada aproximadamente 1 gramo de una sal de S2O8 (persulfato). Hierva por
10-15 minutos. Diluya con agua hasta aproximadamente 100 mL y aada 15
mL de H3PO4 al 85%.

c) Determine cuanto KIO4 necesita aadir y pese la cantidad apropiada. Aada

KIO4 y deje hervir suavemente por 3 minutos. Mantenga un agitador de vidrio
dentro del vaso y cubra con cristal de reloj.

d) Espere que baje la temperatura un poco y aada 0.2 g ms de KIO4. Vuelva a

hervir por 1 2 minutos. Deje enfriar y transfiera cuantitativamente a un matraz
aforado de 500.0 mL.

e) Determine, en triplicado, la absorbencia de esta solucin al 'max que usted

determin anteriormente.

Preparacin de KMnO4 aproximadamente 0.01 M (Esta parte la lleva a cabo el instructor y

luego le informa los resultados de la valoracin)

Disuelva aproximadamente 1.8 g de KMnO4 en un litro de agua destilada. Caliente hasta el

punto de ebullicin y mantenga caliente por aproximadamente una hora. No permita que la
solucin hierva durante esta hora. Cubra con un cristal de reloj y djela reposar preferiblemente
por 24 horas o ms. Filtre la solucin a travs de un crisol de Gooch preparado con lana de vidrio
(glass wool) transfirindolo a una botella mbar.

Valoracin de KMnO4 0.01 M contra Na2C2O4

o
1. Seque la muestra tipo primario por lo menos una hora a 110 C.

2. Enfrela en el desecador y pese en la balanza analtica una muestra de 2.5-3.0

g. echndola en un vaso de 250 mL.

3. Disuelva en agua y transfiera cuantitativamente a un matraz aforado de

250.0 mL.

4. Saque alcuotas de 10.00 mL en matraces cnicos de 500 mL.

 81

5. Diluya cada alcuota hasta aproximadamente 250 mL con agua destilada y

aada a cada una 12 mL de H2SO4 concentrado.

o
6. Caliente hasta una temperatura de 55-60 C. No debe usar un termmetro. Se
sabe que se ha llegado a esa temperatura cuando usted casi no pueda sostener
el matraz con la mano, pero todava s.

7. La primera adicin de KMnO4 (ac) a la solucin de oxalato debe ser de 0.1 mL

ya que en los inicios la reaccin es lenta (de hecho notar que la solucin se
2+
torna rosa inicialmente). No obstante una vez se empieza a formar el Mn (ac),
- 2-
ste cataliza la reaccin del MnO4 con el C2O4 de manera que la titulacin
procede satisfactoriamente.

8. Titule con el KMnO4 hasta un punto final rosa plido que permanezca por lo
menos 30 segundos. La solucin debe estar caliente en todo momento.

Notas:

o
1. El KMnO4 es un oxidante fuerte (E = +1.51V) que reacciona con substancias
reductoras que contiene el agua. Es por esto que hay que calentarla y dejarla
reposar para luego filtrar el MnO2 que se produce. El MnO2 que se deposita en
los vasos y en las buretas se debe remover inmediatamente con una solucin 1
M en H2SO4 y si ste persiste, se usa una solucin del mismo cido al cual se
le ha aadido un poco de H2O2 al 3%.

- 2- 2+
2. La reaccin entre MnO4 y C2O4 es lenta, pero es catalizada por el Mn que
o
se produce, y en el punto de equivalencia, a 60 C es instantnea.

3. Despus que se ha titulado la primera alcuota, las dems se pueden titular

aadiendo un mililitro menos del volumen requerido en la primera, calentando
o
luego a 60 C y completando lentamente la titulacin.

Resultados

1. Incluya los resultados de la valoracin de KMnO4.

2. Incluya las grficas de espectro de absorcin y de curva de calibracin para

permanganato. Asegrese de que hace la curva de calibracin en la escala adecuada,
que rotula los ejes correctamente y que traza la mejor lnea entre los puntos. La tabla de
datos debe incluir el punto 0,0 (medida del blanco). Toda grfica debe ser hecha a
computadora y al trazar la mejor lnea NO debe forzar la mejor lnea por el origen (0,0).

3. Determine la concentracin de su desconocido interpolando en su curva de calibracin o

haciendo uso de la ecuacin de la mejor lnea, ilustre en la grafica.
4. Determine la incertidumbre de la concentracin del desconocido utilizando las siguientes
frmulas:
 82

donde Sr es la desviacin estndar de la regresin lineal, Sc es la incertidumbre de la

concentracin del desconocido, m= pendiente, b = intercepto, n= nmero de puntos en la
curva de calibracin, k= nmero de determinaciones del desconocido (rplicas), y =
absorbancia promedio del desconocido, = absorbancia promedio obtenida con todos los
puntos de la curva de calibracin, xi es la concentracin de cada estndar, es la
concentracin promedio de todos los estndares utilizados en la curva de calibracin.
5. Determine el % Mn en la muestra y su incertidumbre.

Pre Lab.

-1 -
1. El coeficiente de absortividad molar de permanganato es aproximadamente 2200 M cm
1
. Calcule la molaridad que debera tener una solucin de permanganato para que la
Absorbancia medida con celda de 1.00 cm sea 0.500.
2. Para preparar tres soluciones de concentracin conocida de permanganato, suponga
que usted transfiere 5.00 mL de solucin 0.01875 M a matraz de 250.0 mL y lleva hasta
la marca con agua destilada. Esa es la Solucin I. Suponga tambien que transfiere
50.00 mL de solucin 0.01875 M a matraz de 100.0 mL y lleva hasta la marca con agua
destilada. Esa es la Solucin II. Finalmente, transfiere 25.00 mL de la Solucin I a
matraz volumtrico de 100.0 mL y lleva hasta la marca con agua destilada. Calcule las
molaridades de las soluciones I, II y III.
3. Para construir una curva de calibracin, un estudiante obtuvo los siguientes resultados
luego de preparar 3 soluciones estndares de permanganato:

Solucin Concentracin %T Absorbancia

-4
1 4.00 x 10 12.94
-4
2 2.00 x 10 35.91
-4
3 1.00 x 10 59.22
Desconocido
48.92
(tres rplicas)

Complete la informacion de la tabla (absorbancias y concentracin del desconocido).

Use el programado excel para calcular los parmetros de la curva de calibracin
(pendiente e intercepto). Demuestre los cmputos de la concentracin del desconocido,
utilizando la pendiente e intercepto. Puede usar la plantilla llamada Curva de
Calibracin.xls, para corroborar su respuesta y para expresar el resultado con cifras
significativas.
4. Una muestra de acero que pes 1.0145 g fue tratada quimicamente para convertir todo
- -
el Mn en MnO4 (ac). La solucin de MnO4 se transfiri a matraz de 500.0 mL y llevado
a la marca con agua destilada. Si la curva de calibracin y absorbancia de esta solucin
corresponden a la tabla del ejercicio 3, calcule el % de Mn en acero.
5. Suponiendo que el % Mn en la muestra que va analizarse est entre 0.10% y 0.80%. Si
la muestra se prepara siguiendo el procedimiento descrito para este experimento:
a. Determine cul sera el rango de concentracin de KMnO4 esperado en la
solucin final del desconocido.
 83

b. Describa como preparara tres soluciones de KMnO4 de modo tal que el rango
de concentracin de stas cubra el rango de concentracin del
desconocido20%.

En este experimento se le proporcionar una muestra de acero que se obtiene como

estndar de referencia cuyo % Mn es conocido por su instructor. Busque informacin
sobre el contenido tpico del analito en la muestra.
 84

Separacin de aminocidos mediante cromatografia de capa fina

Objetivos
1. Relacionarse con las destrezas bsicas de cromatografa de capa fina
a. Preparacin de placas
b. Preparacin de fase mvil
c. Revelado
d. Deteccin
2. Generar resultados cualitativos para la identificacin de aminocidos en una mezcla
de aminocidos de composicin desconocida

Materiales y reactivos necesarios

1. Fase movible
a. Alcohol butlico: cido actico: agua (80:20:20vol/vol)
2. Diluyente
a. Solucin 0.5M HCl en alcohol
3. Reactivo revelador
Solucin de Nihidrina (0.3 % nihidrina (1,2,3 triketohydrindene Eastman
No.2495) en alcohol butlico conteniendo 3% cido actico glacial.

4. Equipo cromatogrfico
Rociador o atomizador

Cmara de desarrollo de placas de cromatografa de capa fina

Placas para cromatografa de capa fina (Slica Gel)

Procedimiento
A. Preparacin de la placas
1. En el aspirador prepare aproximadamente 200 mL de la fase movible, vierta en la
cmara de desarrollo y tape la cmara.
2. Tome una placa de cromatografa de capa fina y trace una lnea horizontal a una
distancia de aproximadamente 2cm del borde inferior. Trace la lnea suavemente
con un capilar de vidrio o un lpiz de grafito; con cuidado de que no profundice la
superficie de la capa de slice, pero si sea notable la marca.
3. De la misma manera haga otra lnea horizontal a una distancia de 12cm del borde
inferior y otra a 15cm.
4. Identifique la placa en una de las esquinas en la parte superior de la placa.
5. Coloque la placa en forma vertical dentro de la cmara de desarrollo: Asegure que el
nivel de disolvente est por debajo de la primera lnea horizontal. De no ser as
remueva parte del disolvente. Asegure tapar siempre la cmara .
6. Deje correr la fase movible hasta llegar, mnimo, a la ltima lnea horizontal trazada
(15cm).
7. Tome la placa y seque al menos 5 minutos al aire o con un secador, dentro del
aspirador. Luego coloque la placa en el horno y seque por 5 minutos adicionales.
B. Separacin de aminocidos
1. Preparacin de la muestra desconocida
Tome la muestra de desconocido y haga una transferencia cuantitativa a un matraz
aforado de 50 mL y complete con solucin diluyente.
 85

2. Soluciones patrones
Se proveern soluciones patrones de posibles aminocidos

3. Corrida cromatogrfica
a. Deposite lentamente un 1L de la solucin de desconocido en la lnea
horizontal a 2cm a una distancia aproximada de 2cm del borde izquierdo. El
depsito debe hacerse en una zona lo ms pequea posible. Esto se logra
secando con aire frio mientras se descarga la muestra sobre la placa. Repita el
procedimiento tres veces ms y para as tener un triplicado de la muestra,
dejando una distancia de al menos 1.5 entre ellas.
b. Repita el paso a para las soluciones patrones, pero una sola vez por cada
solucin. Repita la descarga slo si hubo alguna dificultad en la misma.
c. Seque todas las zonas con muestra utilizando aire fro.
d. Coloque la placa nuevamente dentro de la cmara de desarrollo y deje correr el
frente de la fase movible hasta la lnea horizontal a 12 cm.
e. Luego, saque la placa de la cmara, seque brevemente con aire fro en el
aspirador y coloque la misma en el horno por 5 minutos.
4. Revelado
a. En el aspirador roce la placa con el agente revelador. Seque brevemente con
aire caliente en el aspirador.
b. Luego caliente en el horno hasta que se hagan visibles las zonas.
C. Identificacin de aminocidos
a. Calcule el Rf para cada zona detectada en la muestra desconocida y el Rf
correspondiente a cada aminocido en las soluciones patrones. Identifique los
aminocidos presentes en la muestra desconocida en concordancia con el Rf
calculado en los estndares o patrones.

Pre-Lab
1. En su libreta de laboratorio, luego de escribir los objetivos del experimento, escriba una
introduccin en la que incluye informacin de trasfondo de cromatografa de capa fina.
Incluya la siguiente informacin:

Cromatografa: Aspectos generales

Cromatografa de capa fina: utilidad cuantitativa y cualitativa
Fase movible (mobile phase)
Fase estacionaria
Significado de Rf, Cmo se determina?, Qu utilidad tiene?, Qu factores
afectan su valor?

En esta experiencia de laboratorio:

a. Cul es la fase movible?, Cul es la estructura molecular de sus

componentes?, Es polar o no polar?
b. Cul es la fase estacionaria? Cul es la estructura molecular de
sus componentes?, Es polar o no polar?
c. Cmo se obtiene la seal analtica?
 86

2. Busque en la literatura la estructura molecular de los siguientes aminocidos: alanina,

serina, arginina y cido glutmico. Colquelos en orden de polaridad?, En el anlisis de
TLC a realizarse en el laboratorio, Cul se esperara tuviera Rf mayor y cul menor?
Dibuja una placa de TLC revelada Cmo se veran los resultados?

3. Si se prepara una solucin patrn pesando 0.9850g de arginina y diluyendo a 100.00mL

de solucin diluyente en un matraz volumtrico. Luego se toma una alcuota de 5.00mL y
se diluye a 50.00mL en matraz aforado. De esta solucin se toman 3#L para
depositarlos en la placa de TLC para su anlisis.

Qu cantidad de arginina repesentara la mancha observada en el TLC al culminar el

anlisis?

Qu % de la muestra de arginina representa esa cantidad?

4. Para analizar una muestra de cierto amino cido y determinar el nivel de impurezas se
pes 0.9843g de la muestra y se le aadi 1.00 mL de diluyente en un tubo de ensayo.
Del sobrenadante se deposit 1 #L en la placa de TLC junto a la solucin patrn segn
se describi en el ejercicio anterior. Luego de desarrollar y revelar la placa se observaron
tres manchas, una de mayor tamao e intensidad, al mismo Rf que la mancha de la
solucin patrn. Las otras dos con distintos Rf: una de mayor tamao e intensidad que
la mancha de la solucin patrn y la otra de menor tamao e intensidad que la mancha
de la solucin patrn.

Cul es la identidad del amino cido?

A que % de la muestra correspondera la respuesta de la solucin patrn?
Qu se puede decir, en trminos cualitativos y cuantitativos, de la composicin de la
muestra?