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Badji Mokhtar Annaba University

Universit Badji Mokhtar- Annaba

Facult des sciences

Dpartement de Biochimie

MEMOIRE

Prsent en vue de lobtention du diplme de Magister en


Microbiologie applique

Option
Microbiologie de lenvironnement

Par

Mlle KHALLEF Messaouda

DIRECTEUR DE MEMOIRE :

MR BENOUARETH Djamel eddine Matre de confrence, Universit Guelma.

Devant le Jury:

PRESIDENT : Mme CHETTIBI H. Matre de confrence, Universit Annaba.


EXAMINATEURS : Melle ABDI Charg de cours, Universit Annaba.
Mlle KIRANE D. Matre de confrence, Universit Annaba.
MR FERKOUS F. Matre de confrence, Universit Annaba.

Promotion 2004
Sommaire

Page
Introduction 1

Partie Bibliographique

I- traitements des eaux destines la consommation


I-1- diffrents types deau de consommation......2
I-1-1- eaux souterraines..2
I-1-2- eaux minrales..2
I-1-3- eaux de source...2
I-1-4- eaux de surface.2
I-2- Impurets contracts dans les eaux..4
I-2-1- Impurets biologiques..4
I-2-2- Impurets minrales..4
I-2-2-1-Impurets sans effet apprciable sur la sant.4
I-2-2-2- Impurets affectant la sant...6
I-2-3-Impurets organiques.7
I-3- Les procds de traitement...9
I-3-1- dgrossissage9
I-3-2- prtraitement au chlore.9
I-3-3- la clarification...9
I-3-4- la dsinfection10
I-4- Traitements supplmentaires.11
I-4-1- la dferrisation11
I-4-2- dmanganisation.11
I-4-3- Elimination de lammonium...12
I-4-4- Elimination du fluorure...12
I-4-5-Autres paramtres12
I-4-5-1- Arsenic.12
I-4-5-2- Mtaux lourds..12
II- la chloration
II-1- Diffrents modes de chloration.14
II-1-1- Chlore gazeux14
II-1-2- Hypochlorite de sodium15
II-1-3- Hypochlorite de calcium...15
II-2- Mode daction du chlore et de ses drivs16
II-3- La chloration au point critique et relation avec SPD16
Sommaire

II-4- Les points dinjection du chlore........17


III- Procds doxydation
III-1- Diffrents types doxydants autres que le chlore.19
III-1-1- Permanganate de potassium..19
III-1-2- Chloramines..19
III-1-3- Rayons ultraviolets...20
III-1-4- Rayonnements ionisants...20
III-1-5- Dioxyde de chlore20
III-1-6- Lozone21
III-2- Niveaux doxydation et oxydants adapts..22
III-3- Impurets apports suite au traitement chimique...23
III-3-1-Impurets dues au ractif.23
III-3-1-1- Coagulants minraux...23
III-3-1-2- Poly lectrolytes, adjuvants.23
III-3-1-3- Correction de pH.23
III-3-1-4- Air dentranement (stripping)23
III-3-1-5- loxydant.....25
III-3-2- Impurets par raction du ractif sur les molcules organiques de leau.....26
IV- Sous produits de dsinfection et la sant publique
IV-1- Les diffrents classes de sous produits de dsinfection..28
IV-1-1- Sous produits de chloration.28
IV-1-1-1- Trihalomthanes....28
IV-1-1-2- Acides haloactiques.....30
IV-1-1-3- Hydrate de chloral.30
IV-1-1-4- Actonitriles halogns31
IV-1-1-5- Chloractones...31
IV-1-1-6- Chlorophnols..32
IV-1-1-7- Chloropicrine...32
IV-1-1-8- Chlorohydroxy furanones32
IV-1-2- Sous produits de chloramination.33
IV-1-2-1- Le chlorure de cyanogne33
IV-1-2-2- Autres sous produits de chloramination..33
IV-1-3- Sous produits dozonation..34
IV-1-3-1- Bromates.34
IV-1-3-2- Formaldhyde.34
Sommaire

IV-1-4- Sous produits du dioxyde de chlore..34


IV- Chlorates...34
IV- Chlorites35
IV-2- Dangers lis aux sous produits de dsinfection.35
IV-2-1- Effets toxiques35
IV-2-1-1- Anomalies du dveloppement.35
IV-2-1-2- Reprotoxicit...36
IV-2-2- Effets mutagnes et gnotoxiques..37
IV-3- Contrle des sous produits de chloration...42
V- Mutations et cancer
V-1- Relation entre mutation et cancer...43
V-2- Gnralits sur les mutations.44
V-2-1- Dfinition de mutation....44
V-2-2- Mcanisme de mutagense44
V-2-2-1- Agents physiques.44
V-2-2-2- Agents chimiques.44
V-2-3- Classement des mutations46
V-2-3-1- Selon la nature et la localisation...46
V-2-3-2- Selon le phnotype...47
V-2-4- Mcanismes biologiques de rparation...48

Partie exprimentale
I- Matriel et mthodes
I-1- Mthodologie...57
I-1-1- Description de la station de traitement..60
I-1-2-Echantillons et frquence dchantillonnage..60
I-1-3- Choix des paramtres60
I-2- la recherche des organohalogns totaux.60
I-3- le dosage du CHCl3 et CHBr3..60
I-4- Dtermination de lactivit mutagne..61
I-4-1- Test dAmes..61
I-4-1-1- Matriel biologique...61
I-4-1-2- Confirmation des gnotypes.63
I-4-1-3- Test de mutagense...64
I-4-2- Le SOS chromotest..65
Sommaire

I-4-2-1- Matriel biologique..65


I-4-2-2- Confirmation des gnotypes.....66
I-4-2-3- Test de mutagense..67
I-4-2-3-1- SOS spot test67
I-4-2-3-2- Mthode standard du SOS chromotest68
II- Rsultats et discussion...70
Conclusion...........................................................................................................................86
Rfrences bibliographiques
Annexes
Introduction

L eau est llment naturel qui fait lobjet dune surveillance attentive travers le monde. Son importance

pour la prservation de la sant publique dtermine de vastes programmes de surveillance tant lchelle
nationale quau plan international. Les objectifs de la surveillance de la qualit de leau destine la
consommation sont nombreux et varient en fonction des moyens et des possibilits techniques [1].
La dsinfection est depuis longtemps un objectif incontournable du traitement de leau potable.
Traditionnellement on croyait que le chlore tait un outil essentiel pour atteindre cet objectif [2]. Dans le
traitement de leau, la raction du chlore sur la matire organique conduit la formation de composs
organohalogns (les TOX). Ces produits sont indsirables cause de leur potentiel cancrigne. La prsence
de ces composs dpend certes des quantits de chlore ajoutes mais aussi de la matire organique et des
prcurseurs de TOX prsents dans leau qui sont soit dorigine naturelle (acide humique) ou artificielle (rsidus
de pesticides, phnols) [3, 4].
Lcotoxicologie sest surtout dveloppe depuis la deuxime guerre mondiale, paralllement lcologie,
entranant une prise de conscience des effets daccumulation des substances toxiques et de leur cheminement
dans la chane alimentaire. La grande question laquelle lcotoxicologie doit globalement rpondre est celle
des valeurs acceptables des facteurs potentiellement toxiques dans lenvironnement il en rsulte un ventail de
mthodes dapprciation des risques [5].
Dans la prsente tude la gnotoxicit des eaux potables de la wilaya dAnnaba obtenus diffrents points de
distribution et partir de la station de traitement grce la collaboration du laboratoire central de LEPE
Annaba, a t tudi par deux tests de dtermination de risque de gnotoxicit qui sont : le test dAmes, SOS
chromotest. Les bactries utilises dans ces tests ont t gracieusement envoyes par monsieur Philippe
Quillardet de linstitut Pasteur de Paris.

1
Traitements des eaux destines la consommation

L es procds de traitement utiliser dans un cas particulier doivent tenir compte de la qualit et de la nature

de la source dapprovisionnement en eau. Lintensit du traitement dpendra du degr de contamination.


Lobjectif fondamental du traitement de leau est de protger les consommateurs des microorganismes
pathognes et des impurets dsagrables ou dangereuses pour la sant [6, 7].
I-1- Diffrents types deau de consommation (Tab. I)

I-1-1-eaux souterraines :
Les eaux souterraines ont pendant longtemps t synonymes deau propres et rpondent naturellement aux
normes de potabilit. Ces eaux sont en effet moins sensibles aux pollutions accidentelles.
Les eaux souterraines peuvent aussi contenir des lments des concentrations dpassant largement les normes
de potabilit. Ceci est d la composition du terrain e stockage on peut citer Fe, Mn, H2S, F.
Les eaux souterraines doivent tre traites avant distribution toutes les fois que la concentration dun ou de
plusieurs lments dpasse la valeur autorise par les rglements en vigueur [7, 8].
I-1-2-eaux minrales :
Sont des eaux profondes qui peuvent contenir certains lments en concentration suprieure la concentration
autorise pour une eau potable et qui sont doues de proprits thrapeutiques reconnues. Elles sont distribues
en bouteilles, avec parfois certains traitements bien dfinis comme dcantation naturelle, dfferisation par
simple aration et/ou rincorporation du CO2 [7].
I-1-3-eaux de source :
Sont des eaux qui contrairement aux eaux minrales doivent rpondre aux critres de potabilit et ne peuvent
subir aucun traitement [7].
I-1-4-eaux de surface :
Ce terme englobe toutes les eaux circulant ou stockes la surface des continents.
Les eaux de surface sont rarement potables sans aucun traitement et sont gnralement pollues
bactriologiquement. De plus elles peuvent prsenter plusieurs pollutions :
Dorigine urbaine.
Dorigine industrielle.
Dorigine agricole [7, 8].

2
Traitements des eaux destines la consommation

Tableau I : Principales diffrences entre les eaux de surface et souterraines [7].

Caractristique Eaux de surface Eaux souterraines


Temprature Variable suivant saisons Relativement constante
Turbidit, MES (vraies ou Variable, parfois leve Faible ou nulle (sauf en
collodales) terrain karstique)
Couleur Lie surtout aux matires en Lie surtout aux matires en
suspension (argiles, algues..) solution (acides humiques
sauf dans les eaux trs par exemple)
douces et acides (acides
humiques)
Minralisation globale Variable en fonction des Sensiblement constante en
terrains, des prcipitations, gnral nettement plus leve
des rejets que dans les eaux de surface
de la mme rgions.
Fer et manganse divalents ( Gnralement absents, sauf Gnralement prsents
ltat dissous) en profondeur des pices
deau en tat
deutrophisation
CO2 agressif Gnralement absent Souvent prsent en grande
quantit
O2 dissous Le plus souvent au voisinage Absent la plupart du temps
de la saturation. Absent dans
le cas deaux trs pollues
H2S Gnralement absent Souvent prsent
NH4 Prsent seulement dans les Prsent frquemment sans
eaux pollues tre un indice systmatique
de pollution bactrienne
Nitrates Peu abondant en gnral Teneur parfois leve
Silice Teneur en gnral modre Teneur souvent leve
Micropolluants minraux et Prsents dans les eaux de Gnralement absent, mais
organiques pays dvelopps, mais une pollution accidentelle
susceptibles de disparatre subsiste beaucoup plus
rapidement aprs suppression longtemps
de la source
Elments vivants Bactries (dont certaines Ferrobactries frquentes
pathognes), virus, plancton
(animal et vgtal)
Solvants chlors Rarement prsents Souvent prsents
Caractre eutrophe Frquent. Accentu par les non
tempratures leves

3
Traitements des eaux destines la consommation

I-2-Impurets contracts dans les eaux :

I-2-1-Impurets biologiques : (Tab. II)


Toutes les eaux sont susceptibles dtre pollues par des microorganismes. Ainsi pour valuer la qualit
microbiologique dune eau destine la consommation on utilise des bactries tests . Les bactries
indicatrices de pollution fcale doivent rpondre certains critres pour donner des rsultats utiles. Elles
doivent tre constamment prsentes en grand nombre dans les excrments de lHomme et des animaux sang
chaud, tre facilement dtectables par des mthodes simples et ne pas se multiplier dans leau naturelle.
En outre, il est essentiel que leur persistance dans leau et leur sensibilit aux mthodes dpuration soit
comparable celles des organismes pathognes transports par leau.
Aucun organisme ne satisfait tous les critres mentionns ci-dessous pour un indicateur idal de pollution
fcale, mais la plupart de ces critres sont remplis par Escerichia coli et ,dans une moindre mesure, par les
bactries coliformes thermotholrantes. Les streptocoques fcaux satisfont galement certains dentre eux,
mais pas autant que Escerichia coli. Nanmoins ils peuvent tre utiliss comme indicateurs supplmentaires
dune pollution fcale ou de lefficacit du traitement dans certaines circonstances [6].
I-2-2-Impurets minrales : (Tab. III)
Certaines de ces impurets ont une influence sur les qualits organoleptiques de leau, son aspect esthtique, ou
son comportement dans le rseau de distribution, mais sont sans effet apprciable sur la sant du
consommateur, alors que dautres ont un effet reconnu.
I-2-2-1-impurets sans effet apprciable sur la sant :
*la turbidit :
Cest le premier paramtre peru directement par le consommateur. Toutes les eaux sont turbides. La turbidit
doit tre limine pour :
Permettre une bonne dsinfection de leau.
Eliminer tout polluant absorb sur les matires en suspension (mtaux lourds).
Eviter tout dpt dans le rseau de distribution.
*la couleur :
La couleur peut tre due certaines impurets minrales (fer) mais galement certaines matires organiques
(acides humiques, fulviques). Elle doit tre limine pour rendre leau agrable boire. Llimination de la
couleur saccompagne galement de llimination de certaines matires organiques indsirables (prcurseurs de
composs haloformes).
*la minralisation :
Lalcalinit et la duret participent lquilibre calcocarbonique de leau conjointement avec le pH et lacide
carbonique dissous. On cherche distribuer une eau lquilibre pour viter lentartrage ou la corrosion des
rseaux. Une quantit trop importante de sulfates a un effet sur le got de leau et peut la rendre laxative. Une
quantit trop importante de chlorures affecte aussi le got de leau et la rend corrosive.
4
Traitements des eaux destines la consommation

Tableau II : Diffrents agents pathognes vhiculs par leau [6].

Agent pathogne Importance sanitaire Persistance dans leau Rsistance au


a
chlore b
Bactries
Campylobacter Grande Modre Faible
Jejuni C. coli
Escherichia coli Grande Modre Faible
Pathogne
Salmonella typhi Grande Modre Faible
Autres
Salmonelles Grande B rve Faible
Shigella spp
Vibrio cholra Grande Longue Faible
Yersinia Grande Longue Faible
enterocolitica
Pseudomonas Modre peut se multiplier Faible
aeruginosa c
Aeromonas Modre peut se multiplier Faible

Virus
Adnovirus Grande ? Modre
Entrovirus Grande Longue Modre
Hpatite A Grande ? Modre
Virus de lhpatite Grande ? ?
non-A, non-B
transmis par voie
entrique et de
lhpatite E

Virus Norwalk Grande ? ?


Rotavirus Grande ? ?
Petit virus ronds Modre ? ?

Protozoaires
Entamoeba Grande Modre Eleve
histolytica
Giardia intestinalis Grande Modre Eleve
Cryptosporidium
parvum Grande Modre Eleve

Helminthes
dracunculus Grande Modre Modre
medinensis

a : Dure de la priode de dtection du stade infectant dans leau 20C brve, jusqu une semaine ; modre une semaine un
mois ; longue, suprieure un mois.
b : lorsque le stade infectant est en suspension dans leau traite, avec une dose normale de dsinfectant et un temps de contact
normal. Rsistance modre : lorganisme peut tre pas compltement dtruit ; Rsistance faible : lorganisme est
compltement dtruit.
c : Linfection sacquiert principalement par contact cutan, mais les patients immunodprims ou cancreux peuvent tre infects par
voie orale.

5
Traitements des eaux destines la consommation

*Certains mtaux :
Le fer et le manganse peuvent provoquer une coloration et sont lorigine de dpts dans les rseaux. Des
corrosions peuvent en rsulter .Par ailleurs, ils affectent les qualits organoleptiques de leau, comme dautres
mtaux : le cuivre, laluminium, le zinc [6, 7].
*Les gaz dissous :
LH2S est rvlateur de conditions anarobies, et dun potentiel doxydorduction trop bas ; il provoque de
mauvaises odeurs et peut tre lorigine de corrosion. Il doit tre limin [6, 7].
*Lammonium NH4:
Il na pas deffet apprciable sur la sant du consommateur, mais sa prsence dans les eaux est un indicateur de
pollution. Dans les eaux profondes, la prsence de NH, peut galement tre due aux conditions rductrices
rgnant dans une nappe. Lammonium doit tre limin dans les eaux de consommations, car cest un aliment
qui peut permettre certaines bactries de prolifrer dans les rseaux de distributions [6,7].
I-2-2-2-Impurets affectant la sant :
*les nitrates :
Ces vingt dernires annes ont vu une augmentation importante de la concentration en nitrates des eaux de
surface et des eaux de nappe fortes concentrations, les nitrates peuvent tre responsable de la mthmoglobine
chez les nourrissons, syndrome consistant en une diminution de la capacit du sang transporter loxygne. La
concentration maximale admissible dans les eaux potables de 50 NO-3 /litre.
Laugmentation en nitrates est souvent lie lutilisation de techniques intensives dans lagriculture.
Quand la ressource est contamine et quaucune autre ressource nest disponible, un traitement spcifique est
ncessaire [7, 9].
*Mtaux lourds :
Le cadmium, le plomb, le mercure, le slnium, larsenic. Ils sont gnralement absorbs sur les matires en
suspension prsentes dans leau brute. Dans certains, les mtaux peuvent tre complexs soit des matires
organiques naturelles (exemple le mercure) soit des composs chimiques rejets par les industries ou les
mnages. Le traitement doit tre capable de dtruire ce complexe pour en assurer llimination [7].
*fibres damiante :
Si lamiante a t reconnue comme tant cancrigne dans lair par inhalation, leffet cancrigne des fibres
damiante contenues dans leau de boisson na pas t directement dmontr. Il est cependant souhaitable de les
liminer le mieux possible, les fibres damiante pouvant tre entranes dans la vapeur (bullition, douches). La
rduction de la turbidit permet den assurer une limination raisonnable [7].
*fluor :
Une concentration en fluor trs importante provoque la fluorose des os. Il est dans ce cas, indispensable de
rduire la concentration en fluor [7].

6
Traitements des eaux destines la consommation

*duret :
La duret de leau est due la prsence de calcium dissous, et dans une moindre mesure de magnsium. On
lexprime gnralement en quantit quivalente de carbonate de calcium. Bien quun certain nombre dtudes
pidmiologiques, cologiques et analytiques aient dmontr une corrlation ngative statistiquement
significative entre la duret de leau de boisson et les maladies cardiovasculaires, les donnes disponibles sont
insuffisantes pour conclure un lien de cause effet [6].
I-2-3-Impurets organiques : (Tab. III)
De nombreuses substances organiques naturelles sont prsentes dans les eaux souterraines ou de surface.
Elles se classent en 6 groupes principaux : substances humiques, acides carboxyliques, peptides, aminoacides,
hydrates de carbone. On trouve galement des substances organiques proviennent des activits urbaines.
Les substances organiques sont caractrises analytiquement soit par la mesure dindices globaux :
loxydabilit au permanganate et le carbone organique total rendent compte de la concentration en
matires organiques.
labsorption mesure en ultraviolet 254 nm rend compte de la concentration en doubles liaisons
aliphatiques, carboxyliques, benzniques.
Le Clot : rend compte de la concentration en matires organiques chlors ou halognes [7].

7
Traitements des eaux destines la consommation

Tableau III : les substances indsirables [1, 7, 8].

Substances Effets indsirables Doses limites

Les nitrites Formation des nitrosamines 0,1 1 mg/l


NO2
Les chlorures Corrosion des conduites 200 mg/l 600 mg/l
CI Got dsagrable
Les nitrates La mthmoglobinmie chez 20 50 mg/l
les nourrissons
Les composs Dveloppement des algues 0,4 mg/l
phosphors
Les sulfates SO4 Irrigation gastro-intestinale 200 400 mg/l (OMS)
25 250 mg/l (U.E)
Aluminium Inconnus chez lhomme 0,2 mg/
Al en mg/l
Le zinc Saveur astringente 5 mg/l (UE) au robinet 15 mg/l
Zn (OMS)
Lazote Formation de drivs dammoniac 1 mg/l
N en mg/l
Le cuivre Coloration, turbidit 0,005 1,5 mg/l (OMS)
Cu 100 g/l (U.E)
Le fer Got dsagrable 0,2 0,3 mg/l (OMS)
Fe Coloration parasite 0,05 0,2 mg/l (U.E)
Le manganse Got dsagrable 0,05 0,5 mg/l (OMS)
Mn Coloration parasite
Le calcium Dpt excessif de tartre 75 200 mg (OMS)
Ca
Le magnsium Got dsagrable, irritation 30 150 mg/l selon la concentration
Mg gastro-intestinale en sulfate (OMS)
Le Sodium Troubles cardio-vasculaires 200 mg/l
Na
Les composs Got dsagrable 0,001 mg/l 0,002 mg/l (OMS)
phnoliques (Phnol)
Le fluor Carie par dfaut 0,8 1 mg/l 20 de Tp de leau
Fluorose par excs (OMS)

8
Traitements des eaux destines la consommation

I-3-les procds de traitement :


Les procds de traitement utiliser dans un cas particulier doivent tenir compte de la nature de la source
dapprovisionnement en eau. Lintensit du traitement dpendra du degr de contamination .Lorsque la source
deau est contamine, il est particulirement important dinstituer un traitement qui oppose des barrires
multiples la diffusion des organismes pathognes de faon assurer un degr lev de protection.
Le concept des barrires multiples peut tre adapt au traitement des eaux de surface. Dans ce cas les tapes
pourraient tre les suivantes :
I-3-1-dgrossissage :
Suivant la nature des eaux prleves le premier traitement possible est un dgrossissage, ayant pour but
dliminer les matires de grandes dimensions susceptibles de gner la mise en uvre des autres traitements, il
peut comporter :
1. un dgrillage.
2. un tamissage, aussi appel macrotamissage si leau charrie des herbes, des feuilles, des dbris
plastiques.
3. un dessablage : est une technique de filtration de leau qui a pour but dextraire des eaux brutes les
graviers, le sable et toutes particules en suspension.
4. un microtamissage si la quantit de plancton est limite et si aucune tape de dcantation nest prvue
ultrieurement.
5. un dshuilage de surface.
6. un dbourbage afin que les particules suprieure un micron de diamtre dcantent naturellement, il est
ncessaire quand la quantit de matires en suspension de leau brute liminer (limons, argile) dpasse
la capacit de concentration et dextraction des dcanteurs en aval [1, 7, 10].

I-3-2-prtraitement au chlore :
Le prtraitement au chlore effectu avant la dcantation est recommand pour protger les conduites deau
brute, lorsque leau est riche en matire organique et en plancton doit tre amene la station principale par une
conduite de grande longueur. Le chlore ainsi que les autres oxydants (eau de javel, hypochlorite de calcium,
dioxyde de chlore) amliorent loxydation des diffrents corps retenus dans leau. Pour la pr chloration on
recommande une teneur en chlore lgrement suprieure celle du point critique [1, 7].

I-3-3-la clarification :
La clarification est lensemble des oprations permettant dliminer les matires en suspension dune eau brute
ainsi que les polluants (organiques et minraux) qui leurs sont associs par la succession des tapes suivantes :

9
Traitements des eaux destines la consommation

1. Coagulation, floculation et sdimentation :


a- La coagulation consiste ajouter des produits chimiques (sulfate daluminium, sulfate ferreux ou
ferrique, chlorure ferrique etc.) pour neutraliser les charges prsentes sur les particules et faciliter leur
agrgation lorsque leau est lentement mlange dans ltape de floculation.
b- Le floc ainsi form coprcipite avec les particules de colorants naturels et de substances minrales
quil absorbe et emprisonne, ce qui entrane une rduction marque de la turbidit et du nombre de
protozoaires, de bactries de virus.
c-La sdimentation a pour objet de laisser se dposer le floc dcantable et donc de diminuer
la concentration des solides en suspension quil faudra retenir par filtration.
La sdimentation est un phnomne qui dpend de nombreux facteurs : dimension, forme et poids du
floc, viscosit et par consquent temprature de leau, temps de rtention, profondeur et surface des
bassins, vitesse dcoulement.
La flottation doit remplacer la sdimentation lorsque la quantit de floc est faible [6, 7].
2. Filtration sur sable
Cette filtration qui suit ltape prcdente permet llimination du floc rsiduel ainsi que des matires
organiques absorbes la surface du floc. Les filtres sable classique sont dun modle plus compact
que ceux utiliss en filtration lente [7].
I-3-4-la dsinfection : (Tab. IV)
La dsinfection finale est dune importance capitale et elle est presque toujours pratique, car elle constitue le
dernier obstacle la transmission des maladies bactriennes et virales dorigine hydrique. Bien que le chlore et
les hypochlorites soient les dsinfectants les plus utiliss, on peut galement employer les chloramines, le
dioxyde de chlore, lozone et le rayonnement ultraviolet [6].
La dsinfection des eaux comporte 2 tapes importantes correspondant 2 effets diffrents dun dsinfectant
donn.
1- Effet bactricide : capacit de dtruire les germes en une tape donne du traitement.
2-Effet rmanent : cest un effet du dsinfectant qui se maintient dans le rseau de distribution et qui permet
de garantir la qualit bactriologique de leau [7].

Tableau IV : pouvoir dsinfectant des principaux procds [7].

O3 CL2 Cl O2 chloramines UV
E. bactricide +++ ++ ++ + ++
E. rmanent 0 + + ++ 0

10
Traitements des eaux destines la consommation

I-4-Traitements supplmentaires :
Ces traitements sont des mthodes mises en uvre pour liminer certains lments indsirables contenus dans
leau brute. Parmi les mthodes de correction chimique les plus utilises, on distingue.
I-4-1-La dferrisation :
Dans les eaux de surface, le fer se trouve gnralement sous forme ferrique et prcipit, souvent associ aux
matires en suspension.
On le rencontre galement sous forme ferreuse dans les couches profondes de certaines rserves deau en
labsence doxygne, ou dans les eaux souterraines. Le fer rduit Fe+2 est alors dissous et souvent complex aux
acides humiques [7].
Les eaux ferrugineuses ont plusieurs inconvnients : colmatage des canalisations ou des appareils, avec risque
de corrosion par aration diffrentielle, marques jaune rougetre dans les appareils o cette eau coule et got
mtallique dsagrable dans les cas des eaux potables [8].
Pour des teneurs suprieurs 2 mg/l, il faut procder une dferrisation.
La dferrisation sera donc une oxydation par transformation du fer divalent en fer trivalent.
Loxydation du fer divalent se fait suivant une vitesse qui dpend du pH rgnant au cours de lopration, dans
ces conditions, laration dune eau ferrugineuse qui simultanment fournit loxygne ncessaire loxydation
du fer divalent tendra lever le pH par limination du gaz carbonique [11].
1-4-2 Dmanganisation :
Le manganse se rencontre moins que le fer mais les dsagrments quil procure sont sensiblement plus grands
et son limination est plus difficile.
Le manganse se trouve gnralement sous forme divalente qui doit tre mise sous une forme plus oxyde pour
tre limin par prcipitation. Le manganse complex par des matires organiques (acides humiques en
particulier) est fort rebelle la prcipitation.
Loxydation Mn++ dans les formes prcipites Mn (OH) 3 et Mn (OH) 4 par loxygne est trs lente pour des
pH < 9.5. La dmanganisation exige dans ces conditions :
-soit lutilisation de catalyseurs doxydation mais de toute faon un pH > 7,5, on emploie comme catalyseur
des zolithes naturelles ou la pyrolusite ou sable imprgn doxyde de manganse de valence leve ; la
rgnration du catalyseur sobtient par injection priodiques de permanganate (5 10 g/m3).Le fer prsent est
prcipit simultanment.
-soit lutilisation de ractifs oxydants puissants le chlore agit dune faon imparfaite et de toute faon des

doses > celles du break point loxydation complte demande plus dune heure [11].

11
Traitements des eaux destines la consommation

1-4-3- Elimination de lammonium :


On peut liminer lNH4 prsent dans les eaux par procds physicochimiques. Lammonium est limin par
laction du chlore lorsque la dose de chlore utilise est suprieure au point critique. Dans ces conditions
apparaissent souvent des produits (organochlors, holoformes) dont la prsence est indsirable dans leau de
consommation. Les autres oxydants (ozone, ClO2, chloramines, KMnO4) sont efficaces pour liminer
lammonium [7].
1-4-4- Elimination du fluorure :
Dans certains pays, Algrie, Chine, Egypte, Inde, Thalande, on a constat que leau de boisson pourrait
contenir des concentrations leves de fluorures (plus de 5 mg/l) ce qui a pu entraner des cas de fluorose
dentaire ou osseuse.
Des techniques dlimination de fluorures ont t mises au point tant pour les rseaux de distribution deau que
pour les besoins des mnages.
La plus utilise est une mthode dchanges dion ou par absorption soit sur poudre dos carbonise, soir sur
alumine active et des dfluorarateurs domestiques contenant de la poudre dos carbonis peuvent rduire la
concentration en fluorures de 5 8 mg/l moins de 1 mg/l [6, 7].
1-4-5- Autres paramtres :
1-4-5-1- Arsenic : Il est ncessaire dassurer loxydation de AS (III) en AS (V) par chloration en
sassurant que tout larsenic est oxyd. Les ions Fe+2 et Mn+ affectant la cintique doxydation. Le carbone
organique a le mme inconvnient.
On peut par la suite :
-soit raliser une coagulation floculation avec sel d fer ou daluminium pH 7.
- soit raliser une carbonatation la chaux, en assurant llimination de la magnsie qui prcipite avec
larsenic.
- soit raliser une adsorption sur alumine active, dans les mmes conditions que pour llimination du fluor
[7].
1-4-5-2 Mtaux lourds :
La prsence de mtaux lourds est gnralement constat lorsque leau brute contient dautres polluants et
ncessite un traitement complet de clarification filtration.
Action dune coagulation floculation dcantation
La coagulation par les sels daluminium et de fer limine trs bien largent, le plomb, le cuivre ; la

teneur en vanadium et de mercure est abaisse de 50/ environ ; la teneur en zinc et en nickel est

surtout diminue en prsence de chlore.

12
Traitements des eaux destines la consommation

Action de la filtration sur sable


Lorsque ltape prcdente apporte une rduction correcte, la filtration sur sable conduit, la filtration
sur sable conduit des teneurs pratiquement nulles en ce qui concerne largent, le mercure, le cuivre, le
plomb et le chrome (III) .Par contre, le chrome (VI), le cadmium et le cobalt ne varient pratiquement
pas.
Action du pr chloration
Associ la coagulation dcantation, la filtration sur sable et la filtration sur sable, la chloration
amliore llimination des mtaux lourds, en particulier lorsque la dose de chlore utilise est lgrement
suprieure celle correspondant au point critique [6, 7].

Tableau V : Le procd type de traitement utilis pour la potabilisation [6].

Catgorie A1 traitement physique simple et dsinfection.


Catgorie A2 traitement normal physique, chimique et dsinfection. Par exemple pr chloration,
coagulation, floculation, dcantation, filtration, dsinfection finale (chloration finale).
CatgorieA3 traitement physique, chimique pouss, affinage et dsinfection. Par exemple chloration au
break point, coagulation, floculation, dcantation, filtration, affinage (charbon actif)

Catgorie A1 : eau claire sans pollution


Catgorie A2 : eau +MES
Catgorie A3 : eau +MO

13
Chloration

L a chloration des eaux destines la consommation humaine a t introduite au dbut du XXme sicle et a

entran une rgression spectaculaire des maladies transmission hydrique. La chloration par sa grande
efficacit a trs faible dose et par sa facilit demploi a t peu peu gnralise travers le monde pour
assurer la dsinfection de leau de boisson.
Le procd de dsinfection de leau, le plus pratiqu et le moins coteux est sans doute la chloration ou la
javellisation.
Lutilisation du chlore pour le traitement de leau potable prsente lavantage dune action rmanente (durable)
et de prolonger la dure de la dsinfection de leau pendant plusieurs heures dans les rseaux de distribution et
de plusieurs jours pour leau de puits [1, 12].

II -1- Diffrents modes de Chloration :


Le chlore destin la dsinfection se trouve normalement sous lune des trois formes suivantes :
II -1-1- Chlore gazeux : (Fig. 1)
Il est stock et livr sous forme liquide en bouteilles de 15 100 kgs sous pression.
Le chlore sous pression provenant des rcipients et amen par une canalisation lappareil de strilisation
proprement dit.
Le gaz est alors le plus gnralement dissous par un courant deau faible dbit dans un dissolveur et cest la
solution chlore ainsi forme qui est introduite et mlange dans leau traiter pour y produire la strilisation.
Introduit dans leau le chlore gazeux est rapidement hydralis pour donner de lacide hypochloreux (HOCl)
selon les ractions suivantes :
Cl2 +H2O HClO + H+ Cl-
Laddition de chlore gazeux dans leau rduit le pH car cela entrane la formation dun ion hydrogne. Lacide
hypochloreux est un acide faible (un Pka denviron 7,5) ce qui signifie quil se dissocie lgrement en ions
hydrogne et hypochlorite, tel que montre la raction suivante :
HO Cl H+ OCL-
Ces ractions chimiques sont influences par la temprature et surtout le pH de leau traiter.
A pH 2, tout le chlore est sous forme molculaire CL 2, PH <6,5 le HOCl ne se dissocie pas, alors qua un
pH 8,5 la dissociation en OCl- est complte.
Quand le pH se situe entre 6,5 et 8,5, cest le cas habituel des eaux traites par le chlore, il y a mlange dacide
hypochlorite qui nest quun faible dsinfectant et laide hypochloreux (HOCl) qui est un puissant bactricide.
Par ailleurs, lefficacit de la chloration est dautant plus meilleure que le temps de contact du chlore dans leau
est plus long (au moins 4 heures).

14
Chloration

100

80 Cl2
ClO-
60
HOCl
40

20

0
2 4 6 8 10 pH
Figure1 : Diffrentes formes de chlore en solution aqueuse [10].

II -1-2- Hypochlorite de sodium :


Appel leau de javel qui est un excellent dsinfectant.
Pour la fabrication industrielle de la javel, on fait agir le chlore sur la soude, on obtient du sel, de leau et de
lhypochlorite : le mlange de ces 3 produits constitue leau de javel.
CL2+2 Na OH Na Cl + H2O + NaCLO
Hypochlorite
Leau de javel
Lquation suivante illustre la raction qui se produit entre lhypochlorite de sodium et leau
NaOCL + H2O HOCl+ Na+ + OH-
Cette quation montre que lajout dhypochlorite de sodium dans leau entrane la formation dacide
hypochloreux un peu comme dans le cas de lhydrolyse du chlore gazeux. Toutefois, contrairement
lhydrolyse du chlore, lajout dhypochlorite de sodium dans leau produit un ion hydroxyle qui fait grimper le
pH.
II -1-3- Hypochlorite de calcium :
On fabrique lhypochlorite de calcium partir du prcit issu de la dissolution de chlore gazeux dans une
solution doxyde de calcium (chaux vive) et dhydroxyde de sodium.
2 Ca O + 2 Cl2 Ca Cl2 + Ca (O Cl)2
Lhypochlorite de calcium a une teneur trs lev en chlore actif et est surtout employ dans des pays ne
pouvant sapprovisionner ni en chlore gazeux, ni en solution dhypochlorite de sodium (cot de transport).
Gnralement utilis sous forme solide en poudre [1, 7, 9, 13, 14, 15, 16].
Ca (O Cl) 2 + 2H2O 2 HO Cl + Ca+2 + 2 OH-
Hypochlorite de calcium

15
Chloration

II -2- Mode daction du chlore et de ses drivs :


Il existe trois modes daction du chlore sur les molcules organiques. Il sagit particulirement des substances
humiques et des drivs du phnol (le rsorcinol, le phloroglucinol, le dichloro3, 5 phnol, etc.) et les acides
amins.
Loxydation des fonctions rductrices ou rduites en acceptant des lectrons du prcurseur organique
comme loxydation des alcools primaires R CH2OH en aldhyde R-CHO, puis en acide carboxylique
R-COOH. Les alcools secondaires R- CHOH-R donnent des ctones R-CO-R. Les produits doxydation
finaux sont principalement le CO2 et les chlorures (Cl-).
Laddition sur des liaisons insatures et des substitutions lectrophiles.
Laddition sur les doubles liaisons prsente les caractres dune raction en deux tapes :
La premire consiste en une attaque lectrophile sur les lectrons, ce qui provoque la rupture htrolytique de
la molcule doxydant en un fragment cationique et un autre anionique. Le premier se fixe sur un des carbones
en utilisant le doublet. La partie anionique se lie ensuite grce au doublet libre de lautre carbone.
Le cas n3 permet dinterprter la formation des chloramines et des organochlors.
Le chlore est un agent de chloration. Les substances humiques possdent des fonctions mthy-ctones qui
ragissent fortement en prsence du chlore. La substitution conduit un driv trihalogne de formule de type
R-CO-CCl3. Celui-ci subit une raction de coupure en haloforme (chloroforme, bromoforme) et sel de lacide
R-COOH. Il faut noter que le schma ractionnel est diffrent suivant le pH du milieu [3, 17].

II-3- La chloration au point critique et relation avec SPD : (Fig. 2)

La dnomination tient ce que, si lon dverse progressivement du chlore dans une eau contenant une
certaine proportion de matires organiques (courbe C3) ou dammoniaque libre (courbe C4), la quantit
de chlore rsiduel ltat libre, aprs avoir augment dabord linairement subit une chute plus ou
moins brutale en passant par un minimum avant de recommencer crotre sans limitation. Ce minimum
marque le break point ou point critique et indiquerait le taux minimum de chlore appliquer
pour obtenir en quelques minutes la destruction pratique de toutes bactries contenues dans leau. La
courbe du C4 montre un exemple du point critique.
Dans la partie OA, de la monochloramine se forme suivant lquation :

NH3 +Cl2 NH2 Cl+ H Cl

Dans la partie AB, il y a formation de dichloramine :

NH3 +2Cl2 NHCl2 + 2HCl

16
Chloration

Dans la partie BC, il y a destruction des chloramines dont le got de chlore est trs nettement suprieur celui
du chlore lui-mme .

2 NH2 Cl+Cl N2 + 4HCl

Enfin dans la partie CD, le chlore nest plus consomm et la pente remente 45 c'est--dire que lon retrouve
en chlore rsiduel dans leau traite la mme quantit de chlore rajoute celle-ci
Cette mthode se propose de lutter contre les inconvnients par du chlore lui-mme doses massives tels que la
formation de chlorophnols extrmement stables et qui, mme sous de trs faibles doses, confrent leau des
mauvais gots particulirement tenaces [9, 18, 19].

0,7 D c1:droite thorique de leau pur,la demande en chlore


0,6 c1 c2 c3 c4 est nulle.le chlore rsiduel est gal au chlore appliqu.
Chlore 0,5 c2 : eau claire sans matire organique ni ammoniaque.
rsiduel 0,4 B pas de break point apparent ncessite dintroduire un
(mg/l) 0,3 un peu dammoniaque avant dapplication du chlore.
0,2 C c3 : eau contenant des matires organiques ou de
0,1 lammoniaque. Le break point commence se dessiner.
0 A c4 : eau contenant de lammoniaque. Le break point
0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 est bien marqu.
Chlore introduit (mg/l)

Figure 2 : le Break point [10, 19].

II-4- Les points dinjection du chlore : (Tab. VI)

Dans les installations de traitement deau potable classiques : on effectue gnralement une pr chloration de
leau brute lentre du traitement ou ltape de mlange rapide une chloration intermdiaire en amont des
filtres, une post chloration la rserve de distribution (aprs les filtres et une r chloration du rseau de
distribution) [17].

17
Chloration

Tableau VI: Points dinjection et usages typiques [6].

point dinjection utilit

admission deau brute limination de la moule zbre et de la petite


corbeille dasie et prvention du dveloppement
de films biologiques.

Mlange rapide (avant la dcantation) dsinfection, oxydation du fer et du manganse,


limination du got et de lodeur, oxydation du
sulfure dhydrogne.

Entre des filtres dsinfection, prvention du dveloppement de


bactries dans les filtres, oxydation du fer et du
manganse, limination du got, de lodeur, des
algues et de la couleur.

Rserve de distribution dsinfection

Rserve de distribution maintien dun dsinfectant rsiduel

18
Procds doxydation

L oxydation est une opration essentielle tout traitement des eaux vise de potabilisation , elle est

caractrise par lutilisation doxydant en amont et au sein de la chane de traitement avant la filtration, est de
plus en plus frquente il sagit de la pr et de linter oxydation. Elle est toujours incluse en fin de filire au
niveau de la dsinfection. Etant donn la dgradation de la qualit des ressources superficielles.
Les ractions doxydorduction sont celles qui mettent en jeu :
Des pertes (oxydation) ou des gains (rduction) dlectrons par certains ions.
Des pertes ou des gains datomes doxygne par dautres ions
La transformation en et CO2 (parfois aussi en azote) de matires organiques indsirables.
Alors que les ractions de rduction se limitent en pratique le plus souvent llimination de loxygne dissous
et la transformation du chrome hexavalent toxique en chrome trivalent peu toxique, les ractions doxydation,
en revanche ont de nombreuses applications :
Dsinfection
Transformation de composs solubles en composs insolubles facilement liminables par filtration (fer,
manganse)
Transformation de composs indsirables en composs admissibles (phnols, nitrite, ammoniaque) [17, 20].

III -1- Diffrents types doxydants autres que le chlore :


III -1-1 Permanganate de potassium : ce ractif relativement coteux, est surtout utilis en prtraitement pour
llimination du manganse en solution dans leau. Son action est plus efficace que celle du chlore. Il oxyde
galement le fer si celui-ci est prsent.
Le permanganate a t utilis dans quelques cas en pr oxydation deau de surface pour llimination des
matires organiques; mais les difficults dadaptation de la dose conduisent un risque de prsence de
manganse soluble (eau rose en cas dexcs de KMnO4) [7, 17].
III -1 -2 Chloramines : elles sont utilises en dsinfection, leur action bactricide est plus lente que celle du
chlore, mais avec effet rmanent important du fait de leur stabilit. Leur utilisation ne conduit pas la
formation dholoformes.
Elles sont en gnral prpares en employant du chlore et de lammoniac (dose dammoniac comprise entre
et de la dose de chlore) ou des sels ammoniacaux. En cas dutilisation en eau potable, il nest pas
recommand de compter sur lammonium initialement prsent dans leau brute.
Ces composs peuvent prsenter un intrt dans certains cas tels que :
Longs rseaux avec temps de sjour et tempratures levs.
Canalisations avec revtements donnant des mauvais gots en cas dutilisation du chlore [7, 8, 9, 11].

19
Procds doxydation

III- 1 -3 Rayons ultraviolets :


Les rayons ultraviolets de longueur donde comprise entre 200 et 300 nm, UV-C, prsentent une action
germicide puissante, dont le maximum se situe aux environs de 260 nm. Leur utilisation en traitement deau
permet la destruction des bactries et virus sans addition de produits chimiques.
En pratique, ces rayons sont produits par des lampes vapeur de mercure.
Un appareil de traitement UV se compose dune ou de plusieurs lampes places dans des gaines de quartz pour
tre isoles thermiquement de leau. Lnergie consomme pour la dsinfection varie en fonction de
labsorption du rayonnement par leau traiter (turbidit, prsence de mtaux, matire organique,).
Les domaines prfrentiels dapplication des UV sont la production deau ultra pure et laquaculture.
Ce procd prsente lavantage de ne pas introduire dlments trangers dans leau traiter, par contre il na
pas deffet rmanent. Son application en traitement deau potable est donc limite aux rseaux courts et bien
entretenus [7, 17].
III -1-4 Rayonnements ionisants :
Cette technique est utilise pour la conservation de certains aliments. Elle a t envisage pour la dsinfection
des eaux et des boues. Les exigences technologiques de mise en uvre rendent encore aujourdhui ce procd
dun cot prohibitif pour le traitement des eaux. On utilise principalement des sources en cobalt. Les intensits
de rayonnement annonces sont :
En dsinfection : 450 kilo rad avec 105 ci/m3.h.
En strilisation totale : 4,5 mega rad avec 106 ci/m3.h. [7, 17].
III -1-5 Dioxyde de chlore :
Le dioxyde de chlore est produit in situ par raction du chlorite de sodium avec du chlore ou de lacide
chlorhydrique :
Na ClO2 + 4 H Cl 4 ClO2 + 5 Na Cl + 2 H2 O
2 Na ClO2 + Cl2 2 ClO2 + 2 Na Cl
Dans leau on distingue le dioxyde de chlore est un gaz dissous. Ainsi il ne rpond pas aux quilibres ioniques
classiques ce qui explique son comportement indpendant du pH. Il est stable pH neutre et lobscurit.
Une des proprits caractristiques du dioxyde de chlore, ce nest pas un agent de chloration. Il ne forme donc
pas de drivs organohalognes tels que les trihalomthones.
Le dioxyde de chlore prsente un bon pouvoir bactricide, virulicide et sporicide. Il doit tre utilis de
prfrence lorsque leau traiter contient des traces de phnols susceptibles de se combiner avec le chlore et de
donner leau un got dsagrable de chlorophnols.
Il oxyde rapidement les sels de fer qui peuvent ensuite prcipiter sous forme dhydroxydes ferrique insoluble ;
De la mme faon utilise en excs des doses variables avec le pH de leau, il oxyde les sels de manganse
sous forme de dioxyde de manganse [7, 16, 19, 21].

20
Procds doxydation

III-1-6 Lozone :
Lozone de formule (O3) est une varit allotropique trs instable de loxygne. Lozone peut tre obtenu
partir de loxygne qui se trouve dans lair, ou doxygne pur.
La raction brute de formation scrit :
3 O2 2 O3 ( 71 Kcal).
Cette raction est ralise par action deffluces lectriques dans un air dshydrate sous haute tension.
Dans leau pure, lozone ragit de la faon suivante :
Lozone se dcompose facilement en oxygne molculaire et en oxygne naissant
O3 O2 + O
Oxygne Oxygne
molculaire naissant
Lozone peut agir et ragir en tant que tel (O3) ou encore comme oxydant par loxygne monoatomique (O).
Il peut, en troisime lieu favoriser laction de loxygne diatomique (cest--dire les habituelles molcules O2)
qui activent les formations fugitives dozone et doxygne monoatomique.
Le pouvoir oxydant trs lev de lozone est la caractristique qui rend ce produit intressant pour le traitement
des eaux. Il permet de dtruire la couleur, les gots et les odeurs, de dtruire les produits base de phnol et
doxyde. Les ions ferreux et manganeux solubles, ce qui les transforme en ions insolubles. De plus ce pouvoir
oxydant lev permet de briser les complexes organiques du fer et du manganse, qui ne le sont en gnral pas
avec les procds habituels du fer et du manganse contrairement au chlore, lozone ne ragit pas avec lazote
ammoniacal.
Le pouvoir dsinfectant de lozone est 10 100 fois suprieur celui du chlore et ce pour tous les types de
microorganismes. Il est mme efficace contre les spores et les kystes, qui sont pourtant les organismes les plus
rsistants [7, 8, 10, 16, 19, 20].

21
Procds doxydation

III-2-Niveaux doxydation et oxydants adapts : (Tab. VII)


Pr oxydation :
Ce traitement en tte de filire se justifie en raison de ses multiples objectifs.
Llimination des algues, des gots, de lodeur et de la couleur, lamlioration des qualits organoleptiques
dune eau. Si leau brute est riche en matires organiques mesures en COT, lemploi de chlore est proscrit.
Loxydation des micropolluants minraux tels que les ions ammonium, ferreux et manganeux se droule trs
souvent en dbut de la filire de traitement. Si de fortes teneurs en matires organiques accompagnent les
polluants Fe2+ et Mn2+, il faut viter toute sur consommation dun oxydant trop puissant par les composs
organiques. En consquence, lemploi de KMnO4 est prconis.
La proxydation permet galement de pallier le dysfonctionnement de la nitrification sur filtres spcifiques.
La proxydation amliore les phnomnes de coagulation et de floculation en terme de turbidit limine, de
dure de fonctionnement des filtres, dconomie de ractif et de compacit des boues hydroxydes. Loxydation
des algues provoque la rupture de leur membrane, librant ainsi lalginate qui est un floculant naturel. On
voque aussi une modification des composs organiques qui se polymrisent sous laction des radicaux OH- et
une inversion de charge des collodes. Enfin, loxydation de complexes librerait des ions mtalliques
participant la coagulation. Il sagirait dun ajout virtuel de chlorure ferrique de formule FeCl3.
Les principaux oxydants utiliss en pr oxydation sont le chlore et drivs, le dioxyde de chlore et lozone.
Inter oxydation :
Llimination des micropolluants organiques de type pesticides peut passer par une interoxydation. Lautre
solution est une adsorption sur charbon actif. Le couplage de ces procds est souhaitable pour conomiser la
capacit de rtention de ladsorbant.
Lamlioration des qualits organoleptiques et une limination des micro-organismes les plus rsistants tels que
les virus, kystes de protozoaires et spores peuvent tre galement les buts recherchs. La dferrisation et la
dmanganisation de leau brute trouvent leur justification. Depuis un certain nombre dannes et la dcouverte
des phnomnes de filtration biologique sur charbon actif en grains, laugmentation de la biodgradabilit des
matires organiques, par transformation du carbone rfractaire en carbone assimilable, est devenue une raison
supplmentaire dinstaller une telle tape. Ceci en vue dviter au maximum tout phnomne de reviviscence
bactrienne sur rseau.
Lin ter oxydation ne se justifie que dans le cas de dveloppement important dalgues. En effet, elle limite
considrablement lactivit biologique des filtres sable.
Lozone est loxydant le plus employ en interoxydation.

22
Procds doxydation

Post oxydation :
La post oxydation est une dsinfection qui a pour objet linhibition des micro-organismes en sortie dusine et
qui doit assurer un rsiduel de dsinfectant dans le rseau pour garantir la protection sanitaire de leau. On
dsire donc un effet bactricide ou biocide qui consiste en un abattement des germes et effet bactriostatique
sur le rseau.
Cette dernire condition nest possible quavec lemploi dun oxydant rmanent tel que le chlore [17].
III -3- Impurets apportes suite au traitement chimique :
Lintroduction dun ractif dans leau peut conduire deux formes de pollution, Les impurets du ractif lui-
mme et les produits de raction du ractif avec les matires organiques de leau.
III-3- 1-Impurets dues au ractif :
Dans de nombreux pays, lutilisation dun ractif est soumise lagrment des autorits sanitaires. La
lgislation peut prvoir, pour chaque ractif, une concentration maximale dimpurets respecter par le
producteur. Une analyse prcise des produits doit tre effectu. Au cas o lon constate la prsence
dimpurets, il importe de vrifier que la chane de traitement prvue en permet llimination.
III-3-1-1-Coagulants minraux :
Certains coagulants sont prpars partir de minerais ou mtaux pouvant contenir des impurets en quantit
non ngligeable : attaque acide de bauxite pour prparer le sulfate daluminium, attaque de carcasses
mtalliques pour prparer le chlorure ferrique. Cette attaque dissout galement des impurets (tungstne,
manganse, arsenic).
III-3-1-2-Polylectrolytes, adjuvants :
Les polylectrolytes de synthse sont prpars par polymrisation de monomres (polyacrylamides, polyamines
en traitement deau potable, la lgislation de chaque pays peut fixer le type de monomre utilisable, la teneur
maximale en monomre utilisable dans le polymre et le taux de traitement maximal quil est possible de mettre
en uvre (0,5 % de monomre acrylamide dans le cas des polyacrylamides par exemple).
III-3-1-3-Correction de pH :
Il faut vrifier les impurets de la chaux et de la soude qui doit tre exempte de mercure (soude prpare par le
procd membrane).
III-3-1-4-Air dentranement (stripping) :
Lair utilis au cours de certaines tapes du traitement peut apporter des lments indsirables : impurets de
latmosphre, gaz dchappement, fumes, bactries [8].

23
Procds doxydation

Tableau nVII : tableau comparatif des diffrents modes de dsinfection [13, 18, 20].

Paramtres chlore ozone Dioxyde de Chloramines Rayons


chlore (ClO2) NH2Cl UV
Source -Cl2 gnr sur site. gnr sur site. gnr sur gnr sur
-Eau de javel site. site.
- gnr sur site.
Utilit DP,DS,GO,C,Ox DP,DS,GO,C, DP,DS,GO,C, DS DP
Ox, FB. Ox
Sous produits de -THM -Bromates
dsinfection (trihalomthanes) -CODB (carbone chlorites/ Mconnus Aucun
-AHA (acide orgnique dissous chlorates
haloactiques) biodgradable)
Avantages -Cot -contrle des -Ne ragit pas -formation -Facile
-Facilit gots/des odeurs avec minime de ajout une
dutilisation et couleurs. lammoniaque. THM/AHA. installation
-Peut tre -Ne fore pas de -Meilleure existante.
combin une THM/AHA. persistance -efficace en
filtration Excellent pour que le Cl2 en eaux froides
biologique. oxyder Fe/Mn. rseau. -Cot
-Plus efficace comptitif.
que le Cl2 -aucun sous
pour contrler produits de
la dsinfection
recroissance

Dsavantages -Risque reli au -Procds -chlorites/ -Possibilits -Pas de


Cl2 relativement chlorates. de rsiduel
gazeux complexe. -Gots et nitrification persistant.
-Gots et odeurs -Pas de rsiduel odeurs pour en rseau. Technologie
-THM persistant. certains types -Faible en
-Bromates. deau. efficacit validation.
-ClO2 rsiduel comme -Encrassemt
recommand=0, dsinfectant possible des
8ppm. primaire. lampes
-Scurit reli selon les
lutilisation du types deau.
NaClO2.
Efficacit en
dsinfection trs bonne excellente bonne Faible acceptable
Virus acceptable trs bonne bonne Faible trs bonne
Giardia ngligeable ngligeable ngligeable ngligeable excellente
Cryptosporidium
DP : dsinfection primaire.
DS : dsinfection secondaire.
Ox : oxydation du fer et du manganse.
GO:gots et odeurs.
C : couleur.
FB : filtration biologique.

24
Procds doxydation

III-3-1-5-Loxydant: (Tab. VIII)


*Clore et drivs : cette famille doxydants contient un certain nombre dimpurets. Les composs les plus
gnants sont les bromures Br-, les bromates BrO3-, les mtaux lourds tels que le plomb, le mercure et le chrome
ainsi que des molcules organochlors comme le ttrachlorure de carbone (CCl4) et le chloroforme (CHCl3).
*Leau de javel NaOCl prsente des taux importants dantimoine Sb et de chlorate ClO3- [17].
La couleur jaune de leau de javel est due la prsence de bichromate de potassium. Rcemment les
allergologues ont attir lattention sur le pouvoir allergisant du chrome. Pour cette raison, dans les pays de la
communaut Europenne, le chrome a t retir de leau de javel [1, 19, 22, 23].
De plus leau de javel prsente linconvnient dintroduire des lments autres que le chlore (mtaux lourds ou
autres) notamment du mercure (procd Solvay mettant en uvre des lectrodes de mercure pour llectrolyse
de chlorure de sodium). Sa vrification est indispensable avant emploi, sa concentration en mercure devant tre
1
infrieure au /10 de la norme de ce mtal (soit < 0,1 mg/l) [9, 22, 23].
*Le chlorure de calcium entrane une augmentation significative de la duret de leau lorsquil introduit fortes
doses.
*Le dioxyde de chlore : paralllement au problme du chlore, la solution de Na ClO2 contient un certain
nombre dimpurets.On peut citer les ClO3-, BrO3-, mais plus surprenant des organochlors.
*Les chloramines : lutilisation des chloramines conduit la dgradation de la saveur de leau lie la prsence
de dichloramines. Un autre effet ngatif est lapparition progressive dans leau de nitrites qui excdent les
normes de potabilit [8, 17, 22, 23].
Tableau VIII : Composition des solutions commerciales la livraison [17].

Composs Cl2 (mg /Kg) NaOCl (mg / l) NaO2Cl (mg / l)


Br- <300 - -
BrO3- <480 <1000 700
Mtaux lourds
-Hg2+ <1 <1 10
-Pb2+ <5 <3 10
3+
-Cr <10 <2 10
Organochlors
-CCl4 <100 - 5
-CHCl3 0,2 0,01 0,1
ClO3- (g / l) - 7 14

25
Procds doxydation

III-3-2- Impurets par raction du ractif sur les molcules organiques de leau : (Fig.3)
Lors des phases doxydation intervenant au long dune chane de traitement, les oxydants (chlore, dioxyde de
chlore, ozone) peuvent ragir sur les matires organiques dans leau.
En particulier le chlore ragit sur certaines de celle-ci pour donner naissance aux composs haloformes.
Cette raction peut se faire soit directement par le chlore prsent dans leau sous forme de ClO-, soit par un
autre halogne (brome ou iode) qui peut avoir t dplac par le chlore (on aura alors XO- qui ragira sur ces
matires organiques pour former des composs organohalogns).
La raction de base pour la formation des composs trihalomthanes est la suivante :
R-CO-CH3 + 3OX- R-CO-O + CHX3 +2 OH-
Compos
haloforme
Les matires organiques carbones qui peuvent donner lieu cette raction sont principalement les
mthylctones, ou, dune manire plus gnrale, tous les produits organiques, peuvent tre oxyds en
mthylctones .
La chloration des composs organiques conduit galement la formation dautres composs qui nont pas t
encore ce jour tous identifis.
Tous ces produits sont suspects dtre cancrignes. Il importe que les filires mises en place et la conduite des
installations de traitement permettent de produire une eau dont la teneur en trihalomthanes et organochlors
soit la plus faible possible [7, 9, 17, 19].

non identifis

haloformes

haloctones
trichloroctones
acides
haloaliphatiques
haloaromatiques

Figure 3: Composs halogns prsents aprs chloration dune eau [7].

26
Sous produits de dsinfection et sant publique

D es tudes pidmiologiques ont suggrs un lien possible entre la chloration, les sous produits de

chloration et le risque accru de plusieurs types de cancer.


Depuis les premiers travaux de recherche sur les sous produits de dsinfection, ROOK, BELLAR et al.(1974),
les trihalomthanes ont reu beaucoup dattention parce que le chloroforme a t montr comme un cancrigne
suite des travaux menus sur des animaux de laboratoire.
Ensuite, la chloration des eaux a t assimile lactivit mutagne ascendante attribue un vaste groupe
conu par plusieurs types de composs appels composs organohalogns ou A.O.X.
Quelques enqutes pidmiologiques tendraient prouver que le risque du cancer est augment :
Pour une consommation deau traite issue dune eau de surface plutt que dune eau souterraine, le risque de
cancer du foie, du pancras et de la vessie serait 5 7 % plus important chez lhomme qui consomme une eau
de boisson provenant dune eau de surface, 2 3 % pour la femme.
Avec ltape de chloration, le cancer du tractus gnital et le cancer gastro-intestinal seraient plus frquents
aprs consommation deau chlore [3, 24, 25, 26, 27].

27
Sous produits de dsinfection et sant publique

IV-1- Les diffrents classes de sous produits de dsinfection :

IV-1-1-Sous produits de chloration :

IV-1-1-1-Trihalomthanes (THM): (Fig. 4) et (Tab. IX)


a- gnralits :
Les trihalomthanes sont des composs mono carbons de formule gnrale CHX3, dans laquelle X peut tre
prsenter un atome de fluor, de chlore, de brome ou diode, ou une combinaison de ces lments. Les THM
sont les sous produits les plus abondants dans leau potable chlore ils reprsentent 44 50 %des AOX totaux.
Ltape de pr chloration engendre plus de35% des THM forms, alors que 60 70% sont forms lors de la
post chloration. On note aussi que les diffrentes tapes du traitement physicochimique nont pratiquement
aucune influence notable sur la rduction des THM forms en pr chloration.
Les quatre membres du groupe les plus importants sont : le trichloromthane (CHCl3 ou chloroforme), le
dibromochloromthane (CHClBr2), le bromodichloromthane (CHBrCl2) et le tribromomthane (CHBr3 ou
bromoforme).le dibromochloromthane est le THM qui prsente le risque srieux de cancer suivi par le
bromoforme et enfin le chloroforme. La concentration des THMs est deux fois plus en saison chaude quen
saison froide [9, 24, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38].
Trihalomthanes iods sont responsables de lodeur mdicinale qui apparat rarement dans les eaux potables
chlores. Il tait mentionn qune concentration de 5g/l est suffisante pour donner une telle odeur.
Leur formation est lie la prsence dions diode qui reprsente 0,01 20g/l dans leau souterraine. Le
trihalomthane le plus reprsentatif de cette catgorie est le iodoforme (CHI3).
Il a t montr que le iodoforme est form lors de la formation des chloramines, dans la rgion o la formation
des autres THM nest plus favorable [39, 40].

[Cl2] rsiduel et [trihalomthanes]


CHCl2Br
10 - CHCl3

Cl2

5 -

CHClBr2

Concentrations croissantes en chlore (mg/l)

Figure 4 : Cintique dapparition des trihalomthanes lors de la chloration des eaux [9].

28
Sous produits de dsinfection et sant publique

Tableau IX : Influence de la dose du chlore sur la formation des THMs [39].

Cl2 ajout CHI3 CHCl3 CHCl2Br CHBr2Cl CHBr3


(mg de Cl2 / mg de N-NH4) (g/L) (g/L) (g/L) (g/L) (g/L)

0 0 0 0 0 0

2,15 14 1,2 0,1 <DL <DL

2,9 11,2 0,8 0,1 <DL <DL

4,3 12,9 4 1 <DL <DL

5,8 9 4,1 1,6 <DL <DL

6,4 12 6,3 2,1 0,2 <DL

8,6 13,3 9,2 4,6 1,3 <DL

8,7 <DL 13,3 9,4 6,2 <DL

11,6 <DL 18,2 11,5 6,3 <DL

12,9 <DL 20,6 13,6 10 0,5

b- Mtabolisme :
Les THM sont absorbs, mtaboliss et limins rapidement par les mammifres aprs ingestion ou inhalation.
Le THM inhal arrive rapidement dans le courant sanguin qui le transporte dans les tissus. Les graisses de
lorganisme sont le lieu de prdilection pour laccumulation des THM, qui est moindre dans le cerveau, les
poumons, les reins, les muscles et le sang. Le mtabolisme lieu dans le foie, la demi-vie varie de 0,5 3h. Des
autoradiographies du corps entier ont permis dobserver le transfert progressif vers le foie de la radioactivit des
dpts situs dans les graisses.
La principale voie mtabolique est dans tous les cas une oxydation par lintermdiaire du cytochrome P450
(CYP) 2E1, qui conduit la formation de drivs carbonyls halogns (le phosgne et ses drivs halogns)
qui peuvent tre leur tour hydrolyss en dioxyde de carbone ou se fixer sur des macromolcules tissulaires. Il
existe des voies mtaboliques secondaires, comme la dshalognation rductrice par lintermdiaire de
CYP2B1/2/2E1 (qui conduit la formation de radicaux libres) ou la conjugaison avec le glutathion (GSH) T1-1
qui entrane la formation dintermdiaires mutagnes.

29
Sous produits de dsinfection et sant publique

Les THMs broms ont beaucoup plus de chance demprunter les voies mtaboliques secondaires que le
chloroforme, la conjugaison de ce dernier avec le GSH sous laction de GST peut seffectuer des
concentrations extrmement leves. Le chloroforme est certainement capable de traverser la barrire
placentaire puisque sa concentration est plus leve dans le sang ombilical que dans le sang maternel [6, 30,
41].
IV-1-1-2-Acides haloactiques (HAA):
a- gnralits :
Les acides halo actiques sont des produits doxydation trs polaires forms par la raction du chlore sur
certaines substances organiques prsentes dans leau comme lacide fulvique et lacide humique.
Cest la fraction la plus importante aprs les THMs et reprsentent 25% des AOX totaux.
Ces acides comprennent des acides chlors, broms et chlors/broms. Le dichloroactique acide et le
trichloractique acide (TCA) sont dtects dans les eaux chlores une concentration de 4 161 g/l. il
nexiste pas de diffrence statistiquement signifiante des concentrations des HAAs durant la saison chaude ou
froide leur concentration est plus faible plus quon sloigne de la station de traitement et plus leau est ge (le
temps de stockage est long) [6, 24, 26, 30, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 42].
b- mtabolisme :
Le mtabolisme et la cintique du DCA et TCA diffre sensiblement. Les principales ractions de lacide TCA
se produisent dans la fraction microsomique, alors que le mtabolisme de lacide DCA qui seffectue
essentiellement sous laction des glutathions transfrases, se droule plus de 90% dans le cytosol en
glyoxalate et oxalate avant dtre excrt. Le TCA a une demie vie biologique de 50h chez lHomme alors que
celle du DCA est trs courte [6, 30].
IV-1-1-3 Hydrate de chloral (trichloroactaldehyde : HC):
a- gnralits :
Cest un sous produit de chloration qui se trouve dans leau de boisson une concentration qui slve 19g/l
et peut atteindre 100 g/l. Il constitue avec les chloractones 3% des SPC. On le dtecte aussi dans les solutions
chlores dacides humiques et daminoacides. Ce produit est aussi un mtabolite du tri et du tetrachloroethylne
chez les mammifres, on le retrouve dans le plasma des individus exposs la vapeur du tetrachloroethylne
(produit chimique de lindustrie du textile). Lhydrate de chloral est en concentration leve dans les eaux
souterraines et faible en eaux superficielles. Les plus faibles niveaux dhydrate de chloral sont enregistrs
durant les mois o leau tait froide que durant les mois ou leau tait chaude. Les niveaux de HC ont t
maximaux lusine de traitement et ont baiss mesure que la distance par rapport lusine augmentait [6, 20,
24, 29, 34, 35, 36, 37, 38].

30
Sous produits de dsinfection et sant publique

b- mtabolisme :
Il existe des donnes limites sur le mtabolisme de lhydrate de chloral. Ses deux principaux mtabolites sont
le trichlorothnol et le trichloractique.
Le trichlorothanol subit une glucuronidation rapide puis il passe dans le circuit entrohpatique o il est
hydrolys et enfin oxyd en TCA. La chloration du trichlorothanol conduirait la formation de DCA, ce
dernier pourrait tre ensuite transform en monochloroactate (MCA) [29].
IV-1-1-4- Actonitriles halogns (AN) :
a- gnralits :
Les actonitriles ont t identifis dans lenvironnement uniquement comme tant des SPC des eaux de surface
et de seaux souterraines. Ils reprsentent 5% des AOX totaux. Les prcurseurs potentiels de ses sous produits
sont : les algues, les acides humiques et les protines. Les actonitriles halogns peuvent aussi se former in
vivo la suite dingestion deau chlore. Le dichloroactonitrile est lactonitrile halogn le plus abondant
dans les eaux de boisson des concentrations situes dans un intervalle de 0,3 24 g/l.
Les actonitriles broms peuvent aussi existaient si les ions bromures se trouvent dans leau brute. Les
concentrations des diffrents actonitriles dans le rseau de distribution sont gnralement faibles et diminuent
lgrement durant la saison chaude [6, 24, 33, 34, 35, 36, 37, 38].
b- mtabolisme :
Les actonitriles halogns sont facilement absorbs par la voie gastro-intestinale et rapidement mtaboliss en
composs mono carbons, notamment en cyanure, en formaldhyde ainsi que des halognures de formyle [6,
30].
IV-1-1-5- chlora ctones (CK) :
a- gnralits :
Un groupe de sous produits de chloration cit par lorganisation mondiale de la sant qui peut prsenter un
danger pour la sant publique. Ils reprsentent 3% des organohalogns totaux. LOMS na pas donne de
valeurs guides aux actonitriles vue le manque de donnes. La concentration des chloropropanones, le DCP et
le TCP est leve pendant la saison chaude plutt quen saison froide. Il nexiste pas une production nette de
CK dans le rseau de distribution [6, 24, 33, 34, 35, 36, 37, 38].
b- mtabolisme :
Il nexiste pas de donnes suffisantes sur le mtabolisme des CKs.

31
Sous produits de dsinfection et sant publique

IV-1-1-6- Chlorophnols (CP):


a- gnralits :
La prsence de chlorophnols dans leau de boisson peut rsulter de la chloration des phnols si la
concentration en chlore libre est importante, ce qui est le cas de la chloration au dessus du point critique.
Un faible taux de chlorophnols, spcialement le mono et le dichlorophnol se produisent dans leau
dsinfecte au chlore.
Les chlorophnols prsents dans leau, le sol ou les sdiments sont dtruits et enlevs de lenvironnement dans
quelques jours quelques semaines par les microorganismes. Il recommand que leau de boisson ne doit pas
contenir plus de 0,04mg/l du 2 chlorophnol durant toute la vie dun adulte et 0,05 mg/l pour un jour, 10jours
ou durant une dure dexposition plus longue chez les enfants.
Pour le 2,4 dichlorophnol, lEPA recommande une concentration ne dpassant pas 0,03mg/l pour un jour,
10jours ou durant une dure dexposition plus longue chez les enfants [6, 43].
b- mtabolisme :
Les mono chlorophnols ne restent pas longtemps dans lorganisme, ils sont rapidement mtaboliss des
composs moins nfastes et la plupart quittent lorganisme travers les urines dans 24h. Les autres
chlorophnols (dichorophnol, tri chlorophnol et tetrachlorophnol) qui sliminent aussi dans les urines
comme des produits moins potentiels, peuvent sjourner dans lorganisme pendant plusieurs jours [43].
IV-1-1-7-La chloropicrine (CPi):
a- gnralits :
La chloropicrine ou trichloronitromthane est trouve dans les eaux chlores comme sous produits de
dsinfection des concentrations suprieurs 1g/l par action du chlore sur les acides humiques, les acides
amins et les nitrophnols. La prsence des nitrates favorise sa formation. Les niveaux de chloropicrine ont t
quelque peu levs durant les mois o leau tait chaude mais ont t relativement constantes durant la
distribution pendant la saison froide. Les niveaux de chloropicrine rduisent au cours de la distribution durant
la saison chaude, cette rduction suggre que la CPi est dgrad dans le rseau de distribution plutt que la CPi
est produite partir du chlore rsiduel [6, 33, 36, 37, 38, 44].
b- mtabolisme : il nexiste pas de donnes sur le mtabolisme de la chloropicrine chez lHomme et lanimal.
IV-1-1-8- Chlorohydroxyfurnones (CHFs):
a- gnralits :
Les chlorohydroxyfuranones ont reu une attention lors de la dernire dcennie. Le plus tudi des CHFs est le
3-chloro-4-dichloromethyl-5-hydroxy-2(5H)-furanone (MX), a t identifi dans les eaux de boisson et tait
montr comme le plus puissant mutagne dans le test dAmes.
Le MX est trouv dans les eaux dsinfectes par le chlore des concentrations atteignant 67 ng/l, il est produit
par laction du chlore sur la matire organique naturellement prsente dans leau.

32
Sous produits de dsinfection et sant publique

Autres CHFs, comme le 3-chloro-4-chloromethyl-5-hydroxy -2(5H) furanone (CMCF), 3-chloro-4-methyl-


5 hydroxy-2(5H) furanone (MCF) et 3,4 - dichloro 5-hydroxy -2(5H)- furanone (MCA) sont aussi forms
et observs dans les eaux de boisson des concentrations atteignant 60 ng/l. CMCF,MCF et MCA sont aussi
des mutagnes sur les systmes bactriens mais leur pouvoir mutagne est infrieur par rapport celui du MX.
Certains estiment que 40 60% du caractre mutagne de leau traite par chloration pourrait tre due au MX et
son tautamre lacide 2-chloro-3-dichloromethyl-4-oxo butenoique (EMX) qui est retrouv des
concentrations entre 2 et 59 ng/l [6, 34, 45, 46, 47].
b- mtabolisme :
14
Le MX radio marqu au C est rapidement absorb au niveau des voies digestives et qui passe dans la
circulation gnrale. La plus grande partie de la radioactivit est excrt dans les lurine au bout de 24 48h et
les matires fcales. Au bout de 5jours, il ne reste dans lorganisme quune proportion minime radio marqueur
initial [6, 30, 45].
IV-1-2-Sous produits de chloramination : (Tab. X)
IV-1-2-1- Le chlorure de cyanogne (CNCL) :
a- gnralits :
Le CNCl est le produit de chloramination le plus connu, il se forme par raction de lacide hypochloreux sur
des prcurseurs organiques en prsence de lion ammonium. Des concentrations de 0,4 et 1,6g/l
respectivement ont t dtectes dans leau de boisson traite par la chloramine [6, 24].
b- mtabolisme :
Le CNCl se transforme rapidement en cyanure dans lorganisme. Il existe peu de donnes sur la toxicit par
voie orale du CNCl, de sorte que la valeur guide indique 70 ng/l est fonde sur les proprits des cyanures [6].
IV-1-2-2- Autres sous produits de chloramination :
Tous les sous produits de dsinfection dtects par chloration peuvent aussi se prsenter dans les eaux
chloramines mais des niveaux infrieurs ceux rencontrs dans les eaux chlores vu le pouvoir oxydant
faible des chloramines.
Le profile des SPD est diffrent avec la dominance des chloroactiques suivis par les trihalomthanes (24% au
lieu de 46% dans leau chlore), les haloactonitriles (augmentent de 5 en eau chlore 11% dans leau
chloramine). La concentration du chloral hydrate diminue de 3 1% tandis que la concentration des
chloractones demeure invariable avec 3%.
Les chloroactiques et les trihalomthanes compte prs de 83% dans les eaux chloramines [6, 24].

33
Sous produits de dsinfection et sant publique

Tableau X: Distribution des SPD halogns dans les eaux chlores et chloramines [24].

eau chlore % eau chloramine %


THMs 46 24
CAAs 42 54
HANs 5 11
CH 3 1
CKs 3 3
CNCl 1 7

IV-1-3-Sous produits dozonation :


IV-1-3-1- Bromates :
a- gnralits :
Des bromates peuvent se former par oxydation de lion bromure lors de lozonation, et ventuellement partir
dautres oxydants utiliss dans le traitement de leau. Des donnes limites montrent que les concentrations
dans leau de boisson sont gnralement infrieures 90g/l [6, 30, 48].
b- mtabolisme :
Les bromates sont rapidement absorbs et excrts, principalement dans les urines sous forme de bromures. On
peut les mettre en vidence dans les urines des doses suprieurs ou gales 5mg/Kg de poids corporel.
La concentration des bromates culmine au bout denviron 2h, ils ne sont plus dcelables dans le plasma [6, 30].
IV-1-3-2- Formaldhyde :
a- gnralits :
La prsence de formaldhyde dans leau de boisson rsulte principalement de loxydation de matires
organiques naturelles lors de lozonation et de la chloration. Des concentrations atteignant 30g/l ont t
mesures dans leau de boisson ozonise [6].
b- mtabolisme : il nexiste pas de donnes significatives sur le mtabolisme de la chloropicrine chez
lHomme et lanimal.
IV-1-4- Sous produits du dioxyde de chlore :
IV-1-4-1- Chlorates :
a- gnralits :
La prsence de chlorates dans leau peut rsulter de la dcomposition du dioxyde de chlore ou de lutilisation
dhypochlorites comme dsinfectant [6, 21, 30].

34
Sous produits de dsinfection et sant publique

IV-1-4-2 Chlorites :
a- gnralits :
Analogues des chlorates gnrs par la dgradation du dioxyde de chlore [6, 21, 30].
b- mtabolisme des chlorates et des chlorites :
16
Les chlorates ont un comportement analogue celui des chlorites. Le Cl provenant de lion chlorite est
rapidement absorb. La dose initiale de chlorite se retrouve moins de 50% sous forme de chlorure dans les
urines et en faible proportion sous sa forme initiale. Il est probable quune proportion sintgre la rserve de
chlorures de lorganisme [6, 30].

IV-2- Dangers lis aux sous produits de dsinfection :


La chloration de leau potable a fait lobjet de mesures effectives de sant publique jamais entrepris. Il existe
plusieurs alternatives la chloration utilises dans beaucoup de pays mais les risques associs leurs sous
produits sont moins tudis et moins contrls que ceux de la chloration. De plus lutilisation des autres
alternatives varie dans leur efficacit et certaines demandent beaucoup de sophistication dans lapplication et le
contrle.

IV-2-1-effets toxiques :
IV-2-1-1- Anomalies du dveloppement :
Les Trihalomthanes broms provoquent des lsions de foie et des reins suite une exposition prolonge
des doses leves. Le chloroforme lui peut provoque, suite une exposition prolonge des doses suprieurs
15 mg /Kg de poids corporel par jour, des modifications dans les reins, le foie et la thyrode [6, 30, 33].
Les acides haloactiques : Dans des tudes court et long terme chez lanimal, lacide dichloractique a
provoqu des neuropathies, une rduction du poids corporel, des lsions des testicules et des changements
histopathologiques dans le cerveau. Lacide trichloractique a provoqu une prolifration des peroxysomes et
une augmentation du poids du foie.
Lacide dichloractique et lacide trichloractique provoquent des malformations cardiaques chez le rat. Le
stress oxydatif est galement une caractristique de la toxicit des drivs broms appartenant ce groupe
[6,49].
Lhydrate Chloral : des donnes relatives sa toxicit sont limits, mais des effets sur le foie ont t
constats dans des tudes de 90 jours chez la souris. Chez le rat, il entrane des anomalies hmatologiques.
Chez lHomme son effet dpresseur sur le systme nerveux central est probablement en rapport avec un
mtabolite, le trichlorothanal [6, 44].

35
Sous produits de dsinfection et sant publique

Actonitriles halogns : Le dibromoactonotrile et le dichloroactonitrile ont provoqu une rduction du


poids corporel ; aucun organe cible prcis na t identifi [6].
Chlora ctones: Des donnes toxicologiques relatives la 1,1dichloractone sont trs limites, mais il ressort
dtudes effectues avec une dose unique que cette substance agit sur le foie [6].
Chlorophnols : Leffet mutagne li lexposition des niveaux levs de chlorophnols est observ sur le
foie et le systme immunitaire et par la rduction du poids corporel [6, 43].
Chloropicrine : une exposition long terme chez les animaux de laboratoire a entran une rduction de la
dure de survie et du poids corporel [6, 44].
Les Bromates : haute concentration, provoquent des lsions au niveau des tubules rnaux chez le rat [6].
Le Formaldhyde : Lingestion pendant deux ans deau de boisson contenant le Formaldhyde a provoqu
une irritation de lestomac chez le rat [6].
Les Chlorites : Laction toxique des Chlorites est due principalement aux lsions quils causent aux
rythrocytes (stress oxydatif) et par la formation de mthmoglobine. Des effets neurocomportementaux lgers
chez des ratons des doses quotidiennes de 5,6 mg/kg de poids corporel ont aussi t relevs. Le pouvoir
lsionnel des Chlorates est moindre par rapport celui des Chlorites mais ils ont un effet analogue [6, 30].
Dautres travaux mens sur une population alimente par une eau dsinfecte au dioxyde de chlore confirment
lhypothse dun lien possible entre lexposition de cette eau et une lgre perturbation de la fonction
thyrodienne chez les nouveaux ns [50].
IV-2-1-1- Reprotoxicit : (Tab. XI et XII)
Des rsultats obtenus dans des tudes pidmiologiques faite sur des femmes vivant dans une rgion alimente
en eau de surface chlore indiquent une association entre les SPC et le taux des mort-ns, bas poids la
naissance, pr maturation et les anomalies congnitales (malformation du tube neural, fissures labio-palatines et
malformation cardiaque) [51].
Les THMs ont peu deffets toxiques sur la reproduction ou le dveloppement, mais des travaux ont rvl
que le BDCM est capable de rduire la mobilit des spermatozodes chez des rats F344 exposs
quotidiennement 39mg de BDCM/Kg dans leau de boisson pendant 52 semaines [29, 52 , 53].
En contraste des tudes sur les animaux, dautres tudes pidmiologiques ont montrs un accroissement dans
le taux davortements spontanes chez les femmes qui boivent 5 ou plus de verres deau du robinet/ jour ayant
contenu dau moins 75g/l de THM. Le pourcentage de risque calcul pour ces femmes sest lev 15,7%
alors que celui des femmes moins exposes ces substances est de 9,5% [54, 55, 56].
Dautres classes de sous produits sont responsables deffets toxiques sur la production :
Lacide dichloroactique, lors dune tude de tratologie chez le rat a mis en vidence des rsorptions ftales,
une rduction du poids et de la taille du ftus et des malformations des systmes cardio-vasculaire, digestif et
urognital de la progniture.Pour le TCAN, ont observs une rduction du poids et de la viabilit du ftus ainsi
que des malformations cardio-vasculaires et urognitales [6, 30,55].
36
Sous produits de dsinfection et sant publique

Tableau XI: Relation entre les malformations congnitales et lexposition aux sous produits de chloration
(RR et intervalles de confiance 95%) [56].

exposition risque relatif


malformation du tube neural THM>80g/l 3,0 (1,3-6,6)
fissures labio-palatines THM>100g/l 3,2 (1,20-7,3)
malformations cardiaques THM>80g/l 1,8(1,0-3,3)

Tableau XII: Relation entre le taux davortements spontans ou daccouchement prmaturs et le type
deau consomme (Odds-ratio et intervalles de confiance 95%) [56].

eau de robinet eau de bouteille


Deane (1989) 3,40 (0,6-19,4) 1,00 (0,4-2,5)
Wrensch (1990) 3,90 (1,8-8,5) 0,34 (0,21-0,54)
Hertz-Picciotto (1989) 2,00 (1,1-3,7) 0,71 (0,55-0,92)
Windham (1992) 1,20 (1,01-1,5) 0,78 (0,65-0,97)
Fenster (1992) 0,70 (0,43-1,2) 1,10 (0,68-1,8)

IV-2-2- Effets mutagnes et gnotoxiques : (Tab. XIII)


Les effets mutagnes et gnotoxiques des sous produits de dsinfection sont dtermins laide de tests in
vitro comme le SOS chromotest et le test dAmes, de tests in vivo test micronoyau triton ainsi que par des
tudes pidmiologiques menes sur des animaux de laboratoire in situ ou sur des populations rsidant dans
des aires gographiques alimentes par des eaux de boisson dorigine diffrente (souterraine ou superficielle)
traites par diffrents dsinfectants.
Les THMs :
Dans le SOS chromotest seul le chloroforme ninduit pas un effet gnotoxique sur Escherichia coli PQ 37. Le
BDCM, le CDBM et le BF sont gnotoxiques avec et sans activation mtabolique.
Dans le test Ames fluctuation, tous les THMs sont montrs mutagnes sur Salmonella typhimurium TA100
avec et sans activation mtabolique.
Dans le test micronoyau triton seul deux des quatre THM exposent des effets clastogniques dans les
rythrocytes priphriques, le BDCM induit une augmentation de la frquence dapparition de micronoyaux
dans les rythrocytes [57].

37
Sous produits de dsinfection et sant publique

Les cellules CCRF-CEM (Human Lymphoblastic Leukemia) exposes 5-10mM de THMs broms pendant
2h montrent une augmentation dans lADN simple brin compars au cellules tmoins. En plus lexposition aux
DBCM et BF des cellules CCRF-CEM apparat compromettre la capacit de rparation de lADN ceci est
dmontr par laugmentation du taux dADN SB aprs 22h aprs exposition [58].
Des tudes pidmiologiques sont intresses, en sparant le CHCl3 des autres composs la corrlation entre
le taux dapparition de 16 cancers distincts et la concentration des THMs dans leau de boisson. Les
informations relatives lexposition provenaient de lenqute nationale sur les matires organiques et de
lenqute faite en 1975 dans la rgion V par lagence pour la protection de lenvironnement des Etats-Unis
dAmrique. Les travaux ports sur 76 comits dont la population tait desservie plus de 50% par les rseaux
de distribution qui ont t lobjet de mesures, le rsultat le plus cohrent en a t une corrlation entre le taux de
mortalit par le cancer de la vessie et la concentration de THMs, corrlation qui a t observe chez les deux
sexes et sest avre proportionnelle au pourcentage de population desservie par les rseaux tudis, elle tait
plus forte pour les composs broms que pour le chloroforme. Dautres chercheurs ont repris en grande partie
les mmes bases de donnes et leur ont fait subir diffrents traitements statistiques pour dterminer la
pertinence du modle statistique. En utilisant une analyse de rgression pondre, ils ont trouvs des rsultats
analogues ceux des tudes antrieures, une corrlation positive entre le taux de mortalit par le cancer de
vessie et par le cancer recto intestinal, dune part, et de la concentration du chloroforme de lautre [29, 59, 60,
61, 62, 63, 64, 65, 66, 67].
Dautres tudes pidmiologiques menues en Taiwan visant vrifier lexistence dun lien possible entre le
taux de mortalit dans cette ville et leau chlore. Ils ont choisis de travailler sur des municipalits aliments en
eau chlore et des municipalits alimentes avec une eau non chlore et ont observs une relation signifiante
pour le cancer de rectum, vessie et reins chez les deux sexes et le cancer du foie chez les hommes [68].
CAAs :
Dans le SOS chromotest, MCA, TCA et MBA ne montrent pas une activit gnotoxique avec ou sans activit
mtabolique. DCA est faiblement gnotoxique sans S9 (mix). DBA et TBA sont les seuls qui montrent des
proprits gnotoxiques avec et sans activit mtabolique, laddition du systme dactivation mtabolique
augmente leur gnotoxicit.
Tous les acides actiques halogns se sont montrs mutagnes dans le test Ames fluctuation sur Salmonella
typhimuriumTA100 leur toxicit est diminue par laddition du S9 (mix), au contraire les MCA et MBA
montrent une activit mutagne uniquement en prsence dactivit mtabolique[68].
Aucun des acides actiques halogns na montr une activit clastognique except le TCA qui induit une
basse frquence de formation drythrocytes micronucles.
Dans plusieurs tudes, le DCA a provoqu des tumeurs hpatiques chez la souris. Les trichloractates ont
galement provoqus des tumeurs du foie chez la souris [6].

38
Sous produits de dsinfection et sant publique

HC :
Ce compos induit des mutations dans le test dAmes avec princuubation en prsence de S9 (mix) chez
Salmonella typhimuriumTA100. Chez Saccharomyces cerevisiae, il cause une augmentation signifiante de la
frquence de la conversion des gnes D7 in vitro avec S9 (mix).
Le chloral hydrate induit une malsgrgation du fuseau miotique chez Aspergillus nidulans et cause des
aneuplodies in vitro chez ce champignon et dans les fibroblastes embryoniques primaires des Hamster chinois
(cellules V 79) et les lymphocytes humains et in vivo dans les cellules germinales des souris males.
Le chloral hydrate est positif in vitro dans les essais micronucleus dans les lymphocytes humains. Ce
compos nest pas clastognique mais a un effet direct sur le fuseau miotique, la formation de micronoyaux,
linduction daneuplodies est en gnral lie lactivit toxique du CH sur le fuseau miotique [44].
CK :
En SOS chromotest tous les propanones chlors tudis sauf le MCP montrent un effet gnotoxique le 1,1 DCP
et le 1, 1,1 TCP sont gnotoxiques sur E.coli, en absence de S9 le 1,3 DCP et le 1, 1, 3 TCP induisent un effet
gnotoxique avec et sans activation mtabolique. Les rsultats obtenus par ce test indiquent que le systme
mtabolique augmente la gnotoxicit du 1,3 DCP et dcrot celle du 1, 1,1 TCP, lordre gnotoxique des CKs
bas sur le facteur dinduction est le suivant : 1,1,3 TCP>1,3 DCP>1, 1,1 TCP>1,1 DCP.
Ces cinq chloropropanones montrent aussi une activit mutagne dans le test dAmes fluctuation avec et sans
activation mtabolique et seul le MCP induit une activit mutagne en absence de S9 (mix).
Le test micronoyau triton est positif pour le 1,3DCP et 1,1,3 TCP, prsence dactivit clastognique sur les
rythrocytes priphriques [70, 71].
AN :
Lors dune tude, trois des actonitriles halogns ont montr un effet gnotoxique. Le DCAN gnotoxique en
prsence de S9 (mix). Le BDAN et le DBAN produisent un effet gnotoxique en absence de S9 (mix).
Tous les actonitriles lexception du DBAN dmontrent une activit mutagne chez Salmonella
typhimuriumTA100 sans ou avec activation mtabolique. Laddition du systme enzymatique dcrot la
mutagnicit du MCAN et limine lactivit mutagne du TCAN et MCAN qui est prsente en son absence. Le
MBAN induit des effets mutagnes en prsence de S9 et non pas en son absence. Le DCAN est le seul qui
prsente une activit mutagne sans et avec activation mtabolique. Lordre de mutagnicit est donc
DCAN>BCAN>MBAN>TCAN>MCAN.
Ces actonitriles tudis exposent des effets clastogniques sur les rythrocytes priphriques des larves de
triton. Les rsultats montrent aussi que la toxicit des actonitriles chlors saccrot avec le nombre de
substituant chlors. [71, 72]

39
Sous produits de dsinfection et sant publique

CP :
Selon certains rapports, le 2,4,6 TCP provoquerait lapparition de lymphomes et de leucmies chez le rat mle
et de tumeurs hpatiques chez les souris des deux sexes, il ne sest rvl pas mutagne dans lpreuve dAmes
mais il a manifest une faible activit mutagne dans dautres preuves in vivo et in vitro [6].
CPi :
La littrature concernant la chloropicrine est plutt pauvre. Des tudes ont dmontrs sa mutagnicit dans le
test dAmes avec S9 (mix) chez Salmonella typhimuriumTA100et une faible activit sur la souche Salmonella
typhimuriumTA98 et E.coli (WP2 MCR). La chloropicrine induit lchange de chromatides surs dans une
culture de cellules lymphocytaires humaines. La plus faible concentration de CPi induisant une activit
gnotoxique signifiante est dtecte dans le SOS chromotest (0,3g/ml). Concernant le test dAmes fluctuation,
il est intressant de noter que 3g/ml de CPi apparat gnotoxique [44].
CHFs :
Dans lessai de micronoyau sur des cellules lymphatiques de souris L5178Y (souche TK+/- 3.7.2.C), tous les
CHFs montrent des effets gnotoxiques signifiantes. MCA induit la formation de micronoyaux des
concentrations fortes (25M), CMCF, MX et MCF augmentent la frquence de micronoyaux des
concentrations de 6,25-25, 50-100 et 100-200 M respectivement. Ils sont aussi gnotoxiques dans les
hpatocytes des rats (lessai UDS). De nombreuses tudes in vitro ont dmontrs que le MX cause un rang
de dommages chromosomial dans les cellules mammifres (sans activation mtabolique). Le MX accrot la
frquence dchanges de chromatides surs dans les lymphocytes priphriques des rats et provoque des
dommages lADN dans les cellules V79 dHamster chinois, dans le foie des rats et dans les cellules
testiculaires, il induit galement des cassures des brins de lADN dans les lymphoblastes humains et les
globules Blancs [45, 46, 73].
Les bromates :
Les bromates provoqueraient une leucmie trs leve de tumeurs rnales chez les rats des deux sexes et de
mosothliomes du pritoine chez les rats mles. Lion bromate est mutagne dans le test dAmes et provoque
des cassures chromosomiques in vivo et in vitro et lapparition de micronoyaux [6].
Le formaldhyde :
Le formaldhyde administr par inhalation des rats et des souris sest rvl cancrigne des doses qui
provoquaient une irritation de lpithlium nasal, lingestion pendant 2ans deau de boisson contenait du
formaldhyde a provoqu des papillomes de lestomac associs une forte irritation ont t observs [6].

40
Sous produits de dsinfection et sant publique

Tableau XIII: Principaux composs organiques gnotoxiques ou cancrignes identifies ou doss dans
leau potable [74].

Concentrations dans leau potable Concentration Activit


minimale Cancrigne :
Valeur Recommandations gnotoxique Classement
Composs maximale OMS b (g/l) (g/l, test e) IARC g
dtectable a
(g/l)
Trihalomthnes
Bromoforme 10 100 2500, MT 3
Bromodichloromthane 50 60 3000, SOS 2B
Chlorodibromomthane 20 100 8000, AC 3
Chloroforme 300 200 _f 2B
Acides haloactiques
Acide Dichloroactique 200 50 p 50000, AF 4h
Acide Tribromoactique 200 100 p 80000, AF 4h
Acide Bromoactique 4 * 20000, AF 4
Acide Dibromoactique 19 * 10000, AF 4
Actonitriles halogns
Bromochloroactonitrile 10 * 120, MT 3
Dibromoactonitrile 11 100 p 30, ECS 3
Dichloroactonitrile 24 90 p 250, MT 3
Trichloroactonitrile 0.1b 1p 2000, ECS 3
Ctones chlors
1,1- dichloropropanone 2.2 * 10000, AF 4
1,1,1- trichoroproapanone 20 * 100000, AF 4
Furanones chlores
MX 0.07 c * 4, SOS 4i
CMCF 0.02 c _ nd 4
MCF 0.07 c _ nd 4
MCA 0.07 c _ 4000, HPRT 4
Divers
Chloral (trichlorothanol) 19 10 200000, MT 4
Chloropicrine 1 * 300, SOS 4
Actaldhyde 7 _ 2B
Formaldhyde 17 900 10000, AF 2A

a c
Selon IARC(1991), sauf b BRUCHET et al.(1985) et KRONBERG(1994) et SMEDS et al.(1997).
d p *
Valeurs guides de lOrganisation mondiale de la sant (OMS, 1994), provisoire, En cours dlaboration (informations disponibles

insuffisantes), - : Non encore lobjet dvaluations.


e
MT : micronoyau triton, AF : Ames fluctuation, SOS : SOS chromotest, HPRT : mutation au locus HPRT, AC : aberration
chromosomique, ECS : change de chromatides surs, nd : non dtermin.
f
Aucune activit gnotoxique observe dans les tests classiques.
g
2A : probablement cancrigne chez lHomme, 2B : possiblement cancrigne chez lHomme, 3 : non classifiable concernant sa
cancrognicit chez lHomme, 4 : non classifi par lIARC.
h
Cancrigne chez le rat (DEANGELO et al.,1991).
i
Cancrigne chez le rat (KOMULAINEN et al.,1997).
41
Sous produits de dsinfection et sant publique

IV-3- Contrle des sous produits de chloration:


Le resserrement des normes concernant la prsence de sous produits de chloration dans leau de distribution
ncessite la modification de filires conventionnelles de traitements plus performants au niveau de lenlvement
des prcurseurs de SPC et par loptimisation de traitements existants. Ceci est possible par lutilisation
alternative de autres dsinfectants et lenlvement des sous produits aprs leur formation.
Une tude pilote faite dans le but ultime dliminer la formation et dterminer les moyens pratiques de
contrle de composs organochlors dune eau traite par le chlore utiliser loxydation avec lozone avant
toute tape de chloration, les rsultats obtenus par cette exprience montrent clairement que loxydation
avance par lozone est capable de dtruire compltement certains composs aromatiques prcurseurs de
A.O.X. (phnol et rsorcinol) et presque 96% du COT mais ncessite des temps dozonation levs. Des
rductions de 99,99% et de 98% de la demande en chlore et du potentiel de formation des A.O.X. ont t
atteintes [3].
En effet la combinaison dune tape dozonation et dune filtration sur charbon actif biologique (CAB) la
suite dune filire conventionnelle de traitement (coagulation, floculation, dcantation, et filtration sur sable)
permet de rduire la demande en chlore de leau traite de stabiliser le rsiduel de chlore dans le rseau de
distribution et de limiter la formation de sous produits de dsinfection lors de la chloration [74, 75, 76, 77].
La dchloration de leau de boisson avec le sulfite rduit dune faon excellente lactivit mutagne.
Le traitement avec le dioxyde de sulfure est propos comme un moyen efficace et une mthode non coteuse
pour rduire lactivit mutagne directe des eaux de boisson et des effluents industriels [79, 80].
Le monochloramine a t utilis par certaines autorits comme moyen pour rduire la production de SPC.
Il est moins puissant mais un persistant dsinfectant en comparaison avec le chlore libre et un temps de contact
plus long est requit pour linactivation des pathognes. Il existe plusieurs alternatives utilises au lieu de la
chloration dans beaucoup de pays au monde mais les risques associs leurs sous produits sont moins
contrls que ceux de la chloration. De plus lutilisation des autres alternatives varie dans son efficacit et
certains demandent une sophistication dans leurs applications [81, 82].

42
Mutations et Cancer

V-1- Relation entre mutations et cancer : (Fig.5)


Il y a de plus en plus dindices dune corrlation entre le pouvoir mutagne et le pouvoir cancrigne dune
substance. Une tude a montr en particulier que 157 des 175 agents carcinognes recenss (donc environ 90%)
sont galement mutagnes. La thorie selon laquelle les cancers rsulteraient de lapparition de mutations
somatiques suppose que ces agents provoquent la formation de mutations dans les cellules somatiques. La
mutagense serait alors un problme essentiel de socit. Nous sommes exposs non seulement des mutations
de nos cellules germinales (avec consquence long terme une augmentation de la frquence des maladies
hrditaires) mais aussi celles de nos cellules somatiques avec la consquence la plus immdiate du cancer.
Llucidation du mcanisme daction spcifique des substances mutagnes chez les bactries a permis de
comprendre le rle de certains mutagnes dans notre environnement dans lapparition de cancers humains [83,
84, 85].

Carcinogne

90% (157/175)
87%
(94/108)

Non mutagne Mutagne


13% (14/108)

Non carcinogne

Figure 5 : relation entre mutation et cancer [85].

43
Mutations et Cancer

V-2- Gnralits sur les mutations :


V-2-1-Dfinition de la mutation :
La mutation est changement dans la squence nuclotidique de lADN de la cellule. Ce changement peut se voir
par des altrations du phnotype de la cellule mais peut tre silencieux. Si ces altrations surviennent sur une
partie non essentielle de la squence protique ou sur une partie codante du gnome. Elles mergent soit :
Des mutations spontanes se produisent naturellement dans toutes les cellules qui sont des consquences des
erreurs de la rplication de lADN, des lsions spontanes et mme des lments transposables peuvent tre
lorigine [86, 87].
V-2-2- Mcanisme de mutagense :
Il existe de nombreux agents pouvoir mutagne qui induisent des mutations par au moins trois mcanismes
diffrents. Il y a soit remplacement dune base de lADN, soit altration dune base de telle sorte quelle
sapparie de manire spcifique mais illgitime avec une autre base, soit enfin dtrioration dune base qui de
ce fait ne peut plus sapparier dans des conditions normales. La plupart de ces agents peuvent tre utiliss pour
obtenir artificiellement des mutations appeles alors mutations induites [88, 89].

V-2-2-1- Agents physiques :


La lumire Ultra violette (200 et 300nm):
Stimule la formation dune srie de photoproduits sur la chane dADN. Deux espces de lsions qui, toutes les
deux produisent sur des pyrimidines adjacentes. Le photodimre cyclobutane-pyrimidine et le photoproduit 6-4
interfrent avec lappariement normal des bases. Linsertion dune base en face du produit provoque le plus
souvent une transition, de mutations de phase, de dltions et de duplications [83].
Rayonnements ionisants :
Il peut sagir de rayons X, de neutrons ou dlectrons. Es rayonnement induisent la formation de radicaux
libres, ils entranent des ruptures de chane avec soit des recombinaisons, soit des mutations ponctuelles,
survenant lors de la rparation de la cassure. Leffet ltal et le niveau de remaniements provoqus par les
rayons X sont augments en prsence doxygne par suite de la formation de peroxydes. Les dommages
chromosomiques provoqus tant trs importants [88, 89].
V-2-2-2-Agents chimiques :
Il en existe de trs nombreux qui agissent par divers mcanismes.
Analogues de bases :
Certains agents chimiques ont des structures suffisamment voisines de celles des bases azotes de lADN pour
pouvoir tre loccasion incorpors dans la chane nuclotidique en lieu et une place dune telle base. Ces
agents sont appels des analogues de base. Une fois en place ils ont des proprits dappariement diffrentes de
celles des bases normales ce qui causes des mutations [88 ,89].

44
Mutations et Cancer

Uracile halogn en 5(5- bromouracile 5 BU , 5chlorouracile 5 CU , 5 iodouracile 5 IU ) :


Ces analogues de la thymine qui portent un atome dun halogn et non un CH3 en position C-5
sassocient ladnine et plus rarement la guanine (dans ce dernier cas, ils sont sous forme
nolique).leur action aboutit enfin de compte une transition AT- GC (erreur de la rplication) ou
GC - AT (erreur lincorporation) [83, 88, 89].
2-Aminopurine : Cet analogue de ladnine sapparie avec les bases pyrimidiques induisant des
transitions GC AT ou AT- GC. La 2-Aminopurine peut galement sapparier avec la cytosine
lorsquelle est sous forme normale ou ltat imino. Les tudes gntiques ont confirm quelle
provoque essentiellement des transitions [83, 88, 89].

Agents alkylants : Sont des mutagnes qui ne sincorporent pas lADN mais altrent une base en une
forme qui provoque le mauvais appariement. Il sagit de ractifs capables dentraner des mthylations,
thylations ou alkylations suprieures au niveau des bases mais aussi celui des groupements phosphate[83,
88,89].
Lthyl-mthane sulfonate (EMS) : il ajoute un groupe thyle en de nombreuses positions sur les
quatre bases, le pouvoir mutagne provient surtout de laddition sur loxygne en position 6 de la
guanine, qui forme la O-6-alkylguanine. Celle-ci sapparie de manire illgitime avec la thymine, ce qui
donne surtout des transitions GC AT [83].
La nitroguanidine (NG) : elle ajoute un groupe mthyle joue un rle identique que celui de lEMS
[83].
Lhydroxylamine (HA) : est un inducteur spcifique de transitions GC AT. Il est plus que
vraisemblable que la spcificit de lHA soit due ce quelle hydroxyle essentiellement lazote du
groupe amino en C-4 de la cytosine pour produire la N-4-hydroxy-cytosine, qui sapparie comme la
thymine [83].

Agents dsaminants : constituent dautres exemples de mutagnes qui agissent en induisant des
modifications spcifiques de bases.
Acide nitreux (AN : HNO2) : Ce compos instable produit des mutations ponctuelles en particulier des
dsaminations, il dsamine la cytosine en uracile. Le rsidu uracile, sil nest pas remplac, sappariera
ladnine et non la guanine, induisant une transition C-T. lAN dsamine ladnine pour donner de
lhypoxanthine qui sapparie avec la cytosine.
Les ions bisulfite : Sont aussi des agents dsaminants [83, 88, 89].

45
Mutations et Cancer

Agents intercalants : constituent une autre classe de substances qui modifient lADN. Il sagit de produits
qui se placent entre les plateaux de bases de la double hlice ou qui stabilisent les glissements survenus la
suite de cassures. Ce sont des molcules planes, qui imitent une paire de bases et peuvent, par un processus
appel intercalation, se glisser entre les bases empiles de la double hlice dADN. Dans cette position
intercale, lagent peut provoquer laddition ou la dltion dune paire de bases. Ce groupe comprend :
La proflavine.
Lacridine orange.
Une famille de composs appels ICR [83, 88].

V-2-3- Classement des mutations :


V-2-3-1- selon la nature et la localisation :
Les mutations gnomiales : Elles affectent le nombre des chromosomes chez les organismes eucaryotes et
donc la plodie.
Polyplodie : parmi les polyplodes, on distingue les autopolyplodes, constitus de jeux multiples de
chromosomes appartenant tus une seule espce, des allopolyplodes, forms de jeux de chromosomes
provenant despces diffrentes. Les allopolyplodes ne se forment quentre des espces fortement apparentes.
Aneuplodie : Laneuplodie constitue la seconde catgorie importante de mutations chromosomiques
portant sur le nombre chromosomique diffre de celui du sauvage par adjonction ou perte dune partie de
garniture chromosomique. Gnralement le nombre de chromosomes de laneuplodie ne diffre de celui du
type sauvage que par un petit nombre de chromosomes, soit surnumraires soit en moindre nombre par rapport
au gnome de dpart. La nomenclature est base sur le nombre de copies dun chromosome spcifique impliqu
dans le fait daneuplodie [83, 88]. Par exemple, 2n-1 dsigne un monosomique (ce qui signifie un seul
chromosome ) puisquune seule copie dun chromosome donn est prsent au lieu des deus classiquement
reprsentes chez le diplode original. 2n+1 dsigne un trisomique, 2n-2 un nullosomique et n+1 un
disomique [83, 88, 89].

Les mutations gniques : Elles sont rencontres aussi bien chez les organismes procaryotes queucaryotes.
Ce sont des mutations touchant un seul gne (mutation intra gnique), elles peuvent tre plus au moins tendues
et on distingue les mutations ponctuelles et les non ponctuelles.
Substitution : Une paire de bases est remplace par une autre. Si une base purique est remplace par une
autre base purique ou une base pyrimidique est remplace par une autre base pyrimidique, il y a transition,
sinon il y a transversion.
Dltion : une paire de bases est perdue. Il en rsulte une modification de la lecture, qui, cause du
dcalage produit, interprtera des codons diffrents : une telle mutation est dcalante ou frame-shift .

46
Mutations et Cancer

Insertion : une paire de bases est ajoute. Linsertion a les mmes consquences que la dltion sur la
lecture de linformation gntique.
Modification : Une paire de bases est modifie. Les principales modifications sont la formation de
formes tautomres (imino et nol), la dsamination de la cytosine, les dpurinations, la formation de dimres
[88].

Les mutations chromosomiques : Elles sont inter (organismes eucaryotes) ou intra chromosomiques
(organismes eucaryotes et procaryotes). Les mutations inter chromosomiques consistent en des remaniements
entre deux chromosomes et les mutations intra chromosomiques affectent la structure dun chromosome.
Dltion : il sagit de la perte dun segment : lorsque ce segment est court, on parle de microdltion. La
dltion peut tre interne (endochromosomique) ou externe (terminale, exochromosomique). A ltat haplode
ou diplode homozygote (gnes identiques sur les deux chromosomes), la plupart des dltions sont ltales.
Chez un htrozygote (allles diffrents sur les deux chromosomes), les dltions peuvent tre conserves et
peuvent conduire lune expression phnotypique nouvelle par limination de lallle dominant (pseudo
dominance).
Inversion : il sagit du retournement dun segment. Ce retournement peut tre conscutif la formation
dune boucle. Linversion peut rendre un gne inapte la transcription, la lecture ne pouvant se faire dans le
bon sens. Chez un diplode htrozygote, linversion va tendre diminuer les possibilits de recombinaison
gntique dans les segments inverss.
Translocation : La translocation est le passage dun segment dune position une autre sur le mme
chromosome ou sur un autre. Sil y a change de segments entre de chromosomes non homologues, la
translocation est dite rciproque : elle est homozygote si elle touche en mme temps les deux chromosomes
dune paire et htrozygote si elle touche un seul des chromosomes dune paire et un dune autre paire.
Duplication : Il y a rptition dune squence. Il en rsulte une localisation modifie des gnes
dupliqus, ce changement de position peut modifier lexpression du gne [88, 89].

V-2-3-2- Selon le phnotype :


Les mutations morphologiques : Les mutations de cette classe modifient les proprits visibles dun
organisme, comme sa forme, sa couleur ou sa taille.
Les mutations ltales : lallle nouveau se reconnat son effet ltal sur lorganisme. Les allles mutants de
cette classe sont homozygotes.
Les mutations conditionnelles : les allles mutants de cette classe nexpriment leur phnotype que dans
certains conditions appeles restrictives. Ils expriment un phnotype normal dans dautres conditions dites
permissives. Les mutants thermosensibles sont un bon exemple.

47
Mutations et Cancer

V-2-4- Mcanismes biologiques de rparation :


La prvention des erreurs : (Fig. 6)
Certains systmes inactivent le composant potentiellement toxique avant mme quil ait pu interagir avec
lADN. Cest le cas de la superoxyde dismutase, une enzyme dtoxifiante qui catalyse la conversion des
radicaux super-oxyde (produits de laction dagents oxydants sur lADN) en peroxyde dhydrogne.
La catalase, une autre enzyme, convertit ensuite le peroxyde en eau. Un autre systme prventif utilise une
enzyme code par le gne mut T, qui empche lincorporation de
8-oxodG dans lADN en hydrolysant le triphosphate de la 8-oxodG en monophosphate.
La photo ractivation : Les dimres de pyrimidine cyclobutane peuvent tre encore monomriss par des
ADN photolyses (enzymes de photoractivation : EPR) en prsence de la lumire visible. Ces enzymes
possdent des groupements prosthtiques qui absorbent la lumire bleue et transfrent lnergie vers lanneau
cyclobutane qui est ensuite cliv. Elle est lexemple dune inversion directe dune lsion sans erreur [83].
UV

lumire visible
Fixation de lenzyme
De la photo ractivation
sur le dimre.

ADN rpar

Figure 6 : systme de rparation par photoractivation [83, 87, 88].

La rparation par excision : (Fig. 7)


Ce mcanisme ubiquiste, essentiellement sans erreur, opre une large varit de lsions. Il en existe deux
formes, la rparation par excision du nuclotide (NER) et la rparation par excision de base (BER). Dans
la NER, une endonuclase clive lADN en un nombre prcis de bases sur chaque ct de la lsion et un
oligonuclotide contenant la lsion est supprim formant une brche la place. Par exemple, chez E.coli les
endonuclases Uvr A, B, C enlvent les dimres pyrimidiques et dautres lsions importantes [87].

48
Mutations et Cancer

Dans la BER, les bases modifies sont relativement reconnues par des ADN glucosylases relativement
spcifiques qui clivent la liaison N-glycosylique entre la base altre et le sucre, en produisant un site
apurinique ou apyrimidique (AP). Une endonuclase AP clive ensuite lADN ce site et une brche peut tre
cre par lactivit exonuclasique. La brche est gnralement plus considrable dans la NER et peut tre petite
quun seul nuclotide dans la BER. Dans E.coli La brche est remplie par lADN polymrase I et la liaison
phosphodiester finale forme par lADN ligase. Chez les eucaryotes, la rparation par excision est associe la
transcription de sorte que les rgions (gntiquement actives) transcrites de lADN soient rpares plus
rapidement que lADN non transcrit ; ce qui limite la production de gnes dfectueux [87].

Figure 6 : Systme de rparation par excision. (..)

Figure 7: Systme de rparation par excision [83, 88].

49
Mutations et Cancer

La rparation par recombinaison (post rplicative) : (Fig. 8)


La rplication de lADN est bloque par les photodimres ou par la prsence dautres types de lsions. Elle
reprend au-del du site endommag, laissant une brche monocatnaire dans lADN. Lors de la rparation post
rplicative, cette brche est comble par lADN prlev dans le brin parental homologue suite une
recombinaison mdie par la protine RecA. Bien que la recombinaison ne rpare pas la lsion, elle permet aux
deux molcules neuves dADN dtre rpares par la rparation par excision [86, 87].

Figure 8: Systme de rparation par recombinaison [83, 87].

50
Mutations et Cancer

La rparation SOS : (Fig. 9)


Il existe un grand nombre de gnes et doprons dans la cellule qui sont rguls par la protine RecA et un
inhibiteur de la transcription, le LexA. Ceux-ci sont impliqus dans la rparation de lADN et sont appels
systmes de rparation SOS. Il sagit dun systme de rparation reconnaissant les erreurs, qui interagit avec
lADN polymrase et lui permet de continuer la rplication de lADN en aval dun dimre de pyrimidine. Cette
capacit de lecture dans le sens 3` 5`de lenzyme est inhibe afin que les bases puissent tre insrs de faon
alatoire en regard du dimre sans complmentarit des bases. La rparation SOS est induite par la protine
RecA active par une modification de la conformation de lADN secondaire la lsion. La protine RecA
active provoque le clivage protolytique de la protine LexA qui ne pourra pas tre inhibiteur de la
transcription. Les gnes dans le systme peuvent tre en suite exprims aussi longtemps que la lsion de lADN
est prsente dans la cellule. Une fois la lsion est rpare, la protine RecA nest plus active et ninduit pas la
protolyse de la LexA ; ainsi la protine LexA saccumule dans la cellule et inhibe la transcription des gnes
codant pour le systme de rparation SOS [83, 86, 87, 88, 89, 90, 91].

Figure 9 : Systme de rparation SOS [91].

51
Mutations et Cancer

Alkyltransfrase (la raction par adaptation) : (Fig. 10)


un autre exemple dinversion directe sans erreur. Cette rponse est dclanche E.coli par de faibles taux
dagents alkylants et augmente la protection contre les effets ltaux et mutagniques de doses ultrieurs leves.
La protection mutagnique est assure aux moyens dune alkyltransfrase qui enlve le groupement alkyle de
lO-6-alkyl-guanine (qui peut former une paire de bases avec la thymine). Curieusement, alkyle est transfr
vers la protine et linactive. Ainsi, chaque alkyle transfrase ne peut tre utilise uune seule fois. Cette
protine est galement prsente dans les cellules des mammifres [86, 87, 88, 92].

Figure 10 : Rparation par adaptation [92].

Rparation de msappariement :
Cest une forme spcialise de la rparation par excision qui traite les mauvaises paires de bases produites
durant la rplication et celles qui ont chapp la correction. Dans le msappariement de rplication, la fausse
base se trouve dans le brin rsultant. Ce systme doit donc pouvoir distinguer les brins parents des brins
rsultants aprs le passage de la fourche de rplication, pour sassurer que la base msapparie est supprime
uniquement du brin rsultant. Chez les procaryotes, certains rsidus de ladnine sont normalement mthyls
dans la squence GATC sur les deux brins. La mthylation des brins rsultants dure plusieurs minutes aprs la
rplication. Ainsi, lADN nouvellement rpliqu est hmi-mthyl. Les brins parents sont mthyls alors que
les brins rsultants ne le sont pas, donc ils peuvent tre aisment distingus. Le mcanisme discriminatoire chez
les eucaryotes nest pas encore connu, cependant il est vident que la rparation du msappariement est
importante : le cancer hrditaire sans polypes du clon est caus par une perte dune de rparation
dappariement [87].

52
Mutations et Cancer

V-3- Tests de dtection du pouvoir cancrigne :


Il existe de nombreux tests de dtection du pouvoir cancrigne. Ils sont laborieux effectuer, lents et chers,
utilisant gnralement des petits mammifres de laboratoire. Il en existe cependant de plus rapides qui utilisent
des microbes (bactries et champignons) et testent le pouvoir mutagne plutt que le pouvoir carcinogne [83].
Les plus employs sont :
Le test dAmes ou mutatest : (Fig. 11)
Le test dAmes est un test se mutagense proprement dit. Il consiste examiner si une substance chimique ou
agent physique est capable dinduire des mutations spcifiques chez diffrentes souches de Salmonella
typhimurium. Les souches utilises dans le test sont des souches porteuses dune mutation dans des gnes
gouvernant la synthse de lacide amin histidine. Cette mutation His- rend les souches incapables de pousser
sur un milieu sans histidine. Avec une frquence trs faible, ces mutations de His- reversent spontanment vers
His+ et donc les cellules retrouvent leur capacit pousser sur un milieu dpourvu dhistidine. Cette frquence
de rversion peut augmenter en exposant les bactries His- des agents mutagnes. Ainsi le test dAmes permet
de quantifier linduction de ces mutations reverses His+ [93, 94].

Figure 11 : principe du test dAmes [83].

53
Mutations et Cancer

Le SOS chromotest : (Fig. 12)


Mis au point par Quillardet et Hoffnung (1982) est bas sur lutilisation de la bactrie intestinal Escherichia
coli PQ37qui sous laction dagents gnotoxiques, c'est--dire dagents capables dendommager lADN
cellulaire va mettre en place un systme de fonctions rparatrices appels fonctions SOS qui vont viter le
blocage irrversible de la synthse dADN. Ce systme code pour une enzyme -galactosidase, avec laide dun
substrat qui peut tre converti en compos color par la -gal, le taux du dommage provoqu lADN peut tre
mesur par lintensit de lactivit enzymatique. Ce test peut tre utilis pour la dtection de nombreux
chantillons aqueux. Cest pourquoi, ce test est particulirement adapt pour tester les chantillons pris de
lenvironnement [95].

Figure 12 : principe du SOS chromotest [96, 97].

54
Mutations et Cancer

Dautres tests :
Le Comet Assay : permet de dtecter les cassures dans brin dADN. Dans ce test, les cassures de brin
sont mesures dans des cellules incluses au sein dun gel dagar. Aprs lyse des cellules, la migration
des brins dADN (placs dans un champ lectrique) vers lanode est dautant plus importante que le
nombre de cassures est lev.
Le test de postmarquage au 32
P : permet de dtecter des adduits lADN est lheure actuelle la
technique la plus sensible pour dtecter une grande diversit de composs modifiant la structure de
lADN. Les principales tapes sont : hydrolyse enzymatique de lADN, enrichissement en nuclotides
32
portant des adduits, marquage enzymatique des nuclotides au P, sparation des adduits marqus au
32
P par chromatographie en couche mince bi-dimentionnelle et autoradiographie.
Test miconucleus : test in vivo, montre la formation de micronoyaux dans les rythrocytes et utilis chez
les amphibiens, les souris et mmes dans les lymphocytes humains [73].

55
Matriel et Mthodes

L tude bibliographique qui prcde a fort bien soulign la grande variabilit des caractres

physicochimiques de leau brute au cours de lanne et ainsi les sous produits de chloration de leau.
Notre contribution a donc t :
1. le suivi des paramtres physicochimiques de leau brute et de leau traite pendant les quatre saisons.
2. dosage des organohalogns totaux.
3. Dosage du chloroforme et du bromoforme.
4. le suivi du chlore rsiduel lors de la distribution.
5. Enfin, ltude des effets mutagnes engendrs par les chantillons deau prlevs aux diffrents points de
prlvement.

56
Matriel et Mthodes

I-1-Mthodologie :
I-1-1-Description de la station de traitement : (Tab. XIV) et (Fig. 13)
La station de traitement traite :
- les eaux de surface qui proviennent du barrage sur loued Bou-Namoussa
-Les eaux de forages du pont Bouchet et Hnichet et les eaux des salines.
Les caractristiques des eaux traites sont prsentes dans le tableau suivant :
Tableau XIV: PRINCIPALES DONNEES CHIMIQUES DES EAUX
DES RESSOURCES GEREES PAR LE. P. E. A [98].

Eaux superficielles Eaux souterraines alimentant la wilaya de Annaba


Elments Unit Barrage Cheffia Lac Oubeira Forage Forage Forage Puits Forage
Eau Eau Eau Eau Bouteldja Salines P.Bouchet Sidi Amar Ain Berda
brute Traite brute Traite
Temprature C 20,7 22 23 26 21,8 28 18,8 24 17,9
Turbidit NTU 27 0,4 88 2,5 5 2 8,32 1,6 0,9
pH 8,4 7,6 8,75 7,25 6,53 7,16 7,49 8,33 8,20
T.H F 18 16 22 22 11 22 70 250 39
T.AC. F 11 11 8 9 5 55 32 / /
Chlorures mg/l 34 34 220 554 170 560 882 1700 565
Salinit.Tot. 227 232 635 658 241 1300 2000 190 430
Oxydabilit
au mg de
permanganate
KMnO4 4,5 1,5 / / / / / / /
de potassium
Rsidus 0,1 0,05 / / / / / / /
Nitrates mg/l 5,4 5,2 / / 5,96 3,0 14,90 / /
Phosphore mg/l 0,2 0,05 / / 10,23 0,2 15,80 / /

Les traitements effectus ces eaux sont les suivants :


-Pr chloration.
-coagulation floculation.
-dcantation.
-filtration.
-strilisation.

57
Matriel et Mthodes

Ces diffrents traitements sont reprsents dans le schma suivant :

Arrive
barrage
1000 m3
Eau traite
EAU
*AOX POSTE
Traite
*mutagnese PRECHLORATION 3
3600 m

Eau brute
POSTE CHLORE *AOX
strilisation
Strilisation *Mutagnse

Dbimtre

FILTRATION RAPIDE ultra_sons

Eau dcante DECANTATION


*AOX
Sulfate
Coagulation+floculation
+

Adjuvant

TRAITEMENT
Traitement d brute
de leau EAU
BRUTE

Figure 13 : Schma du traitement de leau brute [98].

type danalyse effectu au prlvement.


* lajout de lacide ascorbique ou thiosulfate de sodium.

58
Matriel et Mthodes

-Dsinfection au Station centrale Station santans


chlore liquide -complment de javellisation. -complment de javellisation.
-injection de 3 5 mg/l -injection 0,5mg/l. -injection 0,2mg/l

D:CR=1,2 A:CR=0,1 D:CR=1,2 A:CR=0,8

Rservoir
1000m3 O930 R R Rservoir

Entre SC 1250m3 Sortie SC Entre St D : CR=1,2


* AOX * AOX * AOX
Sortie station de CR CR CR
traitement
* AOX
* Mutagense Sortie St
CR * AOX
Mutagense
CR

Consommateur
0,2 0,5mg/l de chlore

A : arrive.
D : dpart.
CR : chlore rsiduel (mg/l).
type danalyse effectu au prlvement.
* lajout de lacide ascorbique ou thiosulfate de sodium.

Figure 14 : Schma reprsentatif des diffrents points de prlvement


et le type danalyse, sur le rseau de distribution.
59
Matriel et Mthodes

I-1-2- Echantillons et frquence dchantillonnages : (Fig.14)


Nous avons procd quatre chantillonnages pendant lanne soit un par saison, les mois cibls ont t : Avril,
Juin, Septembre et Janvier.

I-1-3- Choix des paramtres :


Nous avons commenc par tudier la variation des paramtres physicochimiques de leau brute qui peuvent
avoir une influence sur la qualit de leau au cours des saisons et ceux qui sont en relation directe avec la
formation des organohalogns, prouves nfaste la sant humaine.
Pour leau brute les paramtres retenus ont t : le pH(1), la temprature(1), la turbidit(2), la
couleur(3),lalcalinit(4) , la duret ISO (5) 6059-1984 (F), la matire organique ISO 8467 :1993 (F), lammonium
ISO 7150/1-1984 (F) et la demande en chlore ISO 7393-3:1990 (F).
(1)
: lappareil Hanna 210.
(2)
: lappareil Ach 2100 N.
(3)
: spectrophotomtre Ach 4000.
(4)
: [99].
(5)
: [100].
Pour leau traite, nous avons analys les mmes paramtres cot de lanalyse du chlore rsiduel tout au long
de la chane de distribution aux diffrents points dajout de chlore situs au niveau du rseau ISO 7393/2-
1985(F). Ces analyses sont effectues au laboratoire central de lAlgrienne Des Eaux dANNABA.

I-2- La recherche des organohalogns totaux (A.O.X) :


Les A.O.X sont des paramtres utiliss des fins rglementaires pour leau. Ils reprsentent la totalit des
chlorures et des bromures organiquement lis, adsorbables sur charbon actif. Les composs halogns volatils
prsents dans les matires en suspension sont galement doss.21
Le dosage des A.O.X de leau brute et de leau traite aux diffrents points de prlvement est effectu selon la
norme internationale ISO 9562 : 1989 (F), utilisant lappareil coulomat702 cl au niveau du laboratoire de
lAlgrienne Des Eaux (ADE) dALGER.

I-3- Le dosage du CHCl3 et CHBr3 :


Principe :
Les composs organohalogns volatils ont un fiable coefficient de partage dans leau ; ils sont donc librs trs
rapidement sous laction de la chaleur, de lagitation ou du balayage par un gaz. Les chantillons sont prlevs
sur terrain, 20 ml deau sont prlevs et introduits dans un flacon de type pnicilline de 30 ml ferm
hermtiquement par un septum revtu intrieurement de tflon (polytraflluorothylne) [99].

60
Matriel et Mthodes

Mode opratoire :
Le dosage de ces deux sous produits de chloration volatils (CHCl3 et CHBr3) seffectue par lajout dun solvant
organique trs polaire qui est lther pour permettre leur passage de la phase liquide (leau prleve) la phase
organique (lther) sous leffet de lagitation [99].
Lidentification se fait laide de la chromatographie en phase gaz (CPG) avec dtecteur ionisation de flamme
(FID) utilisant lappareil de marque SHIMADZU GAS CHROMATOGRAPH GC-17A en utilisant la colonne
capillaire FS-SE 30-CB de 25mtre de longueur et de 0,25mm de diamtre par comparaison des temps de
rtention des standards, les rfrences CHCl3 et CHBr3, dans les conditions exprimentales suivantes :
Four : 40C pendant 3 minutes puis chauffage raison de 10C/min.
Temprature de linjecteur, 220-350.
Temprature du dtecteur, 250-340.
Le dosage a t ralis au sein du laboratoire de chimie organique lUniversit BADJI MOKHTAR,
ANNABA.

I-4- Dtermination de lactivit mutagne :


Lactivit mutagne des chantillons deau chlors rassembls partir des points cibls du rseau de
distribution deau potable a t tudie par deux tests biologiques :
Le test dAmes et le SOS chromotest. Les bactries utilises dans ces tests sont envoyes par Mr Philippe
Quillardet de linstitut Pasteur (Paris). Nous tenons le remercier vivement davoir rpondu notre demande.

I-4-1- Le test dAmes :


Le test dAmes consiste prparer une srie de mlanges dune quantit constante dune de chacune des souches
choisies pour le test et des quantits croissantes du produit tester ou dchantillons prlevs sur sites dons les
quelles de traitement supplmentaires comme dans le cas de la prsente tude et les taler sur des boites de
ptri contenant un milieu minimal. Ce milieu autorise la croissance des mutants His+uniquement. Afin
daugmenter la sensibilit du test, une trace dhistidine est ajoute qui permet la croissance de 2 3 gnrations
de His- et amplifie lapparition des mutants. Aprs incubation pendant 48h, le dnombrement des mutants His+
est effectu. Ceux-ci apparaissent sus forme de colonies sur un tapis cellulaire translucide (bruit de fond) [93,
94].

I-4-1-1- Matriel biologique : (Tab. XV)


Il sagit des souches salmonella typhimurium TA98, TA100, TA1535, TA1537, TA1538.chacune des souches
contient un type diffrant de mutation dans lopron Histidine.
En plus de la mutation His les souches standard du test contiennent dautres mutations qui augmente
normment leur habilit dtecter des mutagnes [93, 94].

61
Matriel et Mthodes

Mutation hisD 3052 : mutation dans TA1538 et TA98, ces bactries sont dficientes lenzyme
histidinol dshydrognase. La TA1538 et sa drive r-factor TA98, dtectent des mutagnes de type
-CGCGCGCG -
frameshift . Cette mutation la squence , est rverte par les frameshift
-GCGCGCGC-
mutagnes tel que 2-nitrosofluorne et le daunomycin ce qui conduit la restauration du cadre de lecture
correct pour la synthse de lhistidine.
Mutation hisG 46 : mutation prsente dans TA100 et TA1535, ces bactries sont dficientes la
premire enzyme qui entre dans la synthse de lhistidine. Elle est dtermine par la squence -GGG-
- CCC-

La TA1535 et sa drive r-factor TA100, dtectent les mutagnes qui causent des substituant de pairs de
bases.
Mutation hisC 3076 : Cest une mutation frameshift dans TA1537, elle nest pas squence mais il est
connu quelle contient une cytosine de plus dans une srie dau moins 4 cytosines.
Mutation rfa : cette mutation cause la perte partielle des polysaccharides la surface de la barrire
cellulaire de la bactrie ce qui augmente sa permabilit aux grandes molcules qui sont incapables de
pntrer dans la cellule normale.
Mutation uvrB : cest une dltion du gne codant pour le systme de rparation excision
resynthse , confrant une augmentation de la sensibilit la dtection des mutagnes. Pour des
raisons techniques la dltion du gne uvrB stend jusquau gne bio et par consquent, la
bactrie est aussi auxotrophe la biotine pour crotre.
Plasmide pKM 101 : Ce plasmide porte le gne de rsistance lampicilline (R Factor), il est prsent
dans les souches TA98 et TA100. ces souches portant le facteur de rsistance se rvrtent par des
mutagnes qui sont faiblement dtects par les autres souches. pKM 101qui contient deux gnes
amplifiant le processus SOS de rparation responsable de la mutagense induite [93].
Tableau XV: Diffrents mutations des souches utilises [93, 101].

mutation Histidine
LPS Rparation R-factor
hisC 3076 hisD 3052 hisG 46

TA1537 TA1538 TA1535 rfa () uvrB -R


[TA98] [TA100] rfa () uvrB +R

*Toutes les souches drivent de la souche Salmonella typhimurium LT2.


*[ ] les bactries entre parenthses sont celles les plus utilises dans les tests de mutagnse.
*La dltion () uvrB inclue aussi les gnes de la nitrate rductase et de la biotine.
*LPS : lipopolysaccharides.

62
Matriel et Mthodes

I-4-1-2- Confirmation des gnotypes :


Les gnotypes des souches tests doivent tre confirm :
1. Immdiatement aprs les avoir reu.
2. Quand un lot gel ou lyophilis est destin lutilisation.
3. Quand le nombre de rvertants spontans par boite sort de lintervalle indiqu.
4. Quand il y a une perte de la sensibilit vis--vis les mutagnes standards.
5. La confirmation des gnotypes des souches tests est incluse dans chaque test de mutagense [93].

Activation des souches tests :


La prculture de nuit :
A partir des souches conserves dans une glose de conservation, on cultive 20l dans 5ml de bouillon nutritif.
Lincubation se fait 37 avec agitation dans un bain mari (Salvis AG, CH-6015, type SBK 25D) pendant 16
heures. A cot des souches tests on utilise un tmoin qui est la souche salmonella typhimurium sauvage dans les
mmes conditions.

Le r isolement des souches tests :


A partir de la culture de nuit des souches et avec une anse de platine faire des stries dans des boites contenant du
glucose minimal agar enrichie dhistidine et de biotine, pour les souches rsistantes lampicilline lagar doit
contenir de lampicilline une concentration de 25g/ml, incuber 37pendant 48h.les boites sont ensuite
places dan un rfrigrateur et servirons comme source de bactries pour des tests ultrieurs. Cette conservation
dura jusqu 2 mois.

Le stockage des souches :


Le stockage se fait dans des Eppendorf de 1,2ml.pour1ml de la culture est mlang 90l de DMSO, la
conservation se fait -20. Le mlange est renouveler chaque 6mois.

Vrification des caractres gntiques :


o La culture :
Le but de cette culture est darriver la phase exponentielle de croissance cest dire 2.109 et qui correspond
une DO= 0,4 une longueur donde gale 650nm.
A partir de la culture de nuit on prlve 20l quand dilue dans 5mlde bouillon nutritif. On les incube nouveau
37 pendant 2 heures avec agitation.
Les bactries sont couvrit de papier Aluminium pour les protger de la lumire [93].

63
Matriel et Mthodes

1-Rclamation de lHistidine :
La mutation his- rend les bactries auxotrophes cet acide amin dans un milieu slectif contient
obligatoirement la biotine.
Avec un couvillon ou une anse de platine faire un seul strie de chaque souche sur
1. des boites de contrle contenant uniquement 100l dune solution (0,5mM) strile de biotine par boite
applique la surface de la glose minimal agar, avec un rteau.
2. des boites his / bio.
Lincubation se fait 37pendant 24h.
2-La sensibilit aux UV :
Le but de ce test est de vrifier lexistence de la mutation uvrB.
Les souches testes et la bactrie sauvage sont dposes en stries sur des boites de glose nutritive.
Le moiti de la boite est couvrit par une plaque en verre ensuite irradier par une lampe UV une distance de
30cm. Lincubation dura 24h 37.
Pendant 8secondes:TA98R et TA100R.
Pendant 6secondes:TA1535, TA1537 et TA1538.
3-La rsistance lampicilline et la sensibilit au cristal violet :
Il faut sassurer de la rsistance lampicilline pour vrifier la prsence du plasmide pKM101 chez la TA98 et
TA100 qui est instable. La sensibilit au cristal violet est le rsultat de la mutation rfa.
Ces deux caractristiques sont testes simultanment. On prpare 3disqus de papier Wattman, chaque disque est
dpos sur boite de glose nutritive imbib de 10l dune des solutions suivantes :
Solution 1mg/ml de cristal violet.
Solution 10 mg/ml dampicilline.
Leau distille strile est utilise comme tmoin.

I-4-1-3- Test de mutagense :


Mthode standard avec pr incubation :
Description :
Certains mutagnes ne sont pas dtects par la mthode standard (incorporation en boite) qui doivent tre tests
en utilisant une modification du test standard dcrite pour la premire fois par Yahagi et al.23lessai par
princubation a t utilis pour dtecter la mutagnict de 10 carcinognes, dautres travaux ont aussi dmontr
la mutagnict de produits biologiques et des sries de composs volatils en utilisant cette technique.
Lessai en princubation ncessite lincubation du compos tester avec la souche test pendant 20 minutes 37,
lagar molle est ajoute au mlange puis verser sur le milieu solide (glucose minimal agar) les boites sont
incubes 37 pendant 48h, les rvertants His+sont dnombrs [93].

64
Matriel et Mthodes

Procdure :
Dans des tubes en verre de 20ml, 100l de la culture de nuit mis en contact avec 100l de lchantillon a test
placs en incubation (37,20minutes) avec agitation dans le bain mari. Ensuite 2,5ml de Top agar (glose
molle) sont ajouts au mlange puis verser sur le milieu minimum, laisser se solidifier quelques minutes et enfin
mettre en incubation 48h 37 [93].

I-4-2- Le SOS chromo test :


Dans notre tude on utilis :
*Le test standard, procdure quantitative, bas sur la mesure de lactivit enzymatique de deux enzymes la
-gal et de la phosphatase alcaline dans un milieu liquide.
*Le spot test, procdure qualitative dont laquelle le produit tester est pos directement la surface de la
glose donnant une coloration bleue si le produit est mutagne.
Ce test est utilis sans activation mtabolique [97].
I-4-2-1- Matriel biologique : (Tab.XVI)
La mesure de linduction du gne sfiA a t rendue possible grce llaboration dune souche E.coli PQ37 dans
laquelle le gne lacZ, qui provoque la synthse de lenzyme -gal a t plac par fusion gntique sous le
contrle de lopron sfiA.
Ainsi lorsque les fonctions SOS sont induites, linduction de lopron sfiA se traduit par la production de la
-gal dont on peut dterminer lactivit enzymatique par dosage colorimtrique [97].
Cette souche est drive de la souche E.coli GC4436, prsente galement les caractristiques gntiques
suivantes :
Fusion sfiA :: lacZ
Obtenu par dltion de la rgion normale lac donc lactivit de la -gal est strictement dpendante lexpression
du gne sfiA.
Mutation uvrA :
Rend la souche dficiente au systme de rparation par excision.
Mutation rfa :
Rend la bactrie dficiente aux lipopolysaccharides et permet une bonne diffusion certains produits chimiques
la cellule.
Mutation galE :
Permet la slection des mutants rfa avec le phage C21.
Mutation PHOC :
Responsable de lexpression constitutive de a phosphatase alcaline.
Plasmide pKM 101 : Ce plasmide porte le gne de rsistance lampicilline (R Factor) [97].

65
Matriel et Mthodes

Tableau XVI: Marqueurs gntiques de la PQ37 [97].

Souche Marqueurs critiques Autres marqueurs

GC4436 sfiA ::Mud(Ap lac) cts F-,thr, leu, his, pyrD, thi,
lacU169 trp::Muc+,srl300::Tn10
malB, uvrB

PQ37 sfiA ::Mud(Ap lac) cts F-,thr, leu, his, pyrD, thi,
lacU169 trp::Muc+,srl300::Tn10
mal+B, uvrA, galE, galY, PhoC, rfa. rpoB.

I-4-2-2- Confirmation des gnotypes:

Activation de la souche test:

Pculture de nuit :
A partir de souche conserve dans la glose de conservation, on cultive 50l dans 5ml de milieu La.
Lincubation se fait 37 pendant une nuit avec agitation dans le bain mari.
En parallle avec la souche PQ37, une souche tmoin E.coli sauvage est maintenue dans les mmes conditions
que souche mute mais dans un milieu L.
Le r isolement des souches tests :
A partir de la culture de nuit des souches PQ37 et E.coli sauvage, faire des stries avec une anse de platine dans
des boites de La solide. Les boites sont ensuite incubes 37 pendant 24h et conserves au froid et servirons
comme source de bactries pour des tests ultrieurs. Cette conservation dura jusqu 2 mois.
Le stockage des souches :
Le stockage se fait dans des Eppendorf de 1,2ml. Pour750l de la culture est mlang 750l de glycrol 90%,
la conservation se fait -20. Le mlange est renouveler chaque 6mois.
Vrification des caractres gntiques :
o La culture :
Le but de cette culture est darriver la phase exponentielle de croissance cest dire 2.108 et qui correspond
une DO= 0,4 une longueur donde gale 600nm.
A partir de la culture de nuit on prlve 150l quand dilue dans 5mlde milieu L. On les incube nouveau 37
pendant 2 heures avec agitation. Les bactries sont couvrit de papier Aluminium pour les protger de la lumire
[97].

66
Matriel et Mthodes

1- La rsistance lampicilline et la sensibilit au cristal violet :


Il faut sassurer de la rsistance lampicilline pour vrifier la prsence du plasmide pKM101 chez la PQ37 qui
est instable. La sensibilit au cristal violet est le rsultat de la mutation rfa.
Ces deux caractristiques sont testes simultanment. On prpare 3disqus de papier Wattman, chaque disque est
dpos sur boite de glose nutritive imbib de 10l dune des solutions suivantes :
Solution 1mg/ml de cristal violet.
Solution 10 mg/ml dampicilline.
Leau distille strile est utilise comme tmoin.
On teste la souche sauvage E.coli en mme titre que la souche mute.

2-Mutation rfa :
Cette mutation peut tre vrifi en cultivant les souches PQ37 et E.coli sauvage dans le milieu Mac Conkey
solide qui contient les sels de deoxycholate.

3- La sensibilit aux UV :
Le but de ce test est de vrifier lexistence de la mutation uvrA.
La souche PQ37 et la bactrie sauvage sont dposes en stries parallles sur des boites de milieu La solide.
Le moiti de la boite est couvrit par une plaque en verre ensuite irradier par une lampe UV une distance de
30cm pendant 8secondes.

I-4-2-3- Test de mutagense:

I-4-2-3-1- SOS spot test:


Description
Procdure qualitative dont laquelle le produit tester est pos directement la surface de la glose donnant une
coloration bleue si le produit est mutagne.
La production et linduction de la -gal par la souche test peut tre mise en vidence sur des boites contenant un
substrat indicateur (Xgal=5-bromo-4-chloro-3-indolyl--D galactosidase) qui donne une couleur lorsquil est
hydrolys par la -gal. La simplicit de lSOS chromo test sur des boites (SOS spot test) permet de tester
plusieurs chantillons la fois. Ce test apporte un avantage additionnel certains agents gnotoxiques. Dans
certains cas, lactivation procde un meilleur succs si les enzymes sont immobiliss sur lagar mieux quen
milieu liquide [97].

67
Matriel et Mthodes

Procdure :
*On prlve 100l de la culture de nuit dilue dans 5ml de milieu La liquide, la culture est ensuite incube
37pendant 2h dans un bain mari agitateur pour arriver une concentration de 2.108bactrie/ml.
*Des fractions de 100l de cette culture sont distribues dans des tubes essai strile de 20ml.
*2,5ml de glose molle 45-50 sont additionns dans les tubes.
*Le mlange (culture bactrienne+agar molle) est agit et vers immdiatement sur milieu STA solide (annexe).
*On ajoute lchantillon tester sur la glose molle dj solidifie.
*Incubation 37 pendant 24h.

I-4-2-3-2- Mthode standard du SOS chromo test :


Description
Procdure quantitative dont laquelle le produit suspect dactivit mutagne est test en milieu liquide, cette
activit est dtermine par dosage enzymatique de deux enzymes la -gal qui est induite par laction de lagent
mutagne sur lADN, la phosphatase alcaline qui constitue un tmoin puisquelle est indpendante du systme
SOS est donc non inductible par les agents gnotoxiques. Ce tmoin sert contrler la toxicit de la substance
tudie vis vis de la synthse protique.
Procdure :
*On prlve 150l de la culture de nuit dilue dans 5ml de milieu L liquide, la culture est ensuite incube
37pendant 2h dans un bain mari agitateur pour arriver une concentration de 2.108bactrie/ml.
*1 ml de cette culture est dilu dans 9 ml de milieu L.
*Des fractions de 0,6ml sont distribues dans des sries des tubes bouchonns de 15ml contenant 20l du
compos tester.
*Le mlange est incub avec agitation pendant 2h 37.
*Aprs incubation des fractions de 0,3ml sont retires de chaque tube dans deux sries de tubes.
Srie X : -galactosidase
*2,7ml du tampon B sont ajouts chaque tube de la srie X.
*ces tubes sont incubs 37 pendant 510minutes pour lquilibration de la temprature.
*Lajout de 0,6ml dune solution dONPG (4mg/ml) pour le dveloppement de la couleur.
*Aprs un temps de 10 90minutes du dveloppement de la couleur le test est achev par lajout de 2ml de
Na2CO3 (1M).
*Labsorbance est mesure =420nm en face dun blanc colorimtrique (milieu L) [97].

68
Matriel et Mthodes

Srie Y : Phosphatase alcaline


*2,7ml du tampon P sont ajouts chaque tube de la srie Y.
*ces tubes sont incubs 37 pendant 510minutes pour lquilibration de la temprature.
*Lajout de 0,6ml dune solution de PNPP (4mg/ml) pour le dveloppement de la couleur.
*Aprs un temps de 10 90minutes du dveloppement de la couleur le test est achev par lajout de 1ml de HCl
(0,25M).
*Aprs 5minutes, on ajoute 1ml de Tris (2M).
*Labsorbance est mesure =420nm en face dun blanc colorimtrique (milieu L).
Expression des rsultats :
Lactivit de la -galactosidase permet dvaluer lintensit de la rponse SOS, et lactivit de la phosphatase
alcaline est proportionnelle au nombre de bactries prsentes.
-Lunit denzyme est calcul selon lquation :

1000xA420
Unit denzyme =
T
O :
A420 : La densit optique 420nmde lchantillon.
T : est le temps dincubation en prsence du substrat (ONPG ou PNPP) en minutes (1090 minutes).
-Linduction de -gal par lchantillon test la concentration (c) est obtenue en calculant le rapport R(c) de
lactivit -galactosidase sur lactivit de la phosphatase alcaline.

-gal
R(c)=
PAL

-On en dduit le coefficient dinduction SOS, I pour la concentration (c) par le rapport :

R(c)
I(c)=
R (0)
O :
R (0) : reprsente linduction de -gal du tmoin ngatif en absence de compos.
-Un produit ne sera considr comme tant gnotoxique que :
Si le coefficient dinduction I est suprieur 2 et dans la mesure o cette augmentation provient
seulement dun accroissement significatif de lactivit -galactosidase et non dune inhibition dactivit
de la PAL.
Sil existe une relation dose effet [97].
69
Rsultats et discussion

Les analyses physicochimiques :

*Le tableau suivant indique les diffrences saisonnires des paramtres physicochimiques entre leau brute et
leau traite, obtenues par application du test t de Student pour donnes associes par paires .

Tableau XVII: Valeurs P du test t de Student, IC = 95%

Printemps t Automne Hiver


pH 0.011* 0.007* * 0.045* 0.014*
Temprature 0.963NS 0.285 NS 0.731 NS 0.451 NS
Turbidit 0.277 NS 0.013* 0.010* * 0.088 NS
Matire organique 0.027* 0.326 NS 0.109 NS 0.141 NS
Couleur 0.111 NS 0.076 NS 0.011* 0.283 NS
Alcalinit 0.809 NS 0.500 NS 0.668 NS 0.054 NS
Duret 0.989 NS 0.515 NS 0.679 NS 0.724 NS
Conductivit 0.535 NS 0.139 NS 0.364 NS 0.057 NS
Ammonium _ _ _ _
Demande en chlore / / / /

_ : La plupart des donnes sont infrieurs la gamme (< 0.06), non valable ltude statistique.
/ : Donnes insuffisantes ltude statistique.
P>0.05, il nexiste pas de diffrences statistiques.
P0.05 *, il existe des diffrences significatives.
P0.01**, il existe des diffrences hautement significatives.
P0.001***, il existe des diffrences trs hautement significatives.
Les valeurs de P obtenues IC=95% pour chaque paramtre pendant les quatre saisons exposent la variabilit
de ces paramtres entre leau brute et leau traite c'est--dire de leau destine la consommation avant et
aprs traitement. On observe donc leffet du traitement sur la qualit de leau.
Les rsultats montrent que :
Pour le pH, la diffrence entre leau brute et traite est significative en printemps en hiver et en automne
et trs hautement significative en t.
Pour la matire organique, leffet du traitement est significatif en t et trs hautement significatif en
automne.
Pour la turbidit, leffet du traitement est significatif en t et trs hautement significatif en automne.
La diffrence dans le paramtre couleur est significative en automne.

Rsultats et discussion
Le traitement de leau destine la consommation naboutit pas un changement statistiquement
significatif dans les autres paramtres physicochimiques entre leau brute et leau traite au cours de
lanne.

Comme dans le tableau prcdent, le tableau ci-dessous expose les rsultats de lanalyse de variance deux
critres de classification (eaux, saisons).

Tableau XVIII: test Anova 2 facteurs contrls, valeurs de P IC = 95%.

Saisons Eaux Interaction


(eaux saisons)
pH 0.836NS 0.000*** 0.009**
Temprature 0.000*** 0.858 NS 0.621NS
Turbidit 0.004** 0.001*** 0.003**
Matire organique 0.728 NS 0.001*** 0.716 NS
Couleur 0.086 NS 0.013* 0.104 NS
Alcalinit 0.431 NS 0.579 NS 0524 NS
Duret 0.409 NS 0.646 NS 0.761 NS
Conductivit 0.192 NS 0.474 NS 0.330 NS
Ammonium _ _ _
Demande en chlore / / /

_ : La plupart des donnes sont infrieurs la gamme (< 0.06), non valable ltude statistique.
/ : Donnes insuffisantes ltude statistique.
P>0.05, il nexiste pas de diffrences statistiques.
P0.05 *, il existe des diffrences significatives.
P0.01**, il existe des diffrences hautement significatives.
P0.001***, il existe des diffrences trs hautement significatives.

-Les rsultats de lanalyse de variance permettent de montrer linfluence des saisons sur le changement de la
qualit de leau. Linterprtation de ces rsultats indique que le changement saisonnier une influence trs
hautement significative sur le paramtre temprature qui change entre la saison chaude et la saison froide, cette
influence est hautement significative sur la variation de la turbidit qui change en fonction de la pluviomtrie et
le contenu de leau brute en matire organique.

Rsultats et discussion
-leau de consommation change dune saison une autre du point de vue pH, turbidit et matire organique, ce
changement est statistiquement trs hautement significatif, le changement dans le paramtre couleur qui est en
relation avec la prsence dacides humiques et fluviques est aussi significatif au cours des saisons.
La turbidit, la matire organique et la couleur prsentent les paramtres lis la prsence des prcurseurs
potentiels des SPC et la temprature tant le paramtre cls dans la raction chlore - prcurseurs organiques.
Ce mme rsultat a t rapport par LAFFERRIERE M. et al. (1999) [25], qui ont montr par des analyses de
corrlation limportance des paramtres couleur et temprature de leau brute dans la formation des THMs
(Classe de SPC volatils), de mme que la concentration du chlore rsiduel dans leau traite.

*Dans le tableau suivant figurent les rsultats du suivi du chlore rsiduel partir de la sortie de la station de
traitement (SST) et au cours de la distribution.

Tableau XIX: Suivi du chlore rsiduel.

SST premier point deuxime point


de prlvement de
prlvement
entre sortie entre sortie

printemps 1,2 >1 >1 >1 1

t >1 0,9 >1 >1 >1

automne 1 0,2 0,6 0,2 1

hiver 0,3 0,3 0,4 0,9 1

On remarque qu partir de la sortie de la station de traitement le chlore rsiduel est maintenu au dessus de
1mg/l presque au cours des diffrents points de la chane de distribution pendant le printemps et lt cependant
en automne il se dgrade ou ragit dans la conduite.
En hiver, la faible temprature nexige pas un traitement intensif.
Cette technique est suivie pour prvenir leau traite dune ventuelle contamination dans le rseau de
distribution et viter toute pidmie accidentelle, sachant que pour assurer une bonne dsinfection et empcher
la formation de toute molcule biologique dans les canalisations, la dose de chlore applique doit tre
lgrement suprieure au break point, ce qui explique la concentration du chlore rsiduel 1mg/l. Ce mme
protocole est le mme procd pour les eaux potables dAlger, BIRANE Z. et BOUZID B. (1998) [31], qui
mentionnent aussi que la production de THM est dautant plus importante que ltape de chloration seffectue
plusieurs reprises pendant le traitement et la distribution.
Rsultats et discussion

*La figure 15 reprsente les concentrations des organohalogns (AOX) aux diffrents points de prlvement.
Lanalyse des histogrammes reprsentatifs des taux des organohalogns adsorbables sur charbon actif fait
clairement ressortir que lautomne est la saison critique pour la formation des organohalogns.
Ces rsultats concordent avec ceux obtenues par Le Curieux et al. (1996), qui ont observs des teneurs en
automne suprieurs de 75% 110% ceux rencontrs au printemps, ils expliquent cette teneur leve par la
dcomposition des matires organiques notamment aprs la chute des feuilles. Lhiver est une priode peu
propice la formation des A.O.X. cause de la temprature basse et des faibles doses de chlore ajoutes.

concentation des A.O.X.

30
25
20
g/litre

15
10
5
0
printemps t automne hiver
Saisons

Station de traitement E.D. Station de traitement SST


premier point de prlvement entre premier point de prlvement sortie
deuxime point de prlvement entre deuxime point de prlvement sortie

Figure 15: variation spatio-temporelle des A.O.X.

*Les rsultats du dosage du chloroforme et du bromoforme sont reprsents dans les figures 16-18.
Linterprtation des chromatographes de la CPG montre :
labsence de ces deux composs dans leau brute au cours des saisons.
Lomniprsence du chloroforme dans leau dcante dans toutes les saisons, alors que le bromoforme
na pas pu tre repr en printemps.
Labsence de ces deux composs la sortie de la station de traitement qui probablement nont pas pu
tre dtects par cette technique de dosage.
La prsence du chloroforme et du bromoforme au niveau du dernier point de prlvement en automne
et en t.
La prsence du chloroforme et du bromoforme dans leau traite et leur absence dans leau brute renforce
lhypothse quils sont issus suite au traitement de chloration et la raction du chlore avec les composants
organiques de leau brute.

Rsultats et discussion
Figure 16 : chromatographe du dosage des rfrences CHCl3 et CHBr3.

Rsultats et discussion
Figure 17 : chromatographe du dosage CHCl3 et CHBr3 dans leau brute.
Rsultats et discussion

Figure 18 : chromatographe du dosage CHCl3 et CHBr3 dans leau dcante.


Rsultats et discussion

Ce mme rsultat a t report par de nombreux travaux, YRIEN F. (1986) [26], GIBBBONS J. and LAHA S.
(1994) [33], CHEN W.J and WEISEL C.P. (1998) [35], WILLIAMS D. T. et al. (1998) [36, 37, 38] et
ESPIGARES M. Et al. (2003) [104], ports sur ltude des organohalogns volatils et principalement les
trihalomthanes dont le chloroforme et le bromoforme qui augmentent en fonction du temps de rsidence, de
lloignement par rapport la station de traitement et du taux de chlore applique pour le traitement ds
lentre de leau la station de traitement et jusqu larrive au robinet du consommateur.

Les tests de mutagense :


I- Test dAmes :
*Les rsultats de la vrification des caractres gntiques des bactries prises aprs culture au bouillon nutritif
raliss antrieurement aux tests de mutagnicit sont comme suit :
Rclamation de lhistidine : Aprs incubation on voit que les bactries pousse sur les boites his/ bio et non
sur les boites contenant de la biotine uniquement. Ce rsultat confirme la prsence de mutation His.

1 3
4
2 5

Milieu sans histidine milieux avec histidine


1 : TA100 3 : TA1535
2 : TA98 4 : TA1537
5 : TA1538

Figure 19: La rclamation de lhistidine.

La sensibilit aux UV :

PC
3 PC
4 1
2
5 S

PC : partie cache S: souche sauvage


3 :TA1535 1 : TA98
4 :TA1537 2 :TA100
5 :TA1538
Figure 20: leffet des UV sur les souches dAmes et la souche sauvage.
Rsultats et discussion

Aprs incubation les bactries mutes poussent uniquement dans la partie cache tandis que la souche sauvage
pousse tout au long de la boite mme dans la partie expose au UV gre la possession du systme de
rparation par excision (uvrA, uvrB et uvrC) ce qui nest pas le cas des autres souches du test dAmes.

La rsistance lampicilline et la sensibilit au Cristal violet :

1 3 2
1 2
2
3 31

Salmonella typhimurium sauvage TA98 TA100

2 1 3 3 1

3 1 2 2

TA1535 TA1537 TA1538

H2O : 1
Ampi : 2
CV : 3

Figure 21 : Leffet de lAmpi et du CV sur les souches dAmes.

On remarque, aprs lincubation :


la prsence dune zone claire autour du disque du CV et de lAmpi dans le cas des souches suivantes,
TA1535, TA1537 etTA1538. Ces souches sont donc rfa- (le CV a travers la membrane de ces souches
do la formation de la zone dinhibition) et sensibles lAmpi cause de labsence du plasmide
PKM101.
la prsence dune zone claire uniquement autour du disque du CV dans le cas des souches TA98 et
TA100. Ces souches sont donc portantes de la mutation rfa- et du plasmide PKM101 qui porte le gne
de rsistance lAmpicilline.
La souche sauvage possde le gne rfa+ ce qui explique sa pousse autour du disque du CV qui ne peut
pas travers la membrane bactrienne, cette souche est aussi rsistante lAmpi.

Rsultats et discussion

Test de mutagense: Les rsultats du test dAmes par princubation sont reprsents par des graphes si
dessous en fonction des saisons.

200 40
Printemps Et
180 35
160
nombre de rvertants

nombre de rvertants
30
140
25
120
100 20
80 15
60
10
40
20 5

0 (1) 0
(3) (1) (3)
Tmoin tmoin sst point6 Tmoin tmoin sst point6
positif ngatif positif ngatif
chantillon test chantillon test
TA98 TA100 TA1535 TA98 TA100 TA1535
TA1537 TA1538 TA1537 TA1538

70 800
Hiver
Automne 700
60
nombre de rvertants

50 600
nombre de rvertants

500
40
400
30
300
20
200
10
100
0 (1) 0
Tmoin tmoin sst point6 (2) (3)
Tmoin tmoin E. Brute sst point6
positif ngatif
chantillon test positif ngatif
chantillon test
TA98 TA100 TA1535 TA98 TA100 TA1535
TA1537 TA1538 TA1537 TA1538

Figure 22 : Prsentation des rsultats du test de mutagense.


(1) : K2Cr2O7 1mg/ml [96].

(2) : Ercefuryl (nifuroxime) 1g / ml [102].

(3) : DMSO [93].

Rsultats et discussion

-Ces rsultats du test dAmes sans activation mtabolique montrent que les chantillons deaux prlevs la
sortie de station de traitement ont une activit mutagne directe sur Salmonella typhymurium TA100, qui
dtecte des mutations de type substitution de bases [93], le nombre de rvertants diminue pour les chantillons
prlevs avant distribution finale, au cours des saisons : printemps, t et automne, mais ce nest pas le cas en
hiver. La souche Salmonella typhymurium TA98, qui dtecte des mutations de type frameshift [93], prsente
une cintique inverse celle obtenue avec la TA100, le nombre de rvertants de lchantillon du dernier point
avant distribution est suprieur au nombre des rvertants calcul dans lchantillon prlev la sortie de la
station de traitement.
Pour expliquer ce rsultat on propose deux hypothses :
1. que les mutagnes diffrent au cours de la distribution et pratiquement entre le premier point sortie
station de traitement et le dernier point avant distribution finale. Cette diffrence est aussi en fonction du
changement saisonnier (saison chaude et froide). Cette hypothse est confirme par de nombreux
travaux tudiant la variation spatio-temporelle des diffrents sous produits de dsinfection et non
seulement les sous produits de chloration [35, 36, 37, 38].
2. que la souche TA98 soit beaucoup plus sensible aux organohalogns volatiles (THM) dont la
concentration augmente en fonction de la distance de la station de traitement. tandis que la TA100 est
plus sensible aux organohalogns non volatils (acides actiques, chlorophnols) qui prsentent des
concentrations dcroissantes en fonction de lloignement de la sortie de la station de traitement et de
leffet de stockage [26, 105, 106].
-En ce qui concerne les autres souches :
La TA1535, qui dtecte des mutations de type substitution de bases [93], prsente la mme
cintique que la TA100 en printemps mais non pas au cours des autres saisons.
La TA1537 et la TA1538, qui dtectent des mutations de type frameshift [93, 101], la TA1537
expose la mme cintique que la TA98 quant la TA1538, elle prsente la mme cintique de
sensibilit et de dtection de la TA100 au cours de trois saisons sauf en hiver sa cintique la
mme allure que celle de la TA98.
Ces souches sont moins sensibles que les deux autres TA98 et TA100 [93,101].
Rsultats et discussion

II- SOS chromotest :


Les rsultats des tests de vrification des caractres gntiques de la souche E.coli PQ37 sont prsents ci-
dessous :
La rsistance lampicilline et la sensibilit au cristal violet :

1 1
32
2 2
1 3 3

E.coli sauvage E.coliPQ37

1 : H2O distille
2 : Ampi
3 : CV

Figure 23 : leffet de lAmpi et du CV sur E.coli sauvage et la PQ37.

PQ37

E.coli S.

Figure 24 : leffet de la mutation rfa- sur glose Mac Conkey.

- Sur glose nutritive on remarque que la souche E.coli PQ37 ne pousse pas autour du disque du CV formant
une zone dinhibition claire mais pousse autour du disque de lAmpi et de lH2O. La souche sauvage dE.coli
quant elle prsente une large zone dinhibition autour du disque de lAmpi, tandis quelle pousse
normalement autour du disque de CV et de l H2O.
Rsultats et discussion

La sensibilit de la PQ37 au CV est due au passage de ce compos lintrieur de la cellule bactrienne par
absence de lipopolysaccharides membranaire suite la mutation rfa- et la rsistance de la souche sauvage ce
compos est la consquence de la possession de gne rfa+.
La rsistance de la PQ37 lAmpi est due sa possession du plasmide PKM101. La souche sauvage tant
sensible cet antibiotique.
- on peut confirmer la mutation rfa- aussi par culture sur milieu Mac Conkey qui suite sa composition (la
prsence des sels de deoxycholate) qui empche la pousse de souche mute [97].

La sensibilit aux UV :

PC
1
2

PC : Partie cache
1 : PQ37
2 : E.coli sauvage

Figure 25 : leffet des UV sur la PQ37 et E.coli sauvage.

- la souche sauvage pousse sur les deux parties cache et expose aux UV gre sa disposition du systme de
rparation uvrA qui rpare les mutations provoques par laction des rayons UV.
- La PQ37 est incapable de pousse sur la partie expose suite labsence du systme de rparation par excision
provoque par la mutation uvrA.
Rsultats et discussion

Test de mutagense :
1. Spot test :
Les rsultats obtenus sont prsents dans la figure 26.

1 1
2
3 2 3

Hiver Printemps

2 1
3
3 1
2

Et Automne
1: eau brute.
2 : eau sortie station de traitement.
3 : eau dernier point dchantillonnage.
Figure 26 : rsultat du spot test.

La prsence dun cercle bleu qui est rsultat de linduction du produit du gne sfiA::lacZ suite un dommage
provoqu lADN bactrien apparat pour :
lchantillon prlev la sortie de la station de traitement au cours de diffrentes saisons, cette induction est la
consquence de leffet gnotoxique provoqu par un ou plusieurs composs prsents dans lchantillon. Ce
rsultat renforce celui obtenu par le test dAmes est support par les travaux YRIEN F. (1986) [26], qui
mentionnent que lactivit mutagne dtecte est due principalement aux composs non volatils, puisque la
lyophilisation qui saccompagne de la perte de la plupart es composs volatils, se traduit par une diminution de
seulement 20% de lactivit mutagne, ce rsultat est aussi support par les tudes tudiant la variation
spatiotemporelle des SPC [35].
Rsultats et discussion

Leau brute stocke pendant des mois. Ce rsultat peut sexpliquer par laugmentation de lactivit
gnotoxique des composs prsents dans leau brute qui sont probablement de nature diffrente aux
sous produits de chloration.
lchantillon prlev au dernier point dchantillonnage avant distribution finale ne montre pas un effet
gotoxique peut tre du au fait de la diminution de la plupart des sous produits de dsinfection
organohalogns savoir les acides chloractiques, les chloractones, les actonitriles et la
chloropicrine en fonction de lloignement par rapport la station de traitement, par leffet du stockage
et de la dgradation possible au cours de la distribution, et par laccroissement de la concentration des
THMs (SPC volatils). Ces rsultats sont montrs dans les travaux de WILLIAMS D. T et al. (1998) [36,
37, 38].

1. SOS chromotest standard :


Les rsultats du test sont reports dans la figure 27.

Lanalyse des histogrammes interprtatifs du facteur dinduction I (C), montre que :


lchantillon SST une activit gnotoxique suprieur aux deux autres ce qui prouve que les SPC prsents la
SST sont plus gnotoxique que leau brute et le dernier point dchantillonnage donc les SPC changent au cours
de la distribution en fonction des doses de chlore ajoutes et aussi en fonction du stockage et du changement
saisonnier avec tous quil apporte de changements en caractristiques physicochimiques (pH, temprature,
couleur, turbidit et matire organique) ce qui est dailleurs conforme nos rsultats physicochimiques et des
diffrents dosages effectus au cours de la ralisation de ce travail et ceux raliss par de nombreux travaux
travers le monde [26 ,35, 36, 37, 38], pour cerner les problmes nfastes, surtout gnotoxique cause ces
produits issues dune procdure indispensable toute eau destine la consommation humaine.

70
Rsultats et discussion

Hiver Automne

2,5 4
3,5
2
3
Zone gnotoxique 2,5 Zone gnotoxique
1,5

I (C)
I (C)

I (C) 2 I ( C)
1 1,5
1
0,5
0,5

0 0
T- T+ E.B S.S.T St T- T+ E.B S.S.T St

chantillons chantilllons

Printemps Et
2,5
4
3,5
2
Zone gnotoxique 3
Zone gnotoxique
1,5 2,5
I (C )

I (C )

2
1 I ( C) I ( C)
1,5

0,5 1
0,5
0 0
T- T+ E.B S.S.T St T- T+ E.B S.S.T St
chantillons chantillons

T- : milieu L + bactries [97].


T+ : Ercefuryl (nifuroxime) 1g / ml [102].

Figure 27 : la variation spatio-temporelle de lactivit gnotoxique chez la PQ 37 (SOS chromotest


standard).

71
Conclusion

D ans ce travail nous avons mis en uvre deux tests, le SOS chromotest (mthode standard et le SOS spot

test) et le test dAmes (avec pincubation) pour voluer lactivit gnotoxique et / ou mutagne dchantillons
deau prlevs partir de la station de traitement (Chaiba) et au cours de distribution sur diffrents points du
rseau (ville dAnnaba) pendant les quatre saisons.
Ces deux tests ont bien montr lexistence dune variation qualitative des diffrents chantillons au ours des
saisons.
Le mutatest (test dAmes) a t de grande efficacit quant la sensibilit vis--vis le changement
qualitative en sous produits de dsinfection dou on remarque le comportement diffrent des bactries utilises
dans le test, la TA 100 (qui dtecte des mutations de type substitution de bases) est plus sensible aux sous
produits de chloration prsents la sortie de la station de traitement parmi lesquels ceux qui sont de caractre
non volatil sont les plus abondants. La TA 98 (qui dtecte des mutations de type frameshift) est beaucoup plus
sensible aux sous produits qui prdominent plus loin de la sortie de la station de traitement et qui sont
majoritairement de nature volatils.
Le SOS chromotest a renforc les rsultats obtenus par le test dAmes et a aussi montr leffet
gnotoxique provoqu par lchantillon de sortie station de traitement.
Ces rsultats concordent ceux obtenues par plusieurs travaux tudiant les effets gnotoxiques et mutagnes
des chantillons deau concentrs et non concentrs ainsi que ceux dmontrs par des sous produits isols et
tests sparment.

La dtermination des paramtres physicochimiques et le dosage des organohalogns adsorbables sur charbon
actif (A.O.X.) ont servi de support pour lexplication et linterprtation de lactivit mutagne et/ ou
gnotoxique exprime par les chantillons deau potable.
le dosage de deux sous produits volatils les plus tudis et les plus documents lchelle mondiale (CHCl3 et
CHBr3), nous a montr quils sont originaire de leffet de chloration sur les composants organiques
naturellement prsents dans leau brute par leur prsence dans leau traite partir du premier stade de laction
du chlore (prchloration) et aprs dsinfection finale dans le rseau de distribution et leur absence dans leau
brute pendant toutes les saisons.

Ltude de la gnotoxicit dune eau de boisson constitue une approche nouvelle du problme de la
contamination des eaux potables. Lintroduction de la gnotoxicit des eaux comme nouveau critre de qualit
pour les eaux de boisson, en complment des critres physicochimiques et microbiologiques dj en vigueur,
pourrait savrer profitable.

72
Conclusion

Ainsi, lidentification, la quantification et ltude de la gnotoxicit des agents potentiellement dangereux en


outre de fixer les normes afin damliorer la scurit du consommateur. Par ailleurs, il est important de rappeler
que le risque microbiologique prime sur le risque gnotoxique. En dautres termes, lensemble les efforts visant
limiter la formation des agents gnotxiques, notamment en utilisant moins de chlore, ne doit jamais mettre en
pril la parfaite dsinfection de leau dlivre au consommateur.

Perspectives :
Nous prvoyons didentifier les sous produits de chloration et de tester in vivo le degr gnotoxique sur des
cellules de mammifres et de rechercher leurs effets au niveau de lADN.

73
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Rsum
Toute eau naturelle contient des centaines de substances polluantes, y compris les lments organiques

naturelles, sels, bactries pathognes, virus etc.

La chloration diminue considrablement le risque dinfection aigue mme ltale mais entrane en mme

temps la formation de sous produits qui pourraient tre nocifs long terme, le risque de cancer et plus

prcisment le cancer du rectum et de la vessie sont les plus rencontrs. De ce fait la chloration est

sujette plusieurs critiques en vue de mieux grer ce processus important et indispensable qui est le

traitement de leau tout en essayons de minimiser le risque dexposition de la population aux agents

mutagnes et/ou gntoxiques pouvant tre nfaste pour la sant publique.

Mots cls : eau potable, chloration, trihalomthanes, mutagense, gnotoxicit, test dAmes, SOS

chromotest.
Summary
Every kind of natural water contains a numerous pollutant substances, like organic elements, salts,

microorganisms and so on ..

Chlorine treatment decrease considerably hazard but involve at the same time the formation of disinfection

by products which can be harmful in long- term, bladder and rectum cancer are the most happen.

Actually, chlorination is subject of many investigations in order to minimize exposition hazard of mutagen

and/ or genotoxic agents.

Key word: drinking water, chlorination, trihamethanes, mutagenic, genotoxic, Ames test, SOS chromotest.
1 Test Ames Annexes

Milieu VOGEL-BONNER E (50x)

Utilis dans le milieu minimal agar ;

Sulfate de magnsium (MgSO4. 7H2O)..10g

Acide citrique............................100g

Phosphate de potassium dibasique (K2HPO4)...500g

Sodium ammonium Phosphate (NaHNH4PO4. 4H2O)..175g

H2O distille670 ml

Solution Histidine / Biotine

Utilis dans le Test de mutagense ;

D-Biotine...30,9 mg

L-histidine-HCl...............................................24,0mg

H2O distille.....................................................250 ml

Top agar

Utilis dans le Test de mutagense ;

Agar......................................................................6g

Chloride de sodium (NaCl).......................................................................5g

H2O distille..................................................................1000 ml

Solution dampicilline 10mg/ ml

Utilis dans le Test de rsistance lampicilline ;

Ampicilline trihydrat1g

H2O distille100ml
2 Test Ames Annexes

Solution dampicilline 1mg/ ml

Utilis dans le milieu L ;

Ampicilline trihydrat0,1g

H2O distille1000ml

Solution de cristal violet (0,1%)

Utilis dans le Test de sensibilit au cristal violet

Cristal violet.. 0,1g

H2O distille.100ml

Milieu minimal agar

Utilis dans le Test de mutagense ;

Agar ..15g

H2O distille.930ml

50X VB sels................................................................................................................20ml

40% Glucose................................................................................................................50ml

note: lagar dans leau distille est autoclave 120 pendant 20 minutes, une fois refroidie, nous ajoutons

les sels 50X VB et le glucose autoclavs sparment.


3 Test Ames Annexes

Milieu Histidine/ biotine

Utilis dans le Test de Rclamation de lHistidine ;

Agar ..15g

H2O distille.914ml

50X VB sels................................................................................................................20ml

40% Glucose................................................................................................................50ml

strile histidine-HCl-H2O..................................................100mg

(2g / 400 ml H2O)

strile 0,5 mM Biotine... 6 mg


4 SOS chromotest Annexes

Milieu L

Tryptone................................................................................................................................. 10g

Extrait de levure........................................................................................................................5g

NaCl........................................................................................................................................ 10g

H2O distille........................................................................................................................ 1000ml

Milieu La

Tryptone.................................................................................................................................... 10g

Extrait de levure.......................................................................................................................... 5g

NaCl...................................................................................................................................... 10g

H2O distille......................................................................................................................... 1000ml

20l /ml dune solution dampicilline 1mg / ml

Milieu L solide

Agar ................................................................................................................................ .15g

Tryptone............................................................................................................................ 10g

Extrait de levure...............................................................................................................5g

Na Cl....................................................................................................................................5g

H2O distille..1000ml

Milieu La solide

Agar............................................................................................................................. 15g

Tryptone............................................................................................................................10g

Extrait de levure..................................................................................................................5g

Na Cl....................................................................................................................................5g

H2O distille................................................................................................................1000ml

2ml /l dampicilline dune solution de 10mg / ml


5 SOS chromotest Annexes

Top agar

Agar.................................................................................................................................8g

Na Cl................................................................................................................................8g

H2O distille................................................................................................................1000ml

Milieu M63

Agar................................................................................................................15g

KH2PO4 .......................................................................................................................13,6g

(NH4)2SO4........................................................................................................................2g

FeSO4.........................................................................................................................0,5 mg

Mg.SO4. 7H2O..................................................................................................................0,2g

H2O distille qsq............................................................................................................1000ml

Ajust le pH 7 avec du KOH.

Milieu STA

Lactose 20%.......................................................................................................................2ml

Glucose 20%......................................................................................................................2ml

Tryptophane 1%................................................................................................................2ml

Thronine 1%....................................................................................................................2ml

Histidine 1%......................................................................................................................2ml

Uracil 1%...........................................................................................................................2ml

Thiamine 1%.....................................................................................................................2ml

Ampicilline (10 mg /ml)....2ml

X gal (20mg /ml DMSO)..2ml

M63 qsq...1000ml
6 SOS chromotest Annexes

Solution dONPG (4 mg/ ml)

ONPG400 mg

Tampon phosphate qsq...100 ml

Tampon phosphate

Na2HPO4.7H2O (0,1M)..61 ml

NaH2PO4.H2O (0,1M)..39 ml

Solution de PNPP

PNPP..400 mg

Tampon P qsq.100 ml

Tampon P

Tris.121 g

SDS1 g

H2O distille..........1000 ml

pH= 8,8 (ajust avec HCl)

Tampon B

Na2HPO4................. .16,1 g

NaH2PO4.H2O.....5,5 g

KCl.......................................................................................................................0,75g

Mg SO40,25 g

SDS.2,7 ml

Eau distille qsq 1000 ml

Ajuster le pH 7.
Liste des Tableaux

Numro Titre Page

I Principales diffrences entre les 2

eaux de surface et souterraines.

II Diffrents agents pathognes 5

vhiculs par leau.

III Les substances indsirables. 8

IV Pouvoir dsinfectant des 10


principaux procds.
V Le procd type de traitement 13
utilis pour la potabilisation.
VI Points dinjection et usages 18
typiques.
VII Tableau comparatif des diffrents 24
modes de dsinfection.
VIII Composition des solutions 25
commerciales la livraison.
IX Influence de la dose du chlore sur 29
la formation des THMs.
X Distribution des SPD halogns 34
dans les eaux chlores et
chloramines.
XI Relation entre les malformations 37
congnitales et lexposition aux
sous produits de chloration.
XII Relation entre le taux 37
davortements spontans ou
daccouchements prmaturs et le
type deau consomme.
Liste des Tableaux (la suite)

XIII Principaux composs organiques 41


gnotoxiques ou cancrignes
identifis ou doss dans leau
potable.
XIV Principales donnes chimiques 57
des eaux des ressources gres par
lEPEA.
XV Diffrentes mutations des souches 62

utilises.

XVI Marqueurs gntiques de la PQ37. 66

XVII Valeurs P du test t de student. 70

XVIII Test Anova 2 facteurs contrls. 71

XIX Suivi du chlore rsiduel. 72


Liste des figures

Numro Titre Page

1 Diffrentes formes de chlore en 15


solution aqueuse.
2 Le Break point. 17

3 Composs halogns prsents 26


aprs chloration dune eau.
4 Cintique dapparition de 28
trihalomthanes dans lors de la
chloration des eaux.
5 Relation entre mutation et cancer. 43

6 Systme de rparation par 48


photoractivation.
7 Systme de rparation par 49
excision.
8 Systme de rparation par 50
recombinaison.
9 Systme de rparation SOS. 51

10 Systme de rparation par 52


adaptation.
11 Principe du test dAmes. 53

12 Principe du SOS chromotest. 54

13 Schma du traitement de leau 58


brute.
14 Schma reprsentatif des 59
diffrents points de prlvement
et le type danalyse sur le rseau
de distribution.
15 Variation spatio-temporelle des 73
A.O.X.
Liste des figures (la suite)

16 Chromatographe du dosage des 74


rfrences CHCl3 et CHBr3
17 Chromatographe du dosage 75
CHCl3 et CHBr3 dans leau brute.
18 Chromatographe du dosage 76
CHCl3 et CHBr3 dans leau
dcante.
19 La rclamation de lHistidine. 77

20 Leffet des UV sur les souches 77


dAmes et la souche sauvage.
21 Leffet de lampicilline et du CV 78
sur les souches dAmes
22 Prsentation des rsultats du test 79
de mutagense.
23 Leffet de lAmpi et du CV sur 81
E.coli sauvage et PQ 37.
24 Leffet de la mutation rfa- sur 81
glose Mac Conkey.
25 Leffet des UV sur la PQ 37 et 82
E.coli sauvage.
26 Rsultat du Spot test. 83

27 La variation spatio-temporelle de 85
lactivit gnotoxique de la PQ37
(SOS chromotest standard).
Liste des abrviations

AN : actonitriles.
BCAN : bromochloroactonitrile.
BDCM : bromodichloromthane.
BDAN : dibromoactonitrile.
BF : bromoforme.
CAA : acides haloactiques.
CDBM : dichlorobromomthane.
CF : chloroforme.
CHBr3 : bromoforme.
CHCl3 : chloroforme.
CHF : Chlorohydroxyfurnones.
CK : chloactones.
CMCF : 3-chloro-4-chloromethyl-5-hydroxy -2(5H) furanone.
CNCl : chlorure de cyanogne
CP : chlorophnols.
CPi : chloropicrine.
DBA : acide dibromoactique.
DBAN : dibromoactonitrile.
DBCM : dibromochloromthane.
DCA : acide dichloroactique.
DCAN : dichloroactonitrile.
DCP : dichloropropanone.
HC : hydrate chloral.
MBA : acide monobromoactique.
MCA : acide monochloroactique.
MCA: 3-chloro-4-methyl-5 hydroxy-2(5H) furanone (MCF) et 3,4 - dichloro 5-hydroxy -2(5H)- furanone.
MCAN : mono chloroactonitrile.
MCP : monochloropropanone.
MX: 3-chloro-4-dichloromethyl-5-hydroxy-2(5H)-furanone.
SPC : sous produits de chloration.
SPD : sous produits de dsinfection.
TBA : acide bromoactique.
TCA : acide chloroactique.
TCAN : trichloroactonitrile.
TCP : trichloropropanone.
THM : trihalomthanes.