UNIVERSIDAD AGRARIA DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS

TEMA:
OBSERVACION DE MICROORGANISMOS

ALUMNO:
JEFFERSON AUGUSTO TAPIA VELA

DOCENTE:
Blga. YAMIL BETANCOURT
AO
2017

GUAYAQUIL-ECUADOR
 INTRODUCCIN

QUE SON LOS MICROORGANISMOS

Los microorganismos son aquellos seres vivos ms diminutos que
nicamente pueden ser apreciados a travs de un microscopio. En este
extenso grupo podemos incluir a los virus, las bacterias, levaduras y mohos
que pululan por el planeta tierra.

OBSERVACION DE LOS MICROORGANISMOS

Todos los microorganismos, excepto los virus, pueden ser observados
mediante microscopios pticos, por lo que nos vamos a limitar a describir
las tcnicas ms comunmente usadas para realizar preparaciones para
microscopios pticos.

Preparacin en fresco
Para poder observar la movilidad de un microorganismo es preciso que no
est fijado. Consiste en suspender una gota, tomada directamente de la
muestra, sobre un portaobjetos y cubrindola, sin formar burbujas de aire,
con un portaobjetos se observa al microscopio de contraste de fases.

Tcnicas de tincin:
En general, el proceso seguido en todas las tinciones conlleva las siguientes
etapas: extensin, fijacin, tratamiento con colorantes y observacin.
1.- Extensin
Se realiza sobre un portaobjetos que ha de estar totalmente limpio. Si la
muestra es lquida se hace directamente y, si es slida, hay que
resuspenderla previamente en una gota de H2O.
2.- Fijacin
Tiene por objeto adherir la muestra al portaobjetos y desnaturalizar las
protenas para facilitar la accin del colorante. Normalmente se realiza con
calor, pasando la muestra repetidamente a 10 cm de la llama del mechero.
3.- Tincin
Se realiza aadiendo los colorantes sobre los microorganismos sometidos a
los procesos anteriores. Puede ser de varios tipos:

Negativa: Los colorantes no tien el microorganismo, sino el entorno,

aumentando de este modo su contraste. La muestra se extiende
sobre una gota del colorante (nigrosina).
 Simple: Se utiliza un solo colorante que puede ser de cualquier tipo.
Al igual que la tincin negativa, slo nos permite observar la forma, el
tamao y el tipo de agrupacin de las clulas.
Diferencial: Intervienen dos o ms colorantes y cada uno diferencia
una estructura. El colorante que se usa en segundo lugar es de color
diferente al del primero, denominndose colorante de contraste.

Tincin de Gram
Es la tcnica de tincin diferencial ms importante que se utiliza en
bacterias. El primero en describirla fue el dans Christian Gram. Consiste
bsicamente en aadir lo siguiente:

Cristal violeta (colorante azul)

Lugol (mordiente, sustancia no colorante que refuerza la accin de un
colorante)
Etanol 96 (decolorante que remueve el colorante de ciertas
bacterias)
Safranina (colorante de contraste, rojo)

Esta tincin distingue entre dos amplios grupos de bacterias segn la

composicin de la pared celular; las Gram (-) que no retienen el complejo
cristal violeta-lugol despus de la decoloracin con alcohol y aparecen
teidas de rojo, y las Gram (+) que s lo retienen y aparecen teidas de azul
oscuro.

OBJETIVO
Observar microorganismos mediante preparacin en fresco y realizar frotis
para coloracin.

MATERIALES

DESARROLLO

OBSERVACIN AL FRESCO
1. Con un hisopo tomar el cultivo sin ningn reactivo y colocarlo en un
porta objetos
2. Colocar sobre la muestra un cubre objetos
3. Enfocar en el microscopio

FROTIS
1. Realizar un frotis muy fino en el portaobjeto
2. Dejar secar al ambiente para no deformar la bacteria
 3. Fijar la muestra con la llama del mechero 3 veces
4. Colocar el colorante cristal violeta y dejar secar por 1 minuto
5. Lavar la muestra y dejarla secar
6. Observar la muestra en el microscopio con objetivo de 100x (objetivo
de inmersion)

CONCLUSIONES

Las preparaciones al fresco nos ayudan a observar la morfologa de los

microorganismos

ANEXOS

http://www.mag.go.cr/bibioteca_virtual_ciencia/tec_guayaba.pdf