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I.

INTRODUCCIN

Hoy en da para la medicina experimental, la ratay el ratn son modelos que


ofrecen muchas ventajas con respecto a otros, stas son: al tratarse de un
mamfero, una gran parte de sus procesos bioqumicos son similares al hombre,
tienen un tiempo generacional muy corto, son muy prolficos y se adaptan
fcilmente a la vida en los bioterios, lo que permite controlar las variables
ambientales en las experimentaciones.Comparte con el hombre el privilegio de ser
la especie de mamfero mejor estudiada desde el punto de vista gentico. Existen
varios mtodos para evaluar la calidad proteica de los alimentos y estn
relacionados con la eficiencia con la que son usados para la sntesis y
mantenimiento de la protena tisular. Los mtodos biolgicos se fundamentan en el
crecimiento de ratas destetadas. La aplicacin de los valores de los ensayos
biolgicos en ratas, con respecto a la nutricin proteica es mayormente de tipo
cualitativo.
La calidad nutritiva de una protena, se define como la capacidad de sta o de una
mezcla de ellas paracubrir los requerimientos de un individuo;
dependefundamentalmente de la composicin de AA y de labiodisponibilidad de
los mismos. Para medir la calidadproteica de un alimento, existen mtodos
qumicos,biolgicos y microbiolgicos. Dentro de los biolgicosse han usado, y se
siguen usando, el coeficiente de eficaciaproteica (PER), el valor biolgico (VB) y
la utilizacinneta proteica (NPU). El objetivo del presente informe fue conocer a
travs de pruebas biolgicas en ratas, el valor nutricional de los alimentos,
calculando el valor PER y NPU.

II. MATERIALES Y MTODOS


II.1. PROCEDIMIENTO

Se har los clculos respectivos para la determinacin de la relacin de eficiencia proteica


(PER) o coeficiente de eficacia proteica (CEP), digestibilidad aparente y verdadera,
utilizacin proteica neta (NPU) y por ltimo valor biolgico mediante las siguientes
ecuaciones.

Gananciadepeso( g)
PER=
consumodeprote nas(g)
ingestafecal
D=
ingesta
ingesta[ ( FtFe )+(Ut Ue)]
NPU =
ingesta

ingesta [ ( Ft Fe ) +( UtUe) ]
VB=
ingestaFt

Donde:

- Ft, Ut: excreta total fecal, excreta urinaria total.

- Fe, Ue: excreta fecal endgena, excreta urinaria endgena.

III. RESULTADOS Y DISCUSION

A continuacin se muestra en el cuadro 1, la evaluacin de peso durante diez das de


experimentacin de un grupo de 16 ratitas nacidas el mismo da despus de haber sido
alimentados con muestras aproteica y proteica. Posteriormente se muestra en el cuadro 2, la
evaluacin de alimento consumido, residuo y desperdicio durante estos diez das de
experimentacin. En el cuadro 3 se muestra el anlisis para hallar el valor NPU y finalmente
en el cuadro 4 se muestra los resultados de NPU y PER.
Cuadro 1. Evaluacin del Peso

Muestra Grupo Peso inicial Das Gan.


1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Peso (g)
Primero 261.5 255.0 245.0 235.0 231.5 225.0 217.6 213.5 207.0 199.5 195.0
Aproteica Segundo 262.5 259.5 248.0 236.0 232.0 225.0 223.0 215.0 208.0 206.0 201.0 -64

Primero 261.0 290.0 283.0 298.0 310.0 320.5 332.5 337.5 349.5 359.5 374.0
Proteica Segundo 263.0 291.0 287.0 292.0 307.0 315.5 323.5 332.0 339.5 349.5 362.0 106

Cuadro 2. Evaluacin del Alimento

Muestra Grupo Peso inicial Das Total Consum Consum


1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
(g) o (g) o (g)
Primer Alimento 60.0 60.0 50.5 52.1 60.3 58.2 51.0 51.1 55.0 59.7 558.3
o Residuo 5 7 8 2 9 2 5 2 0 0 289.6 153.34
Desperdici 29.5 33.0 29.8 27.2 28.4 31.6 21.5 24.1 30.0 34.1 6
Aproteic o 6 3 0 8 1 8 5 5 3 7 115.3 38.59
a 6.81 10.7 7.99 9.43 16.4 12.2 10.6 13.5 14.8 12.6
3 5 5 1 5 5 3
Segund Alimento 60.1 60.1 50.7 53.2 58.3 58.5 51.4 51.7 55.0 57.6
o Residuo 2 4 0 0 2 0 1 0 0 6
Desperdici 28.0 37.7 31.1 33.8 36.7 35.8 27.0 31.2 24.9 37.6
o 0 8 6 2 2 1 5 0 3 0
6.40 4.74 5.46 5.49 6.29 5.77 15.5 9.35 10.7 7.50
8 1
Primer Alimento 60.1 60.5 52.0 62.1 60.6 63.1 62.9 63.3 65.0 67.6 617.6
Proteica o Residuo 2 4 7 2 6 8 9 7 0 1 6 446.96
Desperdici 11.6 28.8 8.04 16.9 17.4 12.8 21.7 11.0 9.80 12.8 151.1
o 9 2 1.71 2 3 2 1 0 2.60 9 2 110.27
1.47 1.67 0.83 1.88 2.07 1.95 3.48 1.92 19.58
Segund Alimento 60.0 60.1 51.8 60.6 61.9 63.7 64.6 62.2 65.0 67.2 617.6
o Residuo 7 8 6 9 2 6 2 4 0 9 3 435.16
Desperdici 14.0 27.5 14.1 15.9 12.2 17.0 20.6 12.0 15.9 14.1 163.8
o 7 4 9 8 6 5 9 0 8 2 8
1.11 1.67 1.84 1.54 1.77 2.24 2.45 2.83 1.29 1.85 18.59

Cuadro 3. Anlisis de NPU

Parmetro Aproteica Proteica


Nmero de animales 8 8

Peso inicial (g) 262 262

Peso final (g) 198 368

Ganancia de peso (g) -64 106

Consumo de alimentos (g) 38.59 110.27

Materia seca del alimento (%) 90.89 90.72

Nitrgeno del alimento (%) 0.17 1.60

Consumo de nitrgeno (g) 0.06 1.60

Promedio seco de carcasa (g) 14.44 28.68

Nitrgeno en carcasa (%) 9.47 7.84

Materia seca de carcasa (%) 97.52 98.01

Contenido de nitrgeno en carcasa (g) 1.33 2.20

NPU =Cuadro
((B-Bk4.+ Resultados
Ik)/ I) x 100de= NPU
((2.2 y PER
1.33 + 0.06) / 1.6) x 100

NPU= 58.1 %

PER= Ganancia de peso (g)/consumo de protena (g)

PER= 2,62

NPR=0.0262
El radio de Eficiencia Proteica o PER, por sus siglas en ingls, es un mtodo que determina la
capacidad de la protena dietaria para promover el crecimiento bajo cierta condiciones
estandarizadas. Consiste en controlar el crecimiento de animales jvenes alimentados con la
protena de alimento en prueba, para relacionar los gramos de peso ganado con los gramos de
protena consumida. Segn FAO/WHO/UNU (1985), el Ratio de Eficiencia Proteica (REP)
es el mtodo que mide la habilidad de la protena para soportar el crecimiento en ratas en
etapas de crecimiento. Este ha sido el mtodo utilizado mayormente en el mundo, el PER
representa adems el peso ganado con una protena de prueba dividida por la protena
consumida. Por lo general, el PER de una protena se compara con el de una protena de
prueba que normalmente es la casena. Si el PER tiene una puntuacin inferior al PER de la
casena, se considera que una mayor cantidad de protena es necesaria para satisfacer las
necesidades. En los clculos desarrollados el PER toma una valor de 2.62 (Oropeza y Ortiz,
2002).

Fuente: Oropeza y Ortiz, 2002.

El balance de nitrgeno se mide por la cantidad de nitrgeno que se ingiere y la medicin de


la cantidad excretada a travs de las heces, la orina y el sudor. Si la cantidad de nitrgeno que
entra al cuerpo es menor que la cantidad que excreta el individuo, se le considera un balance
negativo de nitrgeno. Si la cantidad que entra es mayor que la excreta, se deduce que el
individup se encuentra en un estado de balance de nitrgeno positivo. Si la cantidad que entra
es igual a la cantidad excretada por el individuo, se considera que est en un balance de
nitrgeno neutro o en equilibrio, lo que indica que el individuo consume suficiente protena
para satisfacer sus necesidades. Teniendo en cuenta eso, la mayora de los estudios de las
protenas han analizado la cantidad necesaria para asegurarse de que el individuo este en un
balance de nitrgeno neutro o en equilibrio. Adems existe una variedad de factores que
afectan a los requerimientos, desde el balance energtico, pasando por la composicin de la
dieta, as como el sexo, la edad y factores ambientales (Oropeza y Ortiz, 2002).

Los resultados del anlisis de los insumos proteico y aproteico experimentales se observa en
el cuadro 1. Las diferencias entre las cantidades de consumo proteico y aproteico utilizados en
la formulacin de las dietas experimentales se deberan a variaciones propias del organismo
del individuo. En el Cuadro 1, se puede observar que la cantidad de insumo proteico evaluado
mostr una mayor digestibilidad verdadera, comparado con la aproteica (Oropeza y Ortiz,
2002).

Meller y Bender (Church y Pond, 1990) reportaron valores de NPU para la casena de 60,
harina de carne de 35.5 a 48.3 y harina de plumas de 21.2 a 35.6. El NPU determinado en el
estudio fue de 58, y est cerca del rango propuesto por los autores mencionados. Segn el
autor no basta con determinar el contenido proteico y digestibilidad aparente para evaluar la
calidad de los insumos proteicos, sino que es necesario realizar evaluaciones biolgicas (PER,
NPU y DV). Por otro lado el valor biolgico (VB) es uno de los mtodos ms utilizados para
evaluar la calidad de una fuente proteica. El VB mide la cantidad de protena utilizada por el
organismo para reparar y mantener los tejidos en relacin con el total de protena ingerida (a
diferencia del NPU, que solo tiene como referencia el total de protena ingerida). La escala del
valor biolgico va del 0 al 100; un alimento con un valor biolgico elevado proporciona
cantidades elevadas de aminocidos esenciales. Una de las principales limitaciones de este
mtodo es que no tiene en cuenta otros factores importantes que pueden influenciar la
digestin de protenas, como la interaccin con otros alimentos (los estudios para determinar
el valor biolgico son llevados a cabo en individuos en ayunas) (Pellet y Young, 1980).

Refugio (2012), seala que el PER es un bioensayo de un solo punto, dado que se mide la
respuesta a un solo nivel de protena. En cambio NPR es un bioensayo de dos puntos, pues se
mide la respuesta a dos niveles de protena (10 porciento de la protena prueba y cero
porciento de una dieta libre de protena). En este sentido el NPR sera el mejor mtodo, a
tomar en cuenta en pruebas biolgicas.

A pesar de que ambos mtodos tienen sus diferencias en relacin a las condiciones en que se
realizan los bioensayos, las diferencias principales son: El PER dura 28 das de
experimentacin, mientras que el NPR dura solo 14 das. El PER utiliza 10 animales machos,
con diferencia de 10 g entre el peso de los individuos. En cambio el NPR emplea cuatro
individuos (2 machos y 2 hembras) por grupo experimental y la diferencia en peso entre los
grupos experimentales no debe ser mayor de 1 g.

En la prctica solo se evalu el PER por 10 das, lo que resulta inadecuado ya que para
mejores resultados se realiza en 28 das de experimentacin, por ello se debe de tomar en
cuenta el tiempo del ensayo para obtener resultados verdaderos que se puedan comparar con
experimentos antes realizados por diversos autores. Se debe aumentar los das de ensayo.

En la practica se hace mas factible evaluar el PER ya que existe una diferencia de pesos entre
las ratas aproximadamente de 10 g, esto concuerda con lo sealado por Refugio (2012). Por
ello en esta prctica no es factible evaluar el NPR ya que requiere der una diferencia de pesos
menor a 1 g.

IV. CUESTIONARIO

IV.1. Explicar el mtodo NPR (relacin Protena neta). Qu ventajas tiene?

Bodwell (1977) menciona que este mtodo fue desarrollado por Bender y Doell (1957), como
un intento de resolver algunos problemas asociados con el PER. El NPR se fundamenta en
que existe una relacin lineal para el incremento de peso del animal en funcin de la calidad
de la protena consumida. Este mtodo emplea, adems del grupo de animales alimentados
con la dieta experimental, otro grupo de animales alimentados con una dieta libre de nitrgeno
(cero por ciento de protenas). El grupo con dieta libre de nitrgenos se incluye para la
correccin de incremento en peso; ya que no toda la protena que se consume, se destina al
crecimiento, parte de ella se va utilizar para mantener el balance en cero (balance de nitrgeno
corporal). Una vez descubierta esta necesidad de nitrgeno, el resto del nitrgeno proveniente
de la protena dietaria se utiliza para el crecimiento.

Las ventajas de este mtodo son:

Este bioensayo es simple y fcil de realizar.


Los resultados obtenidos son proporcionales, permitiendo realizar comparacin entre
muestras, basndose en su calidad proteica.
Es relativamente corto, pues tiene una duracin de 14 das.
Al incluir un grupo de animales alimentados con una dieta libre de protenas, se
introduce un ajuste para corregir por la protena de la dieta empleada para mantener el
balance cero.
IV.2. Qu factores afectan la digestibilidad de una protena?

Desde el punto de vista de nutricin prctica general, el rumiante depende de la cantidad y


tipo de aminocidos absorbidos del intestino delgado, pero adems de la protena hay otros
factores que afectan la composicin y la cantidad de ese material absorbido, estos son:

a) El porcentaje de N proteico y del Nitrgeno no proteico (NNP) de la racin

b) De la degradacin de la protena del alimento por accin de la microflora del rumen

c) De la cantidad, digestibilidad y calidad de la protena microbial.

d) Del nivel de protena completamente indigerible en la racin.

Recientemente ha surgido el concepto de protena metabolizable con el propsito de


equilibrar las necesidades del animal con la potencialidad de los alimentos para suministrar
aminocidos al organismo en cantidades apropiadas.

IV.3. Qu es la digestibilidad aparente y verdadera?

Con respecto a la digestibilidad aparente, normalmente los valores de digestibilidad que se


obtienen son valores aparentes, es decir, incluyen en las heces los aportes metablicos y
endgenos provenientes de enzimas, clulas epiteliales, clulas microbiales, metabolitos, entre
otros, que llegan a la luz intestinal (Maynard, 1986; Stein et al., 2007), y que no fueron
ofrecidos en el alimento.

Existen diversos mtodos para evaluar la digestibilidad de las materias primas que son
empleadas en las dietas ofrecidas a los animales de compaa, dentro de los cuales estn los
mtodos in vivo directos como la recoleccin total de heces, indirectos cuando se usan
indicadores; mtodos in situ como la canulacin ileal y finalmente los mtodos in vitro en los
cuales se usan enzimas y tcnicas de fermentacin. Los diferentes mtodos varan en
precisin y mecanismos empleados para determinar los coeficientes de digestibilidad.

Para obtener los coeficientes de digestibilidad aparente, se usa la siguiente frmula que
relacional a cantidad de alimento consumido, la cantidad de heces producidas y el contenido
del nutriente que se pretende evaluar, tanto en heces como en el alimento (Stein et al., 2007).
Todos los valores deben de usarse en base seca.
Por otro lado la digestibilidad verdadera, se dio con el fin de obtener informacin ms
aproximada al verdadero aprovechamiento de los nutrientes por parte del animal, se establece
el concepto de digestibilidad verdadera en el cual se tiene en cuenta en los clculos los valores
endgenos, ya que se reconoci que parte de los nutrientes que se encuentran en las heces se
derivan del animal y no son residuos del alimento (Maynard, 1986).

Se puede calcular la digestibilidad verdadera de los alimentos teniendo en cuenta los aportes
endgenos con la siguiente frmula; se deben reemplazar con valores en base seca.
V. BIBLIOGRAFA CONSULTADA

Bodwell, C.E. 1977. Evaluation of proteins for humans. Avi Publ. Co., Wesport,
Connecticut.
Church, D.C.; W.G. Pond. 1990. Fundamentos de nutricin y alimentacin de
animales. 2da ed. Ed. Limusa. Mxico. 438 p
Maynard, L. 1986. Nutricin Animal. 7.ed. Mxico: McGraw-Hill.

Stein, H.H.; Fuller, M.F.; Moughan, P.J. 2007. Definition of apparent, true, and
standardized ileal digestibility of amino acids in pigs. Livestock science, v.109, p.282-
285.
Oropeza, E. y Ortiz, L. B. 2002. Evaluacin nutricional de la protena del grano de seis
cultivares de maz (Zea mays L.). Rey. Fac. Agron. No 15. Maracay, Venezuela. pp.
228-230.

Pellet, P.; Young, V. 1980. Evaluacin nutricional de los alimentos protenicos.


Universidad de las Naciones Unidas. Tokyo, Japn. 174 p

Refugio. 2012. Efecto del sexo de la rata (sprague dawley) sobre la digestibilidad y
razn neta de protena en alimentos de distinta calidad proteica. Rev Chil Nutr Vol. 33,
N3.Chile.

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