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Laboratorio de Biologa
Informe No.3
Protocolo casero para extraccin de ADN de cebolla
Nombres: Alex Gaona Macas Profesor: Nelson Miranda Moyano
Cdigo: 00133112 Seccin: Grupo 1, Miercoles 14h00-16h00
Fecha: 30/03/2016 Nota:
1. Introduccin
Un gen es una regin que codifica o crea protenas. Dentro de una cadena de ADN, la
secuencia de bases nitrogenadas puede variar de un individuo a otro, y es por esto que el cdigo
de ADN es nico para cada individuo, cada gen tiene secuencias adecuadas de bases
nitrogenadas que determinan diferentes tipos de caractersticas como el color de los ojos, tipo
sanguneo, el color de las flores, forma de alas, entre muchas otras caractersticas de todos los
seres vivos. (Guadalupe y Riera, 2014)
Objetivos
Entender a la extraccin del material gentico y su aislamiento como la base para realizar
estudios genticos moleculares
Aprender un mtodo bsico para la extraccin y visualizacin de ADN de manera casera
2. Materiales
1 cebolla fresca
1 papaya
1 mortero
1 papel filtro de caf
1 vaso de precipitacin
1 pinza
1 probeta
Detergente/solucin de sal:
20 ml detergente (para lavar ropa)
20 g NaCl
180 ml agua destilada
20 mL de jugo de papaya cernido con el papel filtro
Solucin salina al 5% (NaCl)
3. Mtodos o Procedimiento
Para dar inicio de la prctica, se revis que los materiales esten en buen estado para que no
infieran en los resultados. Entonces se inici con la prctica. En primer lugar con la ayuda del
mortero y el pistilo se procedi a machacar la cebolla. Una vez machacada la cebolla, se aadio
la solucin del detergente. Despus, en el vaso de presipitacin se fitr la solucin con la ayuda
de un papel filtro para caf. Se coloco la solucin filtrada en un tuvo de ensayo y se procedi a
agitar para que sea una mezcla homognea.
4. Resultados
AD
N
Anlisis de resultados: Debido a que no se contaba con la camara especializada para poder
realizar una buena fotografia no se puede explicar de manera grafica lo que se observo en el
microscopio, pero ha la vista de los observadores fue muy clara la observacion en la cual se
visualizo una pequea muestra de ADN extraido con un aumento de 40x, por ende se tiene como
resultado la visualizacion del mismo amplificada 400 veces. En la imagen se puede apreciar la
forma retorcidad que es caracteristico de esta molecula, asimismo, se observa las hebras que
confirman el mismo. De igual manera, se puede apreciar una aglomeracion en la parte superior
derecha de la imagen debido a que el ADN que se observa se encuentra desnaturalizado o roto,
debido a la manipulacion forzosa que tuvo al momento de ser extraido para ser visualizado.
5. Discusin
En base a los resultados que se pudieron observar en la presente prctiva, se obervo que
uno de los principales incconvinientes que este esta presento fue sacar un poco de la muestra, del
fondo del tuvo de ensayo, puesto que al hacerlo con las pinzas este se rompia con mucha
facilidad, es por ello que se pude decir que hubo una visualizacion parcial de ADN puesto que
este no se encontraba en su forma nartural, sin embargo, segn un informe acerca de la
extraccion de ADN, se dice que incluso la muestra que se ha obtenido no era pura debido a la
presencia de pequeos fragmentos de ARN que se ha entremezclado, no obstante, es posible la
extraccion pura de ADN mediante metodos cientificos de mayor complejidad.(Salas, s/f)
Uno de los primeros pasos de la prctica , fue poner poner el detergente en soluin de sal
sobre la cebolla, esto debido que este elemento ayudar a que las paredes celulares y las
membranas, plasmticas y nucleares de la cebolla comiencen a romperse. (Pimentel, J. 2014).
Entonces al momento en que se rompieron las paredes celulares de la cebolla, se espero
unos minutos para colocar el jugo de papaya que le ayudara a esta mezcla a eliminar cierto tipos
de protenas que pueden contaminar la formacin del ADN. Esto debido a que la papaya contiene
una enzima denominada papayina, que realiza esta funcin especfica. (Pimentel, J. 2014).
Por ltimo, con las paredes celulares rotas y limpias de impurezas, se coloc en la mezcla
la solucn del cloruro de sodio, el cual contribuy a separar el ADN, esto como consecuencia de
que el ADN va a tener ms afinidad con esta solucin comparada con el agua, por ende va a
precipitarse en una interfase formada por el alcohol y el agua. (Pimentel, J. 2014).
6. Conclusiones
En conclusion, para lograr una extraccion eficar de la molecula de ADN, es necesario
romper la membrana celular y nuclear de la celula, ademas en el caso de las celulas vegetales,
debido a que estas poseen pared celular , esta se debe romper tambien para poder liberar al ADN,
dicho proceso se llevo a cabo con la solucion de detergente y sal.
Por otro lado , se concluto que el judo de papaya utilizado en la practica tuvo la finalidad
de eliminar las proteinas que puedan contaminar o daar la muestra de ADN y por ultimo ue la
molecula en presencia del alcohol se desenrrolla y precipita, por ello se utilizo etanol para separa
la muestra.
Al terminar con la prtica se cponcluye que se ha cumplido con cada uno de los objetivos
previamente planteados. Se conocieron los principios bsicos que son muy necesaios a la hora de
extraer el ADN de una manera caser. Tambien se conoce la importancia que existe cuando se
aisla el material gnetico y las ventajas que esto puede tener en los diferentes campos del
desarrollo humano.
7. Literatura Citada
Audersik, T. (2008). Biologa: La vida en la Tierra. Mxico D.F. Pearson Educacin.
Guadalupe, J. Riera P. (2014), Manual del Laboratorio de Biologa para Ingenieras. Quito:
Universidad San Francisco de Quito.
Ruiz, M. (2011). Aplicaciones del ADN en diferentes campos. Recuperado el 3 de marzo del
2015 de: http://procesosdeladn.blogspot.com/2011/04/aplicaciones-del-adn-en
diferentes.html