TRANSFERENCIA DE OXGENO

DETERMINACIN DEL COEFICIENTE VOLUMTRICO DE TRANSFERENCIA DE

OXGENO: KLA.

En el metabolismo aerbico el O2 acta como ltimo aceptor de electrones, siendo este

proceso clave para la generacin de energa (ATP).
Debido a la baja solubilidad del O 2 en agua (7 mg/l a 35C) y a que los
microorganismos son capaces de utilizar solamente el O 2 disuelto, es evidente que ste
deber ser suministrado continuamente al medio de cultivo. Para lograrlo, es necesario
transferir O2 desde la fase gaseosa (normalmente aire) a la fase lquida (medio de cultivo)
de modo permanente.
En el diseo de reactores destinados a cultivos aerbicos es de fundamental
importancia tener en cuenta el aspecto mencionado anteriormente. En la Figura 1 puede
observarse un tipo de biorreactor (tanque agitado) empleado para la produccin en gran
escala. El chorro de aire ingresa al biorreactor por debajo del agitador y al ser golpeado por
las paletas se transforma en miles de pequeas burbujas. El primer efecto que se consigue
con la agitacin es aumentar enormemente el rea interfacial gas-lquido facilitando la
transferencia de O2 desde la fase gaseosa a la lquida. La presencia de deflectores impide
la formacin de vrtice y hace que el sentido de circulacin del lquido sea el indicado por
las flechas en la figura. De este modo las burbujas no ascienden directamente hacia la
superficie sino que quedan temporalmente retenidas por la circulacin del lquido. El
aumento del tiempo de retencin de las burbujas implica un aumento en la transferencia de
O2

(XO2)2; (XCO2)2; (XN2)2; (XH2O)2

F2

F1: Caudal de aire que ingresa

F2: Caudal de gases que salen
V: Volumen del cultivo
Xi: Fraccin molar del gas i

F1, PT

(XO2)1; (XCO2)1; (XN2)1; (XH2O)1

De acuerdo a la ley de Henry, la concentracin mxima que puede alcanzar un gas en

un lquido (su solubilidad) es proporcional a la presin parcial de dicho gas en contacto con
el lquido. La expresin que representa a esta relacin es

C* H PO2
donde C* es la solubilidad del gas a una cierta temperatura, PO 2 es la presin parcial de
dicho gas y H es la constante de Henry que, para un sistema gas/lquido dado, depende
solamente de la temperatura.
Macroscpicamente, la transferencia de O 2 puede explicarse mediante la ecuacin

1
 OTR = KLa (C*-CL)

donde OTR es la velocidad de transferencia de O 2, KLa es el coeficiente volumtrico de

transferencia de O2, C* es el valor del concentracin de O 2 dado por la constante de Henry
y CL es el valor de la concentracin de O 2 en el seno del lquido. La diferencia de estos dos
ltimos trminos es la fuerza impulsora de la transferencia. El K La es una constante de
proporcionalidad que puede tomar diferentes formas dependiendo del modelo que se utilice
para explicarla.

MODELO DE LA PELICULA
Este modelo propone que a ambos lados de la interfase entre dos fluidos (en este
caso gas-lquido) se establece una pelcula o film estanco, en el cual se concentra toda la
resistencia a la transferencia. En dicha pelcula el movimiento del soluto (en este caso el
O2) ocurre por difusin simple, de acuerdo a la ley de Fick que establece que:

dC
Ni D
dt

donde Ni es el flujo del componente i en la direccin x (moles de i . rea -1. t-1), D es una
constante de proporcionalidad (coeficiente de difusin)
En el caso particular del O 2, la resistencia del film gaseoso es despreciable y el flujo
est controlado por la resistencia del film lquido. Un esquema se aprecia en la Figura 2. En
este modelo un aumento en la agitacin se visualiza como una disminucin en el espesor
de la pelcula.
En la interfase gas-lquido la concentracin de O 2 disuelto C* es la correspondiente al
equilibrio con la presin parcial de O 2 en el seno de la fase gaseosa, tal como establece la
ley de Henry.
Supongamos que en un momento dado la concentracin de O 2 en el seno del lquido
CL es menor que C* y permanece constante en el tiempo (estado estacionario). Si en la
pelcula no hay reaccin qumica el flujo de O 2 en estado estacionario ser igual en todo
punto de la pelcula (desde x = 0 hasta x = L; ver Fig. 2, < 0.1). Esto es lo mismo que
decir que:

dN O2
0 (3)
dx

y por la ecuacin 2

2CO2
DO2 0
x 2

Si se integra la ecuacin entre x=0 y x=L se llega a la expresin:

(C * CL )
N O2 DO2 3
L

que da la expresin de la velocidad de transferencia de O 2 a travs de la interfase gas-

lquido en funcin del gradiente de concentracin de O 2 en el film.
Como L es muy difcil de estimar, suele agruparse como K L = DO/L, siendo KL el llamado
coeficiente de transferencia de materia en medio lquido, de esta forma se puede escribir:

N O2 K L (C * CL ) 4

2
Si se define el rea interfacial por unidad de volumen como:

A
a 5
V
donde A es el rea interfacial y V es el volumen de medio lquido, se puede escribir:

OTR N O2 a (6)

combinando 4 y 6 se llega a:

OTR=K L a (C*-CL ) (7)

Con lo que KLa adquiere un significado fsico segn el modelo de la pelcula.

A esta altura cabra una pregunta, como es posible suponer que se est transfiriendo
O2 de la fase gaseosa a la lquida y la concentracin de O 2 en esta (CL) permanece
constante? el sentido comn indica que CL debera aumentar hasta que finalmente C L=C* y
, por lo tanto, OTR = 0. De hecho esto es lo que sucede llegando finalmente a un estado
de equilibrio en el que se cumple la ley de Fick para todo el seno del lquido.
Para que se establezca el estado estacionario es necesario que el O 2 transferido a la
fase lquida sea simultneamente consumido, ya sea por microorganismos o por cualquier
reaccin qumica. Sin embargo hay un aspecto que merece la mayor atencin.
Supongamos que el lquido contiene una sustancia B que reacciona con el O 2 segn

B + O2 BO2
Las molculas de B estarn uniformemente distribuidas en todo el seno del lquido y
tambin en la pelcula lquida, donde se encontrarn con las molculas de O 2 que difunden
y reaccionan para dar BO 2. Se pueden dar dos casos extremos, que caracterizaremos
mediante el parmetro , definido como

velocidad de reaccion
=
velocidad de difusion

a) < 0,1.
En este caso la velocidad de difusin es muy superior a la de reaccin y podemos suponer
que en la pelcula no hay reaccin qumica, por lo que es vlida la ecuacin (3) y
subsiguientes.

b) >> 0,1.
Aqu se da el caso inverso, y las molculas de O 2 reaccionan muy cerca de la interfase
para dar BO2. Naturalmente esto provoca que el perfil de concentracin de O 2 dentro de la
pelcula (y por lo tanto el gradiente) se modifique tal como se muestra en la Figura 2. En
este caso el kL estarC*dado por kPelcula
L =D O2 lquida
/ L . Es evidenteSeno
quedeexistirn
la fase infinitos valores de
lquida
kL dependiendo de cun rpida sea la reaccin, y en todos los casos se cumplir que k L >
kL. Fase gaseosa
A los efectos de caracterizar el sistema, debemos ubicarnos en el primer caso, donde
< 0.1
para un lquido dado y condiciones de aireacin y agitacin prefijadas existe un nico valor
de kL = D O 2 / L.
>> 0.1
CL

0 L L
 Figura 2.

El valor de kLa est directamente relacionado con la eficiencia de un biorreactor para

transferir O2, ya que para una diferencia (C* - C L) dada, la velocidad de transferencia
depende del valor de kLa. Es evidente que si deseamos saber qu tan bueno es un
biorreactor para realizar un cultivo aerbico, debemos medir qu valor de k La lo caracteriza.
Tecnolgicamente importa determinar el valor de K La en su conjunto, para tal fin
existen una diversidad de mtodos. Entre ellos, el mtodo del sulfito es de uso general, el
mismo se basa en la reaccin entre el sulfito de sodio con el O 2 en medio ligeramente
alcalino y en presencia de iones Cu+2 o Co+2.

METODO DEL SULFITO

Se basa en que el SO 3Na2 en presencia de iones Cu 2+ o Co2+, reacciona rpidamente

con el O2 segn la reaccin:

Cu 2 +
SO3Na2 + O2 SO 4 Na 2

Cuando la concentracin de Cu 2+ est en el orden de 0,5 - 2 x 10 -3 M, y el pH se

mantiene neutro o ligeramente alcalino, esta reaccin es suficientemente rpida como para
que en todo momento el valor de CL sea prcticamente nulo (aunque para que esto se
cumpla se requiere adems otra condicin, que se discutir ms adelante), pero no tan
rpida como para que afecte el espesor de la pelcula.
Adems se debe cumplir que:
- La velocidad de la reaccin no dependa de la concentracin de SO 3= (reaccin de
orden cero). Para ello, sta debe ser mayor que 0.015 M.
- El volumen ocupado por la pelcula lquida debe ser muy pequeo en relacin al
volumen total de la fase lquida. Esto hace que el O 2, luego de difundir a travs de la
pelcula, pueda reaccionar con un gran volumen de solucin de SO 3Na2, garantizando as
que CL = 0.

En estas condiciones la reaccin de oxidacin ocurrir totalmente en el seno del

lquido, y la velocidad de la reaccin (r) estar controlada por la velocidad mxima de
difusin de O2, o sea kLa . C*:
r = kLa . C*
donde r es la velocidad de oxidacin del sulfito en el seno del lquido.
Este mtodo, si bien simple, presenta el inconveniente de que soluciones salinas
concentradas provocan una disminucin en la coalescencia de las burbujas, aumentando,
por tanto, el rea por unidad de volumen. De este modo el k La que se obtiene suele ser
mayor que el que se tendr con lquidos no coalescentes, como lo son, en general, los
medios de cultivo.

4
 Si conocemos C* podemos estimar kLa a partir de r. La velocidad de oxidacin del
sulfito puede estimarse de diversos modos. Entre ellos se destacan:
- determinacin del sulfito residual en el reactor (por ejemplo, mediante iodometra)
-determinando la velocidad de consumo de oxgeno en la reaccin por balance en fase
gaseosa.

PARTE EXPERIMENTAL

a) Determinacin de la velocidad de transferencia de O 2 en biorreactor por el mtodo de

balance gaseoso.

1.- Se preparan 3 litros de solucin 0.5 N de SO 3Na2, se ajusta el pH a un valor alrededor

de 8 y se colocan en el biorreactor.
2.- Se agrega el catalizador (SO4Cu, 1M), hasta alcanzar una concentracin final de 10 -3 M.
3.- Se selecciona el caudal de aire F = 60 l.h -1, y se ajusta la agitacin al valor previamente
establecido.
4.- Se aguarda hasta que la lectura del sensor de O 2 se estabilice (10-15 minutos) y
registrar el valor ledo.
5.- Se modifica la agitacin a un nuevo valor y se proceder como en el punto 4
El procedimiento se repite con al menos tres condiciones de agitacin distintas.

Luego de determinadas las tres velocidades de transferencia se agrega en el

biorreactor un tensioactivo (detergente) y antiespumante para determinar cualitativamente
el efecto de estas sustancias sobre la transferencia de O 2.

Con los datos obtenidos se pueden determinar las velocidades de consumo de O 2,

realizando el balance de materia en fase gaseosa. Este conduce a la expresin:

F To 60 pO 2 s 0.21
R O2 rO2 0.79
V T 22.4 1-pO 2s 1 0.21

La deduccin de esta ecuacin se encuentra en la gua complementaria.

rO2
El valor de kLa se calcula a partir de la ecuacin k L a . Vale aclarar que el valor de
C*
7.5 mg/L dado para C* vale slo cuando el gas que est en equilibrio con el lquido es aire
(presin parcial de O2 de 0.21 Atm). En el caso del TP la presin parcial de O 2 estar dada
por la composicin del gas de salida por lo que en el clculo de k La debe corregirse dicho
%O 2
valor. El valor corregido resulta ser C* C *( 21 ) .
21

Con estos datos se construye un grfico de log k La vs log rpm.

SEGUNDA PARTE

El mtodo de Cooper, tal cual se describe anteriormente, posee una simplicidad que lo
hace sumamente til pero tiene el inconveniente de que entrega valores de K La
sobredimensionados. Este problema tiene dos causas principales: 1) como la reaccin es
muy rpida, el gradiente alrededor de la burbuja se ve alterado (Fig 2) y
2) las soluciones salinas concentradas son
menos coalescentes que el agua y los medios de cultivo por lo que las burbujas tienden a

5
permanecer separadas por mas tiempo, generando un rea mayor de las que se
encontrara en un medio de cultivo.
Para solucionar ese tema se desarroll un mtodo alternativo en el cual, en lugar de
trabajar con la solucin concentrada de Na 2SO3 en el reactor y con una concentracin de
O2 cercana a 0, se agrega una solucin de Na 2SO3 a un caudal tal que toda la sal se
consume al momento de ingresar al reactor. Como la velocidad de ingreso de sulfito es
menor la velocidad de trasferencia de O 2, la concentracin de O2 disuelto es distinta de 0.

La ecuacin estequiomtrica que representa a la reaccin que ocurre entre sulfito y O 2 es

la siguiente:
2
2 Na 2 SO3 O2 Cu
2 Na 2 SO4

La velocidad de la reaccin puede representarse segn la ecuacin:

v Na 2 SO3 O2
m n

donde k es la constante de velocidad y m y n son coeficientes que deben determinarse

experimentalmente y representan al orden de la reaccin para sulfito y oxigeno
respectivamente.
Las ecuaciones que representan al balance de materia para el O 2 y el Na2SO3 son las
siguientes:

VL dC A K L a.VL (C A * C A ) Q(C AF C A ) VL k m,n (C A ) m (C B ) n

dt

VL dC B Q(C BF C B ) 2VL k m,n (C A ) m (C B ) n

dt

donde VL es el volumen del reactor, C A y CB son las concentraciones de O 2 disuelto y sulfito

en el medio, CAF y CBF son las concentraciones de O 2 y sulfito en la alimentacin, Q es el
caudal de alimentacin,
Cuando se alcanza el estado estacionario el termino de consumo qumico puede
eliminarse de las ecuaciones anteriores sustrayndolas y se obtiene la ecuacin que
permite calcular el KLa:

Q (C BF C BS ) 2(C AF C AS )
K La
C
2VL C *A 1 AS *
C A

En las condiciones de operacin, la concentracin remanente de sulfito en el medio, la

concentracin de O2 en la alimentacin y en el reactor son despreciable frente a la
concentracin de sulfito en la alimentacin con lo que la ecuacin puede reducirse a:

Q C BF
KLa
C
2VL C A* 1 AS *
CA

Una diferencia operacional importante entre este mtodo y el tradicional de Cooper es

que en el original la concentracin elevada de sulfito mantiene relativamente constante el
pH. En el presente protocolo, la aparicin de sulfato hace que el pH disminuya

6
rpidamente. Como el pH es un parmetro crtico en la medida del K La, se debe controlar el
mismo en forma activa.
A pesar de no permanecer el volumen absolutamente constante, como el volumen de la
planta es grande en relacin al caudal de alimentacin, se puede considerar que, a tiempos
cortos, se llega al estado estacionario.

Parte experimental:

Materiales.
Biorreactor con electrodos de medida de O2 y pH
Solucin de CuSO4 1M
Solucin de Na2SO3 0.8 M (titulada).
Solucin de NaOH 1M

Protocolo

1. Llenar el biorreactor de agua destilada y agregar solucin de CuSO 4 1M hasta una

concentracin final de 1 mM.
2. Termostatizar a 30 C
3. Conectar la salida de gases al equipo de medida
4. Dejar polarizar el electrodo de O2 y calibrarlo con N2 y aire.
5. Al mismo tiempo calibrar el equipo de medida de gases.
6. Calibrar el electrodo de pH y colocar el Set point en 8.
7. Fijar la agitacin en las condiciones de medida requeridas
8. Comenzar la alimentacin de Na2SO3
9. Mantener la alimentacin hasta que se alcance el estado estacionario (10 de valor
constante en la medida de O2 disuelto y de % de O2 en los gases de salida)
10. Anotar ambos valores y cambiar la velocidad de agitacin
11.Repetir los pasos 7 a 10 para tres condiciones de agitacin distintas
12. Manteniendo la velocidad de agitacin constante, aumentar el caudal de alimentacin.

Recomendaciones
A fin de minimizar la concentracin de O 2 en la solucin de alimentacin, la misma se
mantiene con una corriente de N2.
Es muy importante conocer perfectamente el caudal de alimentacin para lo cual la
solucin de sulfito se coloca en una probeta de 100 mL y se mide el volumen consumido a
cada tiempo de medida.
Para realizar los clculos hay que corregir los valores de C A y CA* teniendo en cuanta el
valor de O2 que entrega el equipo de medida de gases ya que el valor de 0.25 mM para C*
ocurre slo cuando la presin parcial de O2 es de 0.21 Atm.