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UNIVERSIDAD DE LA COSTA

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS AMBIENTALES


LABORATORIO DE CONTROL DE EMISIONES ATMOSFERICAS

FACULTAD DE INGENIERA

Determinacin de la concentracin de bioaerosoles usando el mtodo


de impactacin de cascada.
Harold Lpez, Adriana Mercado, Cesar Meza, Stevens Ramos
Docente: Dayana Agudelo. Grupo: AD; 22 de marzo del 2017
Laboratorio de control de emisiones atmosfrica
Universidad de la Costa, Barranquilla.
ESTRUCTUR MARCO TERICO CLCULOS ANLISIS CONCLUSIONES NOTA
A

Resumen
En la experiencia realizada se determin la concentracin de bioaerosoles presentes en el aire en la
cafetera de la Universidad de la Costa CUC, usando como equipo el impactador de cascada mediante el
mtodo activo, donde se deja el equipo por un tiempo de monitoreo de 5 minutos y pasado este tiempo se
incuban las muestras por 48 horas, luego se realiza el conteo e identifacin de las colonias macroscpica
y microscpicamente por medio de la tincin Gram y calculando las concentraciones de Unidades
Formadoras de Colonias (UFC), donde se presenta concentraciones de UFC de 113 hasta 367 ufc/m3 y
bacterias Gram positivas en las diferentes etapas del impactador. Adems las concentraciones
determinadas se asocian a fuentes de emisiones como la exposicin al polvo, agua, rboles y plantas
presentes en el sitio de muestreo.

Palabras claves
Bioaerosoles, Impactador de cascada, Mtodo activo, Concentracin de UFC, Tincin Gram.

Abstract
In the experience made it was determined the concentration of bioaerosols present in the air in the
cafeteria of the university of the CUC, using as a team the impactor cascade through the active method,
where you leave your computer by a monitoring time of 5 minutes and after this time the samples are
incubated for 48 hours, then the count and identification of the macroscopic colonies and microscopically
by means of the Gram staining and calculating the concentrations of colony forming units (CFU), where
concentrations of 113 CFU of up to 367 cfu/m3 and Gram positive bacteria in the different stages of the
impactor. In addition, concentrations are associated with certain sources of emissions and exposure to
dust, water, trees and plants present in the sampling site.

Keywords
Bioaerosols, cascade impactor, Active Method, Concentration of UFC, Staining Gram.

1. Introduccin El impactador de cascada que est diseado para


Los microorganismos pueden ser transportados separar las partculas del aerosol en seis etapas
rpidamente, en forma de bioaerosoles, la cilndricas ajustables, retenerlas sobre unas
atmsfera no tiene una microbiota autctona, cajas de Petri. El flujo de aerosol es inducido
pero es un medio para la dispersin de muchos por una bomba de vaco con capacidad de hasta
tipos de microorganismos (esporas, bacterias, 100 L/min, e ingresa al equipo a travs de una
virus y hongos), procedentes de otros manguera de aspiracin, un rotmetro con
ambientes. Los microorganismos disperso por el capacidad de medir flujos hasta 70 L/min y una
aire producen enfermedades en plantas, vlvula de sobrepaso para modular el flujo a
animales y humanos, causando algunas travs de la seccin de prueba.
alteraciones respiratorias, perdidas de grandes
cosecha y materiales orgnicos (cuero, textiles, El presente informe tiene como objeto
papel) produciendo alteraciones. (M. C. DE LA determinar la concentracin de bioaerosoles
ROSA, 2002, pg. 376). presentes en el aire en la cafetera de la

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Universidad de la Costa, CUC usando el mtodo funcin de arrastrar las partculas con ayuda de
de impactacin de cascada, adems se realiza la una bomba de vaco.
identificacin de los bioaerosoles, as como su
fuente de emisin.

2. Fundamentos Tericos
El aire contiene en suspensin diferentes tipos
de microorganismos, especialmente bacterias y
hongos. La presencia de uno u otro tipo depende
del origen, de la direccin e intensidad de las
corrientes de aire y de la supervivencia del
microorganismo, pueden ser transportados
rpidamente, en forma de bioaerosoles. Las
enfermedades transmitidas por el aire,
producidas por bacterias, virus y hongos, son las
respiratorias (neumona, tosferina, tuberculosis,
legionelosis, resfriado, gripe), sistmicas
(meningitis, sarampin, varicela, micosis) y
alrgicas. (F. Aldape U., 1987)

Los impactadores son usados para la


caracterizacin de partculas de los aerosoles en
diversos ambientes, pueden ser utilizados en
estudios sobre los efectos de la contaminacin o
del ambiente de trabajo sobre la salud. Es un
instrumento que permite colectar el aerosol de la
atmosfera en una muestra adecuada, tambin
clasifica por tamao a las partculas contenidas
en el aire. (Jose Daniel Beltran Villegas, 2008, Figura 1. Impactador de cascada de seis etapas
pg. 2). como simulador del sistema respiratorio del ser
humano. Fuente: Barraza, 2017
El principio del diseo del impactador se basa
en que las partculas con ms inercia son menos En la imagen anterior se evidencia un
capaces de seguir con el flujo e impactan la impactador de cascada de seis etapas como
superficie colectora, si cambia rpidamente de simulador del sistema respiratorio del ser
direccin, las dems partculas permanecen en humano:
el fluido hasta que se consigue aumentar su
inercia. Para el aumento de inercia se obtiene ETAPA 1: cavidad Nasal (partculas
incrementando la velocidad lineal de fluido, lo entre 7.0 Micras y por encima)
cual se dispone de una aja perforadora con
orificios sobre cada etapa, el dimetro de cada ETAPA 2: faringe(partculas entre 4.7
orificio se disminuye a medida que se Micras y 7.0)
desciende en las diferentes etapas del
impactador. (J. Ortiz, 1986). ETAPA 3: trquea y bronquios
primarios(partculas entre 4.7 Micras y
Un impactador de cascada Andersen Thermo 3.3)
Scientific se localiza a una altura de 1,5m.
Adems un impactador de cascada es un equipo ETAPA 4: bronquios
que acta como simulador del sistema secundarios(partculas entre 3.3
respiratorio humano, el cual est compuesto por Micras y 2.1)
ses etapas. (Ver Figura 1); Por otro lado en el
impactador la velocidad del aire va ETAPA 5: bronquios terminales.
incrementando de una etapa a la otra y tiene un (partculas entre 2.1 Micras y 1.1)
caudal de succin de 28,3 L/min que tiene la

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ETAPA 6: alveolos. (partculas entre


1.1 Micras y 0.6)

Para calcular la concentracin de UFC se hace


uso de la siguiente ecuacin.

UFC X 1000
CUFC = Ec . 1.
28,3 X t

Dnde:

t: Tiempo de monitoreo
Caudal 28.3 l/s
UFC: Unidades Formadoras de Colonia.

3. Desarrollo experimental
Figura 3. Muestras obtenidas. Fuente:
3.1 Procedimiento: Elaboracin propia.
Para la determinacin de la concentracin de Finalmente pasadas las 48 h se realiza el conteo
bioaerosoles se sita el impactador de cascada e identificacin de las colonias macroscpica y
en un sitio estratgico en la Universidad de la microscpicamente por medio de la tincin de
Costa, especficamente en la cafetera donde se Gram y calculando las concentraciones de UFC.
deja por 5 minutos y a una altura de 1.5 metros.

Figura 2. Montaje del equipo. Fuente:


Elaboracin propia.
F
Luego se procede a incubar las muestras igura 4. Colonias macroscpicas. Fuente:
obtenidas a una temperatura de 37C por un Elaboracin propia.
periodo de 48 h.

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Figura 5. Colonias microscpicas. Fuente:


Elaboracin propia.

4. Clculos y anlisis de resultados

Tabla 1.

Datos obtenidos del conteo de colonias y su respectiva concentracin.

Etap Tipo Jornad Sitio de Tiemp Uf Clasificaci Concentracin


a a muestre o c n (ufc/m3)
o
1 Bacteri Maan Cafeter 5 31 Sp1 219
as a a
2 Bacteri Maan Cafeter 5 30 Sp2 212
as a a
3 Bacteri Maan Cafeter 5 33 Sp3 233
as a a
4 Bacteri Maan Cafeter 5 21 Sp4 148
as a a
5 Bacteri Maan Cafeter 5 16 Sp5 113
as a a
6 Bacteri Maan Cafeter 5 52 Sp6 367
as a a
Fuente: Elaboracin propia.

Tabla 2.

Caractersticas macroscpicas y microscpicas de las bacterias.

Sp Caractersticas Macroscpicas Imagen Imagen


Macroscpica Microscpica
Color Forma Borde Aspecto

4
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POLEN
Amarillo-
Sp Irregul Lobulad Consisten
Blanqueci
1 ar os cia seca
no

Fuente: Elaboracin propia.

Tabla 3.

Caractersticas macroscpicas y microscpicas de las bacterias.

Sp Caractersticas Macroscpicas Imagen Imagen


Macroscpica Microscpica
Color Forma Borde Aspecto

Amarillo- Consiste
Sp Irregul Lobulad
Blanquec ncia
2 ar os
ino seca

Fuente: Elaboracin propia.

Tabla 4.

Caractersticas macroscpicas y microscpicas de las bacterias.

Sp Caractersticas Macroscpicas Imagen Imagen


Color Forma Borde Aspecto Macroscpica Microscpica

Amarillo Consiste
Sp Irregula Lobulado
Blanqueci ncia
3 r s
no seca

Fuente: Elaboracin propia.

Tabla 5.

Caractersticas macroscpicas y microscpicas de las bacterias.

Sp Caractersticas Macroscpicas Imagen Imagen


Color Forma Borde Aspec Macroscpica Microscpica
to

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Consi
Sp Blanqueci Irregula Lobulado stenci
4 no r s a
seca

Fuente: Elaboracin propia.

Tabla 6.

Caractersticas macroscpicas y microscpicas de las bacterias.

Sp Caractersticas Macroscpicas Imagen Imagen


Macroscpica Microscpica
Color Forma Borde Aspecto

Sp Irregula Lobulado Consiste


5 Blanquecin r s ncia seca
o

Fuente: Elaboracin propia.

Tabla 7.

Caractersticas macroscpicas y microscpicas de las bacterias.

Sp Caractersticas Macroscpicas Imagen Imagen


Color Forma Borde Aspecto Macroscpica Microscpica

Amarillo Consiste
Sp Irregula Lobulado
Blanqueci ncia
6 r s
no seca

Fuente: Elaboracin propia.

Anlisis de resultados (Sp4) tiene 21 UFC con una concentracin de


148 UFC/m3, adems en las dos etapas se
Como se observa en la tabla 1, en la etapa 1 imponen las bacterias Gram positivas. Mientras
(Sp1) del impactador de cascadas tiene 31 que en la etapa 5 (Sp5) y en la etapa 6 (Sp6) se
unidades formadoras de colonias (UFC) con una evidencia una valor de 16 UFC y 52 UFC con
concentracin de 219 UFC/m3, mientras que en una concentracin de 113 UFC/m3 y 367
la etapa 2 (Sp2) tiene 30 unidades formadoras UFC/m3 donde sobresalen las bacterias Gram
de colonias y una concentracin de 212 positivas. Por otro lado en las tablas 2,3,4,5,6 y
UFC/m3, asimismo en las dos etapas prevalecen 7 se observa que a nivel macroscpico las
las bacterias Gram positivas, Del mismo modo colonias son de tamaos intermedios y grandes,
en la etapa 3 (Sp3) presenta 33 UFC con una adems con formas irregulares y planas tambin
concentracin de 233 UFC/m3 y en la etapa 4 con colores amarillo-blanquecino y bordes

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lobulados, del mismo modo se observa una Explique cules seran los riesgos a la salud
protuberancia en el centro de las colonias lo por la presencia de estos bioaerosoloes en la
cual les da una apariencia de huevo estrellado. A atmsfera de Barranquilla
nivel microscpico y segn su morfologa como
se observa en las tablas 2, 3, 4, 6, y 7 se Muchas de las especies de Bacillus no causan
presentan bacterias del gnero Bacillus largos y enfermedades, pero existen algunas especies
cortos con forma de bastn y bordes que generan enfermedades como el carbunco,
redondeados con cadenas cortas y son Gram esta es una enfermedad infecciosa y contagiosa
positivas. Adems con tamaos de 4-10 m. que padecen los animales y puede trasmitirse al
ser humano. Otras especies causan intoxicacin
Posteriormente se puede evidenciar que existen alimentaria semejante a la estafiloccica,
concentracin de UFC considerables en todas tambin generan toxinas termoestables en los
las etapas del impactador estos valores se alimentos lo cual da la germinacin de esporas y
asocian a las caractersticas del sitio de pueden generar un sndrome de vmitos. Del
muestreo (cafetera) debido a que existen mismo modo otras especies generan
fuentes de emisiones como el suelo, adems a enterotoxina termolbil que produce diarrea en
cierta distancia del sitio se encuentran rboles y un tiempo largo, adems algunas causan
plantas. bacteriemia en aquellos enfermos
Del mismo modo cerca del sitio de muestreo se inmunodeprimidos y a veces infecciones
localiza un bao que puede ser fuente de oculares y de otro tipo.
emisin de esta bacteria. Adems los Bacillus se
encuentran en alimentos como carnes, productos
derivados del pollo, arroz, sopas, harinas y
cooler de durazno y pia. Tambin la Explique las posibles fuentes de emisin de
supervivencia y distribucin de esta bacteria los bioaerosoles
est dada por factores biolgicos y
meteorolgicos como el viento, radiacin solar, Ashbolt, Grabow y Snozzi (2001) encontraron
temperatura y humedad relativa y por la qumica que la presencia de Bacillus es frecuente en
atmosfrica. Es importante mencionar que en el una gran variedad de ambientes naturales, como
tiempo de monitoreo hubo una limpieza del piso el agua, suelo y vegetacin, adems se asocian
por parte de los aseadores de la cafetera lo cual con el consumo de diversos alimentos,
puede levantar polvo que inciden en la alta especialmente arroz, pastas y hortalizas, pero
proliferacin y concentracin de Bacillus en las tambin leche cruda y productos crnicos.
diferentes etapas del impactador.
En el sitio de muestreo existan diferentes
Finalmente con las concentraciones obtenidas fuentes como el polvo procedente del aseo
de UFC de bacterias del gnero Bacillus se realizado por los aseadores y tambin los
puede decir que la calidad del aire es inestable y alimentos que ofrecen en la cafetera. Por otro
se pueden presentar impactos en la salud de las lado cerca del sitio de muestreo se encuentra un
personas expuestas, adems las bacterias bao y rboles que pueden ser fuentes de
Bacillus por tener un tamao de 4-10 m emisin de esta bacteria.
pueden estar localizadas en la cavidad nasal y
6. Conclusin
faringe del sistema respiratorio del ser humano.
La concentracin de bioaerosoles en el aire
estn compuestas por seres vivos, o por
5. Cuestionario
molculas grandes que han sido liberadas por un
Calcule las UFC para cada el muestreo para ser vivo (bacterias, hongos, protozoos, virus),
cada etapa siendo estos complejos debido a la naturaleza de
sus componentes y compuestos consecuencia de
Ver anexo su desarrollo o actividad. Los resultados de esta
prctica permiten conocer y caracterizar la
Identifique las bacterias y los hongos para concentracin de bioaerosoles en un sitio de
cada etapa muestreo estratgico en la Universidad de la
Costa, donde se obtienen concentraciones de
Las bacterias identificadas en las diferentes Unidades Formadoras de Colonias (UFC) de
etapas son del genero Bacillus Gram positivas. bacterias del genero Bacillus indicando el grado

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de contaminacin microbiolgica presente en el


sitio de muestreo. Esta experiencia de la
concentracin y tipo de bioaerosoles permite
deducir que la calidad del aire es pobre y que no
se estn llevando a cabo medidas esenciales
para el control de los mismos. Adems estas
concentraciones pueden acarrear enfermedades
graves a las personas expuestas a este agente
biolgico. Es importante mencionar que en
Colombia no existen regulaciones que
establezcan los valores lmites de exposicin
para los bioaerosoles presentes en el aire en
diferentes sectores de la economa, lo cual es de
gran importancia regular para prevenir los
riesgos y enfermedades en los seres humanos
relacionados con estos agentes biolgicos.

7. Bibliografa

M. C. DE LA ROSA, M. A. (2002). El aire:


hbitat y medio de transmisin de
microorganismos.

F. Aldape U., E. P. (1987). Diseo, construccin


y pruebas de funcionamiento de un impactador
de cascada f. Mxico.

Jos Daniel Beltrn Villegas, N. Y. (2008).


Diseo y construccin de un impactador de
cascada para la determinacin de la
distribucin de tamao de material particulado
suspendido en el aire. Universidad de los Andes,
ingenieria qumica.

J. Ortiz, M. P. (1986). Utilizacin y manejo de


un impactador de cascada Andersen en el
estudio de los aerosoles atmosfrico.

Barraza, Y. (2017). Influencia de las


condiciones ambientales en el comportamiento
de los aerosoles fung, en relacin a las
infecciones respiratorias agudas (IRAs)
presentadas en el corregimiento de cuatro
bocas, departamento del Atlntico. (Trabajo de
grado). Corporacin Universidad de la Costa.
Barranquilla.

N.J. Ashbolt, W. O. y M. Snozzi. (2001). Los


indicadores de la calidad del agua microbiana.
Londres (Reino Unido): IWA Publishing.

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8. ANEXO

Calculo de la concentracin de UFC

UFC X 1000
CUFC =
28,3 X t

Tiempo de Monitoreo: 5 minutos.

Caudal de succin: 28,3 L/min

Concentracin de UFC para Sp1

31 X 1000
CUFC =
l
28,3 X 5 min
min

31,000
CUFC =
141.5

UFC
CUFC =219
m3

Concentracin de UFC para Sp2

30 X 1000
CUFC =
l
28,3 X 5 min
s

30,000
CUFC =
141.5

UF C
CUFC =212
m3

Concentracin de UFC para Sp3

33 X 1000
CUFC =
l
28,3 X 5 min
s

33,000
CUFC =
141.5

UFC
CUFC =233
m3

Concentracin de UFC para Sp4


21 X 1000
CUFC =
l
28,3 X 5 min
s

21,000
CUFC =
141.5

UFC
CUFC =148
m3

Concentracin de UFC para Sp5

16 X 1000
CUFC =
l
28,3 X 5 min
s

16,000
CUFC =
141.5

UFC
CUFC =113
m3

Concentracin de UFC para Sp6

52 X 1000
CUFC =
l
28,3 X 5 min
s

52,000
CUFC =
141.5

UFC
CUFC =367
m3

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