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Pruebas de exmenes Preoperatorios: Pruebas de Coagulacin

Las pruebas de hemostasia y coagulacin se dirigen a la determinacin


del recuento plaquetario, su funcionalidad, activacin y la existencia de
cualquier anomala en alguna de las fases o factores de la cascada de
coagulacin, ya sea intrnseca o extrnseca. As mismo, se cuantifican los
productos resultantes de la fibrinlisis.

Para que se lleven a cabo es necesario obtener muestras de sangre por


puncin no traumtica para evitar alterar o activar los mecanismos de
coagulacin sangunea. Se recomienda realizar las pruebas dentro de las
primeras 2 horas posteriores a la recoleccin de sangre, especialmente en el
caso de pruebas plaquetarias.

Pruebas iniciales

stas se realizan en como parte del protocolo de evaluacin clnica, e


incluyen la determinacin de hematocrito, realizacin de un frotis sanguneo,
tiempo de coagulacin activada (TCA) o de tromboplastina parcial activada
(TTPA), tiempo de protrombina (TP) y, de ser necesario, tiempo de hemorragia
en la mucosa bucal.

Recuento Plaquetario:

Se realiza obteniendo una muestra de sangre anticoagulada ya sea con


citrato trisdico u oxalato sdico, preferiblemente, de circulacin perifrica. De
la misma se realiza una extensin en frotis y se procede a examinar por
microscopa la existencia de agregados plaquetarios, el recuento de plaquetas
si es posible, a menos que exista trombocitopenia en el paciente.

El nmero de plaquetas por campo de gran aumento se cuenta a travs


del objetivo de inmersin, multiplicando el total encontrado por 15,000 a 20,000
-dependiendo de lo considerado por diversos autores- para obtener un
aproximado del recuento plaquetario. Cuando el total es de 2-3 plaquetas por
campo (<40,000 plaquetas/ul), entonces se sospecha de hemorragia
secundaria a trombocitopenia. Si es >4-5 plaquetas por campo, se considera
signo de trombocitopata, la cual puede ser causada por CID, administracin de
cido acetil saliclico o la enfermedad de von Willebrand.

Tiempo de Coagulacin Activada (TCA):

El TCA evala los factores de la va intrnseca (II, V, VIII, IX, X, XI, XII) y
la funcin normal de la coagulacin. Se utiliza para el anlisis de defectos
hemostticos secundarios. El TCA se prolonga cuando existe trombocitopenia
marcada (>10,000 20,000 plaquetas/ul) y disminuye el fibringeno adems de
los factores activados de la coagulacin.

Para su realizacin se calienta un tubo de TCA a 37 C a bao mara. Se


obtienen 3 ml de sangre en una jeringa sin anticoagulante y rpidamente se
sustituye por una nueva para extraer 2 ml, esto con el propsito de descartar la
sangre cuyos factores pudieron ser estimulados por el factor tisular. Los 2ml de
muestra se vierten en el tubo de TCA, luego se mezcla suavemente el
contenido y finalmente se coloca el tubo a bao mara. A partir de este paso se
comienza a contar el tiempo de coagulacin.

La existencia de cogulos se verifica invirtiendo el tubo y colocndolo de


nuevo en el calor por 60 segundos, repitiendo el mtodo cada 5 segundos. Se
registra el tiempo transcurrido hasta la aparicin de los primeros cogulos. En
un perro normal el TCA es de 90 a 120 segundos, en el gato de 80 a 100.

TTPA. Es una prueba ms sensible con la misma funcin que el TCA


utilizando menos sangre para detectar alteraciones.

Tiempo de Protrombina (TP):

Esta prueba es utilizada para determinar anomalas en la va extrnseca,


especficamente en el factor VII de la coagulacin. Este factor es ms lbil y de
vida media ms corta que los de la va intrnseca, por lo que el TP se puede
prolongar ms fcilmente que el TCA o el TPPA. El test requiere de plasma
obtenido de una muestra sangunea previamente anticoagulada con citrato. La
muestra debe mantenerse fresca y la prueba debe realizarse en los primeros
30 minutos posteriores a la recoleccin. Se considera que el TP est
prolongado cuando rebasa el 30% ms del tiempo considerado normal (7-10
segundos en perros). Las patologas asociadas al aumento en el TP son
enfermedad heptica, CID e intoxicaciones con warfarina.

Tiempo de hemorragia en la mucosa bucal (TH):

El TH es una prueba para la medicin del tiempo requerido para que las
plaquetas se activen e interaccionen con el endotelio vascular afectado para
formar el tapn plaquetario. Si existe trombocitopenia (<100,000 plaquetas/ul),
el TH aumenta, y est relacionado con sndromes de disfuncin plaquetaria.

El protocolo de realizacin consiste colocar una gasa lazada alrededor


del hocico del animal para elevar el labio y exponer la mucosa. Con una
plantilla de TH se realizan dos incisiones mnimas en la mucosa. La sangre
extrada se filtra con papel filtro sin tocar las incisiones o el cogulo formado. El
tiempo desde la incisin hasta la detencin de la hemorragia se registra, con el
valor de referencia siendo de 3 a 4 minutos en perros y de 3 en gatos.

Si existe prolongacin del TH, es necesario descartar diagnsticos como


la enfermedad de von Willebrand, accin de AINEs, trombopatas congnitas y
enfermedades sistmicas como la azotemia, falla heptica o metstasis de
algn tumor. Si a pesar de un TH y recuento plaquetario normales, la
hemorragia contina, deben realizarse pruebas de la cascada de coagulacin
(TTPA, TP, TCA).

Pruebas secundarias

Tiempo de Trombina:

Este se utiliza para medir la cantidad de fibringeno funcional en plasma,


y se utiliza para diagnosticar coagulopatas como el CID cuando el fibringeno
se encuentra en concentraciones deficientes. An si existe CID, es posible que
el tiempo de trombina se encuentre normal, aunque tambin podra ser alterado
por continua fibrinlisis.

Fibringeno:
Igualmente los niveles plasmticos se utilizan en la deteccin de CID,
donde pueden disminuir por accin de la trombina, formacin de fibrina y
activacin de la plasmina, la cual degrada la fibrina y el fibringeno. En casos
de CID crnica, los niveles de fibringeno pueden elevarse como respuesta
compensatoria a la patologa, por lo que el diagnstico no slo se basa en esta
prueba.

Productos de la degradacin de fibrina (PDF):

Este test provee evidencia de la fibrinlisis in vivo, cuyos productos


tienen propiedades antihemostticas que promueven la hemorragia, pudiendo
tratarse de una secuela a CID. Los kits basados en anticuerpos disponibles
para suero y plasma humano suelen presentar reaccin cruzada con sangre de
algunos animales domsticos. Una prueba positiva de PDF ocurre en animales
con fibrinlisis por iniciacin de CID, mientras que animales con fibrinogenlisis
suelen presentar alteraciones por envenenamiento.

Dmeros-D:

Los dmeros D son liberados como resultado de la degradacin de la


fibrina por accin de la plasmina, y tambin son utilizados en el diagnstico de
CID. Estos aparecen por la presencia de un cogulo estable de fibrina, niveles
altos son ms sensibles y especficos para la prueba de CID.

Prueba de PIAVK:

La prueba de protenas inducidas por la ausencia o antagonismo de la


vitamina K (PIAVK) es utilizada en el diagnstico de dficit de vitamina K.
Cuando los factores dependientes de vitamina K (II, VII, IX y X) se encuentran
deficientes, los resultados de la prueba se ven alterados hasta por 12 horas
ms que una prueba de TP prolongada.

Aglutinacin en solucin salina:

Se utiliza en el diagnstico de anemia hemoltica inmunomediada. Para


su realizacin se coloca una gota de solucin salina fisiolgica (0.9%) sobre un
portaobjetos, y sta se mezcla con una gota de sangre anticoagulada. Bajo
microscopio se observa la presencia de aglutinacin. Si est presente,
entonces se mezcla la muestra con una gota ms de SSF y se vuelve a
observar bajo microscopio. Si la aglutinacin desaparece, se considera una
probable reaccin secundaria a un proceso inflamatorio. Sin embargo, si
persiste la autoaglutinacin eritroctica, se detecta la reaccin inmunolgica
dirigida contra la superficie de membrana.
Bibliografa

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Vives, J. y Aguilar, J. (2014). Manual de Tcnicas de Laboratorio en


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