HOSPITAL UNIVERSITARIO DE LA SAMARITANA E.S.

E
BACTERIOLOGA Y LABORATORIO CLNICO

ARTCULO DE REVISIN EN BIOPSIA POR GRAMO DE TEJIDO

Alarcn Moreno Daniel, Molano Zambrano Camilo

RESUMEN

La Biopsia por gramo de tejido es una tcnica de elucidacin diagnstica a

travs de la remocin de tejido vivo para su posterior anlisis macro y
microscpico, como apoyo diagnstico est indicado para lesiones tisulares con
aparente sobreinfeccin por microorganismos de los que, no se puede establecer
si son saprfitos o patgenos, y que, mediante otros mtodos no ha sido posible
identificar.

A diferencia de las biopsias incisionales o excisionales; la biopsia por gramo de

tejido brinda como herramienta diagnstica un conteo de Unidades
Formadoras de Colonia de el microorganismo que se sospecha; est
afectando tisular o sistemticamente al paciente, al ser incubado en
distintas concentraciones, (diluciones) por lo general 1/10 , 1/100,1/1000
permite visualizar la viabilidad del microorganismo y ser indicativo de
gravedad y cronicidad patolgico en el paciente.

ABSTRACT

Biopsy per gram tissue is a diagnostic elucidation technique through the removal of
living tissue for subsequent macro and microscopic analysis, as diagnostic support
is indicated for tissue lesions with apparent superinfection by microorganisms that
hasn`t been established if are saprophytes or pathogens, and that by other
methods it has not been possible to identify.

Opposite of incisional or excisional biopsies; The biopsy per gram of tissue

provides as a diagnostic tool a count of Colony Forming Units of the microorganism
is suspected to be affecting tissue or systematically to the patient, when incubated
in different concentrations, (dilutions) usually 1/10, 1/100 , 1/1000 allows
visualizing the viability of the microorganism and will be indicative of severity and
pathological chronicity in the patient.
PALABRAS CLAVE
Biopsia, tejido, microorganismos,
diagnstico.
KEY WORDS
Biopsy, tissue, microorganisms, tissue damage, microorganisms, diagnostic support.
Introduccin
La flora cutnea propia de los tejidos
del cuerpo es constante, de baja
patogenicidad y no es comn
asociarlo a infecciones y su
composicin depende del sitio
anatmico correspondiente. (1) Las
infecciones de piel y tejidos blandos
son las que generan traumas
cutneos, fascias y msculo estriado
y, junto con las infecciones de vas
respiratorias, son las ms frecuentes
en clnica humana y de etiologa
variable (2)
El diagnstico microbiolgico
constituye una de las tareas de ms
compleja valoracin dentro del
laboratorio. Usualmente el
diagnstico de infeccin se remite a
los signos netamente clnico y no es
usual recurrir a un concepto
microbiolgico como mtodo
diagnstico de ste. Este ltimo se
reserva para los casos en que se
requiere conocer la etiologa de la
infeccin, debido a su gravedad, o
dao tisular, microorganismos, apoyo
porque se presuma la presencia de
microorganismos poco frecuentes,
comnmente asociado con pacientes
que presentan algn tipo de
inmunodepresin.
Ante la evidencia de una baja o nula
efectividad en los tratamientos, o si
bien se trata de heridas de largo
periodo de tiempo de evolucin de
las que no se evidencia un proceso
de cicatrizacin.
(3)Al tomar muestra, para la
realizacin del procedimiento
conocido como biopsia por gramo de
tejido, es importante tener en cuenta
que los cultivos de superficie de la
herida son el mtodo de diagnstico
ms simples, de bajo costo
adquisitivo, no invasivo y conveniente
para la mayora de las heridas
abiertas, de las que se sospecha
cursan con una sobreinfeccin de
importancia clnica.
En otros tipos de biopsia (4) no es
preciso indicar los organismos que
en realidad estn infectando la herida
dado que postulan que el grado y la
magnitud de la contaminacin
bacteriana se relacionan de forma
directa con el riesgo de sepsis a partir
de la infeccin (4), por esta razn los
mdicos prefieren realizar un cultivo
cuantitativo para determinar las
unidades formadoras de colonia
(UFC) por gramo de biopsia.
Estudios realizados entre los aos 70
y 80 en pacientes con cirugas
establecieron que la presencia de
ms de 105 bacterias por gramo de
tejido debe estar asociado a utilizando una aguja conectada a una
infeccin invasiva, a diferencia de
cuando el conteo de stas es menor
se adjudica a contaminacin del
medio, asociado a incorrectos
procedimientos en el momento de la
recoleccin de muestra, inoculacin,
siembra o incubacin de la biopsias,
esto basado en estudios diversos se
ha evidenciado en estudios
realizados en pacientes (1)
CONTEXTO GENERAL
La biopsia por gramo de tejido es
considerada una de las tcnicas ms
confiables como apoyo diagnstico
para determinar infeccin bacteriana,
de origen saprfito o patgeno.
(5) En general se define biopsia
como un procedimiento diagnstico
que consiste en extraer una muestra
de tejido que se sospecha est
cursando con un trauma cutneo, que
en su mayora tiene etiologa de
origen bacteriano.
Existen descritas, en el
procedimiento clnico varios tipos de
biopsias, (2) dentro de las que se
destacan, entre otras; la biopsia por
puncin, biopsia abierta, biopsia por
laparoscopia y biopsia por gramo de
tejido.
(7) Una biopsia por puncin tambin
conocida como biopsia percutnea,
es aquella en la que se extrae tejido
jeringa que hace las veces de tuvo
vaco, en esta se pasa la aguja varias
veces a travs del tejido que se va a
examinar. (8) El mdico utiliza la
aguja para extraer la muestra de
tejido. Las biopsias por puncin
utilizan herramientas radiolgicas y
de imgenes que brindan al mdico
una visualizacin correcta de la zona
para obtener una muestra idnea
para el procedimiento microscpico.
Una biopsia abierta se caracteriza por
la utilizacin de anestesia general o
local. El cirujano hace una incisin en
la zona afectada y extrae el tejido. (9)
La biopsia laparoscpica se destaca
porque se realizan una o varias
incisiones (cortes) quirrgicos, esto
es posible, por el uso de
laparoscopio, la laparoscopia ayuda a
guiar al cirujano al sitio adecuado
para tomar la muestra.
(10)En las anteriores biopsias crecimiento y proliferacin de
descritas, en laboratorio se procede microorganismos en la muestra.
a otorgar condiciones invitro que
permitan establecer, si , la muestra de (12) La biopsia por gramo de tejido,
tejido que llega al laboratorio es diferencia de las biopsias
referente de crecimiento bacteriano incisionales o excisionales; brinda
asociado a patologa, as pues, las como herramienta diagnstica un
biopsias( distintas de la tcnica por conteo de Unidades Formadoras de
gramo de tejido ) se siembran en Colonia de el microorganismo se
medios de cultivo enriquecidos que, sospecha est afectando tisular o
favorecern el crecimiento de sistemticamente al paciente, al ser
microorganismos de distintas incubado en distintas
caractersticas, morfolgicas y concentraciones, (diluciones) por lo
asociadas a fisiopatologas general 1/10, 1/100,1/1000 permite
oportunistas o propias de cada visualizar la viabilidad del
especie, as entonces, stas microorganismo y ser indicativo de
biopsias sern incubadas con un gravedad y cronicidad patolgico en
inculo y siembra por agotamiento a el paciente.
37 grados, en donde el Agar Sangre Las condiciones Invitro de incubacin
permitir evidenciar el crecimiento para una biopsia por gramo de tejido,
de microorganismos hemolticos, proporcionan al microorganismo
compatibles con formas de vida problema condiciones idneas para
bacteriana con afinidad positiva para crecimiento en distintas
la tincin de Gram, as mismo en el concentraciones , compartiendo los
agar macConkey se esperar medios de cultivo utilizados en otras
evidenciar, bajo las mismas biopsias ( tioglicolato, Agar Sangre y
condiciones la aparicin de un Agar MacConkey, ocasionalmente se
microorganismo Gram Negativo, utiliza Agar chocolate enriquecido
fermentador o no, al que se pueda con factores de crecimiento )
asociar el trauma cutneo del
paciente, para algunos autores PROCEDIMIENTO
como Robson (11) la implementacin
La biopsia de tejido debe ser obtenido
de Tioglicolato permitir evidenciar
por personal especializado segn
la viabilidad de la muestra, en un
protocolo y cumpliendo con las
medio enriquecido que
medidas de asepsia e inocuidad que
eventualmente servir de contraste
requiere ste procedimiento.
con los medios de cultivo donde se
espera una congruencia en el Mtodo microbiolgico
Muestra:
Deber seleccionarse una zona para
la realizacin de la biopsia como la
parte escara necrtica en el paciente
quemado, ulceraciones de pacientes
con pie diabtico, muestra de hueso
de pacientes con algn tipo de
implante esta debe ser una porcin
de tejido de 1 cm aproximadamente,
y ser almacenada y llevada al
laboratorio en tubo estril de tapa
rosca. (13)
Se determina el peso de la muestra
para el posterior clculo de las UFC
La muestra se macera y se inocula
directamente en un frasco con Caldo
Tioglicolato de10 cm3 a este se le
llamara tubo directo
En algunos casos se pesa la muestra
y se escinde en dos partes iguales.
Una de las partes se almacena para
la realizacin de un duplicado para la
corroboracin del resultado
Del tubo directo se toma muestra
para la realizacin de diluciones 1/10,
1/100 y 1/1000 para posteriormente
realizar la siembra en los medios
seleccionados (14)
Cultivo:
Una vez realizada la inoculacin se
proceder a agitar el frasco con el fin
de lograr la destruccin de la
organizacin tisular quedando libres
en el medio de cultivo los
microorganismos causantes de la
posible infeccin
Es preciso evitar una agitacin
excesiva pues esto podra daar
tambin al soma bacteriano de las
especies involucradas en la sepsis y
que se desea cultivar. (15)
Estas diluciones se siembran en
cantidad de 50l en medios de cultivo
slidos por la tcnica de siembra
masiva. (7)
Se emplearn los siguientes medios
de cultivo:
Agar Sangre de Carnero y
Chocolate (para conteo
total de bacterias aerobias
mesfilas).
Agar Mac Conkey (para
conteo de bacterias
coliformes).
En alguno casos se utiliza medios
selectivos para la identificacin de
microorganismos tales como
Agar Cetrimida (para
conteo de Pseudomonas).
Base preparada al efecto.
Agar Manitol Salado o
Medio 110 (para conteo de
Estafilococos y
Estreptococos).
Tiempo de incubacin: 48 horas.
Temperatura: 37C.
Atmsfera de 5 a 10% de CO2.
Se considerarn cultivos tiles para
conteo aquellos que presenten entre
30 y 300 colonias por placa
Discusin
Aunque el cultivo superficial es un
mtodo sencillo, barato, no invasivo y
til para la mayora de las heridas
abiertas. Varios autores cuestionan
este procedimiento puesto que la
microbiologa de la superficie de la
herida puede no reflejar exactamente
lo que ocurre en su profundidad,
adems de que se pueden aislarse
microorganismos de la flora comensal
del individuo e incluso
microorganismos patgenos que no
participan en la infeccin. Estudios
completos de biopsia de espesor con
la cuantificacin del nmero de
bacterias en la herida por quemadura
es el mejor mtodo para la
determinacin de invasin quemar la
herida (9). En la sepsis del paciente
quemado es una de las
complicaciones ms frecuentes,
fatales y difciles de combatir, de ah
que casi todos los esfuerzos en este
campo de la ciencia se hayan dirigido
a lograr mtodos cada vez ms
rpidos, eficientes y exactos para
diagnosticar precozmente tal
fenmeno.
(10) un estudio realizado en EEUU
determino Cuando se cultivaban, la
muestra se obtena con torunda en el
53,4% de los casos, con
torunda/biopsia en funcin del tipo de
herida en el 41,8%, y mediante
biopsia nicamente en el 4,3% de las
ocasiones. El hecho de que slo sea
un 4,3% lo convierte en el menos
usado siendo el ms usado el de
cultivo superficial
Siendo slo casos muy especiales
como los que nombras al comienzo
del documento los que llevan al
mdico a tomar este tipo de muestras
De manera general existen dos
variantes en tales mtodos: la
cualitativa y la cuantitativa, siendo
esta ltima la que ms adeptos ha
ganado debido a su confiabilidad y
precisin al extremo de que ya hoy en
da se ha establecido una cifra o nivel
crtico de microorganismos para
poder diferenciar la contaminacin de
la sepsis: 105 col/g de tejido
necrtico. (16) Para Antonio Moreno ,
el valor agregado en cuanto al apoyo
diagnstico de la biopsia por gramo
de tejido, es ; que la valoracin
microbiolgica de los cultivos, no se
limite a la emisin de un concepto
cualitativo, en el que slo se informa
la presencia o ausencia de
microorganismos en la muestra que
ha sido procesada bajo la tcnica de
biopsia por gramo de tejido, Moreno
propone una herramienta aritmtica
para generarle un valor cuantitativo a
este, cultivos cualitativos evalan la
flora presente en las heridas con
infeccin clnica o que no cicatrizan Conclusiones
adecuadamente. Proveen informacin
Es necesario la implementacin
sobre la diversidad de
de un protocolo bajo estndares
microorganismos existentes y sobre
internacionales para la realizacin
la posibilidad de sinergia entre ellos.
del procedimiento.
Los cultivos semicuantitativos y
En Colombia se realizan pocos
cuantitativos ofrecen informacin
reportes a nivel local, generando
acerca de la densidad o carga
un vaco informativo que permita
bacteriana de la herida conocer estos
evidenciar la situacin actual
datos es de suma importancia como
generalizada de la efectividad y
un indicativo de la gravedad y
eficacia de la biopsia por gramo
cronicidad patolgico en el paciente.
de tejido como apoyo diagnstico
(8) a travs de la cual se podr
en el territorio colombiano, por
evidenciar un valor cuantitativo de
consiguiente es necesario la
las unidades formadoras de colonia
unificacin de los resultados para
presente en los cultivos y diluciones
arrojar un panorama nacional de
de la muestra, permitiendo as
este evento.
otorgar al personal mdico un
Es necesario ampliar las polticas
resultado mucho ms vers y
pblicas que permitan el control y
certero, que permita dar un apoyo
la implementacin de la biopsia
diagnstico y establezca un
por gramo de tejido, de manera tal
indicativo tanto cualitativo como
que se consolide como un mtodo
cuantitativo de gravedad y cronicidad
de apoyo diagnstico de rutina por
patolgico en el paciente.(16)
excelencia para dao tisular y
otras patologas del mbito
clnico.
Se deduce de los resultados de
las estudios reportados que para
aumentar la rentabilidad de la
prueba es necesaria aumentar de
forma moderada el nmero de
tomas, sobre todo a expensas de
las patologas cutneas y
obtencin de lquidos corporales
entre otros.

Referencias
1. Montoya J, Ferro C. Flebtomos
(Diptera: Psychodidae) de Colombia.
En: Amat G, Andrade MG, Fernndez
F, editores. Insectos de Colombia.
Volumen II. Coleccin Jorge lvarez
Lleras No. 13. Academia Colombiana
de Ciencias Exactas, Fsicas y
Naturales. Santa Fe de Bogot:
Centro Editorial Javeriano; 1999.
p.211-45.
2. Krizek T, Robson MC. Biologa de
la infeccin quirrgica. Clin Quir Nort
1975; 55: 1267.
3. Artz CP. The Treatment of burns.
2ed. Philadelphia: Saunders, 1969:
295.
4. Alexander JW, Mc Millan BG.
Infecciones en las quemaduras En:
Bennett JV, Brachman PS.
Infecciones hospitalarias. La Habana:
CientficoTcnica. 1982: 455. partes
5.Silva LC. Mtodos estadsticos para
la investigacin epidemiolgica.
Espaa: Argitalpara 1988; 167.
6..Vliz Ramis M, Sedano Gutirrez
C, Yan Bacallao R, Casado Collado A.
Sensibilidad y especificidad de
estudios microbiolgicos de
quemaduras. Anlisis bayesiano. Rev
Cub Invest Biomed 1989; 8(12):
14856.
7. Bowler PG, Duerden BI, Armstrong
DG. Wound microbiology and
associated approaches to wound
management. Clin Microbiol Rev
2001; 14:244-269.
8. Breidenbach WC, Trager S.
Quantitative culture technique and
infection in complex wounds of the
extremities closed with free flaps.
Plast Reconstr Surg 1995; 95:860-
865
9.Burillo A, Moreno A, Salas C.
Diagnstico microbiolgico de las
infecciones de piel y tejidos blandos.
Enfermedades Infecciosas y
Microbiologa Clnica.
2007;25(9):579-586.
10. Aburto I. Microbiologa de las
heridas y toma de cultivo. Medwave.
2011; 11(01).
11. Barbern JCarmen Farias M.
Tratamiento con daptomicina en las
infecciones complicadas de piel y
blandas. Enfermedades
Infecciosas y Microbiologa Clnica.
2012;30:33-37.
12. Diagnostico Microbiologico
[Internet]. Google Books. 2016 [cited
30 october 2016]. Available from
13. Heggers J, Robson M, Doran E.
Quantitative assessment of bacterial
contamination of open wounds by a
slide technique. Transactions of the
Royal Society of Tropical Medicine
and Hygiene. 1969;63(4):532-534.
14. Krizek TRobson M. Evolution of
quantitative bacteriology in wound 16. Tratado SEIMC de Enfermedades
management. The American Journal Infecciosas y Microbiologa Clnica.
of Surgery. 1975;130(5):579-584. 2006 [cited 20 october 2016].

15. Pie diabetico: estudio 17. MULTIMED | Revista Mdica

bacteriologico por cultivo de biopsia [Internet]. Multimedgrm.sld.cu. 2016
del tejido periulceroso. (Article, 2002) [cited 6 September 2016].
[WorldCat.org] [Internet].
Worldcat.org. 2016 [cited 10
November 2016].