Clase XVI

El endosoma es un organelo encargado de endocitar una seal proveniente del

medio extracelular. En el caso de la endocitosis de la LDL (Low Density Lipoprotein),
encargada de transportar el colesterol a travs de la sangre, la molcula seal y su protena
receptora de membrana van a tener distintos destinos dentro de la clula. La LDL va a parar
en el lisosoma donde es degradada por las diferentes enzimas para obtener colesterol,
componentes de la LDL y diferentes monmeros (que luego van a ser utilizados en vas de
sntesis por parte de la clula), mientras que el receptor de LDL va a ser reciclado de vuelta
en la membrana plasmtica para ser reutilizada, donde se asocia nuevamente a las fosas
recubiertas por clatrina que van a permitir una nueva invaginacin del complejo seal-
receptor. Cuando falla este mecanismo de endocitosis mediada por receptor se producen
patologas como la hipercolesterolemia (niveles elevados de colesterol en la sangre), al no
poder entrar el colesterol a la clula por falta de clatrina (encargado de la formacin de la
vescula en la endocitosis), o la aterosclerosis (endurecimiento de las arterias) provocada
por la ausencia parcial o mal funcin de los receptores de membrana para la lipoprotena.

Otro ejemplo de endocitosis mediada por receptor es el de las transferrinas, que

son las protenas que transportan los iones fierro (Fe3+) a nivel del suero hacia las clulas.
Cuando la ferrotransferrina (se denomina as cuando porta los iones fierro y
apotransferrina cuando no los porta) se endocita, es dirigida dentro de la clula por medio
de un endosoma temprano hasta que se convierte en tardo (la gran diferencia entre estos
dos es que el primero conserva un pH similar al medio extracelular, mientras que el tardo
se acidifica hasta aproximadamente un pH 5,0) y se liberan los iones de la ferrotransferrina
hacia el endosoma y luego hacia el citosol. Despus de esto se lleva la apotransferrina
(an ligada a su receptor) hacia la membrana plasmtica, donde la diferencia de pH va a
provocar la separacin de sta de su receptor, quedando la ltima apta para endocitar una
nueva transferrina. Entonces a pH neutro (7,0) la ferrotransferrina es reconocida por su
receptor, en cambio a este mismo pH la apotransferrina, que ya no porta el fierro, es
liberada por su receptor. Dentro del endosoma, a pH cido (5,0) la apotransferrina sigue
unida a su receptor, pero el fierro es liberado y sacado del organelo hacia el citoplasma.
 Las macromolculas endocitadas son clasificadas en el endosoma junto con sus
receptores. El endosoma tiene tres posibilidades:

1. Reciclar el material,
devolvindolo a la membrana
apical de donde se obtuvo por
endocitosis.

2. Degradar el material a travs

de vesculas que se unen al
lisosoma

3. La transcitosis, donde el
material endocitado cambia de
dominio de membrana (por
ejemplo, que ingrese a nivel de
la membrana apical y viaje
hasta la membrana basolateral)
sin ser modificado y sin ser
utilizado por la clula.

Un ejemplo de este ltimo es lo

que sucede con la
inmunoglobulina G (IgG),
componente importante de la
leche materna en los roedores, en
las clulas epiteliales del
intestino de ratas recin nacidas.
Estas clulas presentan una
expresin alta de receptores para
la IgG, que las captan a nivel del
lmen intestinal, y las transportar
a travs de toda la clula hacia el
intersticio y luego a la sangre.
Un caso similar ocurre con la
IgG en la vida fetal humana.
Transcitosis de la Inmunoglobulina G en clulas intestinales de roedores Nosotros recibimos este
anticuerpo antes de nacer, a
diferencia de los roedores, a nivel de las clulas del intersticio del trofoblasto (grupo de
clulas que rodean la capa externa del blastocito que separa la sangre materna de la sangre
fetal), donde se cree que la inmunoglobulina se pinocita y dentro del endosoma se
encuentra con su receptor, que guiara la macromolcula por una va de transcitosis hacia el
otro lado de la clula.
 Un ejemplo de reciclaje, regulado por una seal extracelular, es el de los
transportadores de glucosa. Estos son guardados dentro de la clula en vesculas dentro
del citosol, hasta que llega la seal hormonal (insulina) al receptor, donde se produce la
cascada de sealizacin, que gatilla la movilizacin de las vesculas con el transportador
hacia la membrana celular para reducir el nivel de glucosa a nivel sanguneo. Una vez que
baja su nivel en la sangre se endocitan los transportadores, la vescula endocitada se
clasifica y se fusiona con un endosoma mayor para ser reutilizadas en una nueva llegada de
la seal.

Reciclaje de los transportadores de glucosa

La digestin intracelular ocurre a nivel de los lisosomas, que son organelos que
poseen un conjunto de enzimas hidrolticas cidas (funcionan mejor a pH cido) que
digieren todo tipo de componentes orgnicos, por lo cual estas deben poseer una bomba
(dependiente de ATP) que introduce permanentemente protones a su interior que mantienen
un pH igual a 5. Las enzimas lisosomales son clasificadas en el golgi (agrupa las enzimas
glicosiladas con manosa 6-fosfato provenientes del RE), para luego ser transportadas en
vesculas hacia los lisosomas, donde un receptor especfico reconoce el oligosacrido con el
cual se marc a estas enzimas y permite la entrada de estas al lisosoma.
 Al lisosoma pueden llegar materiales extracelulares (material endocitado que luego
es llevado hacia el lisosoma) o bien organelos inservibles de la propia clula, que ella
misma ha clasificado como inservibles, y que son llevados a travs de vesculas hacia el
lisosoma para ser digeridos (como por ejemplo una mitocondria o un cloroplasto que deja
de funcionar). La membrana lisosomal es bastante peculiar, ya que adems de poseer
transportadores para mantener el pH interno, necesita una gran cantidad de transportadores
especficos para sacar hacia el citosol los monmeros formados luego de la digestin
(aminocidos, azucares sencillos y nucletidos; los cidos grasos, el colesterol, y otros
lpidos van a poder fluir libremente a travs de la membrana), que luego sern utilizados
por la misma clula en vas metablicas. La membrana del lisosoma se caracteriza adems
por tener un alto grado de glicosilacin que permite defenderse de las mismas enzimas que
posee. El oligosacrido, al ser polar, atrae una gran cantidad de agua que genera una barrera
o un colchn de proteccin qumica que impide que las enzimas degraden su
membrana. Si por alguna razn la membrana lisosomal se rompe y su contenido se vierte
sobre el citoplasma; las enzimas se inactivan, debido a que el pH citoslico es neutro, por lo
que la clula se salva de la degradacin de sus componentes. Sin embargo, si la ruptura
lisosomal es masiva, la clula no alcanza a defenderse y se produce una autodigestin.
Existen patologas asociadas a la ruptura de los lisosomas que se provocan, por ejemplo,
por una acumulacin de materiales sin digerir dentro del organelo. Esto es producido
debido a que la enzima encargada de digerir el compuesto no presenta la glicosilacin de
manosa 6-fosfato que permite su reconocimiento y entrada al lisosoma. Incluso pueden
existir casos que el lisosoma no posee las enzimas hidrolticas ya que no son reconocidas a
nivel de membrana.

Ruta de la enzima desde el RE o el medio extracelular hasta el lisosoma

Formacin de los lisosomas. Las enzimas lisosomales glicosiladas por el retculo

endoplasmtico son reconocidas por el golgi por medio de un receptor especfico que
reconoce la manosa 6-fosfato, para luego agrupar a todas las enzimas que contengan este
marcador y formar la vescula que luego constituir un nuevo lisosoma. La vescula se
forma por la polimerizacin de la clatrina, que luego se va a desensamblar para dejar a la
vescula sin cubierta para que llegue al endosoma y sea clasificada. Los receptores de las
enzimas son devueltas al aparato de golgi y las enzimas se juntan para formar el lisosoma.
Existe un segundo mecanismo para la formacin de lisosomas que se produce cuando la
clula fagocita las enzimas lisosomales del medio extracelular. El aparato de golgi puede
exocitar las enzimas hidrolticas y presenta en la membrana celular receptores para stas.
En este caso la ruta seguida sera muy parecida, ya que el material endocitado ira
igualmente al endosoma donde sera clasificado, separado del receptor de membrana (que
seguira su camino devuelta al golgi o a la membrana plasmtica), para luego ser
transportado en una vescula para la formacin del lisosoma. Este segundo mecanismo de
transporte de enzimas hacia el lisosoma se ha evidenciado en fibroblastos (tipo de clula del
tejido conectivo que sintetiza fibras y mantiene el medio extracelular de tejidos de mucho
animales) de pacientes con enfermedades lisosomales. Cuando estos fibroblastos son
crecidos en un ambiente con enzimas lisosomales en el medio extracelular, son capaces de
recuperar la actividad del lisosoma al endocitar estas enzimas y transportarlas hacia ella.

Existen entonces tres rutas o formas de enviar material para degradar hacia el
lisosoma:

1. La primera ruta, que es la clsica, es la endocitosis donde el endosoma clasifica y

enva parte del material a ser degradado al lisosoma (Ej.: LDL).

2. La segunda ruta es la fagocitosis, donde un fagocito traga otra clula (formndose

un fagosoma) para destruirla envindola al lisosoma, producindose una vescula
gigante llamada fagolisosoma que necesita de prcticamente todo el contenido del
lisosoma para degradar el contenido.

3. Y la tercera es la autofagia, que se provoca cuando existe material celular

deteriorado o inservible, por ejemplo una mitocondria envejecida o que ha dejado
de funcionar, que expresa a nivel de su membrana algunos marcadores que permiten
su reconocimiento para que a nivel del retculo endoplasmtico se forme una
vescula que la rodee (formndose un autofagosoma) y la lleve a unirse al lisosoma
para ser degradada.

Rutas de degradacin de materiales

Mitocondria:
 Es un organelo encargado de la
obtencin de energa y donde ocurre el
proceso de respiracin celular. Se
caracteriza por su doble membrana (interna y
externa) y por los pliegues que va a formar la
membrana interna (crestas mitocondriales)
que aumentan su superficie, especialmente
importante para el proceso de fosforilacin
oxidativa que se lleva a cabo en ella. Se
definen dos espacios dentro de la membrana: la
matriz mitocondrial (que es lo que encierra la
membrana interna) y el espacio
intermembrana (que es el espacio que se
forma entre la membrana interna y externa).

El nmero de mitocondrias dentro de una clula puede variar dependiendo del tipo
celular o la necesidad de ATP que esta posea. La mitocondria puede aumentar su nmero,
al igual que en las bacterias, por un proceso de fisin binaria (crece y luego se invagina), o
disminuir su nmero fusionndose entre s y generando mitocondrias de mayor tamao.
Las mitocondrias se suelen localizar cerca de los sitios de gran utilizacin de ATP (por
ejemplo, cerca de los sarcmeros en una fibra muscular o cerca del flagelo en los
espermatozoides).

La membrana externa de la mitocondria se caracteriza por ser altamente

permeable, debido a la presencia de porinas que generan poros hidroflicos que dejan pasar
una gran cantidad de molculas. En esta membrana se ubican tambin protenas
metabolizadoras de lpidos, que son capaces de metabolizar lpidos para que puedan entrar
a la mitocondria, para luego obtener energa de su oxidacin. El espacio intermembrana
(en composicin) se parece mucho al citoplasma debido a la presencia de porinas y pH
similar (7,2). La caracterstica principal del E. Intermembrana es la presencia de enzimas
que utilizan ATP para fosforilar nucletidos como el GTP, en donde las molculas de GDP
ingresan desde el citosol por la membrana externa hacia el espacio intermembrana para ser
fosforiladas y convertidas en GTP. La membrana interna, a diferencia de la externa, es
altamente selectiva en el paso de distintas molculas y es impermeable a iones (en la
membrana interna no hay porinas). En esta membrana se encuentran una gran cantidad de
protenas especficas que le van a dar una condicin selectiva a la membrana, permitiendo
el paso solo a aquellas molculas para las cuales existe la protena. La membrana posee una
gran superficie debido a los pliegues que forma denominados crestas, y en ella van a estar
las ATP sintasas (responsable de la sntesis de ATP) y todas las protenas que conforman el
complejo de la cadena transportadora de electrones. En la matriz mitocondrial se
encuentra el ADN mitocondrial (circular, de las cuales se transcriben algunas subunidades
de protenas), los ribosomas mitocondriales y el ARN de transferencia, y que le permiten a
la mitocondria sintetizar algunas de las protenas necesarias para su funcionamiento,
mientras que la clula tambin le aporta protenas sintetizadas en el citosol que van a llegar
a la matriz por medio de un canal de translocacin (TIM y TOM) que va a atravesar las dos
membranas mitocondriales. En la matriz se encuentran adems todas las enzimas
encargadas del ciclo de krebs (ciclo del cido ctrico) y de la oxidacin del piruvato y
cidos grasos.
 La mitocondria no es el nico lugar
de sntesis de ATP. En una clula animal
tambin hay sntesis de ATP a nivel del
citosol por una va metablica denominada
gluclisis. En este proceso, una molcula
de glucosa (6 Carbonos) es metabolizada
hacia dos molculas de piruvato (3C),
generando 4 molculas de ATP (aunque en
el proceso se consumen 2 ATP por lo que la
produccin neta por molcula de glucosa
seran 2 ATP) y adems 2 NADH
(Nicotinamida Adenina Dinucletido
hidrogenada) que es una molcula muy
importante por su gran poder reductor. Sin
embargo, la energa que produce la
gluclisis no es suficiente para todos los
procesos celulares que necesitan ATP, es
por eso que esta va metablica va a
continuar dentro de la mitocondria. El
piruvato entra a la mitocondria y dentro de sta es oxidado a nivel de la matriz mitocondrial
hacia Acetil Coenzima-A (2C) y se contina con la produccin de energa dentro de la
mitocondria. Este es un metabolito muy importante para la produccin de energa debido a
que es el punto en comn de las tres grandes vas de produccin de energa: oxidacin
de azcares y polisacridos a azcares sencillos dentro de la clula (Glucosa Gluclisis
Piruvato Acetil Co-A); pero tambin podemos obtener energa a travs de la
oxidacin de grasas, que son llevadas a cidos grasos ms sencillos y que entran
igualmente a la matriz mitocondrial para ser transformadas en acetil Co-A por enzimas
encargadas de la oxidacin de cidos grasos; y cuando no tenemos reserva de azcares ni de
lpidos, podemos degradar protenas y los aminocidos, por medio de las transaminasas,
pueden llegar a la formacin de piruvato y unirse a la misma ruta metablica de los
azcares.

El acetil Co-A luego entra al ciclo de krebs y producto de todas las oxidaciones que
van a ocurrir dentro de la mitocondria, en esta se produce la sntesis principal de ATP en la
clula. El acetil Co-A es entonces el sustrato que entra en el ciclo del cido ctrico y se
combina con el oxalacetato (4C) para formar el primer componente del ciclo que es el
citrato (6C). Al final de este ciclo se genera el oxalacetato y se puede reutilizar para
combinarse con otra molcula de Acetil Co-A. Durante este proceso se pierden dos
carbonos en forma de CO2, en un paso que se denomina descarboxilacin (donde fluje
libremente fuera de la mitocondria hacia el citosol y donde es eliminado por respiracin
pulmonar), y tambin se produce la desfosforilacin de los compuestos con la generacin
de un GTP, adems tres molculas de NADH y un FADH2 (molculas que en su estado
reducido presentan un electrn de alta energa, por lo cual son entregados muy fcilmente a
un receptor). Luego del ciclo de krebs estas dos molculas van a ir a entregar estos
electrones de alta energa a la cadena transportadora de electrones a nivel de la
membrana interna, que corresponden a tres complejos. Los electrones parten la cadena
transportadora con alta energa, a medida que van pasndola esta energa se va perdiendo
(en realidad se est utilizando para generar una gradiente de protones, bombendolos desde
la matriz mitocondrial hacia el espacio intermembranoso, y otra parte se libera como
energa calrica). El gradiente de protones que se forma lo aprovecha la ATP sintasa,
ubicada a nivel de la membrana interna, para realizar la sntesis de ATP a partir de ADP y
fsforo inorgnico con la energa que se genera al pasar los protones hacia la matriz
mitocondrial. Los electrones que son transportados por la cadena llegan a un ltimo
aceptor de estos electrones que es el oxgeno, que capta los electrones para formar agua.
 En algunos tejidos especializados como la grasa parda existe en la membrana
interna de la mitocondria una protena denominada termogenina que acta como
desacoplante, la cual permite la vuelta de los protones hacia la matriz mitocondrial
disipando la gradiente provocada por la cadena transportadora de electrones. Al producirse
esto, la cadena transportadora tiene que trabajar mucho ms para compensar el gradiente, lo
que va a generar que la produccin de energa calrica provocada por el paso de protones a
travs del complejo sea mayor. Entonces, la grasa parda es un tejido especializado que
genera ms calor que las otras clulas, debido a que la cadena transportadora de electrones
ubicada en sus mitocondrias (que dicho sea de paso son ms numerosas) trabaja el doble o
incluso el triple. Este tipo de tejido se encuentra, por ejemplo, en los bebs o en los
animales que hibernan, ya que la generacin de calor y la mantencin de la temperatura
corporal en ellos es un proceso muy relevante. La diferencia entonces entre un adipocito
normal y uno de la grasa parda radica en el nmero de mitocondrias que poseen (mayor
nmero en la grasa parda) y que el principal componente que se ve, a diferencia del
primero, no son las inclusiones de lpidos. Adems, la cadena transportadora de las
mitocondrias posee algunos iones metlicos, tienen un cierto pigmento y, por lo tanto, estos
adipocitos (debido a la gran cantidad de mitocondrias) se ven ms pardos que un adipocito
normal.

El primer complejo de la cadena transportadora de electrones es la NADH

deshidrogenasa, que recibe los electrones del NADH (que al hacer esto se oxida en
NAD+). Los electrones saltan dentro de los componentes del primer complejo hacia la
ubiquinona, que es una protena que difunde en la membrana interna de la mitocondria, y
lleva los electrones hacia el segundo complejo que es el del citocromo b-c1. Este complejo
realiza lo mismo con los electrones (los transporta dentro de sus componentes) y luego se
los pasa a otra protena ubicada en la membrana (ubicada hacia el espacio intermembrana)
que es el citocromo c, para luego esta entregrselos al ltimo complejo de la cadena que es
el de la citocromo oxidasa que es la encargada de entregarle los electrones a la molcula
de oxgeno para que se reduzca a agua.
 Cuando ocurre el traspaso de electrones, por medio del NADH, en los diferentes
complejos (que se encuentran del lado de la matriz), stos van a ir acompaados de
protones al tratarse de protenas transmembrana, ya que no son capaces de recibir el
electrn solo, y estos protones van a ser enviados desde la matriz hacia el espacio
intermembrana. Lo que hace el protn es igualar la carga para que la protena pueda
transportar los electrones a travs de la cadena. Los componentes que estn del otro lado de
la membrana (citocromo c) tienen en su estructura tomos de fierro que permiten el paso y
transporte de electrones sin tener que estar acompaados de un protn. El paso de protones
a travs de la matriz al espacio intermembrana genera un gradiente, que luego va a
aprovechar la ATP sintasa para sintetizar ATP, tambin genera un potencial de membrana al
interior de la matriz mitocondrial, y adems una diferencia de pH entre los dos espacios que
puede llegar a ser de un punto (app 7,2 en el espacio intermembrana y 8,0 en la matriz
mitocondrial).

El FADH2 a diferencia del NADH entrega sus electrones ms tarde dentro del
complejo de la cadena transportadora (casi en el final), y por lo tanto por cada electrn que
se transporta existe una menor cantidad de protones que pasan al espacio intermembrana.
Esto genera que la cantidad de ATP que se puede sintetizar con el gradiente generado por el
FADH2 es de 2 molculas, en cambio con el NADH, que entrega sus electrones al comienzo
de la cadena transportadora, genera un gradiente de protones para sintetizar 3 ATP.

La ATP sintasa tiene una estructura compleja con

dos subunidades. La subunidad F0 es la que se encuentra
insertada en la membrana interna de la mitocondria y la que
permite el paso de vuelta de los protones hacia la matriz
mitocondrial, lo que provoca un cambio conformacional que
hace rotar esta subunidad y a la vez produce la movilizacin
de la subunidad F1 (subunidad cataltica expuesta hacia la
matriz) donde se realiza la sntesis de ATP a partir de ADP y
fsforo inorgnico.

Esta ATP sintasa puede actuar de dos formas:

1. Realizando la sntesis de ATP aprovechando el

gradiente electroqumico de protones (acta como enzima).

2. O de forma inversa hidrolizando ATP para bombear protones hacia el espacio

intermembrana, en contra de su gradiente electroqumico.

La gradiente electroqumica de protones que

se genera no es utilizada exclusivamente por la ATP
sintasa. Existe una serie de otros transportadores
que pueden utilizar esta gradiente de protones
(generado por energa qumica a nivel de los
transportadores de electrones), que es importante
tanto a nivel de las mitocondrias como de las
bacterias aerobias, y tambin es importante en los
cloroplastos y las bacterias fotosintticas donde
existe una energa lumnica que genera el gradiente.
Entonces la gradiente que se genera puede ser
utilizada para un transporte acoplado a travs de una
protena transportadora, ya sea un simporte o un
antiporte. Incluso, este gradiente se puede utilizar en la rotacin del flagelo por parte de una
bacteria, utilizando el mtodo de rotacin similar al que ocurre con la ATP sintasa.
 El transporte activo acoplado utilizando la gradiente electroqumica de protones se
ve reflejada en la matriz con el transporte de algunos metabolitos importantes que se
necesitan dentro, por ejemplo, el simporte de piruvato a travs de la membrana interna o el
simporte de fsforo inorgnico hacia la matriz para la sntesis de ATP. En ambas se utiliza
la diferencia de concentracin de protones para llevar a cabo el transporte. En el caso del
antiporte de ADP-ATP, se utiliza el potencial de membrana generado al acumular cargas
positivas en el espacio intermembrana para mediar el transporte de molculas de ADP 3-
hacia la matriz (para ser utilizadas por la ATP sintasa para la sntesis de ATP) y molculas
de ATP4- desde la matriz. Al ser la molcula de ATP ms negativa, se puede producir el
antiporte ya que se contrarrestaran las cargas positivas del espacio intermembranoso (este
transporte activo es independiente de concentracin).