UNIVERSIDAD SAN PEDRO

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE
FARMACIA Y BIOQUMICA

CURSO : Anlisis

Clnico II

TEMA : Dosaje de amilasa por

sustrato residual

DOCENTE : Q.F. Dr. MSc. Rafael

Camones Diomedes M.

ESTUDIANTES :
Castro Chvez Milenka
Cueva Julca Emerson
Holguin Moncada Jossely
Huancas Herrera Vanessa
Morales Castro Juliet
Ramrez Guerrero ngela
Ruiz Aguirre Claudia
Trujillo Rubina Aarn
CICLO : IX
Chimbote Per

2017
 DOSAJE DE AMILASA POR SUSTRATO RESIDUAL

I. INTRODUCCIN

La amilasa, producida principalmente en el

pncreas exocrino y en las glndulas salivales,
escinde los enlaces -1-4 glucosdicos de los
polisacridos (almidn y glucgeno). Se
encuentra elevada en el suero de pacientes con
pancreatitis aguda alcanzando los valores ms
elevados entre las 24 y 30 horas posteriores al
ataque, declinando luego para volver a los
niveles normales entre las 24 y 48 horas
siguientes.

Tambin se ve aumentada en este caso la excrecin urinaria de la enzima,

persistiendo la hiperamilasuria 3 a 5 das, luego de que la actividad srica ha
alcanzado los niveles normales. Adems es posible encontrar valores aumentados
en cualquier caso de "abdomen agudo" o intervencin quirrgica en regiones
prximas al pncreas. La parotiditis bacteriana y paperas se asocian tambin con
elevaciones en los niveles de amilasa srica.

II. OBJETIVOS

Determinar los valores de amilasa srica en suero.

Correlacionar los valores obtenidos con los valores de referencia.

III. MATERIALES

Material biolgico

Sangre venosa

Reactivos

A: solucin de almidn 500 mg/l, tamponada a pH 7 con buffer fosfatos 0,1

mol/l en NaCl 0,15 mol/L.
 B: solucin 0,01 eq/l de iodo en cido clorhdrico 0,02 mol/l.

Material de laboratorio:

Agujas Nro. 21

Tubos de ensayo

Bao mara

Centrifugadora

Micro pipeta

Pipetas graduadas

Espectrofotmetro

Algodn

Torniquete

Alcohol 70

Gradillas

Para film

Agua destilada
IV. MTODOS Y PROCEDIMIENTO

1. Obtencin de la muestra de sangre.

Preparar los elementos necesarios

Identificar al paciente y explicarle el procedimiento que se va a realizar. Pedirle

que siente o se recueste.

Lavar las manos de acuerdo al procedimiento establecido y colocarse los

guantes

Ubicar el sitio que se va a punzar para que la vena sea ms visible.

Localizar la vena mediante inspeccin. Pedirle al paciente que abra y cierre su

puo.

Desinfectar el rea que se va a punzar con el algodn y el alcohol.

Punzar la vena en direccin contraria al flujo sanguneo. Retirar el compresor

cuando la sangre empiece a brotar. Conectar el tubo de recoger la sangre

Sacar la aguja y aplicar presin suave.

Colocar un apsito en el sitio que fue punzado.

Etiquetar los tubos.

Desechar el material usado

Lavar las manos nuevamente.

Registrar el procedimiento en los formatos designados.

2. Centrifugamos la muestra por 15 minutos.

3. Despus de haber separado el suero, se los aade en 2 tubos en los

cuales se les va a agregar los reactivo A y B.

En dos tubos C (control) y D (desconocido) colocamos 1 ml de reactivo A y

llevamos a bao mara (37) por unos minutos.
 Luego agregamos 20 ul del suero de la muestra al tubo D e incubamos a
37C.

A los 7 minutos y medio exactos agregamos 1ml del reactivo B a ambos

tubos, mezclamos por agitacin suave y llevamos a bao mara.
 Retiramos de bao mara, agregamos 8ml de agua destilada a ambos tubos y
mezclamos por inversin.

Llevamos a leer al espectrofotmetro a 640 nm.

V. CLCULOS Y RESULTADOS

CD
Amilasa (UA /dl )= x 1000
C

DATOS DE LABORATORIO:
C = Control
C = 0,265nm
D = 0,201nm D=
Desconocido

0,2650,201
x 1000
Amilasa (UA/dl) 0,265
 Amilasa (UA/dl) = 242

INTERPRETACIN DE RESULTADOS:

Segn los valores de referencia de la muestra en suero de la ficha informativa, el

paciente presenta un cuadro de Parotiditis que sus valores oscilan entre: 200 a 350
UA/dl.

VI. DISCUSIONES

En cuanto al tiempo de centrifugacin, normalmente es 3500 revoluciones

por minuto (rpm) en 5 minutos. Y debido a la antigedad del equipo, se hizo
en ms tiempo pero an as, no hubo una buena separacin del suero con el
plasma.

El paciente no presentaba antecedentes de haber tenido enfermedades

relacionadas con la elevacin de amilasa, incluso se le vea con buen estado
de salud. Lo ms probable es que haya habido un error en el proceso de
manipulacin de los reactivos. Adems no fue por mucha la diferencia,
justificndose con sta nuestra inexperticia como estudiantes.

VII. CONCLUSIONES

En el tubo C observamos una coloracin ms intensa, esto se debe a que no

hay amilasa presente, al no haber esta enzima el iodo reacciona con todo el
almidn del reactivo A.

En el tubo D la coloracin no es tan intensa, ya que el almidn tamponado

se incuba con la muestra producindose la hidrolisis enzimtica. Esta
hidrolisis se detiene al agregar el reactivo B compuesto por iodo y cido
 clorhdrico, donde el cido clorhdrico va a tener la funcin de desnaturalizar
la enzima (amilasa) y el iodo va a reaccionar con el remanente de almidn
no hidrolizado.

ENZIMA + SUSTRATO = PRODUCTO +

ENZIMA

AMILASA + ALMIDN = GLUCOSA +

ENZIMA

VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

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