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Resumen.
La cromatografa es un mtodo fsico de separacin de componentes formado por una fase
mvil y otra estacionaria. ste mtodo permite determinar el grado de pureza de un
compuesto, comparar muestras y determinar la polaridad a partir de la forma en las
sustancias corren por la placa. La fase estacionaria est formada por una capa adsorbente
extendida sobre una placa de vidrio y la muestra a analizar se coloca cerca del borde de la
superficie adsorbente en forma de una pequea mancha circular y posteriormente se
sumerge ste borde de la placa en el eluyente. Existen varias formas de determinar dnde
se encuentran situadas las manchas del compuesto cuando estas no son visibles, estos
mtodos son revelado ultravioleta y revelado con yodo; con esto es posible determinar el Rf
el cual es la relacin entre las distancias recorridas por el compuesto y por el eluyente.
Cuando ste toma un valor entre 0.3 y 0.5 el eluyente es adecuado para la muestra. De
acuerdo con los resultados obtenidos se observa que cuando la concentracin aumenta el
tamao de la mancha y la distancia recorrida tambin lo hacen y cuando hay impurezas se
pueden observar varias manchas o puntos correspondientes a distintos compuestos,
mientras que cuando la muestra es pura hay un nico punto. Para la identificacin parcial
se emple cafena y se realiz la prueba en dos distintos eluyentes observando que el que
proporciona una mejor separacin es el acetato de etilo; para poder comprobar que el
compuesto separado fuera el mismo se compararon los Rf obtenidos observando que
tenan el mismo valor .
Fue as como en esta prctica se logr determinar cmo influye la concentracin de la
muestra en ste tipo de cromatografa, determinar cundo una muestra es pura, as como
identificar un compuesto presente en la muestra a partir de la forma que corre en la placa
comprobndolo a travs del Rf
Antecedentes.
Imagen 1.
Determinacin de Rf
Para poder determinar la posicin en donde se hallan situadas las zonas o manchas
del compuesto cuando estas no son visibles es posible emplear mtodos como:
a. Revelado ultravioleta: cuando se emplea una lmpara UV,
cualquier material orgnico que contenga un cromforo UV (una parte de la
molcula que absorba la radiacin UV) aparecer sobre la placa como una
mancha oscura sobre un fondo luminoso. La mayora de los adsorbentes de
CCF contienen un compuesto fluorescente, que cuando se expone a la
radiacin UV aparece como fondo luminoso. Teniendo en cuenta que el
material orgnico se deposita sobre la superficie del adsorbente, si tiene un
cromforo UV, actuar como una sombra o cortina que evitar que la
radiacin UV alcance la superficie del adsorbente.
.
Discusin.
De acuerdo con los resultados obtenidos en esta prctica se observa que a las
distintas concentraciones el tamao de la mancha correspondiente al compuesto, as
como la distancia recorrida aumenta conforme lo hace la cantidad de aplicaciones de
la muestra haciendo ms visible la coloracin, Lo anterior produce pequeas
variaciones en los valores de Rf obtenidos.
En las placas empleadas en la determinacin de la polaridad se puede apreciar que en
el caso del hexano la muestra no corre en la placa y por lo tanto no es un buen
eluyente de la muestra, es debido a esto que el Rf obtenido es igual a cero. A partir de
esto es posible saber que el paracetamol es una molcula polar y debido a que el
hexano es no polar la muestra no correr por la placa. En el caso de las placas en las
que se emplearon como eluyentes el acetato de etilo y metanol la muestra corre por la
placa y los valores de Rf obtenidos se encuentran dentro del rango de 0.3 y 0.5, lo cual
indica que son buenos eluyentes de la muestra. Con esto es posible determinar
nuevamente que el paracetamol es polar ya que ambos eluyentes lo son. Al comparar
las distancias que recorri el compuesto es posible saber que el metanol es ms polar
que el acetato de etilo, debido a que la muestra recorri una distancia menor con ste
ltimo.
En la parte correspondiente a la determinacin de la pureza de S4y S5 se logr
determinar que la sustancia que contena impurezas era la 5 debido a que se
observaban dos manchas separadas correspondientes a compuestos diferentes,
mientras que en la sustancia 4 solo se observaba un punto, adems fue posible
determinar que uno de los compuesto presentes en S5 era el mismo que en S4, esto
se debe a que se encontraban aproximadamente a la misma distancia del origen con
tan solo una variacin de un milmetro y por lo tanto su Rf era casi igual.
Para la identificacin parcial de los compuestos presentes en dos muestras se emple
cafena y se observ que cuando se utilizaba acetato de etilo como eluyente la
separacin observada en la muestra de la pastilla uno era mejor, mientras que en la
muestra de la pastilla dos no se logr una separacin adecuada de los componentes,
por lo cual no fue posible identificar la parte correspondiente a la cafena en esta.
Al llevar a cabo el mismo procedimiento pero con metanol como eluyente, se observ
que en ninguna de las muestras haba una separacin clara de la parte
correspondiente a la cafena y por lo tanto no se logr identificar con exactitud el
compuesto. A partir de esto es posible determinar que el mejor eluyente para separar
la cafena de las muestras es el acetato de etilo, debido a que, a pesar de no haber
una separacin clara en la muestra de la pastilla dos, en la muestra uno si se observ
una separacin completa de la cafena y a partir de los valores de Rf correspondientes
.