UNIVERSIDAD DE ORIENTE

NCLEO DE ANZOTEGUI
ESCUELA DE INGENIERA QUMICA Y CIENCIAS APLICADAS
DEPARTAMENTO DE INGENIERA QUMICA
INGENIERA AMBIENTAL

ASIGNACIN 3
Sntesis de tesis de Biodegradacin de la fraccin de
Asfalteno proveniente de los crudos de Hamaca y Guafita

Profesor:
Jess Prez Bachiller:
Yuliana Contreras
C.I: 23.792.967

Barcelona, Mayo del 2017

 En Venezuela como en muchos de los pases productores de petrleo se
producen grandes cantidades de desechos con contenidos de hidrocarburos, los
cuales es necesario que sean dispuestos en sitios seguros como fosas o
recipientes para su almacenamiento hasta que sean reutilizados o tratados. Los
accidentes en la industria petrolera originan derrames de petrleo sobre los
ecosistemas afectando las propiedades fisicoqumicas y biolgicas del suelo
impidiendo el aprovechamiento de los recursos naturales. Para que estos sitios
recobren nuevamente sus caractersticas naturales, es necesario el transcurso de
cientos de aos de atenuacin natural de los contaminantes. Para acelerar este
proceso, existen tcnicas tanto fsicas como qumicas, y novedosas, desde el
punto de vista econmico y ambiental como lo son las tcnicas biolgicas, que
reduciran la contaminacin del suelo y de esta manera se cuidara la vegetacin,
la fauna y la salud del ecosistema.

El objetivo principal de investigacin fue evaluar el proceso de degradacin

de los asfaltenos provenientes de los crudos Hamaca (Ayacucho) y Guafita
presentes en un suelo, mediante la implementacin de las tcnicas de
biorremediacin y lombricultura. Mediante esto se va a seleccionar un pool de
bacterias a partir de diferentes crudos, luego se procede a estudiar la capacidad
degradadora de los distintos consorcios bacterianos provenientes de diferentes
crudos sobre asfalteno para despus plantear ensayos de tratabilidad a escala de
laboratorio de la eficiencia de los consorcios bacterianos aislados y Eisenia fotida
en la degradacin de suelos contaminados con asfalteno. Para esto se necesita
evaluar la eficiencia del sistema de tratamiento biolgico, en cuanto al porcentaje
de remocin de asfalteno, mediante el empleo de tcnicas cromatogrficas,
resonancia magntica nuclear de carbono RMN13C, relacin de H/C y produccin
de dixido de carbono (CO2 ) respirometra y por ultimo un anlisis estadstico de
los resultados obtenidos, con la finalidad de establecer las diferencias ms
significativas entre los diferentes tratamientos.

Se pretende implementar el uso de consorcios bacterianos, capaces de

biodegradar las fracciones recalcitrantes de asfalteno de diferentes crudos, con el
fin de disminuir la acumulacin de estos en el sistema y sustituirlos por
compuestos menos contaminantes y con bajo impacto ambiental, mejorando las
condiciones en el rea contaminada. Mediante esto se introduce un aporte
metodolgico que establecer procedimientos apropiados para realizar la
biorremediacin a partir de la aplicacin de diversas tcnicas fisicoqumicas y
biolgicas, que conduzcan a un proceso eficiente dado que el problema de los
asfaltenos tiene un impacto econmico significativo sobre las operaciones de
produccin del petrleo, as como tambin un importante impacto ambiental
 Las bacterias son las responsables de las reacciones de biodegradacin. En
el microcosmo Gbact, se introdujo bacterias degradadoras obtenidas del crudo,
mientras que en el tratamiento Glomb se generaron bacterias procedente del
estircol y de los excrementos de la Eisenia fotida. Las muestras de crudo medio
y pesado fueron depositadas en frascos con contenido de nitrgeno para su
posterior degradacin. Entre los das dos y tres se alcanzaron densidades
poblacionales de uno 108 UFC/mL en cada una de las atmosferas que contenan
las muestras ya mencionadas, la cual disminuy hasta obtener una densidad
poblacional de 05 UFC/mL. Se llev a cabo la prueba Gram, la cual permite
identificar bacterias de acuerdo al color que adopte su superficie, donde todas
experimentaron cambio de tonalidad. Luego, teniendo en consideracin el grupo
morflogico perteneciente a cada microorganismo, se realizaron pruebas
bioqumicas. Finalmente se reconocieron las siguientes bacterias para los
diferentes tipos de crudos; Crudo Ayacucho: Pseudomonas aeruginosa, Crudo
Guafita: Citrobacter freundii, Citrobacter spp, Enterobacter agglomerans,
Pseudomonas spp y Pseudomonas aeruginosa.

El crudo Ayacucho presenta la bacteria Pseudomonas aeruginosa,

adaptada a utilizar al asfalteno como fuente de energa y carbono. Durante el
proceso, el microorganismo presenta un crecimiento acelerado y luego un estado
estacionario, la cual se debe a que estos son insolubles en agua y su estructura
molecular dificulta el ataque de microorganismos, por lo que la actividad vara muy
poco. Mediante el comportamiento bacteriano en la mineralizacin de asfalteno
Ayacucho a travs del tiempo se observ que los tratamientos sin introduccin de
bacterias presentan menores promedios de densidad poblacional. Entonces,
respecto a la mineralizacin, la mayor produccin de CO2 es en asfalteno con
bacteria, respecto al asfalteno sin bacterias.

Se realiz un anlisis del espectro de FTIR, tanto en la muestra de crudo

Guafita como Ayacucho, donde se identificaron una serie de grupos funcionales,
tales como grupos OH y bandas atribuidas por humedad de muestra. Se
localizaron grupos H-C alinfticos, bandas de grupo carbonilo y carbonos
aromticos. A su vez se encontraron bandas que indican la presencia de alcanos,
como grupos metilo y metileno, as como tambin la presencia de azufre y cidos
carboxlicos o ster, la cual desaparece en la muestra de asfalteno tratado.
Tambin se indicaron cambios estructurales producto de la degradacin
bacteriana.

Durante esta investigacin se realiz un anlisis comparativo entre la

relacin H/C en el crudo Ayacucho respecto al da cero, disminuyendo su valor, lo
que sustenta la degradacin, ya que esto indic un mayor grado de insaturacin,
por ende, un mayor carcter aromtico. Respecto al crudo Guafita, observ la
actividad microbiana presentando el mismo comportamiento que en el estudio
realizado con el asfalteno Ayacucho anteriormente descrito. De igual forma, la
mayor produccin de CO2 se present en el asfalteno con bacterias, respecto al
libre de stas. En asfaltenos Guafita se obtuvo una relacin de H/C de 1,10, lo
cual demuestra que estos presentan una alta aromaticidad en relacin con el
crudo Ayacucho. Se observ que no existi variacin en la relacin en el tiempo
con bacterias, tambin se presenci cambios en los heterotomos, lo que sustenta
una pequea degradacin. En el caso de Guafita la degradacin es ms
complicada, posiblemente por ser una estructura ms aromtica que el Ayacucho.

El anlisis estadstico reflej diferencias significativas entre los tratamientos

con respecto a los porcentajes de degradacin, humedad en el suelo y produccin
de CO2 Con los tratamientos la prueba de Tukey se concluye que los valores de
degradacin de asfalteno, humedad, respiracin celular y potencial de acidez, para
el tratamiento con Eisenia fotida y con cepas bacterianas aisladas, muestra
homogeneidad para ambos crudos, no arrojando ninguna diferencia significativa
en cada tratamiento, pero si presenta en algunos casos heterogeneidad con
respecto a los microcosmos controles.

La prueba de Dunnet, mediante la cual se tomaron en cuenta las diferencias

significativas de cada tratamiento con respecto a su microcosmo patrn o control.
Al aplicar la prueba se determin que existen diferencias significativas en cuanto a
los porcentajes de degradacin y respiracin celular de cada tratamiento, con su
respectivo control para ambos crudos

El suelo virgen utilizado en los tratamientos presenta poco contenido de

materia orgnica, baja conductividad elctrica y pH ligeramente cido. El estircol
utilizado posee alto contenido de materia orgnica y proporciona cantidades
adicionales de fsforo y nitrgeno, favorables para el crecimiento bacteriano. Los
microorganismos degradadores de asfalteno fueron, para el Crudo Ayacucho la
Pseudomonas aeruginosa y para el Crudo Guafita, Citrobacter freundii, Citrobacter
spp, Enterobacter agglomerans, Pseudomonas spp y Pseudomonas aeruginosa.
De la prueba de Tukey se concluye que los valores de degradacin de asfalteno,
humedad, respiracin celular y potencial de acidez, para el tratamiento con la
Eisenia fotida y con cepas bacterianas muestra homogeneidad para ambos
crudos, no arrojando ninguna diferencia significativa en cada tratamiento, pero si
presenta en algunos casos heterogeneidad con respecto a los microcosmo control.
 El porcentaje de degradacin obtenido en los tratamientos con Eisenia
fotida para el asfalteno Ayacucho fue de 92% m/m en comparacin con el
tratamiento de microorganismos aislados fue de 56 % m/m, y el crudo Guafita, la
fraccin degradada de asfaltenos en el tratamiento con lombrices fue de 83 %
m/m, y con bacterias de un 76 % m/m. La investigacin a desarrollar presenta una
alternativa en el marco ambiental, ya que plantea la biodegradacin de las
fracciones recalcitrantes de asfaltenos en diferentes crudos en suelos
contaminados, cuando se aplican tcnicas de biorremediacin reduciendo con
esto el impacto ambiental que provoca al derramarse el petrleo.