ESCUELA SUPERIOR POLITCNICA AGROPECUARIA DE MANAB

MANUEL FLIX LPEZ

CARRERA PECUARIA

SEMESTRE OCTAVO PERODO ABR./2017-AGO/2017

TRABAJO DE INVESTIGACIN

TEMA:
COLECTA, CONSERVACIN SEMINAL E INSEMINACIN
ARTIFICIAL EN EQUINOS

AUTOR:
WILFRIDO L. ZAMBRANO MEJA

FACILITADOR:
DR.CARLOS

CALCETA, ABRIL 2017

INTRODUCCIN
El caballo domstico (Equus caballus) perteneciente a la familia Equidae del
orden perissodactyla. Esta especie presenta un sin nmero de particularidades,
por lo que sin duda alguna, es sujeto de un estudio especfico. La crianza del
caballo se remonta a pocas muy antigua, aproximadamente ms de cinco mil
aos. Sin embargo no ha sido hasta pocas recientes que la ciencia empieza a
construir para que se puedan predecir los resultados de las cruzas con mayor
seguridad (Acosta, 2014).

La recogida de semen es una tcnica habitual en la clnica de reproduccin

equina que se emplea para evaluar la capacidad reproductiva de los
sementales, el control rutinario de la calidad del semen, el diagnstico de la
infertilidad y por su puesto la inseminacin artificial ya sea con semen fresco,
refrigerado o congelado (Serres, s.f.).

El mismo autor menciona que la inseminacin artificial se ha desarrollado

enormemente en los ltimos aos debido a las ventajas que aporta a la cra
equina, podemos destacar el aumento del nmero de yeguas cubiertas por
cada semental, la mejora de los ndices de concepcin de algunos sementales
y yeguas sub frtiles, la posibilidad de almacenamiento y transporte del semen
y la disminucin de los accidentes en los animales y las personas ocurridos
durante la cubricin.

La mayora de los criadores trabajan con el principal objetivo de cruzar el

mximo nmero de yeguas en el mnimo periodo de tiempo. Es una tcnica que
se permite un mejor uso del material gentico de los caballos cuyas
caractersticas zootcnicas son superiores a la de las mayoras de su especie.
El uso de esta tcnica representa una posibilidad para aumentar la eficiencia
de la produccin en los equinos con este mtodo de produccin, han obtenido
un formidable xito no solo multiplicando la produccin de sus yeguas o
sementales, si no disponer rpidamente de estos, a pesar de encontrarse
situados a varios kilmetros de distancias, inclusive en otro hemisferio o
continente (Acosta, 2014).

OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL

Investigar los diferentes mtodos utilizados para colectar, procesar y

crioconservar material seminal y precisar los mtodos de inseminacin artificial
ms utilizados en diferentes especies animales domsticas.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Describir los principales mtodos para colectar, procesar y preservar el semen

as como sus ventajas, desventajas y resultados obtenidos en cuanto a costo
econmico y fertilidad.

Conocer y diferenciar los distintos mtodos aplicados para la biotcnica de la

inseminacin artificial as como sus ventajas, desventajas y resultados
obtenidos a nivel econmico y de fertilidad.
 COLECTA, CONSERVACIN SEMINAL E
INSEMINACIN ARTIFICIAL EN EQUINOS
RECOLECCIN DE SEMEN EQUINO
PROCEDIMIENTOS DE COLECCIN DE SEMEN
En seguida de la excitacin y la limpieza del pene al semental se le debe
consentir el enfoque del potro o yegua. El procedimiento de coleccin con
yegua o potro es muy similar, solo que tienden a requerirse menos
manejadores con el potro. Es necesario que empezando el instante de
coleccin, tanto el manejador como el colector estn situados del mismo lado
del reproductor (Olgun y Esquivel, s.f.).

El mismo autor menciona que la distribucin de todos los manejadores en el

mismo sitio cuando se utiliza una yegua auxiliar a reducir un accidente en
caso de que ocurran problemas con el procedimiento, ya que tanto la cabeza
de la yegua como la del reproductor sern echados al mismo lado del colector
forjando que los cuartos traseros de la yegua y semental se aparten unos de
otros, as como del colector.

Olgun y Esquivel (s.f.) una vez que el semental enfoc el maniqu y est listo
para montar se le debe permitir hacerlo con la ms mnima interferencia, la
interferencia excesiva durante el momento previo de introduccin de la vagina
artificial (VA) puede reducir la libido o distraer al semental; enseguida de que
monta se le debe permitir un poco de tiempo para que se estabilice ya sea en
la yegua o maniqu. La cantidad de tiempo no debe ser demasiado largo y el
colector debe estar listo para desviar el pene para evitar que sea introducido en
la vagina o sufra lesiones con el maniqu.

Durante el empuje y la posterior eyaculacin, la VA debe ser inclinada en un

ngulo de aproximadamente 25 con la horizontal, lo que equivale al ngulo
natural de la vagina de la yegua a la altura del anca, una mano debe sostener
el mango de la VA, mientras que el otro apoya desde abajo Olgun y Esquivel
(s.f.).
El xito de la eyaculacin es normalmente marcado por la contraccin del ano,
puede ser precisada deslizando la mano de apoyo hasta la base del pene para
sentir las contracciones rtmicas de la uretra a lo largo de la parte ventral del
pene; una vez que se ha comprobado la eyaculacin, el extremo distal de la VA
debe irse inclinando verticalmente para facilitar el paso del eyaculado hacia el
bote colector.

SELECCIN DE LA VAGINA ARTIFICIAL

La forma de recoleccin de semen se puede realizar sencillamente utilizando
una vagina artificial (V.A.). La correcta seleccin de la V.A. es fundamental
tanto en el proceso de recoleccin como de evaluacin de semen. En el
momento de elegir una, deben tenerse en cuenta no slo las conveniencias en
cuanto a sus caractersticas y costos sino tambin la preferencia del padrillo
(Molina, 2008).

El mismo autor menciona que los modelo Missouri se halla ampliamente

divulgado por ser muy asequible econmicamente, es sutil, fcil de manipular y
correspondientemente fcil de limpiar. Se dispone de una doble camisa de ltex
permanentemente sellada que desempea como cmara de agua. Un
caparazn de cuero rodea dicha camisa para facilitar su manipulacin. Est
proporcionada con una vlvula que accede colocar agua sola, aire solo o la
mezcla de los dos para comprimir su peso. El mantenimiento de la temperatura
apropiada durante la recoleccin no es tan eficaz como en otros modelos de
V.A.

Lo importante es que en este modelo de V.A los espermatozoides no estn en

unin con la superficie ardiente de la camisa de ltex. El modelo Nishikawa,
japons, constata de un tubo metlico rgido de aluminio y una simple camisa
de ltex entre los cuales queda conformada la cmara de agua. Este modelo es
de cmodo manejo y limpieza aunque sutilmente ms pesada que la anterior.
La camisa debe pactar bien en ambos extremos mediante tiras de goma fuertes
para evitar destilaciones de agua con la constante contaminacin de la muestra
(Molina, 2008).
Segn Molina (2008) el modelo nico de Colorado constituido de una cubierta
de material plstico duro y dos camisas de ltex que forman la cmara de
agua. De esta condicin se logra un buen mantenimiento de la temperatura.
Debido a que el largo de la vagina es mayor al del pene, el eyaculado entra en
relacin con la temperatura interna daando por calor los espermatozoides. Se
han experimentado modificaciones a este modelo con el fin de formarlo ms
liviano y fcil de manipular: es el modelo CSU (Colorado State University).

El mismo autor menciona los modelos de V.A. antes citados son usualmente
llamados cerrados debido a que con ellos se adquiere una muestra de semen
que coge tanto la fraccin espermtica como la fraccin de plasma seminal, es
decir, el eyaculado completo. Con el objetivo de elevar la concentracin
espermtica recolectando slo los primeros pulsos (jets) del eyaculado, en
Polonia desplegaron un modelo de V.A. abierta (modelo Krakow), en donde el
glande se exterioriza en el extremo posterior y puede recolectarse slo la
fraccin del eyaculado rica en espermatozoides (tres primeros jets)

As se obtiene del 75-80% de los espermatozoides presentes en una muestra

con cerca del 50% del volumen total. La recoleccin de semen con este mtodo
reduce la contaminacin de la muestra con orina y/o bacterias.

MANTENIMIENTO Y LIMPIEZA DE LA V.A.

Todos los modelos de la vagina usados deben ser enjuagados con agua
corriente templada, utilizando un detergente neutro, para uso de laboratorio,
que no deje restos qumicos que pueden resultar txicos y espermicidas. Luego
del lavado para agitar los restos de suciedad y de lubricante, se deben
enjuagar con agua destilada por lo menos tres veces y sumergir en alcohol
etlico 70 por el trmino de dos horas (Molina, 2008).

Para el escurrido se recomienda colgar las camisas en un gabinete cerrado

para evitar que en ellas se coloque polvo. Pueden desinfectarse mediante
xido de etileno habiendo la precaucin de ventilarlas por un perodo no inferior
a 48-72 horas antes de volver a usarlas.

PREPARACIN DE LA V.A.
El agua con que se perfecciona la cmara de agua debe tener una temperatura
de 50- 54C, de modo que la temperatura interna sea de 42-45 C. Es
fuertemente importante que la temperatura sea medida mediante un
termmetro y nunca sea estimada; si la temperatura es menor a la citada no
habr bastante estmulo para la eyaculacin y si es superior se podr quemar
al padrillo con los constantes trastornos en su conducta sexual (Molina, 2008).

El mismo autor menciona que la cantidad de agua a ubicar debe acondicionar

al tamao del pene de manera tal que la presin sea uniforme a lo largo de
toda la V.A. y no obstaculice la penetracin y ereccin completa del pene. Si la
presin es excesiva no permitir la correcta intromisin del pene con lo cual el
semen tomar contacto con las paredes de la V.A. a altas temperaturas y se
alterar la calidad de la muestra.

Molina (2008) la superficie interna de la camisa debe lubricarse con algn

elemento no espermicida, tal como gel estril (K-J lubricating jelly), la vaselina
slida daa la camisa de ltex. El eyaculado debe protegerse de la luz y
mantenerse a temperatura corporal hasta ser transportado al laboratorio.

La filtracin del eyaculado pos-recoleccin es esencial para separar la porcin

de gel de la porcin rica en espermatozoides; esto puede hacerse mediante un
trozo de gasa o aspirando el gel con jeringa. Algunos modelos de V.A. traen
botellas recolectoras con filtros incorporados que permiten realizar la operacin
de filtrado al mismo tiempo que la recoleccin (Molina, 2008).

MTODOS ALTERNATIVOS PARA LA RECOGIDA DE SEMEN

EL CONDN
Casualmente algn reproductor acostumbrado a la monta natural rehsa
totalmente la recopilacin de semen mediante vagina artificial, siendo entonces
posible utilizar este mtodo. Se instala en el pene del caballo un condn de
ltex y se le permite cubrir una yegua en celo por monta natural. Seguidamente
tras la eyaculacin, cuando el pene se exterioriza de la vagina, debe retirarse el
condn (Valencia et al., 2009).

INDUCCIN FARMACOLGICA DE LA EYACULACIN

Valencia et al., (2009) en algunos casos, debido a la dificultad fsica del
reproductor para la monta y la cpula, es posible la obtencin de semen
mediante productos farmacolgicos. El eyaculado recluido de esta forma suele
poseer un volumen pequeo pero una concentracin muy elevada,
obtenindose para congelarlo o en un programa de inseminacin artificial con
semen fresco o refrigerado con una fertilidad normal.

En el mismo autor menciona que para la aplicacin es muy importante que el

reproductor est tranquilo. Un posible protocolo sera la administracin de
2.0mg/Kg de imipramina hidrocloruro intravenosa. Si no se produce la ereccin
y eyaculacin en los 15 minutos siguientes se administrar 0.20.3 mg/Kg. de
xilacina intravenosa. Cuando se usa imipraminaxilacina la eyaculacin se
produce tras la ereccin y masturbacin.

MANIPULACIN MANUAL DEL PENE

La masturbacin manual puede ser til en algunos caballos con problemas en
la monta o en la ereccin. Este mtodo requiere de alguien con destreza en su
aplicacin. Tiene como ventajas la ausencia de contacto con la yegua y que no
es necesario ningn tipo de equipamiento especializado. La estimulacin puede
realizarse con el animal en el suelo o encima de un maniqu hasta la
eyaculacin. Los caballos a los que se aplique este mtodo deben ser
tranquilos y estar habituados a su manipulacin (Valencia et al., 2009).

RECOLECCIN EN EL SUELO
Es til en animales con problemas motores que dificulten la monta o en
animales que sin ningn problema aparente, ante la yegua entrar en ereccin
pero no montan en ella de ninguna manera (Valencia et al., 2009).

RECOLECCIN DE SEMEN EPIDIDIMARIO

Valencia et al., (2009) es til en caballos vivos con problemas obstructivos de
las vas genitales posteriores al epiddimo o en caballos muertos recientemente
puede plantearse tambin la recogida de semen de la cola y la porcin distal
del cuerpo del epiddimo. El semen obtenido puede ser de gran calidad y ser
perfectamente til para la congelacin. Aunque debe realizarse en un centro
con cierta experiencia.

EVALUACIN DEL SEMEN EQUINO

Las evaluaciones de rutina utilizadas en el pre congelamiento del semen
corresponden a la motilidad total, motilidad progresiva, vigor espermtico,
concentracin espermtica, volumen seminal sin gel, y el aspecto seminal
adems, se toma muestras para el anlisis de morfologa espermtica (Wernli,
2010).

El mismo autor menciona que el semen debe ser evaluado teniendo en cuenta
el nmero de espermatozoides por mililitro de semen, y el porcentaje de
espermatozoides que presentan una motilidad normal y progresiva para as
poder determinar el nmero de espermatozoides viables en el eyaculado.
Durante esta evaluacin, que dura ms o menos cinco minutos, el semen debe
mantenerse a una temperatura de 38C.

MOTILIDAD PROGRESIVA
Se debe evitar que el semen sufra cambios bruscos de temperatura y se debe
contar con todo el material precalentado adems de una platina trmica en el
microscopio (38 a 40 ). Adems se debe evaluar inmediatamente despus de
la recoleccin. La motilidad progresiva se evala por medio del microscopio,
utilizando los aumentos 40 X y 100 X, valorando tanto el movimiento global de
los espermatozoides, como tambin el movimiento individual progresivo de
aquellos mviles (Wernli, 2010).

CONCENTRACIN ESPERMTICA
Indica la cantidad de clulas espermticas por unidad de volumen eyaculado.
Para determinar este parmetro existen dos mtodos muy comunes: Esperma
cue (mini tube, Alemania) y cmara de neubabuer.

ESPERMA CUE (MINI TUBE)

Permite saber la cantidad de espermatozoides por centmetro cubico luego de
colocar una gota de la muestra en la fotocelda del equipo, el cual trabaja con
un patrn de concentracin conocido, previamente calibrado.
CAMARA DE NEUBABUER
Con ayuda de una pipeta automtica, se toma una alcuota de semen diluido y
homogenizado que luego transfiere a la hemi cmara por medio de capilaridad
entre el piso de esta y el cubre objetos, dejando que la solucin ingrese sin que
pase a los canales laterales. El nmero de espermatozoides es dividido por el
rea contada, multiplicada por la altura de la cmara y por la dilucin utilizada;
obteniendo as el nmero total de millones de espermatozoides por mililitro de
semen (Wernli, 2010).

MORFOLOGA ESPERMTICA

Wernli (2010) determina el porcentaje de espermatozoides con o sin

alteraciones morfolgicas; el nmero total de las alteraciones no debe ser
mayor al 30 %. Consiste es hacer un extendido del semen sobre un porta
objetos precalentado, se seca y se sumerge en solucin saturada de rojo congo
diluido en agua durante 20 segundos, luego la lmina es lavada por su reverso
y sumergida en una solucin de violeta de genciana al 0.5 % por 5 segundos;
posteriormente la lmina es lavada nuevamente y secada al aire, para ser
evaluada en el microscopio.

El semen equino presenta ciertas caractersticas morfolgicas propias de la

especie tales como: cabeza asimtrica, posicin abaxial de la cola, un
acrosoma de poco volumen y la presencia de microtbulos en su cuello.
Adems, se ha reportado que el porcentaje de espermatozoides normales vara
de 51% - 89%; la presencia de anormalidades mayores suman un 9.5%
incluyendo anormalidades de la cabeza 4.1%.

Cola doblada debajo de la cabeza 2.5% y defectos del cuello 2.4%; y

anormalidades menores comprometiendo el 10.7% dentro de las cuales se
encuentran colas dobladas 6.9%, prdida de porciones de la cabeza 1.4% y
prdida del acrosoma 2%.

Dichas caractersticas morfolgicas pueden valorarse como anormales,

representando calidad espermtica pobre; sin embargo, se han presentado
diversos casos en los cuales la morfologa de los espermatozoides no est
relacionada con la fertilidad de los mismos; por lo tanto, un gran rango de
anormalidades morfolgicas son aceptables para los machos reproductores
(Wernli, 2010).

CARACTERSTICAS DEL SEMEN EQUINO

Se describen a continuacin las caractersticas del semen fresco al obtener el

eyaculado y los parmetros normales para la evaluacin macro y microscpica.

Tabla 1. Caractersticas y componentes del semen equino

Autor: (Wernli, 2010)

PROCESAMIENTO Y PRESERVACIN DEL SEMEN EQUINO

El manejo del semen post extraccin y almacenamiento durante la coleccin de
semen y su posterior transporte al laboratorio debe ser mantenida a una
temperatura de 37 C hasta su evaluacin. Por lo que el instrumental que tenga
contacto con el semen, deber estar calentado a la temperatura que se
mencion. Es conveniente usar microscopios con platina trmica, as como
tambin calentar los porta, cubreobjetos y pipetas para evitar el shock de frio
(Prado, 2011).

Aire, luz ultravioleta, agua, sangre y/u orina son considerados espermicidas,
por lo que no debe tener contacto con la muestra. El plasma seminal juega un
papel importante. Una concentracin muy alta tiene efecto letal en semen
almacenado refrigerado; se ha reportado que la centrifugacin y la remocin
parcial del plasma seminal (dejando un 12%) previo al almacenamiento a 5 C
por 24-48 h, resulta en un aumento de la motilidad en semen de sementales
cuyas caractersticas de motilidad son ampliamente menores mediante el
procesamiento convencional (Prado, 2011)

La concentracin del plasma seminal en semen diluido debe ser menor al

20%. Idealmente el semen debera ser diluido dentro de los 3 minutos post
coleccin. Se deber colocar la muestra en un diluyente precalentado a 37 C a
base de leche con una dilucin de 1:2 o 1:4. A mayor factor de dilucin mayor
supervivencia de los espermatozoides (Prado, 2011)

La tasa mnima de dilucin recomendada es de 1:1 siempre y cuando el semen

se use dentro de las 2 a 4 horas posteriores a la extraccin, en donde se debe
usar una mayor dilucin. La razn por la cual se diluye el semen es que se
provee a los espermatozoides de nutrientes o sustratos metabolizables que
aumentan su longevidad ya que les aportan energa, especialmente si estn en
condiciones ambientales desfavorables en las cuales no sobrevivira en su
forma pura (Dutra et al., 2013).

DILUYENTES DE CONGELACIN ESPERMTICA

Los diluyentes a su vez aumentan la viabilidad del semen de padrillos sub
frtiles as como tambin aumentan el volumen inseminante en programas de
inseminacin en los cuales se requieren unos pocos mililitros de semen puro.
Las cualidades de un buen diluyente son que provea de un ambiente favorable
al espermatozoide, de fcil preparacin y almacenamiento, de bajo costo y que
nos permita una evaluacin del semen de forma precisa. La mayora de los
diluyentes de semen equino estn basados ya sea en leche descremada o en
yema de huevo (Dutra et al., 2013).

Algunos diluyentes contienen antibiticos como polimixina B, amikacina,

amikacina y penicilina y ticarcilina; siendo los ms usados el sulfato de
amikacina (1mg/mL) y la penicilina potsica (1000 UI/ml). Si se utiliza el semen
fresco se deber colocar en una incubadora a 37 C debiendo utilizarse en las
prximas 12 horas. Recientemente ha habido un aumento constante en el uso
de semen refrigerado en Amrica Latina. Este aumento se debe a que existen
mtodos efectivos de refrigeracin y la aceptacin de distintas tecnologas de la
reproduccin por numerosas razas (Dutra et al., 2013).

Existen varios diluyentes de congelacin comerciales ocupados para

manipulacin de semen equino. Dentro de los ms utilizados se puede
nombrar, EDTA-lactosa, INRA 82 y Botucro. stos diluyentes contienen
lipoprotenas, las cuales son adheridas por la membrana plasmtica del
espermatozoide y ayudan a la estabilizacin de las membranas durante la
congelacin y descongelacin (Dutra et al., 2013).

Estas lipoprotenas provienen de productos lcteos, yema de huevo o ambos.

Se puede incorporar tambin monosacridos (como glucosa o fructosa),
disacridos (sacarosa, lactosa) y trisacridos. stos azcares otorgan
propiedades osmticas y sirven como fuente de energa (glucosa y fructosa)
(Palacios 1994). Tambin se ha propuesto el uso de trehalosa (disacrido) en
los diluyentes de congelacin de semen equino (Dutra et al., 2013).

Las formas de preservar el semen son refrigeracin y congelacin

VENTAJAS
El uso de semen refrigerado frente la monta natural cuenta con varias ventajas
como permitir evaluar la calidad seminal y el nmero de espermatozoides
utilizados en una dosis de inseminacin.
La abolicin de las restricciones geogrficas, pudiendo acceder a semen de
mayor calidad fcilmente.

Minimizacin de la transmisin de enfermedades tanto venreas como

sistmicas.

La posibilidad de utilizar sementales con lesiones fsicas, problemas

psicolgicos, que no le permitan la monta natural.

Un mayor nmero de yeguas pueden ser servidas por eyaculado logrando un

mejor aprovechamiento del padrillo.

En la yegua los beneficios estn dados por ser innecesario su transporte para
la cubricin, disminuyendo los riesgos asociados

La posibilidad de prear yeguas con enfermedades crnicas, anormalidades

esquelticas, problemas comportamentales, yeguas con endometritis
postservicio, en quienes no se recomienda la monta natural.

DESVENTAJAS
En lo que se refiere a la refrigeracin; dentro de estas se encuentran que tiene
corta longevidad (24 a 48 horas); la fertilidad se ve reducida en caso de semen
de padrillos poco resistentes a la refrigeracin; alta susceptibilidad de los
espermatozoides a daos ambientales por lo que se debe de tener una alta
demanda tcnica (Dutra et al., 2013).

En cuanto al semen congelado, requiere tcnicos ms especializados que para

el semen refrigerado para poder hacer uso del mismo. Esta tecnologa frente a
la anterior resulta en una menor fertilidad, adems de que los costos de
transporte son mayores. A su vez como el semen congelado tiene una menor
longevidad en el tracto reproductivo de la hembra, se requiere una mayor
sincrona entre la inseminacin y la ovulacin; por lo tanto mayores costos son
necesarios por la revisacin peridica de la yegua en el seguimiento folicular.
(Dutra et al., 2013).

DIFERENCIA ENTRE SEMEN CONGELADO Y REFRIGERADO

En contraste, el transporte de semen congelado ofrece a los criadores
beneficios adicionales que no son disponibles con el semen refrigerado.
Algunas de estas son que los sementales no tienen que estar disponibles
siempre que haya demanda, ms que nada en la estacin de monta;
enfermedad o muerte del padrillo no impiden la inseminacin de yeguas con su
semen; tiene mayor facilidad en cuanto a los tiempos de transporte ya que
puede ser almacenado en el establecimiento hasta el momento de la
inseminacin; permite el envo del semen a pases extranjeros (Prado, 2011).

Hay un mayor aprovechamiento ya que el semen colectado para congelarse es

procesado resultando en un promedio de 10 a 12 dosis promedio por
eyaculado. En cambio, con semen refrigerado generalmente se realiza la
colecta para 1 o 2 yeguas, se inseminan y el sobrenadante se descarta (Prado,
2011).

En trminos generales se entiende que las tasas de concepcin con semen

refrigerado son mayores que con semen congelado. La dilucin, centrifugacin
y subsecuente remocin del plasma seminal en el semen para congelacin no
producen daos mayores, sin embargo el mayor dao ocurre durante el
proceso de congelado y descongelado (Prado, 2011).

Prado, 2011 demostr que el descongelado del semen produce que los
espermatozoides no se unan normalmente al epitelio del oviducto, lo que trae
una disminucin en la habilidad de la hembra para establecer reservas
espermticas en su tracto reproductivo. Estas reservas aseguran que haya
espermatozoides viables presentes en el oviducto al momento de la ovulacin
cuando la inseminacin precede a la ovulacin.

El semen refrigerado prolonga la longevidad espermtica ya que disminuye la

tasa metablica de los mismos, reduciendo los requerimientos energticos y
nutrientes. Cuando el semen es llevado a la temperatura normal (37 C) la tasa
metablica retoma su normalidad as como tambin la motilidad y la fertilidad
(Dutra et al., 2013).

Para maximizar la viabilidad y la motilidad espermtica, el refrigerado del

semen debera de ser a una tasa controlada. El enfriado muy rpido resulta en
daos de la membrana espermtica, con la prdida de lpidos, iones y otras
sustancias, resultando en una disminucin de la motilidad y depresin del
metabolismo celular. Estos cambios son irreversibles y son comnmente
conocidos como el shock de frio. La tcnica se debe realizar mediante un
enfriamiento rpido (de 0,5-0,3 C/minuto) desde los 37 C hasta los 20 C.
(Prado, 2011).

MTODOS APLICADOS PARA BIOTECNICA DE INSEMINACION

ARTIFICIAL EN EQUINO
INSEMINACIN ARTIFICIAL CON SEMEN FRESCO
Consiste en recolectar y evaluar el eyaculado, dividirlo en dosis que contengan
como mnimo 500 millones de espermatozoides con motilidad progresiva e
inseminar a las yeguas, de 30 a 90 minutos post-recoleccin. Este sistema es
ideal para padrillos que deban servir 2 ms yeguas/da. Con un eyaculado
promedio, se pueden inseminar entre 5 y 10 yeguas y los ndices de preez
son iguales o levemente superiores (10 %) a la monta natural (Losinno y
Aguilar, 2002).

INSEMINACIN ARTIFICIAL CON SEMEN REFRIGERADO

Este sistema es muy dependiente de la calidad y respuesta seminal de cada
padrillo a los cambios trmicos, pero ofrece ms variantes de manejo. El
semen puede refrigerarse a 4-5C por 24 a 48 hs., pero hay reportes de
aceptables ndices de preez an despus de 80 horas, utilizando diluyentes
especiales (Losinno y Aguilar, 2002).

Es importante requerir de una buena sincronizacin entre el manejo de las

yeguas a inseminar y la recoleccin y envo del semen. Los resultados son muy
variables entre padrillos, pero respetando los protocolos e inseminando con
semen refrigerado durante 24 horas y como mximo 24 hs previas a la
ovulacin, los ndices son muy semejantes a la monta natural (Losinno y
Aguilar, 2002).

INSEMINACIN ARTIFICIAL CON SEMEN CONGELADO

Segn Losinno y Aguilar (2002). Las tasas de preez por ciclo son muy
variables, y resulta muy difcil comparar los distintos procedimientos. Algunas
de las ventajas de la IA con semen congelado son:
 1) Es ms econmico, prctico, y seguro transportar un termo con
Nitrgeno lquido con grandes cantidades de dosis para inseminar
cientos de yeguas que un padrillo

2) Reduccin de los costos de servicios, transporte de las yeguas,

seguros, stress, riesgo de contraer enfermedades, accidentes en
yeguas con cra al pie, etc.

3) La estacin reproductiva del padrillo puede continuar mientras ste

se encuentra participando en torneos, concursos, exposiciones,
convaleciendo de enfermedades, o eventualmente, aos despus de
su muerte,

4) Reduccin del uso de padrillos genticamente inferiores,

5) Conservacin y accesibilidad de semen de padrillos genticamente

superiores,

6) Preservacin del semen en Nitrgeno lquido (-196 C) por un nmero

indefinido de aos.

Las desventajas son en general producto de informacin incompleta sobre el

tema y no inherentes a la tcnica en s. De igual manera, existe una
considerable variacin entre sementales respecto a la capacidad de sus
espermatozoides para sobrevivir intactos a temperaturas bajo cero. Las tasas
de preez reportadas varan entre 0 y 70 %, pero la mayora de los padrillos
oscila entre 20 a 40 % de preez por ciclo, resultados bajos son, en general,
considerados como aceptables hasta el momento (Losinno y Aguilar, 2002).

TRANSFERENCIA EMBRIONARIA
Losinno y Aguilar (2002).Coment que se refiere al procedimiento por el cual se
recolecta un embrin (por un mtodo no-quirrgico a travs de un lavaje
uterino) de una yegua donante inseminada o servida, 6 a 9 das post-ovulacin,
y se transfiere de manera quirrgica o no quirrgica al tero de otra yegua
receptora sincronizada previamente

Las transferencias embrionarias tienen el potencial de aumentar la eficiencia

reproductiva de la especie. Las principales indicaciones incluyen: 1) aumentar
el nmero de potrillos por ao en yeguas seleccionadas, 2) producir potrillos de
yeguas en competicin, 3) producir potrillos en yeguas que no puedan gestar
por problemas no reproductivos (Losinno y Aguilar, 2002).

EMBRIONES REFRIGERADOS
Este sistema reduce la presin de sincronizacin sobre las receptoras
ampliando el margen de das para la transferencia. Los resultados obtenidos
con embriones refrigerados por 12 a 30 hs. en medio y recipientes especiales
son semejantes a los transferidos directamente y en varios pases es una
prctica rutinaria (Losinno y Aguilar, 2002).

EMBRIONES CONGELADOS
El primer nacimiento de un potrillo producto de un embrin equino
criopreservado a 196 C fue reportado en 1983 (Losinno y Aguilar, 2002).

EMBRIONES VITRIFICADOS
La vitrificacin es una variante de la criopreservacin en la que se utilizan altas
concentraciones de crioprotectores que evitan la formacin de cristales,
utilizando curvas de descenso trmico muy bruscas que no necesitan maquinas
congeladoras especiales, lo que disminuy notablemente los costos operativos
de dicha tcnica (Losinno y Aguilar, 2002).

TRANSFERENCIA INTRATUBRICA
Esta tcnica, tambin llamada GIFT (Gamete Intrafallopian Transfer), consiste
en recolectar oocitos de los folculos de una yegua donante, mediante una
aspiracin intrafolicular guiada por ecografa y transferirlos al oviducto de una
yegua receptora junto con una dosis mnima de espermatozoides, a la cual se
han aspirado sus folculos (Losinno y Aguilar, 2002).

INYECCIN INTRACITOPLASMTICA DE ESPERMATOZOIDES

(ICSI)
Es una variante de la Fertilizacin "in vitro" en la que el oocito maduro recibe un
espermatozoide en su citoplasma inyectado por medio de una micropipeta
conectada a un micromanipulador (Losinno y Aguilar, 2002).
 CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

La eficiencia reproductiva en los equinos se ha beneficiado en los ltimos aos

gracias a la aplicacin de biotecnologas como la recoleccin de semen y a la
inseminacin artificial, que alcanzaron una gran difusin e impacto en aquellos
sistemas productivos y reproductivos.

Dando como ventaja el bajo costo ya que de un eyaculado podemos sacar

varias pajuelas evitndonos tambin el costo del transporte del semental hacia
donde se encuentra la hembra si son de fincas diferente o pases deferentes,
por ende es la mejor alternativa pero siempre teniendo en cuenta la
metodologa de recoleccin y preservacin de la muestra ya que esto depende
del semen de cada semental como acta con el diluyente que se le aplica para
preservar el semen del semental o del reproductor.
 BIBLIOGRAFAS

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ANEXOS
Sucesin de eventos en la coleccin de semen con potro: a) enfoque del
semental al domi, b) manejadores del mismo lado del semental antes de la
coleccin, c) retraccin del pene hacia la VA, d) colocacin de vagina a 25
aproximadamente sobre la horizontal.

A B

D C

Empleo de la vagina artificial para la obtencin de semen equino.

Evaluacin microscpica de semen equino con microscopio de luz.

Tcnica de recuento de espermatozoides: las clulas con la cabeza en negro

se cuentan y aqullas con la cabeza blanca, no.

Evaluacin microscpica de semen equino, visualizacin 10X de

espermatozoides equinos.
5. 60ml de dilucin de
semen equino con
diluyente Kenney para
centrifugacin.

Preparacin para centrifugacin de 4 tubos de

10ml para semen equino. Y botn espermtico (85% espermatozoides) post
centrifugacin.

Dilucin del botn espermtico en diluyente para congelacin. Y Empaque de

pajillas de 0.5ml.
Congelacin de pajillas de 0.5ml con vapores de nitrgeno durante 10minutos a
4cm de distancia, a la izquierda tanque de nitrgeno para almacenamiento.
REACTIVO DE REPRODUCCIN I.
1. Cuntas veces puede servir un padrillo/da?
a) 1 a 2 yeguas/da

b) 2 a 3 yeguas/da

c) 3 a 4 yeguas/da

d) 5 a 6 yeguas/da

2. COMPLETE.
En la actualidad, el semen es recolectado mediante una vagina artificial o
montando al padrillo sobre una yegua o maniqu. Pero, cuando esto no es
posible existen otras posibilidades, puede recolectarse con la V.A en el suelo,
mediante la estimulacin manual del pene.

3. A cuntos C debe estar la vagina artificial, para la recoleccin de

semen?
a) 28 30 C

b) 32 35 C

c) 36 40 C

d) 40 47 C

4. Verdadero y Falso.
Los modelos de V.A. llamados cerrados, se obtienen mediante una muestra de
semen que contiene la fraccin espermtica como la fraccin de plasma
seminal, es decir el eyaculado completo. Con el fin aumentar la concentracin
espermtica recolectando slo los primeros pulsos (jets) del eyaculado.

(Verdadero).
5. Escriba las eficiencias reproductivas de la transferencia de
embriones en equinos.
1) Aumentar el nmero de potrillos por ao en yeguas seleccionadas

2) producir potrillos de yeguas en competicin

3) producir potrillos en yeguas que no puedan gestar por problemas no

reproductivos

Verdadero o falso

El xito de la eyaculacin es normalmente marcado por la contraccin del ano,

puede ser precisada deslizando la mano de apoyo hasta la base del pene para sentir
las contracciones rtmicas de la uretra a lo largo de la parte ventral del pene.

(Verdadero)

Verdadero o falso

En las concentraciones espermticas indica la cantidad de clulas espermticas por

unidad de volumen eyaculado.

(Verdaderos)

Verdadero o falso

Motilidad progresiva se debe evitar que el semen sufra cambios bruscos de

temperatura y se debe contar con todo el material precalentado adems de una
platina trmica en el microscopio (38 a 40 ).

(Verdadero)