AO DE LA CONSOLIDACIN DEL MAR DE

GRAU
UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR ORREGO

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

LABORATORIO DE QUMICA GENERAL
PRCTICA DE LABORATORIO N 09

TTULO DE LA PRCTICA: DETERMINACIN CUALITATIVA DE PROTENAS

DOCENTES:
Ll

INTEGRANTES:

Kkkkkkkkkkkkkkk

TURNO: VIERNES: 6 a 7.45 PM

FECHA DE PRESENTACIN: kkkk

PIURA PER
 I CAPACIDADES
Demostrar la presencia de enlace peptdico de las protenas
mediante ensayo de Biuret
Realizar diversas pruebas de coloracin para aminocidos y
protenas
Demostraremos el carcter reductor de monosacridos y de
algunos disacridos.
Comprobaremos que la sacarosa no es un azcar reductor.
Compararemos el comportamiento de la sacarosa y de los
productos de su hidrlisis frente al reactivo de Fehling.

II FUNDAMENTO TERICO

Determinacin Cualitativa de Protenas

Son biomolculas formadas bsicamente por carbono, hidrogeno, oxgeno y

nitrgeno. Pueden adems contener azufre y en algunos tipos de protenas,
fosforo, hierro, magnesio y cobre, entre otros
elementos y son polmeros de aminocidos.
Las protenas son necesarias para la vida, sobre
todo por su funcin plstica, pero tambin por
sus funciones biorreguladoras, las enzimas, y de
defensa, los anticuerpos.

1.1. Aminocidos:

Son unidades estructurales bsicas de las protenas. Son la base de

todo proceso vital ya que son necesarios en todos los procesos
metablicos. Sus funciones ms importantes son el transporte ptimo
de nutrientes y la optimizacin del almacenamiento de todos los
nutrientes.
Los alfa aminocidos se caracterizan por tener un grupo amino y un
grupo carboxilo unidos al carbono alfa. Adems un tomo de
hidrogeno y una cadena lateral R, que distingue a los diferentes
aminocidos.
 Los aminocidos existen en forma de sus sales internas conocidas
como zwitterion. En la glicina, el aminocido ms simple, la cadena
lateral r es un tomo de hidrogeno.

1.1.1. Propiedades qumicas:

Debido a que tienen un grupo cido y un grupo bsico

presentan propiedades anfteras.

Sustancia anfteras: pueden aceptar y donar un H+.

Los aminocidos existen como iones dipolares, se les conoce

como zwitteriones.

Al poseer un carbono asimtrico, los aminocidos poseen

isomera. Existe una forma D y otra forma L. Los ismeros D
poseen en proyeccin lineal, el grupo amina (-NH2) hacia
la derecha del carbono, mientras que la isomera L presenta
el grupo amina (-NH2) a la izquierda del carbono asimtrico.

1.2. Pptidos:

Estn formados por la unin de aminocidos mediante un enlace

peptdico.

Enlace peptdico: Es un enlace covalente que se establece

entre el grupo carboxilo de un aminocido y el grupo amino,
dando lugar al desprendimiento de una molcula de agua.
La unin de un bajo nmero de aminocidos da lugar a un pptido, y si el
nmero es alto, a una protena, aunque los lmites entre ambos no estn
definidos. Orientativamente:

Oligopptido: de 2 a 10 aminocidos.

Polipptido: entre 10 y 100 aminocidos.

Protena: ms de 100 aminocidos. Las protenas con una sola cadena

polipeptdica se denominan protenas monomricas, mientras que las

compuestas de ms de una cadena polipeptdica se conocen

como protenas multimricas.

1.3. Protenas:

Son polmeros de aminocidos, polipptidos de alto peso molecular

(>10 000). Se clasifican en simples (por hidrolisis completa da solo
aminocido), y conjugadas (aminocidos y grupos prostticos).

1.3.1. Estructura de las protenas:

Debido a su tamao y naturaleza qumica exhiben una organizacin
estructural en tres dimensiones.

Estructura Primaria: Secuencia de aminocidos en la cadena

proteica, es decir, el nmero de aminocidos presentes y el
orden en que estn entrelazados.

Estructura Secundaria: Disposicin de una cadena de

polipptido en una estructura organizada como una hlice alfa
o lamina con plegado beta, estabilizada por puentes de
hidrogeno entre enlaces peptdicos.

Estructura Terciaria: Estructura tridimensional doblada,

completamente formada, de una cadena de polipptido,
estabilizada por fuerzas covalentes y no covalentes.

Estructura Cuaternaria: Asociacin no covalente de

subunidades de protenas para formar una protena funcional.

1.4. Desnaturalizacin:

Alteracin o perturbacin de la estructura proteica, perdiendo

as su actividad biolgica. Se llama desnaturalizacin de las
protenas a la prdida de las estructuras de orden

superior (secundaria, terciaria y cuaternaria), quedando la

cadena polipeptdica reducida a un polmero estadstico sin
ninguna estructura tridimensional fija.

Todas las protenas desnaturalizadas tienen la misma

conformacin, muy abierta y con una interaccin mxima con
el disolvente, por lo que una protena soluble en agua cuando
se desnaturaliza se hace insoluble en agua y precipita.
1.5. Ensayo de protenas:

Se emplean diversos ensayos o reacciones de color en el

estudio de protenas; as el ensayo de Biuret es una reaccin
de uso general para mostrar la presencia y cantidad de
protenas en solucin.
Otros ensayos son ms especficos y se usan para determinar
ciertos grupos funcionales, los cuales, cuando se pueden notar
su presencia, son prueba evidente de la de ciertos
aminocidos; como ensayo xantoprotico, de Millon de
Hopkins-Cole, etc.

III MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

Materiales:

Tubos de ensayo
 Vasos precipitados de 50 ml

Huevos

Leche

Solucin albmina
(Esta solucin es preparada por la
mezcla de
las claras de huevo con agua )
 Reactivos

Alcohol etlico (C2H6O)

Cloruro de sodio NaCl(s)

cido actico ( C2H4O2)

 Sulfato cprico (CuSO4)

Hidrxido de sodio (NaOH)

Nitrato de plata (AgNO3)

IV PROCEDIMIENTO

Experimento 1: Desnaturalizacin de protena

A. Protena en clara de huevo

En dos vasos precipitados de 50 ml colocar 5ml de clara de

huevo en cada un0
En el primer vaso agregar 20 ml de alcohol etlico
En el segundo vaso agregar NaCl(s)
Tapar el vaso de precipitados
Observar cada cierto lapso de tiempo
 Claras de huevo Claras de Claras de
+ alcohol etlico huevo + huevo
NaCl(s)

B. Protena en la leche

Colocar en un tubo de ensayo 2 ml de leche a temperatura

ambiente
Agregar 1 ml de cido actico
Agitar a fin de mezclar el contenido
Observar despus de haber trascurrido un tiempo

2 ml de
leche Resultado
final

Experimento 2: Ensayo de Biuret

A. Con clara de huevo

En un tubo de ensayo colocar 2 ml de huevo

Adicionar 10 gotas de CuSO4 y agitar la mezcla
Agregar 1 ml de NaOH
 Dejar reposar la mezcla y observar

B. Con leche

En un tubo de ensayo colocar 2 ml de leche

Adicionar 10 gotas de CuSO4 y agitar la mezcla
Agregar 1 ml de NaOH
Dejar reposar la mezcla y observar

Con clara de
huevo

Con
leche

Experimento 3: Precipitacin de protenas

A. Muestra uno

Colocar en un tubo de ensayo 2 ml de solucin albmina

Agregar 1 ml AgNO3
Observar

B. Muestra dos

Colocar en un tubo de ensayo 2 ml de leche

Agregar 1 ml AgNO3
Observar
 Resultado final
de muestra 1

Resultado final
de la muestra
2

V GRFICOS Y/O ESQUEMA

VI RECOMENDACIONES
 El uso de bata es obligatorio, deber estar siempre cerrada y no ser
utilizada fuera del laboratorio.
Se recomienda llevar zapatos cerrados y no sandalias.
El cabello largo deber estar siempre recogido.
Se evitar el uso de anillos, pulseras, etc.
No comer ni beber en el laboratorio. Hay que lavarse siempre las
manos antes de salir del mismo.
No inhalar, probar u oler los productos qumicos en ningn caso.
La zona de trabajo debe mantenerse limpia y ordenada, sin libros,
abrigos, bolsas o equipos innecesarios.
Los productos qumicos derramados tienen que ser recogidos y
eliminados inmediatamente, siguiendo los protocolos establecidos.
Es preciso ser corts y hacer uso del sentido comn en el laboratorio.
No se tienen que gastar bromas, correr, jugar, empujar o gritar.
Los equipos de laboratorio son costosos y de uso delicado. Es
necesario que aprendamos a usarlos adecuadamente, siguiendo paso
a paso las instrucciones dadas por tu maestro. Al terminar cualquier
experimento todos los instrumentos deben quedar limpios y en el
lugar destinados para ellos.
No se debe hacer nunca un experimento no autorizado por el
profesorado o investigador/a principal, ni dejar experimentos en
marcha sin supervisin.
Utilizar material de cristal en mal estado aumenta el riesgo de
accidentes.
Los aparatos utilizados tienen que dejarse limpios y en perfecto
estado de uso.
Manipulacin de productos qumicos: Leer con atencin los rtulos o
etiquetas de los frascos antes de usar su contenido.
El mayor peligro es el fuego. Es necesario evitar la presencia de
llamas abiertas en el laboratorio siempre que sea posible.
Evitar el contacto de productos qumicos con la piel. No se debe coger
un producto de un recipiente no etiquetado, ni sustituir un producto
por otro en un experimento, si no lo aconseja el profesorado.
Calentamiento de lquidos: hay que dirigir la abertura del recipiente
en direccin contraria a uno mismo y a las dems personas cercanas.
No calentar sustancias inflamables con llama directa, hacerlo a Bao
de Mara
No usar el gotero de una sustancia en otra distinta, ya que las
mismas pueden daarse y perder la efectividad.
Al desarrollar cualquier experimento de laboratorio es necesario estar
atento y en silencio para que se pueda desarrollar bien el trabajo. Las
instrucciones del maestro y las orientaciones que aparecen en el
manual son fundamentales para alcanzar en xito en tu trabajo.
Utilizar cuidadosamente el material de vidrio para evitar heridas por
corte.
Utilizar siempre la cantidad mnima de sustancia.
 Consultar al maestro en caso de dudas.

VII CLCULOS Y RESULTADOS

Experimento 1: Desnaturalizacin de protena

A. Protena en clara de huevo

Muestra
Observaciones
Tiempo

30 minutos Clara de huevo con

espesor blanco en la
parte superior

1 hora No hubo observacin

durante una hora

24 horas No hubo observacin

durante una hora

B. Protena en la leche

Inicio Final Resultado

2 ml de leche + 1 ml de Solucin lechosa El cido actico es

cido actico capaz de producir la
 desnaturalizacin de
la protena casena.

Experimento 2: Ensayo de Biuret

Muestra Inicio Final Resultado

2 ml de
huevo + 10
gotas de Color violeta
CuSO4 + de violeta
NaOH intenso Solucin con
coloracin
violeta debido
a la presencia
de cadenas
2 ml de peptdicas.
leche + 10 Color violeta
gotas de bajo
CuSO4+ 1
ml de NaOH

Experimento 3: Precipitacin de protenas

Muestra Inicio Resultado

Adicin AgNO3
 Clara de huevo
2 ml de solucin Precipitacin
albmina +1ml cremosa
AgNO3

Leche 2 ml de leche +
1 ml AgNO3 Leche cortada

VIII DISCUSIN DE RESULTADOS

Los integrantes del grupo realizamos en parejas o en tros segn lo indicado

por el profesor cada una de las reacciones a investigar segn lo propuesto
en la ficha, estas se realizan con los siguientes reactivos:

cido actico.
Alcohol etlico
Cloruro de sodio
Soluciones de nitrato de plata, NaOH, CuSO4 y AgNO3.

Para los reactivos utilizamos distintos componentes, para luego, al unir los
reactivos con las protenas, designados en laboratorio, podamos
identificarlas.
El experimento se realiz con la satisfaccin y la dedicacin necesaria como
para que saliera bien. Desnaturalizamos la solucin albumina y
comprobamos que bajo ciertas condiciones las protenas se desnaturalizan y
pierden sus funciones bsicas y principales.

IX CUESTIONARIO

1.- Qu elementos se encuentran invariablemente en protenas?

Qu otros elementos se encuentran a veces en protenas?
Los elementos que se encuentran invariablemente son el carbono,
hidrgeno, oxgeno y nitrgeno. Los elementos que se encuentran a
veces son el fosforo, cobre, zinc, hierro, etc.

2.- Qu permite identificar la prueba de Biuret? Explicar cmo

determina que el resultado es positivo.

PRUEBA DE BIURET

La producen los pptidos y las protenas, pero no los aminocidos,

ya que se debe a la presencia del enlace peptdico (- CO- NH -) que
se destruye al liberarse los aminocidos. Cuando una protena se
pone en contacto con un lcali concentrado, se forma una sustancia
compleja denominada Biuret. La reaccin debe su nombre al biuret,
una molcula formada a partir de dos de urea (H2N-CO-NH-CO-
NH2), que es la ms sencilla que da positiva esta reaccin

La presencia de protenas en una mezcla se puede determinar

mediante la reaccin del Biuret. El reactivo de Biuret contiene
CuSO4 en solucin acuosa alcalina (de NaOH o KOH). La reaccin se
basa en la formacin de un compuesto de color violeta, debido a la
formacin de un complejo de coordinacin entre los iones Cu2+ y
los pares de electrones no compartidos del nitrgeno que forma
parte de los enlaces peptdicos presentando un mximo de
absorcin a 540 nm.
Da positiva esta reaccin en todos los compuestos que tengan dos o
ms enlaces peptdicos consecutivos en sus molculas.

3.- Qu permite identificar la prueba de xantoprotica? Explicar

cmo determina que el resultado es positivo.

PRUEBA DE XANTOPROTICA

Reconoce grupos aromticos, es decir aquellas protenas que

contengan tirosina o fenilalanina, con las cuales el cido ntrico
forma compuestos nitrados amarillos.

La reaccin xantoprotica se puede considerar como una

sustitucin electroflica aromtica de los residuos de tirosina de las
protenas por el cido ntrico dando un compuesto coloreado
amarillo a pH cido.

Segn las guas qumicas es una reaccin cualitativa, ms no cuantitativa.

Por ende determina la presencia o no de protenas. Para cuantificar se usa
otra reaccin, como la de Biuret, y se hace un anlisis
espectrofotomtrico.

4.- Qu resultado obtiene en la prueba de Milln?

PRUEBA DE MILLN
Reconoce residuos fenlicos, es decir aquellas protenas que
contengan tirosina. Las protenas se precipitan por accin de los
cidos inorgnicos fuertes del reactivo, dando un precipitado blanco
que se vuelve gradualmente rojo al calentar.

5.-identifique los aminocidos que tienen la caracterstica

siguiente: grupo fenlico, grupo aromtico.

6.-Dar 5 ejemplos de aminocidos.

1.-Histidina

2.-Isoleucina

3.-Leucina

4.-Lisina
5.-Metionina

7.-Fromular la estructura de los siguientes aminocidos: alanina,

fenilalanina, valina.

Alanina Fenilalanina
valina

8.- Cul es la estructura primaria de la protena llamada albmina

de huevo?

9.-Explicar a qu se debe las manchas amarillas de la piel producida

por contacto con HNO3
En la reaccin xantoprotica, el cido ntrico concentrado reacciona
con los grupos aromticos de protenas solubles formando
compuestos aromticos nitrados de color amarillo.
Reaccionan solo las protenas que posean el grupo benceno,
especialmente la tirosina.
Entonces nosotros al tener esas protenas en la piel, el cido
mediante la reaccin xantoprotica empieza a reaccionar en la piel.

X CONCLUSIONES

Las protenas son esenciales para la vida por su funcin plstica,

funciones biorreguladoras y de defensa.

La determinacin de cantidad de protena de un alimento no es

sencilla y el valor obtenido en cada caso depende del mtodo
utilizado.

Los resultados analticos se vern condicionados por la proporcin del

aminocido en cuestin en las protenas sometidas al ensayo y
necesitaran ser referidos a alguna protena estndar.
.
En ensayo de Biuret las reacciones se caracteriza por una coloracin
prpura cuando los iones cpricos son acomplejados por los enlaces
peptdicos a pH alcalino. El matiz del color depende del tipo de
protena y su intensidad depende del contenido de protena presente.

Las protenas son materiales polmeros que se encuentran en las

clulas vivientes. Sirven como materiales estructurales en el cuerpo
siendo fundamentales para muchos procesos vitales.

Las protenas son polmeros de aminocidos y se producen en las

clulas del cuerpo.

Las protenas de otros animales y de algunas plantas son un alimento

importante, ya que proporcionan los aminocidos que son esenciales
para el cuerpo en la produccin de las protenas necesarias.

Las propiedades fisicoqumicas dependen fundamentalmente del

peso molecular de su y de la conformacin que adopte la molcula
 Una protena se puede desnaturalizar por factores como el pH, la
temperatura, detergentes, disolventes orgnicos y la fuerza inica.

sta prctica de laboratorio nos ha permitido tener una visin ms

clara y completa de cmo se lleva a cabo la sntesis de protenas en
los seres vivos y hemos comprendido la importancia de estos.

XI BIBLIOGRAFA
PDF: Luque Guilln V. Estructura y propiedades de las protenas
(pg. 8).
Bioqumica mdica. John W. Baynes, Marek H. Dominiczak. Edit.
Elsevier Espaa, 2007 (pg 10).
Qumica Orgnica. Stephen J Weininger, Frank R. Stermitz. Edit.
Reverte, 1988 (pg. 901).
http://www.scientificpsychic.com/fitness/aminoacidos.html
http://www.innatia.com/s/c-proteinas-y-aminoacidos/a-estructura-
quimica-de-las.html