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LICENCIADO EN FARMACIA

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO


Facultad de Estudios Superiores Cuautitln
Departamento de Ciencias Qumicas

MANUAL DE PRCTICAS
ANLISIS INSTRUMENTAL

LICENCIADO EN FARMACIA
Clave de la Carrera: 105-40
Clave de la asignatura: 1640

M.C. Miriam A. Castillo Rodrguez


M.C. Pablo Hernndez Matamoros
M.C. Enrique Ramos Lpez
Q.F.B. Elia Granados Enrquez
Q.F.B. Ivn Santilln Cano
Q. Ma. Del Carmen Campo-Garrido

Revisin y Correccin: 2016- II

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LICENCIADO EN FARMACIA

INTRODUCCION
Con la amplia gama de tcnicas instrumentales de anlisis con las que se cuenta en la

actualidad y a su incesante desarrollo, el dominio de todos ellas es difcil de abordar en su

totalidad en un curso de licenciatura, por lo tanto es necesario adquirir conocimiento de

una manera general, que nos permita interpretar y manejar datos obtenidos con cualquiera

de ellas.

La gran variedad de tcnicas instrumentadas de anlisis se basan en una relacin que

existe entre la propiedad (absorbancia, ndice de refraccin, pH, rea de pico, potencial,

conductancia, intensidad de corriente, etc.) con la composicin del sistema (anlisis

cualitativo) o bien la cantidad de alguno de sus componentes (anlisis cuantitativo).

Generalmente algunas de las tcnicas se utilizan bsicamente para el anlisis cualitativo,

otras ms en el anlisis cuantitativo y un buen grupo de ellas es capaz de cumplir con

ambas funciones.

La propiedad (P) , no es solamente afectada por la composicin del sistema tambin por

variables como temperatura, presin, tiempo, perturbaciones ocasionadas al realizar la

medicin, presencia de sustancias qumicas interferentes, etc. es por esta razn en este

curso se estudia la relacin entre la propiedad y la composicin; relacin en donde es

necesario ejercer un control efectivo sobre las dems variables que adems de la

composicin afectan la propiedad, todo esto a fin de obtener informacin til desde el

punto de vista analtico de esta manera P ser funcin de la composicin. Pudiendo as

proponer mtodos basados en esta relacin para poder conocer la composicin de cierta

sustancia(s) en muestras de inters.

Este enfoque contribuye a la formacin profesional en anlisis instrumental y al perfil

profesional en su rea.

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LICENCIADO EN FARMACIA

OBJETIVOS

OBJETIVO(S) GENERALES DE LA ASIGNATURA


Que el alumno conozca las tcnicas y mtodos ms utilizados en A. Instrumental al obtener

y utilizar informacin obtenida con estos para en la cuantificacin de sustancias en muestras

de inters en el mbito bioqumico clnico para que desarrolle habilidades, actitudes y criterio

apropiados a fin de resolver problemas en su rea.

OBJETIVOS DEL CURSO EXPERIMENTAL


PRCTICAS CONVENCIONALES: Reafirmar los conocimientos tericos en la aplicacin de

las metodologas analticas empleando un equipo instrumental para identificar y cuantificar

una sustancia en una muestra de inters en el rea bioqumica clnica

1) Conocer e identificar las partes bsicas del equipo utilizado para su manejo adecuado a

fin de obtener resultados confiables.

2) Conocer la informacin que el equipo genera y su uso para anlisis cuantitativo.

3) Interpretar y relacionar variables a utilizar para efectuar el clculo de contenido de una

sustancia en una muestra real.

PRCTICA DE DISEO: Elaborar un formato experimental fundamentado qumica e

instrumentalmente para cuantificar sustancias de inters en su rea a travs de las

siguientes etapas

1) Realizar una investigacin respecto a un procedimiento base y con ello:

2) Estructurar un diseo experimental (protocolo).

3) Consultar la metodologa propuesta con el asesor con la finalidad de mejora.

4) Desarrollar en laboratorio el diseo propuesto para la cuantificacin de una muestra.

5) Contrastar los resultados obtenidos con el diseo propuesto a fin de identificar fuentes

de error tanto de diseo como experimental a fin de optimizar el protocolo.

6) Desarrollar nuevamente el experimento corregido y cuantificar.

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LICENCIADO EN FARMACIA

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO


FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLN
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS QUMICAS
SECCIN DE QUMICA ANALTICA
CODIGO: FPE-CQ-DEX-01-02; FPE-CQ-DEX-03-
CALENDARIZACIN 02; FPE-CQ-DEX-04-02.
No de REVISIN: 0

Asignatura: ANLISIS INSTRUMENTAL Grupo_______


Carrera: LICENCIADO EN FARMACIA Perodo: 2016-
semana ACTIVIDAD FECHA Entrega de
productos)

1 a)Presentacin

b) Informacin sobre el Sistema de Gestin

de Calidad (SGC).

c) Organizacin para trabajo en equipo.

2 a) Aplicacin del examen diagnstico, -Examen diagnstico

Resolucin y evaluacin de este. evaluado.

b) Preparacin de soluciones y Manejo de -Clculos y soluciones

material y equipo comn en el laboratorio de etiquetadas.

Anlisis Instrumental.

3 Prctica 1 Determinacin de Azul Timol C. Previo 1

Con Espectrofotometra UV/VIS.

4 Prctica 2 Determinacin de cido C. previo 2

Ascrbico por curva de calibracin Informe prctica 1

5 Prctica 3 Determinacin de Zn(II) C. previo 3

Con Absorcin Atmica. Informe prctica 2

6 Entrega y discusin de los de Ejercicios Informe prctica 3

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Unidad I /Primer Examen escrito

Asignacin del proyecto para Diseo

Experimental

7 Prctica4.Determinacin por HPLC C. previo 4

8 Prctica No. 5 Determinacin de etanol por C. previo 5

Cromatografa de Gases en enjuague Informe prctica 4

9 Prctica No.6 Determinacin de plata en un C. previo 6

desinfectante Informe prctica 5

10 Prctica no. 7 Determinacin C. previo 7

potenciomtrica de Fe(II) en tabletas. Informe prctica 6

11 Entrega y discusin de los de Ejercicios Informe prctica 7

Unidad 2 /segundo Examen escrito.

12 Revisin del Formato de Diseo Avances de diseo

Experimental (FDE) y experimentos

preliminares.

13 1 Sesin prctica de Diseo Experimental.

14 2 Sesin prctica de Diseo Experimental.

15 Presentacin oral del Diseo Experimental Informe de Trabajo

Aplicacin de la encuesta FPG02-FESC-01 del Diseo Exp.

16 Entrega de Promedios finales (desocupar gavetas)

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TABLA DE PRCTICAS Y TEMAS QUE CUBRE DEL PROGRAMA


NMERO NMERO Y NOMBRE DE LA

DE NOMBRE DE LA PRCTICA UNIDAD TEMATICA EN EL

PRCTICA PROGRAMA DE LA ASIGNATURA

1 Determinacin Cuantitativa de Azul Timol 1.1 Concordancia de una medicin

espectrofotomtrica instrumental

1.2 Preparacin de patrones analticos

2 Determinacin de cido ascrbico por 2.2 Conocer instrumentacin y aplicacin de

Curva de Calibracin Indirecta espectrofotmetro

3 Determinacin de Zn por 2.4 Conocer instrumentacin y aplicacin de

Espectrofotometra de Absorcin Atmica espectrofotmetro de Absorcin Atmica.

4 Determinacin de fenilefrina por HPLC 3.2, 3.4 Conocer y aplicar instrumentacin de

cromatografa de lquidos de alta resolucin

5 Determinacin de etanol por 3.2 Conocer y aplicar instrumentacin de

Cromatografa de Gases en enjuague cromatografa de gases

bucal

5 Determinacin de plata en un 4.3 Conocer instrumentacin de

desinfectante potenciometra

4.1 Aplicar las tcnicas electroqumicas.

6 Determinacin potenciomtrica de Fe(II) 4.2 Aspectos bsicos y necesidades en una

en tabletas. curva de valoracin potenciomtrica.

7 Prctica de Diseo 1.2, 2.4, 4.2 determinacin de sustancias de

inters en su rea.

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SISTEMA DE EVALUACIN
I.-En Prcticas Convencionales

1) Trabajo de laboratorio (TL) Se evala la calidad de los resultados experimentales, as

como la destreza adquirida en el manejo del equipo y material de laboratorio (10%)

2) Cuestionario previo (CP). Se evala una revisin previa del procedimiento a realizar en

la prctica (10%)

3) Informe de trabajo (IT). Se evala el informe en cuanto a claridad y presentacin as

como la consistencia entre los resultados experimentales y el resultado del anlisis reportado

y estimar si la informacin se proces adecuadamente (80%).

La puntuacin concreta en base 10 para cada punto del informe es:

a) Nombre del experimento, fecha y Datos completos como contenidos del producto

analizado (en caso tenerlo) pesadas, preparacin de soluciones y estndares,

concentraciones de estos (1.0punto).

b) Resultados (grfica, tablas, volmenes utilizados para punto de equivalencia) (2puntos)

c) Anlisis de resultados incluyendo: reacciones y constante de equilibrio condicional, en

caso de que se efecte, regresiones lineales y clculos de contenido (5.0 puntos)

d) Conclusiones justificadas qumica e instrumentalmente (1.5puntos)

e) Referencias consultadas (0.5puntos)

II.-En prctica de Diseo Experimental.

1) Formato del diseo experimental (FD). Se evala si el proyecto planteado por el equipo

de alumnos se llevar de manera adecuada a la solucin del problema planteado (40%)

2) Informe de Diseo (ID) (se evalan los mismos puntos que el Informe de prctica

convencional) (60%)

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La puntuacin en una escala de 100 puntos se presenta en la siguiente tabla:

TIPO DE ACTIVIDAD ASPECTO A # DE ACTIVIDADES % FINAL

EVALUAR REALIZADAS

Prctica Convencional TL,CP, IT 7 52

Prctica de Diseo FD, IT 1 12

Examen destreza y 3* 36
habilidades de
manejo e equipo y (dos escritos y uno oral)
clculos de
contenido individual
100

*Es importante que se acredite al menos uno de los dos exmenes escritos para
considerar el promedio final.

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Facultad de Estudios Superiores Cuautitln


Departamento de Ciencias Qumicas
Seccin de Qumica Analtica

REGLAMENTO INTERNO DE LABORATORIO

1.- En todas las sesiones es obligatorio el uso de bata, lentes de seguridad y zapato
cerrado en el laboratorio.
2.- Se debern conservar limpias las instalaciones (en especial las campanas de extraccin,
canaletas y tarjas de las mesas de laboratorio), el material y el equipo de trabajo (incluyendo
las balanzas analticas) al inicio y al final de cada sesin experimental.

3.- Se deber guardar orden y disciplina dentro del laboratorio y durante la sesin
experimental, quedando prohibida la entrada a personas ajenas al mismo, incluyendo los
inter-laboratorios.

4.- Queda estrictamente prohibido fumar, consumir alimentos y bebidas dentro del
laboratorio, ya que muchas de las sustancias qumicas que se emplean son inflamables y/o
txicas.

5.- Es importante que antes de trabajar, el estudiante conozca las caractersticas de las
sustancias qumicas que va a utilizar para que pueda manipularlas adecuadamente (se
deber apoyar en la consulta de las fichas de seguridad).

6.- Para la extraccin de reactivos lquidos, se debern emplear perillas de hule y nunca
succionar con la boca.

7.- Los reactivos qumicos no debern ser manipulados directamente, se debern usar
implementos como pipetas, esptulas, cucharas, etc.

8.- Despus de manipular sustancias qumicas es necesario lavarse las manos con agua y
jabn.

9.- Si se utilizan mecheros, parrillas o cualquier otro aparato, se deber estar atento en su
manejo para evitar un accidente.

10.- En caso de ingestin, derrame o inhalacin de algn reactivo por parte de algn
estudiante, deber ser notificado al asesor del grupo, el cual tomar las acciones pertinentes,
previa consulta de las fichas de seguridad.

11.- Al trmino de la sesin experimental, el asesor de grupo, deber regresar las


disoluciones empleadas a su lugar de resguardo ubicado en el anaquel.

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12.- Todas las personas que elaboren disoluciones y/o generen residuos deben etiquetar
correctamente los frascos que se utilicen para este propsito utilizando la etiqueta del
Sistema de Gestin de Calidad.

13.- Los residuos de cada experimento debern tratarse y eliminarse adecuadamente por
los alumnos, previa consulta del diagrama ecolgico incluido en el manual de prcticas y con
el apoyo del asesor.

14.- Cuando el residuo no pueda ser eliminado, el alumno deber resguardarlo, en un


contenedor, debidamente etiquetado y cerrado, y colocarlo en el anaquel destinado para
ello.

15.- Antes de iniciar las actividades experimentales se le solicitar al laboratorista el material


y equipo necesarios, para ello, una persona responsable del equipo dejar su credencial
(nicamente de la UNAM) en depsito y firmar un vale por el material y equipo recibidos.
En caso de que existiera un defecto en el material o equipo recibido, ste deber ser anotado
en el vale.

16.- Es responsabilidad del alumno revisar el estado en que recibe el material, ya que al
trmino de la sesin experimental lo debe regresar en las mismas condiciones en las que lo
recibi y perfectamente limpio.

17.- En caso de extravo o dao del material o equipo de laboratorio, se resguardar el vale
de solicitud de material y la credencial del estudiante responsable del dao o extravo hasta
su reposicin con iguales caractersticas.

18.- Los alumnos que adeuden material de laboratorio, debern reponerlo a la mayor
brevedad posible o a ms tardar el ltimo da de realizacin de prcticas, de lo contrario los
deudores sern reportados al Departamento de Servicios Escolares y no podrn inscribirse
en el siguiente semestre.

19.- El nmero mximo de alumnos que podrn permanecer en el cuarto de balanzas


(L-101-102) ser el mismo que el nmero de balanzas disponibles.

20.- Cuando sea asignada, una gaveta a los alumnos y por razones de olvido o prdida de
la llave, queda prohibido forzarla. En tal situacin los alumnos debern solicitar su apertura,
por escrito, al responsable del laboratorio, previa autorizacin del profesor.

21.- La gaveta podr usarse hasta la semana 15 del semestre por lo que, el grupo de
estudiantes debern desocuparla a ms tardar en la semana 16.

22.- No se permitir el uso de balanzas y equipos a personas ajenas al laboratorio o fuera


del horario de su sesin experimental.

Vo.Bo.: Comit de Calidad del Depto. de Ciencias Qumicas.

Cuautitln Izcalli, Mayo del 2015.

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PROTECCION PERSONAL

CUANDO EMPIECES A TRABAJAR EN EL LABORATORIO: Te indicarn cmo se deben

utilizar los instrumentos que vayas a usar. Adems, debers saber dnde se encuentran los

extintores, el botiqun, la ducha, los aparatos lavaojos, y las salidas de emergencia.

ANTES DE EMPEZAR UNA REACCIN: Debers conocer la peligrosidad de los reactivos

que vayas a usar, as como de los productos que se obtienen de la propia reaccin (toxicidad,

inflamabilidad, riesgo de explosin, riesgos biolgicos) y tomars las precauciones

apropiadas (por ejemplo, trabajar en la campana extractora). En cualquier caso.

AL TERMINAR UNA SESIN: Tendrs que tratar los residuos para eliminar su peligrosidad

o los almacenars adecuadamente clasificados y etiquetados hasta que se retiren.

AL ABANDONAR EL LABORATORIO: Te asegurars de que no queda encendida la

campana extractora y ningn foco de peligro: gases, agitadores, calentadores, etc.

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DISEO EXPERIMENTAL

Recomendaciones para realizar el diseo experimental:

Objetivos: Proponer experimentos fundamentados qumica e instrumentalmente para


cuantificar una sustancia de inters en su rea y para esto debe:

Estructurar y justificarlo en base a reacciones qumicas conocidas de uso comn.


Consultar la metodologa propuesta con el asesor con la finalidad de mejorarlo.
Aplicar el diseo para la cuantificacin de una muestra real.
Contrastar los resultados con el diseo propuesto a fin de identificar fuentes de error
tanto de diseo terico como experimental.

Para poder evaluar adecuadamente el desarrollo de los estudiantes en el diseo de


experimentos; se debe elaborar un formato que debe considerarse como una gua para
presentarlo a revisin con el asesor en la fecha sealada en el calendario
El formato de diseo experimental debe contener al menos los siguientes puntos:
Los objetivos que se persiguen con la experimentacin.
Listado de actividades generales. Desglosadas en cada parte (material y
reactivos, preparacin de soluciones, procedimiento experimental, etc.)
Programa desglosado por cada actividad general (*).
distribucin equitativa del trabajo para cada integrante del equipo de trabajo.
Tratamiento que darn a los resultados experimentales despus de obtenerlos
mediante un anlisis estadstico.
Referencias consultadas

El informe de Actividades Final (despus de efectuar la experimentacin correspondiente)


debe incluir los puntos anteriores as como el anlisis de resultados y los clculos de
contenido de sustancia en la muestra.
Por ltimo, es necesario hacer una recomendacin. La naturaleza misma del diseo
experimental es dinmica ya que durante su desarrollo se requiere una retroalimentacin
continua y consciente para afinar los aspectos del diseo que se han contemplado. El hecho
de que en esta asignatura se presente una gua para presentarlo a revisin no niega su
dinmica intrnseca, esto es, aunque durante su elaboracin cada estudiante debe
retroalimentarse con la informacin que poco a poco va obteniendo para ir modificando cada
aspecto del diseo en forma lgica y armnica.

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LICENCIADO EN FARMACIA

Los alumnos deben

1) Cubrir las prcticas que comprende este manual.

2) Elaborar una bitcora; la cual debe contener nombre de la prctica o sesin de

trabajo, fecha, todos los clculos y las mediciones (pesadas, preparacin de

disoluciones, cambios de procedimiento, observaciones, etc.) resultados (medidas

de propiedad, grficas), anlisis de resultados (clculos de contenido,

identificaciones, reacciones efectuadas) conclusiones y referencias consultadas.

En caso de error NO BORRAR NADA solo cruzar con una lnea y escribir lo

corregido abajo o a un lado.

3) Contar con:

El 80% de asistencia al curso (10 minutos de tolerancia). La falta anula la calificacin

del reporte correspondiente.

Entrega puntual y en tiempo de los productos a evaluar (IT, ID, CP, etc.)

Aquellas personas que faltaron a la parte experimental de la prctica no tendrn

calificacin de reporte y por ende no se colocar su nombre, a menos que haya

realizado la prctica en otro grupo (bajo autorizacin de los profesores y su informe

lo realizar de manera individual).

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ACTIVIDADES CONTEMPLADAS PARA LA SEMANA No.1

1. El profesor expondr una introduccin sobre el curso de laboratorio, explicando las

actividades por realizar, el reglamento y la forma de evaluacin (ver apartado

evaluacin) e Informar sobre el Sistema de Gestin de Calidad (SGC).

2. Se incluirn las fechas en las actividades calendarizadas en el manual de prcticas.

3. Se le dar formato a la hoja de inscripcin (anotar el nombre de las prcticas).

4. Se formarn equipos (4-5 personas) de trabajo entre los alumnos del grupo.

5. Se les solicitar el siguiente material a los estudiantes, el cual estar bajo su propiedad

en gaveta por grupo que retirarn concluido el curso:

INDIVIDUAL POR EQUIPO (3-4 POR GRUPO

ESTUDIANTES)

Bata blanca y lentes Bitcora de trabajo 1 candado con 3 llaves

de proteccin

Libreta y Manual de 2 frascos de plstico de 100 mL Servitoallas

prcticas 8 frascos de plstico de 10 mL Detergente lquido

1Marcador o Perilla de hule o propipeta Muestras por analizar

etiquetas pequeas Franela y escobilln en cada prctica (ver

manual)

1 barra magntica

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ACTIVIDADES CONTEMPLADAS PARA LA SEMANA No.2

1 Se recordar el uso y manejo del material y reactivos que se utilizarn durante el curso

de laboratorio realizando clculos y pesadas en la balanza Analtica de algunas soluciones

de las prcticas que durante el semestre se utilizarn.

2 Recomendar a alumnos con nfasis a leer antes de cada prctica la introduccin y parte

experimental debido a que el cuestionario previo es individual y se aplica antes de iniciar

la sesin experimental.

3 Revisar el material solicitado asignando la gaveta que se ocupar por el grupo,

colocando este material en ella y etiquetando correctamente (Grupo, carrera, profesores,

semestre, etc.)

4 El profesor organizar y repartir el tratamiento, a los equipos de trabajo, de los

residuos generados en cada prctica.

5 Se avisar a los alumnos dnde y cundo se entregar la bitcora calificada cada

semana (de preferencia en un mismo lugar y da aunque la califique un profesor diferente

ya que son dos).

6 Se aplicar y resolver el examen diagnstico.

NOTA al Profesor: ver la bitcora de asignatura, en ella se encontrarn las soluciones

a preparar de cada grupo.

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PRCTICA No. 1 DETERMINACIN CUANTITATIVA DE AZUL DE TIMOL EN UNA MUESTRA DE


RESIDUOS MEDIANTE UNA CURVA DE CALIBRACIN ESPECTROFOTOMTRICA A pH ALCALINO.

I. OBJETIVOS

Cuantificar azul de timol en una muestra mediante una Curva de Calibracin.


Evaluar la calidad y validez de los resultados obtenidos en la medicin calculando
algunos parmetros estadsticos (desviacin estndar, % RSD, factor respuesta
promedio, prueba de adecuabilidad as como la linealidad del grfico de calibracin)
Analizar las respuestas grficas obtenidas para asociar la magnitud de absorbancia
del Azul Timol con el pH del medio qumico utilizado.

II. INTRODUCCIN

El uso de curvas de calibracin para la cuantificacin de analitos es un recurso de gran

importancia en la qumica analtica, sin embargo, existen varios tipos de curvas dependiendo

de las caractersticas particulares del problema a tratar como ejemplo tenemos a las curvas

de calibracin, adiciones patrn, uso de estndar interno, valoracin,

El mtodo o curva de calibracin se utiliza particularmente para analizar mezclas sencillas,

cuando no existen interferencias fsicas o qumicas entre la matriz y el analito de inters en

la muestra problema, en general la respuesta analtica es debida exclusivamente a dicho

analito.

El mtodo consiste en preparar una solucin mediante pesada directa de un patrn primario,

con esta solucin patrn se preparan una serie de soluciones estndar que cumplan con las

siguientes caractersticas:

a) La concentracin del analito se incremente proporcionalmente (por ejemplo 2, 4, 6,

8, 10 ppm).

b) Se deben preparar al menos 5 sistemas (de diferentes concentraciones).

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c) Los incrementos de concentracin entre los sistemas se recomienda que sean

constantes.

d) Que la matriz qumica donde se preparan los estndares sea semejante a la del

problema (pH, pX, sales, etc.)

Una vez preparados estos estndares, se procede a medir la propiedad o respuesta de los

sistemas en el instrumento adecuado y se obtienen una serie de valores con los que se

construye el grfico de P (propiedad o respuesta) en funcin de Cs (concentracin estndar).

La Figura 1, muestra un ejemplo donde el eje x corresponde a la concentracin y en el eje

y la respuesta o propiedad medida de cada estndar. Se observa que existe una ecuacin

matemtica que relaciona el comportamiento entre las dos variables. En la mayora de los

casos se ajusta a la ecuacin de una recta (y=mX+b) y mediante una regresin (mnimos

cuadrados) se obtiene la dispersin mnima entre los datos y su ecuacin.

Figura 1. Ejemplo de una curva de Calibracin

Por ltimo se realiza la lectura directa o de una dilucin apropiada para la cuantificacin del

analito problema (punto azul), que posteriormente se interpola en la grafica y se obtiene la

concentracin correspondiente, tambin se obtener mediante la resolucin de la ecuacin

obtenida de la regresin. La validez y calidad del resultado est relacionado con la dispersin

de los datos obtenidos, donde una mayor dispersin implica menor precisin. Para evaluar

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la dispersin y por lo tanto, la calidad del valor que se reportar, se hace uso de los

parmetros estadsticos como: la desviacin estndar o el coeficiente de variacin

Finalmente, para medir la respuesta de la propiedad P = Absorbancia, en este caso se

utilizar espectrofotometra de ultravioleta-visible (UV/Vis), una tcnica que se revisar ms

a fondo posteriormente y donde la respuesta tiene una relacin A= K C

III. EQUIPO(S), REACTIVO(S) Y MATERIAL(ES)

Material y Equipo Reactivos y Soluciones

6 matraces volumtricos de 10 mL Agua destilada

1 matraz volumtrico de 25mL

12 tubos de ensaye medianos con gradilla Estndar de azul de timol

2 vasos de precipitados de 50 mL Muestra problema de azul de timol

2 Pipeta volumtrica de 1 y 2, mL

1 Pipeta volumtrica de 1,2,3,4,5, mL

1 esptula pequea, propipeta


NaOH
1 piseta y un espectrofotmetro con celdas

IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1. Preparacin de soluciones (algunas soluciones se encontrarn en el anaquel)

Solucin de NaOH 0.01 M


Solucin Patrn o estndar de Azul de Timol 40 ppm
Solucin problema

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2. Tabla. Preparacin de la curva de Calibracin y problema (por duplicado)


Sistemas BCO 1 2 3 4 5 Pdiludo1 Pdiludo2
Soln. de NaOH 0.01 M 2 2 2 2 2 2 2 2
Soln. Problema (mL) 0 0 0 0 0 0 1 1
Solucin patrn de azul de 0 1 2 3 4 5 0 0
timol 40 ppm (mL)
aforo con agua destilada 10 10 10 10 10 10 10 10

Tabla.-Prueba de Adecuabilidad del sistema.

sistema 1 2 3 4 5 6

Soln. de NaOH 0.01 M 2 2 2 2 2 2


Solucin patrn de azul de 3 3 3 3 3 3
timol 40 ppm (mL)
aforo con agua destilada 10 10 10 10 10 10

3 .Calibracin del espectrofotmetro: El procedimiento de calibracin se realizar de

acuerdo al instructivo utilizando al sistema blanco.

4. Obtencin del espectro de absorcin y determinacin de (longitud de onda) de

trabajo.- Con el sistema 5 mida la absorbancia a 700 nm, ajuste ahora la en el

espectrofotmetro a 690 nm y mida la absorbancia nuevamente y as sucesivamente

hasta llegar a 500 nm a intervalos de 10 nm.

Nota: para cada cambio de se debe ajustar el espectrofotmetro con el blanco.

Registrar los datos de absorbancia y % de Transmitancia en la tabla y graficar

A = f() % T= f() y determine la longitud de onda de mxima absorcin en el

Grfico.

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5.-Obtencin de la curva de calibracin: Se mide la absorbancia de los sistemas

preparados para la curva de calibracin (del 1 al 5), a la longitud de onda de mxima

absorcin y graficar A = f (Concentracin de ascrbico).

6. Determinacin de la concentracin de Azul de Timol Problema.

Se mide la absorbancia de los problemas diluidos (1 y 2) y determine la concentracin

Al interpolar en la grfica (recuerde que se realiz una dilucin del problema).

7.- Efectuar la medicin para la prueba de adecuabilidad.- Se mide la absorbancia de

los sistemas preparados para esta prueba y se registran en la tabla correspondiente.

V. RESULTADOS

Tabla - Datos experimentales del espectro de absorcin.

(nm) Abs %T
500
510
520
530
540
550
560
570
580
590
600
610
620
630
640
650
660
670
680 Grfica. Determinacin de ptima
690
700 Longitud de onda determinada_________

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Tabla . Datos experimentales para la curva de calibracin y el


anlisis estadstico
S Concentracin A1 A2 Aprom
Kprom = Aprom/ C
M Azul de
Timol
1

Grfica . Curva de Calibracin (Aprom. en funcin de la concentracin M de azul


de timol)

Kprom = Factor de Respuesta promedio (constante de proporcionalidad)


Si la respuesta es lineal el factor de respuesta ser constante cualesquiera que
sean los valores de Aprom y C; para ello calcular STD = Desviacin estndar (por
sus siglas en ingls)
% RSD = Porcentaje de desviacin estndar relativa* (por sus siglas en ingls) o
coeficiente de variacin, con un valora bajo (menor al 2%) permite afirmar casi
con certeza que el grfico A= f(C) es una recta.

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Tabla.- Prueba de adecuabilidad del sistema permite verificar que el sistema de

medicin funciona apropiadamente, independientemente de las condiciones ambientales)

Sistema 1 2 3 4 5 6 Aprom STD %RSD

Absorbancia

%RSD un valora bajo (menor al 2%) de este permite afirmar con certeza que el sistema
de medicin funciona apropiadamente a pesar de variaciones ambientales.

VI. INFORME DE TRABAJO

ESQUEMA Y PUNTOS MNIMOS A EVALUAR PARA LA REALIZACIN DEL INFORME DE TRABAJO.


1.- Datos Generales
I) CARTULA. Incluir en ste orden: Nombre de la Universidad, nombre de la Facultad,
nombre de la Seccin, nombre de la asignatura comenzando con Laboratorio de,
Nmero y nombre de la prctica, Nmero de equipo, Nombre de los integrantes (solamente
de aquellos que participaron en su realizacin, se dar por entendido que los que no
aparezcan no recibirn calificacin correspondiente a esa prctica, Nombre de los
profesores (incluir grado: QFB, Q, M en C, Dr., etc.), Fecha de realizacin de la prctica y
Fecha de entrega de reporte.

II) NMERO Y NOMBRE DE LA PRCTICA.

III) OBJETIVOS PARTICULARES. Con base al objetivo y a las actividades realizadas en


la prctica redactar 2-3 objetivos particulares recordando que deben responder el Qu?,
Cmo? y Para qu?

IV) INTRODUCCIN. Incluir solamente aplicaciones de la Tcnica instrumental en las


diferentes reas que contempla su carrera, incluyendo ejemplos (recordar que deben citar
las referencias).
V) DIAGRAMA DE FLUJO. Incluir:
Preparacin del STD; indicando los volmenes, masas y/o concentraciones reales
que se emplearon en caso de una modificacin a la parte experimental reportada

22
LICENCIADO EN FARMACIA

en el Manual en caso de estar ya preparada indicar la concentracin exacta tal


como aparece en el frasco.
Preparacin de la muestra; indicando los posibles cambios realizados.
Preparacin de los sistemas de la curva de calibracin; en forma de tabla
incluyendo nmero y nombre. Especificar la concentracin real de la solucin de
NaOH que se emple.
Calibracin del equipo; paso a paso en forma de diagrama de flujo, puede incluir
imgenes o dibujos y ser con base a la explicacin del profesor no a lo reportado
en el Manual.
Realizacin del espectro de absorcin; mismas consideraciones del punto anterior.
Lectura de los sistemas de calibracin; mismas consideraciones del punto anterior.
Lectura de los sistemas de adecuabilidad.
Disposicin de residuos; mencionar cmo se dispusieron los residuos en la sesin
experimental.

2) RESULTADOS. Incluir:
Tabla .- Datos experimentales del espectro de absorcin, completa.
Grfico del espectro de absorcin indicando nmero y nombre CORRECTO (el
nombre correcto de un espectro de absorcin incluye el nombre del analito, la
composicin de la matriz as como las condiciones de amortiguamiento impuestas,
pH por ejemplo, y la concentracin del analito, la cual es bien conocida ya que se
emplea un sistema de la curva de calibracin para su realizacin), considerar que
se incluirn 2 grficos, uno A = f(M) y A= F(mg/L)
Incluir tabla: con nmero y nombre.
No. Sistema Concentracin (unidades) Absorbancia promedio
Grfico de la curva de calibracin indicando nmero y nombre CORRECTO (el
nombre correcto del grfico de una curva de calibracin se puede indicar bajo el
modelo: PROPIEDAD=f [analito]UNIDADES).

Adems debe incluir: Ecuacin de la recta bajo el modelo:


PROPIEDAD = (valor de la pendiente) [analito] UNIDADES +/- (valor de la
ordenada al origen)
No indicar la propiedad y la concentracin del analito como x y y, y tambin
debe incluir Coeficiente de determinacin (r2). Recordar que se tienen que incluir 2

23
LICENCIADO EN FARMACIA

grficos, uno con unidades de concentracin Molar y otro con unidades de


concentracin en ppm, cada uno con las especificaciones citadas anteriormente.
Incluir tabla: con nmero y nombre.

Muestra empleada (nombre comercial)


Presentacin
Lote y fecha de caducidad (u origen)
Marbete (enfocndose slo al analito que se cuantific
experimentalmente)
Resultado experimental (reportado como en el marbete: por cpsula,
por 100ml, etc.)
% de principio activo con respecto al marbete

3) ANLISIS DE RESULTADOS. Incluir:


Tabla.- Datos experimentales para el anlisis estadstico, adicionando una
columna final:
Sistema [analito]UNIDAD Abs1 Abs2 AbsPROM STD %RSD Intervalo C.
Realizar el anlisis e interpretacin correspondiente de stos datos, finalizando
con la justificacin del valor del coeficiente de determinacin y la validez de los
resultados de cuantificacin.
Analizar los criterios qumicos que afectan para elegir la ptima en los 2
espectros de absorcin ( A= f(longitud de onda) y %T= F(longitud de onda) y por
tanto justificar porqu se consider ese rango de nm para realizar el grfico,
para esto analizar el efecto de la matriz (enfocndose en el pH y calcularlo) en la
determinacin, emplee una escala de zonas de predominio del analito y el
color que presenta el azul Timol al pH de trabajo.
Analizar la relacin de las variables involucradas y contrastarlas con la funcin
obtenida.
Incluir los clculos de cuantificacin, en el siguiente orden: Clculo de la
concentracin del STD (debe coincidir con lo reportado en el diagrama de flujo
en Preparacin del STD), clculo de la concentracin de los sistemas de la curva,
Interpolacin de la propiedad de la muestra en la ecuacin de la curva, considerar
las diluciones de la muestra (deben coincidir con lo reportado en el diagrama de

24
LICENCIADO EN FARMACIA

flujo en Preparacin de la muestra) y cambio de unidades si se reporta en otras


unidades; al final discutir sobre los resultados obtenidos en ambas grficas.
Clculo de Factor de respuesta promedio (K prom) y su % RSD.
Tabla de adecuabilidad y datos de % RSD.

4) CONCLUSIONES. Con base al objetivo y a los redactados por ustedes (particulares).

5) REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS. Debern ser citadas ya sea en la introduccin o en


el anlisis de resultados en caso que se hallan empleado.

DATOS: Peso molecular de Azul de Timol = 466.6 g/mol.

pKa(s) de Azul de Timol = 2.0, 8.7 ( color rojo, amarillo, azul respectivamente )

VII. ORIENTACIONES PARA EL TRATAMIENTO DE LOS REACTIVOS UTILIZADOS

25
LICENCIADO EN FARMACIA

PRCTICA No. 2 DETERMINACIN CUANTITATIVA DE CIDO ASCRBICO (VITAMINA C) EN


TABLETAS EFERVESCENTES MEDIANTE UNA CURVA DE CALIBRACIN INDIRECTA SIN DILUCIN
BAJO CONDICIONES DE AMORTIGUAMIENTO A pH cido.
I.-OBJETIVOS:

Cuantificar cido ascrbico en tabletas efervescentes por una curva de calibracin


indirecta bajo condiciones qumicas amortiguadas en pH y a una longitud de onda
seleccionada.
Identificar la sustancia que da la absorbancia al pH de trabajo, mediante su espectro
de absorcin y la reaccin qumica establecida.
Calcular el coeficiente de absortividad a la longitud de onda seleccionada con los
datos de la curva de calibracin y/o con los del espectro de absorcin.

II.- INTRODUCCIN

Los principios de preparacin y trazo de una curva de calibracin ya fueron estudiados en

prcticas anteriores, donde se considera que la respuesta del instrumento es lineal respecto

a la concentracin de la sustancia a cuantificar, sin embargo debe considerarse que si la

curva es indirecta existe una o varias reacciones efectuadas en los sistemas de

preparacin, dado que la sustancia de inters da seal muy pobre o no da seal, este

reactivo que genera la reaccin debe encontrarse en exceso , considerando el siguiente

estado de equilibrio de manera general:

aX bY cZ Keq > 106

inicio Vst Cst

agrega VyCy

equilibrio a VyCy-b/a VstCst c/a VstCst

En el caso de que Y d la seal, el modelo matemtico que describe la respuesta grfica

es: A = Ky [Y] y considerando el estado de equilibrio anterior entonces:

[Y] =VyCy - b/aVstCst / Vaforo. Entonces la funcin ser: P = Ky [(VyCy - b/a VstCst )/ Vaforo]

26
LICENCIADO EN FARMACIA

Vst, Vy, Vaforo, representan los volmenes de los reactivos utilizados al preparar los sistemas

del estndar, reactivo Y y el aforo utilizado, Cst , Cy representan las concentraciones

molares del estndar (stock) y la concentracin del reactivo Y agregado para generar la

reaccin

Entonces se puede graficar P=f (Vst Cst / V aforo), obtenindose una funcin de pendiente

igual a -Kyb/a y ordenada al origen igual a KyVyCy/Vaforo

En esta prctica se propone la cuantificacin indirecta de cido ascrbico en una forma

farmacutica, siguiendo las variaciones de una especie colorida (Y).

III. EQUIPO(S), REACTIVO(S) Y MATERIAL(ES)

MATERIAL POR EQUIPO REACTIVOS

6 tubos grandes de ensaye con gradilla Agua destilada

5 matraces volumtricos de 10 mL cido ascrbico estndar

2 vasos de precipitados de 40 mL

2 pipeta volumtrica de 0.5 1, 2,3,4,5 mL Buffer cido actico /Acetato 0.01 M

1 matraz volumtrico de 25, 50 y 100 mL pH=4.5

2 pipeta graduadas de 10 mL

1 agitador magntico c/barra

1 embudo con papel filtro Tabletas efervescentes (leer el marbete y

1 piseta, esptula y mortero con pistilo anotar el contenido de cido ascrbico)

Un espectrofotmetro con celdas de 2,6 diclorofenol indofenol

plstico o vidrio.

27
LICENCIADO EN FARMACIA

IV.-PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

PREPARACIN DE SOLUCIONES.- Ya se considera la preparacin como viene

indicada para que alcance para todo el grupo, etiquetar para su uso.

1) -- Buffer de acetatos 0.01 M pH = 4.5 (ya est preparado en el anaquel)

2) --Solucin estndar de cido ascrbico: Se pesan 20 mg del reactivo estndar de

cido ascrbico en un vaso de precipitados de 40 mL se disuelven en aproximadamente 5

mL de agua destilada con agitacin magntica, trasvasar al matraz de 10 mL y aforar con

agua destilada.

3) -- solucin stock de cido ascrbico: A 10 mL de Buffer pH= 4.5 se le agrega 2 mL de

la solucin estndar de cido ascrbico y se aforan a 100 mL con agua destilada.

4)--Solucin de 2,6 diclorofenolindofenol (DFI): Pesar 25 mg de 2,6

diclorofenolindofenol en un vaso de precipitados de 40 mL y agregar 10 mL de agua

destilada con agitacin magntica, trasvazar al matraz de 50 mL y aforar con agua

destilada.

5) -- Solucin problema: Se pesan 3 tabletas (al menos) de una en una para obtener el

peso promedio y se anota en la bitcora cada peso, se pulverizan finamente en un mortero.

-- Se pesan 20 mg de polvo de tabletas en un vaso de precipitados de 40 mL se disuelven

en aproximadamente 5 mL de agua destilada con agitacin magntica, trasvasar al matraz

de 10 mL y se afora con agua destilada.

6) -- Solucin problema diluida: a 5 mL del buffer pH = 4.5 agregar 2 mL* de la soln.

Problema y aforar a 10 mL con agua destilada.

* si la formulacin es de 1.0 g de ascrbico se diluyen como se menciona, si es de 2.0 g de ascrbico se

agregan 1 mL de soln. Problema.

28
LICENCIADO EN FARMACIA

2.Tabla Preparacin de Sistemas (curva de calibracin y problema)

Sistema Blanco 1 2 3 4 5 6 SP1 SP2

Soln. 1 Buffer de acetatos pH=4.5 3 3 3 3 3 3 3 3 3

Soln. 3 stock de cido ascrbico 0 0 1 2 3 4 5 0 0

Soln. 4 (2,6 diclorofenolindofenol DFI) 0 1 1 1 1 1 1 1 1

Soln. 6 Problema diluido 0 0 0 0 0 0 0 0.5 1

Aforo con agua destilada 10 10 10 10 10 10 10 10 10

3 .Calibracin del espectrofotmetro: El procedimiento de calibracin se realizar de

acuerdo al instructivo utilizando al sistema blanco.

4. Obtencin del espectro de absorcin y determinacin de (longitud de onda)

de trabajo.- Con el sistema 1 mida la absorbancia a 580 nm, ajuste ahora la en el

espectrofotmetro a 470 nm y mida la absorbancia nuevamente y as sucesivamente

hasta llegar a 460 nm a intervalos de 10 nm.

Nota: para cada cambio de se debe ajustar el espectrofotmetro con el blanco.

Registrar los datos de absorbancia y % de Transmitancia en la tabla y graficar

A = f() % T= f() y determine la longitud de onda de mxima absorcin.

5. Obtencin de la curva de calibracin: Se mide la absorbancia de los sistemas

preparados para la curva de calibracin (del 1 al 6), a la longitud de onda de mxima

absorcin y graficar A = f( Concentracin de ascrbico ).

29
LICENCIADO EN FARMACIA

V. RESULTADOS EXPERIMENTALES

Tabla - Datos experimentales del espectro de absorcin.

(nm) 460 470 480 490 500 510 520 530 540 550 560 570 580

%T

Grfica 1.- Espectro de Absorcin A= f( Longitud de onda )

Tabla- . Curva de Calibracin Indirecta

Sistema 1 2 3 4 5 6 SP1 SP2

Conc.M del

estndar

Absorbancia

30
LICENCIADO EN FARMACIA

Grafico 2.- Curva de Calibracin Indirecta de Ac. Ascrbico A = f(M)

VI. INFORME DE TRABAJO

ESQUEMA Y PUNTOS MNIMOS A EVALUAR PARA LA REALIZACIN DEL INFORME DE TRABAJO.

1.- Datos Generales


I) CARTULA. Incluir en ste orden: Nombre de la Universidad, nombre de la Facultad,
nombre de la Seccin, nombre de la asignatura comenzando con Laboratorio de,
Nmero y nombre de la prctica, Nmero de equipo, Nombre de los integrantes (solamente
de aquellos que participaron en su realizacin, se dar por entendido que los que no
aparezcan no recibirn calificacin correspondiente a esa prctica. Nombre de los
profesores (incluir grado: QFB, Q, M en C, Dr., etc.), Fecha de realizacin de la prctica y
Fecha de entrega de reporte.

II) NMERO Y NOMBRE DE LA PRCTICA.

III) OBJETIVOS PARTICULARES. Con base al objetivo general del Manual y a las
actividades realizadas en la prctica redactar 2-3 objetivos particulares recordando que
deben responder el Qu?, Cmo? y Para qu?.

31
LICENCIADO EN FARMACIA

IV) INTRODUCCIN. Incluir solamente aplicaciones del Mtodo de cuantificacin en las


diferentes reas que contempla su carrera, incluyendo ejemplos (recordar que deben citar
las referencias).

V) DIAGRAMA DE FLUJO. Incluir:


Preparacin del STD; indicando los volmenes, masas y/o concentraciones reales
que se emplearon en caso de una modificacin a la parte experimental reportada
en el Manual. Si se emplean reactivos comerciales incluir la pureza y densidad (en
caso de reactivos lquidos).
Preparacin de la muestra; indicando los posibles cambios realizados. Mencionar
la marca, presentacin y gramaje de la muestra empleada en caso que el alumno
la halla proporcionado.
Preparacin de los sistemas de la curva de calibracin; en forma de tabla
incluyendo nmero y nombre. En el caso del buffer especificar la concentracin y
pH reales con las que se trabajaron, as como del cido ascrbico y DFI.
Calibracin del equipo; paso a paso en forma de diagrama de flujo, puede incluir
imgenes o dibujos y ser con base a la explicacin del profesor no a lo reportado
en el Manual.
Realizacin del espectro de absorcin; mismas consideraciones del punto anterior.
Lectura de los sistemas de calibracin; mismas consideraciones del punto anterior.
Disposicin de residuos; mencionar cmo se dispusieron los residuos en la sesin
experimental.

2) RESULTADOS. Incluir:
Tabla .- Datos experimentales del espectro de absorcin, completa.
Grfico del espectro de absorcin indicando nmero y nombre CORRECTO (el
nombre correcto de un espectro de absorcin incluye el nombre del analito, la
composicin de la matriz as como las condiciones de amortiguamiento impuestas
y la concentracin del analito, la cual es bien conocida ya que se emplea un
sistema de la curva de calibracin para su realizacin), considerar que se incluirn
2 grficos, uno en funcin de Absorbancia y otro en % Transmitancia.

32
LICENCIADO EN FARMACIA

Tabla - Datos experimentales de la Curva de calibracin.


Grfico de la curva de calibracin indicando nmero y nombre CORRECTO (el
nombre correcto del grfico de una curva de calibracin se puede indicar bajo el
modelo: PROPIEDAD=f[analito]UNIDADES).
Adems debe incluir forzosamente: Ecuacin de la recta bajo el modelo:
PROPIEDAD = (valor de la pendiente) [analito]UNIDADES +/- (valor de la
ordenada al origen)
No indicar la propiedad y la concentracin del analito como x y y, y tambin
debe incluir Coeficiente de determinacin (r2).
Incluir tabla: con nmero y nombre.
Muestra empleada (nombre comercial)
Presentacin
Lote y fecha de caducidad (u origen)
Marbete (enfocndose slo al analito que se cuantific
experimentalmente)
Resultado experimental (reportado como en el marbete: mg/por
tableta, por 100ml, etc.)
% de contenido (principio activo con respecto al contenido registrado
por el marbete)

3) ANLISIS DE RESULTADOS. Incluir:


Realizar el anlisis e interpretacin correspondiente al valor del coeficiente de
determinacin para la validez de los resultados de cuantificacin.
Identificar y calcular las condiciones de amortiguamiento impuestas en los
sistemas de la curva (calcular el pH y pCH3COO)
Analizar los criterios qumicos que se emplearon para elegir la ptima en los 2
espectros de absorcin. Adems justificar porqu se consider ese rango de nm
para realizar el espectro de absorcin, para ello realizar la escala de zonas de
predominio para 2,6 DFI y ver el color que presenta en cada caso.
Proponer una escala de prediccin de reacciones redox para obtener la reaccin
representativa llevada a cabo entre el cido ascrbico y el DFI, Balancear, as
como calcular la Keq considerando que en los equilibrios redox el clculo no
es mediante Ley de Hess, sino mediante la frmula general que considera los E
(s).

33
LICENCIADO EN FARMACIA

Analizar que cambiara en la respuesta del espectro de absorcin y en la curva


de calibracin si el anlisis se realizara a un pH bsico. Explicar.
Analizar la relacin de las variables involucradas (A y Concentracin) en funcin
de la respuesta grfica y contrastarlas con la Ley de Lambert & Beer.
Calcular el Coeficiente de absortividad molar, incluyendo unidades correctas,
especificando a que sustancia corresponde ese valor.
Incluir los clculos de cuantificacin, en el siguiente orden: Clculo de la
concentracin del STD (debe coincidir con lo reportado en el diagrama de flujo
en Preparacin del STD), clculo de la concentracin de los sistemas de la curva,
Interpolacin de la propiedad de la muestra en la ecuacin de la curva, regresin
a las diluciones de la muestra (deben coincidir con lo reportado en el diagrama
de flujo en Preparacin de la muestra) y cambio de unidades a las similares al
marbete as como el % de principio activo; esto se debe reportar con los datos de
ambos sistemas problema (Sp1 y SP2), al final discutir sobre los resultados
obtenidos en ambos sistemas.
Con base al % de principio activo (recordar que es el comparativo entre el
resultado experimental y el reportado en el marbete) analizar las posibles fuentes
de error que condujeron a la diferencia con el contenido reportado y las acciones
preventivas que sugieres para la mejora.

4) CONCLUSIONES. Con base al objetivo y a los (particulares).

5) REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS, ELECTRNICAS O HEMEROGRFICAS.


Debern ser citadas ya sea en la introduccin o en el anlisis de resultados en caso que se
hallan empleado.

DATOS
cido ascrbico(C6H8O6) pKas = 4.05, 7.25
2,6 diclorofenolindofenol ( C12H7Cl2NO2 ) pKa= 5.758 (forma cida roja, bsica azul)
C6H7O6 - / C6H6O6 + H+ + 2e- Eo = 0.13 V ( a pH=4.5)
C12H7Cl2NO2 / C12H9Cl2NO2 Eo = 0.43 V ( a pH=4.5)
(roja) (Incolora)

34
LICENCIADO EN FARMACIA

VII. ORIENTACIONES PARA EL TRATAMIENTO Y DISPOSICIN DE RESIDUOS

El cido actico glacial, La inhalacin de sus vapores es altamente txico produce

trastornos en las vas respiratorias. Cualquier contacto directo con la piel u ojos debe de

lavarse con abundante agua.

35
LICENCIADO EN FARMACIA

PRCTICA No. 3 DETERMINACIN CUANTITATIVA DE ZINC EN UN MULTIVITAMNICO


MEDIANTE UNA CURVA DE CALIBRACIN POR ESPECTROFOTOMETRA DE ABSORCIN
ATMICA
I. OBJETIVOS

Conocer el fundamento, las partes bsicas y manejo del espectrofotmetro de


absorcin atmica, para obtener resultados confiables en este tipo de instrumento.
Interpretar y relacionar las variables a utilizar para efectuar el clculo de contenido
de zinc en un multivitamnico comercial por una curva de calibracin directa.
II. INTRODUCCIN

La curva de calibracin se prepara mediante diluciones de una solucin estndar (stock) de

la misma naturaleza del analito a determinar en la muestra, en un intervalo que pueda ser

trabajado en el instrumento y la muestra se prepara de manera tal que la concentracin del

analito en la muestra o en su dilucin se encuentre dentro de dicho intervalo.

Las soluciones preparadas se llevan al instrumento de medicin y se registra una respuesta

P para cada dilucin de estndar y de muestra. Los resultados se grafican P=

f(concentracin de cada dilucin del estndar). Se debe evaluar la linealidad de la respuesta

en relacin a la concentracin del analito mediante la inspeccin grfica y se efecta

adems la regresin lineal para determinar la mejor ecuacin que exprese el

comportamiento de la misma. La interpolacin de la seal de la muestra (o su dilucin) en

la recta permite conocer la concentracin de esta.

La Espectrometra de Absorcin Atmica (EAA) se utiliza habitualmente en la determinacin

cuantitativa de soluciones de iones metlicos Se ha aplicado a determinacin de hasta 70

elementos, en concentraciones trazas (ppb) y hasta 1%. Cabe mencionar que esta tcnica

no diferencia estados de oxidacin de los metales, por lo que solo se mide la cantidad de

metal total.

Previo a la cuantificacin por EAA es necesario realizar una digestin cida a fin de eliminar

la presencia de materia orgnica, an en muestras lquidas y adems para solubilizar los

metales, sobretodo en muestras slidas. Para ello se utiliza normalmente cido ntrico

36
LICENCIADO EN FARMACIA

concentrado y calor, hasta que no se generen humos amarillos, reflejo de que todava hay

una reaccin redox presente.

El zinc es un nutriente que nos aporta casi todas las enzimas de la piel, incluyendo aquellas

que se encargan de crear el colgeno y producir nuevas clulas, tanto el zinc como el hierro

son fundamentales en la produccin de clulas en los folculos capilares y en el transporte

de oxgeno, etc.

A continuacin, se presenta un esquema de un espectrofotmetro de absorcin atmica

con flama (EAA-F).

37
LICENCIADO EN FARMACIA

III. EQUIPO(S), REACTIVO(S) Y MATERIAL(ES)

MATERIAL REACTIVOS

1 piseta y 1 esptula Acido ntrico R.A. Multivitamnico


2 matraces volumtricos de 10 mL
Fortimin (o sol. oral

3 vasos de precipitados de 50 mL infantil de marca libre)

1 micropipeta de 100 L(vol. Variable)


Nitrato de Zn

1 parrilla con agitador magntico c/barra


Solo un equipo pedirlo EQUIPO

6 tubos de ensaye con gradilla Espectrofotmetro de

absorcin atmica
6 Matraces volumtricos de 10 mL

1 Matraces volumtricos de 25 mL

1Pipeta volumtrica de 1, 2, 3, 4, 5 mL

IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1.1Preparacin de soluciones

Solucin de cido ntrico 1 M.

Solucin estndar de Zn .- Se mide 1 ml de una solucin de Zn elemental 100 ppm con

pipeta volumtrica y se agrega y afora a 25 ml con solucin cida (soln. Stock).

Solucin problema del multivitamnico - Medir 0.1 mL del multivitamnico Fortimn (sol.

oral infantil) agregar con mucho cuidado 2 mL de cido ntrico concentrado, mezclando con

agitacin magntica y con calentamiento en parrilla a 100 oC * (colocarla dentro de la

campana de extraccin), para eliminar el azcar contenido, hasta que no se generen humos

amarillos. Enfriar y aforar a 10 mL con Soln. cida. (Soln. Problema)

38
LICENCIADO EN FARMACIA

*No sobrepasar la temperatura y tener paciencia hasta que la solucin quede lo ms transparente

posible

1.2 Preparacin de sistemas para la curva de calibracin y problema

Sistema 0 1 2 3 4 5 Pdiludo

Soln. Acida (mL) 3 3 3 3 3 3 3

Soln. Stock Zn aprox. 4 ppm 0 1 2 3 4 5 0

Soln. Problema (mL) 0 0 0 0 0 0 0.12

Agua destilada (aforo) 10 10 10 10 10 10 10

3. Obtencin de resultados

a) Optimizar las condiciones de medicin en el equipo (EAA-Fl).

Siguiendo el programa que controla el equipo, revisar que estn las siguientes condiciones:

muestreo manual, mezcla de gases = acetileno /aire, seal absorbancia, posicin correcta

de la lmpara, longitud de onda () 213.9 nm, ancho de banda = 0.7, voltaje de la lmpara

=15 A, etc. (para determinacin de zinc)

b) Optimizacin de la lmpara de ctodo hueco.

El procedimiento se realizar siguiendo las indicaciones del profesor para alinear la lmpara

de ctodo hueco hacia el monocromador y la posicin del quemador.

c) Medicin de la Absorbancia.

Considerando las indicaciones del programa de trabajo del equipo, primero se emplea agua

destilada y despus el blanco reactivo (sistema blanco) para calibrar la seal a cero.

Despus se solicitan las soluciones estndar y problemas, anotar la lectura promedio de

las mediciones que realiza (Tabla 2) y graficar los resultados que se van obteniendo.

39
LICENCIADO EN FARMACIA

V. RESULTADOS EXPERIMENTALES

Tabla 1. Medicin a absorbacia de los sistemas para la curva y problema

Sistema Zn(ppm) Abs.

estndar medida

Pdiludo

Grafica 1. Absorbancia en funcin de la concentracin de Zn

40
LICENCIADO EN FARMACIA

VI. INSTRUCCIONES PARA EL INFORME DE TRABAJO

ESQUEMA Y PUNTOS MNIMOS A EVALUAR PARA LA REALIZACIN DEL INFORME


DE TRABAJO.
1.- Datos Generales
I) CARTULA. Incluir en ste orden: Nombre de la Universidad, nombre de la Facultad,
nombre de la Seccin, nombre de la asignatura comenzando con Laboratorio de,
Nmero y nombre de la prctica, Nmero de equipo, Nombre de los integrantes (solamente
de aquellos que participaron en su realizacin, se dar por entendido que los que no
aparezcan no recibirn calificacin correspondiente a esa prctica. Nombre de los
profesores (incluir grado: QFB, Q, M en C, Dr., etc.), Fecha de realizacin de la prctica y
Fecha de entrega de reporte.

II) NMERO Y NOMBRE DE LA PRCTICA.

III) OBJETIVOS PARTICULARES. Con base al objetivo general del Manual y a las
actividades realizadas en la prctica redactar 2-3 objetivos particulares recordando que
deben responder el Qu?, Cmo? y Para qu?.

IV) INTRODUCCIN. Incluir solamente aplicaciones de la Tcnica instrumental en las


diferentes reas que contempla su carrera, incluyendo ejemplos (recordar que deben citar
las referencias).

V) DIAGRAMA DE FLUJO. Incluir:


Preparacin del STD; indicando los volmenes, masas y/o concentraciones reales
que se emplearon en caso de una modificacin a la parte experimental reportada
en el Manual. Si se emplean reactivos comerciales incluir la pureza y densidad (en
caso de reactivos lquidos).
Preparacin de la muestra; indicando los posibles cambios realizados. Mencionar
la marca y presentacin de la muestra empleada en caso que el alumno la halla
proporcionado. Incluir tabla:
Peso de polvo de tableta empleada
(unidades):
Peso promedio por tableta (unidades):

41
LICENCIADO EN FARMACIA

Preparacin de los sistemas de la curva de calibracin; en forma de tabla


incluyendo nmero y nombre. En el caso de la solucin cida indicar la
concentracin molar empleada.
Optimizacin del equipo; paso a paso en forma de diagrama de flujo, puede incluir
imgenes o dibujos y ser con base a la explicacin del profesor no a lo reportado
en el Manual. Recuerde especificar la mezcla de gases, longitud de onda y voltaje
de la lmpara que realmente se emplearon.
Optimizacin de la lmpara de ctodo hueco; mismas consideraciones del punto
anterior.
Calibracin con el sistema blanco y lectura de los sistemas de la curva de
calibracin; mismas consideraciones del punto anterior. No olvidar mencionar qu
se debe hacer una vez que se termin de usar el equipo ya para apagarlo.
Disposicin de residuos; mencionar cmo se dispusieron los residuos en la sesin
experimental.

2) RESULTADOS. Incluir:
Tabla No. 1.- Datos experimentales de la Curva de calibracin. Adicionando una
columna ms donde coloquen la concentracin molar (M) de cada sistema.
Grfico de la curva de calibracin indicando nmero y nombre CORRECTO (el
nombre correcto del grfico de una curva de calibracin se puede indicar bajo el
modelo: PROPIEDAD=f[analito]UNIDADES).
Adems debe incluir forzosamente: Ecuacin de la recta bajo el modelo:
PROPIEDAD = (valor de la pendiente) [analito]UNIDADES +/- (valor de la
ordenada al origen)
No indicar la propiedad y la concentracin del analito como x y y, y tambin
debe incluir Coeficiente de determinacin (r2). Recordar que se tienen que incluir 2
grficos, uno con unidades de concentracin Molar y otro con unidades de
concentracin en ppm, cada uno con las especificaciones citadas anteriormente.
Incluir tabla: con nmero y nombre.
Muestra empleada (nombre comercial)
Presentacin, Lote y fecha de caducidad (u origen)
Marbete (enfocndose slo al analito que se cuantific)
Resultado experimental (reportado como en el marbete
% de principio activo con respecto al marbete

42
LICENCIADO EN FARMACIA

3) ANLISIS DE RESULTADOS:
Incluir la copia de la hoja del Manual del equipo de Absorcin atmica para la
medicin de Zn.
Calcular el pH en los sistemas (es el mismo) en base a la concentracin utilizada
de HNO3 y ver si es una condicin de amortiguamiento.
Establecer que especie de Zn(II) es la representativa que tienen los sistemas
antes de medir, utilice una escala de zonas de predominio para Zn(II).
Justificar en base al clculo de solubilidad molar condicional (SM) que el Zn(II)
no ha precipitado bajo las condiciones de pH amortiguado y por ende es posible
el anlisis sin interferencias.
Analizar los criterios qumicos que se emplearon para elegir la ptima, se puede
apoyar con la curva de calibracin, la hoja para medicin de Zn por absorcin
atmica y al rango de concentraciones que se manejaron experimentalmente en
la curva de calibracin.
Describir brevemente con sus propias palabras como funciona la lmpara de
ctodo hueco y como se lleva a cabo el proceso de nebulizacin y atomizacin.
Mencionar las posibles interferencias que se pueden llevar a cabo y cmo
evitarlas para que no afecten en la medicin del Zn.
Analizar la relacin de las variables involucradas y contrastarlas con la Ley de
Lambert & Beer.
Calcular el Coeficiente de absortividad molar, incluyendo unidades correctas, la
manera de cmo se calcul con la grfica y su interpretacin.
Escribir la reaccin que se lleva a cabo en la Digestin cida con HNO3
concentrado, justificando el nombre de la entidad qumica que se genera en forma
de gas caf rojizo y el por qu se realiz en la prctica.
Incluir los clculos de cuantificacin, en el siguiente orden: Clculo de la
concentracin del STD (debe coincidir con lo reportado en el diagrama de flujo
en Preparacin del STD), clculo de la concentracin de los sistemas de la curva,
Interpolacin de la propiedad de la muestra en la ecuacin de la curva, considerar
las diluciones de la muestra (deben coincidir con lo reportado en el diagrama de
flujo en Preparacin de la muestra) y cambio de unidades a las similares al
marbete as como el % de principio activo; al final discutir sobre los resultados
obtenidos.

43
LICENCIADO EN FARMACIA

Con base al % de principio activo (recordar que es el comparativo entre el


resultado experimental y el reportado en el marbete) analizar los posibles errores
que condujeron a ese resultado, mencionando el tipo de error que cometi y las
acciones preventivas que sugieres para la mejora.

4) CONCLUSIONES. Con base al objetivo y a los redactados por ustedes (particulares).

5) REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS. Debern ser citadas ya sea en la introduccin o en


el anlisis de resultados en caso que se hallan empleado.

Datos
Zn(OH)nn-1 = log 1= 4.4 , log 3= 14.4, = log 4= 15.5 Zn(OH)2=15.68
o
HNO3 / NO2 E = 0.79 V
C12H22O11 CO2 (considere un potencial menor al HNO3)
(sacarosa)

VII. ORIENTACIONES PARA EL TRATAMIENTO Y DISPOSICIN DE RESIDUOS

La inhalacin de vapores de cido ntrico y sus productos de reaccin produce trastornos

en las vas respiratorias, usarlo siempre en la campana extractora.

La solucin cida sobrante de todo el grupo se debe mezclar y guardar bien etiquetada

indicando fecha de preparacin y concentracin aproximada en frasco de vidrio.

44
LICENCIADO EN FARMACIA

1 SESION DE EJERCICIOS

1.- El coeficiente de Absortividad Molar de una solucin acuosa de fenol a 211 nm es de

6170 cuando se mide en celdas de 1 cm, calcular el intervalo de concentraciones en el

cual La absorbancia no es menor a 0.15 ni mayor de 0.8.

2.-Trazar la curva de Calibracin espectrofotomtrica de Bi(III) Utilizando Bi(III) 1x10-3 M

como stocK a pH = 1.0 , si el coeficiente de absortividad molar del Bi(III) es 5300 a

=265 nm. Por AA

3.- Para determinar la glucosa en un suero un suero* se prepararon los siguientes

Sistema 1 2 3 4 5 6 7 8

NaOH 0.1 M 3 3 3 3 3 3 3 3

Estndar de glucosa 2x10-3 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0 0 0


M

Sol. Fe(CN)63- 0.01M 2 2 2 2 2 2 2 2

Suero sanguneo * 0 0 0 0 0 0.1 0.1 0.1

Aforo con agua destilada 10 10 10 10 10 10 10 10

Absorbancia a 420 nm 1.42 1.07 0.80 0.45 0.05 0.885 0.876 0.895

a) Graficar y obtener la funcin, mencionando el color de la sustancia que da la seal

b) Calcular los mg promedio de glucosa / dL de suero.

c) Calcular la media, desviacin estndar y % CV del problema.

d) Calcular el coeficiente de absortividad molar de Fe(CN)63-

5.-Resultados Obtenidos para evaluar la adecuabilidad del sistema en la determinacin de

Ampicilina/ Bromhexina en una formulacin por espectrofotometra, completar la tabla

45
LICENCIADO EN FARMACIA

Sistema Bromhexina Ampicilina

1 0.5698 0.659

2 0.5841 0.676

3 0.6113 0.674

4 0.5817 0.677

5 0.5852 0.657

6 0.5398 0.664

Promedio

Desviacin Estndar

CV %

Decir si el sistema de medicin empleado funciona adecuadamente Por qu?

6.- Los siguientes datos fueron obtenidos en la calibracin de un espectrofotmetro para la

determinacin de potasio en agua mineral

mg K /100 1.1 1.95 2.9 3.85 4.6 4.95

ml

Respuesta 14.2 28 37.3 48.4 62.7 69.4

A) Deducir la ecuacin de la mejor lnea recta

B) Si la muestra de agua da una seal de 30.3 Cul es el contenido de K en la

muestra?

46
LICENCIADO EN FARMACIA

PRCTICA No. 4 DETERMINACIN CUANTITATIVA DE CLORHIDRATO DE FENILEFRINA EN UN


PRODUCTO FARMACUTICO (TABLETAS Y/O GOTAS) MEDIANTE UNA CURVA DE CALIBRACIN
POR CROMATOGRAFA DE LQUIDOS DE ALTA RESOLUCIN (HPLC).
I. OBJETIVOS

Conocer los componentes bsicos del cromatgrafo de lquidos de alta


resolucin mediante su descripcin frente al equipo, su manejo y cuidados.
Conocer un cromatograma obtenido durante la sesin experimental para ser
utilizado en anlisis cualitativo y cuantitativo, considerando las variables
qumicas que afectan esta respuesta.
Interpretar y relacionar las variables de los cromatogramas obtenidos para
efectuar el clculo de contenido de clorhidrato de fenilefrina por una curva de
calibracin en productos comerciales.
II. INTRODUCCIN

La Cromatografa de Lquidos de Alta Resolucin es la tcnica de separacin ms

ampliamente utilizada en la industria, debido a su sensibilidad. Su fcil adaptacin a

determinaciones cuantitativas es idnea para sustancias no voltiles o termolbiles de

aplicacin en la industria, en muchos campos de la ciencia y para la sociedad en general.

En la Cromatografa de Lquidos de Alta Resolucin, se ponen en contacto dos fases

inmiscibles, una mvil y la otra estacionaria. Una muestra que se introduce en la fase mvil

es transportada a lo largo de la columna que contiene a la fase estacionaria distribuida. Los

componentes separados emergen en orden creciente de interacciones con la fase

estacionaria. La migracin depende de la solubilidad de los solutos en fase mvil o

estacionaria.

Los mtodos de evaluacin para las determinaciones cuantitativas por medio de HPLC son

variados. Sin lugar a duda, la calibracin con estndares es el mtodo ms utilizado

El xito de la separacin para un compuesto dado depende de las condiciones de operacin

como son: tipo y longitud de columna, proporcin y tipo de fase mvil, velocidad de flujo de

la fase mvil, etc.

47
LICENCIADO EN FARMACIA

Componentes bsicos que integran un equipo de HPLC

III. EQUIPO(S), REACTIVO(S) Y MATERIAL(ES)

Equipo y material Reactivos y smbolo de peligrosidad

Cromatgrafo de lquidos de alta

resolucin HPLC Metanol grado HPLC

Balanza analtica

1 agitador magntico c/barra


Trietanolamina

2 matraces aforados de 25 mL

1 esptula y piseta
cido actico

6 matraces aforados de 10 mL (grupo)

2 vasos de precipitados de 50 ml
Clorhidrato de Fenilefrina

1 pipeta volumtrica de 1,2,3,4,5 mL Fenilefrina problema (puede utilizar producto

1 pipeta graduada de 2 y 6 mL genrico solo verificando que no contiene

1 micropipeta de 10 a 100 microlitros paracetamol)

48
LICENCIADO EN FARMACIA

IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1.- PREPARACIN DE SOLUCIONES (verificar en el anaquel las soluciones ya

preparadas y en su caso solo utilizarlas)

-- FASE MOVIL [c. Actico-Trietanoamina-H2O (1.5:0.5:98)]

Se filtra al vaco a travs de una membrana con dimetro de poro 0.45mm.

Se coloca en un frasco perfectamente limpio y se lleva al ultrasonido 15 minutos.

-- SOLUCIN ESTNDAR DE FENILEFRINA

Se pesa en un vaso de precipitados de 50 mL, con balanza analtica, 20 mg del estndar

de fenilefrina, se disuelve en aproximadamente 20 mL de agua desionizada con

agitacin y se afora a 25 mL con fase mvil (Soln. A).

De la soln. A se toma una alcuota, con pipeta volumtrica, de 1 mL llevando a un aforo

de 25 mL con agua desionizada (Sol. Stock)

--- SOLUCIN PROBLEMA DE FENILEFRINA

Solucin Oftlmica.-Se toma una alcuota de 30 L de la solucin oftlmica*, se

adicionan a aproximadamente 5mL de fase mvil y se afora a 50 mL con agua

desionizada(Soln.P1).

49
LICENCIADO EN FARMACIA

*de acuerdo al marbete: 10g de fenilefrina / 100 mL de solucin.

Tabletas Pesar 5 tabletas y obtener el peso promedio por tableta (Anotarlo).

Triturar 2 tabletas y pesar la cantidad de polvo equivalente a 1 mg* de fenilefrina.

Disolver muy bien el polvo en aproximadamente 5 mL de fase mvil.

Aforar a 10 mL, con agua desionizada, filtrar para eliminar los excipientes insolubles

El filtrado es la soln. P2.

*calcular la cantidad de polvo a pesar de acuerdo al marbete del medicamento (que no debe

contener paracetamol de preferencia)

85
LICENCIADO FARMACIA

2.-TABLA 1 Preparacin sistemas CURVA DE CALIBRACIN Y PROBLEMAS

Sistemas 1 2 3 4 5 Pdil.1 Pdil.2

Sol Stock de fenilefrina aprox. 32 ppm 1 2 3 4 5 0 0

Soln. P (1 ) soln. oftlmica 0 0 0 0 0 3 0

Soln. P (2) tabletas 0 0 0 0 0 0 1

Aforo a mL Con agua desionizada 10 10 10 10 10 10 10

Trasvasar los sistemas debidamente etiquetados a frascos de plstico de aproximadamente

20 mL y Colocar las soluciones en el ultrasonido 5 minutos.

TABLA 2 CONDICIONES DE LA INSTRUMENTACIN PARA LA CORRIDA

CROMATOGRAFICA

Tipo de Flujo de fase Detector Longitud de Volumen de

columna Mvil onda Inyeccin

C-18 0.8 mL/min UV/VIS 272nm 20L

Se obtienen con atenuacin =5 en el registro.

51
LICENCIADO FARMACIA

3.-PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

A) Fijar el flujo de la fase mvil en la bomba

B) Ajustar la longitud de onda del detector

C) Iniciar el flujo de la fase mvil por la columna durante 10 min para asegurar la

remocin de posibles compuestos retenidos de la columna.

D) Inyectar 20L de las soluciones estndar, iniciando con el menos concentrado.

E) Finalizar con la inyeccin de las soluciones problema.

Despus de la ltima inyeccin, lavar la columna con una fase mvil Metanol/Agua

V. RESULTADOS EXPERIMENTALES

Llenar la siguiente tabla con los resultados del cromatograma o en su caso efectuar el

clculo (con la frmula pertinente) para cada una de las soluciones inyectadas (sistemas).

Sistema Concentracin (ppm) Tr (min) W rea Altura N AEPT

Tr= tiempo de retencin, W= ancho de pico a la base, N= Nmero de platos tericos, AEPT=

altura equivalente de un plato terico, ppm (partes por milln).

52
LICENCIADO FARMACIA

CURVA DE CALIBRACIN DE FENILEFRINA Area = f (concentracin)

VI. INFORME DE TRABAJO


ESQUEMA Y PUNTOS MNIMOS A EVALUAR PARA LA REALIZACIN DEL INFORME
DE TRABAJO.
1.- Datos Generales
I) CARTULA. Incluir en ste orden: Nombre de la Universidad, nombre de la Facultad,
nombre de la Seccin, nombre de la asignatura comenzando con Laboratorio de,
Nmero y nombre de la prctica, Nmero de equipo, Nombre de los integrantes (solamente
de aquellos que participaron en su realizacin, se dar por entendido que los que no
aparezcan no recibirn calificacin correspondiente a esa prctica. Nombre de los
profesores (incluir grado: QFB, Q, M en C, Dr., etc.), Fecha de realizacin de la prctica y
Fecha de entrega de reporte.

II) NMERO Y NOMBRE DE LA PRCTICA.

III) OBJETIVOS PARTICULARES. Con base en los objetivo de la prctica y a las


actividades realizadas en la misma redactar 2-3 objetivos particulares recordando que cada
objetivo dentro de su estructura deber responder a las preguntas Qu?, Cmo? y
Para qu?.

53
LICENCIADO FARMACIA

IV) INTRODUCCIN. Incluir solamente aplicaciones de la Tcnica instrumental en las


diferentes reas que contempla su carrera, incluyendo ejemplos (recordar que deben citar
las referencias).

V) DIAGRAMA DE FLUJO. Incluir:


Preparacin del STD; indicando los volmenes, masas y/o concentraciones reales
que se emplearon en caso de una modificacin a la parte experimental reportada
en el Manual. Si se emplean reactivos comerciales incluir la pureza y densidad (en
caso de reactivos lquidos). ***
Preparacin de la muestra; indicando los posibles cambios realizados. Mencionar
la marca y presentacin de la muestra empleada en caso que el alumno la halla
proporcionado. Si trabajaron con tabletas y gotas se debe describir la preparacin
por separado de cada muestra. Mencionar la composicin y proporcin de la Fase
mvil que se emple y describir brevemente cmo y con qu se llev a cabo el
proceso de filtracin. No olvidar mencionar el proceso de sonicacin. Incluir tabla:
Peso de polvo de tableta empleada
(unidades) o Volumen medido de gotas
Peso promedio por tableta (unidades):
Preparacin de los sistemas de la curva de calibracin; en forma de tabla
incluyendo nmero y nombre.
Optimizacin y preparacin del equipo; paso a paso en forma de diagrama de flujo,
puede incluir imgenes o dibujos y ser con base a la explicacin del profesor no
a lo reportado en el Manual. Recuerde especificar el lavado previo de la columna
(Fase estacionaria) y con qu Fase mvil, tipo de columna empleada (Tipo, marca
y longitud), Velocidad de flujo impuesto en la bomba, tipo de detector y longitud de
onda empleada. No es necesario mencionar las condiciones impuestas en el
integrador.
Lectura de los sistemas de la curva de calibracin; mismas consideraciones del
punto anterior. Enfatizar cmo se debe cargar la jeringa con la muestra para
inyectar y propiamente el proceso de inyeccin de la muestra al equipo. No olvidar
mencionar qu se debe hacer una vez que se termin de usar el equipo ya para
apagarlo.
Disposicin de residuos; mencionar cmo se dispusieron los residuos en la sesin
experimental.
54
LICENCIADO FARMACIA

2) RESULTADOS. Incluir:
Incluir los cromatogramas con nmero y nombre, tanto de TODOS los sistemas de
la Curva de calibracin como de su(s) muestra(s). Recortar y pegar de forma limpia
y ordenada, no solamente engraparlos, y sombrear con marcatextos los datos del
pico de la fenilefrina.
Tabla No. 1.- Datos experimentales de la Curva de calibracin y parmetros
cromatogrficos. Recuerda que la altura ser medido con una regla ya que es un
dato que no da el cromatograma. Incluir el clculo del Intervalo de confianza
para el tiempo de retencin y el nmero de platos toricos.
Grfico de la curva de calibracin indicando nmero y nombre CORRECTO (el
nombre correcto del grfico de una curva de calibracin se puede indicar bajo el
modelo: PROPIEDAD=f[analito]UNIDADES).
Adems debe incluir forzosamente: Ecuacin de la recta bajo el modelo:
PROPIEDAD = (valor de la pendiente) [analito]UNIDADES +/- (valor de la
ordenada al origen)
No indicar la propiedad y la concentracin del analito como x y y, y tambin
debe incluir Coeficiente de determinacin (r2). Recordar que se tienen que incluir 2
grficos, uno con rea como propiedad y otro con altura, cada uno con las
especificaciones citadas anteriormente.
Incluir tabla: con nmero y nombre. Si emple 2 muestras, sern 2 tablas, uno por
cada muestra.
Muestra empleada (nombre comercial)
Presentacin
Lote y fecha de caducidad (u origen)
Marbete (enfocndose slo al analito que se cuantific
experimentalmente)
Resultado experimental (reportado como en el marbete: por cpsula,
por 100ml, etc.)
% de principio activo con respecto al marbete

55
LICENCIADO FARMACIA

3) ANLISIS DE RESULTADOS. Incluir:


Calcular el pH y pAcO de la Fase mvil, considerando su preparacin y los datos
de pKas correspondientes.
Trazar el diagrama trivial de zonas de predominio para las especies de fenilefrina
y con base a esta indique la especie representativa presente en la separacin a
las condiciones de amortiguamiento.
Analizar los criterios qumicos que se emplearon para elegir la ptima de lectura
en el equipo.
Analizar qu tipo de cromatografa se emple con base a las polaridades de la
Fase mvil y Fase estacionaria y tambin con base a la proporcin de la Fase
mvil a lo largo de la corrida cromatogrfica, indicando el orden de separacin de
los analitos (que se presentaron en el cromatograma) con base a su polaridad
(quin saldra primero y al ltimo y porqu).
Mencionar que datos del cromatograma usaron para IDENTIFICAR el pico de la
fenilefrina y que datos usaron para CUANTIFICAR, indicando porqu.
Discutir cul es el motivo del porqu se les sugiere muestras farmacuticas sin
paracetamol.
Realizar el anlisis e interpretacin correspondiente al valor del coeficiente de
determinacin para la validez de los resultados de cuantificacin.
Incluir los clculos de N (# de platos tericos) y AEPT (o H) para cada sistema;
adems, calcular el tR promedio, N promedio y AEPT promedio y realizar el
anlisis correspondiente de estos parmetros cromatogrficos para justificar si la
separacin y corrida cromatogrfica fue eficiente.
Incluir los clculos de cuantificacin, en el siguiente orden: Clculo de la
concentracin del STD (debe coincidir con lo reportado en el diagrama de flujo
en Preparacin del STD), clculo de la concentracin de los sistemas de la curva,
Interpolacin de la propiedad de la muestra en la ecuacin de la curva, regresin
a las diluciones de la muestra (deben coincidir con lo reportado en el diagrama
de flujo en Preparacin de la muestra) y cambio de unidades a las similares al
marbete as como el % de principio activo; esto se debe reportar para cada una
de las muestras que se trabajaron y cada una empleando la curva con rea y con
altura, al final discutir sobre la variabilidad de ambos resultados.
Con base al % de principio activo (recordar que es el comparativo entre el
resultado experimental y el reportado en el marbete) analizar los posibles errores
56
LICENCIADO FARMACIA

que condujeron a ese resultado, mencionando el tipo de error que cometi y las
acciones preventivas que sugieres para la mejora.

4) CONCLUSIONES. Con base en los objetivos de la prctica y a los redactados por


ustedes (particulares).

5) REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS. Debern ser citadas ya sea en la introduccin o en


el anlisis de resultados en caso que se hallan empleado.

DATOS

pKa(s) = 8.8 y 9.8

cido actico CH3COOH pKa = 4.8 trietanolamina pKa= 7.8

57
LICENCIADO FARMACIA

VII. ORIENTACIONES PARA EL TRATAMIENTO Y DISPOSICIN DE RESIDUOS

Procurar generar y guardar la menor cantidad de residuos. Aquellas soluciones que puedan

ser re-utilizadas deben emplearse o bien ser desechadas adecuadamente

58
LICENCIADO FARMACIA

PRCTICA No. 5 DETERMINACIN CUANTITATIVA DE ALCOHOL ETLICO EN ENJUAGUE BUCAL


MEDIANTE EL MTODO DE ADICIN DE ESTNDAR INTERNO POR CROMATOGRAFA DE GASES.

I. OBJETIVOS

Aplicar los conocimientos tericos adquiridos para emplear el mtodo de adicin del
estndar interno al realizar un anlisis cuantitativo.
Conocer e identificar las partes bsicas del cromatgrafo de gases para capacitarse
en su manejo a fin de obtener resultados confiables.
II. INTRODUCCION

En Cromatografa de Gases (CG) la muestra se inyecta y volatiliza en la cabeza de una

columna cromatogrfica. La elucin se produce por el flujo de una fase mvil, un gas inerte

(no interacciona con las molculas del analito) cuya nica funcin es la de transportar el

analito a travs de la columna (fase estacionaria). Al pasar por la columna los solutos son

separados y eluyen hacia el detector, cuya respuesta se visualiza en un integrador o una

computadora.

Los estndares internos tienen su mxima utilidad cuando hay prdidas inevitables de la

muestra, por ejemplo durante una inyeccin manual en CG. Si se agrega un estndar

interno a una mezcla antes de cualquier prdida, entonces la fraccin de estndar que se

pierde es la misma que la fraccin de la muestra que se pierde y el cociente (Cmta/Cstd)

permanece constante.

Un compuesto para ser utilizado como Estndar Interno (EI), debe reunir los siguientes

requisitos: a) que el pico de respuesta est cercanos pero resuelto de los componentes a

determinar, b) que sea estable y qumicamente inerte, c) tener estructura similar al

componente a determinar, d) no estar presente en la muestra original y e)tener alto grado

de pureza.

59
LICENCIADO FARMACIA

Los enjuagues bucales llevan la finalidad primordial de corregir el mal aliento de origen

bucal, tornndolo agradable. Para ello, deben controlar el desarrollo bacteriano y dejar la

boca agradablemente fresca, por eso integran en su composicin etanol.

1. Fase mvil (gas)


2. Puerto de inyeccin
3. Columna (FE)
4.Horno de la columna
5. Detector
6. Computadora

Esquema de un cromatgrafo de gases

III. EQUIPO(S), REACTIVO(S) Y MATERIAL(ES)

REACTIVOS MATERIAL EQUIPOS

Alcohol etlico 6 tubos de ensaye de volumen Cromatgrafo de

pequeo con gradilla gases con detector

3 vasos de precipitado de 50 mL de ionizacin de

1piseta flama

Alcohol n-proplico 1 jeringa para CG de 10 L

1 micropipeta de 100 a 1000 L

60
LICENCIADO FARMACIA

V. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1. Preparacin de soluciones

Solucin estndar externo. Tomar 200 L de etanol y adicionar 800 L de agua

destilada en un tubo de ensaye (Soln. 1).

Solucin estndar interno. Tomar 100 L de n-propanol, colocarlos en un tubo de

ensayo y adicionar 900 L de agua destilada; (Soln. 2).

Mezcla de estndares. Colocar en un tubo de ensayo 100 L de la Soln. 1 y 100 L

de la Soln. 2 y adicionar 800 L de agua destilada.

Solucin problema. Colocar en un tubo de ensayo 100 L de la Soln. 2 y 100 L del

enjuague bucal y adicionar 800 L de agua destilada

2.- DESARROLLO EXPERIMENTAL

Conectar y verificar las conexiones elctricas del equipo

Abrir las vlvulas de los tanques de gas (nitrgeno e hidrgeno) y las llaves de paso.

Encender el equipo y dejarlo calentar.

a) Seleccionar las condiciones de medicin en el equipo (CG-FID).

Siguiendo la pantalla y el programa que controla el equipo, revisar que estn las siguientes

condiciones.

61
LICENCIADO FARMACIA

Tabla 1. Parmetros a emplear para la separacin de alcoholes por CG-FID

PARMETRO CONDICIONES

Columna DB-wax 30 m Megabore

Gas acarreador Nitrgeno, a 5 psi

Presin de aire 7 psi

Presin de hidrgeno 20 psi

Temperatura del inyector 200C

Temperatura del detector 250C

Encender el detector y verificar su encendido.

b) Obtencin de los cromatogramas.

1.- Inyectar 1.0 L de la Soln 1, esperar a que se registre el pico del alcohol. Hacer la

inyeccin por duplicado.

2.-Inyectar 1.0 L de la Mezcla de estndares, esperar a que se registren los picos. Hacer

la inyeccin por duplicado.

3.-Inyectar 1.0 L de la Solucin problema y esperar a que se registren los picos de los

alcoholes.

Una vez obtenidos los cromatogramas, anotar los datos promedio de cada inyeccin en la

Tabla 2.

NOTA:

Al terminar las inyecciones, llevar a cabo el proceso de lavado, que consiste en DEJAR 10

MINUTOS EL FLUJO DEL GAS DE ARRASTRE y luego apagar el equipo y cerrar los

gases.

62
LICENCIADO FARMACIA

V. RESULTADOS EXPERIMENTALES

Tabla 2. Resultados obtenidos con los cromatogramas correpondientes.

Inyeccin Soln. 1 Mezcla estndares Solucin Problema

Analito Etanol Etanol Propanol Etanol Propanol

Conc. % (v/v)

Tiempo

retencin

rea de pico

Ancho de pico

Platos tericos

Resolucin

Calcular los parmetros asociados a la separacin (nmero de platos tericos y resolucin)

a partir de los datos de tiempo de retencin (Tr), ancho y rea de pico.

63
LICENCIADO FARMACIA

VII. INFORME DE TRABAJO


ESQUEMA Y PUNTOS MNIMOS A EVALUAR PARA LA REALIZACIN DEL INFORME
DE TRABAJO.
1.- Datos Generales
I) CARTULA. Incluir en ste orden: Nombre de la Universidad, nombre de la Facultad,
nombre de la Seccin, nombre de la asignatura comenzando con Laboratorio de,
Nmero y nombre de la prctica, Nmero de equipo, Nombre de los integrantes (solamente
de aquellos que participaron en su realizacin, se dar por entendido que los que no
aparezcan no recibirn calificacin correspondiente a esa prctica. Nombre de los
profesores (incluir grado: QFB, Q, M en C, Dr., etc.), Fecha de realizacin de la prctica y
Fecha de entrega de reporte.

II) NMERO Y NOMBRE DE LA PRCTICA.

III) OBJETIVOS PARTICULARES. Con base al objetivo general del Manual y a las
actividades realizadas en la prctica redactar 2-3 objetivos particulares recordando que
deben responder el Qu?, Cmo? y Para qu?.

IV) INTRODUCCIN. Incluir solamente aplicaciones de la Tcnica instrumental en las


diferentes reas que contempla su carrera, incluyendo ejemplos (recordar que deben citar
las referencias).

V) DIAGRAMA DE FLUJO. Incluir:


Preparacin de los STDs y mezcla de STDs; indicando los volmenes, masas y/o
concentraciones reales que se emplearon en caso de una modificacin a la parte
experimental reportada en el Manual. Si se emplean reactivos comerciales incluir
la pureza y densidad (en caso de reactivos lquidos).
Preparacin de la muestra + STDINTERNO; indicando los posibles cambios
realizados. Mencionar la marca y % etanol de la muestra empleada en caso que el
alumno la halla proporcionado.
Optimizacin y preparacin del equipo; paso a paso en forma de diagrama de flujo,
puede incluir imgenes o dibujos y ser con base a la explicacin del profesor no
a lo reportado en el Manual. Recuerde especificar tipo de columna empleada (Tipo,
marca y longitud), Gas acarreador empleado y presin trabajada de ste,
64
LICENCIADO FARMACIA

temperatura del inyector, tipo de detector y la rampa empleada (en caso de utilizar
una cromatografa por gradiente de temperatura).
Lectura de los sistemas; mismas consideraciones del punto anterior. Enfatizar
cmo se debe cargar la jeringa con la muestra para inyectar y propiamente el
proceso de inyeccin de la muestra al equipo. No olvidar mencionar qu se debe
hacer una vez que se termin de usar el equipo ya para apagarlo.
Disposicin de residuos; mencionar cmo se dispusieron los residuos en la sesin
experimental.
2) RESULTADOS. Incluir:
Incluir los cromatogramas con nmero y nombre, recordar que se debe incluir el
cromatograma de la mezcla de STDs y TODOS los cromatogramas de las
muestras que se hallan empleado en el grupo, ya que se cuantificarn todas las
muestras por cada equipo. Recortar y pegar de forma limpia y ordenada, no
solamente engraparlos, y sombrear con marcatextos los datos del pico del Etanol
de un color y con otro los datos del pico del n-propanol.
Tabla No. 2.- Datos experimentales y parmetros cromatogrficos. Incluir dos filas
adicionales al final una para escribir la altura de pico y otra para el AEPT. Recuerde
que las unidades del tR es en minutos y W (ancho del pico) es en segundos para
que los considere en los clculos, ya que ambos datos deben estar en las mismas
unidades al aplicar las frmulas. Recordar que la resolucin es el nico parmetro
contemplado en la tabla que es compartido por 2 picos (etanol y n-propanol).
Incluir tabla: con nmero y nombre. Recordar que el Marbete (% de etanol en el
enguaje) hay productos que si lo mencionan y otros no y por ende se tienen que
investigar en la pgina web de la marca comercial.
Muestra empleada (nombre comercial)
Presentacin, Lote y fecha de caducidad (u origen)
Marbete (enfocndose slo al analito que se cuantific
experimentalmente)
Resultado experimental (reportado como en el marbete)
% de principio activo con respecto al marbete

65
LICENCIADO FARMACIA

3) ANLISIS DE RESULTADOS. Incluir:


Analizar y discutir que dato(s) podran emplear para dar validez y confiabilidad de
sus resultados.
Describir brevemente el funcionamiento del detector empleado y que propiedad
es la que se registra.
Analizar qu tipo de cromatografa se emple con base a la polaridad de la Fase
estacionaria, y tambin con base a la variacin de la temperatura a lo largo de la
corrida cromatogrfica, indicando el orden de separacin
Describir la importancia de emplear el mtodo de adicin de estndar interno
cuando se emplea a la cromatografa de gases como tcnica instrumental.
Mencionar la importancia que tiene realizar una rampa de temperatura para
mejorar la eficiencia en la separacin de los analitos.
Mencionar que datos del cromatograma usaron para IDENTIFICAR los picos de
ambos alcoholes y que datos usaron para CUANTIFICAR, indicando porqu.
Incluir los clculos de N (# de platos tericos), AEPT (o H) y R (resolucin) para
cada analito en ambos sistemas; adems, calcular el tR promedio, N promedio,
AEPT promedio y R promedio y realizar el anlisis correspondiente de estos
parmetros cromatogrficos para justificar si la separacin y corrida
cromatogrfica fue eficiente.
Incluir los clculos de cuantificacin, en el siguiente orden: Clculo de la
concentracin de los STDs en la mezcla de STDs (debe coincidir con lo
reportado en el diagrama de flujo en Preparacin de los STDs y mezcla de
STDs), clculo del Factor Respuesta, clculo del % de etanol en el sistema de
muestra + STDINTERNO y considerar las diluciones de la muestra, en caso que por
necesidad se hallan tenido que realizar (deben coincidir con lo reportado en el
diagrama de flujo en Preparacin de la muestra + STDINTERNO) y cambio de
unidades a las similares al marbete as como el % de principio activo; esto se
debe realizar empleando las reas y las alturas como propiedad.
Con base al % de principio activo (recordar que es el comparativo entre el
resultado experimental y el reportado en el marbete) analizar los posibles errores
que condujeron a ese resultado, mencionando el tipo de error que cometi y las
acciones preventivas que sugieres para la mejora.

66
LICENCIADO FARMACIA

4) CONCLUSIONES. Con base al objetivo general del Manual y a los redactados por
ustedes (particulares).

5) REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS. Debern ser citadas ya sea en la introduccin o en


el anlisis de resultados en caso que se hallan empleado.

DATOS DE LOS REACTIVOS Y DE LA COLUMNA PARA LA PRCTICA.

Columna DB-WAX 304

30 m x 0.32 mm DI, pelcula 0.25 m, fase estacionaria: columna tubular capilar de

polietilen glycol (PEG). POLAR

Temperatura minima 20C. Limite de mxima temperatura: 250 oC.

Gas acarreador: Nitrgeno de alta pureza.

Gases para el Detector de Ionizacin de Flama (FID): Hidrgeno alta pureza - Aire.

ETANOL, J. T. Baker, P.M. 46.0 g/mol, n-PROPANOL, J. T. Baker, P.M. 60.097 g/mol,
99.85 % de Pureza, densidad 0.79 g/ml, 99.0 % de Pureza, densidad 0.80 g/ml, Punto
Punto de ebullicin: 78.3 oC de ebullicin: 97.2 oC

67
LICENCIADO FARMACIA

VI. ORIENTACIONES PARA EL TRATAMIENTO Y DISPOSICIN DE RESIDUOS

Los remanentes de la solucin se deben de almacenar para su tratamiento posterior dado

el poco volumen generado.

68
LICENCIADO FARMACIA

PRCTICA No. 6 DETERMINACIN CUANTITATIVA DE PLATA EN DESINFECTANTES DE VERDURAS


MEDIANTE UNA CURVA DE CALIBRACIN POTENCIOMTRICA EMPLEANDO ELECTRODOS IN
SELECTIVOS.

I. OBJETIVO
A) Conocer el funcionamiento de los Electrodos in-especficos mediante su empleo y

aplicacin en un mtodo analtico, y de esta manera recordar la correcta forma de

calibracin del potencimetro y su manejo adecuado en la obtencin de resultados

confiables al utilizar este tipo de instrumentos.

B) Cuantificar la cantidad de plata en un desinfectante por medio de una Curva de

calibracin potenciomtrica con uso de un Electrodo especfico a plata, para

analizar la aplicacin de este tipo de mtodos analticos en el rea.

II. INTRODUCCIN

El mtodo empleado en esta prctica describe el procedimiento a seguir y el equipo

necesario para la determinacin de plata en un producto mediante la Tcnica

potenciomtrica de in selectivo en una Curva de calibracin.

Esta metodologa se fundamenta en el uso de un electrodo de in-especfico sensible a

plata. La diferencia de potencial desarrollada por este electrodo (con el de referencia) y la

concentracin de plata se ajustan a la ecuacin de Nernst, como se muestra a

continuacin:

E= E 0.059 pAg (si el potencial est dado en Volts), o bien

E= E 59 pAg (si el potencial est dado en miliVolts)

Esta ecuacin permitir calcular la concentracin de soluciones incgnitas utilizando

soluciones estndar. La concentracin de plata en la muestra, se determina directamente

por interpolacin de la lectura obtenida en la curva de calibracin. Por lo tanto, cualquier

especie de plata que no se encuentre como in plata, no ser detectada por el electrodo y

necesitar un tratamiento previo para su deteccin.

69
LICENCIADO FARMACIA

La plata se ha utilizado como conservador ya que impide el crecimiento de hongos y

bacterias en frutas, verduras, agua y el organismo as como sanitizacin de redes

hidrulicas y uso mdico aunque su uso es restringido por provocar una condicin llamada

argiria. Tambin, evidencia clnica seala su eficacia para erradicar infecciones vaginales

por levaduras de hongos con aplicacin tpica y duchas vaginales.

III.- PARTE EXPERIMENTAL

MATERIAL POR EQUIPO SOLUCIONES


Muestra de inters: desinfectante para frutas y
2 vasos de precipitados de 50 ml
legumbres que contenga plata, ejemplo microdyn
1 pipeta volumtrica 0.5, 2, 3, 5, mL
2 pipetas volumtricas de 1 mL
Solucin de cido ntrico al 10%
2 pipetas volumtricas de 3 mL
6 vasos de volumen pequeo
(copas tequileras) Solucin de Nitrato de plata 0.01M
5 matraces aforados de 10 mL Tampn de fuerza inica (nitrato de sodio)1.0 M
1 bureta de 10 mL
1 soporte con pinzas
1 parrilla con agitador magntico y barra
magntica (la trae el alumno) Solucin de Cloruro de potasio 0.01 M
1 perilla y una esptula pequea Puente de agar
potencimetro con electrodo selectivo a
1 micropipeta
plata y electrodo de calomel
Tiras de papel pH

A) LIMPIEZA DE MATERIAL

1.- Lavar perfectamente el material y enjuagar por varios minutos con HNO 3 al 10%,

posteriormente enjuagar con agua de la llave y finalmente con agua destilada.

70
LICENCIADO FARMACIA

B) ESTANDARIZACIN DEL STOCK DE NITRATO DE PLATA (puede realizarlo un

solo equipo y compartir los datos, seguir instrucciones del asesor)

Medir 3 mL de KCl 0.01M (patrn primario) con pipeta volumtrica y verter en un vaso de

volumen pequeo, 2 mL de agua destilada y agregar 5 gotas de K2CrO4 al 5%, mezclar.

(Ver la figura del montaje para esta valoracin al final de la pgina).

Llenar la bureta con la Solucin de Nitrato de plata de concentracin aproximada 0.01M

(stock) y agregar poco a poco esta solucin hasta el cambio de amarillo (turbio) a caf rojizo.

Realizar por triplicado y obtener el volumen promedio para calcular exactamente la

concentracin de la Solucin de Nitrato de plata 0.01M (stock), as como el promedio,

desviacin estndar y el % RSD*

Al finalizar la valoracin, medir el pH de slo uno de los sistemas resultantes con tiras de

papel pH.

*Conocido tambin como coeficiente de variacin (C.V.), se calcula con la frmula:

No debe ser mayor al 5% en el caso de mtodos volumtricos. Esto ayudar a que los

alumnos evalen la calidad de su trabajo experimental, adems de que el profesor pueda

ver avances con respecto al inicio del curso y al final de ste.

71
LICENCIADO FARMACIA

TRATAMIENTO DE LA MUESTRA

Se mide 1 mL del desinfectante (verificar que el marbete indique contener plata) en un vaso

de precipitados de 50 mL, se agregan 5 mL de Tampn de fuerza inica (nitrato de sodio)

1.0 M y dos gotas de cido ntrico, reactivo analtico, mantener en agitacin magntica y

calentar a 100 C por 5 minutos, transcurrido el tiempo, permitir que se enfre, en caso de

ser necesario filtrar y trasvasar al matraz volumtrico para as llevar al aforo de 10 mL.

(Solucin problema)

C) PREPARACIN DE LA CURVA DE CALIBRACIN

Preparar en matraces volumtricos cada uno de los sistemas para

trazar la curva de calibracin, segn la siguiente tabla, se

trasvasar despus cada sistema a un vaso de volumen pequeo

(copas tequileras) para su posterior medicin de potencial (E).

SISTEMAS 1 2 3 4 5 6 Pdiludo
Solucin de Nitrato de plata
0.25 0.5 1 2 4 8 0
0.01M (stock) (mL)

Tampn de fuerza inica


2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0
(nitrato de sodio) 1.0 M (mL)

Solucin problema (mL) 0 0 0 0 0 0 5

Aforo con agua destilada (mL) 10 10 10 10 10 10 10

A un solo sistema de la curva, medirle el pH con tiras.

NOTA: En caso de registrar una lectura alta, en la muestra problema, preparar otro sistema con

mayor volumen de problema. Por el contrario, en caso de una lectura baja colocar menor volumen

de solucin problema.

72
LICENCIADO FARMACIA

**; para el caso nico del sistema Pdiludo (muestra problema)

E) DETERMINACIN POTENCIOMTRICA

1.- Efectuar el montaje experimental (pgina siguiente) con el potencimetro,

calibrar previamente (cerrando el circuito con el cable correspondiente).

2.- Introducir los electrodos en la solucin correspondiente y ajustar la posicin

del vaso que contiene Ag y su velocidad de agitacin.

3.-Situar el botn del potencimetro en el modo de milivoltios (mV) y una vez estabilizada

la lectura, proceder a su anotacin.

NOTA: Para la mayora de las muestras, la lectura se estabiliza en 1minuto. La


estabilizacin de las lecturas tarda ms a concentraciones bajas.
Se recomienda medir de la solucin ms diluida a la ms concentrada en este caso no es
necesario el lavado de los electrodos entre mediciones. Para el caso de las muestras
problema, lavar los electrodos con agua destilada y secar suavemente antes de proceder a
efectuar la siguiente determinacin.

73
LICENCIADO FARMACIA

NOTA Una vez realizada la medicin, no desechar nada hasta asegurarse de que los
resultados obtenidos son los adecuados. Almacenar las soluciones de trabajo restantes
debidamente etiquetadas. NO DESECHARLAS. Para los sistemas de la curva una vez
concluida la prctica, seguir el procedimiento indicado en la disposicin de residuos.

IV.- RESULTADOS

Tabla No. 1 Estandarizacin de Solucin de Nitrato de plata 0.01M (stock)

Concentracin Volumen (mL) Volumen de AgNO3


Alcuota Molar exacta exacto de KCl utilizado para llegar al
de KCl medido punto de equivalencia

1 V1 =

2 V2 =

3 V3 =

pH del sistema Promedio =_______________

_____________ Desviacin estndar (STD) =_____________

% Desviacin estndar relativa (% RSD)* =_____________

74
LICENCIADO FARMACIA

Tabla No.2.- Curva de Calibracin

Sistemas 1 2 3 4 5 6
Pdiludo
Concentracin Molar de de Ag --------
-
-log de la concentracin (pAg)

Lectura en milivoltios (mV)

pH de uno de los sistemas ________________________

Grfica No. 1.- E = f (-log [Ag+])

V.- INFORME DE TRABAJO


ESQUEMA Y PUNTOS MNIMOS A EVALUAR PARA LA REALIZACIN DEL INFORME
DE TRABAJO.
1.- Datos Generales
I) CARTULA. Incluir en este orden: Nombre de la Universidad, nombre de la Facultad,
nombre de la Seccin, nombre de la asignatura comenzando con Laboratorio de,
Nmero y nombre de la prctica, Nmero de equipo, Nombre de los integrantes (solamente
de aquellos que participaron en su realizacin, se dar por entendido que los que no
aparezcan no recibirn calificacin correspondiente a esa prctica. Nombre de los
profesores (incluir grado: QFB, Q, M en C, Dr., etc.), Fecha de realizacin de la prctica y
Fecha de entrega de reporte.
75
LICENCIADO FARMACIA

II) NMERO Y NOMBRE DE LA PRCTICA.

III) OBJETIVOS PARTICULARES. Con base al objetivo general del Manual y a las
actividades realizadas en la prctica redactar 2-3 objetivos particulares recordando que
deben responder el Qu?, Cmo? y Para qu?.

IV) INTRODUCCIN. Incluir solamente aplicaciones del Mtodo de cuantificacin y de los


electrodos in selectivos en las diferentes reas que contempla su carrera, incluyendo
ejemplos (recordar que deben citar las referencias).

V) DIAGRAMA DE FLUJO. Incluir:


NOTA: Describir de manera breve como se realiz el lavado de material.
Estandarizacin del STD de Nitrato de plata; no olvidar indicar los posibles cambios
en volmenes o concentraciones que pudieron haberse realizado. Indicar la
concentracin correcta y real del KCl.
Preparacin de la muestra; indicando los posibles cambios realizados. Mencionar
la marca y gramaje de la muestra empleada en caso que el alumno la halla
proporcionado.
Preparacin de los sistemas de la curva de calibracin; en forma de tabla
incluyendo nmero y nombre. Especificar en la tabla la concentracin real del
estndar de Nitrato de plata (obtenido y calculado en el paso de la Estandarizacin)
y la concentracin y composicin real del Tampn de fuerza inica. En caso de
haber realizado sistemas adicionales, ya sea de la curva o de la muestra, indicarlos
igual en la tabla.
Calibracin del equipo; paso a paso en forma de diagrama de flujo, puede incluir
imgenes o dibujos y ser con base a la explicacin del profesor no a lo reportado
en el Manual.
Montaje experimental; mismas consideraciones del punto anterior. Enfatizar bien
en lo que contiene cada uno de los vasos o copas tequileras y qu electrodo se
sumergir en cada solucin (tipo y composicin).
Lectura de los sistemas de la curva de calibracin; mismas consideraciones del
punto anterior. Mencionar qu solucin se ir cambiando y cul permanecer
dentro de su vaso, as como la propiedad que se medir y en qu unidades.

76
LICENCIADO FARMACIA

Disposicin de residuos; mencionar cmo se dispusieron los residuos en la sesin


experimental.

2) RESULTADOS. Incluir:
Tabla No. 1.- Datos experimentales de la estandarizacin del estndar de Nitrato
de plata. No olvidar colocar en una fila adicional al final de la tabla los datos de
Promedio, STD y %RSD para los 3 volmenes gastados de KCl obtenidos en este
paso.
Tabla No. 2.- Datos experimentales de la Curva de calibracin. Considere que la
concentracin que debe reportar es de Plata no de Nitrato de plata. si realiz varias
muestras o de una misma hizo varios sistemas coloque una columna en la tabla
de resultados para cada sistema.
Grfico de la curva de calibracin indicando nmero y nombre CORRECTO (el
nombre correcto del grfico de una curva de calibracin se puede indicar bajo el
modelo: PROPIEDAD=f[analito]UNIDADES).
Adems debe incluir: Ecuacin de la recta bajo el modelo:
PROPIEDAD = (valor de la pendiente) [analito]UNIDADES +/- (valor de la
ordenada al origen)
No indicar la propiedad y la concentracin del analito como x y y, y tambin
debe incluir Coeficiente de determinacin (r2). No olvidar que la propiedad la debe
graficar en funcin de -log[Plata]MOLAR.
Incluir tabla: con nmero y nombre.
Muestra empleada (nombre comercial)
Presentacin, Lote y fecha de caducidad (u origen)
Marbete (enfocndose slo al contenido de plata inica)
Resultado experimental (reportado como en el marbete % p/v)
% de principio activo con respecto al marbete

77
LICENCIADO FARMACIA

3) ANLISIS DE RESULTADOS. Incluir:


Realizar el anlisis e interpretacin correspondiente del %RSD para determinar
si tiene validez los resultados de la estandarizacin para el clculo de la
concentracin del estndar de Nitrato de plata.
Plantear la reaccin generalizada de estandarizacin y la reaccin generalizada
de deteccin del punto final de valoracin.
Trazar la escala de zonas de predominio para las especies de plata en funcin
del pH.
Plantear la reaccin representativa de estandarizacin y representativa de
deteccin del punto final de valoracin, calcular para cada una el valor de Keq.
Justificar el uso de K2CrO4 5% como indicador del punto final de estandarizacin
con base al clculo de las solubilidades molares condicionales.
Justificar el por qu se realiz el lavado con HNO3 10% del material empleado.
Realizar el anlisis e interpretacin correspondiente al valor del coeficiente de
determinacin para la validez de los resultados de cuantificacin.
Investigar y describir qu es la fuerza inica y porqu hay que controlarla
justificando la funcin que tiene el tampn de fuerza inica en la matriz para la
lectura de los sistemas de la curva, as como la justificacin del uso de un puente
de agar entre los sistemas de la curva y la solucin de KNO3.
Mencionar brevemente el funcionamiento del electrodo in selectivo de plata.
Analizar la relacin de las variables involucradas y contrastarlas con la Ecuacin
de Nernst, justificando el signo y el valor de la pendiente obtenida.
Incluir los clculos de cuantificacin, en el siguiente orden: Clculo de la
concentracin del Stock (debe coincidir con lo reportado en el diagrama de flujo
en Estandarizacin del STD de Nitrato de plata), clculo de la concentracin de
los sistemas de la curva, clculo del -log[Plata], interpolacin de la propiedad de
la muestra en la ecuacin de la curva, considerar las diluciones de la muestra
(deben coincidir con lo reportado en el diagrama de flujo en Preparacin de la
muestra) y cambio de unidades a las similares al marbete as como el % de
principio activo.
Con base al % de principio activo (recordar que es el comparativo entre el
resultado experimental y el reportado en el marbete) analizar los posibles errores
que condujeron a ese resultado, mencionando el tipo de error que cometi y las
acciones preventivas que sugieres para la mejora.
78
LICENCIADO FARMACIA

4) CONCLUSIONES. Con base al objetivo general del Manual y a los redactados por
ustedes (particulares).

5) REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS. Debern ser citadas ya sea en la introduccin o en


el anlisis de resultados en caso que se hayan empleado.
DATOS
Ag+/ Ag E = 0.79 v Electrodo de Calomel E= 0.245 v
Ag(OH)n 1 n log 1 = 2.3, log 2 = 3.6, log 3 = 4.8
H2CrO4 pKa(s) = 0.8, 6.5 Ag2CrO4 pKs= 11.95 AgCl pKs= 9.75

VI. ORIENTACIONES PARA EL TRATAMIENTO Y DISPOSICIN DE RESIDUOS

79
LICENCIADO FARMACIA

PRCTICA No. 7 DETERMINACIN CUANTITATIVA DE SULFATO FERROSO EN TABLETAS


MEDIANTE UNA CURVA DE VALORACIN POTENCIOMTRICA BAJO CONDICIONES DE
AMORTIGUAMIENTO.

I. OBJETIVOS

Efectuar la cuantificacin de FeSO4 por medio de una Curva de valoracin


potenciomtrica.
Identificar las partes bsicas del potencimetro para reconocer su manejo a fin
de obtener resultados confiables.
Establecer la reaccin de valoracin representativa a fin de justificar qumica e
instrumentalmente la respuesta obtenida.

II. INTRODUCCIN

El mtodo de titulacin potenciomtrica consiste en medir el potencial (voltaje) en una

solucin por medio de un electrodo como funcin de volumen de agente titulante. El

potencial que se mide se puede transformar a unidades de concentracin de una especie

en solucin. La ventaja de medir potencial es que ste se mide por medio de un electrodo

que es selectivo a la especie o analito que se quiere determinar. Por lo tanto, el voltaje que

se mide en la solucin es representativo de la concentracin de la especie en solucin. Este

alto grado de selectividad (seal analtica que puede mostrar un pequeo grupo de analitos

en una solucin que contiene mltiples especies qumicas) se debe a la propiedad fsica

del electrodo con que se mide el voltaje. La medida del potencial se puede emplear para

poner de manifiesto el punto final en reacciones cido-base, redox, precipitacin y

formacin de complejos; para ello se selecciona el electrodo indicador adecuado y un

electrodo de referencia que cierra la celda.

Para determinar el punto final se pueden utilizar varios mtodos; el ms directo se basa en

representar el potencial en funcin del volumen de valorante. Otro procedimiento ms exacto

consiste en representar el (E= f(V)).

80
LICENCIADO FARMACIA

En esta prctica el hierro presente se disuelve en cido se valora con dicromato de potasio

y las variaciones del potencial durante el proceso se siguen con un potencimetro, para

obtener una grfica de E = f(mL de valorante) mediante la cual se determinara el volumen

gastado para llegar al punto de equivalencia y as poder cuantificar el contenido de hierro.

El grado en que ocurre la reaccin (y por tanto del cambio de pendiente en el punto de

equivalencia) depende de la constante condicional de formacin, el efecto del pH en la

titulacin es un parmetro a considerar en el amortiguamiento del medio de reaccin.

III. EQUIPO(S), REACTIVO(S) Y MATERIAL(ES)

MATERIAL REACTIVOS EQUIPOS

1 piseta cido fosfrico R.A. 1 agitador magntico

2 vasos de volumen pequeo

1 Pipeta graduada de 5 mL

1 bureta de 10 mL Potencimetro con

1 Pipeta volumtrica de 2 ,10 mL cido Ntrico R. A. electrodo de platino y

1 agitador magntico c/barra de calomel ( o

1 probeta de 25 ml convinado)

2 vasos de precipitados de 50 mL Soln. de Dicromato de

1 Soporte universal completo potasio 0.01M

Tabletas que contengan sulfato

ferroso (Hemobin o SSA)

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LICENCIADO FARMACIA

IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1.-Preparacin de soluciones

-Solucin de cido fosfrico 1 M.(solucin cida)

-Solucin problema

Se pesan tres tabletas y se obtiene el peso promedio, se muelen y se pesa el polvo

equivalente a 25 mg de sulfato ferroso en un vaso de precipitados (considerar el peso

promedio y el contenido segn el marbete del producto) y se agregan 10 mL de solucin

cida con agitacin mecnica.(soln. problema)

2.- Valoracin Potenciomtrica: Efectuar el montaje con el potencimetro, calibrando

previamente. Llenar la bureta con el valorante (dicromato de potasio 0.01 M), comenzar la

titulacin agregando 0.5mL consecutivamante a la solucin problema (hasta despus del

punto de equivalencia) VER MONTAJE ANEXO

82
LICENCIADO FARMACIA

V. RESULTADOS EXPERIMENTALES

Tabla 1: Datos experimentales de la valoracin potenciomtrica del Fe(II) en las


tabletas

K2Cr2O7 0.01 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0
M (mL)

EECS(mV)

E ECS(mV)

Grfico 1. Curva de valoracin potenciomtrica E= f(Vol. De K2Cr2O7 0.01 M )

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LICENCIADO FARMACIA

Grfico 2. Curva de valoracin potenciomtrica E= f(Vol. De K2Cr2O7 0.01 M )

VI. INFORME DE TRABAJO


ESQUEMA Y PUNTOS MNIMOS A EVALUAR PARA LA REALIZACIN DEL INFORME
DE TRABAJO.

1.-DATOS GENERALES

I) CARTULA. Incluir en ste orden: Nombre de la Universidad, nombre de la Facultad,


nombre de la Seccin, nombre de la asignatura comenzando con Laboratorio de,
Nmero y nombre de la prctica, Nmero de equipo, Nombre de los integrantes (solamente
de aquellos que participaron en su realizacin, se dar por entendido que los que no
aparezcan no recibirn calificacin correspondiente a esa prctica. Nombre de los
profesores (incluir grado: QFB, Q, M en C, Dr., etc.), Fecha de realizacin de la prctica y
Fecha de entrega de reporte.
II) NMERO Y NOMBRE DE LA PRCTICA.

III) OBJETIVOS PARTICULARES. Con base al objetivo general del Manual y a las
actividades realizadas en la prctica redactar 2-3 objetivos particulares recordando que
deben responder el Qu?, Cmo? y Para qu?.

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LICENCIADO FARMACIA

IV) INTRODUCCIN. Incluir solamente aplicaciones del Mtodo de cuantificacin en las


diferentes reas que contempla su carrera, incluyendo ejemplos (recordar que deben citar
las referencias).

V) DIAGRAMA DE FLUJO. Incluir:


Preparacin de la muestra; indicando los posibles cambios realizados. Mencionar
la marca y presentacin de la muestra empleada en caso que el alumno la halla
proporcionado. Sealar la concentracin real de la solucin cida empleada. Incluir
tabla:
Peso de polvo de tableta empleada
(unidades):
Peso promedio por tableta (unidades):
Calibracin del equipo; paso a paso en forma de diagrama de flujo, puede incluir
imgenes o dibujos y ser con base a la explicacin del profesor no a lo reportado
en el Manual.
Montaje experimental; mismas consideraciones del punto anterior. Enfatizar bien
en lo que contiene el vaso y la bureta (en este caso sealar la concentracin exacta
y real de la solucin valorante de K2Cr2O7 que se emple), as como de los
electrodos que se sumergirn en el sistema de valoracin (tipo y composicin).
Lectura de la valoracin; mismas consideraciones del punto anterior. Mencionar
como sern las adiciones del valorante y en que volumen se detendr la valoracin,
as como la propiedad que se medir y en qu unidades. No olvidar mencionar qu
se debe hacer una vez que se termin de usar el equipo ya para apagarlo.
Disposicin de residuos; mencionar cmo se dispusieron los residuos en la sesin
experimental.
2) RESULTADOS. Incluir:
Tabla No. 1.- Datos experimentales de la Curva de valoracin.
Grfico de la curva de valoracin indicando nmero y nombre CORRECTO (el
nombre correcto del grfico de una curva de valoracin se puede indicar bajo el
modelo: PROPIEDAD=f(V(ml)VALORANTE). Recordar que tienen que transformar los
valores de EECS a EENH sumndole 0.245 V o 245 mV, segn sea el caso, y con esta
grfica es con la que trabajarn para la cuantificacin y otros datos que se piden
en el anlisis de resultados.
85
LICENCIADO FARMACIA

Incluir tabla: con nmero y nombre.


Muestra empleada (nombre comercial)
Presentacin
Lote y fecha de caducidad (u origen)
Marbete (enfocndose slo al analito que se cuantific
experimentalmente)
Resultado experimental (reportado como en el marbete: por cpsula,
por 100ml, etc.)
% de principio activo con respecto al marbete

3) ANLISIS DE RESULTADOS. Incluir:


Analizar y discutir que dato(s) podran emplear para dar validez y confiabilidad de
sus resultados.
Identificar y calcular las condiciones de amortiguamiento impuestas en el sistema
de valoracin; adems, proponer la reaccin de valoracin generalizada y
representativa empleando los Diagrama anexos en el Manual,
Clcular la Keq considerando que en los equilibrios redox el clculo de la Keq
no es mediante Ley de accin de masas, sino mediante la frmula general
considerando los E y con ayuda de la grfica de la Curva de valoracin con
datos de EENH, obtener el valor del E experimental del par Fe(II)/Fe(III) y el valor
de E experimental del par Cr(III)/Cr(VI), y con base a estos valores calcular la
Keq experimental.
Obtener el valor del Volumen de Punto de Equivalencia (VPE) mediante el mtodo
de las tangentes (puede ocupar la grfica de los resultados o realizar otra y
colocarla en este punto). Obtener de igual forma el VPE con el mtodo de la 1ra
derivada graficando E/V, y finalmente comparar y analizar ambos resultados,
justificando con cul de los 2 realizarn la cuantificacin.
Incluir los clculos de cuantificacin, en el siguiente orden: Mencionar el VPE que
emplearn y de qu mtodo es (tangentes o 1ra derivada), obtener la
concentracin de hierro en el sistema de valoracin, considerar las diluciones de
la muestra si es que hubo (deben coincidir con lo reportado en el diagrama de
flujo en Preparacin de la muestra) y cambio de unidades a las similares al
marbete as como el % de principio activo; recordar que aunque hallan justificado

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LICENCIADO FARMACIA

que VPE es ms confiable, deben realizar la cuantificacin con ambos, y al final


compararlos.
Con base al % de principio activo (recordar que es el comparativo entre el
resultado experimental y el reportado en el marbete) analizar los posibles errores
que condujeron a ese resultado, mencionando el tipo de error que cometi y las
acciones preventivas que sugieres para la mejora.

4) CONCLUSIONES. Con base al objetivo general del Manual y a los redactados por
ustedes (particulares).

5) REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS. Debern ser citadas ya sea en la introduccin o en


el anlisis de resultados en caso que se hallan empleado.

DATOS: H3PO4 pKas = 2.2 , 7.2 , 12.3

Complejos de Fe(II)

Fe(OH)n+ Log 1= 4.5


Fe + H2PO4- Fe H2PO4+ log K = 2.7
2+

Fe2+ + HPO42- Fe HPO4 log K = 3.6

Complejos de Fe(III)
Fe(OH)n3-n Log 1= 11.0 , Log 2= 21.7
Fe3+ + H2PO4- Fe H2PO42+ log K = 3.47
Fe3+ + HPO42- Fe HPO4+ log K = 8.3

Complejos de Cr(III)
Cr(OH)n3-n Log 1= 10.2, Log 2= 18.3
Cr3+ + H2PO4- Cr H2PO42+ log K = 2.56
Cr(OH)3 pKs = 30.3

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LICENCIADO FARMACIA

DIAGRAMA pPO4 como funcin del pH para Fe(III)

pPO
15
Fe(OH) 2+
10
Fe 3+
Fe(OH)2 +
5

0 pH
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
-5
FeH2PO4 FeHPO4 +
2+
-10

-15

-20

DIAGRAMA pPO4 como funcin del pH para Fe(II)

PO4' 4
Fe 2+ Fe(OH)+
3

1
FeH2PO4+ FeHPO4
0 pH
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
-1

-2

-3

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LICENCIADO FARMACIA

DIAGRAMA pPO4 como funcin del pH para Cr(III)

pCr(III)'
12
Cr(OH)2+
CrH2PO42+
7

Cr(OH)3
2
pH
0 2 4 6 8 10 12 14
-3

-8

-13

89
LICENCIADO FARMACIA

VIII. ORIENTACIONES PARA EL TRATAMIENTO Y DISPOSICIN DE RESIDUOS

Deber disponer de un frasco debidamente etiquetado como residuos de K2Cr2O7 y deber

mantenerse bien tapado, alejado de materiales combustibles y protegidos de calor, dao

fsico y flamas y en lugares secos (se almacena para su tratamiento)

El tratamiento posterior se realizar como sigue

90
LICENCIADO FARMACIA

91
LICENCIADO FARMACIA

2 SERIE DE EJERCICIOS
1.- Completar la tabla, calculando los parmetros que se piden y explicar si esta separacin

es eficiente, dibujando el cromatograma correspondiente.

componente Tr w K N R

A 21.5 0.96

B 22.1 0.95

C 25.3 0.99

Tiempo muerto ( to ) es de 2.5 min.

2.-El anlisis de residuos de pesticidas en plantas se realiza por cromatografa 2.856g de

planta son triturados y colocados en un solvente apropiado y aforados a 20 mL, con fase

mvil. Se toman 20 l de esta solucin y se inyectan al cromatgrafo, obteniendo un rea

de 3587. Se cuenta con un estndar de concentracin de 52 g/ ml, y se obtienen los

siguientes resultados

sistema mL del mL de Tiempo de W rea

estndar fase mvil retencin (min) (min) (UA)

1 2 18 2.510 0.196 1168

2 4 16 2.505 0.197 2170

3 6 14 2.521 0.198 3214

4 8 12 2.513 0.197 4079

5 10 10 2.518 0.196 5392

92
LICENCIADO FARMACIA

a) Graficar la curva y calcular los parmetros lineales.

b) Cul es el N promedio y AEPT de la columna si esta mide 30 cm.

c) Calcular el % en peso de pesticida en la planta.

3.- Se cuanta con los estndares de anfetamina (8x10-4 M) y metanfetamina (6 x10-4 M) ,

se toman 2 mL de cada uno de ellos se mezclan aforando a 10 ml (Sistema A ) Se inyecta

al C. Gases y produce las respuestas 25165 y 14487 respectivas.

Por otro lado 5 mL de una muestra que contiene anfetamina se mezclan con 2 mL del

estndar de metanfetamina (6 x10-4 M) aforando a 10mL (Sistema B), se obtienen las

siguientes respuestas medidas en el C. de gases 26078 y 14494 respectivamente Calcular

el Factor Respuesta y los mg de anfetamina/L de orina.

4.- El mtodo para la determinacin de Fe(II) se realiz, midiendo 5 mL de electrolito

soporte y en varias adiciones sucesivas de 0.2 ml de Fe(II) estndar 0.002M, se tom la

lectura de la corriente (i) se obtienen los siguientes resultados

ml de Fe(II)st 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0

i ( mA) 2.0 3.4 4.8 6.4 7.6

a) Si 1mL de muestra se afor a 5 mL con electrolito soporte se obtiene una corriente

(i) = 5.1 Calcular los mg de Fe(II)/100 mL.

93
LICENCIADO FARMACIA

5.- Explique el tipo de sustancias que pueden ser analizadas en Cromatografia de Gases

y especficamente que compuestos dan seal utilizando un detector FID (ionizacin de

flama)

4.-En la Figura se muestra un cromatograma para los


compuestos A y B obtenido por cromatografa de gases

a) Que compuesto tiene el punto de ebullicin mayor


b) Que pasara si se utiliza una mayor temperatura para la
medicin de esta mezcla
c) Si el w para A es de 0.35 s y el w para B es de 0.41,
adems que el tiempo muerto to es de 0.61 min .
Calcule la eficiencia de los picos (N), su factor de
capacidad (k) y la resolucin (Rs) entre los picos

94
LICENCIADO FARMACIA

ANEXOS

INSTRUCTIVO PARA EL MANEJO DEL ESPECTROFOTOMETRO

BAUSCH & LOMB SPECTRONIC 20

Este instrumento se utiliza para medir la radiacin absorbida por las molculas. Cuando una

onda electromagntica de longitud de onda definida incide sobre una sustancia dada, la

cual es una funcin de la concentracin de la sustancia en la trayectoria de la luz y del

espesor de la muestra. Este instrumento solo posee lmpara para el espectro visible, por lo

que si se desean hacer lecturas en el espectro ultravioleta o infrarrojo, es necesario cambiar

la lmpara.

pasos a seguir cuando se usa Specctronic 20.

Encender el instrumento usando la

perilla izquierda del frente. Permitir

unos 5 minutos para calentamiento

en el primer encendido.

95
LICENCIADO FARMACIA

Seleccionar la longitud de de onda

apropiada para la muestra a analizar.

Con el porta muestra vacio y

cerrado, ajustar la aguja de lectura a

0%T usando la perilla de ajuste de

cero.

Llenar a la mitad una celda con

agua. Se conoce como blanco.

Colocarlo en el porta muestra y

cerrar la cubierta.

96
LICENCIADO FARMACIA

Con el blanco en el porta muestra y la

cubierta cerrada, ajustar la aguja

meter a 100%T usando la perilla de

control de luz en el frente derecho del

instrumento.

Retirar el blanco y colocar la muestra

a analizar en el porta muestra y cerrar

la cubierta.

Registrar el valor de Absorbancia (o

%T) En este caso las lecturas son

20%T y 0.70 absorbancia.

Repetir este paso con estndares si

se esta realizando una curva de

calibracin o verificando

proporcionalidad (Ley de Beer).

Repetir este paso con una muestra de

concentracin desconocida.

97
LICENCIADO FARMACIA

CUIDADOS GENERALES

CELDAS

Manipularlas solo por la parte superior.

Limpiarlas solo si se requiere, con papel suave

Llenarlas hasta la marca para asegurar lectura representativa

Introducirlas verificando que la marca de stas coincida con la muesca del equipo, para que

siempre entre en la misma posicin

No utilizar tubos de ensayo como sustitutos de celda, pues no estn hechos del vidrio

adecuado.

SOLUCIONES

Solo se realizan mediciones de soluciones translcidas en el instrumento, la presencia de

partculas suspendidas causara error muy grave.

Los valores de absorbancia que presentan un error relativo muy pequeo se encuentran

dentro de 0.2 y 0.8 (63 y 16% T, respectivamente), por lo que debe realizarse procedimiento

correcto para que las lecturas estn dentro de ese rango.

LAMPARAS

No trabajar a longitudes de onda mayores a 600nm o menores a 400 estn fuera del alcance

de la lmpara de espectro visible que es la que generalmente tiene este tipo de instrumento,

solo utilizar soluciones coloridas. Para trabajar en regin infrarrojo o ultravioleta, se tiene

que conseguir la lmpara adecuada.

98
LICENCIADO FARMACIA

INSTRUCTIVO PARA EL MANEJO DEL CROMATOGRAFO DE LIQUIDOS DE ALTA

RESOLUCIN PERKIN ELMER MODELO

PREPARACIN DE LA FASE MOVIL

A) Mezclar los solventes previamente ajustado el pH

B) filtrar y llevar al ultrasonido para eliminar microburbujas de aire

I) ENCENDIDO Y PROGRAMADO DE LAS CONDICIONES DE ANALISIS

A)ENCENDIDO DEL EQUIPO: Presionar el botn power de la bomba,del Detector y del

registrador, dejar calentar por 15 minutos, colocar la Fase Mvil en el canal A o B y la

columna de trabajo

B) PROGRAMACIN DEL FLUJO Y LA COMPOSICIN Al encender aparece en la pantalla

electrnica de la bomba

STP MIN FLW %A CURV

Etapa Tiempo Flujo % del disolvente del Gradiente

o paso canal A fase mvil

99
LICENCIADO EN FARMACIA

Estos parmetros aparecen con algn nmero dado por la memoria del anlisis anterior

Para efectuar algn cambio en ellos

1) Presionar PROGRAM y Seleccionar del 1-9 en el teclado adjunto a la pantalla,

2) Presionar nuevamente el botn de PROGRAM y aparecer STP remarcado por

negro lo que indica que el cursor se encuentra all localizado,

3) Presionar ENTER y el cursor se localizar en el siguiente evento de la pantalla es

decir Min si desea cambiarlo teclear de 1 a 999.

4) Presionar ENTER nuevamente y el cursor pasara a Flw si desea cambiar el flujo

teclee el valor deseado( normalmente los flujos de Fase Mvil van de 0- 5 ml/ min,

aunque los de trabajo comn son de 0-2 ).

5) Si desea cambiar e % de disolvente en canal A presione ENTER y teclee la

proporcin ya que si es menor a 100 el restante para completar este lo tomar la

bomba del canal B por default ( esto se realiza solo si el anlisis es por gradiente

de Fase Mvil ya que es una bomba binaria ).

Cuando se termina el programa aparecer el paso o etapa 1 en la pantalla, el cual se

programar al igual que el paso 0 .

6) Para Ejecutar el programa presione las teclas RUN METHOD y EXIT METHOD

7) Presione la tecla START BOMB y la bomba comienza a trabajar con el flujo

programado, espere unos 10 minutos para estabilizar el flujo y limpiar la columna con el

solvente utilizado como Fase mvil.

85
LICENCIADO FARMACIA

CALIBRADO DEL DETECTOR

Una vez encendido y calentado por 10 minutos se ajusta Manualmente la longitud de onda

deseada cuidando que el seguro, colocado en la parte inferior (perilla negra) se ajuste hacia

la izquierda y se cierre al contrario una vez ajustada

1) Si se desea trabajar en longitudes de la regin visible se jala

un dispositivo para ello colocado junto a la celda del detector.

2) Se presiona el botn naranja para ajustar el cero de absorbancia y as calibrar ya

que la Fase Mvil que ya est pasando por este, es el blanco reactivo.

C) ENCENDIDO Y PROGRAMACIN DEL INTEGRADOR

101
LICENCIADO FARMACIA

1) Ajustar parmetros a fin de mejorar presentacin de la respuesta

Zero(lnea base) nmeros enteros.

Attn2 (nmeros enteros no mayores a 10.

Ch sp velocidad del papel

Thrsh lmite de ruido ( nmeros enteros del 1-4.)

Wd pk ancho de pico

AR REJ rea mnima del pico 8 valores desde 1000 a 1000000)

Estos tres ltimos valores permiten tener respuesta que no se considere ruido.

Un cambio en estos valores se oprime la tecla correspondiente, se teclea con los valores

numricos el valor deseado y se oprime la tecla enter.

II) PROCEDIMIENTO DE INYECCIN

1.-Colocar la jeringa en INYECT, cargar la muestra

2.- Girar a LOOD.*

3.- Retirar la jeringa.

4.- Girar a INYECT nuevamente.

*Al mismo tiempo se oprime la tecla Stara del integrador, para efectuar la corrida.

102
LICENCIADO FARMACIA

III) CUIDADOS DEL EQUIPO

1.- Purgado de la Bomba

a) Se retira la columna.y se gira el botn de la parte baja frontal de la bomba ( ver figura)

b) Se incrementa el flujo de la bomba hasta 3-5 ml / min.

c) Se conecta la entrada de una jeringa de plstico sin aguja en la entrada del botn y se

extrae fase mvil hasta que el flujo sea continuo y sin aire.

d) Se retira la jeringa y se regula nuevamente el flujo de trabajo en la bmba.

e) Se conecta nuevamente la columna.

2.- Cuidados de la Jeringa

a) Al inyectar debe ser con mano firme y rpido.

b) Antes y despus de inyectar debe ser con fase mvil varias 3.- Cuidados del Inyector

a) Si tiene fuga hacia enfrente (vlvula de inyeccin ) se debe cambiar empaque


interno.( ver Manual de Inyector).

103
LICENCIADO FARMACIA

USO Y CUIDADO DE ELECTRODOS

MANIPULACIN

Los electrodos debern enjuagarse entre muestras con agua destilada o desionizada.

Seque con cuidado el extremo del electrodo con un papel que no deje residuos para eliminar

el exceso de agua.

Electrodos rellenables

La solucin para relleno en los electrodos deber aadirse hasta el orificio de rellenado,

pero no sobrepasarlo. Asegrese de dejar el orificio de rellenado abierto cuando est

midiendo para asegurar que la solucin de relleno fluya adecuadamente a travs de la unin

de referencia.

ALMACENAMIENTO

Siempre mantenga su electrodo de pH hmedo. Recomendamos que almacene su

electrodo en una solucin para almacenamiento de electrodos de 4 M KCl . Si no dispone

de 4 M KCl, utilice una solucin buffer a pH 4 7. NO almacene el electrodo en agua

destilada o desionizadaesto ocasionar que los iones se filtren a travs de ampolla de

vidrio y el electrolito de referencia, haciendo que su electrodo pierda su utilidad.

Los electrodos que se envan con una botella protectora de almacenamiento para ayudar a

prevenir las grietas o araazos y mantener el bulbo hmero. Remueva la botella de

almacenamiento del electrodo antes de utilizar el mismo Mantenga su electrodo en la botella

para el almancenamiento a largo plazosolo llene la botella con suficiente solucin 4 M

KCl para cubrir el bulbo de vidrio y rellnela.

Si existen impurezas visibles adheridas, sumergir el electrodo en una disolucin de

detergente diluda al dcimo en agua caliente, con vigorosa agitacin durante 15 min. Si las

impurezas son de origen proteico, sumergir el electrodo en una disolucin al 1% de pepsina

en HCl 0.1 M por 15 min. Si las impurezas son inorgnicas, sumergir el electrodo en una

104
LICENCIADO FARMACIA

disolucin 0.1 M de EDTA tetrasdico por 15 min. Si las impurezas son de grasas o aceites,

enjuagar con un detergente suave o en una disolucin metanlica.

Despus de realizar el procedimiento de limpieza adecuado, se debe volver a llenar el tubo

exterior con disolucin acuosa saturada de KCl y dejar el electrodo sumergido durante una

hora en una solucin de pH 4 con 0.5 g de KCl/100 mL.

REFERENCIAS.

1) Ramette, A. 1988. Equilibrio y Anlisis Qumico. Editorial Fondo Educativo

Interamericano. Mxico, DF. P.p. 72-74, 140-144, 148-155, 158-161

2) Harris, D. C. 1999. Anlisis Qumico Cuantitativo. Grupo Editorial Iberoamrica, SA

de CV. 3 edicin. Mxico, D. F. P.p. 327-330.

3) Christian G., Qumica Analtica. Editorial Limusa.2. Edicin cap. 15,17,22

4) Skoog, D. y West D. 1988. Qumica Analtica.. Ed. McGraw-Hill / Interamericana de

Espaa, SA. 4 edicin. Madrid, Espaa. P.p. 451, 452, 476 y 477.

5) Skoog, D. y West D. 2001.Principios de Anlisis Instrumental. Ed. McGraw-Hill /

Interamericana de Espaa, SA. 7 edicin. Madrid, Espaa. P.p. 251 y 252.

6) Smith, R. and Martell, A. 1989. Critical Stability Constants. Plenum Press. 2

edition. Volume 4: Inorganic Complexes. USA.

7) Rovessac Annick F., Mtodos y tcnicas Instrumentales Modernas Ed. McGraw-

8) Rubinson/Rubinson, Qumica Analtica Contempornea Editorial Pearson

Educacin

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LICENCIADO FARMACIA

Nombre Alcohol Etlico Frmula CH3CH2OH


PRIMEROS Inhalacin Trasladar al aire fresco. Si no respira administrar respiracin artificial. Si respira con dificultad
AUXILIOS suministrar oxgeno. Mantener la vctima abrigada y en reposo. Buscar atencin mdica
inmediatamente.
Ingestin Lavar la boca con agua. Inducir al vmito. No administrar emticos, carbn animal ni leche.
Buscar atencin mdica inmediatamente (puede tratarse de alcohol desnaturalizado).
Contacto Lavar con abundante agua, mnimo durante 15 minutos. Levantar y separar los prpados para
con ojos asegurar la remocin del qumico. Si la irritacin persiste repetir el lavado. Buscar atencin
mdica.
Contacto Lavar la piel con abundante agua. Retirar la ropa contaminada y lvela con abundante agua y
con piel jabn.
FUGAS Y Mantener alejadas fuentes de ignicin. Cubrir el rea de derrame con roco de agua para diluir el
DERRAMES producto y eliminar vapores. En caso de pequeos derrames utilizar material inerte absorbente.
Evitar que el producto sea conducido al drenaje.
DESECHOS Se puede realizar una incineracin controlada del material una vez ha sido absorbido o se puede dejar evaporar.

Nombre Hidrxido de sodio Frmula NaOH


PRIMEROS Inhalacin Trasladar al aire fresco. Si no respira administrar respiracin artificial. Si
AUXILIOS respira con dificultad suministrar oxgeno. Mantener a la persona abrigada y
en reposo.
Ingestin Lavar la boca con agua. Si est consciente, suministrar abundante agua.
No inducir el vmito. Buscar atencin mdica inmediatamente.
Contacto Lavar con abundante agua, mnimo durante 15 minutos. Levantar y separar
con ojos los prpados para asegurar la remocin del qumico. Colocar una venda
esterilizada. Buscar atencin mdica.
Contacto Retirar la ropa y calzado contaminado. Lavar la zona afectada con abundante
con piel agua y jabn, mnimo durante 15 minutos. Si la irritacin persiste repetir el
lavado. Buscar atencin mdica.
FUGAS Y Evacuar o aislar el rea de peligro. Restringir el acceso a personas innecesarias y sin la
DERRAMES debida proteccin. Ubicarse a favor del viento. Usar equipo de proteccin personal.
Ventilar el rea. No permitir que caiga en fuentes de agua y alcantarillas. Los residuos
deben recogerse con medios mecnicos no metlicos y colocados en contenedores
apropiados para su posterior disposicin.
DESECHOS Debe tenerse presente la legislacin ambiental local vigente relacionada con la
disposicin de residuos para su adecuada eliminacin. Los residuos de este material
pueden ser llevados a un relleno sanitario legalmente autorizado para residuos qumicos
para su debida neutralizacin.

Nombre cido actico Frmula CH3COOH


PRIMEROS Inhalacin Trasladar al aire fresco. Si no respira administrar respiracin artificial.
AUXILIOS Evitar la reanimacin boca a boca. Si respira con dificultad suministrar
oxgeno. Mantener a la persona abrigada y en reposo. Buscar atencin
mdica inmediatamente

106
LICENCIADO FARMACIA

Ingestin Lavar la boca con agua. Si est consciente, suministrar abundante agua.
No inducir el vmito. Mantener la vctima abrigada y en reposo. Buscar
atencin mdica inmediatamente.
Contacto Lavar con abundante agua, mnimo durante 15 minutos. Levantar y
con ojos separar los prpados para asegurar la remocin del qumico. Si la
irritacin persiste repetir el lavado. Buscar atencin mdica.
Contacto Retirar la ropa y calzado contaminados. Lavar la zona afectada con
con piel abundante agua y jabn, mnimo durante 15 minutos. Si la irritacin
persiste repetir el lavado. Buscar atencin mdica inmediatamente.
Extraer la sustancia con un algodn impregnado de Polietilenglicol 400.
FUGAS Y Evacuar o aislar el rea de peligro (entre 50 y 100 metros en todas las direcciones),
DERRAMES marcar las zonas. Restringir el acceso a personas innecesarias y sin la debida
proteccin. Ubicarse a favor del viento. Usar equipo de proteccin personal. Ventilar el
rea. No permitir que caiga en fuentes de agua y alcantarillas.. Recoger con palas no
metlicas u otro elemento que pueda producir chispas. Evitar el paso de la sustancia de
la alcantarillado, neutralizar con sosa. Recoger la sustancia utilizando los absorbentes
adecuados.
DESECHOS Neutralizar con sosa custica diluida, recoger el residuo y enterrar segn las leyes
locales. Puede considerarse su neutralizacin, dilucin y vertimiento al desage. Tenga
en cuenta las leyes vigentes. Disponga de acuerdo con las reglamentaciones
ambientales locales.

Nombre cido clorhdrico Frmula HCl


PRIMEROS Inhalacin Trasladar al aire fresco. Si no respira administrar respiracin artificial
AUXILIOS (evitar el mtodo boca a boca). Si respira con dificultad suministrar
oxgeno. Mantener a la persona abrigada y en reposo. Buscar atencin
mdica inmediatamente.
Ingestin Lavar la boca con agua. Si est consciente, suministrar abundante
agua. No inducir el vmito. Si ste se produce de manera natural,
inclinar la persona hacia el frente para evitar la broncoaspiracin.
Suministrar ms agua. Buscar atencin mdica.
Contacto Lavar con abundante agua, mnimo durante 15 minutos. Levantar y
con ojos separar los prpados para asegurar la remocin del qumico. Si la
irritacin persiste repetir el lavado. Buscar atencin mdica.
Contacto Retirar la ropa y calzado contaminados. Lavar la zona afectada con
con piel abundante agua y jabn, mnimo durante 15 minutos. Si la irritacin
persiste repetir el lavado. Buscar atencin mdica.
FUGAS Y Evacuar o aislar el rea de peligro. Restringir el acceso a personas innecesarias y sin
DERRAMES debida proteccin. Eliminar toda fuente de calor. Evitar que la sustancia caiga en
alcantarillas, zonas bajas y confinadas, para ello construya diques con arena, tierra u
otro material inerte. Mezclar con sosa o cal para neutralizar. Lavar la zona con agua.
DESECHOS Debe tenerse presente la legislacin ambiental local vigente relacionada con la
disposicin de residuos para su adecuada eliminacin. Considerar el uso del cido
diluido para neutralizar residuos alcalinos. Adicionar cuidadosamente ceniza de sosa o
cal, los productos de la reaccin se pueden conducir a un lugar seguro, la disposicin
en tierra es aceptable.
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LICENCIADO FARMACIA

Nombre cido ntrico Frmula HNO3


PRIMEROS Inhalacin Evaluar los signos vitales: pulso y velocidad de respiracin; detectar
AUXILIOS cualquier trauma. En caso de que la persona no tenga pulso,
proporcionar rehabilitacin cardiopulmonar; si no hay respiracin, dar
respiracin artificial y si sta es dificultosa, suministrar oxgeno y
sentarla.
Ingestin Proceder como en el caso de inhalacin en caso de inconciencia. Si
la persona est conciente, lavar la boca con agua corriente, sin que
sea ingerida. No inducir el vomito ni tratar de neutralizarlo. El carbn
activado no tiene efecto. Dar a la persona 1 taza de agua o leche,
solo si se encuentra conciente. Continuar tomando agua,
aproximadamente una cucharada cada 10 minutos.
Contacto Lavarlos con agua tibia corriente de manera abundante, hasta su
con ojos eliminacin total.
Contacto Lavar cuidadosamente el rea afectada con agua corriente de manera
con piel abundante.
FUGAS Y Ventilar el rea dependiendo de la magnitud del siniestro. Mantener el material
DERRAMES alejado de agua, para lo cual construir diques, en caso necesario, con sacos de
arena, tierra o espuma de poliuretano. Para absorber el derrame puede utilizarse
mezcla de bicarbonato de sodio-cal sodada o hidrxido de calcio en relacin 50:50,
mezclando lenta y cuidadosamente, pues se desprende calor. Una vez
neutralizado, lavar con agua. Tanto el material derramado, el utilizado para
absorber, contener y el generado al bajar vapores, debe ser neutralizado con cal,
cal sodada o hidrxido de calcio, antes de desecharlos.
DESECHOS Con cuidado (se genera calor y vapores) diluya con agua-hielo y ajuste el pH a
neutro con bicarbonato de sodio o hidrxido de calcio. El residuo neutro puede
tirarse al drenaje con agua en abundancia.

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