Avaliao da toxicidade

Elaine Gavioli
UFRN
Toda substncia pode ser considerada um agente
txico, dependendo das condies de exposio:

Via de exposio (respiratria, oral, drmica,

parenteral);
Dose administrada ou absorvida;
Frequncia de exposio (agudo x crnico);
Idade (feto, crianas, idosos)
Estado nutricional
Sexo
 AVALIAO DA TOXICIDADE

Avaliao dos dados toxicolgicos de um

composto qumico

Objetivos:
- classificao quanto toxicidade
- fornecer informaes sobre a forma
correta de seu emprego
- medidas preventivas/curativas no uso
inadequado
AVALIAO DA TOXICIDADE

Como feita a avaliao dos dados

toxicolgicos de um composto qumico?

- experimentao em animais de
laboratrio
- ensaios com microorganismos ou clulas
- registro de casos de intoxicaes
ocorridas em seres humanos (medidas
biolgicas)
 Testes
Toxicolgicos
Testes toxicolgicos em animais:
Testes de toxicidade aguda, subaguda,
subcrnica e crnica;

Avaliao da toxicidade do Sistema

Reprodutivo e do Desenvolvimento;

Mutagenicidade e Carcinogenicidade;

Outros (hepatotoxicidade, nefrotoxicidade, ...)

 Espcies animais

Rotas de exposio

Idade dos animais:

adultos

Sexo: ambos

Doses: diversas
 Calcula-se:

Observa-se a mortalidade e sinais gerais de toxicidade (ex. salivao,

convulses, alteraes comportamentais
Toxicidade Aguda
 Parmetros de avaliao toxicolgica

DL50: Dose letal para 50% dos animais em teste

DE50: Dose efetiva para 50% dos pacientes/animais

IT (ndice Teraputico): Compara as doses efetiva e txica

USADO PARA MEDICAMENTOS!!!!

IT = DL50/DE50

IT >> 1, baixo risco para promover intoxicao;

Valor de IT prximo a 1, significa que a substncia
EXTREMAMENTE TXICA
ADMINISTRAES REPETIDAS
(subagudo, subcrnico, crnico) e crnico)
(subagudo, subcrnico
ADMINISTRAES REPETIDAS
(subagudo, subcrnico, crnico)
ADMINISTRAES REPETIDAS
(subagudo, subcrnico, crnico)
 ADMINISTRAES REPETIDAS
(subagudo, subcrnico, crnico)

Observaes e exames
Hematolgicos:
Peso corpreo
hematcrito,
e consumo de
hemoglobina,
comida
contagem de
leuccitos,
Aparncia eritrcitos, e
comportamento e contagem diferencial
anormalidades, de leuccitos
mortos e
morimbundos
Exames de urina:
colorao, pH,
Testes protena, glicose,
laboratoriais bilirrubina, etc

Exames ps-morte
Testes histopatolgicos
 Ainda a avaliao da toxicidade
subcrnica e crnica...
Investiga o potencial toxicolgico (em dados
rgos) e cumulativo de determinadas
substncias;

Investiga o potencial carcinognico das

substncias testadas;

Determina a NOAEL (Maior dose testada que

no causa efeitos adversos) - dose para fins
regulatrios - utilizada no clculo de nveis
aceitveis (seguros) de exposio humana
NOAEL = No Observed Adverse Effect Level

A maior dose testada que no est associada ao surgimento de

efeitos adversos.

NOAEL = Maior dose testada que no causa efeitos adversos

LOAEL = Menor dose que causa um efeito adverso

 IMPORTNCIA DOS TESTES
TOXICOLGICOS
Gerenciamento de Risco (Agncias Regulatrias - ANVISA):
Anlise do risco/benefcio de uma substncia
Ex.: Analisar o risco do uso do DDT para a sade humana em
comparao com o benefcio no controle do mosquito transmissor
da malria.
Avaliao de alternativas
Ex.: existem outros pesticidas mais seguros e viveis
economicamente?
Analisar o impacto scio-econmico, poltico e de sade pblica
Tomada de decises
 Toxicologia reprodutiva e do
desenvolvimento
Segmento I: fertilidade e performance reprodutiva dos
animais
Trata-se os animais machos e fmeas durante a fase
reprodutiva e as fmeas durante a gestao e lactao

Importncia: avaliao da funo gonadal, ciclo estral

(fmeas), comportamento sexual, fertilidade, gestao, parto
e lactao.

Final do Tratamento: eutansia dos animais, avaliao

histopatolgica dos rgos reprodutivos e anlise hormonal
 Toxicologia reprodutiva e do
desenvolvimento:
Segmento II: Avaliao da Teratogenicidade

2 espcies de animais (roedores e coelhos)

Tratamento: Perodo de organognese

Roedores: dia 6-15 dias de gestao

Coelhos: dia 6-18 dias de gestao
Fmeas grvidas so eutanasiadas no final da gestao e os fetos
so recolhidos para estudo
Importncia: verificao da ocorrncia de malformaes congnitas
(esquelticas ou estruturais), retardo no desenvolvimento, morte
fetal.
Exemplos:

Toxicologia reprodutiva e do desenvolvimento:

Segmento II: Teratogenicidade

Avaliao esqueltica em ratos

colorao com vermelho de alizarina
Exemplos:

Toxicologia reprodutiva e do desenvolvimento:

Segmento II: Teratogenicidade

Hipospdia:

Abertura da uretra no pnis deslocada de sua posio normal1

1 Jiang et al. 2007 Toxicology 232, 286-293

 Toxicologia reprodutiva e do
desenvolvimento
Segmento III: Toxicidade peri e ps-natal

Avaliado em Roedores

Tratamento: fase final da gestao (a partir do dia 12 em ratos) at o

final da lactao

Avaliao dos filhotes vivos: peso corporal, desenvolvimento geral

e sexual, comportamento motor e social
Eutansia dos filhotes na idade adulta: histopatologia de rgos
(fgado, rins, rgos reprodutivos,...)
Importncia: viabilidade, crescimento e desenvolvimento dos
filhotes
Testes para avaliao do
potencial mutagnico
(Testes in vitro)
 Testes de Ames
Usa bactrias alta taxa de replicao - Salmonella typhimurium
Este teste mede a capacidade de mutao de uma bactria, que no
cresce em meio sem histidina
Estas bactrias so inoculadas ao meio sem histidina e o seu
crescimento verificado aps a exposio ao agente qumicos - a
taxa de mutao verificada atravs do crescimento das colnias

Bactrias
sofreram
mutao
 Teste do cometa
- suspenso de clulas de indivduos ou animais
expostos ao agente txico - de onde se extrai o
DNA
- este material submetido a eletroforese para
avaliar a migrao do material gentico
Cauda do cometa: indica fragmentao do DNA

material nuclear de um material nuclear de um

organismo no exposto a organismo exposto a
agentes qumicos agentes qumicos
 Teste do microncleo
Realizado a partir da anlise dos linfcitos de
animais expostos a ao do agente txico

Microncleos so estruturas que aparecem

dentro dos linfcitos - indicam que o material
gentico foi danificado

Coloraao Giemsa-Wright