UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

Universidad del Per, DECANA DE AMRICA

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICA
ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE FARMACIA
Y BIOQUMICA

LABORATORIO DE TOXICOLOGA Y
QUMICA LEGAL
CURSO: TOXICOLOGA Y QUMICA

PRACTICA N6

TTULO: Monxido de Carbono

GRUPO N 4

INTEGRANTES:

Bohorquez Ramirez Billy

Frank
Cueva Quiroz Jhon Nilser
Machaca Vizcardo Darwin Joe
Mallma Bazn Walter Andrs
Pariona Quichca Kelly
Maryory

HORARIO DE PRCTICAS
DA: JUEVES
HORA: 10 14 hrs

FECHA DE REALIZACIN DE LA
PRCTICA: 27/04/2017
FECHA DE ENTREGA DEL
INFORME:
04/05/2017

LIMA PER
2017
I. INTRODUCIN
El monxido de carbono es un gas incoloro, inodoro, inspido y no irritante que se
origina de la combustin incompleta de la materia orgnica. Su afinidad a la
hemoglobina es aproximadamente 240 veces mayor que el oxgeno, de manera
que desplaza a este ltimo provocando hipoxia. Es un txico no especfico y se ha
encontrado que inhibe la actividad de la enzima citocromo a 3 oxidasas, causando
una peroxidacin lipdica. La magnitud de sus efectos est relacionada con las
cantidades absorbidas y el tiempo de exposicin. El complejo monxido de
carbono-hemoglobina, conocido como carboxihemoglobina (HbCO), es
generalmente utilizado como bioindicador de intoxicacin por este gas, aunque no
es 100% fidedigno para evaluar la dimensin del dao en el organismo. 1

Las intoxicaciones por monxido de carbono (CO) ocupan un especial inters en

la ciencia forense. Muchos incidentes de envenenamiento por CO se producen
debido a la combustin incompleta, el fuego, los gases de escape de automviles
entre otras causas. Cuando una vctima es encontrada en la escena de un
incendio, el grado desaturacin HbCO puede ser til para juzgar si ha muerto por
asfixia ante el humo generado durante el fuego en s o s fue asesinada antes del
mismo (muchos homicidas incendian la escena del crimen para borrar cualquier
evidencia). Dado que el CO tiene una vida media muy corta, rara vez se
recomienda su determinacin en casos clnicos.2

Para las mediciones del porcentaje de saturacin de HbCO en la sangre, se

disponen generalmente de mtodos espectrofotomtricos y la cromatografa de
gases. La metahemoglobina (Met-Hb) aparece en muchas muestras de sangre y
puede interferir en estas determinaciones, por tanto es importante utilizar mtodos
que no sean influidos por la presencia de la misma. En esta prctica se llevar a
cabo un mtodo espectrofotomtrico simple, fiable y selectivo para las mediciones
de saturacin de HbCO.3

II. OBJETIVOS
1. Aplicar herramientas espectrofotomtricas a estudios toxicolgicos.
2. Conocer sobre la evaluacin de intoxicaciones por monxido de carbono.
III. PROCEDIMIENTO:

Materiales
Tubos de ensayo
Pipetas graduadas
Luna de reloj

Equipos
Campana extractora
Estufa

Reactivos
Agua Destilada
PdCl2 0.01 N
H2SO4 10%

Metodologa:

PASO 1:
Extraer 1 mL de sangre y traspasar en el lado lateral de la placa Petri

PASO 2:

Agregar la luna de reloj al medio de la placa Petri y se agreg

2 Ml de PdCl2
PASO 3:

Luego se agreg 1mL H2SO4 10% al compartimiento externo y cubrir con la tapa
de la placa Petri

PASO 4:

Con una pipeta se extrae 0.1 Ml del sobredamente a una fiola de 10 mL .En otra
fiola se le adiciona 1 mL de IK al 15% mas 1 mL de goma arbiga al 0.1% y llevar
a volumen.
Determinar la densidad oprica a 500 mu llevando a cero con agua destilada.

IV. RESULTADOS
DETERMINACIN CUANTITATIVA DE MONXIDO DE CARBONO POR
MICRODIFUSIN1

Se coloca la sangre en el compartimiento externo. Se coloca en el compartimiento

interno el reactivo fijador PdCl2 0,01 N, y se coloca la base olesa en los bordes
del compartimento externo (para que fije la tapa del compartimento externo).
Luego, sobre la sangre se agrega el reactivo liberador (H2SO4 10%). Se cierra la
cmara y se coloca por 20 25 minutos en una estufa a 50 C. Entre el Pd+2 y el
CO, se produce la siguiente reaccin redox:
Como consecuencia aparece en la cmara interna una ptina de color metlico
(Pd).

Para la determinacin cuantitativa, se toma cuantitativamente 0,1 ml del

sobrenadante y se transfiere a un matraz aforado de 10 ml. Se toma igual volumen
de la solucin de PdCl2 0,01 N original y se coloca en otro matraz aforado (blanco
de reaccin). A ambos se agrega goma arbiga 1 % (para evitar la precipitacin
del PdI2) y solucin de KI 15 %. Se lee la absorbancia del complejo coloreado
formado (complejo de color rojo) a 500 nm:

Clculos

La solucin fijadora de cloruro de paladio es 0,01 N, que corresponde, por lo

tanto, a 0.88805 miligramos de cloruro de paladio por mililitro de solucin.

Donde 177.61 g es el peso molecular del cloruro de paladio, el cual contiene 106.7
gramos de paladio metlico. Esto equivale a que en 1 ml de la solucin de PdCl2
0,01 N hay 0.5335 mg de Pd.

De acuerdo a la ecuacin redox sealada, cada mol de paladio es reducido a

paladio metlico por un mol de monxido de carbono, es decir que 177.61 g de
cloruro de paladio son reducidos por 28 g de monxido de carbono hasta 106.7 g
de paladio metlico.

Por lo tanto, 0.26 es el factor de transformacin para expresar mg de paladio en

mg de monxido de carbono.

Una vez determinada la densidad ptica (absorbancia) del complejo [I4Pd]+2, los
miligramos de paladio reducidos a paladio metlico se calculan de la manera
siguiente (conociendo que la relacin entre la absorbancia y la concentracin de
una solucin es constante):

Donde 0.05335 corresponde a los mg de Pd en 0.1 ml de la solucin de PdCl2

0,01 N.

Para expresar este resultado en mg por ciento de monxido de carbono, se debe

multiplicar por 520, factor que proviene de multiplicar 2 x 10 para referir al volumen
inicial de sangre y de acuerdo con la dilucin (factor de la alcuota tomada del
compartimento interno 2 ml/0.1 ml), por 100 para referir a 100 ml de sangre (1 dl) y
por 0.26 (factor de conversin en mg de paladio metlico a mg de monxido de
carbono), resultando:

Por lo tanto:
Los mg de CO pueden expresarse en ml de CO, por medio de un factor que es
igual a 0.8, ya que 1 mol de gas equivale a 22.4 l en condiciones normales de
presin y temperatura (1 atm y 273 K, respectivamente); usando la ecuacin de
los gases ideales:

Por lo tanto, 0.8 es el factor de transformacin para expresar mg en ml de

monxido de carbono.
El valor se lo suele referir a la cantidad de Hb de la sangre problema, expresando
el CO hallado como porcentaje de saturacin de la Hb total, sabiendo que:

Para llegar a las relaciones anteriores, se parte de la oxihemoglobina y de conocer

cuntas molculas de oxgeno transporta una molcula de hemoglobina.

Por lo tanto, 1g de hemoglobina fija 2 mg de oxgeno molecular, a partir de esto,

calculamos el volumen de oxgeno molecular que ocupan 2 mg de oxgeno en
condiciones normales (1 atm y 273 K, respectivamente); usando la ecuacin de los
gases ideales:
A partir del peso molecular de la hemoglobina se puede calcular que 1 g de
hemoglobina puede combinarse con 1.4 ml de oxgeno. En realidad, parte de la
hemoglobina normalmente en los glbulos rojos no puede unirse al oxgeno (por
encontrase como metHb o HbCO), y la capacidad emprica determinada de
fijacin de oxgeno de la hemoglobina es 1.34 ml de O2 por gramo de Hb.

Por consiguiente, si 1 g de Hb tiene la capacidad de fijar 1.34 ml de O2, entonces

el mismo volumen de CO puede ser fijado por la Hb, considerando que la afinidad
del monxido de carbono por la hemoglobina es 200 300 veces mayor que la
afinidad del oxgeno por la hemoglobina en adultos normales. 2

RESULTADOS DE LA PRCTICA

Los valores de las lecturas de absorbancia (densidad ptica) fueron los

siguientes:

Calculamos los mg por ciento de CO obtenidos segn la frmula:

Calculamos los ml por ciento de CO obtenidos, usando el factor de

conversin:
 El valor de la hemoglobina del estudiante del que se tom la muestra de
sangre es de 15 g/dl; segn este dato, calculamos el volumen necesario de
CO que fija 15 g de hemoglobina:

Calculamos el porcentaje de saturacin:

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

1. Romero, J.; Espinoza, J. Determinacin sangunea de monxido de

carbono en residentes del centro histrico de la ciudad de Cuenca y
comparacin con la concentracin de CO en el aire ambiente [Tesis].
Cuenca: Universidad de Cuenca, Facultad de Ciencias Qumicas, Escuela
de Bioqumica y Farmacia; 2011.
2. Pittman, R. Regulation of tissue oxygenation. San Rafael (CA): Morgan &
Claypool Publishers; 2011.
3. Suzuki O. Watanabe K. (traduced 2005) Drugs and Poisons in Human,
AHandbook of Practical Analysis, cap.Carbon monoxide by Keizo Sato.
Springer -Verlag,Berlin, Heidelberg, Deutschland.
4. Penney D. G., (2008) Carbon Monoxide Poisoning. CRC press, Taylor &
Francis Group, Boca Raton, Florida, U.S.A.
5. Flanagan R. J., et al. (2007) Fundamentals of Analytical Toxicology.John
Wiley & Sons.West Sussex, England.