Tesis de Microorganismos Eficaces PDF

EVALUACIN DEL EFECTO DE LOS MICROORGANISMOS EFICACES
(EM) SOBRE LA CALIDAD DE UN AGUA RESIDUAL DOMSTICA
JUANITA CARDONA GMEZ
LUISA ALEJANDRA GARCA GALINDO
FABIO ROLDN, Ph D.
Director
PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA
FACULTAD DE CIENCIAS
CARRERA DE MICROBIOLOGA INDUSTRIAL
DICIEMBRE DE 2008
BOGOT D.C
TABLA DE CONTENIDOS
LISTA DE TABLAS .................................................................................................................. iii

LISTA DE FIGURAS ................................................................................................................ iv
LISTADO DE ANEXOS ............................................................................................................. v
RESUMEN ............................................................................................................................... vi
ABSTRACT ............................................................................................................................. vii
1. INTRODUCCIN ................................................................................................................. 1
2. MARCO TERICO............................................................................................................... 3
2.1. Agua Residual (AR) ................................................................................................... 3
2.1.1. Aguas residuales domsticas (ARD) .......................................................................... 3
2.2. Calidad de un agua residual domstica ..................................................................... 5
2.2.1. Parmetros biolgicos ............................................................................................... 5
2.2.2. Parmetros fisicoqumicos ......................................................................................... 7
2.3 Tratamiento de las aguas residuales ........................................................................13
2.4. Microorganismos eficaces (EM) y su uso en AR .....................................................14
2.5. Microorganismos del EM ........................................................................................15
2.5.1. Bacterias fotosintticas (Rhodopseudomonas palustris)............................................15
2.5.2. Bacterias cido lcticas (Lactobacillus spp.) .............................................................16
2.5.3. Levaduras (Saccharomyces sp)................................................................................17
3. JUSTIFICACIN .................................................................................................................19
4. OBJETIVOS ........................................................................................................................21
4.1. Objetivo general .......................................................................................................21
4.2. Objetivos especficos................................................................................................21
5. MATERIALES Y MTODOS................................................................................................22
5.1. Verificacin de algunas de las tcnicas analticas fisicoqumicas ..............................22
5.2. Origen del ARD ........................................................................................................23
5.3. Caracterizacin inicial del ARD .................................................................................23
5.4. Montaje de las unidades experimentales (UEs) ........................................................25
5.5. Evaluacin de la dosis de EM ................................................................................26
5.6. Evaluacin del efecto de la profundidad....................................................................26
5.7. Muestreos ................................................................................................................26
5.8. Realizacin de los anlisis para los parmetros fisicoqumicos y microbiolgicos......27
5.9. Anlisis estadstico ...................................................................................................28
6. RESULTADOS Y DISCUSIN ............................................................................................29
6.1. Verificacin de algunas de las tcnicas analticas empleadas ...................................29
6.2. Caracterizacin inicial del agua residual domstica ..................................................30
6.2.1. Parmetros microbiolgicos......................................................................................30
6.2.2. Parmetros fisicoqumicos ........................................................................................31
6.3. Distribucin de los datos obtenidos ...........................................................................31
6.4. Evaluacin del efecto de la profundidad....................................................................32
6.5. Seguimiento de los parmetros fisicoqumicos y microbiolgicos y evaluacin
de las diferentes dosis de EM ................................................................................34
6.5.1. Parmetros microbiolgicos......................................................................................34
6.5.2. Parmetros fisicoqumicos ........................................................................................41
6.6 Relaciones obtenidas del anlisis de componentes principales .....................................55
7. CONCLUSIONES ............................................................................................................57
8. RECOMENDACIONES ....................................................................................................58
9. REFERENCIAS ...............................................................................................................59
10. ANEXOS .........................................................................................................................67
ii
LISTA DE TABLAS
Pg
Tabla 1. Criterios para la clasificacin de la calidad de un AR. .......................................4
Tabla 2. Valores mximos y mnimos permitidos en parmetros convencionales de las

ARD. ...............................................................................................................................5
Tabla 3. Tipo y concentracin de microorganismos patgenos encontrados tpicamente

en un ARD sin tratar ........................................................................................................6
Tabla 4. Organismos propuestos en la literatura como indicadores de la contaminacin

fecal humana ..................................................................................................................7
Tabla 5. Criterios organolpticos y fsicos de la calidad del agua potable en Colombia ....7
Tabla 6. Criterios qumicos de la calidad del agua potable en Colombia ..........................8
Tabla 7. Criterios de la calidad qumica para caractersticas de tipo econmico o accin

indirecta en la salud ........................................................................................................8
Tabla 8. Parmetros fisicoqumicos ms importantes relacionados con la calidad de un

ARD ................................................................................................................................9
Tabla 9. Tipos de tratamientos para aguas residuales ................................................... 13
Tabla 10. Parmetros y concentraciones de las soluciones patrones empleadas para la

verificacin de las tcnicas fisicoqumicas analizadas durante el estudio ....................... 23
Tabla 11. Parmetros microbiolgicos monitoreados durante el estudio ........................ 24
Tabla 12. Parmetros fisicoqumicos monitoreados durante el estudio .......................... 24
Tabla 13. Precisin y exactitud obtenidos durante la verificacin de las tcnicas

analticas empleadas..................................................................................................... 30
Tabla 14. Caracterizacin microbiolgica inicial del ARD del pozo sptico del vivero
Coraflor ......................................................................................................................... 31
Tabla 15. Caracterizacin fisicoqumica inicial del ARD del pozo sptico del vivero
Coraflor ......................................................................................................................... 32
iii
LISTA DE FIGURAS
Figura 1 Montaje de las UEs en el viviero Cloraflor. Se muestran las UEs utilizadas
para evaluar los diferentes tratamientos y las columnas empleadas para realizar el
seguimiento fotogrfico ................................................................................................. 25
Figura 2 Proceso de aplicacin de EM y toma de muestras. A) Aplicacin de dosis

especficas de EM a las UEs seleccionadas aleatoriamente como tratamientos.
B) Homogenizacin del ARD posterior a la aplicacin de EM y C) Toma de muestras
en cada uno de los puertos de muestreo ....................................................................... 27
Figura 3 Crecimiento de floraciones de algas observado sobre la superficie de las

UEs............................................................................................................................... 33
Figura 4 Crecimiento en placa de los microorganismos evaluados durante el estudio. . 34
Figura 5 Comparacin de los valores medios obtenidos ( s) para A) hetertrofos

totales, B) coliformes totales y C) coliformes fecales teniendo en cuenta los das de
anlisis y los tratamientos aplicados (n=6). .................................................................... 36
Figura 6 Comparacin de los valores medios obtenidos ( s) para A) Levaduras, B)

Lactobacilos y C) bacterias fototrficas teniendo en cuenta los das de anlisis y los
tratamientos aplicados. (n=6). ....................................................................................... 39
Figura 7 Comparacin de los valores medios obtenidos ( s) para pH, teniendo en

cuenta los das de anlisis y los tratamientos aplicados (n=6)........................................ 42
Figura 8 Comparacin de los valores medios obtenidos ( s) para A) oxgeno disuelto

(OD), B) demanda biolgica de oxgeno (DBO5) y C) demanda qumica de oxgeno
(DQO), teniendo en cuenta los das de anlisis y los tratamientos aplicados (n=6). ....... 44
Figura 9 Comparacin de los valores medios obtenidos ( s) para A) amonio, B)

niratos y C) nitritos, teniendo en cuenta los das de anlisis y los tratamientos
aplicados....................................................................................................................... 48
Figura 10 Comparacin de los valores medios obtenidos ( s) para fosfatos (PO4),

teniendo en cuenta los das de anlisis y los tratamientos aplicados. (n=6) ................... 50
Figura 11 Comparacin de los valores medios obtenidos ( s) para A) sulfuros y B)

sulfatos teniendo en cuenta los das de anlisis y los tratamientos aplicados (n=6)........ 52
Figura 12 Comparacin de los valores medios obtenidos para slidos totales (ST),
teniendo en cuenta los das de anlisis y los tratamientos aplicados (n=6) .................... 54
Figura 13 Resultados obtenidos tras la realizacin del anlisis de componentes

principales (ACP). ......................................................................................................... 56
iv
LISTADO DE ANEXOS
ANEXO A ................................................................................................................................67
ANEXO B ................................................................................................................................72
ANEXO C................................................................................................................................73
ANEXO D................................................................................................................................82
ANEXO E ................................................................................................................................83
ANEXO F ................................................................................................................................84
ANEXO G .............................................................................................................................118
ANEXO H............................................................................................................................ 1181
v
RESUMEN
Los microorganismos eficaces (EM) han sido reportados como una alternativa frente al
problema ambiental de la contaminacin hdrica, puesto que este consorcio puede
utilizar los compuestos contaminantes presentes en el agua residual domstica (ARD)
como fuente de carbono y energa para su metabolismo y crecimiento, reduciendo as
sus concentraciones en el agua. El presente trabajo tuvo como objetivo monitorear
algunos de los cambios fisicoqumicos y microbiolgicos que se presentaron en un ARD
tras aplicar 3 diferentes concentraciones de EM; evaluando su efecto, la relacin entre
parmetros y de stos con la calidad del agua, as como el efecto de la profundidad en la
accin de EM. Adicionalmente, se busca una aproximacin al funcionamiento de EM
en este tipo de sistemas de tratamiento. Para este fin se evaluaron tres dosis de EM
(1/10000, 1/5000 y 1/3000 v/v), empleando tanques de 1.10 x 0.56 m y 7 mm de espesor
que contenan 110 L de ARD cada uno (n=3). Se tomaron muestras del ARD en dos
alturas (20 y 40 cm) a los 0, 10, 30 y 45 das analizando parmetros fsicoqumicos (OD,
pH, T, DQO, DBO5, ST, NO3-, NO2-, NH4+, PO4-3, SO4-2 y S2-) y microbiolgicos
(coliformes totales y fecales, hetertrofos totales, levaduras, lactobacilos y bacterias
fotrficas). Bajo las condiciones del estudio, los resultados no mostraron diferencias
significativas entre las profundidades evaluadas, de igual forma no se observaron
diferencias significativas entre el control y los tratamientos para la mayora de los
parmetros, a excepcin de la disminucin significativa de S2- (30 y 45 d) y coliformes
fecales (10 d), as como recuentos significativamente mayores en levaduras y mayor
DBO5 (30 y 45 d) en los tratamientos.
vi
ABSTRACT
Efficient microorganisms (EM) have been reported as an alternative against the serious
environmental problem of hydric contamination, since this microbial consortium can use
contaminant compounds of domestic wastewater (DWW) like source of carbon y energy
for its metabolism y growth, by reducing their concentrations in the water. The purpose of
this investigation was to evaluate some of the physico-chemical y microbiological
changes that appeared in a DWW after applying three different concentrations of EM,
their effect y the relation between evaluated parameters y with the quality of water, as
well to determine the effect of depth in the EM action. To accomplish this goal, triplicate
samples of three different EM doses were used (1/10000, 1/5000 y 1/3000 v/v).
Samples were taken from 1.10 x 0.56 m y 7mm of thickness tanks, each one contained
110 L of DWW (n=3). Two different heights (20 y 40 cm) were sampled on 0, 10, 30 y 45
days, analyzing physico-chemical (DO, pH, T, COD, BOD5, TS, NO3-, NO2-, NH4+,
PO4-3, SO4-2y S-2) y microbiological (total y fecal coliforms, total heterotrophic bacteria,
photrophic bacteria, lactobacilli y yeast) parameters of each sample. Under the study
conditions, the results did not show significant differences between the evaluated depths,
nor between controls y treatments for most of evaluated parameters, excepting significant
diminution of S-2 (30 y 45 d), fecal coliforms (10 d) as well as significant majors counts y
higher BOD5 (30 y 45 d) of the treatments.
vii
1. INTRODUCCIN
Uno de los problemas ambientales ms graves en la actualidad es la contaminacin del

recurso hdrico debido a que el problema tiene mltiples causas y se presenta en formas
muy diversas, con asociaciones y sinergismos difciles de prever. Este est relacionado
directamente con cambios demogrficos en las ltimas dcadas, ya que a medida que
las poblaciones humanas crecen utilizan ms el agua para llevar a cabo sus actividades
cotidianas y productivas, originando cambios fsicos, qumicos y biolgicos en el agua
resultante.
Las aguas residuales domsticas (ARD), son aquellas que se obtienen luego de que el
agua es usada en actividades como limpieza general, preparacin de alimentos y
sanitarios, entre otras. Las ARD contienen gran cantidad de materia orgnica (protenas,
carbohidratos y lpidos) e inorgnica (sales nutritivas de nitrgeno y fsforo, entre otras)
que modifica las caractersticas fisicoqumicas del agua, generando un ambiente propicio
para la proliferacin de organismos en ellas.
Los organismos presentes en el ARD pueden ser tanto inocuos como patgenos, en
cuyo caso corre riesgo la integridad de todo aquel que use estas aguas de forma
indiscriminada; si a esto sumamos las sustancias contaminantes y el exceso en que se
encuentran es posible explicar el desarrollo reciente de tecnologas fsicas, qumicas y
biolgicas necesarias para el tratamiento de las ARD.
La tecnologa del producto EM (del ingles efficient microorganisms), basada en la

actividad sinrgica de consorcios de microorganismos eficaces, ha sido reportada como
una alternativa para el tratamiento de aguas contaminadas. EM ha sido aplicado, ya
que incrementa las densidades de microorganismos que pueden utilizar los compuestos
presentes en el agua como fuente de carbono y energa para su metabolismo y
crecimiento, reduciendo sus concentraciones. Adems, al emplear una mezcla de varios
microorganismos, con caractersticas metablicas diferentes y complementarias entre s,
la cantidad y variedad de los compuestos que pueden ser degradados ser mayor y los
procesos a su vez, sern ms eficaces.
La Fundacin de Asesoras para el Sector Rural (Fundases) empresa sin nimo de lucro,
adscrita al Minuto de Dios, produce y difunde la tecnologa EM en Colombia en las
reas agrcola, produccin animal, saneamiento ambiental, salud humana, construccin
e industria automotriz. A pesar de que esta empresa ha venido utilizando procesos
1
biolgicos para el tratamiento de aguas residuales domsticas e industriales con la
adicin de EM, no se ha evaluado el efecto a corto, mediano y largo plazo, de las
diferentes dosis empleadas en campo. De igual forma, aunque se han observado
durante su aplicacin en campo diferencias en el efecto de EM a diferentes
profundidades, este aspecto tampoco ha sido estudiado con detalle.
Por tanto, esta investigacin tuvo por objeto monitorear algunos parmetros
fisicoqumicos y microbiolgicos, al aplicar diferentes dosis de EM, sobre ARD y
documentar su efecto sobre la calidad del agua. As mismo, se busc determinar si
exista un efecto significativo sobre los parmetros fisicoqumicos y microbiolgicos
evaluados al aplicar EM a dos diferentes profundidades.
2
2. MARCO TERICO
2.1. Agua Residual (AR)
El agua residual (AR), es aquella que ha sufrido una alteracin en sus caractersticas
fsicas, qumicas o biolgicas por la introduccin de contaminantes como residuos
slidos, biolgicos, qumicos, municipales, industriales, agrcolas etc., afectando as los
ecosistemas acuticos y su entorno (Novotny, 2003; Snchez, 2003). Las AR provienen
del sistema de abastecimiento de una poblacin, por esta razn son lquidos de
composicin variada que pueden clasificarse segn su origen en aguas residuales
domsticas (ARD), industriales, de infiltracin y pluviales. Las dos primeras son las ms
relacionadas con la contaminacin del agua (Metcalf y Eddy, 2003).
2.1.1. Aguas residuales domsticas (ARD)
Las aguas residuales domsticas (ARD) son aquellas provenientes de las actividades
domsticas cotidianas como lavado de ropa, bao, preparacin de alimentos, limpieza,
etc., por lo cual son principalmente una combinacin de heces humanas y animales,
orina y agua gris (Mara y Cairncross, 1990). Estas, presentan un alto contenido de
materia orgnica, compuestos qumicos domsticos como detergentes y compuestos
clorados y microorganismos patgenos y no patgenos. Las ARD se clasifican de
acuerdo con su composicin, la cual vara segn los hbitos de la poblacin que las
genera (Tablas 1 y 2) (Leyva, 1998). En ocasiones, el agua generada por varias
industrias puede entrar tambin en esta clasificacin si no contiene una gran proporcin
de sustancias de sntesis qumica (Mara y Cairncross, 1990)
En lo que se refiere a la composicin de compuestos qumicos, las ARD pueden

contener varios tipos de protenas (albminas, globulinas y enzimas industriales
(detergentes)) producto de la actividad microbiana en la propia ARD; carbohidratos
como glucosa, sacarosa, almidn y celulosa (Blundi, 1988) y grasas animales y aceites,
provenientes de los alimentos, junto con los respectivos productos de la degradacin de
los compuestos mencionados, as como sales inorgnicas y otros compuestos inertes
(Metcalf y Eddy, 2003).
3
Tabla 1. Criterios para la clasificacin de la calidad de un AR.
Concentracin
Parmetro Baja Moderada Alta
Slidos totales (ST) 350 720 1200
Slidos disueltos totales (SD) 250 500 850
Slidos disueltos fijos 145 300 525
Slidos disueltos voltiles 105 200 325
Slidos suspendidos totales (SS) 100 220 350
Slidos suspendidos fijos 20 55 75
Slidos suspendidos voltiles 80 165 275
Slidos sedimentables 5 10 20
Demanda biolgica de oxgeno (DBO) 110 160 400
Demanda qumica de oxgeno (DQO) 250 220 1000
Carbono orgnico total (COT) 50 500 290
Nitrgeno (Total como N) 20 40 85
N-Orgnico 8 15 35
N-Amonio libre 12 25 50
N-Nitratos 0 0 0
N-Nitritos 0 0 0
Fsforo (Total como fsforo) 4 8 15
P-Orgnico 1 3 5
P-inorgnico 3 5 15
Cloruros* 30 50 100
Sulfato* 20 30 50
Alcalinidad (como CaCO3) 50 100 200
Grasa 50 100 150
6 7 7 8 7 9
10 -10 10 -10 10 -10
Coliformes totales
UFC/100ml UFC/100ml UFC/100ml
Compuestos orgnicos voltiles <100g/l 100-400g/l >400g/l
*Los valores se deben aumentar en la cantidad en que estos compuestos se hallen
presentes en las aguas de suministro.
Nota: Valores en mg/L a menos que se especifique lo contrario.
(Tomado de: Metcalf y Eddy, 2003)
4
Tabla 2. Valores mximos y mnimos permitidos en parmetros convencionales de las
ARD.
Concentracin
Parmetro Mnima Mxima
Slidos totales 1132 130475
Slidos voltiles totales 353 71402
Slidos suspendidos totales 310 93378
Slidos suspendidos voltiles 95 21500
Demanda bioqumica de oxgeno 440 78600
Demanda qumica de oxgeno 1500 703000
Nitrgeno total 66 1060
Nitrgeno amoniacal 3 116
Fsforo total 20 760
Alcalinidad 522 4190
Grasas 208 23368
pH 1.5 12.6
7 9
Coliformes totales 10 /100ml 10 /100ml
8 8
Coliformes fecales 10 /100ml 10 /100ml
Nota: Valores en mg/L a menos que se especifique lo contrario.
2.2. Calidad de un agua residual domstica
La calidad en general de un agua residual, incluyendo el ARD est determinada por sus
caractersticas o parmetros fsicos, qumicos y biolgicos a partir de los cuales se
determina que tan aceptable es un agua residual para determinado uso (Luv y Liptk,
1999; Novotny, 2003). A continuacin se explican los parmetros utilizados para
determinar la calidad del ARD.
2.2.1. Parmetros biolgicos
Estas caractersticas se relacionan con los organismos y microorganismos, en particular,

bacterias y virus, entre otros, causantes de enfermedades. Para poder clasificar las AR
de acuerdo a sus caractersticas biolgicas, se cuenta con valores establecidos que
dependern de la utilizacin que se prev y los requisitos sanitarios. La gran mayora de
los pases determina los valores permitidos con base en lo estipulado por la
Organizacin Mundial De La Salud (OMS) adaptndolo a sus circunstancias. A
continuacin se presentan algunos de los organismos empleados para determinar la
calidad biolgica del agua (Tabla 3).
En Colombia, en el decreto 1575 de 2007 por el cual se establece el sistema para la

proteccin y control de la calidad del agua para consumo humano, se exige que el agua
debe cumplir con los siguientes valores admisibles desde el punto de vista
microbiolgico, dependiendo de dos diferentes tcnicas aprobadas tanto por el Instituto
Nacional de Salud como por el Ministerio de Salud, para cuantificar Coliformes totales y
5
E. coli: en el caso de nmero ms probable o la tcnica enzimtica de sustrato definido
3 3
deben ser 0 NMP/100cm y de 0 UFC/100 cm , en la tcnica de filtracin por membrana
respectivamente; mientras que para la tcnica de tubos mltiples de fermentacin los
3 3
valores son 0 UFC/100 cm y de 0 microorganismos/100 cm . As mismo, en estre
decreto se reportan los valores correspondientes a los dems parmetros fisicoqumicos,
permiten seleccionar un determinado tipo de tratamiento para mejorar la calidad del
agua.
Para evaluar la calidad biolgica de un agua se ha planteado, el uso de microorganismos

indicadores de contaminacin fecal (Tabla 4) debido a que presentan un comportamiento
similar a los patgenos en cuanto a concentracin, sensibilidad a factores ambientales y
barreras artificiales, adems resultan ms fciles, econmicos y rpidos de cuantificar
(Castillo, 2001; Metcalf y Eddy, 2003; Len-Zapata et al., 2007). Dentro de los
microorganismos indicadores el ms conocido es E. coli, para el grupo de los coliformes
fecales. Los coliformes son el grupo que cuenta con mayores especificaciones en cuanto
a concentraciones en la normatividad nacional (Decreto 1594 de 1984, Decreto 475 de
1998, Decreto 1575 del 2007), aunque en la actualidad, el uso de bacterifagos para el
mismo fin es igualmente frecuente (Len-Zapata et al., 2007).
Tabla 3. Tipo y concentracin de microorganismos patgenos encontrados tpicamente

en un ARD sin tratar
Organismo UFC/ml
5 6
Coliformes totales 10 -10
Coliformes fecales 10 -105
4
Streptococos fecales 103-104

Enterococos 102-103
Shigella Presente
Salmonella 100-102
Pseudomonas aeroginosa 101-102
Clostridium perfringens 101-103
Mycobacterium tuberculosis Presente
Quistes de protozoos Nmero de quistes 101-103
Quistes de Giardia Nmero de quistes 10-1-102
Quistes de Cryptosporidium Nmero de quistes 10-1-101
Huevos de Helmintos 10-2-101
Virus entricos 101-102
Nota: Valores en UFC/mL a menos que se especifique lo contrario.
6
Tabla 4. Organismos propuestos en la literatura como indicadores de la contaminacin
fecal humana
Organismo Caractersticas
Estos microorganismos pueden fermentar lactosa con
Bacterias coliformes
generacin de gases a 35 0.5C de 24 2 h a 48 3 h.
Se establecen como coliformes fecales aquellos
Bacterias coliformes microorganismos capaces de generar gas (o colonias) a una
fecales temperatura de incubacin elevada. (44.5 0.2C durante 24
2 h.
Este grupo se ha empleado, junto con los coliformes fecales,
Estreptococos fecales
para determinar las fuentes de contaminacin fecal recientes.
S. faecalis y S. faecium son las dos familias ms especficas de
Enterococos para la determinacin de contaminacin humana,
Enterococos estas se pueden aislar y cuantificar mediante mtodos
analticos de tipo PCR, filtracin por membrana y conteo en
placa.
Bacterias anaerobias formadoras de esporas, y sus
Clostridum
caractersticas la convierten en un indicador til en los casos en
perfringens
los que se realiza la desinfeccin del agua.
Pseudomonas. Estos organismos pueden estas presentes en grandes
aeruginosa y cantidades en el agua residual. Ambos se pueden considerar
Aeromonas. como organismos acuticos y se pueden encontrar en el agua
hydrophila en ausencia de fuentes de contaminacin fecal inmediatas.
2.2.2. Parmetros fisicoqumicos
Existen varios parmetros fisicoqumicos de importancia que caracterizan a las ARD y

cuyos valores se encuentran estrechamente relacionados con el grado de contaminacin
de la misma. Por esta razn, cuantificar las concentraciones de estas sustancias es de
gran inters en el tratamiento del AR.
En Colombia, en el Decreto 475 de 1998, en los Artculos 7 y 8 se indican los criterios

fisicoqumicos y organolpticos permisibles en el agua potable. Los valores se
presentan a continuacin (Tabla 5, 6 y 7)
Tabla 5. Criterios organolpticos y fsicos de la calidad del agua potable en Colombia
CARACTERSTICAS EXPRESADAS COMO VALOR ADMISIBLE

Color verdadero Unidades de platino Cobalo < 15
Olor y sabor Aceptable
Unidades nefelomtricas
Turbiedad <5
de turbidez (UNT)
Slidos Totales Mg/L < 500
Conductividad Micromhos/cm 50
Sustancias flotantes Ausentes
7
Tabla 6. Criterios qumicos de la calidad del agua potable en Colombia
CARACTERSTICAS EXPRESADAS COMO VALOR ADMISIBLE mg/L

Aluminio Al 0.2
Antimonio Sb 0.005
Arsnico As 0.01
Bario Ba 0.5
Boro B 0.3
Cadmio Cd 0.003
Cianuro Libre disociable CN- 0.05
Cianuro total CN- 0.1
Cloroformo CHCL3 0.03
Cobre Cu 1.0
Cromo hexavalente Cr+6 0.001
Fenoles totales Fenol 0.001
Mercurio Hg 0.0001
Molibdeno Mo 0.07
Niquel Ni 0.02
Nitritos NO2 0.1
Nitratos NO3 10.00
Plata Ag 0.01
Plomo Pb 0.01
Selenio se 0.01
Sustancias activas de azul
0.5
de metileno (ABS)
Grasas y Aceites Ausente
Trihalometanos totales THMs 0.1
Tabla 7. Criterios de la calidad qumica para caractersticas de tipo econmico o accin

indirecta en la salud
CARACTERSTICAS EXPRESADAS COMO VALOR ADMISIBLE mg/L

Calcio Ca 60
Acidez CaCO3 50
Hidrxidos CaCO3 <LD
Alcalinidad Total CaCO3 100
Cloruros Cl- 250
Dureza Total CaCO3 160
Hierro Total Fe 0.3
Magnesio Mg 36
Manganeso Mn 0.1
-2
Sulfatos SO4 250
Zinc Zn 5
Fluoruros F- 1.2
-3
Fosfatos PO4 0.2
Una breve descripcin de los parmetros ms importantes utilizados en la

caracterizacin y determinacin de la calidad de las AR (Tabla 8) se presenta a
continuacin.
8
Tabla 8. Parmetros fisicoqumicos ms importantes relacionados con la calidad de un ARD
PARMETRO CARACTERSTICAS MTODO DE EVALUACIN REFERENCIA
Slidos totales (ST) Son aquellos que permanecen como residuos tras una evaporacin del (Luv y Liptk, 1999).
agua a temperaturas de 103 a 105C.
(Metcalf y Eddy,
Slidos Son aquellos que gracias a su peso especfico y dimensin descienden En un tiempo determinado (18ml/l 2003).
sedimentables fcilmente cuyo no hay una fuerte agitacin. en 10 minutos o 453ml/l-h) se
determina con un cono Inhoff.
(Metcalf y Eddy,
Slidos suspendidos Incluyen materiales particulados que pueden ser sedimentables Se filtra el agua residual en un filtro 2003).
fcilmente aunque hay unos que no lo son. de fibra de vidrio y este es puesto a
secar antes de pesarlo.
(Leyva, 1998).
Slidos disueltos Comprenden molculas orgnicas, inorgnicas e iones en disolucin. Mtodos avanzados como smosis
inversa y destilacin.
(Metcalf y Eddy,
Olor Causados por gases provenientes de la descomposicin o por Pueden ser determinados de 2003).
sustancias olorosas presentes en el agua como aminas, amonio, manera sensorial.
diaminas, sulfuro de hidrgeno mercaptanos y sulfuros orgnicos.
(Jaramillo y Arias,
Temperatura La temperatura de las aguas residuales es mayor a la de las aguas no Termmetro 2001).
contaminadas debido a la energa liberada durante las reacciones
bioqumicas que se presentan en la degradacin de la materia
orgnica. (Metcalf y Eddy,
2003).
Densidad De ella depende la potencial formacin de corrientes de densidad en Densmetro
fangos de sedimentacin.
(Metcalf y Eddy,
Color Es un indicador de la edad del agua. Las aguas frescas an conservan Fotmetro 2003).
condiciones aerobias que le dan una apariencia griscea al agua,
posteriormente en condiciones anaerobias por formacin de biomasa y
la reaccin del sulfuro con metales presentes en el agua este adquiere
un color negro.
9
Turbiedad La turbidez es causada por finas partculas de mineral en suspensin, Turbidmetro (Gray, 1996).
biomasa y burbujas que impiden el paso de la luz a travs del agua.
Demanda Biolgica Se define como una medida de materia orgnica presente en el agua Se realiza un oxmetro. Es la (Luv y Liptk, 1999)
de Oxgeno (DBO) que est determinada por la medicin del oxgeno necesario para la diferencia entre los dos niveles de
degradacin de materia orgnica por va biolgica. OD presentados entre el 13r y 5to
da de incubacin del AR en
oscuridad.
Demanda Qumica Al igual que la DBO es una medida indirecta de la materia orgnica Se realiza en la actualidad gracias a (Luv y Liptk, 1999).
de Oxgeno (DQO) presente en el agua y se define como la cantidad de un oxidante un Kit colorimtrico
qumico fuerte (cido crmico) reducido por un residuo orgnico
expresado en trminos en su equivalencia de consumo de oxgeno.
pH Se refiere a la actividad de ion hidrnio H+ expresada en moles por El pH se puede determinar por (Metcalf y Eddy,
litro. medio de un pHmetro, aunque 2003).
La concentracin de in hidrgeno inadecuado en un agua residual tambin puede emplearse papel
indica que es difcil su tratamiento por procesos biolgicos. indicador.
Alcalinidad La alcalinidad en un agua residual est determinada por la presencia Se realiza en la actualidad gracias a (Metcalf y Eddy,
de hidrxidos, carbonatos y bicarbonatos de elementos como el sodio, un Kit colorimtrico 2003)
el magnesio, el potasio o el amoniaco. La alcalinidad ayuda a regular
los cambios en el pH producidos por la adicin de cidos.
Nitrgeno El nitrgeno presente en las aguas residuales hace parte de protenas Se realiza en la actualidad gracias a (APHA, 1999;
y rea, que por medio de reacciones biolgicas puede ser transformado un Kit colorimtrico Novotny, 2003;
en amoniaco, nitritos y nitratos. El nitrato, es muy mvil en el suelo y en Washington State
el agua.; estas descargas de nutrientes en forma de nitrgeno en el Deparment of
agua favorecen el crecimiento masivo de algas causando eutroficacin, Health, 2005)
aumento de la DBO y toxicidad en peces por amonio.
10
Fsforo Al igual que el nitrgeno, el fsforo es un nutriente esencial para el Se realiza en la actualidad gracias a (Novotny, 2003)
crecimiento de algas y otros organismos biolgicos, este favorece el un Kit colorimtrico
crecimiento de vida acutica no deseada y puede contaminar el agua
subterrnea.
Oxgeno disuelto El oxgeno disuelto es necesario para el mantenimiento de la vida Se puede determinar por el mtodo (Leyva, 1998;
(OD) acutica. Los requerimientos de oxgeno disuelto para la conservacin de Winkler o yodomtrico o el que Jaramillo y Arias,
de los seres vivos depende de la temperatura, presin, contenido de utiliza electrdos de membrana. 2001;)
sales y la presencia de sustancias qumicas oxidables en condiciones
acuticas especficas.
Sulfuro de hidrgeno Los sulfuros son producidos por la reduccin de sulfatos en Los mtodos cuantitativos para la (APHA, 1992;
condiciones anaerbicas, el sulfuro de hidrgeno reacciona con el deteccin de sulfuro de hierro Jaramillo y Arias,
hierro presente en el agua residual formyo sulfuro de hierro u otros incluyen el azul de metileno, el 2001)
sulfuros metlicos, estas reacciones provocan corrosin y malos olores. potenciomtrico y el yodomtrico y
los cualitativos la prueba de
antimonio, la del electrodo plata-
sulfuro de plata, prueba de papel de
acetato de plomo y lminas de plata.
Metano El metano es el principal subproducto de la descomposicin anaerobia Se realiza en la actualidad gracias a (Metcalf y Eddy,
de la materia orgnica, este no se encuentra en grandes cantidades en un Kit colorimtrico 2003)
AR
Grasas y aceites Las grasas se hallan entre los compuestos orgnicos de mayor Extraccin qumica y cuantificacin (Metcalf y Eddy,
estabilidad, y su biodegradacin no resulta sencilla. Si no se elimina el 2003).
contenido de grasas en un AR antes del vertido, esta puede interferir
con la vida biolgica en aguas superficiales y crear pelculas y
acumulaciones de materia flotante desagradable.
11
Compuestos Se consideran compuestos orgnicos voltiles aquellos compuestos El contenido de grasa se determina (Metcalf y Eddy,
orgnicos voltiles orgnicos que tienen su punto de ebullicin por debajo de los 100C, por la extraccin de la muestra con 2003).
(COVs) y/o una presin mayor que 1mm de Hg a 25C. Los compuestos triclorofluoroetano, debido a que la
orgnicos voltiles son muy mviles en estado gaseoso por lo que su grasa es soluble en l.
liberacin al medio ambiente se hace ms sencilla, estos compuestos
tambin contribuyen al aumento de hidrocarburos reactivos en la
atmsfera.
12
2.3 Tratamiento de las aguas residuales
El tratamiento de las AR se divide en preliminar, primario, secundario y terciario (Tabla

9), indicando as el nivel de remocin de contaminantes que se alcanza a medida que se
pasa de un tratamiento a otro (Orozco y Salazar, 1989). La seleccin de un tratamiento
para un AR depende de diversos factores como las caractersticas inciales del agua, el
requerimiento de la calidad del efluente y los costos y la disponibilidad de un terreno
destinado para tal fin (Ramalho, 1983). A continuacin se presentan las principales
caractersticas de cada tipo.
Tabla 9. Tipos de tratamientos para aguas residuales
Tipo de
Caractersticas Ejemplos Referencia
tratamiento
Rejas y cribas de
Su objetivo es eliminar
barras, tamices, (Ramalho
cualquier elemento que pueda
desmenuzadores 1983;
entorpecer alguna de las
desarenadores, Eckenfelder y
Preliminar etapas siguientes del
separadores de grasas y Grau, 1992;
tratamiento como slidos
aceites, tanques de Seoanez,
gruesos, arena, aceites y
preaireacin y 1996)
grasas.
aliviaderos.
El objetivo del tratamiento Fosas spticas, tanques
primario es la remocin de la de doble accin, (Ramalho
materia orgnica suspendida tanques de 1983; Diehl y
Primario
(40 a 60%), por medio de sedimentacin, filtracin, Jeppsson
procedimientos fsicos, neutralizacin y 1998)
qumicos y a veces biolgicos. flotacin.
Su objetivo es la remocin de
la materia orgnica disuelta,
medida como demanda
bioqumica de oxgeno (DBO)
Lechos bacterianos,
que no pudo ser removida en
lodos activados, lagunas (Gaudy y
el tratamiento primario. En este
de estabilizacin, Gaudy, 1971;
tratamiento se estimula de
biodiscos, filtros Seoanez,
Secundario manera controlada el
bacterianos, filtros 1996; Metcalf
crecimiento de
percoladores, reactor de y Eddy 2003)
microorganismos
lodos de flujo
degradadores de materia
ascendente (UASB)
orgnica. El porcentaje de
remocin de DBO en este tipo
de tratamientos es
aproximadamente del 90%
El objetivo del tratamiento
terciario, o avanzado, es (Seoaenz,
Cloracin, ozonizacin,
remover cualquier otro 1996; Boari et
carbn activado,
elemento no deseado Esta al., 1997;
Terciario intercambio inico,
etapa del tratamiento est Eckenfelder,
smosis inversa,
generalmente enfocada a la 2000; Metcalf
rizofiltracin.
remocin de nutrientes y Eddy, 2003).
(nitrgeno y fsforo).
13
Como parte de los tratamientos descritos anteriormente y principalmente del tratamiento
secundario, el componente biolgico es de gran importancia. Enmarcado dentro de esta
clase de tratamientos se encuentra EM, cuyos microorganismos se describen con ms
detalle a continuacin.
2.4. Microorganismos eficaces (EM) y su uso en AR

Se usa el trmino microorganismos eficaces o en ingls efficient microorganisms (EM)
para denotar cultivos mixtos especficos de microorganismos benficos conocidos que
son empleados efectivamente como inoculantes microbianos (Higa y Parr, 1994). EM
es una tecnologa desarrollada por el Doctor Teruo Higa en la dcada de los ochenta en
Okinagua, Japn y ha sido empleada en diferentes campos como la agricultura, industria
animal, remediacin ambiental, entre otros y se encuentra en la actualidad ampliamente
distribuida (Sangkkara, 2002).
EM es un cultivo mixto de microorganismos no modificados genticamente, con

diversos tipos de metabolismo, que al encontrarse juntos presentan relaciones
sinergistas, de cooperacin y cometabolismo (Higa y Parr, 1994). Estudios de las
interacciones entre los diferentes integrantes de las comunidades microbianas han
demostrado en varias ocasiones una mayor eficiencia de estos consorcios en los
procesos de degradacin, frente a estudios que involucran slo a un gremio (Atlas y
Bartha, 1998). El Dr. Higa encontr que se creaba un efecto potencializador al mezclar
microorganismos con diversas caractersticas metablicas.
Los microorganismos del EM poseen varias caractersticas tiles en procesos de

biorremediacin, entre las cuales se encuentran la fermentacin de materia orgnica sin
la liberacin de malos olores y su capacidad de convertir los desechos txicos (H2S) en
sustancias no txicas (SO4) (Garca, 2006), propiedades desionizantes que favorecen la
detoxificacin de sustancias peligrosas, quelacin de metales pesados, produccin de
enzimas como la lignina peroxidasa, entre otras (Wididana y Higa, 1997).
Aunque EM ha sido usado exitosamente en muchos aspectos de manejo ambiental no

existen muchos reportes cientficos de su uso en aguas residuales (Okuda y Higa, 2005).
La razn por la cual EM ha sido empleado para el tratamiento de AR es que los
microorganismos que contiene secretan cidos orgnicos, enzimas, antioxidantes y
quelantes metlicos creyo un ambiente antioxidante que ayude al proceso de separacin
slido/lquido, el cual es el fundamento de la limpieza del agua (Higa y Chinen 1998).
Estudios realizados por Silva y Silva (1995) emplearon EM para el tratamiento de ARD
utilizyo el sistema de lodos activados. Los resultados mostraron que el consumo de
14
oxgeno en el sistema de tratamiento disminuy al igual que la produccin de lodos, la
DQO y los malos olores. Clesceri et al. (1999), realizaron un estudio para determinar el
efecto de EM en la estabilizacin de lodos spticos, mostrando disminucin de olor, pH
y coliformes. De igual forma, Szymansky y Patterson (2003), evaluaron la efectividad del
uso de EM, para reducir olores y disminuir la cantidad de lodos generados en los
tratamientos de AR, se evaluaron alcalinidad, pH, conductividad, ST, SS y SD,
presentando significativas mejoras en estos parmetros. Por su parte, Ngurah (2005)
realiz una investigacin en el cual se prob EM, a escala de laboratorio (2 L de AR),
con 2 pH diferentes (4 y 7) en aireacin constante durante 10 d; los datos obtenidos
mostraron disminucin en las concentraciones de los parmetros DBO5, DQO y SS.
En lo que se refiere a Colombia, Roldn y col., (2007) encontraron que tras la aplicacin
de EM, tanto en agua residual domstica como sinttica, se evidenciaron significativas
disminuciones en el contenido de coliformes en las aguas.
2.5. Microorganismos del EM
2.5.1. Bacterias fotosintticas (Rhodopseudomonas palustris)
Dentro de gremio de organismos fotosintticos que hacen parte de EM se encuentra

Rhodopseudomonas palustris. Estas son bacterias fototrficas facultativas clasificadas
dentro de las bacterias prpura no del azufre, el cual comprende un grupo variado, tanto
en morfologa, filogenia y su tolerancia a diferentes concentraciones de azufre (Holt,
2000). Son microorganismos capaces de producir aminocidos, cidos orgnicos y
sustancias bioactivas como hormonas, vitaminas y azcares empleados por otros
microorganismos, hetertrofos en general, como sustratos para incrementar sus
poblaciones (Vivanco, 2003).
R. palustris es encontrada comnmente en suelo y aguas y posee un metabolismo muy

verstil al degradar y reciclar gran variedad de compuestos aromticos, como
bencnicos de varios tipos encontrados en el petrleo, lignina y sus compuestos
constituyentes y por lo tanto est implicado en el manejo y reciclaje de compuestos
carbonados. No slo puede convertir CO2 en material celular, sino tambin N2 en amonio
y producir H2 gaseoso. Crece tanto en ausencia como en presencia de oxgeno (JGI,
2005). En ausencia de oxgeno, prefiere obtener toda su energa de la luz por medio de
la fotosntesis, crece y aumenta su biomasa absorbiendo CO2, pero tambin puede
crecer degradando compuestos carbonados txicos y no txicos cuyo el oxgeno est
presente llevando a cabo respiracin (JGI, 2005).
Este microorganismo presenta un crecimiento fototautotrfico con H2, sulfuro y tiosulfato

como donadores de electrones en presencia de pequeas cantidades de extracto de
15
levadura. Su crecimiento fotohetertrofico es posible con varios sustratos orgnicos
como azcares simples y complejos. El sulfato puede ser usado como la nica fuente de
azufre, mientras que el amonio, dinitrogeno, algunos aminocidos, y en algunas cepas el
nitrato, pueden ser usados como fuente de nitrgeno. Como factores de crecimiento
requiere de p-aminobenzoato y, algunas cepas biotina. Su crecimiento ptimo ocurre a
una temperatura de 30-37C y pH 6.9 (rango 5.5-8.5) (Holt, 2000). En ocasiones no se
hace uso de Rhodopseudomonas porque no se conoce detalladamente su metabolismo.
Sin embargo, estas bacterias se han utilizado tanto en cultivos puros como mixtos para
evaluar su actividad metablica (Kyun et al., 2004).
Debido a la gran variedad de rutas metablicas que puede llegara a tomar este
microorganismo segn sus necesidades y condiciones ambientales, como parte del
mismo produce una serie de enzimas y coenzimas segn sea el caso, dentro de las que
se encuentran amilasas, hidrolasas y proteasas, as como ubiquinonas y la coenzima
Q10, las cuales participan directamente en los procesos de remocin de sulfuro de
hidrgeno, nitratos, sulfatos, sulfitos, hidrocarburos, halgenos y nitratos reduciendo de
esta forma la demanda biolgica de oxgeno (Cetinkaya y Ostrk, 1999)
Teniendo en cuenta las condiciones de crecimiento para la bacteria fototrfica

R. palustris, as como los estudios reportados por Honda et al., (2006), en donde se
optimiza el crecimiento de estos microorganismos bajo condiciones de anaerobiosis para
el tratamiento de AR, se considera que las poblaciones de estos microorganismos
pueden llegar a adaptarse de forma exitosa a las condiciones que presentan las ARD.
2.5.2. Bacterias cido lcticas (Lactobacillus spp.)
Dentro de los microorganismos que conforman el multicultivo EM los ms abundantes

son las bacterias cido lcticas. Estos microorganismos producen cido lctico a partir
de azcares y otros carbohidratos generados por bacterias fotosintticas y levaduras,
como parte de su metabolismo. El cido lctico es un componente con propiedades
bactericidas que puede suprimir a los microorganismos patgenos (Rodrguez-
Palenzuela, 2000), mientras ayuda a la descomposicin de la materia orgnica, incluso
en el caso de compuestos recalcitrantes como la lignina o la celulosa, ayudando a evitar
los efectos negativos de la materia orgnica que no puede ser descompuesta
(Sustainable Community Development, 2001).
No se tiene gran informacin precisa acerca de la forma en la cual actan las bacterias
acido lcticas en el tratamiento de las aguas contaminadas, pero teniendo en cuenta sus
caractersticas, se plantea que al disminuir el pH se genera una inhibicin de patgenos
(Early, 1998). Sin embargo, no slo el cido lctico es responsable de los efectos
16
antimicrobianos generados por los lactobacilos. En el estudio realizado por Kelly et al.
(1998), se determin que parte del comportamiento antagnico frente a patgenos del
cido lctico se deba a la produccin de pptidos antimicrobianos y compuestos de bajo
peso molecular, como la bacteriosina clase I, y la nisina, pptido de 34 carbonos que es
activo frente a la mayora de las bacterias Gram positivas.
En lo que se refiere a los requerimientos de crecimiento para el grupo de las bacterias

cido lcticas, se encuentran como generalidades que estas son bacterias
microaeroflicas, razn por la que debe procurarse que la incubacin se realice en una
atmsfera con 5% de CO2. Por lo general, para su crecimiento se emplean un incubacin
de 3 das, a 37C o hasta 5 das a 30C, puesto que son microorganismos de
crecimiento relativamente lento y sus rendimientos metablicos dependen de la
temperatura directamente (Merck, 2003).
2.5.3. Levaduras (Saccharomyces sp)
El tercer grupo dentro de los gremios de microorganismos presentes en EM son las

levaduras. Todos los miembros de Saccharomyces emplean diversas fuentes de carbono
y energa. En primer lugar se encuentran la glucosa y la sacarosa, aunque tambin
pueden emplearse fructuosa, galactosa, maltosa y suero hidrolizado, ya que
Saccharomyces no puede asimilar lactosa. Tambin puede utilizarse etanol como fuente
de carbono. El nitrgeno asimilable debe administrarse en forma de amonaco, urea o
sales de amonio, aunque tambin se pueden emplear mezclas de aminocidos. Ni el
nitrato ni el nitrito pueden ser asimilados. (Harvey et al., 1985).
Aparte de carbono y el nitrgeno los macroelementos indispensables son el fsforo que

se emplea comnmente en forma de cido fosfrico y el Mg+2 como sulfato de magnesio,
que tambin provee azufre. Finalmente son tambin necesarios el Ca+2, Fe+2, Cu+2 y Zn+2
como elementos menores. Un requerimiento esencial est constituido por las vitaminas
del grupo B como biotina, cido pantotnico, inositol, tiamina, piridoxina y niacina.
Existen sin embargo, algunas diferencias entre las distintas cepas. Entre las vitaminas
mencionadas la biotina es requerida por casi la totalidad de las mismas. (Harvey et al.,
1985).
Estos microorganismos sintetizan sustancias antimicrobianas a partir azcares, y

aminocidos secretados por las bacterias fotosintticas, tambin producen sustancias
bioactivas como hormonas y enzimas que son sustancias empleadas por las bacterias
cido lcticas presentes en el EM (ACARA, 2006).
17
Como parte de su metabolismo fermentativo, las levaduras producen etanol en
relativamente altas concentraciones, que es tambin reconocida como sustancia
antimicrobiana (Mlikota et al., 2004). Se asume por lo tanto que al degradar los
carbohidratos presentes en AR, se producir etanol, el cual puede funcionar como
sustancia antagnica frente a microorganismos patgenos (Sustainable Community
Development, 2001).
Los requerimientos anteriormente mencionados cambian segn las condiciones de

cultivo, ya que el aumento de la aerobiosis disminuye los requerimientos de esa vitamina
y el uso de urea como fuente de nitrgeno los aumenta por la necesidad de biosntesis
de 3 sistemas enzimticos que contienen biotina. En el caso de la tiamina, se ha
demostrado que aumenta la actividad fermentativa de la levadura (Harvey et al.,
1985).Teniendo en cuenta que durante el presente estudio, las condiciones fueron
anaerbicas, los requerimientos de estas vitaminas y sus efectos sobre las poblaciones
pudieron variar, a pesar de que las ARD, se caracterizan por ser una muy buen fuente de
compuestos vitamnicos.
Finalmente debe mencionarse al O2 como otro requerimiento para la produccin de

levadura, puesto que se necesita 1 g de O2 para la produccin de 1 g de levadura seca
en el caso de crecimiento en condiciones ptimas. Si existe limitacin de O2 no se
puede alcanzar los rendimientos ptimos, lo cual genera que los valores normales de la
velocidad especfica de crecimiento para levaduras, que se encuentran en el orden de
-1
0,45 a 0,6 h como mximo, sean mucho menores (Adams, 1986). Es as como
S. cereviceae, puede encontrar condiciones ptimas en un rango relativamente amplio
de condiciones de oxgeno, puesto que a pesar de requerir este factor para su
crecimiento, sus exigencias no son altas y con bajas concentraciones, puede realizar
normalmente su metabolismo fermentativo, aunque es probable que lo haga en una
forma un poco menos eficiente (Adams, 1986).
As mismo, para las poblaciones de levaduras, la temperatura ptima se ha establecido

en 28.5 C, dado que a mayores temperaturas disminuye el rendimiento, probablemente
debido al aumento de energa de mantenimiento (Adams, 1986).
El rendimiento celular puede tambin afectarse por la presencia de inhibidores como

SO2, cido acontico y metales pesados o restos de herbicidas o bactericidas que
pueden estar presentes en las melazas (Sustainable Community Development, 2001).
18
3. JUSTIFICACIN
Las aguas residuales domsticas (ARD) presentan un alto contenido de carbohidratos,

protenas, cidos grasos, sales minerales y otros compuestos qumicos sintticos, lo cual
las convierten en ambientes que favorecen el crecimiento de microorganismos
patgenos. Estos microorganismos emplean estos compuestos como fuente de carbono
y energa para su metabolismo y crecimiento, generando durante este proceso malos
olores por la descomposicin de la materia orgnica e inorgnica, siendo esta una de las
razones que no permite reutilizar las aguas residuales (Ngurah, 2005).
La industria proporciona un amplio repertorio de productos para la remediacin de AR

que, en general, se obtienen por sntesis qumica, lo cual resulta txico y peligroso para
el ambiente. Debido a una mayor sensibilidad de la sociedad ante los problemas
medioambientales y una mayor valoracin de los productos ecolgicos por los
consumidores (Castillo et al., 2005), existe un inters creciente en desarrollar alternativas
sostenibles que sustituyan la utilizacin masiva de sustancias sintticas por productos
naturales.
Adicionalmente, el tratamiento de AR llevado a cabo con mtodos convencionales

requiere un costo extra representado en productos qumicos tales como coagulantes o
productos clorados de alto valor en el mercado, lo cual no los hace disponibles para
todos los sectores que los necesitan. Es por esto que es de gran inters la
implementacin de una tecnologa econmica y eficaz para la solucin de este problema.
Los microorganismos eficaces (EM) se presentan como una alternativa asequible en el
rea del tratamiento de ARD, por sus beneficios y menor costo.
La capacidad de los microorganismos presentes en el EM de interactuar entre si y con

los microorganismos presentes en el agua gracias a sus productos metablicos tales
como los cidos, enzimas antioxidantes, quelatos y sustancias promotoras de
crecimiento, entre otros (Ngurah, 2005) justifican el uso del EM en el tratamiento de
AR. Lo anterior, ha sido sustentado por Investigaciones como la de Fioravanti (2005) en
Costa Rica, la cual busc documentar la efectividad de EM en el mejoramiento de
algunos parmetros utilizados para medir la calidad del agua. En Colombia, Roldn et al.
(2007), realizaron una aproximacin acerca de la dosificacin, tiempo de permanencia de
EM en AR y el monitoreo de parmetros fisicoqumicos y microbiolgicos, encontrando
una disminucin significativa en las poblaciones de coliformes totales. A excepcin de
este trabajo, en la actualidad no se cuenta con estudios de este tipo en nuestro pas, en
los cuales se presente una debida documentacin de los procesos realizados y de los
resultados obtenidos.
19
Teniendo en cuenta, lo anterior, se hace evidente la necesidad de llevar a cabo una
mayor cantidad de estudios en donde se evalen diferentes parmetros, como
concentracin y profundidad. Por esta razn, se desea realizar un estudio experimental
que documente el uso de estos microorganismos en el tratamiento de ARD en nuestro
pas, ya que un trabajo bajo estas condiciones nunca antes se ha realizado.
A pesar de que la Fundacin de Asesoras para el Sector Rural (Fundases), ha venido

utilizando procesos biolgicos para el tratamiento de ARD y Aguas residuales
industriales (ARI) con la adicin de EM, en varios sectores industriales como el
camaronero y agrcola, en los cuales se han observado resultados satisfactorios, el
efecto de las diferentes dosis empleadas en campo a corto, mediano y largo plazo no ha
sido completamente evaluado y documentado, lo cual permitira optimizar diversos
parmetros del proceso.
Se esperaba que la aplicacin de EM presentara un efecto diferencial entre aquellas

unidades experimentales tratadas con respecto a los controles, principalmente en la
remocin de olores (sulfuros), as como de coliformes totales y fecales y la permanencia
en el tiempo de las poblaciones de microorganismos presentes en EM.
Los objetivos de este trabajo fueron, en primera instancia, monitorear algunos de los
cambios fisicoqumicos (OD, pH, Temperatura, DQO, DBO5, ST, NO3-, NO2-, NH4+, PO4-3,
SO4-2 y S2-) y microbiolgicos (coliformes totales, coliformes fecales, hetertrofos totales,
levaduras, lactobacilos y bacterias fototrficas) que se presentaron en el ARD tras aplicar
tres diferentes dosis de EM, buscando evaluar su efecto, la relacin entre los
parmetros evaluados y de estos con la calidad del agua. As mismo, se busc
determinar si exista un efecto significativo de la profundidad en la accin EM en el
ARD tratada. Lo anterior procurando dar explicacin al funcionamiento del producto EM
en este tipo de sistemas de tratamiento.
20
4. OBJETIVOS
4.1. Objetivo general
Evaluar el efecto de EM sobre la calidad de un agua residual domstica.
4.2. Objetivos especficos
Realizar un seguimiento en el tiempo de parmetros microbiolgicos y

fisicoqumicos de un agua residual domstica tratada con EM.
Evaluar si la profundidad presenta un efecto sobre el la accin de EM.
Evaluar tres diferentes dosis de EM para el tratamiento de un agua residual
domstica.
21
5. MATERIALES Y MTODOS
Para evaluar el efecto de diferentes dosis de EM, as como de la profundidad, sobre la

calidad de un agua residual domstica (ARD), se realiz el seguimiento de algunos
parmetros fisicoqumicos y microbiolgicos relacionados con su calidad.
Inicialmente, se realiz una caracterizacin microbiolgica y fisicoqumica del ARD
proveniente del pozo sptico del vivero Coraflor (Fundases), del cual se obtuvieron las
muestras para el estudio de ARD, buscando determinar las cargas iniciales tanto de los
microorganismos como de los parmetros fisicoqumicos a monitorear, para as
establecer protocolos de anlisis en rangos adecuados segn sus concentraciones en el
posterior procesamiento de las mismas durante todo el estudio.
Se emplearon canecas de PVC como unidades experimentales (UEs), que contenan el

ARD a tratar junto con una de las dosificaciones asignadas como tratamiento. El
seguimiento se realiz durante 45 das. Se evaluaron 3 dosis de EM: 1/3000, 1/5000 y
1/10000 y se estableci si la profundidad (20 y 40 cm) presentaba un efecto sobre la
calidad del ARD tratada con EM.
5.1. Verificacin de algunas de las tcnicas analticas fisicoqumicas
Nueve de los parmetros fisicoqumicos seleccionados para el estudio como indicadores

de la calidad de agua, fueron sometidos a una verificacin de sus tcnicas analticas.
Esto parmetros fueron: DQO, DBO5, slidos totales (ST), NO3-, NO2-, NH4+, PO4-3, SO4-2
y S2-. Se prepararon patrones de concentracin conocida de cada uno de los analitos
(Tabla 10) y a partir de estos se realiz la medicin por las tcnicas respectivas, con el
fin de garantizar la precisin y exactitud de los analistas y la tcnica.
Los dos analistas realizaron tres repeticiones por cada uno de los parmetros para un
total de seis repeticiones.
Se consideraron como verificadas aquellas tcnicas que presentaron un coeficiente de

variacin (CV) y desviacin estndar (s), que cumplieran con lo establecido por la casa
comercial del kit empleado o el procedimiento operativo estndar (POE) de los
laboratorios de Fundades, es decir, precisas y porcentajes de error (%error) < 10%, es
decir exactas.
22
Tabla 10. Parmetros y concentraciones de las soluciones patrones empleadas para la
verificacin de las tcnicas fisicoqumicas analizadas durante el estudio
Concentracin de la
Parmetro
sln patrn (mg/L)
DQO 500
DBO5 180
ST 250
-
NO3 9
-
NO2 10
NH4+ 15
-2
PO4 1
SO4-2 20
2-
S 20
5.2. Origen del ARD
El ARD se obtuvo del pozo sptico del vivero Coraflor, el cual pertenece a la Fundacin
de Asesoras para el Sector Rural (FUNDASES), ubicado a 1 Km de la inspeccin de
Puente Piedra, va Subachoque (Cundinamarca). Para el muestreo, se utiliz un
muestreador de agua tipo Uhlad con el cual se tomaron muestras de 1 L a tres diferentes
profundidades (0.20, 0.70 y 1.20 m), para formar una muestra compuesta de 3 L. En total
se obtuvieron tres muestras compuestas las cuales fueron colocadas en recipientes
plsticos estriles y almacenadas (4-6C) hasta su anlisis.
5.3. Caracterizacin inicial del ARD
Se realiz la caracterizacin fisicoqumica y microbiolgica inicial del ARD del pozo para
identificar en que estado se encontraba segn los parmetros de para la calidad del
agua sealados por Metcalf y Eddy (2003), as como para determinar los rangos en los
que se encontraban los parmetros buscando establecer las diluciones a emplear en la
medicin de cada parmetro para garantizar una buena lectura segn el alcance de cada
tcnica.
Se siguieron las metodologas establecidas en los planes operacionales estndar (POEs)

de los laboratorios de Microbiologa y de Qumica de Aguas de Fundases, para cada una
de las tcnicas.
Se realiz la caracterizacin microbiolgica de las muestras para describir concentracin

microbiana tanto de indicadores de contaminacin fecal (Coliformes Totales y Fecales) y
hetertrofos totales, como de los microorganismos presentes en EM sobre medios de
cultivo especficos (Anexo A) y empleando la tcnica de recuento en placa (Tabla 11).
23
Tabla 11. Parmetros microbiolgicos monitoreados durante el estudio
Tiempo Temperatura
Medio De
Microorganismos Mtodo Incubacin Incubacin
Cultivo
(d) (C)
Lactobacillus spp. NTC 5034-2003 MRS 4 37
Rhodopseudomonas Norma interna 5-7 30
Van Niels
sp. Fundases
Rosa de 1 24
Sacharomyces sp. NTC 4132-2003
Bengala
Hetertrofos totales Oxoyd 2007 R2A 1 24
Coliformes totales NTC 4458-2003 Chromocult 1 37
Coliformes fecales NTC 4458-2003 Chromocult 1 37
As mismo, con respecto a los parmetros fisicoqumicos se evaluaron aquellos que se

consideraron ms relevantes segn los fines del estudio (Tabla 12) dentro de los
presentados por Metcalf y Eddy (2003). Todos los anlisis fueron realizados en los
laboratorios de Fundases en Bogot D.C.
Tabla 12. Parmetros fisicoqumicos monitoreados durante el estudio

Parmetro Mtodo Equipo
Reflujo cerrado por mtodo Termoreactor y
Demanda qumica
colorimtrico 5220D. (Merck y espectofotmetro (NOVA 60)
de oxgeno (DQO)
Styard Methods, 1999)
Mtodo oximtrico, 5210. Multiparamtrico (WTW 340i) con sonda
Demanda
(Styard Methods, 1999). para determinacin de Oxigeno disuelto
biolgica de
Mtodo sin filtracin. (Cell Ox) e incubadora a 20C (Oxi Top
oxgeno (DBO5)
Box).
Mtodo gravimtrico 2540B a Horno de secado (Novatec)
Slidos totales
103-105C. (Styard Methods,
(ST)
1999).
Mtodo fotomtrico del cido Equipo de filtracin y espectofotmetro
Nitratos (NO3-) 4500- NO3-. (Styard Methods, (NOVA 60)
1999).
Mtodo fotomtrico de la sal de Equipo de filtracin y espectofotmetro
Nitritos (NO2-) diazonio. 4500-NO2- B. (Styard (NOVA 60)
Methods, 1999).
Mtodo de nitrgeno amoniacal Equipo de filtracin y espectofotmetro
Amonio (NH4+) 4500-NH4+ D. (Styard Methods, (NOVA 60)
1999).
Mtodo fotomtrico del Equipo de filtracin y espectofotmetro
-3
Fosfatos (PO4 ) fosfomolibdeno 4500-P E. (NOVA 60)
(Styard Methods, 1999).
Mtodo Turbidimtrico 4500 espectofotmetro (NOVA 60)
Sulfatos (SO4-2) SO4-2-E. (Styard Methods,
1999).
Mtodo yodimtrico 4500-S2-- Equipo de filtracin al vaco y placas de
2-
Sulfuros (S ) E. (Styard Methods, 1999). agitacin magntica con barras de
agitacin en TFE
Mtodo potenciomtrico, Multiparamtrico (WTW 340i) con sonda
Oxgeno disuelto
4500-O G (Styard Methods, para determinacin de Oxigeno disuelto
(OD)
1999). (Cell Ox)
Mtodo potenciomtrico 4500- Multiparamtrico (WTW 340i) con
pH
H. (Styard Methods, 1999). electrodo sensis (WTW).
Temperatura Multiparamtrico (WTW340i).
24
5.4. Montaje de las unidades experimentales (UEs)
Las dimensiones de cada UE fueron: 1.10 x 0.56 m y 7 mm de espesor con una

capacidad total de 250 L. En cada UE, se adaptaron dos llaves de plstico instaladas a
0.20 y 0.40 m de la base las cuales se utilizaron como puertos de muestreo.
Con el fin de llevar un registro fotogrfico del proceso y observar los cambios en el
tiempo, se emplearon columnas de acrlico translcido de 1.50 x 0.53 m y 4 mm de
espeso una para cada tratamiento (Figura 1).
40cm
cm
20cm
Unidad experimental
(UE) 20
cm
Columna para
Seguimiento fotogrfico
Figura 1 Montaje de las UEs en el viviero Cloraflor. Se muestran las UEs utilizadas para
evaluar los diferentes tratamientos y las columnas empleadas para realizar el
seguimiento fotogrfico
Las UEs se ubicaron en un invernadero del vivero Coraflor, adaptado con plstico
transparente especial para proteger el montaje de los posibles cambios de clima, con el
fin de lograr una ptima realizacin del estudio. Las UEs fueron llenadas con 110 L de
ARD proveniente del pozo sptico con la ayuda de una motobomba. Una vez realizado el
proceso de llenado, a cada UE se le asign aleatoriamente como control o tratamiento.
25
Las columnas de acrlico empleadas para el seguimiento fotogrfico, se llenaron, se
marcaron segn correspondiera como control o tratamiento y finalmente fueron cubiertas
con una bolsa negra para simular condiciones similares de las UEs.
5.5. Evaluacin de la dosis de EM
Para evaluar el efecto de la concentracin de EM en el tratamiento del ARD, se

seleccionaron tres dosis: 1/3000, 1/5000 y 1/10000 (v EM / v ARD), de acuerdo con las
dosis empleadas en campo por Fundases en estudios en campo. Tanto las dosis a
evaluar, como el control (sin adicin de EM) contaron con tres UEs cada uno, para un
total de 12 UEs.
Para garantizar que la dosis fuera la correspondiente a cada tratamiento, el volumen de
cada UE se recalcul luego de cada muestreo teniendo en cuenta el volumen de agua
extrado.
Al inicio del estudio (da 0) se realiz una adicin de EM con una proporcin de 1/1000
(dosis de choque) a todos los tratamientos y se homogeniz manualmente con la ayuda
de un tubo de PVC. Las aplicaciones de EM posteriores, correspondientes a los das
15 y 30 a partir del inicio del estudio se realizaron de igual manera pero empleando la
dosis de EM especficas para cada tratamiento.
5.6. Evaluacin del efecto de la profundidad
Se tomaron muestras a los 20 y 40 cm de la base de cada UE, con el fin de determinar si

existan diferencias significativas en cuanto a los parmetros analizados entre las dos
profundidades seleccionadas. Buscando evitar que las muestras de las diferentes
profundidades se mezclaran se tomaba la primero muestra a los 20cm y luego a los
40cm,
5.7. Muestreos
Los muestreos se efectuaron a los 0, 10, 30 y 45 d. En cada uno de ellos se tom 1.5 L
de agua en cada puerto de muestreo en recipientes plsticos estriles. Durante el
estudio se tom el 11% del volumen total de AR en la UE, para garantizar que las UEs y
los muestreos fueran representativos. Los recipientes se transportaron desde el vivero
hasta los laboratorios de Fundases a una temperatura de 4C y fueron preservados
hasta su anlisis, segn el POE de cada parmetro. Los muestreos correspondientes al
da 0 y 30 que coincidan con los eventos de aplicacin de EM, se realizaron antes de
agregar las respectivas dosis (Figura 2).
26
5.8. Realizacin de los anlisis para los parmetros fisicoqumicos y
microbiolgicos
Para la realizacin de los anlisis, las muestras se dejaron alcanzar la temperatura

ambiente (14C 2) y luego fueron homogenizadas mediante placas de agitacin
magntica.
Las tcnicas analticas de los parmetros fisicoqumicos se desarrollaron siguiendo los

- - +
mtodos especificados en la tabla 9. Para las pruebas colorimtricas NO 3 , NO2 , NH4 ,
-3 -2
PO4 y SO4 , el agua fue filtrada al vaco, usando filtros de membrana (60 m)
(WHATMAN GFB/40). Para los anlisis microbiolgicos, se realizaron a las muestras seis
diluciones seriadas en base diez; de acuerdo con los rangos establecidos en la
caracterizacin inicial del ARD se sembraron las diluciones seleccionadas en cada medio
especfico y selectivo para el recuento de los microorganismos de inters (Tabla 11) por
duplicado. As mismo se prepararon soluciones de concentracin conocida y fueron
analizadas en las mismas condiciones de las muestras como control de calidad de cada
una de las tcnicas.
A) B)
C)
Figura 2 Proceso de aplicacin de EM y toma de muestras. A) Aplicacin de dosis

especficas de EM a las UEs seleccionadas aleatoriamente como tratamientos.
B) Homogenizacin del ARD posterior a la aplicacin de EM y C) Toma de muestras en
cada uno de los puertos de muestreo
27
5.9. Anlisis estadstico
Inicialmente, se realiz la estadstica descriptiva de los datos obtenidos (Anexo B).

Posteriormente, mediante grficas para la deteccin de valores extremos (outlayer) se
identificaron estos para cada una de las variables (Anexo C).
La distribucin de los datos se evalu mediante los anlisis Shapiro-Wilks (p<0,05),

Kolmogorov-Smirnov (p<0,05) y grficas Q-Q (Anexo D) empleando el paquete
estadstico Statistics 4.0. Los datos iniciales fueron transformados con Log 10 y debido a
que no presentaron distribucin normal, se emplearon pruebas no paramtricas para
todos los anlisis.
Para establecer si existan diferencias significativas entre las profundidades 20 y 40 cm,

se realiz la prueba LSD (p<0,05), teniendo en cuenta todos los parmetros para todos
los tratamientos en todos los tiempos (Anexo E).
Para evaluar el efecto de la aplicacin de EM en el ARD, as como para establecer

entre qu eventos de muestreo y entre cuales tratamientos en cada evento de muestreo
existan diferencias estadsticamente significativas se realiz la prueba de comparacin
mltiple LSD entre tratamientos (Anexo F), y entre das (Anexo G) con el paquete
estadstico SAS 9.1.
As mismo se efectu un anlisis estadstico con Chi-Cuadrado (Anexo H) para

determinar si exista o no independencia entre el tiempo y los tratamientos, buscando
saber si tal relacin explicaba el comportamiento presentado por los datos obtenidos.
A partir de los datos originales (Anexo I) Finalmente, se efectu un anlisis de

componentes principales (ACP) para determinar la relacin entre las variables
estudiadas y su influencia sobre la calidad del agua para el caso del estudio.
28
6. RESULTADOS Y DISCUSIN
6.1. Verificacin de algunas de las tcnicas analticas empleadas
Se entiende por verificacin de una tcnica analtica, el proceso por el cual se evala
esta, en trminos de su comportamiento frente a un determinado tipo de muestra y un
analista bajo condiciones controladas. Se estableci si los datos obtenidos se
encontraban dentro del porcentaje de error (<10%) y el coeficiente de variacin que
permite cada tcnica ( 5 unidades) (Tabla 13).
Todas las tcnicas analticas evaluadas lograron ser verificadas, excepto nitritos, amonio
y sulfatos. Para las tcnicas de nitrito y amonio se obtuvieron valores de %CV y
desviacin estndar (s), superiores a los reportados por las tcnicas. Es decir, que para
las condiciones en que se realiz la verificacin, estas dos tcnicas no fueron precisas y
por lo tanto no se pudo evaluar su exactitud. Estos resultados pueden deberse, a
interferencias causadas por la inestabilidad propia de estas especies qumicas, las
cuales se interconvierten a otras ms estables como nitratos (APHA, 2005).
Para el caso de los sulfatos, el % de error obtenido fue del 12,32%, mientras que los
valores de %CV y (s) estuvieron dentro del rango aceptable, indicando que para las
condiciones de la validacin esta tcnica fue precisa mas no exacta. Lo anterior, puede
considerarse como una consecuencia de la tcnica para cuantificar sulfatos, en la cual,
factores como los tiempos de reaccin y agitacin influyen en los resultados obtenidos,
debido a que se generan amplias variaciones entre los valores de las repeticiones
realizadas a una misma muestra en periodos cortos de tiempo.
Adicional a lo anterior, es importante resaltar que los anlisis para estas tcnicas fueron
realizados el mismo da. Esto implica que los datos obtenidos estn influenciados por el
da de preparacin, lo cul puede ser tomado como un sesgo en la informacin obtenida,
es decir, se prob la repetibilidad de la tcnica ms no su reproducibilidad.
29
Tabla 13. Precisin y exactitud obtenidos durante la verificacin de las tcnicas
analticas empleadas
Estndar Precisin Exactitud
Tcnica empleado
(mg/L) S %CV % Error
DQO 500 12,11 2,5 0,33

DBO5 198 18,14 0,04 10,00
ST 250 2,93 1,2 1,26
-
NO3 9 0,09 1,0 5,72
-
NO2 * 5 3,46 7,3 7,80
+
NH4 * 15 1,07 7,0 0,93
PO4-3 1 0,04 3,9 3,33
-2
SO4 * 20 1,39 6,2 12,32
2-
S 20 0,32 1,5 7,33
*: Tcnica no verificadas; s: desviacin estndar; %CV: porcentaje de coeficiente de

variacin; % error: porcentaje de error.
6.2. Caracterizacin inicial del agua residual domstica
La caracterizacin inicial del ARD permiti determinar las concentraciones en las cuales
se encontraban tanto los microorganismos como los parmetros fisicoqumicos
evaluados durante el estudio. Con base en esto fue posible seleccionar las diluciones y
rangos que se emplearon para su cuantificacin.
De igual forma, teniendo en cuenta el conjunto de los valores de los parmetros se

estableci que el ARD a tratar presentaba una concentracin entre moderada y alta de
contaminantes (Tabla 14 y tabla 15), de acuerdo con Metcalf y Eddy (2003).
6.2.1. Parmetros microbiolgicos
Los coliformes totales y fecales, son parmetros microbiolgicos relacionados con la

calidad del agua. Los recuentos obtenidos para estos microorganismos se encontraron
en concentraciones bajas (104) para un AR, segn la clasificacin de Metcalf y Eddy
(2003).
Los anlisis microbiolgicos que se realizaron inicialmente al ARD, indicaron la presencia

de microorganismos que pueden ser encontrados en EM. Esto puede ser atribuido a
que el ARD del pozo sptico del vivero que Fundases deseaba reutilizar, ya haba sido
tratada con estos microorganismos dos meses antes de la toma de muestra, y
probablemente, las condiciones del pozo permitieron su permanencia, y adems, las
30
levaduras y los lactobacilos pueden estar presentes como parte de la carga microbiana
normal de un ARD (Tabla 14)
Tabla 14. Caracterizacin microbiolgica inicial del ARD del pozo sptico del vivero
Coraflor
Microorganismos Recuento (UFC/mL)
Lactobacilos 1.0 x 104 1.7

4
Fototrficas 7.0 x 10 2.7
Levaduras 1.0 x 102 1.2

6
Hetertrofos 1.7 x 10 2.6
Coliformes totales 2.6 x 104 9.8

3
Coliformes fecales 3.0 x 10 7.0
Al comparar los valores obtenidos (Tabla 15) con los reportados por Metcalf y Eddy
(2003), se obtuvo que en relacin con los slidos totales y los sulfatos las
concentraciones pueden ser consideradas como bajas; los valores de DBO5 y amonio se
encuentran en el AR en concentraciones moderadas, mientras que la DQO se encuentra
en altas concentraciones, al igual que los nutrientes: fosfatos, nitratos y nitritos.
6.3. Distribucin de los datos obtenidos
Las grficas de puntos extremos permitieron observar que las variables demanda
biolgica de oxgeno (DBO5), slidos totales (ST), nitritos (NO2-), levaduras, lactobacilos,
coliformes totales (CT), coliformes fecales (CF) y hetertrofos presentaron algunos
valores que pueden ser considerados como extremos (Anexo C). Estos datos pueden
presentarse como parte normal del trabajo experimental y analtico por diferentes causas
dentro de las que se incluyen desde los materiales (por ejemplo, presencia de residuos
slidos, jabn u otros reactivos, etc), errores analticos e incluso la incertidumbre propia
de cada tcnica de anlisis (Puerto, 2007). La incertidumbre es causada por muchos
factores durante el anlisis, como ejemplo, se encuentran el sistema de muestreo, los
efectos de la matriz, las interferencias, las condiciones ambientales, el equipo de medida
empleado, etc, y cada uno de ellos aporta un componente a la incertidumbre total (Steel
y Torrie, 1988).
31
Tabla 15. Caracterizacin fisicoqumica inicial del ARD del pozo sptico del vivero
Coraflor
Parmetros fisicoqumicos Concentracin
DQO 663,33 5,00
DBO5 293,3 17,4
ST 11,12 3,00
-
NO3 5,65 0,10
-
NO2 0,09 5,20
NH4+ 26,35 2,00

-3
PO4 21,47 1,00
SO4-2 2,1 3,0
S2- 6,7 0,5
OD 0,12 0,02
pH 7,08 0,10
Temperatura 19 2C
*Todos los parmetros se expresan en mg/L a menos que se especifique lo contrario.
6.4. Evaluacin del efecto de la profundidad
En las columnas de acrlico asignadas a los tratamientos para el seguimiento fotogrfico

se observ una clara diferencia entre el fondo y la superficie con respecto a la
sedimentacin de los slidos, que no se observ en la columna correspondiente al
control (Figura 3) No se observaron diferencias significativas entre las profundidades
evaluadas (20 y 40 cm medidos desde el fondo hacia la parte superior), para ninguno de
los parmetros y en ninguno de los tiempos de muestreo en los diferentes tratamientos y
controles (Anexo D). Esto pudo deberse a que bajo las condiciones del estudio, la
distancia entre las alturas evaluadas no fue lo suficientemente amplia como para
determinar diferencias significativas causadas por la profundidad al ser aplicado EM.
As mismo, se consider que los resultados pudieron estar estrechamente relacionados,
entre otros factores, con el tamao de las UEs, dado que el volumen del ARD en ellas
era poco y se present una gran cantidad de sedimentos, reduciendo probablemente las
concentraciones de oxgeno disuelto (OD).
Las concentraciones de OD, en sistemas de lagunas y en el sistema de UEs empleado

en el presente estudio, se espera, varen con la profundidad, entre dos puntos diferentes,
32
y particularmente de un da a otro (Hargreaves y Tucker, 2002). Sin embargo, a pesar de
que las profundidades evaluadas no se encontraban muy alejadas de la superficie (30
cm), la concentracin de oxgeno en el agua era baja y se hizo mucho menor debido a la
actividad heterotrfica aerobia de los microorganismos en presencia de sustratos
orgnicos abundantes (Atlas y Bartha, 1998). As mismo, fue posible observar sobre la
superficie de los tanques, como a causa de los nutrientes liberados de la materia
orgnica degradada se favoreci el crecimiento de algas (Figura 3), limitando an ms,
la entrada de oxgeno al sistema.
Figura 3 Floraciones de algas observado sobre la superficie de las UEs
Al comparar las mediciones de OD de las dos profundidades evaluadas, frente a las

reportadas por otros estudios como los de Hargreaves y Tucker (2002) y Abbassi y
col..., (1999), en la mayora de los casos en los que se presentan diferencias de OD
entre profundidades en los sistemas de tratamiento, se debi a que uno de los puntos de
medicin, fue la superficie que est en contacto inmediato con la atmsfera, versus
diferentes profundidades (Hargreaves y Tucker, 2002). Para el caso de los tratamientos
de EM, evaluados en este estudio, las dos profundidades presentaron bajas
concentraciones de oxgeno disuelto (ver numeral 6.4)
Debido a que no se observaron diferencias significativas en las profundidades para

ningn parmetro fisicoqumico o microbiolgico en las UEs, se tom la decisin de
emplear los 6 datos obtenidos como repeticiones de cada tratamiento o control, para el
anlisis de los parmetros a evaluar durante el estudio. El mayor tamao de muestra en
cada UE permitira determinar el efecto de las diferentes concentraciones y es ms
significativo tanto estadstica como cientficamente (Lenth, 2001).
33
6.5. Seguimiento de los parmetros fisicoqumicos y microbiolgicos y
evaluacin de las diferentes dosis de EM
6.5.1. Parmetros microbiolgicos
Los parmetros microbiolgicos evaluados durante el estudio estuvieron enfocados en el

monitoreo en el tiempo, del comportamiento de las poblaciones tanto de los
microorganismos presentes en EM, como de grupos indicadores de contaminacin
fecal (coliformes totales y fecales) y degradadores de materia orgnica (hetertrofos
totales) (Figura 4).
Figura 4 Crecimiento en placa de los microorganismos evaluados durante el estudio.

A) Lactobacilos sembrados en medio MRS. B) Coliformes fecales (colonias moradas) y
totales (colonias restantes) sembrados en Chromocult. C) Levaduras sembradas en
medio Rosa de Bengala. D) Bacterias fototrficas sembradas en medio Van Neils
Microorganismos indicadores
En los monitoreos realizados durante el estudio, para las poblaciones de hetertrofos
totales, coliformes totales y coliformes fecales, se observaron recuentos similares a los
obtenidos en la caracterizacin inicial (107-109, 104-105, 102-103 UFC/mL,
respectivamente), puesto que el ARD present un gran contenido de materia orgnica y
microorganismos degradadores dentro de los cuales una proporcin considerable son de
origen fecal (Atlas y Bartha, 1998).
No se observaron diferencias significativas de los tratamientos con respecto al control en

relacin a los recuentos de hetertrofos totales, coliformes totales y coliformes fecales
(Figura 5), en los eventos de muestreo entre el control y los tratamientos. Por lo tanto,
tras la aplicacin de EM al ARD, no se observ ningn efecto significativo del
tratamiento.
34
La densidad poblacional de los microorganismos hetertrofos reflej la tendencia general
de las densidades de las poblaciones microbianas que contribuyeron con la degradacin
de materia orgnica, por lo cual el comportamiento de los hetertrofos estuvo
potencialmente relacionado con los dems grupos microbianos evaluados en el estudio.
35
Figura 5 Comparacin de los valores medios obtenidos ( s) para A) hetertrofos
totales, B) coliformes totales y C) coliformes fecales teniendo en cuenta los das de
anlisis y los tratamientos aplicados (n=6).
Diferente letra mayscula indica diferencias significativas (p <0,05), dentro de cada
evento de muestreo. Diferente letra minscula indica diferencias significativas (p <0,05),
para cada tratamiento durante el estudio
Entre los das 10 y 30 del estudio las densidades poblacionales de hetertrofos no
mostraron cambios significativos, mientras que para el final del estudio (45 d), se
evidenci un descenso significativo, probablemente debido a que para este da, la
mayora de las densidades poblacionales disminuyeron, debido a que disminuy la
concentracin de OD y as mismo disminuy la materia orgnica repercutiendo en el
comportamiento de los hetertrofos. Los recuentos de hetertrofos pueden enmascarar
la alta variabilidad presentada en los recuentos de cada grupo de microorganismos
monitoreado, como el observado en los recuentos tanto de coliformes totales como
fecales.
Las densidades poblacionales de coliformes totales disminuyeron en el tiempo,

presentndose un descenso significativo de todos los recuentos en el da 45 (3.20
0.94) con respecto al da 30 (3.50 0.70), se observ un descenso significativo en el da
10 de los tratamientos 1/3000 y 1/10000, con respecto al control mientras que con
respecto al tratamiento 1/5000 no se presentaron diferencias, no se volvieron a observar
diferencias significativas para ningn otro evento de muestreo. El comportamiento
observado para el da 10, coincide con la disminucin de coliformes esperada tras la
aplicacin de EM, de acuerdo a lo observado en estudios previos (Early 1998; Mlikota
et al., 2004; Roldan y col., 2007). Sin embargo, estas diferencias se observaron
nicamente al da 10 del estudio.
36
La tendencia de las densidades poblacionales de coliformes totales y fecales, fue similar,
presentndose en todos los casos recuentos mayores para los coliformes totales, debido
a que stos incluyen a los coliformes fecales. Para los recuentos de coliformes fecales,
se observ una disminucin significativa de las densidades poblacionales de los
coliformes fecales en el da 45 con respecto al da 30, pero sin presentarse ninguna
diferencia significativa de las densidades poblacionales de los tratamientos con respecto
al control, a excepcin del da 10.
Las poblaciones de indicadores de contaminacin fecal fueron monitoreadas ya que en

el estudio realizado por Roldan y col..., (2007), en el cual se evalu durante 60 d el
efecto de la aplicacin de EM (1/3000 v/v) sobre ARD y aguas residuales sintticas
(ARS) en UEs de 3 L, se obtuvo una reduccin significativa en los recuentos de
coliformes totales en ambos casos hacia el da 30 del estudio. Este comportamiento se
explic teniendo en cuenta lo reportado por Early (1998) y Mlikota y col., (2004) quienes
afirmaron que metabolitos producidos por los microorganismos presentes en el EM
como cidos, etanol y bacteriocinas, inhiben las poblaciones de patgenos de origen
fecal cuyo se encuentran en contacto con estos microorganismos, posiblemente debido
que bajan el pH del medio y/o limitan su crecimiento desestabilizando el transporte a
travs de la membrana al bloquear receptores o generar cambios en el equilibrio inico.
Sin embargo Roldn y col. (2007), reportan que no se observan diferencias significativas
para los otros parmetros con la presencia de EM.
En la literatura generalmente se hace referencia a la densidad de coliformes fecales en

el ARD y muy poco a la densidad de coliformes totales. Esto se debe a que los
coliformes fecales y E. coli en particular, reflejan mejor la contaminacin fecal debido a
su relacin con el grupo tifoide-paratifoide y a su alta concentracin en diferentes tipos
de muestras (Madigan et al, 1997). En el presente estudio, los valores obtenidos al final
(45 d) para coliformes fecales (> 10 x 102 UFC/mL), ocasionan que agua no pueda ser
empleada ni siquiera para irrigacin de reas cuyo acceso al pblico es infrecuente y
controlado como campos de golf y cementerios (< 200/100ml) y por lo tanto tampoco
para cultivos de alimentos (ND/100ml) (EPA, 2003)
Microorganismos del EM
Para el caso de los microorganismos del EM, en general, no se observaron diferencias
significativas entre las densidades poblacionales presentadas por los tratamientos y el
control. Se observ que las levaduras y lactobacilos disminuyeron significativamente en
el tiempo, mientras que las bacterias fototrficas aumentaron significativamente en los
tratamientos y el control. Solamente se observaron diferencias significativas entre los
37
tratamientos y el control en la densidad poblacional de las levaduras hacia el final del
estudio (30 y 45d) (Figura 6).
La disminucin de las poblaciones de levaduras y lactobacilos puede indicar que factores

como el descenso del OD y el aumento de la DBO5, as como la competencia normal que
se presenta entre los microorganismos alctonos con los autctonos (Atlas y Bartha,
1998), probablemente influenciaron de forma negativa a estos microorganismos. A pesar
que los recuentos disminuyeron en el tiempo, se observ, en el caso de las levaduras,
que en los tratamientos los recuentos fueron significativamente mayores con respecto a
los presentados por los controles, esto se debi probablemente, a la aplicacin de EM.
Atlas y Bartha (1998), afirman que las poblaciones de densidad intermedia, como la
alcanzada por las levaduras en los tratamientos a partir del da 30, tienen generalmente
ms xito en la colonizacin de nuevos hbitat naturales que los organismos individuales
o de bajas densidades poblacionales como en el caso del control.
38
Figura 6 Comparacin de los valores medios obtenidos ( s) para A) Levaduras, B)
Lactobacilos y C) bacterias fototrficas teniendo en cuenta los das de anlisis y los
tratamientos aplicados. (n=6).
evento de muestro. Diferente letra minscula indica diferencias significativas (p <0,05),
en cada uno de los tratamientos en el tiempo
39
En los tratamientos se observ una densidad poblacional significativamente mayor de
levaduras, por lo tanto, pudo suceder que, como en el caso de poblaciones de mediana
y alta densidad, existiera cooperacin para contrarrestar la prdida de intermediarios
metablicos de bajo peso molecular esenciales para la biosntesis y el crecimiento, que
la membrana celular deja escapar, as como para facilitar su reabsorcin (Atlas y Bartha,
1998), mientras que para poblaciones de baja densidad, como en el caso del control, las
prdidas pudieron sobrepasar la velocidad de sntesis e impedir el crecimiento (Atlas y
Bartha, 1998).
A pesar de que en otros estudios como el de Fioravantii y col., (2005), en donde se

agreg EM diariamente, se observ la permanencia de los microorganismos del EM a
travs del tiempo, esto no pudo observarse en el presente estudio. Las poblaciones de
lactobacilos presentaron una tendencia a disminuir en el tiempo, para todos los casos,
esto pudo deberse a que, al aplicar la presentacin lquida de EM, el sustrato, rico en
sustancias carbonadas, pudo ser utilizado tanto por los microorganismos del EM, como
por los microorganismos presentes en el ARD (autctonos y oportunistas), los cuales se
caracterizan por tener tiempos de duplicacin cortos y emplear de forma muy eficiente
los compuestos orgnicos, presentes en el medio, colonizando fcilmente nuevos hbitat
(Atlas y Bartha, 1998). Es as, como al encontrarse en un sustrato rico en materia
orgnica, evidenciado en un aumento de la DBO5 tras la adicin de EM, los
microorganismos oportunistas con altas densidades, resistentes a ambientes adversos,
como en el caso de los coliformes (Haslinger, 2005), tendran ventajas competitivas
frente a las levaduras y los lactobacillos presentes en el EM, haciendo que sus
poblaciones disminuyan (30 d).
Adems, el antagonismo de tipo amensalismo, que se esperaba presentaran los

lactobacilos para eliminar los coliformes en el ARD, requerira de altas concentraciones
del metabolito difusible (cido lctico) as como un considerable tiempo de contacto con
el patgeno para ser efectivo (Atlas y Bartha, 1998). Razones por las cuales, no se
gener durante el estudio este tipo de inhibicin, ya que pudo presentarse una baja
produccin de sustancias difusibles, como el cido lctico, o estas pudieron diluirse en el
agua, disminuyendo su eficacia. Lo anterior pudo relacionarse con los valores de pH que
permanecieron de tendencia neutral cercana a la alcalinidad, sin que se alcanzaran
valores tan bajos como pH 4.4, el cual elimina las poblaciones entricas (Atlas y Bartha,
1998; Fioravantti et al, 2005).
Para el caso de las bacterias fototrficas no se observaron diferencias significativas entre

los tratamientos y el control en ninguno de los eventos de muestreo, pero se observ un
40
aumento significativo de la densidad poblacional de estos microorganismos al final del
estudio (45 d) con respecto a la densidad poblacional inicial (0 d), para todos los
tratamientos.
Los resultados obtenidos de las densidades poblacionales de bacterias fototrficas en

las ARD tratadas y no tratadas se explica con base a la capacidad metablica que
presentan estos microorganismos (ACARA, 2006), puesto que en concentraciones bajas
de oxgeno y en presencia de luz presentan un metabolismo fotoauttrofo y
fotohetertrofo, mientras que en aerobiosis y oscuridad, se comportan
quimioheterotrficamente empleando un amplio rango de compuestos orgnicos como
fuente de carbono, entre los cuales se encuentran cidos orgnicos, que se relacionan
con los malos olores presentados en las ARD (Kyum et al, 2004). As mismo, estudios
reportados por Honda y col. (2006), en donde se optimiza el crecimiento de estos
microorganismos bajo condiciones de anaerobiosis para el tratamiento de AR, permiten
considerar que posiblemente las poblaciones de estos microorganismos pudieron
adaptarse de forma exitosa a las condiciones que presentan las ARD estudiadas
empleando su metabolismo de forma heterotrfica.
Adicional a lo anterior, dentro de la versatilidad del metabolismo de estos

microorganismos, se encuentra la capacidad de emplear sulfuro como donador de
electrones (Novak et al, 2004), lo cual se relaciona con la disminucin en la
concentracin de esta sustancia observada en los resultados del presente estudio que se
presentarn a continuacin.
pH
Uno de los parmetros con mayor influencia sobre los dems parmetros evaluados en
este estudio, fue el pH. Durante el tiempo de monitoreo, el pH se mantuvo relativamente
constante presentyo valores cercanos a la neutralidad con tendencia a la alcalinidad.
Se observaron diferencias significativas de este parmetro en el tiempo, ms no entre los
tratamientos y el control en los eventos de muestreo. Inicialmente, se present una
disminucin significativa en los valores de este parmetro, pasyo de un promedio de 7.6
0.11 a 6.9 0.17 en todos los tratamientos (10 d), para luego darse un incremento
significativo hasta 7.4 ( 0.16) (30 d). Los valores obtenidos al final del estudio (45 d), no
fueron significativamente diferentes con respecto a los iniciales para los tratamientos, ni
el control (Figura 7). Por lo tanto no se observ un efecto de la aplicacin de EM sobre
este parmetro.
41
La tendencia hacia la neutralidad del pH obtenido en este estudio, no coincidi con lo
esterado, es decir la disminucin en los valores de este parmetro. A diferencia de los
reportado por Fioravanti (2005), quien evalu EM como estabilizador de AR y lodos
spticos y en cuyo trabajo se present una disminucin en el pH de 6.3 a 4.5, eliminando
el 99% de los coliformes fecales y totales, el pH que se alcanz en el presente estudio,
(alrededor de 7) no afect el crecimiento de E. coli y otros microorganismos fecales
puesto que el pH ptimo de los contaminantes fecales se presenta entre 6-7 y un mnimo
de 4.4 (Atlas y Bartha, 2001).
Figura 7 Comparacin de los valores medios obtenidos ( s) para pH, teniendo en

cuenta los das de anlisis y los tratamientos aplicados (n=6)
Diferente letra mayscula indica diferencias significativas (p <0,05) para el parmetro,
dentro de cada evento de muestro. Diferente letra minscula indica diferencias
significativas (p <0,05), en cada uno de los tratamientos en el tiempo
.
Las condiciones del estudio de Fioravanti (2005), as como la composicin del ARD
fueron diferentes a las del presente estudio, dado que el resultado en cuanto a la
disminucin del pH, y de coliformes fecales y totales esta estrechamente relacionado con
el hecho de que los lodos y AR se haban tratado con anterioridad, agregyo 1/10 v/v de
EM todos los das durante dos semanas. Adems, los tanques empleados para el
experimento fueron de 1.20 x 1.30 m (Fioravanti, 2005), lo que permita una distribucin
ms homognea de los lodos debido a un rea ms amplia, mientras que las UEs
utilizadas en este estudio presentaban una forma que daba diferentes condiciones al
42
ARD a tratar. Adicional a esto, Fioravanti (2005) solo emple dos tanques: uno para el
tratamiento y otro para el control, es decir una UE, lo cual no es estadsticamente
significativo, por lo tanto, aunque en sus resultados disminuyen los recuentos de
coliformes, no hay forma de estimar la variabilidad natural o error aleatorio y esto dificulta
la construccin de estadsticas realistas en los anlisis de datos (Gutierrez et al., 2004).
En el trabajo realizado por Roldan y col. (2007), los valores de pH no presentaron

diferencias estadsticamente significativas, a pesar de que como se mencion
anteriormente, los coliformes totales disminuyeron sus poblaciones. Sin embargo, los
tamaos de UEs eran muy inferiores a los empleados en el presente estudio, impidiendo
una dilucin alta de las sustancias difusibles en el agua.
Parmetros relacionados con el comportamiento del oxgeno

Al hacer referencia a los parmetros cuantificados que presentan relacin con el
comportamiento del oxgeno durante el estudio (Figura 8), fue posible observar que las
concentraciones de OD disminuyeron en el tiempo, tanto para el control como para los
tres tratamientos, existiendo diferencias significativas entre los das de estudio, ms no
entre el control y los diferentes tratamientos en cada evento de muestreo.
Con respecto al comportamiento de la demanda biolgica de oxgeno (DBO5), esta se

encontr, en general, relacionada con la adicin de EM. Para este parmetro no se
presentaron diferencias significativas entre los tratamientos, pero si entre estos y el
control, pues este (control) present para todos los das de estudio (excepto 10 d), una
concentracin menor que los tratamientos. En tanto que la demanda qumica de oxgeno
(DQO), mostr un comportamiento relacionado directamente con el de DBO 5 a partir del
da 30 con una tendencia a disminuir, en todos los casos, observndose siempre la
menor concentracin en el control.
Las concentraciones de OD presentadas al inicio del estudio oscilaron entre 1.6 2.0
mg/L O2, valores considerados bajos, si se tiene en cuenta que los niveles de OD
tpicamente pueden variar de 0 - 8 mg/L O2, siendo requerido un mnimo aproximado de
5 - 6 mg /L O2 para soportar una diversidad de vida acutica (APHA, 2005). Al tener
estos valores bajos e incrementarse la demanda de este elemento tanto DBO5 como
DQO se vieron influenciados debido a que estos dos parmetros son medidas indirectas
del oxgeno necesario para degradar la materia inorgnica y orgnica presente en un AR
(Metcalf y Eddy, 2003)
43
Figura 8 Comparacin de los valores medios obtenidos ( s) para A) oxgeno disuelto
(OD), B) demanda biolgica de oxgeno (DBO5) y C) demanda qumica de oxgeno
(DQO), teniendo en cuenta los das de anlisis y los tratamientos aplicados (n=6).
evento de muestro. Diferente letra minscula indica diferencias significativas (p <0,05) en
cada uno de los tratamientos en el tiempo.
44
Al contrario de la DBO5, la DQO no se vio afectada por la adicin de EM, pues se
observ una disminucin en este parmetro para todos los tratamientos, durante todo el
tiempo de estudio, aunque como en DBO5 el menor valor corresponde al control sin ser
significativamente diferente. Sin embargo, la dispersin presentada por los diferentes
tratamientos desde la mitad hasta el final del estudio (30 y 45 d) fue muy alta ( 294.2 y
411.9 mgO2/ml respectivamente), lo que no permiti observar cambios significativos.
Al inicio del estudio, los incrementos en DBO5 de los tratamientos fueron similares entre
si, debido a que la dosis de EM fue la misma (1/1000) para todos los tratamientos. A
pesar de que se present un aumento significativo de la DBO5 en los tratamientos para el
segundo da de muestreo (10 d), el cual se relacion con la adicin de EM cuyo
sustrato est constituido en gran parte de melaza y otros sustratos orgnicos que
incrementan el valor de este parmetro, sin embargo, el control tambin present un
aumento significativo que no es justificable, pues a este no se le adicion ningn tipo de
sustrato orgnico con el cual se pueda relacionar este aumento. Teniendo en cuenta lo
anterior, es posible que el aumento de la DBO5 no se debiera del todo a la aplicacin de
EM sino al proceso normal de degradacin de materia orgnica, el cual requiere de
oxgeno para ser llevada a cabo.
Para el da 30, luego de las dosificaciones respectivas (1/3000, 1/5000 y 1/10000) de

EM, menores que la dosis aplicadas inicialmente (10 d), se observ una disminucin en
la DBO5, relacionada con la dosis suministrada. Es por esto que el menor valor fue del
control seguido por el tratamiento al que se le adicion la menor cantidad de EM;
aunque no se presentan diferencias significativas entre los tres tratamientos, debido a la
gran desviacin observada ( 102,96 mgO2/ml). Posteriormente, los tratamientos 1/3000
y 1/5000, mostraron, como era de esperarse, valores de DBO5 significativamente
mayores que el tratamiento 1/10000 (30 d).
La tendencia a disminuir se mantuvo hasta el final del estudio para todos los casos (45
d), ya que en ese momento se haba dejado de adicionar EM a los tratamientos y lo
que se observ fue la degradacin de los sustratos presentes debido a la actividad
metablica de los microorganismos.
A pesar de las disminucin en la DBO5 durante el estudio, hasta alcanzar valores de 49,8
mg/L ( 16.9 mgO2/ml), la EPA exige para el reuso del ARD valores menores a 30mg/L,
para este parmetro, los cuales no fueron alcanzados empleyo la aplicacin de EM, en
ninguno de los tratamientos.
Los resultados obtenidos coinciden con lo reportado, ya que a medida que se van agotyo
los compuestos de fcil degradacin (valores dados por la medida de la DBO5), y los
45
microorganismos empiezan a consumir otras sustancias ms complejas, llega cierto
punto en el cual los microorganismos presentes no cuentan con las enzimas o los
nutrientes requeridos para continuar con el proceso (Atlas y Bartha, 1998), que permita
la disminucin de la DQO, lo anterior, sumado a al falta de oxgeno, limita claramente la
degradacin, como se observ en el comportamiento similar de los valores de los das
30 y 45 en donde no hay un cambio significativo para la DQO por la presencia de
compuestos, cuya estructura qumica compleja, no permite su fcil degradacin (Ngurah
et al., 2005).
En general, los valores presentados para DQO fueron mayores a los observados para la
DBO5, esto debido a que por este mtodo se oxidan tambin las sustancias no
biodegradables, por lo tanto, la relacin entre los dos parmetros es indicativo de la
calidad del agua. Se considera que valores de DQO/DBO > 2 indican alta cantidad de
material de difcil degradacin (IDEAM, 2001). Para el caso de los resultados obtenidos,
se encontr que las relaciones DQO/DBO oscilaron entre 2 (10 y 30 d) y 15 (45 d). Lo
anterior sugiere la presencia de compuestos altamente recalcitrantes, probablemente,
pesticidas, en el ARD a tratar (Scheuring et al, 2006).
Resultados similares a los obtenidos, han sido reportados por Shelton (1991), en donde
se observ un incremento de la DBO5, debido a la adicin de EM, por la gran cantidad
de carbohidratos que contiene el medio de mantenimiento de EM, mientras que los
cambios con respecto a DQO no fueron tan notorios; de igual forma, a medida que la
materia orgnica fue consumida, los niveles de DBO5 comenzaron a disminuir (Shelton,
1991), como se observ en este caso. As mismo en el trabajo de Roldn y col. (2007), la
presencia de EM en el ARD y ARS ocasion aumentos significativos para el parmetro
DBO5.
En general, los cambios del OD observados durante el estudio se deben a la dinmica

presentada por el oxgeno, la cual resulta de la interaccin de tres factores: solubilidad
limitada, rpido consumo y bajas tasas de reemplazo, causyo agotamiento de este
elemento en el agua (Hargreaves y Tucker, 2002). Por lo tanto, se pudo observar que el
exceso de nutrientes evaluado, (como fsforo y nitrgeno) sumado al metabolismo
microbiano presentado en el ARD tuvo como consecuencia la reduccin o agotamiento
en su contenido de OD, debido a una mayor demanda de DBO5. Una vez agotado el OD
los procesos de autopurificacin se hicieron drsticamente ms lentos dado que los
productos de fermentacin y el uso de aceptores de electrones, como el nitrato y el
sulfato, producen olores, sabores y colores desagradables y el agua se convierte en
anxica o sptica (Atlas y Bartha, 1998).
46
Compuestos nitrogenados:
Con relacin a los compuestos nitrogenados evaluados (Figura 9), se observaron
diferencias significativas en el tiempo para todos los casos. Aquellos compuestos
nitrogenados que se forman por reacciones de reduccin como el amonio presentaron
una tendencia a aumentar, mientras que los compuestos como el nitrato que son usados
como aceptores de electrones en condiciones de anaerobiosis y se forman por
oxidacin, tendieron a disminuir. Los valores obtenidos para los nitratos, mostraron una
alta dispersin, lo cual no permiti establecer diferencias significativas entre el control y
los tratamientos. Los compuestos intermedios como los nitritos permanecieron
constantes en el tiempo y mostraron concentraciones muy pequeas ocasionyo que la
precisin y la exactitud de la tcnica no fueran suficientes para determinar la
concentracin real.
En general, se observ para el nitrgeno, una relacin con las bajas concentraciones de
oxgeno presentes en el ARD empleada tras la adicin de EM, ya que la baja
disponibilidad de oxgeno limit los procesos aerbicos de transformaciones de
nitrgeno, como la nitrificacin, evidenciado por la disminucin en el tiempo de los
nitratos, mientras que favoreci procesos de reduccin como la desnitrificacin, en
donde se emplea el nitrato como aceptor de electrones causyo una disminucin en la
concentracin del mismo (Sawyer et al., 2000). Lo anterior se corrobor con los
resultados obtenidos para el OD, puesto que, se considera hipoxia, cuyo la
concentracin de OD en el agua, como las obtenidas en este estudio, son menores a
2 mg/L (EPA, 2003), por lo cual, se llevaron a cabo principalmente procesos de
denitrificacin.
Para el parmetro de nitratos solo se presentaron diferencias significativas entre los

tratamientos y el control, al inicio del estudio (control y 1/10000 significativamente
mayores que 1/3000 y1/5000) (Figura 9). Por lo tanto, aunque fue posible observar
diferencias significativas entre las concentraciones iniciales y finales, para todos los
tratamientos, estos cambios no pudieron ser atribuidos a la aplicacin de EM.
Por otro lado, se observ un aumento significativo del amonio (10 y 30 d), tanto en los
controles como en los tratamientos, lo cual estuvo directamente relacionado con las
reacciones de reduccin mencionadas anteriormente, permitiendo considerara el
proceso observado como de tipo desasimilatorio (Atlas y Bartha, 1998).
47
Figura 9 Comparacin de los valores medios obtenidos ( s) para A) amonio, B) niratos y
C) nitritos, teniendo en cuenta los das de anlisis y los tratamientos aplicados.
evento de muestro. Diferente letra minscula indica diferencias significativas (p <0,05) en
cada uno de los tratamientos en el tiempo.
48
La posterior disminucin significativa de amonio (45 d), para todos los casos, se puede
atribuir a diferentes factores como el hecho de que a partir de ese da se observ la
aparicin de algas en la superficie de las unidades experimentales que pudieron
emplearlo, junto con el nitrato como nutriente, disminuyendo sus concentraciones, es
decir, que para este da se hayan llevado a cabo, reducciones asimilatorias del nitrato en
donde se incorporan los compuestos nitrogenados, sin liberar un compuesto ms
reducido como resultado del metabolismo (Atlas y Bartha, 1998).
Desde el punto de vista qumico el nitrgeno puede existir en siete estados de oxidacin,
pero el N2O, el NO y el NO2-, tienen poca importancia ambiental al ser inestables y pasar
rpidamente de una especie a otra o ser relativamente inertes (vila y col, 2002);
probablemente a esto se debi que las reacciones de reduccin llevadas a cabo, no
estuvieran relacionadas con la produccin de nitritos, por lo cual, la tendencia de este
compuesto a bajos valores y de permanecer constante era esperada (Madigan et al.,
2001). Los nitritos, estos presentaron valores muy bajos (0,12 mg/L en promedio), por lo
cual, se pudieron presentar errores ms frecuentes en la medicin de la concentracin
de los mismos por la tcnica empleada. Estos errores se evidenciaron en la alta
variabilidad de los datos (0,12) razn por la cual, en este caso, no fue posible
determinar diferencias significativas entre los tratamientos y los controles y tampoco
diferencias significativas entre los das.
En general, se presentan diferencias significativas entre los das, en los diferentes

compuestos nitrogenados evaluados, consecuencia del metabolismo microbiano. Sin
embargo, no se observaron diferencias significativas entre el control y los tratamientos,
por lo cual, se establece que la aplicacin de EM, no tuvo un efecto para este
parmetro bajo las condiciones de este estudio.
No obstante a que la norma establecida por la EPA, 2004 no exige un valor especfico de
los parmetros nitratos y amonio en caso de que el ARD fuese a emplearse en riego,
teniendo en cuenta otras referencias, se observ que aunque los nitratos disminuyeron
significativamente durante el estudio, los valores que se presentaron para este
parmetro fueron siempre mayores a 0.3 mg/L, valor considerado como el mnimo que
puede causar eutroficacin en el agua (Tchobanogloues y Burtton, 1991). En la
clasificacin de Metcalf y Eddy (2003), un agua considerada de calidad baja debe tener 0
mg/L de nitratos. Con relacin al amonio, a pesar de que se observaron concentraciones
de amonio superiores a 50 mg/L (30 d) consideradas como altas, las presentadas al final
del estudio (45 d), se consideran como bajas bajo la misma clasificacin.
49
Fosfatos:
El comportamiento de los fosfatos fue constante en el tiempo y no se presentaron
diferencias significativas entere los tratamientos y el control ni en los das (exceptuyo 10
d). Por lo tanto, no se evidenci un efecto de EM sobre los fosfatos presentes en el
ARD tratada en ninguna de las diferentes dosis (Figura 10).
Figura 10 Comparacin de los valores medios obtenidos ( s) para fosfatos (PO4),

teniendo en cuenta los das de anlisis y los tratamientos aplicados. (n=6)
significativas (p <0,05), en cada uno de los tratamientos en el tiempo.
Las gryes cantidades de fosfatos presentes en las AR son una de las principales causas
de eutroficacin que afecta negativamente los cuerpo de agua. Por lo tanto, es necesario
que los tratamientos de AR eliminen fsforo antes de que estas sean vertidas a cuerpos
de agua (Pastor, 2006). Para la eliminacin de nutrientes, es necesario, un tratamiento
terciario o avanzado tales como la adicin de agentes precipitantes (cloruro frrico y
otras sales metlicas), la adicin de cal o el conjunto entre tratamientos biolgicos y
qumicos, debido a que la remocin de nutrientes es un proceso complejo. Es por esto
que la estrategia de emplear EM como nico tratamiento para la disminucin
significativa de este parmetro no result ser suficiente.
50
Segn la clasificacin de Metcalf y Eddy (2003), se considera un ARD con alta
concentracin de fsforo orgnico, aquella con ms de 5 mg/L, razn por la cual la
concentracin de fosfatos alcanzada al final del presente trabajo, que oscila alrededor de
13 mg/L, se considera alta. Sin embargo, las normas establecidas por la EPA en el 2004,
no especifican estndares para este compuesto, en caso de que el agua llegase a ser
empleada para riego.
Compuestos azufrados:
En lo que se refiere a los compuestos azufrados analizados, sulfuros y sulfatos (Figura
11), se pudo observar que, bajo las condiciones del estudio, para el caso de los sulfuros
fue posible observar una tendencia de los tratamientos a permanecer constantes,
durante los primeros muestreos (10 y 30 d), mientras que para el control se presentaron
-
concentraciones significativamente mayores, con sus valores ms altos (25.5 1.2 S2
mg/L) al da 30. Posteriormente se present una disminucin (45 d), en los valores del
control, aunque con concentraciones significativamente mayores con respecto a los
tratamientos, los cuales en su totalidad mostraron incrementos en las concentraciones.
Lo anterior, sugiriere que la aplicacin de EM, pudo tener un efecto significativo en
retardar la reduccin hasta sulfuros y por lo tanto en la generacin de malos olores.
En tanto, para los sulfatos existi una alta variabilidad durante todo el tiempo de estudio
en los datos obtenidos. Sin embargo, fue posible observar incrementos significativos en
las concentraciones de sulfatos en el ARD, tanto en los tratamientos como en el control
(10 y 30 d), aunque no fueron significativas entre los mismos tratamientos. Solo al final
del estudio (45 d) el tratamiento 1/5000 present diferencias significativamente mayores
con respecto al control y los otros dos tratamientos
El comportamiento de los sulfuros estuvo estrechamente relacionado con el presentado
por los sulfatos consideryo dicho comportamiento en el sistema de tratamiento de ARD
evaluado como de tendencia oxidativa. Lo cual es inesperado debido a las bajas
concentraciones de oxgeno que se presentaron durante el estudio.
Durante el presente estudio se present una variabilidad muy alta en los datos obtenidos
en la mayora de los casos, (en ocasiones el doble del promedio) como consecuencia de
una verificacin de la precisin para la tcnica de sulfatos poco exitosa, frente a lo cual
se tuvo especial cuidado al momento de generar la discusin basada en este parmetro.
Es por esta razn que se plantea la necesidad de realizar la evaluacin y validacin de
una tcnica alternativa para la cuantificacin de las concentraciones de sulfato, debido a
que la que se utiliz no permiti observar claramente el comportamiento de esta
variable.
51
Inicialmente, se esperaba que el comportamiento del azufre, estuviera relacionado con el
de las poblaciones de bacterias fototrficas, debido a que se ha reportado que remueven
el H2S (Garca, 2006), por lo cual se asuma que a mayores cantidades de bacterias
fototrficas, menores concentraciones de H2S. Sin embargo, como se observ (Figura
11), entre mayores fueron las concentraciones H2S en el agua, en la mayora de los
casos, tambin aumentaron las poblaciones de estos microorganismos, por lo cual se
consider que la tasa de produccin de sulfuro pudo ser mayor que su tasa de consumo.
Figura 11 Comparacin de los valores medios obtenidos ( s) para A) sulfuros y B)

sulfatos teniendo en cuenta los das de anlisis y los tratamientos aplicados (n=6).
52
Las bacterias como Rhodopseudomonas palustris, se consideraron por mucho tiempo
como bacterias rojas no del azufre, porque se crea que no podan usar H2S como
donador de electrones en la reduccin de CO2. No obstante, esta especie, entre otras,
puede crecer en presencia de este compuesto siempre y cuyo sus concentraciones se
mantengan relativamente bajas (Madigan et al., 2001). Teniendo en cuenta que se
consideran como bajas las concentraciones de sulfuro comprendidas entre el rango de
15-50 mg/L (Reyes, 2006), y la mxima concentracin de sulfuros presentada durante el
estudio fue de 25.5 1.2 mg/L, es posible afirmar que las concentraciones de sulfuros
durante el presente estudio permitieron el desarrollo de las bacterias fototrficas
presentes en el EM favoreciendo incluso su presencia de forma selectiva.
Es necesario tener en cuenta que, el comportamiento del azufre, es consecuencia del

conjunto de los metabolismos de todos los microorganismos y organismos presentes en
el ARD, y por lo tanto no se puede pretender explicar el comportamiento del azufre, en
su totalidad, con base nicamente en el comportamiento de las bacterias fototrficas. Ya
que la adicin de EM pudo favorecer el crecimiento de otras poblaciones microbianas
en los tratamientos, capaces de oxidar los sulfuros en condiciones anaerobias
(Kantachote et al., 2008), disminuyendo sus concentraciones, la ausencia de estos
microorganismos en los controles, explicaran el incremento significativo de sulfuros en el
control a partir de la mitad del estudio.
El proceso de remocin de H2S se puede dar por dos rutas: como donador de electrones
en la fotosntesis anoxignica y como donador en el metabolismo quimilitotrfico, y que
2-
en los dos casos el producto final es la oxidacin del azufre hasta SO4 (Madigan et al.,
2001), por lo cual estas dos variables suelen encontrarse muy relacionadas, como en el
caso del presente estudio. Estos compuestos mostraron comportamientos inversos,
observndose un incremento de los sulfatos (30 d) como resultado de la oxidacin de
sulfuros y posteriormente, un aumento de sulfuros y una disminucin de sulfatos para
todos los tratamientos (45 d); esto debido a que el mayor precursor de sulfuros
generalmente es el sulfato (EPA, 2003).
El comportamiento de los sulfuros hacia el final del estudio (45 d) se explica teniendo en
cuenta la baja concentracin de OD durante todo el estudio, que pudo favorecer
procesos reductores que no se haban presentado al principio, dadas las bajas
concentraciones iniciales de sulfato. Aunque el metabolismo oxidativo puede seguir
ocurriendo, este se hace menor a causa de la concentracin presente de cada uno de
los compuestos.
53
Slidos totales:
Finalmente, haciendo referencia al comportamiento de los slidos totales (ST) durante el
estudio, se observ que a pesar de haberse presentado diferencias significativamente
menores en el tiempo para los tratamientos y el control con respecto a las
concentraciones de ST, no se presentaron, en general, diferencias significativas entre el
control y los tratamientos (Figura 12). Por esta razn, se afirma que no existieron
diferencias significativas en cuanto a las concentraciones de ST, tras la aplicacin de
EM en el ARD tratada.
Figura 12 Comparacin de los valores medios obtenidos para slidos totales (ST),
teniendo en cuenta los das de anlisis y los tratamientos aplicados (n=6)
Teniendo en cuenta el conjunto de los datos para todos los parmetros, se observ que
en general, existi una mayor influencia del tiempo que de la aplicacin de EM
(tratamientos) en el comportamiento de los datos, ya que en la mayora de las variables
los tratamientos y el control presentan concentraciones estadsticamente iguales para un
mismo da, mientras que en varios parmetros, hay diferencias significativas entre las
concentraciones encontradas en los diferentes das de muestreo. Lo anterior se explica
debido a que existe independencia entre las variables da y tratamiento y al ser
independientes estas dos variables, en trminos generales, por lo cual no es posible que
una explique a la otra en un anlisis de covarianzas (Anexo H)
54
6.6 Relaciones obtenidas del anlisis de componentes principales
El anlisis de componentes principales (ACP) permiti analizar de forma resumida, la

gran cantidad de datos obtenidos durante el estudio, ya que consigui reducir las 18
variables iniciales a un menor nmero (dos variables) manteniendo la mayor cantidad de
informacin posible reunida en ellas. Los nuevos componentes principales, variables o
factores fueron una combinacin lineal de las variables originales, siendo adems
independientes entre s (Terryes, 2001).
Se obtuvieron varios factores, pero se slo seleccionaron dos, debido a que estos fueron
de contraste y lograron explicar el 44.46% de la variabilidad de los datos. A pesar de
que la variabilidad presentada en conjunto por los dos factores no fue muy alta (menor a
la 50%), si result til para explicar algunos de los comportamientos observados en
parmetros individuales.
Al observar los dos ejes resultantes (Figura 13), se determin que uno de ellos
corresponda al factor que explic el 18.20% de la variabilidad total de los datos (Eje y),
y el eje corresponda al segundo factor que explic el 26.26%.de variabilidad total (Eje x).
Cada vector dentro de la figura correspondi a cada uno de los parmetros evaluados.
Los vectores de los parmetros NO2, ST, hetertrofos, coliformes totales, coliformes
fecales y lactobacilos, los cuales mostraron la menor longitud, fueron dentro de los
parmetros evaluados, los que menos aportaron al estudio. Los parmetros
correspondientes a los vectores con mayor longitud, OD, DQO, DBO5, bacterias
fototroficas y sulfuros, fueron los ms influyentes y por tanto los que permitieron
disminuir el nmero de factores, ya que alrededor de estos se agruparon los otros
parmetros que no mostraron una gran influencia sobre la calidad del ARD empleada en
el presente estudio.
Los parmetros con vectores de menor longitud correspondieron a aquellos que no

mostraron diferencias significas en el tiempo, razn por la cual, para efectos de prximos
estudios pueden no ser incluidos, claro est, segn sea la pregunta de investigacin.
En tanto, los parmetros que presentaron variaciones en el tiempo coinciden con
aquellos de vectores ms largos y se consideraron como de gran relevancia para
identificar y analizar los efectos de la aplicacin de EM al ARD tratada.
Por otro lado, cuyo los vectores presentaron en direcciones opuestas entre si, pero con
un ngulo de 180 grados, esto indic que dichos factores tuvieron una correlacin
negativa pero alta, como en el caso de las bacterias fototrficas y OD, ya que, en las
condiciones del estudio, a medida que disminuyeron las concentraciones de oxgeno en
el agua, se presentaron incrementos en las poblaciones de estos microorganismos, lo
55
anterior se explica teniendo en cuenta que bajas tensiones de oxgeno favorecen el
desarrollo de las bacterias fototrficas y les da ventajas sobre otros microorganismos con
metabolismo areroflicos y microaeroflicos (Honda et al., 2006)
En los casos en que los vectores se encontraron en la misma direccin y muy cercanos,
esto se debi a que existi una correlacin positiva, como en el caso de los sulfuros y
las bacterias fototrficas, corroboryo lo expuesto anteriormente; mientras que cuyo los
vectores forman un ngulo de 90 grados no hay correlacin como ocurre entre los
sulfuros y pH, ya que a pesar de que el pH se mantuvo alrededor de valores constantes,
los sulfuros si variaron durante el tiempo.
Figura 13 Resultados obtenidos tras la realizacin del anlisis de componentes

principales (ACP).
56
7. CONCLUSIONES
No se observaron diferencias significativas en las concentraciones de ninguno de

parmetros en ninguno de los tiempos, entre el control y los tratamientos. Por lo cual se
concluy que no existi un efecto de la profundidad de la aplicacin de EM, bajo las
condiciones del presente estudio.
De igual forma, para la mayora de los parmetros evaluados, no se observaron

diferencias significativas entre el control y los tratamientos, a excepcin de la
disminucin significativa de S2- (30 y 45 d), coliformes fecales (10 d), as como recuentos
significativamente mayores en levaduras y mayor DBO5 (30 y 45 d) de los tratamientos
con respecto a los controles, mostryo un claro efecto positivo de la aplicacin de EM.
Para el conjunto de los parmetros analizados, fue posible observar que en general, en
el comportamiento de los datos influy ms tiempo, que los tratamientos, debido a que
entre las variables da y tratamiento existi independencia.
57
8. RECOMENDACIONES
Para implementar los microorganismos eficaces EM para tratamiento de aguas

residuales generadas en el vivero Coraflor, es aconsejable que esta sea, para as
sometida previamente a un tratamiento preliminar y/o primario como filtro de
arena o rejillas para as disminuir la cantidad de material que pueda obstruir el
resto del proceso
Es aconsejable emplear un sustrato que no aporte materia orgnica al agua

poroso para la colonizacin de los microorganismos, tal como polvo de ladrillo o
estropajo, entre otros.
Con el fin de obtener conclusiones ms certeras acerca del efecto de EM para

el tratamiento de ARD, el agua empleada para el estudio debe ser un ARD que
no haya sido tratada previamente con EM previamente.
Para que los resultados obtenidos sean confiables desde el punto de vista
analtico y estadstico, es aconsejable que las tcnicas empleadas para la
medicin de los parmetros fisicoqumicos y microbiolgicos deben estar
estyarizadas.
58
9. REFERENCIAS
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66
10. ANEXOS
ANEXO A
MEDIOS DE CULTIVO
R2A (Oxoid) (medio de cultivo para Hetertrofos totales)
El agar R2A es un medio con un bajo contenido de nutrientes, lo cual, en combinacin

con una baja temperatura y un largo tiempo de incubacin, permite que sea
especialmente empleado para recuperar bacterias tolerantes al cloro estresadas
presentes en el agua potable.
Este medio nutritivo se prepara conforme las recomendaciones del Styard Methods para
la evaluacin de agua.
Modo de accin
La baja concentracin de extracto de levadura, caseina hidrolizada, peptona y glucosa
permite un amplio espectro de bacterias de crecimiento lento sin suprimir a otros
microorganismos de rpido crecimiento; como puede ser el caso de otros medios ricos
en nutrientes como Plate Count. El contenido de almidn y piruvato permite que las
bacterias que han sufrido injuria crezcan ms rpido.
Composicin tpica (g/L)

Extracto de levadura 0.5; peptona proteosa 0.5; caseina hidrolizada 0.5; glucosa 0.5;
almidn soluble 0.5; piruvato de sodio 0.3; dipotasio hidrogeno fosfato 0.3; sulfato de
magnesio 0.05; agar-agar 12.0.
Preparacin
Suspender 15.2 g en un litro de agua destilada y calendar en bao mara hasta que se
disuelva completamente el medio. Autoclavar a 121C por 15 minutos. Enfriar de 45 a
50C y servor en cajas de Petri estriles.
pH : 7.2 0.2 a 25C.
Procedimiento experimental
La determinacin de recuento total usyo R2A puede ser llevado a cabo por el mtodo de
recuento en placa y el mtodo de filtracin por membrana. Si se incuba por ms de tres
das las cajas deben ser protegidas contra la deshidratacin.
67
Chromocult (Medio de cultivo para Coliformes )
Modo de accin
La interaccin de peptonas seleccionadas, piruvato, sorbitol y buffer fosfato, garantiza el
rpido crecimiento de las colonias, incluso para aquellos coliformes que han sufrido
injuria. El crecimiento de bacterias Gram positivas como el de algunas Gram negativas
es inhibido por el contenido de Tergitol 7, el cual no tiene efecto negativo en el
crecimiento de coliformes.
La combinacin de dos sustratos cromognicos detecta simultneamente Coliformes
totales y E. coli.
Identificacin de colifomes
La enzima caracterstica de los coliformes, D-galactosidasa emplea el sustrato Salmon-
GAL y causa un color salmn a rojo en las colonias de los coliformes.
Identificacin de E. coli
El sustrato X-glucuronido es usado para la identificacin de la enzima D-glucuronidasa,
la cual es caracterstica de E. coli
E. coli emplea los dos sutratos, Salmon-GAL y X-glucuronido, as que las colonias
positivas se tornan a azul oscuro o violeta. Esto las hace fcilmente distinguibles de otras
colonias de Coliformes. La inclusin de triptfano en el medio mejora la reaccin de
indol, mejoryo su deteccin en combinacin con la reaccin de Salmon-GAL y X-
glucuronido.
Composicin tpica (g/L).

Peptonas 3.0; cloruro de sodio 5.0; sodio dihidrogeno fosfato 2.2; di-sodio hidrogeno
fosfato 2.7; piruvato de sodio 1.0; triptfano 1.0; agar-agar 10.0; Sorbitol 1.0; Tergitol 7
0.15; mezcla cromognica 0.4.
Preparacin
Suspender 26.5 g en un litro de agua destilada calentyo en bao mara. Alguna turbidez
puede ocurrir, pero esta no afecta el crecimiento. Este medio no se debe autoclavar ni
sobrecalentar.
El pH debe estar entre 6.8 0.2 a 25 C
68
Procedimiento experimental y evaluacin
Inocular el medio por el mtodo de recuento en placa, siembra por superficie o tambin
puede usarse filtracin por membrana.
Incubacin: 24 horas a 35-37 C.
Identificacin
E.coli: Colonias azul oscuras a violetas (Reaccin Salmon-GAL y X-glucuronido).
Coliformes totales: Color salmon a rojo. (Reaccin Salmon-GAL).
Otros Gram-negativos: Incoloros, excepto por algunos organismos que poseen
actividad D-glucuronidasa. Estas colonias se observan azul claro a turquesa.
Agar MRS (medio de cultivo para Lactobacillus spp.)
Modo de accin
El medio MRS contiene polisorbato, acetato, magnesio y manganeso, los cuales son
conocidos como factores especiales de crecimiento de los Lactobacilos, as como una
base rica en nutrientes. Como este medio muestra un bajo grado de selectividad,
Pediococcus y Leuconostoc son otras especies secundarias que pueden crecer en el
medio.

Peptona de casena 10.0; extracto de carne 8.0; extracto de levadura 4.0; D(+)-glucosa
20.0; fosfato dipotasio de hdrogeno 2.0; Tween 80 1.0; citrato dipotsico de hidrgeno
2.0; acetato de sodio 5.0; sulfato de magnesio 0.2; sulfato de manganeso 0.04; agar-agar
14.0.
Preparacin
Suspender 66.2 g de Agar MRS en un litro de agua destilada, autoclavar (15 min a
118C). Ajustar pH a 5.7 0.2 a 25 C.
Rosa de Bengala (Medio de cultivo para hongos)
Modo de accin
El pH neutro en combinacin con el cloramfenicol suprime el crecimiento de la mayora
de las bacterias. El rosa de bengala es tomado intracelularmente por los hongos y
restringe el tamao de los mohos, previniendo el sobrecrecimiento o el crecimiento lento
de otras especies.
69
Peptona micolgica 5.0; glucosa 10.0; potasio fosfato dihidrgeno 1.0; sulfato de
magnsio 0.5; Rosa de Bengala 0.05; clloramfenicol 0.1; agar-agar 15.5.
pH 7.2 0.2 a 25 C.
Preparacin
Suspender 32.2g en 1 litro de agua destilada y calendar y revolver hasta la disolucin
completa. Autoclavar el medio a 121C por 15 minutos. Enfriar a 50C aproximadamente,
mezclar bien y servir en cajas de Petri. La apariencia del medio preparado es rosada o
rojiza.
Procedimiento experimental.
Inocular directamente en las cajas de Petri usyo la tcnica en superficie con diluciones
seriadas. Incubar a 25C por 5 das en la oscuridad.
Interpretacin de resultados
Contar el nmero de hongos y levaduras por un gramo de muestra.
Van Neils (Medio de cultivo para Rhodopseudomonas palustris)
Modo de accin
El extracto de levadura estimula el crecimiento de bacterias fototrficas al igual que los
dems componentes del medio, empleados como factores de crecimiento que permiten
la determinacin de Rhodopseudomonas Palustris. El medio es poco selectivo pues no
posee inhibidores y otras especies capaces de utilizar los sustratos presentes en el
medio de cultivo pueden crecer, mientras que la luz y la temperatura empleadas para su
incubacin, garantiza que desarrollen el color rosado caracterstico de sus colonias en
este medio

Extracto de levadura 10; Fosfato dipotasio de hidrogeno 1; Sulfato de maganesio
hexahidratado 0.5.
Soluciones complemento (mL/L)
Solucin de cisterna 3% 17 y Solucin de etanol 3% 60,
Preparacin
Pesar el extracto de levadura, el fosfato hidrgeno dipotsico, el sulfato de magnesio y el
agar-agar, autoclavar a 121C por 15 minutos. Preparar las soluciones de cistena y
etanol al 3% y esterilizarlas por filtracin y aadir la cantidad correspondiente al medio
despus de autoclavar.
pH 7.0 +/- 0.2.
70
Procedimiento experimental y evaluacin
Servir aproximadamente 15mL de medio en cajas de petri, sembrar por superficie o por
profundidad empleyo diluciones seriadas la muestra, homogenizar. Incubar a 30C +/-0.2
en oscuridad y aerobiosis, o en contacto con la luz en anaerobiosis.
Realizar lectura de UFC /mL o g de muestra: Colonias brillantes, regulares, de color rojo
o con ligera tonalidad.
71
ANEXO B
ESTADSTICO DQO DBO5 ST SULFUROS NO3 NO2 NH4 PO4 SULFATOS HETEROTROFOS LEVADURAS LACTOBACILLUS CT CF OD T
Media 1019,81 390,19 1152,90 11,12 1,20 0,12 34,40 15,51 65,34 164180729,17 675,63 643298,47 10910,64 1566,03 1,15 16,23
Error tpico 50,49 30,12 134,82 0,61 0,08 0,00 2,28 0,40 6,15 51496147,36 99,11 265007,65 1726,71 813,60 0,07 0,17
Mediana 1068,00 387,62 972,00 8,40 1,17 0,12 28,00 14,28 64,80 41750000,00 280,00 24000,00 3700,00 200,00 1,04 16,40
Moda 1446,00 587,93 914,00 7,20 1,87 0,09 24,71 14,91 #N/A 14500000,00 750,00 120,00 15000,00 200,00 1,48 16,40
Desviacin estndar 492,07 295,07 1320,92 5,94 0,83 0,04 22,33 3,87 60,29 504557138,98 955,80 2086672,30 16289,73 7231,43 0,71 1,20
Varianza de la muestra 242133,04 87067,46 1744816,51 35,26 0,68 0,00 498,54 14,98 3635,20 254577906493147000,00 913554,38 4354201266724,25 265355232,95 52293627,36 0,50 1,43
Curtosis -0,33 -1,00 68,32 0,21 -0,75 6,90 -0,61 -0,60 -0,50 52,84 6,61 22,11 10,21 56,61 -0,91 1,82
Coeficiente de asimetra 0,32 0,27 7,20 1,15 0,33 1,86 0,58 0,85 0,57 6,82 2,37 4,65 2,84 7,22 0,32 1,00
Rango 2263,00 1178,30 16022,00 23,20 3,08 0,26 81,07 15,62 232,12 4363650000,00 4799,00 11499980,00 95497,50 59999,00 2,78 5,20
Mnimo 265,00 -97,07 -3120,00 4,00 0,06 0,06 1,40 8,63 0,07 1350000,00 1,00 20,00 2,50 1,00 0,16 14,70
Mximo 2528,00 1081,23 12902,00 27,20 3,14 0,31 82,47 24,25 232,19 4365000000,00 4800,00 11500000,00 95500,00 60000,00 2,94 19,90
Suma 96881,55 37458,06 110678,20 1056,20 114,89 11,97 3302,83 1489,11 6272,40 15761350000,00 62833,50 39884505,00 971047,33 123716,08 110,50 779,20
Cuenta 95,00 96,00 96,00 95,00 96,00 96,00 96,00 96,00 96,00 96,00 93,00 62,00 89,00 79,00 96,00 48,00
Nivel de confianza(95,0%) 100,24 59,79 267,64 1,21 0,17 0,01 4,52 0,78 12,22 102232775,75 196,84 529915,54 3431,47 1619,75 0,14 0,35
72
ANEXO C
GRFICAS DE COMPORTAMIENTO GENERAL DE CADA VARIABLE EN EL TIEMPO

DE ESTUDIO E IDENTIFICACIN DE PUNTOS EXTREMOS
DBO5
1200
1000
800
600
DBO5
400
200
0
1 5 9 13 17 21 25 29 33 37 41 45 49 53 57 61 65 69 73 77 81 85 89 93
-200
Distribucin de los datos y puntos extremos encontrados durante el estudio para los
datos obtenidos al analizar el parmetro Demanda biolgica de oxgeno (DBO5)
ST
14000
12000
10000
8000
6000
ST
4000
2000
0
1 5 9 13 17 21 25 29 33 37 41 45 49 53 57 61 65 69 73 77 81 85 89 93
-2000
-4000
datos obtenidos al analizar el parmetro Slidos totales (ST)
73
NO2
0,3500
0,3000
0,2500
0,2000
NO2
0,1500
0,1000
0,0500
0,0000
1 5 9 13 17 21 25 29 33 37 41 45 49 53 57 61 65 69 73 77 81 85 89 93
datos obtenidos al analizar el parmetro Nitritos (NO2)
LEVADURAS
6,0E+03
5,0E+03
4,0E+03
3,0E+03 LEVADURAS
2,0E+03
1,0E+03
0,0E+00
1 5 9 13 17 21 25 29 33 37 41 45 49 53 57 61 65 69 73 77 81 85 89 93
datos obtenidos al analizar el parmetro levaduras (LV)
74
LACTOS
1,2E+07
1,0E+07
8,0E+06
6,0E+06 LACTOS
4,0E+06
2,0E+06
0,0E+00
1 5 9 13 17 21 25 29 33 37 41 45 49 53 57 61 65 69 73 77 81 85 89 93
datos obtenidos al analizar el parmetro lactobacilos (LB)
CT
1,2E+05
1,0E+05
8,0E+04
6,0E+04 CT
4,0E+04
2,0E+04
0,0E+00
1 5 9 13 17 21 25 29 33 37 41 45 49 53 57 61 65 69 73 77 81 85 89 93
datos obtenidos al analizar el parmetro Coliformes totales (CT)
75
CF
7,0E+04
6,0E+04
5,0E+04
4,0E+04
CF
3,0E+04
2,0E+04
1,0E+04
0,0E+00
1 5 9 13 17 21 25 29 33 37 41 45 49 53 57 61 65 69 73 77 81 85 89 93
datos obtenidos al analizar el parmetro Coliformes fecales (CF)
HETEROTROFOS
7,0E+08
6,0E+08
5,0E+08
4,0E+08
HETEROTROFOS
3,0E+08
2,0E+08
1,0E+08
0,0E+00
1 6 11 16 21 26 31 36 41 46 51 56 61 66 71 76 81 86 91 96
datos obtenidos al analizar el parmetro Hetertrofos totales (HT)
76
DQO
3000
2500
2000
1500
DQO
1000
500
0
1 5 9 13 17 21 25 29 33 37 41 45 49 53 57 61 65 69 73 77 81 85 89 93
Distribucin de los datos durante el estudio para los datos obtenidos al analizar el
parmetro Demanda qumica de oxgeno (DQO)
SULFUROS
30
25
20
15
10
0
1 5 9 13 17 21 25 29 33 37 41 45 49 53 57 61 65 69 73 77 81 85 89 93
parmetro Sulfuros (SFU)
77
NO3
3,50
3,00
2,50
2,00
NO3
1,50
1,00
0,50
0,00
1 5 9 13 17 21 25 29 33 37 41 45 49 53 57 61 65 69 73 77 81 85 89 93
parmetro Nitratos (NO3)
NH4
90,00
80,00
70,00
60,00
50,00
NH4
40,00
30,00
20,00
10,00
0,00
1 5 9 13 17 21 25 29 33 37 41 45 49 53 57 61 65 69 73 77 81 85 89 93
parmetro amonio (NH4)
78
PO4
30,00
25,00
20,00
15,00
PO4
10,00
5,00
0,00
1 5 9 13 17 21 25 29 33 37 41 45 49 53 57 61 65 69 73 77 81 85 89 93
parmetro fosfatos (PO4)
SULFATOS
250,00
200,00
150,00
100,00
50,00
0,00
1 5 9 13 17 21 25 29 33 37 41 45 49 53 57 61 65 69 73 77 81 85 89 93
parmetro sulfatos (SFA)
79
pH
9,00
8,00
7,00
6,00
5,00
4,00
pH
3,00
2,00
1,00
0,00
1 5 9 13 17 21 25 29 33 37 41 45 49 53 57 61 65 69 73 77 81 85 89 93
parmetro pH
OD
3,50
3,00
2,50
2,00
OD
1,50
1,00
0,50
0,00
1 5 9 13 17 21 25 29 33 37 41 45 49 53 57 61 65 69 73 77 81 85 89 93
parmetro oxgeno disuelto (OD)
80
FOTOTROFICAS
18000000
16000000
14000000
12000000
10000000
8000000
6000000
4000000
2000000
0
1 5 9 13 17 21 25 29 33 37 41 45 49 53 57 61 65 69 73 77 81 85 89 93
parmetro bacterias fototrficas (FOTO)
81
ANEXO D
ESTADSTICAS DE PRUEBA SHAPIRO-WILK (P>0.05) Y KOLMOGOROV-SMIRNOV

(P >0.05) PARA EL SUPUESTO DE NORMALIDAD Y GRFICAS Q-Q
Estadsticas de prueba para distribucin normal

DATOS ORIGINALES
SHAPIRO- KOLMOGOROV-
VARIABLE WILK (W) SMIRNOV (D) p DECISIN ESTADSTICA
> Rechazo Ho de igualdad
DQO 0,0004 < 0,0100 0,05 entre medias
DBO 5 0,0003 < 0,0100 0,05 entre medias
ST < 0,0001 < 0,0100 0,05 entre medias
SULF < 0,0001 < 0,0100 0,05 entre medias
> Rechazo por W y acepto por
NO3 0,0006 0,0229 0,05 D
NO2 <0,0001 <0,0100 0,05 entre medias
NH4 <0,0001 <0,0100 0,05 entre medias
PO4 <0,0001 <0,0100 0,05 entre medias
SULFA <0,0001 <0,0100 0,05 entre medias
pH <0,0001 <0,0100 0,05 entre medias
OD <0,0001 <0,0100 0,05 entre medias
FOTOTRFICAS <0,0001 <0,0100 0,05 entre medias
LEVADURAS <0,0001 <0,0100 0,05 entre medias
LACTOBALILOS <0,0001 <0,0100 0,05 entre medias
C. TOTALES <0,0001 <0,0100 0,05 entre medias
C. FECALES <0,0001 <0,0100 0,05 entre medias
HETERTROFOS <0,0001 <0,0100 0,05 entre medias
82
ANEXO E
COMPARACIN ENTRE PROFUNDIDADES (20 Y 40 Cm)
COMPARACIN ENTRE LAS PROFUNDIDADES

DA VALOR t CON LSD
DQO DBO5 ST S NO3 NO2 NH4 PO4 SO4 PH OD FOTOS LEVS LACTOS CT CF HETEROS
0 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11
10 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12
30 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12 2,12
45 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11 2,11
83
ANEXO F
LSD COMPARACION ENTRE DIAS DE UN MISMO TRATAMIENTO
TRATAMIENTO 0:
VARIABLE DQO:
Procedimiento GLM
t Tests (LSD) para DQO
Alfa 0.05
Valor crtico de t 2.44691
Diferencia menos significativa 363.14
Medias con la misma letra no son significativamente diferentes.
t Agrupamiento Media N DIA

A 1315.3 3 1
A 1147.5 3 2
B 467.7 3 4
B 317.7 3 3
VARIABLE DBO5:
t Tests (LSD) para DBO5
Alfa 0.05

A 823.9 3 2
B 162.9 3 1
B 142.1 3 3
C 15.4 3 4
84
VARIABLE ST:
t Tests (LSD) para ST
Alfa 0.05

A 1222.67 3 1
B 927.33 3 4
CB 872.00 3 2
C 724.67 3 3
VARIABLE SULF:
t Tests (LSD) para SULF
Alfa 0.05

A 25.467 3 3
B 20.333 3 4
C 8.000 3 2
C 6.267 3 1
85
VARIABLE NO3:
t Tests (LSD) para NO3
Alfa 0.05

A 2.2129 3 1
B 1.3247 3 3
B 1.0537 3 4
C 0.2311 3 2
VARIABLE NO2:
Alfa 0.05

A 0.11767 3 3
BA 0.09833 3 2
B 0.08933 3 4
B 0.08900 3 1
86
VARIABLE NH4:
t Tests (LSD) para NH4
Alfa 0.05

A 63.796 3 3
B 26.901 3 2
B 23.607 3 1
B 13.304 3 4
VARIABLE PO4:
t Tests (LSD) para PO4
Alfa 0.05

A 20.6795 3 1
B 14.9635 3 3
CB 13.0800 3 4
C 12.8707 3 2
87
VARIABLE SULFA:
t Tests (LSD) para SULFA
Alfa 0.05

A 89.25 3 3
BA 73.86 3 4
BA 68.64 3 2
B 3.18 3 1
VARIABLE PH:
t Tests (LSD) para pH
Alfa 0.05

A 7.6467 3 1
BA 7.5567 3 4
BC 7.2600 3 3
C 6.9633 3 2
88
VARIABLE OD:
t Tests (LSD) para OD
Alfa 0.05

A 1.5600 3 1
A 1.4500 3 2
B 0.6900 3 3
B 0.3333 3 4
VARIABLE FOTOTRFICAS:
t Tests (LSD) para FOTO
Alfa 0.05
Diferencia menos significativa 3.24E6

A 6766667 3 4
B 3003333 3 3
C 230000 3 1
D 15027 3 2
89
VARIABLE LEVADURAS:
t Tests (LSD) para LEVA
Alfa 0.05

A 443.3 3 1
A 53.0 3 2
B 33.3 3 3
C 6.0 3 4
VARIABLE LACTOS:
t Tests (LSD) para LACTO
Alfa 0.05

B 3.0000 3 3
C 2.6667 3 4
A 1.0000 3 1
A 0.6667 3 2
90
VARIABLE CT:
Procedimiento GLM
t Tests (LSD) para CT
Alfa 0.05

A 1.6667 3 2
B 1.0000 3 4
A 0.0000 3 1
A 0.0000 3 3
VARIABLE CF:
t Tests (LSD) para CF
Alfa 0.05

A 27.00 3 2
C 14.33 3 4
B 2.00 3 1
B 2.00 3 3
91
VARIABLE HETERTROFOS:
t Tests (LSD) para HETE
Alfa 0.05

A 773.6 3 2
BA 141.3 3 4
B 40.0 3 1
B 40.0 3 3
TRATAMIENTO 1:
VARIABLE DQO:
Alfa 0.05
Las comparaciones importantes del nivel 0.05 estn indicadas por ***.
DIA Comparacin Diferencia entre media 95% Lmites de confianza

1-2 323.31 98.15 548.47 ***
1-3 895.00 654.98 1135.02 ***
1-4 900.25 637.32 1163.18 ***
2-1 -323.31 -548.47 -98.15 ***
2-3 571.69 322.26 821.12 ***
2-4 576.94 305.39 848.49 ***
3-1 -895.00 -1135.02 -654.98 ***
3-2 -571.69 -821.12 -322.26 ***
3-4 5.25 -278.74 289.24
4-1 -900.25 -1163.18 -637.32 ***
4-2 -576.94 -848.49 -305.39 ***
4-3 -5.25 -289.24 278.74
92
VARIABLE DBO5:
Alfa 0.05

2-3 129.11 -32.06 290.28
2-1 131.20 -14.29 276.68
2-4 589.35 413.89 764.81 ***
3-2 -129.11 -290.28 32.06
3-1 2.09 -153.00 157.18
3-4 460.24 276.74 643.74 ***
1-2 -131.20 -276.68 14.29
1-3 -2.09 -157.18 153.00
1-4 458.15 288.26 628.04 ***
4-2 -589.35 -764.81 -413.89 ***
4-3 -460.24 -643.74 -276.74 ***
4-1 -458.15 -628.04 -288.26 ***
VARIABLE ST:
Alfa 0.05

1-4 105.3 -176.6 387.3
1-2 525.6 284.2 767.1 ***
1-3 529.3 272.0 786.7 ***
4-1 -105.3 -387.3 176.6
4-2 420.3 129.1 711.5 ***
4-3 424.0 119.5 728.5 ***
2-1 -525.6 -767.1 -284.2 ***
2-4 -420.3 -711.5 -129.1 ***
2-3 3.7 -263.8 271.2
3-1 -529.3 -786.7 -272.0 ***
3-4 -424.0 -728.5 -119.5 ***
3-2 -3.7 -271.2 263.8
93
VARIABLE SULFUROS:
Alfa 0.05

4-1 9.2667 8.0330 10.5004 ***
4-3 10.2167 8.8841 11.5492 ***
4-2 11.5467 10.2725 12.8208 ***
1-4 -9.2667 -10.5004 -8.0330 ***
1-3 0.9500 -0.1762 2.0762
1-2 2.2800 1.2235 3.3365 ***
3-4 -10.2167 -11.5492 -8.8841 ***
3-1 -0.9500 -2.0762 0.1762
3-2 1.3300 0.1596 2.5004 ***
2-4 -11.5467 -12.8208 -10.2725 ***
2-1 -2.2800 -3.3365 -1.2235 ***
2-3 -1.3300 -2.5004 -0.1596 ***
VARIABLE NO3:
Alfa 0.05

1-3 0.2653 -0.1987 0.7293
1-4 0.4553 -0.0529 0.9636
1-2 1.4532 1.0180 1.8885 ***
3-1 -0.2653 -0.7293 0.1987
3-4 0.1900 -0.3589 0.7390
3-2 1.1879 0.7057 1.6701 ***
4-1 -0.4553 -0.9636 0.0529
4-3 -0.1900 -0.7390 0.3589
4-2 0.9979 0.4729 1.5228 ***
2-1 -1.4532 -1.8885 -1.0180 ***
2-3 -1.1879 -1.6701 -0.7057 ***
2-4 -0.9979 -1.5228 -0.4729 ***
94
VARIABLE NO2:
Alfa 0.05

3-2 0.01435 -0.05771 0.08641
3-1 0.01508 -0.05426 0.08442
3-4 0.01842 -0.06363 0.10046
2-3 -0.01435 -0.08641 0.05771
2-1 0.00073 -0.06431 0.06578
2-4 0.00407 -0.07438 0.08252
1-3 -0.01508 -0.08442 0.05426
1-2 -0.00073 -0.06578 0.06431
1-4 0.00333 -0.07262 0.07929
4-3 -0.01842 -0.10046 0.06363
4-2 -0.00407 -0.08252 0.07438
4-1 -0.00333 -0.07929 0.07262
VARIABLE NH4:
Alfa 0.05

3-2 45.368 34.509 56.228 ***
3-1 55.909 45.459 66.359 ***
3-4 66.000 53.636 78.365 ***
2-3 -45.368 -56.228 -34.509 ***
2-1 10.541 0.738 20.343 ***
2-4 20.632 8.810 32.455 ***
1-3 -55.909 -66.359 -45.459 ***
1-2 -10.541 -20.343 -0.738 ***
1-4 10.091 -1.356 21.538
4-3 -66.000 -78.365 -53.636 ***
4-2 -20.632 -32.455 -8.810 ***
4-1 -10.091 -21.538 1.356
95
VARIABLE PO4:
Alfa 0.05

1-2 6.841 2.627 11.055 ***
1-3 8.692 4.200 13.184 ***
1-4 10.196 5.275 15.116 ***
2-1 -6.841 -11.055 -2.627 ***
2-3 1.851 -2.818 6.519
2-4 3.355 -1.727 8.437
3-1 -8.692 -13.184 -4.200 ***
3-2 -1.851 -6.519 2.818
3-4 1.504 -3.811 6.819
4-1 -10.196 -15.116 -5.275 ***
4-2 -3.355 -8.437 1.727
4-3 -1.504 -6.819 3.811
VARIABLE SULFATOS:
Alfa 0.05

3-4 44.58 -25.71 114.86
3-2 66.04 4.30 127.77 ***
3-1 112.53 53.13 171.93 ***
4-3 -44.58 -114.86 25.71
4-2 21.46 -45.75 88.66
4-1 67.95 2.88 133.02 ***
2-3 -66.04 -127.77 -4.30 ***
2-4 -21.46 -88.66 45.75
2-1 46.49 -9.23 102.21
1-3 -112.53 -171.93 -53.13 ***
1-4 -67.95 -133.02 -2.88 ***
1-2 -46.49 -102.21 9.23
96
VARIABLE PH:
Alfa 0.05

1-4 0.04833 -0.06833 0.16500
1-3 0.35917 0.25267 0.46566 ***
1-2 0.55167 0.45176 0.65157 ***
4-1 -0.04833 -0.16500 0.06833
4-3 0.31083 0.18482 0.43684 ***
4-2 0.50333 0.38285 0.62382 ***
3-1 -0.35917 -0.46566 -0.25267 ***
3-4 -0.31083 -0.43684 -0.18482 ***
3-2 0.19250 0.08182 0.30318 ***
2-1 -0.55167 -0.65157 -0.45176 ***
2-4 -0.50333 -0.62382 -0.38285 ***
2-3 -0.19250 -0.30318 -0.08182 ***
VARIABLE OD:
Alfa 0.05

1-2 0.2427 -0.0446 0.5299
1-3 1.2317 0.9255 1.5378 ***
1-4 1.7567 1.4213 2.0921 ***
2-1 -0.2427 -0.5299 0.0446
2-3 0.9890 0.6708 1.3072 ***
2-4 1.5140 1.1676 1.8604 ***
3-1 -1.2317 -1.5378 -0.9255 ***
3-2 -0.9890 -1.3072 -0.6708 ***
3-4 0.5250 0.1627 0.8873 ***
4-1 -1.7567 -2.0921 -1.4213 ***
4-2 -1.5140 -1.8604 -1.1676 ***
4-3 -0.5250 -0.8873 -0.1627 ***
97
VARIABLE FOTOTROFICAS:
Alfa 0.05

4-3 4784064 3477666 6090462 ***
4-2 5146143 3896988 6395299 ***
4-1 5255000 4045511 6464489 ***
3-4 -4784064 -6090462 -3477666 ***
3-2 362079 -785343 1509502
3-1 470936 -633172 1575044
2-4 -5146143 -6395299 -3896988 ***
2-3 -362079 -1509502 785343
2-1 108857 -926888 1144602
1-4 -5255000 -6464489 -4045511 ***
1-3 -470936 -1575044 633172
1-2 -108857 -1144602 926888
VARIABLE LEVADURAS:
Alfa 0.05

2-1 199945 -121054 520944
2-3 200974 -154636 556584***
2-4 201139 -186000 588278***
1-2 -199945 -520944 121054
1-3 1029 -341157 343215***
1-4 1194 -373651 376040***
3-2 -200974 -556584 154636***
3-1 -1029 -343215 341157***
3-4 165 -404715 405045***
4-2 -201139 -588278 186000***
4-1 -1194 -376040 373651***
4-3 -165 -405045 404715***
98
VARIABLE LACTOS:
Alfa 0.05

2-1 734027 -231878 1699932 ***
2-3 1060016 -10036 2130068 ***
2-4 1064232 -100693 2229157 ***
1-2 -734027 -1699932 231878 ***
1-3 325990 -703668 1355648 ***
1-4 330205 -797729 1458139 ***
3-2 -1060016 -2130068 10036 ***
3-1 -325990 -1355648 703668 ***
3-4 4216 -1214092 1222524 ***
4-2 -1064232 -2229157 100693 ***
4-1 -330205 -1458139 797729 ***
4-3 -4216 -1222524 1214092 ***
Sistema SAS 06:02 Saturday, June 12, 2008 68

VARIABLE CT:
Alfa 0.05

1-3 1700 -8247 11646
1-2 8177 -1153 17508
1-4 9657 -1239 20553***
3-1 -1700 -11646 8247
3-2 6478 -3859 16814
3-4 7957 -3811 19726***
2-1 -8177 -17508 1153
2-3 -6478 -16814 3859
2-4 1480 -9773 12733***
4-1 -9657 -20553 1239***
4-3 -7957 -19726 3811***
4-2 -1480 -12733 9773***
99
VARIABLE CF:
Alfa 0.05

2-3 1999973 -65681605 69681550
2-4 23500110 -50182259 97182479***
2-1 36999677 -24094516 98093869
3-2 -1999973 -69681550 65681605
3-4 21500138 -55558728 98559003***
3-1 34999704 -30126924 100126332
4-2 -23500110 -97182479 50182259***
4-3 -21500138 -98559003 55558728***
4-1 13499567 -57843080 84842213***
1-2 -36999677 -98093869 24094516
1-3 -34999704 -100126332 30126924
1-4 -13499567 -84842213 57843080***
VARIABLE HETEROTROFOS:
Alfa 0.05

3-1 24133334 -22465262 70731930
3-2 30675000 -17751682 79101681
3-4 60374997 5238795 115511199 ***
1-3 -24133334 -70731930 22465262
1-2 6541666 -37171692 50255023
1-4 36241663 -14804542 87287867
2-3 -30675000 -79101681 17751682
2-1 -6541666 -50255023 37171692
2-4 29699997 -23020296 82420290
4-3 -60374997 -115511199 -5238795 ***
4-1 -36241663 -87287867 14804542
4-2 -29699997 -82420290 23020296
100
TRATAMIENTO 2:
VARIABLE DQO:
Alfa 0.05

1-2 209.3 -241.9 660.5
1-3 433.4 -17.8 884.6
1-4 665.3 138.4 1192.2 ***
2-1 -209.3 -660.5 241.9
2-3 224.1 -247.2 695.4
2-4 456.0 -88.2 1000.2
3-1 -433.4 -884.6 17.8
3-2 -224.1 -695.4 247.2
3-4 231.9 -312.3 776.1
4-1 -665.3 -1192.2 -138.4 ***
4-2 -456.0 -1000.2 88.2
4-3 -231.9 -776.1 312.3
VARIABLE DBO5:
Alfa 0.05

3-2 132.89 -96.14 361.92
3-1 246.89 27.61 466.17 ***
3-4 599.70 335.24 864.16 ***
2-3 -132.89 -361.92 96.14
2-1 114.00 -105.28 333.28
2-4 466.81 202.35 731.27 ***
1-3 -246.89 -466.17 -27.61 ***
1-2 -114.00 -333.28 105.28
1-4 352.82 96.75 608.88 ***
4-3 -599.70 -864.16 -335.24 ***
4-2 -466.81 -731.27 -202.35 ***
4-1 -352.82 -608.88 -96.75 ***
101
VARIABLE ST:
Alfa 0.05

1-3 221.5 -1006.7 1449.7
1-4 613.7 -820.6 2047.9
1-2 1431.1 202.9 2659.3 ***
3-1 -221.5 -1449.7 1006.7
3-4 392.1 -1089.1 1873.4
3-2 1209.6 -73.2 2492.4
4-1 -613.7 -2047.9 820.6
4-3 -392.1 -1873.4 1089.1
4-2 817.5 -663.8 2298.7
2-1 -1431.1 -2659.3 -202.9 ***
2-3 -1209.6 -2492.4 73.2
2-4 -817.5 -2298.7 663.8
VARIABLE SULFUROS:
Alfa 0.05

4-3 3.6933 1.9145 5.4722 ***
4-1 5.6667 3.9443 7.3890 ***
4-2 6.7733 4.9945 8.5522 ***
3-4 -3.6933 -5.4722 -1.9145 ***
3-1 1.9733 0.4984 3.4483 ***
3-2 3.0800 1.5395 4.6205 ***
1-4 -5.6667 -7.3890 -3.9443 ***
1-3 -1.9733 -3.4483 -0.4984 ***
1-2 1.1067 -0.3683 2.5816
2-4 -6.7733 -8.5522 -4.9945 ***
2-3 -3.0800 -4.6205 -1.5395 ***
2-1 -1.1067 -2.5816 0.3683
102
VARIABLE NO3:
Alfa 0.05

1-4 0.5570 -0.0256 1.1396
1-3 0.6292 0.1303 1.1281 ***
1-2 1.5004 1.0015 1.9993 ***
4-1 -0.5570 -1.1396 0.0256
4-3 0.0723 -0.5295 0.6740
4-2 0.9434 0.3417 1.5451 ***
3-1 -0.6292 -1.1281 -0.1303 ***
3-4 -0.0723 -0.6740 0.5295
3-2 0.8712 0.3501 1.3923 ***
2-1 -1.5004 -1.9993 -1.0015 ***
2-4 -0.9434 -1.5451 -0.3417 ***
2-3 -0.8712 -1.3923 -0.3501 ***
Sistema SAS 06:02 Saturday, June 12, 2008 94

VARIABLE NO2:
Alfa 0.05

3-2 0.01060 -0.02084 0.04204
3-1 0.01507 -0.01504 0.04517
3-4 0.02107 -0.01524 0.05737
2-3 -0.01060 -0.04204 0.02084
2-1 0.00447 -0.02564 0.03457
2-4 0.01047 -0.02584 0.04677
1-3 -0.01507 -0.04517 0.01504
1-2 -0.00447 -0.03457 0.02564
1-4 0.00600 -0.02915 0.04115
4-3 -0.02107 -0.05737 0.01524
4-2 -0.01047 -0.04677 0.02584
4-1 -0.00600 -0.04115 0.02915
103
VARIABLE NH4:
Alfa 0.05

3-2 31.562 20.031 43.094 ***
3-1 37.876 26.835 48.916 ***
3-4 63.018 49.703 76.333 ***
2-3 -31.562 -43.094 -20.031 ***
2-1 6.314 -4.727 17.354
2-4 31.456 18.140 44.771 ***
1-3 -37.876 -48.916 -26.835 ***
1-2 -6.314 -17.354 4.727
1-4 25.142 12.250 38.035 ***
4-3 -63.018 -76.333 -49.703 ***
4-2 -31.456 -44.771 -18.140 ***
4-1 -25.142 -38.035 -12.250 ***
VARIABLE PO4:
Alfa 0.05

1-3 7.722 5.362 10.083 ***
1-4 8.267 5.511 11.023 ***
1-2 8.539 6.178 10.899 ***
3-1 -7.722 -10.083 -5.362 ***
3-4 0.544 -2.302 3.391
3-2 0.816 -1.649 3.281
4-1 -8.267 -11.023 -5.511 ***
4-3 -0.544 -3.391 2.302
4-2 0.272 -2.574 3.118
2-1 -8.539 -10.899 -6.178 ***
2-3 -0.816 -3.281 1.649
2-4 -0.272 -3.118 2.574
104
VARIABLE SULFATOS:
Alfa 0.05

4-3 23.90 -34.36 82.15
4-1 145.29 88.88 201.69 ***
4-2 146.93 88.67 205.19 ***
3-4 -23.90 -82.15 34.36
3-1 121.39 73.09 169.69 ***
3-2 123.03 72.58 173.48 ***
1-4 -145.29 -201.69 -88.88 ***
1-3 -121.39 -169.69 -73.09 ***
1-2 1.64 -46.66 49.95
2-4 -146.93 -205.19 -88.67 ***
2-3 -123.03 -173.48 -72.58 ***
2-1 -1.64 -49.95 46.66
VARIABLE PH:
Alfa 0.05

1-4 0.12333 -0.04326 0.28993
1-3 0.36133 0.21867 0.50400
1-2 0.68133 0.53867 0.82400 ***
4-1 -0.12333 -0.28993 0.04326
4-3 0.23800 0.06594 0.41006
4-2 0.55800 0.38594 0.73006 ***
3-1 -0.36133 -0.50400 -0.21867
3-4 -0.23800 -0.41006 -0.06594
3-2 0.32000 0.17099 0.46901 ***
2-1 -0.68133 -0.82400 -0.53867 ***
2-4 -0.55800 -0.73006 -0.38594 ***
2-3 -0.32000 -0.46901 -0.17099 ***
105
VARIABLE OD:
Alfa 0.05

1-2 0.2693 -0.1129 0.6516
1-3 1.1713 0.7891 1.5536 ***
1-4 1.6767 1.2303 2.1230 ***
2-1 -0.2693 -0.6516 0.1129
2-3 0.9020 0.5027 1.3013 ***
2-4 1.4073 0.9463 1.8684 ***
3-1 -1.1713 -1.5536 -0.7891 ***
3-2 -0.9020 -1.3013 -0.5027 ***
3-4 0.5053 0.0443 0.9664 ***
4-1 -1.6767 -2.1230 -1.2303 ***
4-2 -1.4073 -1.8684 -0.9463 ***
4-3 -0.5053 -0.9664 -0.0443 ***
Alfa 0.05

4-2 6889667 2989527 10789806 ***
4-3 10408067 6507927 14308206 ***
4-1 10631667 6855373 14407961 ***
2-4 -6889667 -10789806 -2989527 ***
2-3 3518400 140780 6896020 ***
2-1 3742000 508175 6975825 ***
3-4 -10408067 -14308206 -6507927 ***
3-2 -3518400 -6896020 -140780 ***
3-1 223600 -3010225 3457425
1-4 -10631667 -14407961 -6855373 ***
1-2 -3742000 -6975825 -508175 ***
1-3 -223600 -3457425 3010225
106
VARIABLE LEVADURAS:
Alfa 0.05

1-2 1029.3 415.1 1643.6 ***
1-3 1490.3 876.1 2104.6 ***
1-4 1716.0 998.7 2433.3 ***
2-1 -1029.3 -1643.6 -415.1 ***
2-3 461.0 -180.6 1102.6 ***
2-4 686.7 -54.2 1427.5 ***
3-1 -1490.3 -2104.6 -876.1 ***
3-2 -461.0 -1102.6 180.6 ***
3-4 225.7 -515.2 966.5 ***
4-1 -1716.0 -2433.3 -998.7 ***
4-2 -686.7 -1427.5 54.2 ***
4-3 -225.7 -966.5 515.2 ***
VARIABLE LACTOS:
Alfa 0.05

2-4 1024476 16426 2032526 ***
2-1 1161667 325836 1997497 ***
2-3 1491606 618609 2364603 ***
4-2 -1024476 -2032526 -16426 ***
4-1 137191 -838849 1113231
4-3 467130 -540920 1475180
1-2 -1161667 -1997497 -325836 ***
1-4 -137191 -1113231 838849
1-3 329939 -505891 1165770
3-2 -1491606 -2364603 -618609 ***
3-4 -467130 -1475180 540920
3-1 -329939 -1165770 505891
107
VARIABLE CT:
Alfa 0.05

2-1 10368 -11920 32655
2-3 21444 -1835 44723
2-4 28321 1441 55200 ***
1-2 -10368 -32655 11920
1-3 11076 -11211 33364
1-4 17953 -8073 43979***
3-2 -21444 -44723 1835
3-1 -11076 -33364 11211
3-4 6877 -20003 33756***
4-2 -28321 -55200 -1441 ***
4-1 -17953 -43979 8073***
4-3 -6877 -33756 20003***
VARIABLE CF:
Alfa 0.05

3-2 44599825 -60702984 149902634
3-4 60850139 -60743071 182443350
3-1 63999771 -36819994 164819535
2-3 -44599825 -149902634 60702984
2-4 16250314 -105342896 137843525
2-1 19399946 -81419819 120219710
4-3 -60850139 -182443350 60743071
4-2 -16250314 -137843525 105342896
4-1 3149631 -114582489 120881751
1-3 -63999771 -164819535 36819994
1-2 -19399946 -120219710 81419819
1-4 -3149631 -120881751 114582489
108
Alfa 0.05

2-3 184600000 -6083246 375283245
2-1 233591667 51026359 416156975 ***
2-4 248999997 28817950 469182043 ***
3-2 -184600000 -375283245 6083246
3-1 48991667 -133573641 231556976
3-4 64399997 -155782049 284582043
1-2 -233591667 -416156975 -51026359 ***
1-3 -48991667 -231556976 133573641
1-4 15408330 -197782020 228598679
4-2 -248999997 -469182043 -28817950 ***
4-3 -64399997 -284582043 155782049
4-1 -15408330 -228598679 197782020
TRATAMIENTO 3:
VARIABLE DQO:
Alfa 0.05

1-2 489.43 311.97 666.89 ***
1-3 897.01 707.84 1086.18 ***
1-4 1113.08 923.91 1302.25 ***
2-1 -489.43 -666.89 -311.97 ***
2-3 407.57 210.98 604.17
2-4 623.65 427.06 820.24 ***
3-1 -897.01 -1086.18 -707.84 ***
3-2 -407.57 -604.17 -210.98
3-4 216.08 8.85 423.30 ***
4-1 -1113.08 -1302.25 -923.91 ***
4-2 -623.65 -820.24 -427.06 ***
4-3 -216.08 -423.30 -8.85 ***
109
VARIABLE DBO5:
Alfa 0.05

2-3 315.8 34.3 597.4 ***
2-1 493.8 239.6 748.0 ***
2-4 823.4 541.9 1105.0 ***
3-2 -315.8 -597.4 -34.3 ***
3-1 178.0 -93.0 448.9
3-4 507.6 210.8 804.4 ***
1-2 -493.8 -748.0 -239.6 ***
1-3 -178.0 -448.9 93.0
1-4 329.6 58.7 600.6 ***
4-2 -823.4 -1105.0 -541.9 ***
4-3 -507.6 -804.4 -210.8 ***
4-1 -329.6 -600.6 -58.7 ***
VARIABLE ST:
Alfa 0.05

4-1 2611 -1240 6462
4-2 3174 -828 7176
4-3 3377 -842 7595
1-4 -2611 -6462 1240
1-2 563 -3050 4175
1-3 766 -3085 4617
2-4 -3174 -7176 828
2-1 -563 -4175 3050
2-3 203 -3799 4205
3-4 -3377 -7595 842
3-1 -766 -4617 3085
3-2 -203 -4205 3799
110
VARIABLE SULFUROS:
Alfa 0.05

4-1 9.767 6.958 12.576 ***
4-2 12.489 9.570 15.409 ***
4-3 12.823 9.745 15.900 ***
1-4 -9.767 -12.576 -6.958 ***
1-2 2.723 0.087 5.358 ***
1-3 3.056 0.247 5.865 ***
2-4 -12.489 -15.409 -9.570 ***
2-1 -2.723 -5.358 -0.087 ***
2-3 0.333 -2.586 3.253
3-4 -12.823 -15.900 -9.745 ***
3-1 -3.056 -5.865 -0.247 ***
3-2 -0.333 -3.253 2.586
VARIABLE NO3:
Alfa 0.05

1-4 0.9201 0.0225 1.8177 ***
1-3 0.9692 0.0715 1.8668 ***
1-2 2.3077 1.4656 3.1497 ***
4-1 -0.9201 -1.8177 -0.0225 ***
4-3 0.0490 -0.9343 1.0323
4-2 1.3875 0.4547 2.3204 ***
3-1 -0.9692 -1.8668 -0.0715 ***
3-4 -0.0490 -1.0323 0.9343
3-2 1.3385 0.4057 2.2713 ***
2-1 -2.3077 -3.1497 -1.4656 ***
2-4 -1.3875 -2.3204 -0.4547 ***
2-3 -1.3385 -2.2713 -0.4057 ***
111
VARIABLE NO2:
Alfa 0.05

3-2 3.121 -16.324 22.566
3-1 10.644 -8.067 29.354
3-4 10.653 -9.844 31.149
2-3 -3.121 -22.566 16.324
2-1 7.523 -10.029 25.075
2-4 7.532 -11.913 26.977
1-3 -10.644 -29.354 8.067
1-2 -7.523 -25.075 10.029
1-4 0.009 -18.702 18.720
4-3 -10.653 -31.149 9.844
4-2 -7.532 -26.977 11.913
4-1 -0.009 -18.720 18.702
VARIABLE NH4:
Alfa 0.05

3-2 13.946 -7.573 35.466
3-1 19.191 -1.516 39.898
3-4 40.565 17.882 63.248 ***
2-3 -13.946 -35.466 7.573
2-1 5.245 -14.180 24.669
2-4 26.619 5.099 48.138 ***
1-3 -19.191 -39.898 1.516
1-2 -5.245 -24.669 14.180
1-4 21.374 0.667 42.081 ***
4-3 -40.565 -63.248 -17.882 ***
4-2 -26.619 -48.138 -5.099 ***
4-1 -21.374 -42.081 -0.667 ***
112
VARIABLE PO4:
Alfa 0.05

3-2 13.38 -55.32 82.08
3-1 31.29 -34.81 97.40 ***
3-4 39.44 -32.98 111.85
2-3 -13.38 -82.08 55.32
2-1 17.92 -44.10 79.93 ***
2-4 26.06 -42.64 94.76
1-3 -31.29 -97.40 34.81 ***
1-2 -17.92 -79.93 44.10 ***
1-4 8.14 -57.96 74.25 ***
4-3 -39.44 -111.85 32.98
4-2 -26.06 -94.76 42.64
4-1 -8.14 -74.25 57.96 ***
VARIABLE SULFATOS:
Alfa 0.05

3-4 25.49 -64.99 115.97
3-2 48.20 -37.64 134.04
3-1 107.99 25.39 190.59 ***
4-3 -25.49 -115.97 64.99
4-2 22.71 -63.13 108.54
4-1 82.50 -0.10 165.10 ***
2-3 -48.20 -134.04 37.64
2-4 -22.71 -108.54 63.13 ***
2-1 59.79 -17.69 137.28
1-3 -107.99 -190.59 -25.39 ***
1-4 -82.50 -165.10 0.10 ***
1-2 -59.79 -137.28 17.69 ***
113
VARIABLE PH:
Alfa 0.05

1-4 0.104 -2.735 2.944
1-2 1.630 -1.034 4.293 ***
1-3 1.779 -1.060 4.619
4-1 -0.104 -2.944 2.735
4-2 1.525 -1.425 4.476
4-3 1.675 -1.436 4.786
2-1 -1.630 -4.293 1.034 ***
2-4 -1.525 -4.476 1.425 ***
2-3 0.149 -2.801 3.100 ***
3-1 -1.779 -4.619 1.060
3-4 -1.675 -4.786 1.436
3-2 -0.149 -3.100 2.801 ***
VARIABLE OD:
Alfa 0.05

3-2 409999 -169666 989664 ***
3-1 449998 -107784 1007781 ***
3-4 450000 -161020 1061021 ***
2-3 -409999 -989664 169666 ***
2-1 39999 -483248 563246
2-4 40001 -539664 619666 ***
1-3 -449998 -1007781 107784 ***
1-2 -39999 -563246 483248
1-4 2 -557781 557785 ***
4-3 -450000 -1061021 161020 ***
4-2 -40001 -619666 539664 ***
4-1 -2 -557785 557781 ***
114
VARIABLE FOTOTRFICAS:
Alfa 0.05

4-3 4812464 3367943 6256986 ***
4-1 5275000 3956338 6593662 ***
4-2 5494930 4124536 6865324 ***
3-4 -4812464 -6256986 -3367943 ***
3-1 462536 -856126 1781198
3-2 682466 -687928 2052859
1-4 -5275000 -6593662 -3956338 ***
1-3 -462536 -1781198 856126
1-2 219930 -1017084 1456944
2-4 -5494930 -6865324 -4124536 ***
2-3 -682466 -2052859 687928
2-1 -219930 -1456944 1017084
VARIABLE LEVADURAS:
Alfa 0.05

1-2 1682.7 1122.9 2242.4 ***
1-3 1915.2 1318.5 2511.8 ***
1-4 2042.4 1445.7 2639.1 ***
2-1 -1682.7 -2242.4 -1122.9 ***
2-3 232.5 -387.6 852.6
2-4 359.8 -260.3 979.8 ***
3-1 -1915.2 -2511.8 -1318.5 ***
3-2 -232.5 -852.6 387.6
3-4 127.3 -526.4 780.9 ***
4-1 -2042.4 -2639.1 -1445.7 ***
4-2 -359.8 -979.8 260.3 ***
4-3 -127.3 -780.9 526.4 ***
115
VARIABLE LACTOS:
Alfa 0.05

1-2 1592.7 952.5 2232.9
1-3 1625.9 943.4 2308.4 ***
1-4 2042.4 1359.9 2724.9 ***
2-1 -1592.7 -2232.9 -952.5
2-3 33.3 -676.0 742.5 ***
2-4 449.8 -259.5 1159.0 ***
3-1 -1625.9 -2308.4 -943.4 ***
3-2 -33.3 -742.5 676.0 ***
3-4 416.5 -331.1 1164.1 ***
4-1 -2042.4 -2724.9 -1359.9 ***
4-2 -449.8 -1159.0 259.5 ***
4-3 -416.5 -1164.1 331.1 ***
VARIABLE CT:
Alfa 0.05

4-1 1560532 -345930 3466993***
4-3 1577558 -510866 3665981***
4-2 1586471 -394782 3567724***
1-4 -1560532 -3466993 345930***
1-3 17026 -1889435 1923487***
1-2 25939 -1762480 1814358***
3-4 -1577558 -3665981 510866***
3-1 -17026 -1923487 1889435***
3-2 8914 -1972339 1990166***
2-4 -1586471 -3567724 394782***
2-1 -25939 -1814358 1762480***
2-3 -8914 -1990166 1972339***
116
VARIABLE CF:
Alfa 0.05

3-2 149624985 -48832903 348082873
3-4 160075173 -49117809 369268154***
3-1 161624247 -29341944 352590439
2-3 -149624985 -348082873 48832903
2-4 10450188 -188007700 208908075***
2-1 11999262 -167142905 191141429
4-3 -160075173 -369268154 49117809***
4-2 -10450188 -208908075 188007700***
4-1 1549074 -189417117 192515266***
1-3 -161624247 -352590439 29341944
1-2 -11999262 -191141429 167142905
1-4 -1549074 -192515266 189417117***
Alfa 0.05

3-2 51950001 -154120586 258020589
3-1 139025002 -59266514 337316517
3-4 154950000 -62267472 372167471
2-3 -51950001 -258020589 154120586
2-1 87075000 -98938929 273088930
2-4 102999999 -103070589 309070586
1-3 -139025002 -337316517 59266514
1-2 -87075000 -273088930 98938929
1-4 15924998 -182366517 214216513
4-3 -154950000 -372167471 62267472
4-2 -102999999 -309070586 103070589
4-1 -15924998 -214216513 182366517
117
ANEXO G
LSD COMPARACION ENTRE TRATAMIENTOS EN UN MISMO DA
VARIABLE DQO:
DIA 1: t Tests (LSD) para DQO
NOTA: Este test controla el ndice de error comparisonwise de tipo I, no el ndice de error
experimentwise.
Alfa 0.05
Error de grados de libertad 18
Error de cuadrado medio 100433.5
t Agrupamiento Media N TRAT

A 1570.3 6 3
A 1553.0 6 2
A 1496.3 6 1
A 1326.7 6 0
experimentwise.
Alfa 0.05
TRAT Comparacin Diferencia entre medias 95% Lmites de confianza

21 134.80 -69.59 339.19
2-0 190.38 -14.02 394.77
2-3 266.60 52.23 480.97 ***
1-2 -134.80 -339.19 69.59
1-0 55.58 -148.82 259.97
1-3 131.80 -82.57 346.17
0-2 -190.38 -394.77 14.02
0-1 -55.58 -259.97 148.82
0-3 76.22 -138.14 290.59
3-2 -266.60 -480.97 -52.23 ***
3-1 -131.80 -346.17 82.57
3-0 -76.22 -290.59 138.14
118
experimentwise.
Alfa 0.05

2-3 189.6 -197.5 576.7
2-1 348.9 -20.2 718.0
2-0 645.7 276.6 1014.7 ***
3-2 -189.6 -576.7 197.5
3-1 159.3 -227.8 546.4
3-0 456.1 69.0 843.1
1-2 -348.9 -718.0 20.2
1-3 -159.3 -546.4 227.8
1-0 296.8 -72.3 665.8
0-2 -645.7 -1014.7 -276.6 ***
0-3 -456.1 -843.1 -69.0
0-1 -296.8 -665.8 72.3
experimentwise.
Alfa 0.05

A 836.5 6 1
A 662.8 6 2
A 540.0 6 3
A 430.0 6 0
119
VARIABLE DBO5:
DIA 1: t Tests (LSD) para DBO5
experimentwise.
Alfa 0.05

A 493.9 6 1
A 413.9 6 2
A 362.9 6 3
A 358.2 6 0
experimentwise.
Alfa 0.05

3-0 60.80 -83.62 205.22
3-1 239.80 95.38 384.22 ***
3-2 318.80 174.38 463.22 ***
0-3 -60.80 -205.22 83.62
0-1 179.00 41.30 316.70 ***
0-2 258.00 120.30 395.70 ***
1-3 -239.80 -384.22 -95.38 ***
1-0 -179.00 -316.70 -41.30 ***
1-2 79.00 -58.70 216.70
2-3 -318.80 -463.22 -174.38 ***
2-0 -258.00 -395.70 -120.30 ***
2-1 -79.00 -216.70 58.70
120
experimentwise.
Alfa 0.05

2-1 65.7 -197.1 328.4
2-3 141.3 -134.2 416.8
2-0 473.3 210.6 736.0 ***
1-2 -65.7 -328.4 197.1
1-3 75.6 -199.9 351.2
1-0 407.6 144.9 670.3 ***
3-2 -141.3 -416.8 134.2
3-1 -75.6 -351.2 199.9
3-0 332.0 56.5 607.5
0-2 -473.3 -736.0 -210.6 ***
0-1 -407.6 -670.3 -144.9 ***
0-3 -332.0 -607.5 -56.5
experimentwise.
Alfa 0.05

A 63.947 6 2
BA 48.780 6 1
B 36.613 6 3
C 13.613 6 0
121
VARIABLE ST:
DIA 1: t Tests (LSD) para ST
experimentwise.
Alfa 0.05

A 1572.3 6 2
BA 1435.3 6 1
BA 1403.0 6 3
B 1201.3 6 0
experimentwise.
Alfa 0.05

2-1 66.73 -79.76 213.22
2-3 145.43 -8.21 299.07
2-0 158.83 12.34 305.32
1-2 -66.73 -213.22 79.76
1-3 78.70 -74.94 232.34
1-0 92.10 -54.39 238.59
3-2 -145.43 -299.07 8.21
3-1 -78.70 -232.34 74.94
3-0 13.40 -140.24 167.04
0-2 -158.83 -305.32 -12.34
0-1 -92.10 -238.59 54.39
0-3 -13.40 -167.04 140.24
122
experimentwise.
Alfa 0.05

2-1 347.0 -50.9 744.9
2-3 526.8 109.5 944.1
2-0 570.7 172.8 968.7 ***
1-2 -347.0 -744.9 50.9
1-3 179.8 -237.5 597.1
1-0 223.7 -174.2 621.7
3-2 -526.8 -944.1 -109.5
3-1 -179.8 -597.1 237.5
3-0 43.9 -373.4 461.3
0-2 -570.7 -968.7 -172.8 ***
0-1 -223.7 -621.7 174.2
0-3 -43.9 -461.3 373.4
experimentwise.
Alfa 0.05

A 1146.0 6 1
A 1064.7 6 3
A 967.0 6 2
A 914.7 6 0
123
VARIABLE SULFUROS:
DIA 1: t Tests (LSD) para SULF
experimentwise.
Alfa 0.05

A 8.8000 6 1
BA 8.0667 6 2
BA 7.8333 6 3
B 7.0000 6 0
experimentwise.
Alfa 0.05
Las comparaciones importantes del nivel 0.05 estn indicadas por ***

0-2 0.8000 -1.0455 2.6455
0-1 1.5667 -0.2788 3.4122
0-3 2.9567 1.0211 4.8922 ***
2-0 -0.8000 -2.6455 1.0455
2-1 0.7667 -1.0788 2.6122
2-3 2.1567 0.2211 4.0922 ***
1-0 -1.5667 -3.4122 0.2788
1-2 -0.7667 -2.6122 1.0788
1-3 1.3900 -0.5456 3.3256
3-0 -2.9567 -4.8922 -1.0211 ***
3-2 -2.1567 -4.0922 -0.2211 ***
3-1 -1.3900 -3.3256 0.5456
124
experimentwise.
Alfa 0.05

0-2 15.8000 14.2730 17.3270 ***
0-1 17.8333 16.3064 19.3603 ***
0-3 20.4780 18.8765 22.0795 ***
2-0 -15.8000 -17.3270 -14.2730 ***
2-1 2.0333 0.5064 3.5603 ***
2-3 4.6780 3.0765 6.2795 ***
1-0 -17.8333 -19.3603 -16.3064 ***
1-2 -2.0333 -3.5603 -0.5064 ***
1-3 2.6447 1.0432 4.2462 ***
3-0 -20.4780 -22.0795 -18.8765 ***
3-2 -4.6780 -6.2795 -3.0765 ***
3-1 -2.6447 -4.2462 -1.0432 ***
experimentwise.
Alfa 0.05

A 20.7667 6 0
B 17.4667 6 1
B 17.2000 6 3
C 13.5000 6 2
125
VARIABLE NO3:
DIA 1: t Tests (LSD) para NO3
experimentwise.
Alfa 0.05

A 2.4733 6 3
A 2.3217 6 0
B 1.6433 6 2
B 1.6133 6 1
experimentwise.
Alfa 0.05

0-3 0.04067 -0.07731 0.15864
0-1 0.05333 -0.05915 0.16582
0-2 0.07667 -0.03582 0.18915
3-0 -0.04067 -0.15864 0.07731
3-1 0.01267 -0.10531 0.13064
3-2 0.03600 -0.08197 0.15397
1-0 -0.05333 -0.16582 0.05915
1-3 -0.01267 -0.13064 0.10531
1-2 0.02333 -0.08915 0.13582
2-0 -0.07667 -0.18915 0.03582
2-3 -0.03600 -0.15397 0.08197
2-1 -0.02333 -0.13582 0.08915
126
experimentwise.
Alfa 0.05

1-0 0.1667 -0.6799 1.0133
1-3 0.2293 -0.6586 1.1172
1-2 0.2383 -0.6083 1.0849
0-1 -0.1667 -1.0133 0.6799
0-3 0.0627 -0.8252 0.9506
0-2 0.0717 -0.7749 0.9183
3-1 -0.2293 -1.1172 0.6586
3-0 -0.0627 -0.9506 0.8252
3-2 0.0090 -0.8789 0.8969
2-1 -0.2383 -1.0849 0.6083
2-0 -0.0717 -0.9183 0.7749
2-3 -0.0090 -0.8969 0.8789
experimentwise.
Alfa 0.05

A 1.2833 6 3
A 1.1550 6 2
A 1.1533 6 1
A 1.0150 6 0
127
VARIABLE NO2:
experimentwise.
Alfa 0.05

A 0.15000 6 1
A 0.14167 6 3
A 0.12167 6 2
A 0.09833 6 0
experimentwise.
Alfa 0.05

3-1 7.516 -2.035 17.066
3-2 7.544 -2.007 17.095
3-0 7.562 -1.988 17.113
1-3 -7.516 -17.066 2.035
1-2 0.028 -9.078 9.134
1-0 0.047 -9.059 9.153
2-3 -7.544 -17.095 2.007
2-1 -0.028 -9.134 9.078
2-0 0.018 -9.088 9.124
0-3 -7.562 -17.113 1.988
0-1 -0.047 -9.153 9.059
0-2 -0.018 -9.124 9.088
128
experimentwise.
Alfa 0.05

3-1 8.486 -2.310 19.282 ***
3-2 8.510 -2.286 19.306 ***
3-0 8.543 -2.253 19.339
1-3 -8.486 -19.282 2.310 ***
1-2 0.023 -10.270 10.317
1-0 0.057 -10.237 10.350 ***
2-3 -8.510 -19.306 2.286 ***
2-1 -0.023 -10.317 10.270
2-0 0.033 -10.260 10.327 ***
0-3 -8.543 -19.339 2.253
0-1 -0.057 -10.350 10.237 ***
0-2 -0.033 -10.327 10.260 ***
experimentwise.
Alfa 0.05

A 0.13667 6 1
BA 0.13000 6 3
BA 0.11833 6 2
B 0.09000 6 0
129
VARIABLE NH4:
DIA 1: t Tests (LSD) para NH4
experimentwise.
Alfa 0.05

A 30.745 6 2
A 28.962 6 3
A 23.058 6 1
A 21.413 6 0
experimentwise.
Alfa 0.05

2-0 3.705 -10.970 18.380
2-3 5.596 -9.795 20.987
2-1 6.448 -8.226 21.123
0-2 -3.705 -18.380 10.970
0-3 1.891 -13.500 17.282
0-1 2.743 -11.931 17.418
3-2 -5.596 -20.987 9.795
3-0 -1.891 -17.282 13.500
3-1 0.853 -14.538 16.244
1-2 -6.448 -21.123 8.226
1-0 -2.743 -17.418 11.931
1-3 -0.853 -16.244 14.538
130
experimentwise.
Alfa 0.05

1-2 12.320 -3.052 27.692
1-0 18.675 3.303 34.047 ***
1-3 26.910 10.788 43.032 ***
2-1 -12.320 -27.692 3.052
2-0 6.355 -9.017 21.727
2-3 14.590 -1.532 30.712
0-1 -18.675 -34.047 -3.303 ***
0-2 -6.355 -21.727 9.017
0-3 8.235 -7.887 24.357
3-1 -26.910 -43.032 -10.788 ***
3-2 -14.590 -30.712 1.532
3-0 -8.235 -24.357 7.887
experimentwise.
Alfa 0.05

A 13.357 6 1
A 11.735 6 0
B 6.638 6 3
B 5.810 6 2
131
VARIABLE PO4:
DIA 1: t Tests (LSD) para PO4
experimentwise.
Alfa 0.05

A 22.2283 6 1
A 21.5033 6 2
A 21.3667 6 3
A 20.6800 6 0
experimentwise.
Alfa 0.05

3-1 24.42 -8.23 57.07
3-0 26.28 -6.37 58.93
3-2 26.49 -6.16 59.14
1-3 -24.42 -57.07 8.23
1-0 1.86 -29.27 32.99
1-2 2.07 -29.06 33.20
0-3 -26.28 -58.93 6.37
0-1 -1.86 -32.99 29.27
0-2 0.21 -30.92 31.34
2-3 -26.49 -59.14 6.16
2-1 -2.07 -33.20 29.06
2-0 -0.21 -31.34 30.92
132
experimentwise.
Alfa 0.05

3-0 30.78 -8.13 69.68
3-2 30.96 -7.95 69.87
3-1 31.80 -7.11 70.70
0-3 -30.78 -69.68 8.13
0-2 0.18 -36.91 37.28
0-1 1.02 -36.07 38.12
2-3 -30.96 -69.87 7.95
2-0 -0.18 -37.28 36.91
2-1 0.84 -36.26 37.93
1-3 -31.80 -70.70 7.11
1-0 -1.02 -38.12 36.07
1-2 -0.84 -37.93 36.26
experimentwise.
Alfa 0.05

A 13.7333 6 3
A 13.2883 6 2
A 13.1583 6 0
A 12.0067 6 1
133
VARIABLE SULFATOS:
DIA 1: t Tests (LSD) para SULFA
experimentwise.
Alfa 0.05

A 3.432 6 2
A 3.160 6 1
A 2.383 6 0
A 0.668 6 3
experimentwise.
Alfa 0.05

1-3 1.47 -78.55 81.48
1-0 10.02 -66.27 86.31
1-2 38.02 -38.27 114.32
3-1 -1.47 -81.48 78.55
3-0 8.55 -71.46 88.57
3-2 36.56 -43.46 116.57
0-1 -10.02 -86.31 66.27
0-3 -8.55 -88.57 71.46
0-2 28.00 -48.29 104.30
2-1 -38.02 -114.32 38.27
2-3 -36.56 -116.57 43.46
2-0 -28.00 -104.30 48.29
134
experimentwise.
Alfa 0.05

2-1 2.88 -59.38 65.13
2-3 30.35 -34.95 95.65
2-0 45.81 -16.45 108.07
1-2 -2.88 -65.13 59.38
1-3 27.47 -37.82 92.77
1-0 42.93 -19.33 105.19
3-2 -30.35 -95.65 34.95
3-1 -27.47 -92.77 37.82
3-0 15.46 -49.84 80.76
0-2 -45.81 -108.07 16.45
0-1 -42.93 -105.19 19.33
0-3 -15.46 -80.76 49.84
experimentwise.
Alfa 0.05

A 127.25 6 2
B 72.74 6 3
B 71.79 6 1
B 71.48 6 0
135
VARIABLE PH:
DIA 1: t Tests (LSD) para pH
experimentwise.
Alfa 0.05

A 7.68000 6 0
BA 7.65333 6 2
BA 7.56167 6 3
B 7.54167 6 1
experimentwise.
Alfa 0.05

2-0 0.0133 -1.3257 1.3524
2-1 0.0667 -1.2724 1.4057
2-3 1.0263 -0.3780 2.4307
0-2 -0.0133 -1.3524 1.3257
0-1 0.0533 -1.2857 1.3924
0-3 1.0130 -0.3914 2.4174
1-2 -0.0667 -1.4057 1.2724
1-0 -0.0533 -1.3924 1.2857
1-3 0.9597 -0.4447 2.3640
3-2 -1.0263 -2.4307 0.3780
3-0 -1.0130 -2.4174 0.3914
3-1 -0.9597 -2.3640 0.4447
136
experimentwise.
Alfa 0.05

2-0 0.0267 -1.6189 1.6722
2-1 0.1067 -1.5389 1.7522
2-3 1.1827 -0.5432 2.9086
0-2 -0.0267 -1.6722 1.6189
0-1 0.0800 -1.5656 1.7256
0-3 1.1560 -0.5699 2.8819
1-2 -0.1067 -1.7522 1.5389
1-0 -0.0800 -1.7256 1.5656
1-3 1.0760 -0.6499 2.8019
3-2 -1.1827 -2.9086 0.5432
3-0 -1.1560 -2.8819 0.5699
3-1 -1.0760 -2.8019 0.6499
experimentwise.
Alfa 0.05

A 7.48333 6 1
A 7.47333 6 0
A 7.45833 6 3
A 7.41500 6 2
137
VARIABLE OD:
DIA 1: t Tests (LSD) para OD
experimentwise.
Alfa 0.05

A 2.1933 6 3
BA 1.9967 6 1
BA 1.9333 6 2
B 1.6850 6 0
experimentwise.
Alfa 0.05
Error de cuadrado medio 1.5686E9

3-1 39999 -10599 90598
3-2 40000 -10599 90598
3-0 40000 -10599 90598
1-3 -39999 -90598 10599
1-2 0 -48244 48244
1-0 0 -48243 48244
2-3 -40000 -90598 10599
2-1 -0 -48244 48244
2-0 0 -48244 48244
0-3 -40000 -90598 10599
0-1 -0 -48244 48243
0-2 -0 -48244 48244
138
experimentwise.
Alfa 0.05

3-1 360000 -95389 815389
3-2 360000 -95389 815389
3-0 360000 -95389 815389
1-3 -360000 -815389 95389
1-2 0 -434196 434196
1-0 0 -434196 434196
2-3 -360000 -815389 95389
2-1 -0 -434196 434196
2-0 0 -434196 434196
0-3 -360000 -815389 95389
0-1 -0 -434196 434196
0-2 -0 -434196 434196
experimentwise.
Alfa 0.05

A 0.35000 6 0
A 0.29500 6 2
A 0.28000 6 3
A 0.25833 6 1
139
DIA 1: t Tests (LSD) para FOTO
experimentwise.
Alfa 0.05
Diferencia menos significativa 215345

A 275000 6 3
A 235000 6 2
A 171667 6 0
A 78333 6 1
experimentwise.
Alfa 0.05

2-1 3066667 167097 5966236
2-3 3292430 251336 6333524 ***
2-0 3340633 441063 6240202 ***
1-2 -3066667 -5966236 -167097
1-3 225764 -2815331 3266858
1-0 273966 -2625604 3173536
3-2 -3292430 -6333524 -251336 ***
3-1 -225764 -3266858 2815331
3-0 48203 -2992892 3089297 ***
0-2 -3340633 -6240202 -441063 ***
0-1 -273966 -3173536 2625604
0-3 -48203 -3089297 2992892 ***
140
experimentwise.
Alfa 0.05

0-1 1650500 266176 3034824
0-3 1740971 289080 3192863
0-2 1796167 411842 3180491
1-0 -1650500 -3034824 -266176
1-3 90472 -1361420 1542363
1-2 145667 -1238657 1529991
3-0 -1740971 -3192863 -289080
3-1 -90472 -1542363 1361420
3-2 55195 -1396696 1507087
2-0 -1796167 -3180491 -411842
2-1 -145667 -1529991 1238657
2-3 -55195 -1507087 1396696
experimentwise.
Alfa 0.05

A 9566667 6 2
A 7566667 6 0
A 5966667 6 1
A 5300000 6 3
141
VARIABLE LEVADURAS:
DIA 1: t Tests (LSD) para LEVA
experimentwise.
Alfa 0.05

A 2066.7 6 3
A 1733.3 6 2
AB 1215.0 6 1
B 596.7 6 0
experimentwise.
Alfa 0.05
Error de cuadrado medio 1584702

0-1 526.7 -1006.7 2060.1
0-2 1159.2 -374.2 2692.6
0-3 1442.7 -165.6 3050.9
1-0 -526.7 -2060.1 1006.7
1-2 632.5 -900.9 2165.9
1-3 916.0 -692.3 2524.3
2-0 -1159.2 -2692.6 374.2
2-1 -632.5 -2165.9 900.9
2-3 283.5 -1324.8 1891.8
3-0 -1442.7 -3050.9 165.6
3-1 -916.0 -2524.3 692.3
3-2 -283.5 -1891.8 1324.8
142
experimentwise.
Alfa 0.05

2-3 29.13 -122.79 181.06
2-1 100.33 -44.52 245.19
2-0 208.50 63.64 353.36 ***
3-2 -29.13 -181.06 122.79
3-1 71.20 -80.73 223.13
3-0 179.37 27.44 331.29 ***
1-2 -100.33 -245.19 44.52
1-3 -71.20 -223.13 80.73
1-0 108.17 -36.69 253.02***
0-2 -208.50 -353.36 -63.64 ***
0-3 -179.37 -331.29 -27.44 ***
0-1 -108.17 -253.02 36.69***
experimentwise.
Alfa 0.05

AB 26.50 6 2
A 26.50 6 1
A 26.17 6 3
B 3.33 6 0
143
VARIABLE LACTOS:
DIA 1: t Tests (LSD) para LACTO
experimentwise.
Alfa 0.05

A 330333 6 2
A 330333 6 1
A 10001 6 0
A 2067 6 3
experimentwise.
Alfa 0.05

2-1 0 -1370765 1370765
2-0 526167 -844598 1896931
2-3 1279526 -158144 2717196
1-2 0 -1370765 1370765
1-0 526167 -844598 1896931
1-3 1279526 -158144 2717196***
0-2 -526167 -1896931 844598
0-1 -526167 -1896931 844598
0-3 753359 -684311 2191030
3-2 -1279526 -2717196 158144
3-1 -1279526 -2717196 158144***
3-0 -753359 -2191030 684311
144
experimentwise.
Alfa 0.05

3-2 91.8 -328.9 512.4
3-1 91.8 -328.9 512.4
3-0 327.4 -93.2 748.1
2-3 -91.8 -512.4 328.9
2-1 0.0 -401.1 401.1
2-0 235.7 -165.4 636.7
1-3 -91.8 -512.4 328.9
1-2 0.0 -401.1 401.1
1-0 235.7 -165.4 636.7
0-3 -327.4 -748.1 93.2
0-2 -235.7 -636.7 165.4
0-1 -235.7 -636.7 165.4
experimentwise.
Alfa 0.05

A 26.167 6 3
A 1.000 6 0
A 1.000 6 2
A 1.000 6 1
145
VARIABLE CT:
DIA 1: t Tests (LSD) para CT
experimentwise.
Alfa 0.05

A 27013 6 3
BA 17958 6 2
B 9663 6 1
B 8502 6 0
experimentwise.
Alfa 0.05

2-0 2498 -24544 29541
2-1 21900 -5142 48942
2-3 22639 -5723 51002
0-2 -2498 -29541 24544
0-1 19402 -7641 46444
0-3 20141 -8221 48504
1-2 -21900 -48942 5142
1-0 -19402 -46444 7641
1-3 739 -27623 29102
3-2 -22639 -51002 5723
3-0 -20141 -48504 8221
3-1 -739 -29102 27623
146
experimentwise.
Alfa 0.05

0-2 9840 -5549 25229
0-1 11319 -4070 26708
0-3 11719 -4421 27859
2-0 -9840 -25229 5549
2-1 1479 -13910 16868
2-3 1879 -14261 18019
1-0 -11319 -26708 4070
1-2 -1479 -16868 13910
1-3 400 -15740 16540
3-0 -11719 -27859 4421
3-2 -1879 -18019 14261
3-1 -400 -16540 15740
experimentwise.
Alfa 0.05

A 1275 6 2
A 1035 6 3
A 672 6 1
A 137 6 0
147
VARIABLE CF:
DIA 1: t Tests (LSD) para CF
experimentwise.
Alfa 0.05

A 927.8 6 3
BA 433.3 6 1
BA 369.5 6 2
B 175.0 6 0
experimentwise.
Alfa 0.05

3-0 11982846 -3198002 27163693***
3-2 11999911 -3180936 27180758
3-1 12000048 -3180799 27180895
0-3 -11982846 -27163693 3198002***
0-2 17065 -14457305 14491435***
0-1 17203 -14457167 14491572***
2-3 -11999911 -27180758 3180936
2-0 -17065 -14491435 14457305***
2-1 138 -14474232 14474507
1-3 -12000048 -27180895 3180799
1-0 -17203 -14491572 14457167***
1-2 -138 -14474507 14474232
148
experimentwise.
Alfa 0.05

3-2 3299877 -874442 7474196
3-1 3299977 -874342 7474296
3-0 3300118 -874201 7474437
2-3 -3299877 -7474196 874442
2-1 100 -3979957 3980157
2-0 241 -3979816 3980298
1-3 -3299977 -7474296 874342
1-2 -100 -3980157 3979957
1-0 141 -3979916 3980198
0-3 -3300118 -7474437 874201
0-2 -241 -3980298 3979816
0-1 -141 -3980198 3979916
experimentwise.
Alfa 0.05

A 5.667 6 1
A 3.000 6 2
A 2.500 6 0
A 1.667 6 3
149
VARIABLE HETEROTROFOS:
DIA 1: t Tests (LSD) para HETE
experimentwise.
Alfa 0.05

A 36241667 6 1
A 19725000 6 3
A 15408333 6 2
A 6466667 6 0
experimentwise.
Alfa 0.05

2-0 84916667 -119865929 289699262
2-3 121200000 -93577799 335977798
2-1 164333333 -40449262 369115929
0-2 -84916667 -289699262 119865929
0-3 36283333 -178494465 251061131
0-1 79416667 -125365929 284199262
3-2 -121200000 -335977798 93577799
3-0 -36283333 -251061131 178494465
3-1 43133334 -171644464 257911132
1-2 -164333333 -369115929 40449262
1-0 -79416667 -284199262 125365929
1-3 -43133334 -257911132 171644464
150
experimentwise.
Alfa 0.05

3-0 115916667 -89156814 320990149
3-2 123166667 -81906814 328240149
3-1 188000001 -17073481 393073482
0-3 -115916667 -320990149 89156814
0-2 7250000 -188279892 202779892
0-1 72083333 -123446559 267613226
2-3 -123166667 -328240149 81906814
2-0 -7250000 -202779892 188279892
2-1 64833333 -130696559 260363226
1-3 -188000001 -393073482 17073481
1-0 -72083333 -267613226 123446559
1-2 -64833333 -260363226 130696559
experimentwise.
Alfa 0.05

A 19291667 6 3
A 10991667 6 1
A 8416667 6 0
A 7691667 6 2
151
ANEXO H
PRUEBA PARA DEMOSTRAR INDEPENDENCIA ENTRE LAS VARIABLES DA Y

TRATAMIENTO
H0 : Tratamiento y da son variables independientes.

2
Probabilidad de X =1
p< 0.05, entonces no se rechaza la hiptesis.
Statistics for Table of DIA by TRAT
Statistic DF Value Prob

Chi-Square 9 0.1393 10.000
Likelihood Ratio Chi-Square 9 0.1395 10.000
Mantel-Haenszel Chi-Square 1 0.0000 10.000
Phi Coefficient 0.0385
Contingency Coefficient 0.0385
Cramer's V 0.0222
Sample Size = 94
152

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EVALUACIN DEL EFECTO DE LOS MICROORGANISMOS EFICACES

(EM) SOBRE LA CALIDAD DE UN AGUA RESIDUAL DOMSTICA

JUANITA CARDONA GMEZ

LUISA ALEJANDRA GARCA GALINDO

PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA

CARRERA DE MICROBIOLOGA INDUSTRIAL

LISTA DE TABLAS .................................................................................................................. iii

Tabla 2. Valores mximos y mnimos permitidos en parmetros convencionales de las

Tabla 3. Tipo y concentracin de microorganismos patgenos encontrados tpicamente

Tabla 4. Organismos propuestos en la literatura como indicadores de la contaminacin

Tabla 6. Criterios qumicos de la calidad del agua potable en Colombia ..........................8

Tabla 7. Criterios de la calidad qumica para caractersticas de tipo econmico o accin

Tabla 8. Parmetros fisicoqumicos ms importantes relacionados con la calidad de un

Tabla 9. Tipos de tratamientos para aguas residuales ................................................... 13

Tabla 10. Parmetros y concentraciones de las soluciones patrones empleadas para la

Tabla 11. Parmetros microbiolgicos monitoreados durante el estudio ........................ 24

Tabla 12. Parmetros fisicoqumicos monitoreados durante el estudio .......................... 24

Tabla 13. Precisin y exactitud obtenidos durante la verificacin de las tcnicas

Figura 2 Proceso de aplicacin de EM y toma de muestras. A) Aplicacin de dosis

Figura 3 Crecimiento de floraciones de algas observado sobre la superficie de las

Figura 4 Crecimiento en placa de los microorganismos evaluados durante el estudio. . 34

Figura 5 Comparacin de los valores medios obtenidos ( s) para A) hetertrofos

Figura 6 Comparacin de los valores medios obtenidos ( s) para A) Levaduras, B)

Figura 7 Comparacin de los valores medios obtenidos ( s) para pH, teniendo en

Figura 8 Comparacin de los valores medios obtenidos ( s) para A) oxgeno disuelto

Figura 9 Comparacin de los valores medios obtenidos ( s) para A) amonio, B)

Figura 10 Comparacin de los valores medios obtenidos ( s) para fosfatos (PO4),

Figura 11 Comparacin de los valores medios obtenidos ( s) para A) sulfuros y B)

Figura 13 Resultados obtenidos tras la realizacin del anlisis de componentes

ANEXO H............................................................................................................................ 1181

Uno de los problemas ambientales ms graves en la actualidad es la contaminacin del

La tecnologa del producto EM (del ingles efficient microorganisms), basada en la

2.1. Agua Residual (AR)

2.1.1. Aguas residuales domsticas (ARD)

En lo que se refiere a la composicin de compuestos qumicos, las ARD pueden

2.2. Calidad de un agua residual domstica

2.2.1. Parmetros biolgicos

Estas caractersticas se relacionan con los organismos y microorganismos, en particular,

En Colombia, en el decreto 1575 de 2007 por el cual se establece el sistema para la

Para evaluar la calidad biolgica de un agua se ha planteado, el uso de microorganismos

Tabla 3. Tipo y concentracin de microorganismos patgenos encontrados tpicamente

Streptococos fecales 103-104

2.2.2. Parmetros fisicoqumicos

Existen varios parmetros fisicoqumicos de importancia que caracterizan a las ARD y

En Colombia, en el Decreto 475 de 1998, en los Artculos 7 y 8 se indican los criterios

Tabla 5. Criterios organolpticos y fsicos de la calidad del agua potable en Colombia

CARACTERSTICAS EXPRESADAS COMO VALOR ADMISIBLE

CARACTERSTICAS EXPRESADAS COMO VALOR ADMISIBLE mg/L

Tabla 7. Criterios de la calidad qumica para caractersticas de tipo econmico o accin

CARACTERSTICAS EXPRESADAS COMO VALOR ADMISIBLE mg/L

Una breve descripcin de los parmetros ms importantes utilizados en la

El tratamiento de las AR se divide en preliminar, primario, secundario y terciario (Tabla

Tabla 9. Tipos de tratamientos para aguas residuales

2.4. Microorganismos eficaces (EM) y su uso en AR

EM es un cultivo mixto de microorganismos no modificados genticamente, con

Los microorganismos del EM poseen varias caractersticas tiles en procesos de

Aunque EM ha sido usado exitosamente en muchos aspectos de manejo ambiental no

2.5. Microorganismos del EM

2.5.1. Bacterias fotosintticas (Rhodopseudomonas palustris)

Dentro de gremio de organismos fotosintticos que hacen parte de EM se encuentra

R. palustris es encontrada comnmente en suelo y aguas y posee un metabolismo muy

Este microorganismo presenta un crecimiento fototautotrfico con H2, sulfuro y tiosulfato

Teniendo en cuenta las condiciones de crecimiento para la bacteria fototrfica