INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLGICAS
BIOQUMICA GENERAL
PRACTICA 2 REACCIONES DE AMINOCIDOS Y PROTENAS.
PRIMERA PARTE
VILA LAGUNA NELLY AIDEE
GUERRERO HERNNDEZ ANDREA
Introduccin
Las protenas son componentes principales de todas
nuestras clulas, estas estn conformadas por
aminocidos. Los aminocidos se agrupan de acuerdo a
su comportamiento qumico.
La sntesis de protenas ocurre mediante la unin entre
s de las cadenas de aminocidos, son distintos e
imparten diferentes comportamientos qumicos en las
estructuras de las protenas. Debido a la presencia de
diferentes aminocidos en las uniones peptdicas de las
protenas reaccionan con una variedad de compuestos
formando compuestos coloreados. Las reacciones de
coloracin que son especficas para aminocidos de
esas protenas y son importantes para la deteccin como
el dopaje de aminocidos y protenas. Existen tambin
reacciones generales por que sirven para caracterizar
grupos comunes a todas las protenas como grupos
"amino" o "uniones peptdicas".
Objetivos
Identificar la existencia de aminocidos en
distintas protenas a travs de reacciones que
los ponen en manifiesto.
Anlisis de la tcnica
Para el procedimiento de la prctica, primero
etiquetamos todos los tubos y les colocamos las
soluciones que bamos a analizar, posteriormente
comenzamos las diferentes reacciones.
Reaccin del plomo para cistena: En primera
instancia se coloc NaOH al 10% en cada uno de los
tubos correspondientes, para propiciar el medio alcalino
y posteriormente se agregaron 3 gotas de acetato de
plomo al 5% y se calent a bao mara, esto para que el
azufre presente reaccione para formar sulfuros. Este
sulfuro puede detectarse por la formacin de un
4QM1 SECCIN 4
EQUIPO 3
precipitado negro de sulfuro de plomo por adicin de
acetato de plomo.
Reaccin de la Ninhidrina: La Ninhidrina es un
poderoso agente y reactivo para la determinacin
general de aminocidos. En este caso se agreg a los
tubos correspondientes 3 gotas del reactivo de
Ninhidrina, esta reacciona con todos los aminocidos
alfa cuyo pH se encuentra entre 4 y 8, dando una
coloracin que vara de azul a violeta intenso.
Reaccin de Hopkins-Cole: Para esta reaccin se
agreg 10 gotas del reactivo de Hopkins-Cole y se
mezcl bien, despus se estratifico con cido sulfrico,
esta reaccin es positiva slo para las protenas que
contienen Triptfano. El cido concentrado hidroliza las
protenas en la interfase liberando el Triptfano para dar
el producto violeta.
Reaccin de Millon: Para esta reaccin, se agreg 3
gotas del reactivo de Millon a los tubos
correspondientes, posteriormente se llev a calentar a
bao mara, el primer paso de la reaccin de Millon
consiste en la nitracin del anillo fenlico de la tirosina,
por el cido ntrico del reactivo. La tirosina nitrada forma
complejos con los iones Mercurioso Hg(I) y Mercrico
Hg(II) del reactivo produciendo un precipitado rojo o una
solucin roja, ambos resultados positivos. Algunas
protenas pueden formar el precipitado rojo desde el
inicio, mientras que otras primero forman un precipitado
blanco, que se debe calentar para dar el color rojo
indicativo de la presencia de tirosina, por ello se llev a
calentamiento.
Reaccin Xantoproteica: Se coloc 1 mL de cido
ntrico a los tubos correspondientes, posteriormente se
calent la mezcla y despus se enfri, de inmediato se
estratifico con 1 mL de hidrxido de amonio concentrado,

la reaccin dio positiva para la aparicin de un color
amarillo o naranja en la interfase, los anillos benceno de
tirosina y triptfano estn activados y reaccionan
fcilmente, mientras que el benceno de la fenilalanina no
tiene sustituyentes que lo activan y reacciona con ms
dificultad. El color amarillo se intensifica en medio
alcalino por ello la aplicacin del hidrxido de amonio.
Reaccin de Biuret: Para el procedimiento primero se
colocaron 2 mL de NaOH al 10 % para dar el medio
alcalino necesario para que se lleve a cabo la reaccin y
despus se agreg 3 gotas del reactivo de Biuret
(solucin de CuSO4 al 0.5%) y mezclo muy bien, la
formacin de un color violceo o la precipitacin de
hidrxido cprico significa que la prueba fue positiva. La
prueba consiste en la formacin de un complejo entre al
menos dos enlaces peptdicos consecutivos con un ion
cprico Cu(II) en medio alcalino. El complejo es de color
violeta y la intensidad depende del nmero de enlaces
presentes.
RESULTADOS
Tabla 1. Resultados de las reacciones llevadas a cabo en
protenas, aminocidos y agua
Figura 1. Reaccin del plomo para Cistena
Figura 1.1 Reaccin de Hopkins-Cole
Figura 1.2 Reaccin de Milln
Discusin
De las pruebas realizadas en el laboratorio, dos de ellas
fueron pruebas generales para aminocidos la prueba de
Ninhidrina y la de Biuret, mientras que las otras cuatro
fueron especficas para ciertos aminocidos
dependiendo del grupo R que contenan.
Reaccin del plomo para Cistena: Esta
prueba es especfica para detectar grupos
sulfhdricos y en especfico para la cistena, en
este caso se obtuvieron cuatro tubos positivos,
se utiliz la tcnica de cruces para denotar que
tanto se present positiva la prueba, en primera
instancia la cistena fue la que principalmente dio
la prueba positiva (precipitado negro), siguen
con la albmina, la peptona y despus la
gelatina, para estos 3 ltimos, que son
protenas, se puede corroborar con la
bibliografa, que la albmina contiene mucha
ms cistena (grupos azufrados) que la peptona
y la gelatina, que lo tienen en menor proporcin,
pero a pesar de ello dieron la prueba positiva.
Reaccin de la Ninhidrina: Esta prueba fue
general, debido a que identifica los grupos amino
libres y reacciona con ellos, todos los
aminocidos y protenas que se utilizaron dieron
la prueba positiva, por obviedad a que todos
ellos contienen en su estructura un amino libre.
Reaccin de Hopkins-Cole: Esta prueba
tambin fue especfica, ya que se lleva a cabo
para la identificacin de aminocidos que en su
 grupo R contengan un anillo indol que reacciona Reaccin Xantoproteica: Esta prueba
con el cido glioxlico formando un compuesto caracteriza a los aminocidos aromticos
color violeta, por ende, el triptfano al ser el activados y protenas en solucin. Los
nico aminocido que contiene este grupo, fue el aminocidos reaccionan con cido ntrico
nico que nos dio positivo; por parte de las concentrado y forman nitrocompuestos de color
protenas, la albmina tambin fue positivo, esto amarillo. Resultados (+), excepto; Fenilalanina y
debido a que en su composicin, aparte de tener agua.
la cistena que se vio anteriormente, tambin Reaccin de Hopkins Cole: El anillo indlico
contiene triptfano y en el caso de la peptona presente en la cadena lateral de los alfa-
que ocurri lo mismo, as una vez ms aminocidos libres o haciendo parte de pptidos
corroboramos los datos encontrados en la y protenas se puede reconocer mediante
bibliografa. reaccin con el cido glioxlico a pH cido,
Reaccin de Milln: Esta prueba especfica puesto que formo complejos de coloracin
consisti en la identificacin del grupo fenlico violeta-rojizo, permitiendo as identificar al
como grupo R en la estructura de un amino Triptfano, siendo este el nico de contener al
acido, en este caso la tirosina fue el nico anillo. Resultados (+), excepto; Fenilalanina,
aminocido que dio la prueba positiva, as como agua y Gelatina.
las tres protenas que se utilizaron, gelatina, Reaccin de Biuret: Es una prueba general
peptona y albmina, comprobando que en su para protenas y pptido no menor de 3
estructura contienen este aminocido. unidades de aminocidos. Determino la
Reaccin Xantoproteica: Con esta prueba presencia de enlaces peptdicos en una muestra
logramos identificar aminocidos aromticos debido a la formacin de un compuesto de
activados, en este caso el triptfano, tirosina y coordinacin de color violeta. Resultados (+).
fenilalanina dieron la prueba positiva, adems de
las protenas utilizadas, como habamos visto en Pregunta extra Investigar 15 ejemplos de protenas
pruebas pasadas como la de Millon y la de
grupos sulfhdricos, las protenas utilizadas
contenan los aminocidos que dan la prueba
positiva, gracias a ello tambin dieron esta
prueba positiva.
Reaccin de Biuret: Esta fue la segunda
prueba general que llevamos a cabo, en la cual
identificamos, en general, protenas y pptidos
de cadena no menor a tres aminocidos, de esta
manera todos los aminocidos y protenas nos
dieron la prueba positiva, debido a que
claramente todos contiene ms de tres
aminocidos en su estructura.
Conclusiones
Reaccin de Ninhidrina: Permite identificar la
presencia de grupos amino libres. El grupo -
amino de los aminocidos al reaccionar con la Referencias
ninhidrina forma complejos de color azul-violeta.
Mena, C.. (2004). Funciones y clasificacin de
Resultados (+), excepto el agua.
las protenas. Febrero 23, 2017, de Consejera
Reaccin de Plomo para Cistena: Los
de la educacin, junta de extremadura Sitio web:
Aminocidos azufrados como Cistena se
http://e-
reconocen por la formacin de precipitados de
ducativa.catedu.es/44700165/aula/archivos/repo
Sulfuro de Plomo de color gris oscuro o negro
sitorio/3250/3374/html/14_funciones_y_clasificac
que se forman cuando reacciona con Acetato de
in_de_las_proteinas.html
Plomo en medio alcalino. Resultados (+) excepto
http://www.bioquimica.dogsleep.net/Teoria/archiv
agua.
os/Unidad30.pdf. Consultado Febrero 23 de
Reaccin de Milln: El anillo fenlico tiene un
2017.
comportamiento caracterstico frente a las sales
de Mercurio a pH cido, formando complejos
color rojo ladrillo con el anillo fenlico y las
protenas que lo contienen. Resultados (+),
excepto; Fenilalanina y agua.