INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLGICAS

PRACTICA AISLAMIENTO DE DNA PLSMIDICO
VILA LAGUNA NELLY AIDEE BIOQUMICA GENERAL
GUERRERO HERNNDEZ ANDREA 4QM1 SECCIN 4

INTRODUCCIN
Los plsmidos son molculas de DNA OBJETIVO
extracromosmico capaces de replicar
autnomamente. La replicacin en plsmidos Aislar DNA plsmidico mediante
depende, en mayor o menor extensin de electroforesis en gel agarosa
protenas, codificadas por genes de la bacteria. RESULTADOS
Las molculas de ADN plasmdico, adoptan
una conformacin tipo doble hlice al igual que
el ADN de los cromosomas, aunque, por
definicin, se encuentran fuera de los mismos.
Se han encontrado plsmidos en casi todas las
bacterias. A diferencia del ADN cromosomal,
los plsmidos no tienen protenas asociadas.
Los plsmidos pueden utilizarse como vectores
de clonaje y amplificacin de fragmentos de
DNA que se hayan insertado en los mismos
mediante tcnicas, estos fragmentos replican y
se transmiten a las clulas hijas conjuntamente
en el resto del plsmido.
Los plsmidos contienen con frecuencia genes
que codifican enzimas tiles para la bacteria
hospedadora como genes de resistencia o la
produccin de antibiticos de degradacin de
compuestos orgnicos, de toxinas y de
produccin de enzimas de restriccin y
modificacin, entre otros.
La mayora estn constituidos por un DNA
bicatenario circular cerrado de tamao muy
variable, que se puede aislar de la bacteria en
una gran variedad de especies bacterianas, Se encontr el DNA renaturalizado de las
pero suele tener un rango de hospedador bacterias transformadas con un plsmido
estrecho. pUcl9 en la forma superenrollada, sin
embargo, no se pudieron observar las tres (donde el fragmento de ADN insertado
isoformas juntas. codifica para alguna protena de inters).
De acuerdo al mtodo empleado MINI-
PREP o Lisis alcalina, cuanto ms
DISCUSIN chico sea el plsmido, mejor es el
resultado obtenido, ya que a medida que
Se observ en el transiluminador, la
se incrementa el tamao, sus
electroforesis llevada a cabo, en la cual solo se
propiedades se asemejan cada vez ms
logr identificar la isoforma de la molcula de
a las del ADN cromosmico.
DNA superenrollada, sin embargo tambin
buscbamos observar las otras dos isoformas, REFERENCIAS
las cuales eran circular relaja, siendo la primera
Alberts B., Bray D., Lewis J., Raff M.,
en observarse debido a que se rompe una de
las cadenas y por ello su corrimiento es muy Roberts K., Watson J.D. Biologa
poco, la segunda isoforma que se esperaba molecular de la clula (1996) Omega.
observar, despus de la circular relajada, era la https://ibcmunq.files.wordpress.com/201
lineal, la cual nos indica que ambas cadenas se 0/03/tp4.pdf. Consultado: 18/05/2017
rompieron y por ello su corrimiento es
intermedio, por ltimo la isoforma que si
logramos observar, aunque muy poco, es la
superenrollada la de mayor corrimiento.
Tambin la larga cadena de corrimiento que se
observa es la del RNA la cual tuvo el mayor
corrimiento ya que es la de menor peso
molecular.
CONCLUSIONES
Del plsmido obtenido, la isoforma que
se obtuvo en mayor proporcin fue DNA
superenrollado.
El DNA plasmdico de acuerdo a sus
diferentes conformaciones puede correr
a diferentes velocidades en un gel
durante la electroforesis.
Los plsmidos pueden ser modificados
para utilizarse como vectores de clonado
(para amplificar un fragmento de ADN de
inters), o como vectores de expresin