AISLAMIENTO DE FITONEMATODOS EN RAICES POR EL MTODO DE

BAERMANN MODIFICADO

INTRODUCCION:
Los nematodos son un grupo de animales pluricelulares de origen acutico que carecen de
sistema circulatorio y respiratorio, son vermiformes, no segmentados, ms o menos
transparentes, cubiertos de una cutcula hialina, la cual est marcada por estras u otras
marcas, transversalmente son redondeados y tienen cavidad oral. Este grupo de organismos
forma parte de los componentes ms abundantes de la fauna del suelo, puesto que se
encuentran en todos los hbitats y ecosistemas de la bisfera.
Los nematodos fitoparsitos estn ampliamente distribuidos en suelos naturales y
cultivados en todo el mundo. El gnero Meloidogyne es el ms importante por su
distribucin, el rango de hospedantes y los daos que origina en las plantas cultivadas, en
las hortalizas frecuentemente muestra altas poblaciones y predomina sobre otros nematodos
fitoparsitos.
Los nematodos conforme sus hbitos alimenticios pueden ser: especies saprofitas o de vida
libre, depredadores y parsitos de vegetales o animales los cuales se dividen en parsitos de
vertebrados, invertebrados y de plantas (Hugot et al., 2001). Los nematodos fitoparsitos
son organismos bitrofos que se alimentan del citoplasma de las clulas vivas de su planta
hospedante, y secundariamente se convierten en agentes patgenos dependiendo de la
poblacin existente, susceptibilidad del cultivar y las condiciones existentes
(principalmente la temperatura del suelo).
Algunos de ellos estn muy especializados en infectar a determinadas especies vegetales,
mientras que otras son de amplia polifagia. En su mayora habitan en el suelo y colonizan
las races, aunque tambin algunas pueden parasitar las partes areas de las plantas. Los
nematodos fitoparsitos inducen enfermedades en forma directa porque ocasionan agallas
radicales, necrosis en races, deformaciones en tallos y bulbos, entre otros; e
indirectamente, por las interacciones con otros agentes fitopatgenos (hongos, bacterias y
virus).
En el pasado los daos causados por los nematodos a los cultivos, frecuentemente se
ignoraron o se atribuyeron a otras causas debido a que los fitonemtodos son todos
microscpicos, y a que no se dispona de informacin clara sobre su poder patgeno. Hoy
se sabe que son agentes patognicos que afectan al rendimiento y calidad de los cultivos
con las consiguientes implicaciones econmicas.
Los ataques de fitonemtodos no manifiestan una sintomatologa clara descartando posibles
deficiencias de agua y nutrientes en el suelo, cuando se sospecha la presencia de estos
fitfagos se procede a la toma de muestras y remisin de las mismas a un laboratorio
nematolgico para su debido procesamiento.
Las tcnicas actuales para el aislamiento de fitonemtodos, a partir de races, son mltiples
y diversas. En general todas ellas estn basadas en las diferentes densidades y tamaos que
presentan los distintos componentes de un suelo, y consisten en diferentes de lavado y
separacin de dichos componentes, hasta extraer los fitonematodos aislados de toda la
mezcla del suelo; dichas tcnicas podramos agruparlas en funcin a la muestra, como en
nuestro caso las races, del cultivo en cuestin y del nematodo a detectar.

OBJETIVOS:
- Conocer la importancia del estudio de estos organismos para determinar medidas de
control.
- Desarrollar y comprender las principales tcnicas que se utilizan para aislar
fitonemtodos en races.
- Realizar los procedimientos preliminares de identificacin del agente causal de la
enfermedad en la planta.

MATERIALES:
- Muestra de races de:
Yuca
Verdolaga
- Copas de plstico
- Papel higinico
- Coladores pequeos
- Laminas
- Laminillas
- Microscopio ptico

MTODOS:

- MTODO DE BAERMANN MODIFICADO EN COPA:

1. Homogeneizar la muestra de races (y tierra). Adicionar una copa para sedimentacin

con papel higinico (o papel filtro).
2. Colocar la muestra sobre la capa de papel higinico previamente humedecido.
3. Verte por las paredes solucin salina fisiolgica hasta cubrir la muestra.
4. Dejar reposar 7 das.
5. Extraer el sedimento con una pipeta.
6. Colocar el sedimento sobre una lmina portaobjetos y cubrir con una laminilla.
 7. Observar en el microscopio.

DISCUSIN:

- En la presente prctica para el aislamiento y deteccin de fitonemtodos, se

recolectaron muestras de races, las cuales presentaran ndulos. Debido a que los
fitonemtodos se caracterizan por el desarrollo de una sofisticada interaccin con
las races de la planta hospedera donde inducen la formacin de clulas
multinucleadas gigantes y agallas, que slo pueden ser observadas cuando la planta
se desecha (Jones et al., 2001; Snchez, 2007).

- Segn Perry & Moens, 2006, Los nematodos fitoparsitos, segn el gnero, tienen
en la regin anterior (cabeza) un estilete usado para perforar o penetrar las clulas
de las plantas y a travs de l extraer los nutrientes, causando enfermedades en
diferentes cultivos. Por ello, en la presente prctica, se logr encontrar la presencia
de nemtodos, sin embargo, todos estos fueron clasificados como saprfitos y no
como parsitos (fitonemtodos) por la ausencia del estilete, el cual es considerado
un rgano de adaptacin al parasitismo.

- La tcnica usada denominada Tcnica de Baermann modificada en copa, se basa

en los principios de movilidad de los nemtodos y de mayor densidad de estos que
el agua, por lo que este mtodo funciona solamente para nemtodos muy mviles,
normalmente los nemtodos parsitos tienen escasa movilidad, siendo los de vida
libre los que ms se mueven y los que ms abundantes resultan en este mtodo de
extraccin, la tcnica de Baermann se fundamenta en s, en la migracin activa o
movimiento de las larvas promovida por el ingreso de agua en la muestras, las
cuales por filtracin y diferencia de densidades, son las que se hunden sobre el
fondo, donde pueden ser colectadas para su identificacin. Este mtodo se
fundamenta en la capacidad de las larvas de migrar hacia el fondo de la copa por el
termotropismo e hidrotropismo positivo para concentrarlas biolgicamente. La
sensibilidad vara entre 59,5% y 80% (Tello R. & Canales M.; 2000).

- Con este mtodo se logr la obtencin de larvas de nematodos en 1 de las 3

muestras recolectadas. Sin embargo, los resultados fueron negativos en la deteccin
de fitonemtodos. Esto puede explicarse debido a la realizacin de una mala tcnica,
debido a que la tcnica de Baermann modificada en copa se usa para muestras de
suelos.
 - Por ello, lo recomendable para el trabajo de fitonemtodos en races, sera la previa
incubacin de las muestras de races con ndulos, adicionndoles agua tibia a unos
25C, ya que al darle las condiciones ideales para su crecimiento, los nematodos
saldran y a partir de esto continuar con la tcnica de Baermann modificada en copa
para que por filtracin, estos caigan.

CONCLUSIONES
- La deteccin de fitonemtodos en la presente prctica fue de resultado negativo.

- Es necesaria la presencia del estilete para determinar la deteccin de un nematodo

fitoparsito, debido a que ste es considerado un rgano de adaptacin al
parasitismo.

- Para trabajar con races es necesario la previa incubacin de las muestras con
ndulos, porque al darle las condiciones ideales para su crecimiento, saldrn los
nematodos y se contina con la tcnica de Baermann modificada en copa.

Referencias Bibliogrficas:
- Frapolli Daffari, Elvira. 2000 .Los nematodos fitoparsitos. Junta de Andaluca,
Consejera de agricultura y pesca.
- Perry, R. & Moens, M. 2006. Plant nematology. CAB International, London.
- Tello R, Canales M. 2000. Tcnicas de diagnstico de enfermedades causadas por
enteroparsitos. Diagnstico [en lnea] [acceso 23 de Setiembre de 2016]; 39(4): [2
p.] Disponible en: www. fihu -diagnostico.org.pe/revista/numeros/2000/.../197-
198.html
- Agrios, G. N. 2005.Plant pathology. 5th ed. Elsevier academic Press. Amsterdam,
Boston, Heidelberg, London, New York, Oxford, Paris, San Diego, san Francisco,
Singapore, Sydney, Tokyo. 992 pp.