Vous êtes sur la page 1sur 7

PRACTICA 03 y 04

EXTRACCION Y CARACTERIZACIN DE COLORANTES

I. INTRODUCCIN

En la actualidad existe una creciente demanda en el uso de colorantes de origen natural, en


remplazo de los colorantes artificiales, utilizados en la industria procesadora de alimentos;
productos como el maz morado, camote, manzana, fresa, cebolla, entre otros contienen el
colorante antocianina, que puede ser extrado utilizando mtodos de extraccin adecuados;
esta realidad ha generado el inters por investigar sobre los colorantes naturales y los
mtodos de extraccin a utilizar, as como su aplicacin en la industria de alimentos.

Los colorantes son compuestos que tienen diferentes propiedades fsicas, sobre todo en lo
que es la incidencia de la luz y emisin del mismo. Las caracterizaciones de los colorantes
se basan en determinacin por mtodos espectrofotomtricos, espectro infrarrojo, y
algunos por cromatografa de capa delgada; en funcin del tipo de colorante y su origen,
donde cada tipo de colorante tiene diferentes longitudes de onda respectivos, respecto a la
UV visible. Estas caractersticas se ven influenciadas por la estructura qumica,
propiedades fsicas, medios de extraccin (solventes) entre otros aspectos.

El maz morado es una variedad pigmentada del Zea mays L., cuyos granos y coronta
presentan color morado. Investigaciones recientes han revelado la presencia de compuestos
tales como: un dmero de cianidina, derivados mono y di-glicosidados de cianidina,
pelargonidina, peonidina y otros fenlicos (1,2,3). Las caractersticas estructurales de las
antocianinas, su relativa estabilidad en medio acuoso segn el pH, con la presencia de
estructuras tales como el catin flavilium, una base quinoidal, una pseudo base carbinol y
una chalcona (4,5,6), determinan una mayor estabilidad frente a cambios de pH,
temperatura y exposicin a la luz, debido a procesos de co-pigmentacin y asociacin
intermolecular e intramolecular que se desarrollan en el medio (1,7), convirtiendo a estos
compuestos en fuentes potenciales de colorantes naturales (1,8,9), sustancias activas de
alimentos funcionales, nutracuticos y medicamentos (10,11). En este trabajo se
investigaron los factores pH, solvente, temperatura y tiempo relacionados a la extraccin
de antocianinas, siendo el objetivo la identificacin de las condiciones ptimas para la
extraccin de antocianinas de las corontas de maz morado.
.
Se plantean diversas metodologas de extraccin, en las cuales se busca por cierto
equilibrio entre los rendimientos, mnima cantidad de compuestos contaminantes y el
evitar costos muy altos, de igual modo se plantean diversas metodologas de
caracterizacin, en las cuales se buscan ciertos criterios de seleccin de mtodos de
extraccin, equilibrio entre los rendimientos, mnima cantidad de compuestos
contaminantes, producto final de calidad y el evitar costos muy altos.
II. OBJETIVOS

- Conocer los diferentes mtodos de extraccin de antocianina, a partir del maz


morado
- Conocer el proceso de extraccin de colorantes a partir de materias primas
vegetales.
- Conocer el proceso de caracterizacin de colorantes extrados
- Familiarizar al estudiante con los parmetros que rigen los mtodos de extraccin y
caracterizacin.
- Conocer los aspectos relacionados con el colorante antocianina, sus caractersticas
qumicas-fsicas.

III. FUNDAMENTO TERICO

3.1. Extraccin de colorante

El color de las frutas y legumbres se debe a los pigmentos localizados en los plastos,
vacuolas y el lquido citoplasmtico de las clulas, muchas veces limitado slo a las clulas
epidrmicas (por ejemplo, algunas variedades de uvas). Los pigmentos ms caractersticos
pertenecen a tres grandes grupos: clorofilas, carotenoides y antocianinas.

3.1.1. Flujo General para la obtencin de Colorante: El flujo convencional a seguir se


explica a continuacin:

a. Recepcin de la materia prima


La materia prima que contiene el colorante natural generalmente es de origen vegetal tales
como frutas, races y hojas; muy poca materia prima es de origen animal, la ms conocida
es la cochinilla, insecto del cual se obtiene el carmn.

b. Acondicionamiento de la materia prima


Comprende operaciones como el lavado, triturado o molido, secado y en algn blanqueado,
dependiendo de la naturaleza de la materia prima a emplear.

c. Extraccin del colorante


El mtodo de extraccin que se utiliza para la extraccin de colorantes naturales es el de
lixiviacin o sea la extraccin de uno o ms constituyentes de un soluto, mediante el uso de
un solvente.
Los factores que afectan la velocidad de extraccin son:

Tamao de las partculas,


Tipo de solvente,
Temperatura y tiempo,
Velocidad de agitacin,
Relacin materia prima : solvente,
pH de extraccin.
d. Separacin
La separacin del colorante puede incluir operaciones como: precipitacin, filtracin,
centrifugacin, sedimentacin, evaporacin, secado por atomizacin o cristalizacin.

e. Purificacin
Se realiza con el objeto de eliminar todos los compuestos que impurifican al colorante.

f. Secado
Se realiza para obtener un colorante en polvo estable. Se puede llevar a cabo en un secador
de tnel (temperatura no > a 80C), en un atomizador o en un liofilizador.

3.2. Caracterizacin de colorante

Para caracterizar el colorante se usan tcnicas de anlisis como: espectroscopa infrarroja,


UV-Visible y cromatografa en capa delgada.

3.2.1 Anlisis cromatogrfico en capa delgada:

Se seleccionan diferentes eluentes, tales como: cloroformo, acetato de etilo y ter de


petrleo en relacin 7:3, acetato de etilo y metanol. El colorante se diluye en un solvente
como cloroformo, acetato de etilo y ter de petrleo, o acetato de etilo para hacer una
cromatografa de capa fina.
De los eluentes utilizados, todos separan un solo componente entre la parte intermedia y el
80 % de placa. Sin embargo, utilizando como eluente metanol, el colorante se logra separar
ligeramente en 2 componentes, uno en la parte intermedia de color rojo-anaranjado y el
otro un poco ms arriba.
La Bixina pura, se separa en la parte intermedia, comprobando as que uno de los
componentes presentes en el colorante obtenido es la bixina.

3.2.2 Anlisis UV-Visible:

La bixina y los ismeros se determinan espectrofotomtricamente, al igual que los


pigmentos amarillos (orellina) en un espectrofotmetro Spectronic 20, Genesys 2PC. Para
determinar la longitud de onda a la cual el colorante tiene la mxima absorbancia, se toma
1 gramo de muestra del colorante y se transfiere a un baln de 100 mL aforando con
solucin al 5% de KOH.
Luego se toma una alcuota de 1 mL de la solucin anterior y se lleva a un segundo baln
de 100 mL y se afora con solucin al 5% de KOH. Mediante el espectrofotmetro se hace
un barrido de absorbancias entre 300 nm y 600 nm.
La grfica de absorbancia vs. Longitud de onda, Figura 1, deja ver claramente que la
mxima absorbancia se encuentra en un rango de 450 nm a 500 nm de longitud de onda.
A 480nm se presenta la mayor absorbancia para el colorante del achiote.
Figura 1. Grfica de absorbancia vs. Longitud de onda para el colorante del achiote

Absorbancia vs. Longitud de onda para el colorante de achiote

Longitud de onda (nm)

3.2.3 Espectro infrarrojo:

El espectro infrarrojo del colorante se obtiene por el mtodo de la pastilla de KBr, en un


espectrofotmetro Perkin-Elmer modelo Spectrum DX.
El espectro obtenido muestra un pico sobresaliente aproximadamente a los 1600 cm -1,
representativo de los grupos carbonilos, los cuales son caractersticos de la estructura
qumica de la bixina. Entre los 1700 cm-1 y los 1800 cm-1 se presenta una serie de picos
consecutivos que, aunque no son muy sobresalientes, son representativos de los dobles
enlaces en las estructuras orgnicas, lo cual tambin es caracterstico de la estructura de la
bixina.

IV. MATERIALES Y MTODOS

4.1. Materia Prima

- Coronta de Maz Morado (Zea mays L.)

4.2. Materiales y equipos

- Espectrofotmetro UV Visible
- Potencimetro
- Balanza
- Fiolas de 100 mL
- Cubetas de vidrio
- Cubetas de cuarzo
- Vasos de precipitacin de 250 y 500 mL
- Pipetas
- Agitador
- Baguetas
- Sistema de filtracin al vaco
- Telas de seda para filtrar
- Balanza
- Potencimetro
4.3. Reactivos

- KOH 5%
- Cloroformo
- Acetato de etilo
- ter de petrleo
- Metanol
- Pastilla de KBr
- cido clorhdrico 3N
- Hidrxido de sodio al 1%
- Alcohol etlico industrial
- Agua potable

4.4. Metodologa Experimental

4.4.1. Extraccin de colorante: Se evaluarn tres mtodos de extraccin: agua, con soda y
con alcohol. Las etapas de extraccin en cada caso se exponen a continuacin.

a. Extraccion con agua


Se tom en cuenta los siguientes parmetros:

- Relacin materia prima:solvente = 1:7,5


- Velocidad de agitacin = 650 rpm.
- Temperatura de extraccin = ambiente
- Tiempo de extraccin = 25 min.
- Nmero de etapas de extraccin = una

b. Extraccin con soda al 1%


Se tom en cuenta los siguientes parmetros:

- Relacin materia prima:solvente = 1:3,4


- Velocidad de agitacin = Manual
- Temperatura de extraccin = Ambiente
- Etapas de lavado =6

Para las etapas de lavado se proceder de la siguiente forma:

Etapas Tiempo (min) Solvente


1ra. Etapa 8 soda al 1%
2da. Etapa 8 soda al 1%
3ra. Etapa 8 agua
4ta. Etapa 8 agua
5ta. Etapa 8 agua
6ta. Etapa 8 agua

La precipitacin se har con HCl 3N hasta pH cido


c. Extraccin con alcohol etlico industrial de 96G.L.

Se tom en cuenta los siguientes parmetros

- Relacin materia prima:solvente = 1:2


- Velocidad de agitacin = manual
- Temperatura de extraccin = ambiente
- Etapas de lavado =5

Para las etapas de lavado se procedi de la siguiente forma:

Etapas Tiempo (min) Solvente


1ra etapa 10 Alcohol
2da etapa 10 Alcohol
3ra etapa 10 Alcohol
4ta etapa 10 Alcohol
5ta etapa 10 Alcohol

Los controles a seguir durante la extraccin de la gelatina sern las siguientes:

- Determinacin de la humedad inicial de la materia prima


- Determinacin de rendimientos

4.4.2 Anlisis UV-Visible:

Colorante bixina y norbixina

Tomar 1 gramo de muestra del colorante y se transfiere a un baln de 100 mL aforando con
solucin al 5% de KOH.
Luego se toma una alcuota de 1 mL de la solucin anterior y se lleva a un segundo baln
de 100 mL y se afora con solucin al 5% de KOH.
Mediante el espectrofotmetro se hace un barrido de absorbancias entre 300 nm y 600 nm.
Luego graficar la absorbancia vs. Longitud de onda.
Hacer la misma grfica para cada una de las extracciones para determinar la curva de
rendimiento.
V. RESULTADOS Y DISCUSIONES

VI. CONCLUSIONES

VII. RECOMENDACIONES

VIII. REFERENCIAS

1. ARAUJO VARGAS, M. 1995. Estudio de la extraccin del colorante de maz


morado (Zea mays L.) con el uso de enzimas. Tesis para optar el grado de Mag. Sc
en Tecnologa de Alimentos de la Universidad Nacional Agraria La Molina,
Lima Per.

2. ARIAS, L.L. 1958. Proyecto de una planta de extracto maz morado en Lima.

3. FERNANDEZ, N.A. 1995. Extraccin y pre -purificacin de antocianinas de maz


morado. Tesis para optar el ttulo de Ing. En Ind. Alimentarias. U.N.A. Lima-Per.

IX. CUESTIONARIO