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Reconocimiento de

Biomolculas orgnicas

Integrantes:
Karina Espinoza
Mariafernanda Espinoza
Vanesa Maturana
Viviana Marcos
Paula Vera
Carrera: Enfermera
Profesor: Fernando Tapia Alvarez
Asignatura: Biologa celular
Introduccin

La mayor parte del peso de la materia orgnica de la clula corresponde a


macromolculas pertenecientes a cuatro clases: cidos nucleicos, protenas, polisacridos
y lpidos complejos. Ests macromolculas estn formadas por compuestos orgnicos de
menor peso molecular denominados elementos estructurales. Cada clase de
macromolcula se define por el tipo qumico de elemento estructural que se polimeriza
para formarla: nucletidos en el caso de los cidos nucleicos, aminocidos en el caso de
las protenas, y azucares simples (monosacridos) en el caso de los polisacridos. Los
lpidos complejos son ms variados y heterogneos en su composicin; sus precursores
incluyen cidos grasos, polialcoholes, azucares simples, aminas y aminocidos.

Sntesis de nucletidos
Los nucletidos son sustancias que estn presentes en todas partes y participan en casi
todos los procesos bioqumicos: son las unidades monomricas del ADN y ARN. La
importancia de los nucletidos en el metabolismo celular se pone de manifiesto por la
observacin de que casi todas las clulas pueden sintetizarlos de nuevo, como a partir de
los productos de la degradacin de cidos nucleicos.
Los precursores de los cidos nucleicos son los nuclesidos trifosfato de purinas y
pirimidinas, que tienen todos la misma estructura general. Una base purinica o pirimidinica
se una a travs de tomos de nitrgeno a una pentosa; est combinacin se llama
nuclesido. Se unen luego grupos fosfato en la posicin 5del nuclesido. Esta
combinacin es la que se denomina nucletido.

Sntesis de aminocidos
Las protenas, -en particular, en forma de enzimas- poseen funciones bioqumicas
importantsimas en los procesos biolgicos. Las unidades monomricas de las protenas,
los aminocidos, son metabolitos energticos y muchos de ellos constituyen nutrientes
esenciales en los animales. Para la biosntesis de protenas se requieren 20 aminocidos.
Solo la histidina tiene un origen biosinttico aislado. Los otros 19 se forman a travs de
rutas ramificadas, a partir de un nmero relativamente pequeo de metabolitos
precursores. En cuanto a su origen biosinttico, pueden agruparse en un total de cinco
familias: la familia del glutamato; del aspartato; aminocidos aromticos, de la serina y del
piruvato.

Sntesis de monosacridos
Los carbohidratos o sacridos son componentes esenciales de los organismos vivos, y
son de hecho, la clase ms abundante de clulas biolgicas en general, despus de las
protenas. El nombre de carbohidrato, que significa literalmente hidrato de carbono,
proviene de su composicin qumica. Los carbohidratos son o se clasifican en
polihidroxialdehidos o cetonas o sustancias que rinden tales compuestos por hidrolisis.
Los azucares simples se denominan monosacridos, cada molcula contiene de tres a
siete tomos de carbono. La cantidad de tomos de carbono en una molcula de azcar
simple se indica por medio del prefijo en su nombre. Por ejemplos, los azucares simples
con tres carbonos se denominan triosas. A partir de los monosacridos se forman los
disacridos (dos monosacridos unidos en una reaccin de sntesis), y los polisacridos
(se forman por decenas o centenas de monosacridos).

Sntesis de lpidos
Los lpidos constituyen el ltimo grupo fundamental de compuestos orgnicos
encontrados en la materia viva. Como los hidratos de carbono estn compuestos de
tomos de carbono, hidrogeno y oxgeno. Aun cuando constituyen un grupo muy diverso
de compuestos, comparten una caracterstica en comn: son molculas no polares de
modo que, a diferencia del agua, no tienen un extremo positivo y uno negativo (polo). Por
consiguientes, casi todos los lpidos son insolubles en agua, pero se disuelven con
facilidad en solventes no polares, como el ter o cloroformo. Los lpidos funcionan como
reserva energtica y proporcionan la estructura de las membranas y de algunas paredes
celulares.
Entre los grupos de lpidos encontramos: lpidos simples, denominados grasas o
triglicridos, compuestos por un alcohol (glicerol) y un grupo de cidos grasos; lpidos
complejos, que contienen elementos como fosforo, nitrgeno y azufre, adems de los ya
mencionados que se encuentran en los lpidos simples, denominados fosfolpidos, y estn
formados por glicerol, cidos grasos y un grupo fosfato; esteroides, que son
constituyentes importante de las membranas plasmticas de clulas animales, hongos y
plantas.

Objetivos generales
- Reconocimiento de glcidos, protenas, lpidos y nucletidos en muestras
biolgicas utilizando diferentes mtodos y test.
Metodologa, resultados y discusin
1) Reconocimiento de glcidos.
1A) Reconocimiento de glucosa.

Metodologa

Leche Liquida

Sol. Sacarosa

Agregar 5 Agregar 5
Tubos gotas de gotas de
Sol. Glucosa
de Reactivo Reactivo
ensayo Fehling A Fehling B

Sol. Almidn
Aplicar
Calor
H2O destilada
- Observar
- Observar
- Describir
- Describir
- Fotografiar
-Fotografiar

Reaccin Reaccin
(+) Color (-)
Rojo Cualquier
Ladrillo otro color
Resultados
Reaccin (+) Reaccin (-)
Leche liquida -
Sol. Sacarosa -
Sol. Glucosa +
Sol. Almidn -
H2O destilada -

Tubos con Fehling B Tubos con Fehling A

Tubos con sus Reacciones Fehling A - Fehling B

Discusin
A partir de las muestras de leche lquida, sol. Sacarosa, sol. Glucosa, sol. Almidn y H 2O
destilada, fuimos capaces de observar diferentes reacciones producto de los Reactivos
Fehling A (CuSO4) y Fehling B (Solucin de tartrato de sodio y potasio en medio alcalino).
Solo una de las soluciones fue positiva (sol. Glucosa), en las dems no se detect
presencia de glucosa. Ambos reactivos se deben guardar separados hasta el momento de
su uso, para evitar la precipitacin del hidrxido de cobre (II). El Fehling A y Fehling B son
utilizados como reactivos para la determinacin de azcares reductores, el poder reductor
que presentan los azcares proviene de su grupo carbonilo, que puede ser oxidado a
grupo carboxilo con agentes oxidantes suaves. Si el grupo carbonilo se encuentra
combinado no presenta este poder reductor.

2A) Reconocimiento de almidn.

Metodologa

1. Pltano

2. Manzana

3. Zanahoria

4. Papa Observar

5. Pan
Agregar 2 gotas Fotografiar
6. Arroz de reactivo lugol
Muestras 7. Cereal Registrar
resultados
8. Galleta

9. Harina

10. Azcar

11. Leche en
polvo

12. Maicena
10
1
9
2
8

1
1 3
7

4 6
12
5

Resultados
(Las muestras que contengan almidn reaccionaran con el reactivo, adquiriendo una
coloracin violeta-azulado.)
Los resultados se muestran en la siguiente tabla:

Reaccin (+) Reaccin (-)


1. Pltano +
2. Manzana +
3. Zanahoria +
4. Papa +
5. Pan +
6. Arroz +
7. Cereal +
8. Galleta +
9. Harina +
10. Azcar -
11. Leche en polvo -
12. Maicena +
7

8 6 10

5
9
12

4 12
1

11
3
2

3A) Reconocimiento de almidn en tubos de ensayo.

Metodologa
Observar
3 mL de solucin
glucosa Agregar
3 tubos 2 gotas Fotografiar
de 3mL de H2O Destilada de
ensayo reactivo
lugol. Registrar
3mL de solucin
resultados
almidn

Resultados

12
(Las muestras que contengan almidn reaccionaran con el reactivo, adquiriendo una
coloracin violeta-azulado.)
Los resultados se muestran en la siguiente tabla:

Reaccin (+) Reaccin (-)

Solucin almidn -
Solucin glucosa -
H2O destilada +

1
Discusin 2 3

Por qu razn el Lugol identifica la


presencia de almidn? La
reaccin del Lugol es un
mtodo que se usa para
identificar polisacridos. Por
ejemplo, el almidn al entrar
en con el reactivo de Lugol
(disolucin de yodo y yoduro
potsico) toma una coloracin azul-violeta caracterstica. Esta coloracin producida por el
reactivo se debe a que el yodo se introduce entre las espiras de la molcula de almidn,
por lo tanto, no es una verdadera reaccin qumica, sino que se forma un compuesto de
inclusin que modifica las propiedades fsicas de la molcula, dando paso a la coloracin
azul-violeta.

2) Reconocimiento de protenas.

Metodologa
20 gotas
3ml
Clara de Reactivo
huevo de Biuret
Reconoce

Tubo de Protena Coloracin


ensayo Albmina rosado/violeta

Resultados
Se extrajeron 3 ml de clara de huevo y se deposit en el tubo de ensayo, a continuacin,
se aadi 2 ml del reactivo de Biuret y se agito, al observar la muestra, fuimos capaces de
ver como comenz a adquirir una coloracin violeta sin mezclarse con la clara de huevo,
la muestra cada vez fue adquiriendo un tono ms oscuro y solamente se tio en la
superficie.

Agregando 2 ml de
Reactivo Biuret DiscusinReactivo
Protenas: Clara de huevo +
Biuret = color violeta

Cuando una protena se pone en contacto con un lcali concentrado, se forma una
sustancia compleja denominada Biuret.
Observamos que la reaccin de Biuret fue positiva con la solucin de clara de huevo,
adquiriendo una coloracin violeta que indica la presencia de enlaces peptdicos y, por
consiguiente, protenas. El reactivo de Biuret detecta la presencia de protenas, pptidos
cortos y otros compuestos con dos o ms enlaces peptdicos en sustancias de
composicin desconocida. Est hecho de hidrxido potsico (KOH) y sulfato cprico
(CuSO4), junto con tartrato de sodio y potasio (KNaC4O64H2O). El reactivo, de color
azul, cambia a violeta en presencia de protenas, y a rosa cuando se combina con
polipptidos de cadena corta.
La clara de huevo tiene una composicin de: ovomucina que corresponde al 1,5% de la
albmina protenica existente en el huevo y ovoalbmina que es la ms abundante.

3) Reconocimiento de lpidos.
Metodologa

3ml
Aceite comn Observar
Agregar una
Tubo de Aceite oliva pizca de Fotografiar
ensayo Sudan III
H2O destilada Describir

Resultados
Reaccin (+) Reaccin (-)
Aceite comn +
Aceite oliva +
H2O destilada -
Muestras Muestras al reaccionar con rojo sudan III

Discusin
A partir de las muestras utilizadas de aceite comn, aceite de oliva y H 2O destilada,
fuimos capaces de reconocer lpidos en ambos aceites al aadir rojo Sudn III. El Sudan
III es un colorante usado para reconocer grasas neutras en tcnicas histolgicas, por lo
tanto, es soluble en ellas.
4) Extraccin de ADN.
Metodologa
30 mL de
Agua en la
boca.

Enjuagar Vaciar Vaso Agregar


2,5 mL de solucin de
durante 30 Precipitado agua + detergente.
segundos. En

Agitar

Agregar

Alcohol
frio

Agregar

5 gotas de Azul Fotografiar


de Metileno

Observar

Describir

Fotografiar

Resultados
Despus de aadir detergente, agitar y agregar alcohol frio a la muestra, fuimos capaces
de observar pequeas burbujas dentro del recipiente (poco visibles). A continuacin,
agregamos 5 gotas de azul de metileno. La mezcla se convirti en una muestra
heterognea, quedando en el fondo una solucin transparente y en la superficie una
solucin de coloracin azul.

Discusin

El ADN constituye el material hereditario de


cada ser vivo. Todas las clulas que forman
a un individuo contienen una copia idntica
de ADN conformada por
Desoxirribonucletidos: Citosina (C),
Guanina (G), Adenina (A) y Timina (T),
formados, cada uno de ellos, por
desoxirribosa y un ion de fosfato.
La coloracin azul que se observa en la superficie de la muestra corresponde al ADN.
Para llevar a cabo la extraccin de ADN, el detergente, que contiene Lauril sulfato de
sodio, separa las grasas (lpidos) y las protenas que constituyen la membrana que rodea
a la clula y el ncleo. Una vez que esta membrana se ha quebrado, el ADN es liberado
de la clula.
El ADN se precipita en el alcohol fuera de la solucin, donde puede ser visualizado. El
alcohol, adems de permitirnos ver el ADN, es capaz de separar otros componentes
celulares del material gentico, dejndolos en la solucin acuosa.
Conclusin

Los objetivos del laboratorio fueron llevados a cabo con xito. Como resultado del trabajo
practico, aprendimos a diferenciar distintos tipos de molculas orgnicas presentes en las
muestras utilizadas en el laboratorio, la materia viva est organizada en niveles de
complejidad cuya base la conforman molculas de caractersticas y propiedades que
determinan los fenmenos qumicos que ocurren a nivel celular y de organismo.

En la primera y segunda actividad, al agregar dos gotas de lugol a cada muestra, algunas
adquirieron una coloracin violeta, de este modo, sabemos que el lugol reacciona con las
estructuras que forman el almidn, con la amilosa proporciona un color azul y cuando
reacciona la amilopectina con lugol la coloracin es rojiza, la combinacin de estos dos
colores nos proporciona el color violeta caracterstico del almidn.

En la tercera muestra, se comprob la reaccin de Biuret con la clara de huevo porque


esta contiene la protena albmina, por esta razn, para determinar si la muestra de
estudio resultaba positiva o negativa (el reactivo, de color azul, cambia a violeta en
presencia de protenas, y a rosa cuando se combina con polipptidos de cadena corta), la
solucin final deba adquirir una coloracin violeta, esto significa que ha detectado la
presencia de protenas (enlaces peptdicos).
En la cuarta actividad de reconocimiento de glcidos, se cumpli el objetivo: reconocer la
presencia de diferentes tipos de glcidos en distintas muestras y, adems conocer las
propiedades del Fehling A y B, que se utiliza para detectar la presencia de azcares
reductores. Existen dos tipos de Fehling, el Fehling A, de color azul, y el Fehling B, de
color rojo ladrillo.

En la quinta actividad de reconocimientos de lpidos, aprendimos que el sudn III detecta


las cadenas de hidrocarbonos y produce una reaccin hidrofbica donde los grupos no-
polares (los hidrocarbonos) se agrupan y son rodeados por molculas del reactivo.
Gracias a esto se utiliza como mtodo para demostrar la presencia de grasas mediante la
tincin de triglicridos, aunque tambin tie otro tipo de lpidos y, adems, es capaz de
teir los hidrocarbonos de rojo.

Finalmente, a partir de la ltima actividad de extraccin de ADN, fuimos capaces de


observar como la capa que qued en la superficie de la mezcla contena clulas en forma
de espirales que se separaron del agua gracias a los dems materiales agregados a la
solucin. El detergente es capaz de separar las clulas, porque disgrega las clulas de
suciedad de la superficie en donde stas se encuentren. Aprendimos tambin que el
alcohol tiene la funcin de aislar las cadenas del ADN. De esta manera, todos estos
procedimientos experimentales fueron realizados exitosamente.

Cuestionario

1. Indica la forma en que reacciona el Lugol con el almidn. Fundamenta


bioqumicamente.

La reaccin de Lugol se usa para identificar polisacridos. El almidn entra en


contacto con unas gotas de reactivo de Lugol (disolucin de yodo y yoduro
potsico) adquiriendo un color azul-violeta caracterstico. Esta coloracin se debe
a que el yodo se introduce entre las espiras de amilosa de la molcula de almidn.
Se forma un compuesto de inclusin que modifica las propiedades fsicas de esta
molcula, apareciendo la coloracin azul violeta.

2. Cules son las propiedades del Reactivo de Fehling al actuar en el


reconocimiento de glucosa?

Pone de manifiesto la presencia de azucares reductores (aldosas: glucosa, ribosa,


eritrosa, etc.). Se trata de una reaccin redox en la que el grupo aldehdo
(reductor) de los azcares es oxidado a grupo cido por el Cu2+ que se reduce a
Cu+. Tanto los monosacridos como los disacridos reductores reaccionan con el
Cu2+ dando un precipitado rojo de xido cuproso. La reaccin tiene lugar en
medio bsico por lo que es necesario introducir en la reaccin tartrato sdico-
potsico para evitar la precipitacin del hidrxido cprico.

3. Cmo acta el Reactivo de Biuret sobre las Protenas?

La reaccin de Biuret es un mtodo colorimtrico que se produce por presencia de


pptidos y protenas, pero, no por aminocidos libres, ya que la reaccin se debe a
la presencia del enlace peptdico, el cual no est presente en soluciones de
aminocidos libres. La intensidad de color del complejo formado es proporcional a
la concentracin de protena presente en la muestra problema. Esta reaccin
cualitativa consiste en tratar protenas o pptidos con una solucin de sulfato
cprico diluida, en un medio alcalino (KOH), produciendo una coloracin violcea
por formacin de un complejo de coordinacin entre el Cu+2 y los pares de
electrones libres de los nitrgenos de los grupos amino de la unin peptdica.

4. Dibuja la estructura qumica y describe brevemente la funcin de las


siguientes Biomolculas orgnicas.

a) Glucosa: Es el monosacrido ms importante. Es la principal fuente de


energa para todos los organismos vivos.

b) Almidn: Es la molcula de reserva energtica vegetal. Es muy abundante en


las semillas y los tubrculos, como la papa.
c) Colesterol: Es un componente muy importante de las membranas
plasmticas de las clulas animales

Referencias

- Donald Voet, Judith G. Voet. (2006) Bioqumica. Ed. Mdica Panamericana.


Captulo 4: Aminocidos. Pg. 70. Captulo 5: cidos nucleicos, expresin gnica y
tecnologa del DNA recombinante. Pg. 87.
- Roger Y. Stanier. (1996) Microbiologa. Reverte. Metabolismo microbiano:
biosntesis, polimerizacin y ensamble. Pgs. 114, 115, 120.
- Gerard J. Tortora, Berdell R. Funke, Christine L. Case. (2007) Introduccin a la
microbiologa. Ed. Mdica Panamericana. Captulo 2: Principios de la qumica.
Pgs. 39-43.
- Nelson & Cox (2009). Lehninger, Principios de Bioqumica (5Edicin). Editorial
OMEGA. Pgs 40-45.

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