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Espectrometria de massa
Origem: Wikipdia, a enciclopdia livre.
Espectrmetro de massa.
ndice
1 Histrico
2 Estrutura de um espectrmetro de massa
3 Fontes de ionizao
3.1 Ionizao por eltrons(EI)
3.2 Ionizao qumica
3.3 Bombardeamento por tomos rpidos
3.4 Ionizao por Electrospray(ESI)
3.5 Ionizao qumica presso atmosfrica(APCI)
3.6 MALDI
4 Analisadores de massa
4.1 Fora de Lorentz
4.2 O analisador quadrupolar
4.3 Analisador octopolar
4.4 FT-ICR
4.5 Orbitrap
5 Detectores
5.1 Multiplicadores de eltrons
5.2 Copo de Faraday
5.3 Dinodo conversor fotomultiplicador
6 Espectrometria de massa do tipo Tandem
6.1 Espectrmetro de massa triplo quadrupolo(TQMS)
6.1.1 Princpio de operao
6.1.2 Instrumentao
6.2 Espectrmetro de massa hbrido
6.3 Analisadores eletromagnticos acoplados a quadrupolos ou
armadilhas inicas
6.4 Analisador de armadilha de ons(IT) combinado TOF ou ICR
7 Resoluo
8 Calibrao de massa
8.1 Calibrao de massa externa
8.2 Calibrao de massa interna
9 Aplicaes
9.1 Bioqumica
10 Ver tambm
11 Referncias
Histrico
Em 1886, o fsico alemo Eugen Goldstein observou raios formados em descargas de gs sob baixa presso que viajava atravs
dos canais em um ctodo perfurado na direo do nodo, e chamou este fenmeno de "Kanalstrahlen" (raios canais). Mais tarde
(1907), utilizando campos magnticos demonstrou que os raios produzidos revelavam que a matria era composta por
elementos de massa varivel, sendo que a mais leve era a do hidrognio. Em experimentos paralelos utilizando fortes campos
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magnticos e eltricos, Wilhelm Wien (1898) identificou a presena de um
elemento com carga positiva e massa igual a do hidrognio, e em 1911
recebeu o Prmio Nobel de Fsica. Tambm em paralelo, diversos estudos
estavam sendo realizados por Joseph J. Thomson, que em 1897 descobriu os
eltrons, recebendo o Prmio Nobel de Fsica em 1906, como
reconhecimento por esta descoberta. Posteriormente, trabalhando sobre os
experimentos de Wien, J. J. Thomson obteve um registro em chapas
fotogrficas obtidos pela ionizao do gs nenio. Contudo seus registros
acusavam a presena de duas marcas referentes ao nenio, que foram
inicialmente entendidas como se o gs nenio fosse formado por uma mistura
de dois gases. Mais tarde foi atribudo que a presena de compostos de
massas diferentes no gs nenio era devido presena de seus istopos
(20Ne, 21Ne e 22Ne), assim, outros compostos isotpicos acabaram sendo
identificados. Em 1918, Arthur J. Dempster desenvolveu o primeiro
espectrmetro moderno, e fez a importante descoberta do istopo 235 U. Em John Fenn, agraciado com o Nobel de Qumica em
1919, Francis W. Aston tambm desenvolveu e melhorou seu espectrmetro 2002
de massa, o que lhe permitiu descobrir 212 istopos naturais e em 1922 ele
recebeu o Prmio Nobel de Qumica pela sua pesquisa. Os conceitos
desenvolvidos por Arthur J. Dempster e Francis W. Aston so utilizados at hoje no desenvolvimento dos modernos
espectrmetros de massa. Mais tarde, na dcada de 50, foi desenvolvida uma das principais tcnicas de anlise de massas,
chamada de on trap (armadilha de ons). Seus criadores, Hans G. Dehmelt e Wolfgang Paul receberam o Prmio Nobel de
Fsica (1989). Contudo, todas as tcnicas de ionizao e anlise de massas at ento desenvolvidas, no permitiam anlises de
molculas de alta massa molecular, mas nos anos 80, John Bennett Fenn desenvolveu um mtodo de ionizao suave chamado
de electrospray ionization, que permitiu a anlise de macromolculas com baixos nveis ou nenhuma fragmentao. Fenn
juntamente com Koichi Tanaka, quem desenvolveu outra tcnica suave de ionizao chamada de soft laser desorption (1987),
receberam o Prmio Nobel de Qumica em 2002. A importncia do desenvolvimento desta tcnica analtca pode ser notada pelo
grande nmero de Prmios Nobel que foram dados aos seus criadores. [3]
a insero direta: a amostra colocada em primeiro lugar sobre uma sonda e, em seguida, inserido na regio de
ionizao do espectrmetro de massa, tipicamente atravs de um bloqueio de vcuo, aps a amostra aquecida e
evaporada).
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a infuso direta: Um capilar simples ou uma coluna capilar utilizado para introduzir uma amostra, tal como um gs ou
uma soluo. Essa tcnica, por exemplo inclui a cromatografia de gs.[1][5]
A fonte de ionizao: Nessa etapa a considerao mais importante a energia interna transferida durante os processos de
ionizao e as propriedades fsico-qumicas que podem ser ionizados.Como exemplos de algumas fontes de ionizao,
temos:
Analisador de massa: etapa em que ocorre a separao dos ons de acordo com a relao massa/carga (m/z). H
analisadores de baixa resoluo: o quadrupolo (Q), o ion trap 3D (IT) ou linear (LIT) e analisadores de alta resoluo
,que medem a massa exata dos analitos: o setor magntico acoplado com um setor eltrico, o tempo de voo
(TOF),Transformada de Fourier de ressonncia cclotron de ons (FT-ICR) e Orbitrap. Estes analisadores podem ser
acoplados em conjunto para executar as experincias de espectrometria de massa em tandem . Em geral, um primeiro
analisador separa os ons, uma clula de coliso usada para os ons do fragmento, e um segundo analisador os separa
do fragmento. Alguns analisadores, como armadilhas de ons(ion trap,em ingls) e FT-ICR, constituem vrios
analisadores e permitem uma fragmentao dos ons e anlise dos fragmentos diretamente.
O sistema de deteco e processamento: etapa em que o detector transforma a corrente dos ons em sinal eltrico. Alm
disso, o detector amplifica o sinal obtido o qual pode ser processado por computador, criando, por conseguinte, o
espectro de massa correspondente.[2]
Fontes de ionizao
Algumas tcnicas de ionizao so muito energticas e causam fragmentaes extensivas. Outras tcnicas so energeticamente
menos intensas e produzem somente ons de espcies moleculares. Ionizao por eltrons , ionizao qumica, por exemplo, so
somente teis para ionizao de fases gasosas e , ento,seu uso limitado a componentes suficientemente volteis e
termicamente estveis.[2]
A fonte de ionizao por ons foi concebido por Dempster e aperfeioada por
Bleakney e Nier.Essa fonte de ionizao largamente usada na espectrometria de
massa orgnica. Essa fonte consiste de um filamento aquecido que ejeta eltrons ,
os quais so acelerados em direo ao nodo e colidem com as molculas gasosas
da amostra analisada.Para cada eltron ejetado corresponde um comprimeto de
onda, por exemplo, 2.7 para um energia cintica de 20 eV. Quando o
comprimeto da onda da ordem dos comprimentos de ligao da amostra
analisada, a onda perturbada e se torna complexa. Se uma das frequncias dos
eltrons tm energia correspondente a da transio da molcula, est pode absorv-
la e, ento, produzir vrias excitaes eletrnicas. Em molculas orgnicas, desde
que 10 eV suficiente para ioniz-las, e em um espectrmetro com condies
usuais, a energia dos eltrons so em mdia de 70 eV, o excesso de energia orienta Diagrama da ionizao por eltrons.A
a uma fragmentao extensiva.Est fragmentao til , pois ele fornece proporo dos produtos depende da ener
gia
informaes estruturais de analitos desconhecidos.[2] dos eltrons
Ionizao qumica
Em adio ao dispositivo EI acima, um gs reativo introduzido na fonte e ionizado por impacto de eltrons. Segue-se uma
srie de reaes que do origem aos ons que podem reagir com as molculas de analito que chegam da fonte. Este tipo de
molcula-on do produto de reao principalmente (em modo positivo) on [MH]+, permitindo o acesso a massa molecular da
substncia a analisar. O metano, isobutano e amnia esto entre os gases de ionizao qumica mais utilizados. Para a deteco
de molculas globalmente eletronegativas , incluindo pores de derivados halogenados, utiliza-se a ionizao qumica
negativa. O princpio carregar negativamente as molculas do analito e bombarde-las com eltron que sero capturados pelas
molculas eletronegativas. Devido alta probabilidade de captura do eltron, este tipo de ionizao pode ser 1000 vezes mais
sensvel do que a ionizao qumica positiva.[6].
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Uma explicao fsica da ESI que, a presso atmosfrica, uma voltagem(3-6 KeV
) entre o capilar(onde um lquido est passando com fluxo baixo (110) lmin-1), e
o eletrodo produz um gradiente eltrico sobre o fluido que separa as cargas na
superfcie. Isso fora o lquido a sair da agulha como um cone de Taylor. A ponta
do cone de Taylor sobressai como um filamento at que o lquido atinge o limite de
Rayleigh, onde a tenso superficial e repulso eletrosttica so iguais e as gotculas
altamente carregadas deixam o filamento. As gotculas que rompem com o
filamento so atrados para a entrada do espectrmetro de massa, devido alta
tenso oposta entrada do analisador de massas. medida que a gota se move no Fonte de ionizao por electrospray
sentido dos analisadores, a repulso de Coulomb sobre a superfcie ultrapassa a
tenso superficial, as gotculas, ento, se fragmentam em gotculas mais pequenas
em ltima anlise, libertando ons , as quais so orientados , por eletrosttica, para o vcuo do analisador de massa.[2]
APCI tornou-se tambm uma importante fonte de ionizao porque gera ons diretamente a partir da soluo e capaz de
analisar os compostos relativamente apolares. Semelhante a electropray, o efluente lquido do APCI introduzido diretamente
na fonte de ionizao. No entanto, a semelhana para. As gotculas no so carregadas e a fonte APCI contm um vaporizador
aquecido, o que facilita a rpida vaporizao das gotculas. Molculas de amostra vaporizadas so transformadas em molculas-
ons por reaes presso atmosfrica. A ionizao APCI origina-se do solvente sendo ionizado a partir da descarga corona.
Uma vez que os ons de solventes esto presentes em condies de presso atmosfrica, a ionizao qumica de molculas de
analito muito eficiente; presso atmosfrica molculas de analito colidem com os ons reagentes frequentemente.
Transferncia de prtons ( reaes de protonao MH+) ocorre no modo positivo, e, ou a transferncia de eltrons ou a perda do
prton, ([MH]-) no modo negativo.[1][2]
MALDI
Analisadores de massa
Os analisadores so diferenciados pelo seu princpio de medio da razo m / z dos ons, que so:
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a disperso dos ons com base no seu tempo e energia cintica (ou nos seus instrumentos de setor eltrico ou magntico).
a separao em tempo, com base na velocidade dos ons (TOF)
a transmisso de ons atravs de um campo eletrodinmico (quadrupolo)
movimento peridico em um campo magntico, ou eletrodinmica ( armadilhas de ons)
Fora de Lorentz
em que:
Parte magntica. Parte eltrica.
o vetor campo eltrico,
o vetor campo magntico,
a carga da partcula,
o vetor velocidade e
simboliza o produto vetorial.
Todos os analisadores tm como princpio fsico a aplicao das foras de Lorentz, de uma forma ou de outra, na determinao
da taxa massa-carga(m/z), esttica ou dinmica. Alm dos tipos de analisadores de massa originais da rea magntica, outros
tipos de analisadores atualmente usam esse princpio, incluindo os analisadores de massa de tempo de voo(TOF), de armadilha
de ons,analisadores de quadrupolo e TF-ICR.
O analisador quadrupolar
medida que os ons se repelem na armadilha, as suas trajetrias se expandem como uma funo do tempo. Para evitar perdas
de ons por essa expanso, cuidados devem ser tomados para reduzir a trajetria.Isto conseguido atravs da manuteno na
armadilha de uma presso de gs hlio, que remove excesso de energia a partir dos ons por coliso. Esta presso paira em
torno de 10-3Torr (0,13Pa).
Uma bomba de alto vcuo com um nico fluxo de cerca de 40 ls-1 suficiente para manter um tal vcuo em comparao com
os 250 ls-1, necessrios para outros espectrmetros de massa.
Aqui, novamente, uma anlise matemtica utilizando as equaes de Mathieu permite-nos localizar reas em que os ons de
determinados massas tm uma trajetria estvel. Estas reas podem ser exibidas em diagrama como uma funo de U, o
potencial direto, e de V, a amplitude do potencial alternado. As reas em que os ons so estveis so aquelas em que as
trajetrias nunca excedem as dimenses da armadilha.[2][10]
Analisador octopolar
O mesmo que o analisador quadrupolo mas com 8 eletrodos, este analisador usado apenas para a concentrao dos ons.
[carece de fontes ?]
https://pt.wikipedia.org/wiki/Espectrometria_de_massa 5/11
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FT-
ICR
Nesse
Para evitar que ons escapem da cela, uma baixa voltagem dc aplicada aos
eletrodos de aprisionamento gerando um campo eltrico E perpendicular ao
campo magntico B.
Uma voltagem rf aplicada aos eletrodos transmissores (laterais). Varre-se
ento
rapidamente a frequncia da voltagem rf (pulso) mantendo-se B constante. Esquema de uma clula cbica ICR
Quando a
Orbitrap
O Orbitrap consiste de um eletrodo oco, no interior do qual colocado coaxialmente um eletrodo em forma de fuso. A forma
particular dos eletrodos permite a imposio de um campo eletrosttico quadro-logartmica com a tenso:
Detectores
Uma vez que os ons so separados por um analisador de massa, eles atingem o Trajetria dos ons atravs de um orbitrap
detector de ons, o qual gera uma corrente de sinal para os ons incidentes. O mais
(em vermelho)
comumente usado detector o multiplicador de eltrons, que transfere a energia
cintica dos ons incidentes para a superfcie , que por sua vez gera eltrons
secundrios . No entanto , uma variedade de abordagens so usados para detectar os ons dependendo do tipo de espectrmetro
de massa.
Multiplicadores de eltrons
O detector dinodo fotomultiplicador de converso no to utilizado como multiplicador de eltrons, mas semelhante em
funcionamento, em que os eltrons secundrios atingem uma tela fosforecente em vez de um dinodo. Os ftons que saem da
tela fosforecente so detectados pelo fotomultiplicador. Fotomultiplicadores tambm operam como o multiplicador de eltrons,
onde a coliso dos ftons na superfcie de um cintilador resulta no surgimento de eltrons, que so ento amplificados
utilizando o princpio da cascata. Uma vantagem do dinodo de converso que o tubo fotomultiplicador selado em vcuo,
no exposto ao meio ambiente do espectrmetro de massa e, assim, a possibilidade de contaminao removida.[2]
Um espectrmetro de massa triplo quadrupolo um espectrmetro de massa Tandem consistindo de dois analisadores de massa
quadrupolares em srie com uma frequncia de rdio(RF) de quadrupolo-apenas entre eles para atuar como uma clula para a
dissociao ativada por coliso(em ingls collisionally activated dissociation).
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Princpio de operao
Instrumentao
Alguns espectrmetros de massa combinam vrios tipos de analisadores. Os mais comuns incluem dois ou mais dos seguintes
analisadores: Quadrupolos, TOF(time of flight), ressonncia ciclotrnica de ons ou orbitrap. Estes so nomeados instrumentos
hbridos. O objetivo de um instrumento hbrido combinar os pontos fortes de cada analisador, evitando a combinao de suas
fraquezas. Assim, melhores desempenhos so obtidos com um instrumento hbrido que com analisadores isolados.[1][2]
https://pt.wikipedia.org/wiki/Espectrometria_de_massa 8/11
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= Resoluo
Tabela 1Uma comparao geral de analisadores de massa normalmente utilizada para electrospray . Estes valores variam
de acordo com a fabricao do instrumento.
quadrupolo Ion trap TOF Setor magntico FTMS quadrupolo-TOF
Preciso 0.01%(100ppm) 0.01%(100ppm) 0.02%(200ppm) <0.0005% (<5 ppm) <0.0005% (<5 ppm) 0.001% (10 ppm)
Resoluo 4,000 4,000 8,000 30,000 100,000 10,000
Taxa m/z 4,000 4,000 >300,000 10,000 10,000 10,000
Calibrao de massa
https://pt.wikipedia.org/wiki/Espectrometria_de_massa 9/11
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At agora, os conceitos de massa exata, preciso e resoluo de massa foram introduzidas sem considerar os meios atravs dos
quais as medies de massa precisas podem ser realizadas. A chave para este problema a calibrao de massa. Resoluo
sozinha pode separar ons de diferentes valores de taxa m / z, mas no inclui automaticamente a informao da precisa
localizao no eixo m / z dos respectivos sinais.[1]
Todo espectrmetro de massa requer a calibrao de massa antes de ser utilizado. Contudo, o nmero de pontos de calibrao
necessrios pode diferir largamente entre os diferentes tipos de analisadores de massa.Estes pontos so fornecidos a partir de
um composto de calibrao de massa conhecido ou composto de referncia em massa. A calibrao ento realizada pela
gravao do espectro de massa do composto de referncia e posteriormente correlao com os valores experimentais das taxas
m/z de uma lista de referncia de massa. Normalmente, esta converso acompanhada pelo sistema de arquivos do
espectrmetro de massa.Deste modo, o espectro de massa recalibrado por interpolao da escala m / z entre a calibragem
atribuda aos picos para obter a melhor correspondncia. A calibrao de massa obtido pode ento ser armazenada em um
arquivo de calibrao e usado para medies futuras sem a presena de um composto de calibrao.[1]
Se as medies de alta resoluo so realizados a fim de atribuir composies elementares,a calibrao de massa interna
quase sempre necessria. O composto de calibrao pode ser introduzido a partir de um segundo sistema de admisso ou ser
misturado com o analito antes da anlise. Misturar os compostos de calibrao com a substncia a analisar exige algumas
habilidades operacionais a fim de no suprimir o que se quer analisar pela referncia ou vice-versa. Portanto, uma entrada
separada para introduzir o composto de calibrao vantajoso. Isto pode ser conseguido mediante a introduo de padres
volteis, tais como PFK a partir de um sistema de entrada de referncia na ionizao de eltrons, atravs da utilizao de uma
sonda de duplo-alvo no bombardeamento atmico rpido, ou pela utilizao de um segundo pulverizador na ionizao por
electrospray.[1]
Aplicaes
A espectrometria de massa utilizada na anlise qumica analtica e como um mtodo para a determinao de elementos
qumicos ou compostos. Nesta forma, espectrmetros de massa so usados em muitos campos da cincia e da tecnologia para a
anlise de materiais, incluindo qumica, biologia, arqueologia e climatologia.
Tambm se utiliza a espectrometria de massa em partculas. Nesta rea, no entanto, o objetivo no tanto a anlise de
elementos qumicos, mas a determinao das massas de partculas elementares e ncleos atmicos ou a deteco de partculas
ainda desconhecidas.
Bioqumica
A espectrometria de massa utilizada em proteoma e metaboloma, onde o uso corresponde, em grande parte em qumica. A
Espectrometria de massa de protenas foi nomeado pela revista Nature Methods o mtodo do Ano 2012.[15]
Ver tambm
https://pt.wikipedia.org/wiki/Espectrometria_de_massa 10/11
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Biofsica
Espectroscopia
Espectroscopia de infravermelho
Referncias
10. http://citeseerx.ist.psu.edu/viewdoc/download?
1. Gross, Jnger (2004). Mass spectr ometry a textbook 1ed doi=10.1.1.1 12.6004&rep=rep1&type=pdf
ed. [S.l.]: Springer . ISBN 10 3-540-40739-1 Verifique 11. Hu, Q.;Noll, R.J.; Li, H.;Makarov , A.; Hardman, M.;
|isbn= (ajuda) Cooks, G., J. Mass Spectrom. 2005 40(4), 430
2. Edmond de;Stroobant, Hof fman;Vicent (2007). Mass 12. Makarov, A.; Denisov , E.; Kholomeev , A.; Balsch un, W.;
spectrometry principles and aplications 3ed ed. [S.l.]: Lange, O.; Strupat, K.; Horning, S. Anal Chem. 2006
Wiley. ISBN 978-0-470-03310-4 78(7), 2113
3. http://www.biq.iqm.unicamp.br/arquivos/teses/vtl s000321813.pdf 13. http://www.chem.uky.edu/research/lynn/pdfs/tandem.pdf
4. http://www2.dbd.puc- 14. Hail, M. E.; Berberich, D. W .; Yost, R.A. (1989). Gas
rio.br/per gamum/tesesabertas/0124802_03_cap_02.pdf chromatographic sample introduction into the collision cell
5. http://old.vscht.cz/clab/ms/samples.htm of a triple quadrupole mass spectrometer for mass-selection
6. Gas Chromatography and mass spectrometry : a practical of reactant ions for char ge exchange and chemical
guide, Kitson, Larsen & McEwen, academic press, 1996 ionization. Analytical Chemistry . 61 (17): 18741879.
7. http://www.institutonanocell.or g.br/maldi-tof-uma - doi:10.1021/ac00192a019 (https://dx.doi.or g/10.1021%2Fa
ferramenta-revolucionaria-para-as-analises-clinicas-e- c00192a019)
pesquisa-do-cancer/ 15. Anonym: Method of the Y ear 2012. In: Nature Methods. 10,
8. Hiraoka, Kenzo (2013). Fundamental of mass 2012, S. 1, doi:10.1038/nmeth.2329 (https://dx.doi.or g/10.1
spectrometry. [S.l.]: Springer . ISBN 978-1-4614-7232-2 038/nmeth.2329) .
9. David J. Grif fiths, Eletrodinmica, 3 edio.
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